Mtodo de ensayo Preparacin de la muestra: Las muestras deben sumergirse en agua hirviendo (segn la norma EN ISO 3696, nivel

el 3) durante 10 minutos sin que toquen las paredes del recipiente Nota: esto es para eliminar el recubrimiento superficial que surge del proceso de fabricacin y asegurar que los materiales usados son estables en agua hirviendo

Para cada ensayo deben utilizarse nuevas muestras preferiblemente del mismo lote Las muestras y las probetas de ensayo deben ser manipuladas nicamente con guantes adecuados (ni de caucho ni de plstico) y deben conservarse solamente en recipientes cerrados, no susceptibles de migracin (vidrio) y protegidos de la luz

Determinacin de la liberacin de 2,2 bis(4-hidroxifenil) propano [Bisfenol A] (BPA) Principio: El BPA se extrae de los artculos sometidos a ensayo en un simulante de alimentos acuoso. Es identificado y su nivel se determina por HPLC con detector de fluorescencia (FLD)

Aparatos: Aparato de HPLC preferiblemente equipado con un circuito de inyeccin de 50l automtico y detector de fluorescencia y estacin de datos Columna de HPLC capaz de separar completamente el BPA de los picos que originan los simulantes y/o solventes utilizados Un filtro de membrana con un tamao de poro de 0,45m Balanza analtica con sensibilidad de 0,0001 g Micro jeringas: 10l, 20l y 50l

Reactivos: qumicos (de calidad analtica a menos que se especifique de otro modo)

Agua (grado HPLC) Metanol (grado HPLC) Agua destilada cido actico, 3% (w/v) solucin acuosa

Reactivos: Muestras patrn (grado pureza mayor del 98%) 2,2 bis (4-hidroxifenil) propano [Bisfenol A] (BPA)

Reactivos: soluciones patrn

Soluciones patrn madre de BPA en metanol a una concentracin definida aproximadamente 1,0 mg/ml Se pesan, con una aproximacin de 0,1mg, 100mg de BPA en un matraz volumtrico de de 100 ml. Se disuelve el BPA en metanol y se completa hasta la marca con metanol Se calculan las concentraciones en g de BPA por ml de disolucin Se repite el procedimiento para obtener una segunda solucin madre

Soluciones de calibracin Se pesa con micro jeringas, 0l , 10,0l, 20,0 l, 30,0l, 50l de la solucin madre

2,2 bis (4-hidroxifenil) propano [Bisfenol A] (BPA)

Eleccin de las probetas de ensayo De cada componente individual de los artculos para la alimentacin lquida que sean accesibles al nio se deben tomar las probetas de ensayo. Los componentes que estn unidos deben ser separados y ensayados individualmente

Preparacin de las probetas de ensayo Se debe obtener como mnimo 100mg o preferiblemente, al menos, 1g de la muestra representativa de los componentes individuales de los artculos para la alimentacin

liquida. Se debe evitar calentar los materiales durante la separacin de los componentes y durante su troceado Las tetinas deben cortarse longitudinalmente una sola vez. El resto de los componentes deben cortarse, en la medida de lo posible, en piezas de una longitud comprendida entre 4mm y 6mm y una anchura que no exceda de 6mm Procedimiento Se mezclan a (372)C la probeta de la muestra preparada con 50 veces su masa de una solucin acuosa de cido clorhdrico (0,070,005) mol/l en un recipiente de 1,5 a 5 veces el volumen del cido. Agitar el recipiente en el bao de agua durante (605) s y se determina la acidez de la mezcla con el pH-metro. Si el pH es superior a 1,5, aadir gota a gota sin dejar de agitar la mezcla, una solucin acuosa de cido clorhdrico (2,0 0,2) mol/l hasta que el pH se encuentre en un rango de 1,0 a 1,5. La mezcla debe protegerse de la luz y agitarse continuamente bajo unas condiciones similares durante (601) min antes de dejarla reposar durante (601) min a la misma temperatura Inmediatamente despus del reposo, separar los slidos de la solucin mediante el filtro de membrana y, si es necesario, centrifugar a 5000 rpm durante un tiempo no superior a 10 minutos. El uso de la centrifugacin debe ser registrado Si las soluciones se mantienen ms de un da previamente al anlisis, deben estabilizarse aadiendo cido clorhdrico de manera que la concentracin de la solucin almacenada sea de aproximadamente 1 mol/l Determi