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BIOSNTESIS DE LOS ESTEROIDES SEXUALES RECONOCIMIENTO DE LA MOLCULA ESTEROIDEA Y PROPIEDADES

Bernardo Agudelo Jaramillo Ginecologo-Obstetra Docente Departamento de Ginecologa y Obstetricia Facultad de Medicina, Universidad de Antioquia

El colesterol (C27) es el precursor de la sntesis de todos los esteroides y es producto del metabolismo heptico, pero puede ser sintetizado en las glndulas endocrinas encargadas de la sntesis de esteroides (suprarrenal y gnadas). La esteroidognesis ocurre en los rganos especializados como son la suprarrenal, las gnadas y la placenta; sin embargo en el sistema nervioso central (SNC) y en el perifrico (SNP) tambin hay sntesis de neuroesteroides, en el corazon se sintetiza corticosterona y deoxicorticosterona, pero hast ahora no se demuestra sntesis de cortisol o de aldosterona. La transformacin de los esteroides y el metabolismo de ellos puede ocurrir en casi todos los tejidos, incluyendo el hueso, la piel, el tejido graso, hgado, prstata, gnadas, glndula mamaria, en donde se producen esteroides trficos de accin local que no alcanza a ser medido ni impacta en la circulacin perifrica. Este metabolismo de esteroides especfico de tejido blanco se conoce hoy como intracrinologa. La estructura qumica de los esteroides, est constituida por tres anillos bencnicos y un anillo ciclopentano. Se nominan A,B,C a los tres anillos bencnicos y D al anillo pentano. Los carbonos (Cs) se numeran de manera progresiva a partir del anillo A hacia el D, y en los C17, C13 y C10 se agregan los C20, C18 y C19 respectivamente. 12 17 11 1 2 3 9

C 13 D
14 8 7

16 15

A
4

10 5

B
6

Ciclopentano-perhidrofenantreno (Molcula bsica de 17 carbonos, conocida como gonano. No es activa)

En el C17 se fija el C20 que se continua hasta el C27 en una cadena de hidrocarburo, as: H2 H 26 H C21 CH C C2
3

18 CH 19

CH

C H2

25CH

CH3
10

13

17

27CH3

Cada uno de los Cs complementa su estabilidad con hidrgeno (H+), excepto: *El C3, se satura con radical hidroxilo (-OH), cuando la molcula posee doble enlace entre C5 y C6 (llamados esteroides delta 5, 5), o un radical cetona (=O) cuando existe doble enlace entre C4 y C5 (esteroides delta 4, 4). *El C10, y el C13 se saturan cada uno con un radical metilo (los carbonos C19 y C18, respectivamente). *El C17, se satura con el C20 y la cadena de hidrocarburo hasta el C27. Entre el plano del anillo A y el B existe angulacin espacial, que le confiere caractersticas nicas con respecto a la unin al receptor intracelular o nuclear, conocido como receptor clsico de la va clsica de los esteroides. CH3 H A
5

Plano / cis D C

B Plano / trans

Estereoquimicamente se consideran dos ismeros moleculares, cada uno con caractersticas qumicas particulares. Cuando un radical se proyecta hacia delante de la molcula esteroidea se denomina y cuando est hacia atrs de la molcula se denomina . El plano hacia donde se encuentra el grupo metilo angular del C10, o sea el C19, es reconocido como el plano anterior del ncleo esteroideo, o plano beta ( ). Los estereoismeros de importancia funcional se presentan en C 3 y C17, de tal manera que las formas biolgicamente activas del estradiol (E2) y de la testosterona (T) son , mientras que las formas son inactivas, por lo menos en su accin clsica sobre el receptor nuclear. Otro sitio de posible isomerizacin y por ende de modificacin funcional es el C 5. A este nivel se forman as dos ismeros: la forma cis, cuando el radical est hacia el plano de la molcula y trans cuando est hacia el plano . La isomerizacin en este punto es de tal magnitud sobre la conformacin espacial de la molcula, que cuando un estereoismero es 5 , el ngulo entre los anillos A y B casi desaparece (se ubican en el mismo plano) y cuando es 5 , el ngulo se magnifica casi hasta los 90. Esta modificacin espacial le confiere a la molcula una gran especificidad a nivel del sitio receptor en la protena ligando (nicho ) del receptor intracelular nuclear o clsico. Segn el nmero de Cs que posea la molcula esteroidea, se caracterizan cuatro familias especficas con propiedades particulares:
1.

El grupo colestano, con 27 Cs. Su principal representante es el colesterol (C27). Es el esteroide estructural por excelencia y el substrato principal para la biosntesis esteroidea. El grupo pregnano, con 21 Cs. Su principal representante es la progesterona (P4). Otros pregnanos son la pregnenolona (P5), el cortisol y la aldosterona.

2.

3.

El grupo androstano, con 19 Cs. Sus principales representantes son: la T, la androstenediona (A4) producidos principalmente en las gondas. Los andrgenos (As) de la suprarrenal, considerados As precursores como la deshidroepiandrosterona (DHEA) y el androstenodiol (A5). El grupo estrano, con 18 Cs. Su principal representante es el 17 -estradiol (E2), objetivo final en la sntesis de los esteroides sexuales, y los otros estrgenos menos potentes como la estrona (E 1), el estriol (E3) y el estetrol (E4), este ltimo caracterstico de la vida intrauterina en conjunto con el estriol. La caracterstica distintiva de estos esteroides es la presencia del triple doble enlace en el anillo A, condicin que le confiere propiedades aromticas (anillo fenlico) nicas de este grupo y caractersticas nicas para la unin al receptor estrognico. Los estrgenos (Es) son dependientes en su accin sobre el receptor intracelular de la angulacin existente entre el anillo A y el B, donde la forma es la forma realmente activa. Las formas tienen los dos planos de los anillos A y B sin mayor angulacin y as no son reconocidos por el receptor intracelular, pero si pueden ser reconocidos por otros receptores de membrana extracelulares, conocidos como los receptores no clsicos. Estos ltimos son los predominantes en el tejido nervioso, en la accin de los neuroesteroides. C18 OH (alcohlico) Anillo A : triple insaturacin (anillo circular e inestable) OH (aromtico) ...las damas adoran los anillos y los perfumes, y el alcohol la desestabiliza...
B.A.J

4.

17 -Estradiol (C18) 17 - E2

Los esteroides pueden tener insaturacin de alguno de sus carbonos. De manera natural, la insaturacin entre el C5 y el C6, con un doble enlace, clasifica este tipo de molcula como un ismero delta-5 y adquiere el apelativo ene. El radical que satura el C3 es un alcohol (OH). A este tipo pertenecen los colestanos, la pregnenolona y los androstanos de la suprarrenal. Si el doble enlace se encuentra entre el C4 y el C5, se conoce como delta-4. El radical que satura el C 3 es una cetona (=O). Estos isomeros se consideran mas potentes desde el punto de vista hormonal, y a ellos pertenecen la progesterona, la 17 -hidroxiprogesterona, los mineralocorticoides como la deoxicorticosterona y la aldosterona, los glucocorticoides como el deoxicortisol y el cortisol, y los andrgenos gonadales como la androstenediona, la testosterona. Los estranos, estradiol (E2), estrona (E1) y estriol (E3), tambin son delta-4, pero por la presencia del triple doble enlace del anillo A, que conforma un enlace circular de caractersticas inestables, el radical que satura el C 3 es un hidroxilo (-OH), es decir un alcohol, que conforma as un anillo fenlico de caracteristicas aromticas. En contraposicin, el radical que satura el C 3 en los esteroides delta-4 es una cetona (=O).

La isomerizacin de los esteroides delta-5 en ismeros delta-4 se realiza por medio de una enzima, la 3 -hidroxiesteroide deshidrogenasa- 4-5 isomerasa (3 HSD/ 4-5 Isomerasa), que es una enzima de membrana con diferentes isoenzimas reconocidas y con especificidad tisular especfica. En el feto, esta enzima es practicamente inexistente o inactiva en la suprarrenal propia del feto. Pero esta presente y activa en los rganos que transforman los andrgenos precursores provenientes de la suprarenal, como la unidad folicular del ovario, el cuerpo lteo y el testculo, al igual que en las clulas gliales del cerebro y en ciertas neuronas. a nivel de las clulas gliales. En la placenta es la responsable de la formacin de la progesterona (P4). Debe resaltarse que la va delta-5 es preferencial en la suprarrenal para la formacin de los As precursores que utilizan las gnadas para la sntesis de los andrgenos mas potentes, la androstenediona y la testosterona. La va delta-4 es caracterstica del cuerpo lteo en el ovario para la sntesis de progesterona. La va delta-4 en la suprarrenal esta limitada a las porciones fasciculada y glomerular, donde se producen los glucocorticoides y los mineralocorticoides respectivamente, a expensas de la 17 -hidroxiprogesterona y la progesterona localmente producida. Se puede caracterizar a los esteroides delta-5 como esteroides dbiles y a los delta-4 como esteroides activos. Todos los esteroides derivan en la biosntesis de una molcula sustrato con un nmero mayor de tomos de carbono, el colesterol. Desde el punto de vista termodinmico es mas factible retirar tomos de carbono que adicionar. Sin embargo, la adicin o el retiro de los radicales que saturan los carbonos es posible por medio de la actividad enzimtica. En la biosntesis esteroidea, la oxidacin y la reduccin no se refieren a la insercin y remocin de tomos de oxgeno; en tal caso, la adicin de 02 a una molcula de esteroide se denomina oxigenacin. Oxidacin es para los esteroides, el proceso por el cual se remueven electrones (ej; se remueve un tomo de H+ de un radical OH y se origina un radical cetnico =O). La deshidrogenizacin es por lo tanto el proceso de oxidacin y la hidroxilacin es un proceso de reduccin. Esta es la estrategia evolutiva que los esteroides han adquirido para retirar carbonos de su molcula original y conformar familias especficas de menor nmero de carbonos, a travs de enzimas oxidativas y reductoras (deshidrogenasas e hidroxilasas) que requieren de la participacin de cofactores enzimticos transportadores de electrones. La mayora de las enzimas encargadas de estos procesos son del tipo de las citocromos p450, que possen en su ncleo un tomo de hierro y molculas transportadoras de electrones, como la NADH+ y la FADH+. De esta manera, a partir del C27 se forman los pregnanos (C21) por perdida de seis carbonos, de stos se forman los androstanos (C19) por la perdidad de tres Cs y finalmente de estos se forman los estranos (C 18) por la perdida de un C. En el C10, entre los anillos A y B, existe un grupo metilo (-CH3) que identifica a los androstanos o C19; en el C13 , entre los anillos C y D, existe un grupo metilo (-CH 3) que identifica a los estranos o C18; en el C17 se encuentra una cadena hidrocarbonada de ocho Cs que caracteriza al C27. La primera perdida de carbonos se produce a nivel de esta cadena hidrocarbonada que sale desde el C17, quedando slo dos Cs unidos al C17, que identifica a los pregnanos o C 21. Es necesaria la existencia del C18 y del C19 para poder tener los C21 y el C27. Por manipulaciones de laboratorio es posible producir hormonas con 18 carbonos, es decir ausencia del metil C19, sin accin estrognica

propia de los C18. Estos derivados se conocen como los nor-esteroides, que se obtienen de la testosterona, un androstano C19. Estas molculas adquieren propiedades progestacionales y conservan slo algunas propiedades de los andrgenos, se utilizan en las terapias anticonceptivas y progestacionales. Los otros Cs del ncleo esteroideo son sitios posibles de fijacin de radicales del tipo hidroxilo (-OH), del tipo cetnico (=O), metilo (-CH3), etilo (-C2H5), entre otros. En relacin con la unin al receptor y el metabolismo de los esteroides, pueden identificarse en la molcula dos zonas: (a) la regin de reconocimiento por el receptor clsico, que corresponde al anillo A, el que de acuerdo con los radicales all presentes muestra una elevada especificidad por determinado receptor, ejemplo, el grupo hidroxilo (OH) en el C3 del anillo A forma un anillo fenlico que caracteriza a los estrgenos, y es el sitio de identificacin por el receptor intracelular. El ngulo existente entre el anillo A y el B, propio de la forma del 17 - E2, mas no de la forma , contribuye con el proceso de reconocimiento por el receptor; (b) la regin de los anillos C y D, principalmente el D, donde la modificacin de radicales o la adicin de algunos de ellos origina cambios funcionales en la molcula, aumentando el metabolismo con descenso en la accin hormonal, o disminuyndolo y as potenciando el efecto hormonal. En este sitio pueden ocurrir cambios en los Cs 14, 15,16 y 17. Los mejores ejemplos son: la transformacin funcional del 17 -E2 a E1, que ocurre por efecto de la 17 hidroxiesteroide deshidrogenasa, convirtiendo el -OH del C17 en una cetona (=O), modificacin que en s misma le baja la potencia al 17 -E2 hasta la mitad o la tercera parte; la adicin de un OH al C-16 forma el E3, estrgeno dbil con una potencia 20 veces menor que la del 17 -E2 y principal forma de excresin urinaria; la adicin sinttica del radical etinil al C17que constituye el etinil- estradiol (EE2). Este ltimo estrgeno es el ms utilizado en la terapia anticonceptiva, ya que tiene una afinidad por el receptor estrognico cien veces mayor que la propia por el 17 -E2, de tal forma que se suministra en mnimas dosis garantizando la accin estrognica. El mestranol es otro estrgeno sinttico utilizado en terapia anticonceptiva, tiene un radical metilo en el C3, en vez de su natural OH, y un etilo en el C17, como el EE2. En el hgado se transforma casi totalmente a EE2 por desmetilacin enzimtica. La accin hormonal de los esteroides se ejerce a travs de receptores protecos, presentes en el citosol celular y que luego se trasfieren al ADN en el ncleo. La accin molecular realizada se conoce como efecto genmico en razn a la conformacin de un complejo entre la hormona con su receptor (CH-R), que en conjunto con otras protenas nucleares constituyen el complejo factor transcripcional sobre el DNA. La transcripcin genmica se demora entre 12 a 24 horas para obtener la protena postranscripcional, que es el objetivo ltimo de la accin esteroidea. En la accin genmica, el ncleo esteroideo expone el anillo A al receptor. Recientemente, se han identificado efectos hormonales esteroideos no genmicos que no corresponden con los observados en la forma clsica. Son de accin ms rpida, es decir que se aprecian en cuestin de minutos o en menos de siete horas a partir del estmulo, sin ingreso de la molcula al citosol, y el efecto no es bloqueado por inhibidores de sntesis proteca. Esta accin no genmica se acompaa de cambios en el potencial de la membrana celular. Las clulas que responden as a los

esteroides poseen mnima o nula sntesis de RNAm, que clasicamente no han sido identificadas como hormono-dependientes, como son el endotelio y las clulas neurales. Pero recientemente, stas clulas estn siendo caracterizadas en su totipotencial funcin biosinttica y transcripcional. Estos efectos parecen estar mediados por sitios de reconocimiento en los anillos C y D a los receptores no clsicos localizados en la superficie de las membranas celulares, como el mecanismo dilucidado en la accin de la P4 sobre el acrosoma espermtico; en los neuroesteroides sobre el tejido neural; los estrgenos de tipo y sobre el endotelio y el tejido nervioso, entre otros. COMPRENSIN FCIL DE LA SNTESIS DE LOS ESTEROIDES La sntesis de los esteroides a partir del sustrato comn, el C27, se realiza en la suprarrenal, el ovario, el testculo y la placenta. Recientemente, se ha podido establecer que en las clulas gliales del SNC, en algunos ncleos neuronales y en el miocardio, existe expresin de los genes y la transcripcin de RNAm de las enzimas necesarias para la biosntesis esteroidea. El C27 puede proveerse de las lipoprotenas de baja densidad (LDL) que transportan el C27 de sntesis heptica; pero tambin se puede sintetizar en las clulas a partir de la acetilcoenzima-A, excepto en la placenta; o puede tomarse del C27 liberado de los steres del C27 de la grasa. En la sntesis de los esteroides existen tres puntos enzimticos que se consideran como reguladores, o Check-points del ingls. Estos sitios crticos en la actividad de una enzima realizan procesos de auto-regulacin o control biosinttico. Cada una de estas enzimas es activada o modulada por las hormonas trficas de la hipfisis, la ACTH, las gonadotropinas LH y FSH y en la placenta por la gonadotropina corinica. El primer punto de control se realiza en la enzima -hidroxi- -metilglutaril coenzima A (HMG CoA). Aqu el proceso autolimita la sntesis del colesterol en relacin con los niveles de LDL-C circulante. Por polimerizacin de molculas a partir de la acetil-coenzima A se conforma una primera gran molcula de 30 carbonos, el escualeno, del que luego se forma el lanosterol (C30 de predominio vegetal). La actividad enzimtica de fragmentacin de los Cs se inicia siempre con una hidroxilacin en el sitio donde se va a cortar el C, y luego una deshidrogenizacin que tiene actividad de desmolasa, osea, de retiro de una molcula de agua. La perdida de los Cs ocurre a partir del C30 hacia abajo. El colesterol es el precursor de todos los esteroides, es un compuesto estructural fundamental para la fluidez de las membranas y es el sustrato esencial en la esteroidognesis. La placenta no posee la HMGCoA, por lo tanto no puede sintetizar colesterol. Adquiere el colesterol a partir de la LDL materna y en menor cantidad del feto. Los esteroides con idntico nmero de tomos de C se transforman entre s por mecanismos enzimticos pero sin reduccin de tomos de C, modificando los radicales libres sobre los Cs 3, 5, 17, 18, 19, 20 y 22 (generalmente cambio de hidroxilo a cetona o visceversa). La modificacin trascendental de la biosntesis esteroidea ocurre en el doble enlace entre C5 y C6 (caracterstico de los esteroides -5 que se consideran precursores de baja actividad hormonal, tales como el C27, la pregnenolona (P5), la 17 -OH-P5,

la DHEA y el androstenodiol (A5). El radical del C3 en los esteroides -5 siempre es un grupo fenlico (-OH asociado a un benceno). Por la accin enzimtica de la 3 -HSD/ 4-5 Isomerasa, los -5 se transforman en los ismeros -4 con cambio en el doble enlace, que exige rearreglos de las cargas elctricas en el anillo A y por lo tanto, se cambia el radical fenlico del C 3 (-HO) por el radical cetona (C=O). La excepcin ocurre en el ordenamiento circular del anillo A durante la aromatizacin de los As para formar los Es, donde la perdida del C19 origina la aparicin de tres enlaces dobles que forman un enlace de carbono circular inestable. Es el radical alcohlico del C3 el encargado de desestabilizar el triple doble enlace del anillo A. De esta forma los esteroides -5 se convierten en esteroides -4 y adquieren mayor potencia hormonal. Las clulas de las glndulas esteroidognicas responden a las hormonas trficas de la hipfisis: la ACTH para la suprarrenal; la LH para las clulas de la teca y para el cuerpo lteo, en el ovario, y las clulas de Sertoli, en el testculo; la FSH para las clulas de la granulosa del folculo ovrico y las clulas de Leydig del testculo; y de la placenta, la hCG, sintetizada en el cito-sincitio trofoblasto para activar las clulas del cuerpo lteo rescatado a partir de la implantacin del embrin. La condicin glicoproteca las caracteriza en la activacin de receptores de membrana de la familia de la protena G. La activacin del segundo mensajero, el AMPc, induce la fosforilacin de protenas que especificamente actan sobre la maquinaria transcripcional en el ADN, activando o inhibiendo los genes especficos para la sntesis del esteroide especfico. Adems se induce la sntesis de otras protenas como receptores, factores de crecimiento, protenas reguladoras, protenas estimuladoras, entre otras. El receptor de la LDL es importante para la sntesis de novo de los esteroides a partir del C27, pero no es imprescindible en las clulas que posean capacidad de sntesis de C27. Todos los rganos que sintetizan esteroides pueden sintetizar el C27, excepto la placenta porque no expresa HMGCoA. Una vez el C27 se encuentra disponible en la clula esteroidognica, debe ingresar hasta la matriz interna de la mitocondria. All se inicia el primer paso en la sntesis de los esteroides, esto es, el clivaje o retiro de seis tomos de C (desde C22 a C27). Este es mediado por el complejo enzimtico dependiente de una enzima p450 clivadora de la cadena lateral del colesterol (P450SCC). Este es el segundo punto de control en la sntesis de los esteroides. Por esta reaccin enzimtica se forma el primer esteroide precursor, la P5 (C21). En el SNC, el SNP y en el corazn se ha detectado la expresin y la actividad de la P450SCC , que sugiere la sntesis local de esteroides en rganos no reconocidos hasta ahora como de sntesis hormonal. La membrana externa de la mitocondria es parcialmente permeable al C27. El transporte por esta primera barrera hacia la matriz intermedia es facilitado por la protena-2 portadora de esteroides (SCP2) que capta el C27 del citoplasma y lo expone a la mitocondria. La membrana interna de la mitocondria es impermeable al C27, mas no a las formas hidroxiladas como 20R-OH-Colesterol, 22 -OHColesterol y 25OH-Colesterol; por lo tanto, el transporte del colesterol al interior de la mitocondria requiere de una o varias protenas que faciliten el transporte hacia el sitio donde se inicia la sntesis esteroidea. Se han propuesto la SCP2, un polipptido activador de la esteroidognesis (SAP), un receptor perifrico de las benzodiacepina (PBR) y la protena reguladora de la esteroidognesis aguda (StAR). Esta ltima, ha

sido reconocida recientemente como la responsable y principal regulador de la sntesis esteroidea, y es modulada por la fosforilacin inducida por la activacin del AMPc y en parte por vas de sealamiento mediadas por Ca2+. En resumen, el transporte del C27 hasta el sitio enzimtico ubicado en la matriz interna de la mitocondria es el tercer punto de control de la sntesis de los esteroides, y su principal, mas no exclusivo mediador es la protena StAR, que depende de la activacin celular por las protenas trficas. Colesterol (C-27) + LDL
Lisosoma Hidrolasa esteres C27 esteres colesterol C27 libre

LDL-C
LDL-receptor

Hormonas trficas: ACTH FSH LH HCG

Receptor

(+) PKA (+) AMPc ATP

transferencia C27 membrana interna transferencia C27 membrana externa Fosforilacin sntesis protenas

LDL-r SCP2 StAR

(Protena G) Complejo P450scc Pregnenolona (P5)

La enzima P450SCC forma un complejo con las enzimas transportadoras de electrones, FADH+ (reductasa de adrenodoxina) y NADPH (adrenodoxina). El complejo constituye una especie de tnel molecular por el que debe ingresar por un extremo el C27 y por el otro sale la P5. Los procesos que all suceden ocurren por la actividad de tipo 20 -hidroxilasa y 22 -hidroxilasa sobre el C27, adicionando radicales OH a los C20 y C22. Luego por una accin de tipo 20-22 desmolasa, se extrae agua y se transfieren electrones para formar finalmente la pregnenolona. Este primer esteroide formado es un -5, es el precursor de todos los otros esteroides.
OH H3C C=O

OH

+ H2O 20,22 -diOH-Colesterol

OH OH

Pregnenolona (P5)

La P5 Se considera inactiv como hormona en lo que respecta a la accin genmica, pero se ha demostrado que ejerce accin estimulante no genmica sobre SNC cuando est en la forma sulfato (radical sulfato en el C 3), que se expresa en la modulacin allostrica positiva de la enzima N-metil-D-aspartato (NMDA), por medio de la cual aumenta la fraccin de tiempo de apertura de los receptores GABAA , elevando el potencial convulsivante de la neurona, aumentando la capacidad de respuesta inicial al estrs, la ejecucin de la memoria, la respuesta sexual en ratas expuestas a hembras en estro y estimula la liberacin de la hormona liberadora de gonadotropina (GnRH). Una vez formada la P5, puede ser metabolizada dentro de la mitocondria a P4 por intermedio de la 3 -HSD/ 4-5 Isomerasa, puede salir hacia los microsomas en el retculo endoplsmico liso (REL), donde se encuentran las otras enzimas no existentes en la mitocondria e igualmente la 3 -HSD/ 4-5 Isomerasa. La va 5 es preferencial en la suprarrenal. En sta se forman los As precursores con accin hormonal dbil como son la DHEA y el A5. La va 4 es preferencial en el ovario a nivel de las clulas de la teca interna, en las clulas de la granulosa luteinizadas y en el cuerpo lteo maduro, mientras est ausente en las clulas de la granulosa; en el testculo en la clulas de Leydig. En la suprarrenal aparece en las zonas glomerulosa y fascicular, donde se forman los mineralocorticoides y los glucocorticoides respectivamente. La P5 producida es captada por los microsomas del retculo endoplsmico liso (REL), que son las organelas especializadas en sntesis de los esteroides y se encuentran cargadas de lpidos. All, se someten los precursores a un complejo enzimtico del grupo de enzimas tipo citocromo P450, la P450C17/lyasa. En este sitio de la esteroidognesis se presenta el cuarto punto de control en la sntesis de los esteroides. En el ovario, la actividad de la P450C17/lyasa est restringida a las clulas de la teca, que es el sitio de produccin de andrgenos, y no se expresa en las clulas de la granulosa. El estmulo trfico es la LH, proceso que controla la sntesis de los andrgenos precursores para la sntesis de los estrgenos. La P450C17/lyasa en los esteroides 5 produce la -hidroxilacin del C17 de la P5, y facilita el segundo clivaje de carbonos en C20 y C21 para formar la 17 OH-P5 y la DHEA respectivamente. El grupo cetnico en C20 es fundamental para la iniciacin del clivaje de los C21 , de esta forma la 20 -dihidro P4 no puede ser convertida a andrgenos. El SNC, el SNP y la placenta no demuestran expresin de la P450C17/lyasa, por lo tanto, la sntesis de As en estos tejidos no es posible ni por la va de la 20 -dihidro P4 , ni por la va de los andrgenos precursores tipo 5. La sulfatacin del radical -OH del C3 la realiza la sulfotransferasa, reaccin que aumenta la hidrosolubilidad. Esta modificacin ocurre en la adrenal, el ovario, el testculo y en otros rganos metabolizadores de los esteroides, para facilitar la circulacin en la sangre y la aceptacin por las clulas nerviosas. Los substratos en la adrenal son la P5, la 17 -OH-P4 y la DHEA. En el feto, la suprarrenal produce sulfato de C-27 y S-DHEA como precursores para la biosntesis de los estrgenos placentarios como son el estriol y el estradiol. Estos andrgenos deben pasar por el hgado fetal donde se hidroxilan en el C16 por la

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16 -hidroxilasa heptica para formar de sulfato de 16 OH-DHEA. Esta ltima finalmente ingresa a la placenta donde se aromatiza por medio de la p450 aromatasa para formar estriol (E3) y estradiol placentario (E2). El estriol es el principal estrgeno sintetizado en la placenta. Existe un estrgeno totalmente inactivo y nico de la vida fetal, el estetrol (E4) que se forma por la hidroxilacin del C15 a travs de la 15hidroxilasa placentaria.
C=O C=O

(ACCION LH)
17 hidroxilasa

OH

P5
HO HO

+ acetaldehdo 17 -OH-P5

P450C17/Liasa O A HO-S-O O S-DHEA SO2(OH)2 +

C-17,20-liasa

O DHEA HO

La DHEA posee efectos andrognicos dbiles sobre los rganos blanco, pero es el principal precursor en la sntesis de As ms potentes como la A4, para lo cual necesita el concurso de la 3 -HSD/ 4-5 Isomerasa. Como neuroesteroide, posee efecto no genmico en la forma de S-DHEA y acta como antagonista no competitivo de los receptores GABAA; por tanto, con efectos estimulantes sobre el SNC, reflejados en conductas impulsivas observadas en humanos, mejora de la respuesta coronaria al estrs, mejora de la memoria y de la sensacin de bienestar.
O NAD-NADP OH

DHEA
HO

17 -HSD

HO

5-Adiol Por la va 5, mediante la enzima 17 -hidroxiesteroide deshidrogenasa (17 HSD) la DHEA se convierte en androstenodiol (A5), que es el A precursor inmediato de la T testicular. La va 5 se expresa igualmente bien en el testculo. La 17 HSD requiere de la mediacin de NAD/NADP y se encuentra en el citosol; es considerada una de las enzimas activadoras ("switch") de las hormonas sexuales, junto con la 3 -HSD y la 20 -HSD. Todos los esteroides de la va 5 se

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isomerizan a esteroides 4 dependiendo de la disponibilidad del precursor y de la expresin de la enzima clave para la transformacin, la 3 -HSD/ 4-5 Isomerasa. Como se dijo, sta enzima es el paso fundamental en la activacin de los esteroides precursores en respuesta al estmulo de las hormonas trficas. La LH activa la sntesis de P4 en el cuerpo lteo posovulatorio a partir de la P5, y la sntesis de A4 en las clulas lutenizadas del folculo en crecimiento a partir de la DHEA; en el testculo, la T se sintetiza en las clulas de Leydig a partir del A5. La ACTH en la zona glomerulosa de la suprarrenal induce la sntesis de aldosterona a partir de la P5; para la va mineralocorticoide, forma primero P4 como substrato, y a partir de la 17 -OH-P5 se forma la 17 OH-P4 como intermediario de la va glucocorticoidea en la zona fasciculada de la suprarrenal. En la placenta hay expresin de la 3 -HSD/ 4-5 Isomerasa , pus es fundamental en la formacin de los Es a partir de los As, porque la placenta carece de P450C17/lyasa. En las microglias del SNC tambin se ha demostrado la expresin de esta enzima necesaria para la sntesis de neuroesteroides. La enzima reside en los microsomas del REL (citosol) donde ocurre la mayor parte de las reacciones enzimticas en la esteroidognesis, pero tambin est presente en la mitocondria donde transforma de inmediato la P5 en P4 para continuar la sntesis de los mineralocorticoides y los glucocorticoides en razn a que las enzimas necesarias para estas vas son del tipo p450 mitocondriales (P450C21, P450C11). El punto final de la esteroidognesis sexual es la formacin de los Es. Su biosntesis se ha demostrado en casi todas las especies animales, salvo en el filium de los invertebrados. La enzima encargada de transformar los As, el complejo de la aromatasa, pertenece a la familia de las p450 (P450aromatasa), y es la ms antigua del linaje de las citocromos p450 con una antigedad de ms de 10 millones de aos. La enzima se expresa en las gnadas, en la placenta y en el SNC, aunque tambin existe expresin mnima en la suprarrenal (principalmente en algunas especies). En tejidos perifricos, carentes de las condiciones enzimticas necesarias para iniciar la esteroidognesis pero con capacidad de metabolizar los esteroides, existe expresin de la P450aromatasa y por lo tanto all pueden transformarse los As aromatizables (DHEA, A4 y T) en E2 y en E1. El estmulo hormonal que induce la sntesis de la enzima y su actividad es realizado por la FSH, que se une a su receptor especfico en las clulas de la granulosa del folculo en crecimiento. En el cuerpo lteo de la gestacin, el estmulo trfico lo realiza la hCG procedente del trofoblasto. En la placenta, la expresin de la enzima (isoforma I.1) se inicia una vez el cuerpo lteo declina, para comenzar la aromatizacin de los As precursores de orgen fetal (16 -OH-DHEA-S) y materno (S-DHEA y A4). La P450aromatasa es una enzima muy dinmica y existe en practicamente todos los tejidos sensibles a los estrgenos como son el hueso, el endotelio, la glndula mamaria, el endometrio, el flculo en crecimiento y en el cuerpo lteo.

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La enzima esta localizada en los microsomas del REL y, como todas las de su gnero, requiere de la mediacin de NADPH para el transporte de electrones. La reaccin es compleja y se realiza sobre al anillo A de esteroides 4 donde realiza los cambios trascendentes propios de los estrgenos: 1. Por medio de tres molculas de O2 se ataca el grupo metilo angular del C19 por el proceso de hidroxilacin. 2. Los tomos adicionales de H+ desestabilizan los enlaces entre los Cs 1, 2 y 3 y propician la enolizacin de las tres cetonas existentes despus de la oxidacin (C19 =O, C1=O y C3=O). 3. El anillo A se convierte en un anillo fenlico (benceno con radical hidroxilo) en C3, nica reaccin en los vertebrados capaz de introducir un anillo aromtico en una molcula. Andrgeno (C19) NADPH Reductasa Cit P450arom +O2 Estrgeno (C18) +H2O P450arom O O

A4
O OH

E1
HO OH

17 -HSD

17 -HSD
HO OH OH

E3

T
O HO

17 -Estradiol (17 - E2 )

Los substratos suceptibles de aromatizacin son la T que se transforma en E2, la A4 que se transforma en E1; la S-DHEA, que se transforma en E1 en los tejidos perifricos y en E3 en la placenta. El estetrol (E4) posee un cuarto grupo hidroxilo en el C15, es un metabolito final del E3 existente slo en el feto (efecto de la 15hidroxilasa heptica fetal). En el testculo existe expresin de la P450arom que aromatiza localmente a la T y la A4 pero no a los esteroides 5 -reducidos (metabolitos de la T y al A4 por la accin de la 5 -reductasa, la 5 -

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dihidrotestosterona 5 -DHT). En el SNC ocurre similar proceso sobre los Ass aromatizables (DHEA y T) y sobre metabolitos de la progesterona (20 -OH-P4), pero no sobre los no aromatizables (5 -DHT y la 5 -dihidroprogesterona 5 DHP4- , que es el principal metabolito neuroesteroide de la P4). La E1 de orgen perifrico deriva de la conversin del 17% del 17 -E2 circulante y el resto de ella, procede de la aromatizacin de los As, DHEA y A4. El 17 -E2 total deriva fundamentalmente de las clulas de la granulosa en la unidad folicular , y slo en un 3%-5% de la conversin perifrica de la E1.

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Diagrama de las vas delta-5 y delta-4 en la esteroidognesis VIA DELTA 5

C=O

hidroxiesteroide deshidrogenasa 4-5 Isomerasa

VIA DELTA -4
C=O

P5
HO O

P4 P450C17/liasa
(17 hidroxilasa)

P450C17/liasa
(17 hidroxilasa)

C=O OH

C=O OH

17 -OH-P5
HO O

17 -OH-P4

P450C17/liasa (17,20-desmolasa)
O

P450C17/liasa (17,20-desmolasa)
O

DHEA
HO O

A4
17 -hidroxiesteroide reductasa

17 -hidroxiesteroide reductasa

OH

OH

5-Adiol
HO O

Va preferencial en la teca interna

Va preferencial en testculo

Va preferencial en cuerpo lteo

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LECTURAS RECOMENDADAS Carr, B.R. Disorders of the ovaries and female reproductive tract. In: Wilson, J.D; Foster, D.W; Kronenberg, H.M and Larsen, P.R. : Williams Textbook of Endocrinology. Saunders Co., 9 ed, Philadelphia. 1998. Pp. 751-817. Devlin, T.M. Textbook of Biochemistry. Wiley-Liss, Inc., 3d ed, New York. 1992. 1185 p. Falcone, T and Little, B. Placental Synthesis of Steroid Hormones. In: Tulchinsky, D and Little, A.B. Maternal Fetal Endocrinology. W.B Saunders, Philadelphia, 1994. p: 1-14. Fraser, I.S; Jansen, R.P.S; Lobo, R.A; Whitehead, M.I. Estrogens and Progestogens. In Clinical Practice. Churchill Livingstone, London, 1998. 909 p. Gore-Langton, R.E and Armstrong, D.T. Follicular steroidogenesis and its control. In: Knobil, E and Neill, J.D.: The Physiology of Reproduction. Raven Press, Ltd., New York, 1994. Pp. 571-627. Griffin, J.E and Wilson, J.D. Disorders of the testes and the male reproductive tract. In: Wilson, J.D; Foster, D.W; Kronenberg, H.M and Larsen, P.R.: Williams Textbook of Endocrinology. Saunders Co., 9 ed, Philadelphia. 1998. pp. 819-875. Orth, D.N, Kovacs, W.J. The adrenal cortex. In: Wilson, J.D; Foster, D.W; Kronenberg, H.M and Larsen, P.R. : Williams Textbook of Endocrinology. Saunders Co., 9 ed, Philadelphia. 1998. pp. 517-664. Payne, A.H, Hales, DB. Overview of steroidogenic enzymes in the pathway from cholesterol to active steroid hormones. Endocrine.Rev. 2004; 25(6):947970. Penning, T.M. Molecular endocrinology of hydroxysteroid dehydrogenases. Endocrine.Rev. 1997; 18(3):281-305. Richardson, G.S. Steroidogenesis. In: Sciarra, J.J: Gynecology and Obstetrics. Vol 5. Lippincot, Co., Philadelphia, 1995. Cap 1, 1-15. Simpson, E.R; Mahendroo, M.S; Means, G.D; Kilgore, M.W; Hinshelwood, M.M et al. Aromatase cytochrome P450, the enzyme responsible for estrogen biosynthesis. Endocrine.Rev. 1994; 15(3):342-355. Stocco, D.M and Clark, B.J. Regulation of the acute production of steroids in steroidogenic cells. Endocrine.Rev. 1996; 17(3):221-244.