Controle de microrganismos: agentes fsicos, qumicos e biolgico

Os principais agentes fsicos que promovem o controle microbiano so: Calor Filtrao Radiaes Baixas temperaturas CALOR - agente fsicos mais prtico e eficiente para a esterilizao e/ou desinfeco. - pode ser empregado sob duas formas: seco e mido, tendo a vantagem de apresentar, basicamente, apenas 2 parmetros a serem controlados: tempo e temperatura. - Para todos os organismos so definidas as temperaturas mnima, mxima e tima de crescimento, qdo submetido a t C acima da mxima os efeitos so letais. Processos empregando calor: - a morte se d pela oxidao de constituintes celulares e desnaturao de protenas e cidos nuclicos -

Os principais agentes fsicos que promovem o controle microbiano so: Calor Filtrao Radiaes Baixas temperaturas CALOR - agente fsicos mais prtico e eficiente para a esterilizao e/ou desinfeco. - pode ser empregado sob duas formas: seco e mido, tendo a vantagem de apresentar, basicamente, apenas 2 parmetros a serem controlados: tempo e temperatura. - Para todos os organismos so definidas as temperaturas mnima, mxima e tima de crescimento, qdo submetido a t C acima da mxima os efeitos so letais. Processos empregando calor seco: -A morte se d pela oxidao de constituintes celulares e desnaturao de protenas e cidos nuclicos. - No a melhor maneira de utilizao do calor, uma vez que o ar menos condutor da temperatura que a gua.

Tcnicas de esterilizao por calor seco

Mtodo Flameja o Estufa

Mecanismo de ao

Uso preferencial

Comentrios
Mtodo eficaz de esterilizao no momento do uso Mtodo eficaz esterilizao de

Baixa penetrao/alta temperatura e longos perodos Ala, espalhador, agulha de platina

Oxidao de material 1 h 180C, 2 h 170C, 4 h 140C;

todo

Materiais de vidro e outros materiais resistentes a altas temperaturas

Estufas

Calor mido
- Elevado poder de penetrao: maior poder de penetrao do vapor dgua. - Desnaturao de cidos nuclicos e protenas, podendo tambm romper membranas celulares. - Vapor tem maior capacidade de romper as pontes de hidrognio. -Mtodos - gua em ebulio. C. botulinum eliminao de esporos 5,5 horas a 100C/30 min. 120C, estes esporos so eliminados aps 4 a 5 minutos

Mt odo

Mecanismo de ao
Desnaturao de protenas (1atm/120 C/ 20 min) Desnaturao de protenas

Uso preferencial

Coment rios

Autoclave

Meios de cultura, solues, materiais e instrumentos resistentes a temperatura e presso elevadas Indstria alimentar, na produo de produtos lcteos, bebidas e conservas

Verificar a relao superfcie/volume da massa do material com o tempo de penetrao do calor Destri bactrias; dependendo da temperatura e do tempo de exposio pode esterilizar

P asteuriza o

Autoclave

 Filtragem -Processo muito til na esterilizao de materiais termolbeis, sendo empregado para lquidos e gases (vitaminas, antibiticos ) - usada na remoo mecnica de microorganismo (bactrias e fungos) - estes filtros so geralmente compostos por celulose, acetato, policarbonato, teflon, ou outro material sinttico. - dimetro dos poros mais utilizados so de 0,2 m, que removem os microrganismos (exceto vrus) das solues e do ar.

Radiao Radiao No-Ionizante: UV (de 4 a 400 nm - sendo 260 nm o comprimento mais eficiente) letal, mas exibe baixa penetrabilidade, no atravessando vidros, filmes sujos e outro materiais. extremamente eficiente na eliminao de microrganismos presentes em superfcies. 260 nm, ocorre maior absoro pelo DNA,

Radiao Ionizante: - Radiaes de pequeno comprimento de onda, portanto, de altssima energia e penetrabilidade radiao gama e os Raios X - promovem a ionizao de tomos, fazendo-os perderem eltrons so gerados radicais livres extremamente reativos, que podem destruir pontes de hidrognio, duplas ligaes, estruturas em anel. Quando na presena de oxignio, geram radicais hidroxila livres, absolutamente txicos para as clulas. Uso: em produtos termolbeis, tais como plsticos e alguns tipos de alimentos (frutas, vegetais, alimentos marinhos). Nos alimentos seu uso interessante, uma vez que as radiaes inativam enzimas autocatalticas que participam do processo de degradao natural.

Tcnicas de esterilizao e desinfeo

Mtodo Calor mido Autoclave Mecanismo de Uso preferencial ao Elevada penetrao do calor
Desnaturao de protenas (1atm/120C/ 20 min) Desnaturao de Meios de cultura, solues, materiais e instrumentos resistentes a temperatura e presso elevadas Indstria alimentar, na

Comentrios

Pasteurizao

Verificar a relao superfcie/volume da massa do material com o tempo de penetrao do calor Destri bactrias; dependendo da

Mtodo Calor seco Flamejao Estufa

Mecanismo de ao

Uso preferencial

Comentrios

Filtragem

Baixa penetrao/alta temperatura e longos perodos Ala, espalhador, Mtodo eficaz de agulha de platina esterilizao no momento do uso Oxidao de todo o Materiais de vidro e Mtodo eficaz de material outros materiais esterilizao 1h/180C, 2h/170C, resistentes a altas 4h/140C; 12-14h/120 temperaturas C Remoo mecnica de Usada na eliminao de Remoo de bactrias e microrganismos microrganismos de fungos (pode no remover lquidos termosalguns vrus) sensveis(vitaminas, antibiticos) e do ar

Controle de Microrganismos por Agentes Qumicos

Cuidados prvios: lavagem adequada do material, garantia de pleno contato com o agente. Caractersticas de um agente qumico ideal: boa atividade antimicrobiana, toxicidade seletiva, solubilidade e estabilidade, inocuidade, no interao com a matria orgnica, temperatura de ao adequada, alto poder de penetrao, sem poder corrosivo ou tintorial, desprovido de ao danosa ao meio ambiente.

Principais Tipos de Agentes Qumicos: 1) Compostos orgnicos:

Fenis e derivados, Hexaclorofeno - so cumulativo e carcinognico.

lcoois: efetivos, confiveis e baratos, atuando como bactericidas, fungicidas e contra vrus envelopados. Os mais usados so etanol e isopropanol, nas concentraes entre 70 e 80%. Atuam desnaturando protenas e dissolvendo lipdeos de membrana. Compostos Quaternrios de Amnio: detergentes catinicos so detergentes efetivos, que desnaturam protenas (Ex: cloreto de benzalcnio, que mata a maioria das bactrias).

2) Halognios Iodo: Eficaz contra bactrias, fungos, vrus e protozorios parasitas. - Atua oxidando componentes celulares e iodinando protenas. Cloro: -tratamento de guas e nas indstrias de laticnios e alimentos. - pode ser aplicado na forma de gs, hipoclorito de sdio ou de clcio, que gera cido hipocloroso e ento O2, promovendo a oxidao de materiais celulares e causando a morte em cerca de 30 minutos. - Eficaz contra fungos, bactrias e vrus, com a desvantagem ser descorar alguns materiais. - eficiente, barato, de fcil uso, mas altamente reativo com a matria orgnica. - desvantagem, o uso do cloro em guas pode produzir pequenas quantidades de compostos organoclorados, particularmente o trihalometano (THM), um possvel agente carcinognico.

3) Metais Pesados Foram muito usados no passado como germicidas (prata, mercrio, zinco e cobre), sendo atualmente substitudos por compostos menos txicos. sulfato de cobre usado na desinfeco de guas, especialmente contra algas. Estes atuam combinando-se com protenas, geralmente nos grupos SH, inativando-as. 4) Outros Perxidos: principalmente gua oxigenada, sobre organismos anaerbios, atuando pela sua ao oxidante. Oznio: Vem sendo empregado na desinfeco de gua, com sucesso, na Europa e Estados Unidos. Embora seja um tratamento mais caro, tem a vantagem de no produzir compostos organoclorados. Por outro lado, devido sua instabilidade, a gua submetida a este tipo de tratamento est mais sujeita contaminao que quando clorada.

Agentes Qumicos Esterilizantes Aldedos: Formaldedo e Glutaraldedo, molculas muito reativas, combinam-se com protenas, inativando-as. Formaldedo 8% dissolvido em gua ou lcool (irritante e deixa resduos) e glutaraldedo 2% (menos irritante). Em 12 horas, destroem esporos. Gases esterilizantes: xido de etileno Brometo de etdio: fumigao do solo Vapam (metilcarbamato de sodio) usado na fumigao do solo

 Controle de microrganismo: agente biolgico Mecanismos de antagonicidade dos agentes de controle biolgico - parasitismo direto ou predao - antibiose (produo de antibiticos, bacteriocinas, metablitos cidos ou txicos etc.) - competio por elementos essenciais - estmulo do hospedeiro (Blakeman e Brodie, 1976; Weller, 1988) - eliminao ou reduo do potencial de inculo - proteo fsica do rizoplano ou filoplano - induo de resistncia do hospedeiro (Cook e Baker, 1983) Trichoderma sp. - o fungo mais utilizado no controle biolgico de doenas de plantas existem vrios produtos comerciais com elevada eficincia no controle de murchas vasculares, tombamentos de mudas, mofo branco e etc..., - Fungos indutores de resistncia patgenos em plantas tem sido amplamente estudado no sentido de: identificar as molculas envolvidas em resposta da resistncia Dificuldades a serem superadas Seleo de isolados virulento Desenvolvimento de tcnicas de multiplicao em laboratrio, de formulao de tcnicas de aplicao do produto

Bactria PGPR (Rizobactrias promotoras de crescimento da planta) - vivem na rizosfera sem estabelecer relaes simbiticas com plantas; - produzem substncias promotoras do crescimento vegetal; - interferem na nutrio de plantas; - controle biolgico: induo de resistncia a doenas em vrias culturas - seleo de isolados especficos e eficientes na RInduzida - Identificao e Isolamento de compostos qumicos indutores de resistncia (Messenger- produto comercial , harpina) Actinomycetes: produo de antibiticos, atua por competio, -seleo mutantes: especficos e eficientes na produo de antibiticos Siderforos: Reao de quelao e complexao de metais siderforos afinidade por Fe quelatos com Fe controle biolgico Pseudomonas putida (Phytophthora) , P. fluoresncens