ACCIN ANTIMICROBIANA DE LOS CEMNENTOS OBTURADORES EN DIENTES DECIDUOS

RESUMEN Objetivo: El estudio valor la efectividad antimicrobiana de una pasta iodoformada y una pasta modificada por la adicin de gel de gluconato de clorhexidina para reemplazar al paramonoclorofenol alcanforado de la pasta iodoformada. Mtodos: La accin antimicrobiana fue probada sobre los siguientes microorganismos: staphilococcus aureus, staphylococcus epidermidis, streptococcus oralis, enterococcus faecalis, escherichia coli y bacillus subtilis. En la prueba de difusin de agar se utilizaron 18 placas petri con 20ml. de BHIA que fueron inoculadas con 0,1 ml.de suspensin microbiana. Los discos de papel fueron inmersos en la solucin experimental por 1minuto y luego puestas en el agar BHI, mantenidas a temperatura ambiente por 1 hora y luego incubadas a 37 C por 48 horas. Los dimetros de los halos de inhibicin fueron medidos alrededor de los discos de papel sumergidos anteriormente en la solucin experimental. Los datos fueron analizados usando el test de Man- Whitney ( = 0,05).Resultados: la accin antimicrobiana fue observada en las pastas iodoformada y la de gluconato de clrorhexidina, las cuales presentaron ausencia de turbidez para casi todos los microorganismos. No existe diferencia significativa en la accin antimicrobiana de ambas. Conclusin: ambas pastas presentan efectividad antimicrobiana similar sobre varios microorganismos comnmente hallados en infecciones endodnticas de dientes deciduos. INTRODUCCIN La terapia pulpar en dientes deciduos es un complejo tratamiento debido al proceso de instrumentacin, la complejidad del lmite apical, el ciclo biolgico de los dientes deciduos, la resorcin fisiolgica del canal y la rizlisis y las largas sesiones de tratamiento durante las que a veces los nios no cooperan. Por lo tanto es importante seleccionar un material efectivo para el tratamiento endodntico de dientes deciduos para eliminar microorganismos de los conductos radiculares usando un apropiado procedimiento, tales como la preparacin biomecnica, irrigacin con diferentes soluciones y el uso de cementos obturadores del conducto. Un ,material ideal como pasta obturadora debe tener varias propiedades tales como ser inocuo para los tejidos periapicales y grmenes de dientes permanentes, reabsorbindose rpidamente si presiona ms all del pice y ser antisptico. Entonces el xito de la terapia endodntica depende primariamente de la susceptibilidad de los microorganismos a los agentes antimicrobianos comnmente usados. Para los casos de pulpectoma en dientes deciduos, ms el 90% de todas las escuelas dentales en Brasil han adoptado el cemento obturador propuesto por Guedes- Pinto y colaboradores, el cual es llamado pasta Guedes- Pinto( PGP) y est compuesto por yodoformo, paramonoclorofenol alcanforado( PMCC) y Ricofort. La exitosa combinacin de estos tr es compuestos en la terapia endodntica de dientes deciduos ha sido reportada en varios estudios (2; 4,5-7,10-13) mostrando excelente biocompatibilidad con los fibroblastos leves reacciones inflamatorias. Estas tres drogas han sido tambin toleradas en los tejidos conectivos y periapical. Santos (14) evalu la citotoxicidad de la PGP en comparacin con el formocresol, glutaraldehdo y el cido fosfrico. La lnea celular NIH3T3 y los fibroblastos pulpares fueron usados para las pruebas de viabilidad celular, la pasta fue directamente

aplicada en portaobjetos con las clulas en un ensayo de corto tiempo (12horas) y luego en un ensayo de largo plazo de 7 das. En ese estudio el grupo tratado con PGP tena ms clulas vitales que el grupo tratado con otras drogas, la citotoxicidad del PGP fue reducida en las pruebas con fibroblastos y la pasta con glutaraldehdo fue la ms citotxica. Ningn estudio ha atentado a modificar la PGP por la PMCC ni adherir otra sustancia con actividad antimicrobiana y menor toxicidad. La clorhexidina ha sido usada en periodoncia por ms de 20 aos debido a sus propiedades antimicrobianos y baja toxicidad, tambin puede usarse como solucin irrigadora y como medicacin intraconducto. Por lo tanto el pronostico de este estudio un vivo fue evaluar la efectividad antimicrobiana de la PGP y la pasta modificada por la accin del gel de gluconato de clorhexidina al 2% (CHX) para reemplazar el PMCC de la pasta original contra los microorganismos comnmente hallados en las infecciones endodnticas de los dientes deciduos. METODOLOGA Ambas pastas fueron preparadas por la mezcla de partes iguales de cada componente bajo esterilizacin como sigue: 1) PGP 0.25g Ricofort, 0.30g yodoformo y 0.1ml PMCC(3:7) 2) CHX 0.25g Ricofort, 0.30g yodoformo, 0.05ml gluconato de clorhexidina al 2% La accin antimicrobiana de las pastas fue probada usando una mezcla de los siguientes microorganismos: staphilococcus aureus, staphylococcus epidermidis, streptococcus oralis, enterococcus faecalis, escherichia coli y bacillus subtilis. Todas las sepas que fueron aisladas e identificadas por la Coleccin americana de cultivos bacterianos, fueron cultivadas y mantenidas en el departamento de microbiologa de la Universidad Federal de Santa Mara en Brasil. Las sepas fueron usadas para inocular 7ml de agar cerebro- corazn, la cual fue incubada a 37 C por 24 horas. Los seis indicadores biolgicos fueron cultivados en la superficie del agar siguiendo las mismas condiciones de incubacin. Los microorganismos bacterianos fueron resuspendidas en solucin salina para obtener una concentracin final de 3108 clulas/ml, similar al tubo nm. 1 de la escala de Mc Farland. Un mililitro de cada suspensin pura fue usado para obtener una mezcla de prueba de los microorganismos. Para la prueba de difusin en agar, 18 placas petri con 20ml de BHIA fueron inoculadas con 0,1ml de la suspensin microbiana y disperso en el medio. 54 discos de papel (9mm de dim.) fueron inmersos en la solucin experimental por 1 minuto y luego fueron puestos 3 papeles sobre la superficie de cada placa con agar. Estas placas fueron mantenidas por 1 hora a temperatura ambiente y luego incubadas a 37 C por 48 horas. El dimetro del halo de inhibicin fue medido en milmetros alrededor de los discos de papel. El crecimiento microbiano fue evaluado por la turbidez del medio de cultivo. La tincin Gram fue utilizadas para identificar la contaminacin de los cultivos BHIA y el crecimiento microbiano fue determinado con un examen macro y microscpica. Todos los ensayos fueron llevados por duplicado bajo condiciones aspticas. El test Mann-Whitney fue usado para comparar los dimetros de los halos de inhibicin microbiana de las pastas probadas al 5% de significancia.

RESULTADOS La accin antimicrobiana fue observada para loas pastas PGP y CHX, las cuales presentaron ausencia de turbidez para casi todos los microorganismos. PGP prob ser bacteriosttico para todos y bactericida para todos menos el enterococcus faecalis y bacillus subtilis. El CHX mostr accin bactericida y bacteriosttico para todos los microorganismos. No hubo diferencia significativa en la efectividad antimicrobiana entre las pastas (P>0,05). DISCUSIN El xito del tratamiento endodntico depende de varios factores, pero primariamente de la reduccin n o eliminacin de la infeccin bacteriana. Los microorganismos y sus productos son considerados la mayor causa de patologas pulpar y perirradiculares. De aqu, un mayor objetivo en el tratamiento del conducto radicular es desinfectarlo todo, lo cual requiere que todo su contenido sea eliminado como un posible origen de infeccin. Esta meta puede ser acompaada usando la instrumentacin mecnica y la irrigacin en conjunto con la medicacin entre sesiones. Por lo tanto, es necesario usar una apropiada tcnica con un material de baja citotoxicidad que debe tener excelentes propiedades antimicrobianas contra los microorganismos comnmente hallados en los conductos radiculares. Las sustancias qumicas usadas en la terapia pulpar en dientes deciduos debe ser bien tolerada, debe ser capaz de reabsorberse fisiolgicamente, debe tener excelentes propiedades antispticas asociadas con la habilidad para difundirse en los tbulos dentinarios y debe mantener el diente en un estado funcional hasta su exfoliacin normal, sin comprometer la denticin permanente. En el presente estudio, ambas pastas mostraron efectividad antimicrobiana contra todos los microorganismos comnmente hallados en las infecciones endodnticas. La PGP es la ms usada en pulpectoma de dientes deciduos en Brasil. Kramer y col. Hallaron que el 48% usan PGP como cemento obturador, seguido del ZOE (19%) y ZOE con yodoformo (9%) y PGP con ZOE (7%). Otros estudios tambin reportaron que la pasta PGP tiene aspectos microbiolgicos, histopatolgicos, y baja toxicidad que la hacen adecuada para ser usada. PGP tiene una accin antimicrobiana relacionada a sus componentes: yodoformo tiene accin germicida, la PMCC es un agente antimicrobiano con efecto bacrteriosttico cuando es administrado tpico o sistmicamente, pero es citotxico y el Ricofort es una combinacin de corticosteroides y un antibitico que tiene una gran accin antimicrobiana y es recomendado para el tratamiento de los dientes deciduos con infecciones endodnticas. Santos mostr que la PMCC fue el componente responsable de la citotoxicidad de la PGP, aunque el nivel el bajo. El presente estudio fuel el primero en probar la CHX como reemplazo de la PMCC y demostramos que la pasta CHX tiene accin antimicrobiana contra todos los microorganismos. El gluconato de clorhexidina ha sido usado como solucin irrigadora y en medicacin. Este es activo contra un amplio rango de microorganismos, tales como Gram+ y Gram-. En adicin a su baja toxicidad y alta actividad antimicrobiana, la CHX tiene otras propiedades que la hacen adecuada en tratamiento endodnticos como la habilidad de interactuar con tejidos orales y continuar su liberacin en un largo periodo. El gel de CHX es efectivo como medicacin intraconducto debido a su amplio espectro antimicrobiana.

El mtodo de difusin en agar usado en el presente estudio es comnmente empleado para evaluar la actividad antimicrobiana. De acuerdo a Estela y colaboradores la medida del halo de inhibicin depende de la solubilidad y difusin de la sustancia, por lo tanto el potencial antimicrobiano de las drogas con diferentes consistencias, tales como pasta y lquido, no se pueden comparar directamente. Tanomaru y colaboradores mostraron que el contacto entre la prueba del material y el agar, el peso, la medida y prueba, la textura del agar, y la concentracin inica del medio deben ser ampliamente usados para probar la actividad antimicrobiana, el cual es relevante en la prctica de la terapia pulpar. CONCLUSIONES En acuerdo con la metodologa usada y los resultados obtenidos, puede concluirse que el reemplazo de la PMCC por la CHX en la PGP no afecta negativamente la efectividad antimicrobiana del cemento obturador.