U.T.I.

Biologa Celular

Oxidacin de cidos grasos y ciclo de Krebs

Departamento de Bioqumica Noviembre de 2005

Fases de la respiracin celular

1. La oxidacin de cidos grasos, glucosa y algunos aminocidos produce acetil-CoA

2. Los grupos acetilo se incorporan al ciclo de Krebs, se oxidan a CO2 y la energa liberada se conserva en forma de ATP y en las coenzimas reducidas NADH y FADH2

3. Los electrones transportados por el NADH y el FADH2 se transfieren a la cadena respiratoria, donde fluyen hacia el O2 para formar H2O y promueven la formacin de ATP en el proceso de fosforilacin oxidativa

Anatoma bioqumica de la mitocondria

-Oxidacin de cidos grasos

Los cido grasos deben ser activados antes de su entrada a la mitocondria

La ligasa especfica para cidos grasos de cadena larga es una enzima unida a membrana mitocondrial externa y al retculo endoplsmico

El ciclo de la carnitina permite la entrada de los cidos grasos a la mitocondria

Translocasa

Estrategia general de la -oxidacin

Balance de la -oxidacin (C16)

Palmitoil-CoA + 7CoA-SH + 7FAD + 7NAD+ + 7H2O

8 Acetil-CoA + 7FADH2 + 7NADH + 7H+

Balance de la -oxidacin (C16)

En el ltimo ciclo de oxidacin de un cido graso de cadena impar el sustrato tiene 5 carbonos: la fragmentacin tioltica produce acetil-CoA y propionil-CoA

Control de la oxidacin de los cidos grasos

En la mayora de las clulas el control depende de la disponibilidad de sustrato En animales superiores esta disponibilidad est determinada por accin de hormonas En el hgado el malonil-CoA inhibe a la carnitina acil transferasa I y por tanto la -oxidacin

El ciclo de Krebs

La decarboxilacin oxidativa del piruvato produce acetil-CoA, CO2 y NADH

Complejo multienzimtico: piruvato deshidrogenasa formado por 3 enzimas y 5 coenzimas diferentes implicadas en la reaccin y dos enzimas adicionales implicadas en la regulacin

El complejo piruvato deshidrogenasa utiliza 5 coenzimas diferentes

Pirofosfato de tiamina Lipoamida

NAD

FAD

CoA

El complejo piruvato deshidrogenasa est formado por 3 enzimas diferentes

E1 : E2 : E3 : Enzima piruvato deshidrogenasa dihidrolipoil transacetilasa dihidrolipoil deshidrogenasa Coenzima No/complejo TPP 24 Lipoato, CoA 24 FAD, NAD 12

Los productos intermedios permanecen unidos al complejo piruvato deshidrogenasa

Panormica del ciclo de Krebs

El ciclo de Krebs tiene 8 pasos

1. Formacin de citrato

El citroil-CoA es un intermediario transitorio de reaccin La hidrlisis del enlace tioster del intermediario hace que la reaccin sea exergnica

2. Formacin de isocitrato va cis-aconitato

La aconitasa contiene un centro hierro-azufre que acta como centro de fijacin de sustratos y centro cataltico

3. Oxidacin del isocitrato a -cetoglutarato y CO2

Existen dos formas diferentes de isocitrato deshidrogenasa: NAD dependiente (matriz mitocondrial) NADP dependiente (matriz mitocondrial y citosol)

4. Oxidacin del -cetoglutarato a succinil-CoA y CO2

El complejo de la -cetoglutarato deshidrogenasa es muy parecido al complejo piruvato deshidrogenasa, tanto en estructura como en funcin

5. Conversin del succinil-CoA en succinato

La formacin acoplada de GTP (o ATP) a expensas de la energa liberada por la decarboxilacin oxidativa del -ceto-glutarato es otro ejemplo de fosforilacin a nivel del sustrato

6. Oxidacin del succinato a fumarato

El malonato es un fuerte inhibidor competitivo de esta enzima

En eucariotas, la succinato deshidrogenasa se encuentra unida a la membrana mitocondrial interna, contiene tres centros hierro-azufre diferentes y una molcula de FAD unida covalentemente.

7. Hidratacin del fumarato y produccin de malato

Esta enzima es especfica para el fumarato y el L-malato

8. Oxidacin del malato a oxalacetato

Balance del Ciclo de Krebs

Acetil-CoA + 3H2O + 3NAD+ + FAD + GDP + Pi

2CO2 + 3NADH + FADH2 + CoASH + GTP

La energa de las oxidaciones del ciclo se conserva con eficiencia

Los C de los cidos grasos entran al ciclo de Krebs mayoritariamente va acetil-CoA

Los C de los aminocidos entran al ciclo de Krebs en diferentes puntos

Los componentes del ciclo son importantes intermediarios biosintticos (va anfiblica)

Las reacciones anaplerticas reponen los intermediarios del ciclo de Krebs

Regulacin del Ciclo de Krebs

Regulacin del ciclo de Krebs Piruvato deshidrogenasa

1. Regulacin alostrica: alostrica Inhibidores: ATP, acetil-CoA, NADH y cidos grasos de cadena larga Activadores: AMP, CoA y NAD+ 2. Modulacin covalente: adems de E1, E2 y E3 el complejo covalente
PDH contiene 2 enzimas reguladoras capaces de modificar covalentemente a E1

E1 quinasa : al fosforilar a E1 la inactiva

esta quinasa es activada por NADH y acetil-CoA

E1 fosfatasa: al defosforilar a E1 la activa fosfatasa

esta fosfatasa es activada por Mg++ y Ca++

Regulacin del ciclo de Krebs

1. Disponibilidad de sustratos 2. Inhibicin por acumulacin de productos: 3. Regulacin de las siguientes enzimas:
Citrato sintasa Inhibidores: NADH, succinil-CoA, citrato, ATP Activadores: ADP Isocitrato deshidrogenasa Inhibidores: ATP Activadores: Ca++, ADP -cetoglutarato deshidrogenasa Inhibidores: succinil-CoA, NADH Activadores: Ca++

El factor regulador ms importante es la relacin intramitocondrial de [NAD+] / [NADH]