UNIVERSIDAD AUTNOMA DE QUERTARO

Facultad de Qumica Biologa Celular Biotecnologa

Articulo
Histoqumica Evaluacin de tejidos humanos de prstata con Cratylia mollis semillas Lectina

Alumno: De Santiago Hernndez Edgar Daniel

Maestro: Dr. Teresa Gasca

Fecha de entrega: viernes 3 de mayo del 2011

Histoqumica Evaluacin de tejidos humanos de prstata con Cratyliamollis semillas Lectina

Amanda LR de Lima, 1, 2 CB Cavalcanti Carmelita, 2 CC Mariana Silva, unMGPaiva Patricia, una Coelho CBB Luana, una IC Beltro Eduardo, 2 y Mara T. dos S. Correia 1 *
Un Laboratorio de glicoprotenas, Departamento de Bioqumica, Universidad Federal de Pernambuco (UFPE), 50670901 Recife, PE, Brasil 2

Laboratorio de ImunopatologiaKeizoAsami (LIKA), la UFPE, 50670-901 Recife, PE, Brasil

* Mara T. dos S. Correia: Correo electrnico: mtscorreia@gmail.com Editor acadmico: Richard D. Ludescher Recibido 26 de agosto 2009; revisado de marzo 16 de 2010; abril aceptadas 13, 2010. Este es un artculo de acceso abierto distribuido bajo la licencia CreativeCommonsLicense, que permite el uso ilimitado, distribucin y reproduccin en cualquier medio, siempre que la obra original es debidamente citada

Resumen
La decisin de tomar este artculo se bas en el contenido de la tercera unidad especficamente el captulo 3.1en esta unidad se abordan temas de interaccin cy reconocimiento celular. El artculo que eleg lleva por ttulo: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2896646/?tool=pubmed

Histoqumica Evaluacin de tejidos humanos de prstata con Cratylia mollis semillas Lectina
El cncer de prstata crece lentamente y muchos hombres conla enfermedad nunca experimentarn problemas derivados de ella y morirn sinque el cncer alcance significacin clnica. El cncer de prstata aumenta apartir de los 40 aos, llegando a su pico mximo a los 80 aos. El 80% de loscasos se diagnostican en hombres de ms de 65 aos, siendo la edad mediadel diagnstico 72 aos. La mayor parte de los cnceres se dan comoenfermedad histolgica oculta o latente. Segn estimaciones realizadas, de 95hombres con cncer de prstata slo uno tendr manifestaciones clnicas, yuno de 323 morir de la enfermedad. Para un hombre de 50 aos el riesgo dedesarrollar cncer de prstata a lo largo de su vida es del 42%, sin embargo, elde tener sintomatologa clnica es del 9,5% y el de morir por esta causa del2,9%. La supervivencia especfica del cncer de prstata confinado al rgano,no tratado es del 93,8% a los cinco aos. El grupo de las lectinas son protenas de origen no inmune que comparten en comn la propiedad de enlazarse de forma especfica y reversible a carbohidratos, ya sean libres o que formen parte de estructuras ms complejas. Contienen al menos 2 sitios de unin, de ah que puedan enlazarse en primer lugar a un azcar especfico y en forma secundaria a una molcula glicosilada. Poseen interesantes propiedades que convierten a esta clase

de protenas en herramientas invalorables en los laboratorios biolgicos, por lo que se utilizan en numerosas investigaciones que incluyen: estudio de la estructura de las membranas, deteccin de transformaciones malignas, purificacin de glicoconjugados, estudios citogenticos, as como tambin en ensayos histoqumicos, enzimticos y en el tipaje de grupos sanguneos. Esto es utilizado en histoqumica para ver los cambios que presenta la glicosilacion en diferenciacin celular, en este utilizaron a Cratylia mollis,lecitinas de semillas,Cratylia mollis es una planta de forraje natural del noreste de Brasil. Cratylia mollis lectina de la semilla (Cramoll) que contienen formas moleculares 1 y 4 (1,4 Cramoll) ha puesto de manifiesto las actividades de la cicatrizacin de heridas-antiinflamatorias,esta lectina la conjugaron con peroxidasa de rbano, se utilizaron como sondas histoqumicas en los tejidos de prstata humanos: normal (NP), hiperplasia (HPB) y el carcinoma de prstata (CaP).

Las lectinas son utilizadas por la capacidad de afnidad que presentan, a causa de esto se utilizaron para la caracterizacin de distintos tipos de clula en etapas de maduracin y diferenciacin de cncer, para esto de llevo a cabo una purificacin, para la purificacin de cramoll, a partir de semillas de C.mollis, se cont con una electroforesis en gel de poliacrilamida, para la obtencin de las muestras se cortaron gracias a la enzima tripsina, despus fue tratado con metanol, las secciones se incubaron con lectinas despus del tiempo y temperatura establecido se lavaron las rebanadas dos veces durante 5min.se agrego un tampn de sales en este caso se agreg un tampn de fosfato manteniendo un ph optimo, a partir de entonces, los tejidos se lavaron en agua destilada, de contraste con hematoxilina, se deshidrataron en etanol escalonadas, aclarados en xilol, y montado. Inhibicin de la unin lectina-carbohidratos controles se realizaron con los azcares especficos a una a una concentracin final de 0,3M para cada lectina (metil- D-mannopyranoside para Cramoll 1,4 y Con-A, D-galactosa para Cramoll 3 y ANP). Para examinar e tejido se utiliz microscopia de luz en este caso las muestras se apreciaron con un microscopio ptico, para la tincin se anot en cuatro categoras 0-notincin, 1 tincin dbil, 2-moderada tincin, y 3 tincin intensa. En los resultados encontramos Los resultados mostraron que las lectinas conjugadas migrado ms lentamente que sus respectivas contrapartes no conjugados.

En las clulas normales de la prstata la tincin con Con-A y Cramoll 1, 4, fue dbil mientras que, Cramoll 1,4 patrn de tincin en HBP fue intensa en la mayora de los casos, En las muestras de CaP, que se caracteriza por las puntuaciones de Gleason heterognea, Con-A y Cramoll 1,4 intensidad de la tincin disminuido mientras que el mayor grado de malignidad, es decir, en tejidos diferenciados y ambos lectinas mostr tincin moderada, mientras que en el tejido indiferenciado no se observ tincin, tincin de clulas CaP fue ms evidente con Cramoll 1,4

Histoq umic a de los tejidos prostticos con la Con A, Cramoll 1,4, ANP, y Cramoll 3. (A) prstata normal teida con Con-A. Las clulas epiteliales (flecha) presentan una tincin dbil, mientras que el estroma (asterisco) es intensamente teido. (B) moderada tincin por Cramoll 1,4 en el epitelio de las glndulas normales. (C, d) el epitelio y el estroma prosttico normal (asteriscos) presentar una tincin dbil por la ANP y Cramoll 3, respectivamente. (E) Con una moderada tincin de las glndulas de la HBP (flecha). (F) HBP clulas epiteliales que muestran una intensa tincin por Cramoll 1,4 en el citoplasma apical (puntas de flecha) y (membrana de flecha). (G y H) glndulas HBP (flechas) no fueron teidas o slo dbilmente manchadas por la ANP y Cramoll 3, respectivamente. (I y j) La puntuacin de Gleason 2 y 3 clulas CaP teidas con un patrn moderado, respectivamente. (K) tincin dbil en la puntuacin de Gleason 4 clulas de CaP

(L) en las clulas no mancha Gleason 5 CaP. (M y n) CaP lmenes glndula (flechas) present un patrn de tincin intensa para PNA y Cramoll 3, respectivamente. Ampliacin (a, b, c, d, k, m, n) x 100 (e, f, g, h, i, j, l) x 400. En el recuadro de arriba vemos los diferentes resultados en base a las tinciones y los tejidos y tipos de clulas utilizados, el aumento de la glucosa y el contenido de manosa glicocalix pueden estar relacionados con la gran produccin de glicoconjugados teniendo estos residuos segn lo observado por histoqumica de lectinas, tambin encontramos que la lectina aumento en la tincin BHP lo cual nos dice que puede estar relacionada con las clulas secretoras de la prstata. Al terminar este proceso de tinciones el artculo nos dice que el cramoli 1,4 se valora ms en el diagnstico de enfermedades de la prstata que la lectina disponible comercialmente Para lo que se est planteando juega un papel muy importante estas dos isoformas del nativo de plantas de forraje nordeste brasileo, puesto que las lectinas comerciales son de gran uso hoy en da, y esta nueva herramienta nos hace tener otra opcin de diagnosticar cncer de prstata, esta nueva alternativa nos hace ver que tan importante son las lectinas en el reconocimiento celular y todo lo que involucra la deteccin de esta protena cuando se trata de enfermedades como el cncer.