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BIOENERGTICA Y REACCIONES DE OXIDORREDUCCIN RESUMEN Energa se define como la capacidad de realizar trabajo o de producir calor. El cambio en energa libre de Gibbs es el criterio ms til para saber si puede ocurrir determinado proceso bioqumico. El cambio de energa libre (G) representa la energa libre de los productos, menos la de los reactantes: G < 0 (el proceso es factible y es exergnico) G = 0 (el proceso est en equilibrio y es isoergnico) G > 0 (el proceso no es factible y es endergnico) Las energas libres estndar y las reacciones qumicas pueden sumarse o restarse. Los resultados dan el cambio de energa libre estndar del proceso resultante. A mayor la tendencia de una sustancia para donar sus electrones menor es su afinidad por los mismos y funciona como agente reductor y mas negativo es su potencial de reduccin. El superxido se genera por la reduccin del oxgeno por un electrn. El superxido se convierte a oxigeno y perxido de hidrgeno en la reaccin catalizada por la superxido dismutasa. La superxido dismutasa del citoplasma contiene cobre y zinc. La superxido dismutasa de las mitocondrias contiene manganeso. Los perxidos se forman por reducciones del oxigeno molecular por dos electrones. El perxido de hidrgeno es destruido por la catalasa (que se encuentra en el peroxisoma) y por la glutatin peroxidasa (que se encuentra en el citoplasma). La glutatin peroxidasa contiene selenio como cofactor. Los radicales libres de hidroxilo se pueden formar por una reaccin del perxido con hierro ferroso (reaccin de Fenton) o por una reaccin de perxido con superxido (reaccin de Haber-Reiss) Los leucocitos generan superxido en una reaccin catalizada por la oxidasa de NADPH. El superxido es convertido a perxido de hidrgeno. La mieloperoxidasa es una enzima leucocitaria que cataliza la conversin de perxido a hipoclorito. El perxido, el hipoclorito y los radicales libres de hidroxilo son bactericidas. BIOENERGETICA Y REACCIONES DE OXIDORREDUCCIN Bioenergtica es el estudio de los cambios de energa que acompaan a los procesos biolgicos. La bioenergtica nos ayuda a predecir si puede ocurrir un proceso bioqumico. La energa de oxidorreduccin del catabolismo se convierte a energa de enlaces fosfato del ATP; esta estrategia se lleva a cabo durante las etapas II y III del metabolismo aerobio. El ATP proporciona la energa para innumerables reacciones de transferencia de grupos durante el anabolismo y catabolismo. CAMBIO EN ENERGA LIBRE COMO CRITERIO DE FACTIBILIDAD

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La energa libre de Gibbs es la funcin termodinmica ms usada en bioqumica. Para cualquier proceso real o factible, el cambio de energa libre de Gibbs ( G) es negativo exergnico. El sistema tiene mas energa libre en el estado inicial que en el estado final. G = Gfinal - Ginicial Todas las reacciones factibles ocurren con un cambio de energa libre negativo ( G). Cuando el cambio de energa libre es cero, la reaccin o proceso esta en equilibrio. Estos importantes resultados se pueden resumir como sigue: G < 0 (el proceso es factible y es exergnico) G = 0 (el proceso est en equilibrio y es isoergnico) G > 0 (el proceso no es factible y es endergnico) CAMBIO EN ENERGA LIBRE ESTNDAR Y LA CONSTANTE DE EQUILIBRIO El cambio de energa libre estndar se relaciona con la constante de equilibrio. Considrese la siguiente reaccin qumica general: A+B C+D Por conveniencia, los componentes del lado izquierdo se llaman substancias reaccionantes y los del lado derecho, productos. Tabla 5.1 Unidades de energa y masa y valores de algunas constantes fsicas Nmero de Avogadro (NA) NA = 6.022 x lO23 mol-1 Calora (cal) 1 calora es la energa requerida para calentar 1 g de agua de 14.5 C a 15.5 C 1 calora = 4.184 J Faraday (F ) 1 F = NA cargas de electrones 1 F = 96.485 kJ V-1 o 23 kcal V-1 Constante de los gases o coeficiente de energa y temperatura (R) R = 8.314 J K-1 mol-1 R = 1.987 cal K-1 mol-1 Joule (J) 1 J = 0.239 caloras 1 kilojoule (kJ) = 1 000 J Temperatura Kelvin (T) escala (K) 0 K = cero absoluto 273 K = 0 C Solucin molar Una solucin molar (M) consiste en 1 mol de una sustancia en 1.00 litro de solucin mM, milimolar, 1 x 10-3 M; M, micromolar, 1 x 10-6 M; nM, nanomolar, 1 x 10-9

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M; pM, picomolar, 1 x 10-12 M; fM, fentomolar, 1 x 10-15 M Mol Un mol es el nmero de Avogadro de molculas. El peso molecular corresponde a la suma de los pesos de los elementos que forman la molcula. Un equivalente es el peso molecular dividido por el valor absoluto de la carga ( I , 2, 3) La siguiente ecuacin ilustra la relacin logartmica entre el cambio de energa libre estndar y la constante de equilibrio: G = -RT In Keq (5-4)

R= constante de los gases o coeficiente de energa y temperatura, relaciona la temperatura con la energa (tabla 5.1). R tiene el valor de R = 8.314 J K-1 mol-1, T es la temperatura absoluta en grados Kelvin. La ecuacin 5-4 describe el cambio en energa libre estndar como funcin de la constante de equilibrio (y viceversa). El cambio en energa libre estndar ( G) para la reaccin A + B C + D es el cambio de energa libre que acompaa la conversin de A y B a C y D bajo condiciones estndar. Condiciones estndar: las reacciones bioqumicas de inters ocurren en soluciones acuosas, la concentracin de los reactantes y de los productos bajo condiciones estndar se considera que es 1 M (1 mol/L). No conviene emplear 1 M como la concentracin estndar para el agua, ya que est muy lejos de la concentracin fisiolgica. El uso constante del valor 1.00 como concentracin del agua no produce diferencias en el cambio de energa libre. Sin embargo, el valor para el agua se fija en 1.00 y no a 55.6 (1 000 g/L + 18 g/mol agua = 55.6 mol agua/L, donde 18 es el peso molecular del agua y 1 000 g es el peso de 1 L de agua). El cambio de energa libre estndar de un proceso qumico es el cambio de energa libre de Gibbs durante la conversin de los reactantes a productos cuando todos los componentes (excepto el agua) estn presentes en concentracin 1 M. Las concentraciones de estos componentes permanecen constantes durante la conversin. Las reacciones bioqumicas por lo general se estudian a 25C (298 K), 30C (303 K) o 37C (310 K). Sin embargo, la mayor parte de los datos termodinmicos fueron determinados a 25C y los valores usados habitualmente corresponden a esa temperatura. Adems; estos valores son cercanos a los de 37C. El cambio en energa libre de numerosas reacciones bioqumicas es afectado por el pH. Dado que la mayor parte de las reacciones se llevan a cabo alrededor de la neutralidad (pH 7.0), este valor de pH es el que se usa para el estado bioqumico estndar y esta convencin se denota con una prima ('), como en G', G', o Keq'. Entonces, a [H+] = 1 X l0-7 M se le da una actividad de 1. El trmino para el cambio de energa libre (no cambio en energa libre estndar) a pH = 7.0 es G'. El cambio en energa libre estndar es una funcin logartmica de la constante de equilibrio: G' = -RT In Keq (5-5) La constante de equilibrio (Keq) para la siguiente reaccin a 25C y pH 7.0 es 14.66 Isocitrato-3 citrato-3 (5-6)

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El cambio de energa libre estndar puede ser calculado entonces de la siguiente manera: G' = -8.314 KJ-1mol-1 x 298 K x ln 14.66 G' = -8.314 KJ-1mol-1 x 298 K x 2.685 G' = -6653 J mol-1 (5-7)

La constante de equilibrio es mayor que 1 y el cambio en energa libre estndar ( G' ) es negativo. Bajo condiciones estndar (1 M de reactantes y productos), la reaccin proceder hacia la derecha con la formacin de citrato. En la tabla 5-2 se dan las relaciones entre constantes de equilibrio (K eq) y cambios en energa libre estndar ( G ) a 25C o 298 K. Obsrvese que cuando la constante de equilibrio es mayor que uno, el cambio de energa libre estndar es negativo. Bajo condiciones estndar, los reactantes son convertidos a productos. Cuando la constante de equilibrio es menor que uno, el cambio de energa libre estndar es positivo. El cambio de energa libre ( G) y no el cambio de energa libre estndar ( G') es el que determina si puede ocurrir un proceso qumico o fsico. El cambio de energa libre est influenciado por la concentracin de los reactantes y productos. Sin embargo, es comn usar cambios de energa libre estndar ( G') para anlisis cualitativos de las reacciones bioqumicas. Debe recordarse que el uso de los cambios de energa libre es solo una aproximacin cuando se usan bajo condiciones fisiolgicas. CAMBIO EN ENERGA LIBRE COMO FUNCIN DE ESTADO Los cambios de energa libre estndar ( G') dependen solo de los estados inicial y final de un sistema. Si se conoce el cambio de energa libre asociado con cada porcin de un proceso qumico o va, puede calcularse el cambio de energa libre para el proceso en su totalidad, ya que los cambios de energa libre son funciones de estado. Pueden sumarse o restarse reacciones qumicas y sus correspondientes cambios en energa libre. La energa libre medida de la hidrlisis de numerosos compuestos bioqumicos puede usarse en el anlisis de muchas reacciones de fosfotransferasas de la siguiente manera: En la hidrlisis de la glucosa-6-fosfato, Glucosa-6-fosfato + H20 glucosa + Pi;

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AG' = -13.8 kJ mol-1

(5-8)

Bajo condiciones estndar (1M glucosa6 fosfato, 1 M glucosa, 1 M fosfato) en solucin acuosa, la reaccin procede hacia la derecha y se libera energa libre (G' productos - G'reactantes = -13.8 kJ/mol). La energa libre de los reactantes es mayor que la de los productos. Puede cambiarse la forma de la reaccin y de la energa libre estndar de la siguiente manera: Glucosa + Pi Glucosa-6-fosfato + H20 G' = +13.8 kJ/mol

(5-9)

Para que la reaccin que se muestra en la ecuacin (5-9) se lleve a cabo de la izquierda a la derecha se requiere disponer de energa ( G' es opuesta en signo a la ecuacin mostrada en la ecuacin 5-8 en sentido contrario). La energa libre de hidrlisis del trifosfato de adenosina (ATP) es -30.4 kJ/mol. Las reacciones y sus correspondientes cambios en energa libre estndar ( G') pueden sumarse. glucosa Glucosa G' (kJ/mol) 6-fosfato + +13.8 + Pi H2O ATP + H2O Glucosa + ATP ADP + Pi Glucosa 6-fosfato + ADP -30.4

-16.6 (5-10)

A partir de los datos termodinmicos de las dos reacciones puede calcularse el cambio en energa libre estndar a pH 7 ( G') de una tercera reaccin. Estos clculos indican que la reaccin de la ecuacin (5-10) proceder de los reactantes a los productos bajo condiciones estndar. A partir de la energa libre estndar de hidrlisis de la glucosa 6-fosfato y la energa libre estndar para la conversin de glucosa 1-fosfato a glucosa 6-fosfato puede calcularse la energa libre estndar de hidrlisis de la glucosa 1-fosfato. Glucosa 1-fosfato Pi Glucosa 6-fosfato + H2O glucosa 6-fosfato glucosa + Pi G' (kJ/mol) -6.32 -13.8

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Glucosa 1-fosfato + H2O

glucosa + Pi

-20.1 (5-11)

Pueden utilizarse varios procedimientos para determinar el cambio de energa libre estndar de una reaccin. Dos de los ms importantes incluyen los clculos dependientes de: 1) la constante de equilibrio y 2) las diferencias en potenciales estndar de reduccin. Ahora se expondrn los potenciales estndar de reduccin. REACCIONES DE OXIDORREDUCCION Oxidacin se defini como la prdida de electrones, y reduccin como la ganancia de stos. Las reacciones de oxidorreduccin representan la fuente ms importante de energa bioqumica. La energa proveniente de la oxidacin de carbohidratos y lpidos mantiene las reacciones bioqumicas requeridas para la vida. Hay cuatro variedades de reacciones biolgicas de oxidorreduccin. Cuatro tipos de reacciones de oxidorreduccin Primero, los electrones pueden ser transferidos directamente del donador al aceptor. Por ejemplo, la ecuacin 5-12 muestra una reaccin de oxidorreduccin donde se transfiere un electrn de hierro ferroso de una protena llamada citocromo b al hierro frrico del citocromo c: Citocromo b (Fe+2) + citocromo c (Fe+3) citocromo b (Fe+3) + citocromo c (Fe+2) (5-12)

EI citocromo b es el agente reductor y el citocromo c es el agente oxidante. Los citocromos son protenas que contienen hierro formando un complejo con el grupo hem, y los citocromos participan en las reacciones de transferencia de electrones. Segundo, los electrones pueden ser transferidos con protenas en un proceso formalmente equivalente a la transferencia de tomos de hidrgeno. A + 2 H+ + 2 e- AH2 (5-13)

A representa al agente oxidante o aceptor de electrones. La reduccin del FAD (dinucletido de adenina flavina) es un ejemplo de una sustancia que sufre reduccin por el equivalente de dos protones y electrones o dos tomos de hidrgeno. Tercero, Los electrones pueden ser transferidos como in hidruro (H:-), como se muestra en la ecuacin 5-14. El NAD+ es el oxidante. NAD+ + H: - NADH (5-14)

Cuarto, puede haber una reaccin directa entre un reductor (AH) y el oxgeno molecular. Un camino para que esto ocurra se ilustra por la ecuacin 5-15. AH + O2 + BH2 AOH + H20 + B (5-15)

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Las reacciones de oxidorreduccin ocurren simultneamente y no puede ocurrir una sin la otra. Sin embargo, conviene manejar las reacciones de oxidorreduccin en trminos de medias reacciones. En vez de dar informacin sobre innumerables reacciones entre oxidantes y reductores, se puede comparar cada mitad de reaccin con una reaccin de referencia y entonces considerar cualquier par de medias reacciones de inters. Medias reacciones Por conveniencia, las medias reacciones se escriben como reducciones; de ah el trmino potencial de reduccin. Esta distincin se pierde con el trmino ambiguo de potencial redox. Los electrones son aceptados por el reactivo oxidante. Recurdese que los reactantes se escriben en el lado izquierdo y los productos en el lado derecho de una ecuacin qumica. Aqu se utilizar el trmino potencial de reduccin para enfatizar el proceso de reduccin; un electrn se escribe en el lado izquierdo de la ecuacin como un reactante. El reactante en los dos ejemplos siguientes es reducido. A+ + e- A B+ + e - B (5-16a) (5-16b)

El estndar de referencia para las reacciones de oxidorreduccin es el electrodo de hidrgeno, y su mitad de la reaccin se escribe como sigue: 2 H+ + 2 e- H2 0.00 V (5-17)

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Por conveniencia, la concentracin de H+ es 1 M y el gas hidrgeno se encuentra presente a una atmsfera de presin. A la reaccin se le asigna un potencial de reduccin estndar de cero voltios (V). Las condiciones estndar para los otros componentes son concentracin 1 M de soluto a presin atmosfrica en solucin acuosa. Si un compuesto bajo condiciones estndar puede donar sus electrones al electrodo de hidrgeno de referencia en un circuito externo, el potencial de reduccin estndar de este compuesto es negativo (A). Si un compuesto bajo condiciones estndar acepta electrones del electrodo de hidrgeno de referencia del circuito externo, el potencial de reduccin estndar de este compuesto es positivo (B). Una manera conveniente de recordar este acuerdo es que los electrones llevan una carga negativa. Los compuestos con tendencia a donar electrones tienen un potencial de reduccin negativo. La mayor parte de las reacciones bioqumicas de inters ocurren a pH 7.0; por lo tanto, se ha adoptado como un estado de referencia. Cuando los valores de los potenciales de reduccin estndar se dan a pH 7.0 se denotan como E' (E designa un potencial de reduccin estndar y la prima indica pH 7.0). Los electrones fluyen a la mitad de la celda mas positiva. Por convencin, la diferencia en potencial elctrico (E) del aceptor menos el donador durante la transferencia de electrones es positiva. Una diferencia positiva en el potencial de reduccin corresponde a un cambio negativo de energa libre estndar, y ambos se asocian a reacciones termodinmicamente posibles. El procedimiento usado para medir el potencial de reduccin estndar se ilustra en la figura 5-1. La media celda de la muestra contiene las especies oxidadas y reducidas a concentracin 1 M; la media celda de referencia contiene H+ 1 M (pH 0.0) y est en equilibrio con el H2 a presin atmosfrica de 1. El potencial de reduccin estndar del electrodo de hidrgeno estndar se define como 0.00 V. Los electrones fluyen de la mitad de la celda negativa a la mitad de la celda positiva. Para la mitad de la celda de piruvato/lactato, los electrones fluyen de ella al electrodo de hidrgeno. Por lo tanto, el potencial de reduccin estndar del piruvato/lactato es negativo. El potencimetro registra un valor de -0.185 V. Para la mitad de la celda Fe+3/Fe+2, los electrones fluyen del electrodo estndar de hidrgeno al Fe+3/Fe+2. Por lo tanto, el potencial de reduccin estndar de Fe+3/Fe+2 es positivo. El potencimetro registra un valor de +0.772 V. POTENCIALES DE REDUCCIN ESTNDAR Direccin de la transferencia de electrones

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Cada oxidante en la media reaccin tiene afinidad caracterstica por los electrones. Forma oxidada + n e- forma reducida-n (5-18)

Cuanto mayor sea la tendencia de donar electrones y actuar como agente reductor, el potencial de reduccin ser ms negativo. Los potenciales de reduccin estndar para un gran nmero de medias reacciones se proporcionan en la tabla 5-3. Los electrones tienden a ir del compuesto con el potencial de reduccin ms negativo al potencial de reduccin menos negativo. El compuesto con el potencial de reduccin mas positivo acepta electrones y es reducido. Obsrvese que el potencial de reduccin estndar para el oxgeno es fuertemente positivo. El oxgeno tiene muy poca tendencia a donar electrones y actuar como agente reductor. Las siguientes propiedades generales de las reacciones de oxidorreduccin reaparecen a travs de la bioenergtica y la bioqumica. Los electrones pasan desde las molculas de combustible listadas en la parte superior de la tabla 5.3 al NAD +, a los citocromos y a los oxidantes fuertes como el oxgeno. Ntese que los combustibles metablicos comunes,

como el piruvato y el -cetoglutarato son reductores fuertes (tabla 5-3). Tambin debe observarse que el potencial de reduccin estndar del NAD+ est entre las molculas combustibles y los citocromos. Estas generalizaciones se presentan en forma diagramtica en la figura 5-2. REACCIN DE LA ENZIMA LACTATO DESHIDROGENASA

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5.2 Direccin del flujo de electrones de los metabolitos bioquimicos.

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La reaccin de la enzima lactato deshidrogenasa es un prototipo de muchas reacciones de oxidorreduccin en bioqumica. El piruvato, una cetona, se reduce por el NADH para producir lactato, un alcohol y NAD+. La reaccin neta se da en la siguiente ecuacin qumica. COOl HOCH l l CH3 L-Lactato CH3 + Piruvato NAD+ + NADH + H+ COOl C=O (5-19)

La reaccin puede dividirse en sus medias reacciones componentes: COOl C=O l CH3 Piruvato + 2H+ + 2eNAD+ + 2H+ + 2eCOOl HOCH E' (V) l -0.19 CH3 L-Lactato (5-20)

NADH + H+ - 0.32

(5-21 )

Bajo condiciones estndar, los electrones sern donados por el compuesto con el potencial de reduccin estndar mas negativo (E') al compuesto con el potencial de reduccin estndar mas positivo (E'). La reaccin del final se sustrae de la reaccin superior. Restando la ecuacin del final se obtiene el mismo resultado que: 1) revirtiendo el orden de los reactantes y productos de la ecuacin del final; 2) cambiando el signo del potencial a +0.32 V, y 3) aadiendo las ecuaciones qumicas y los potenciales. El resultado se muestra en la ecuacin 5-22. Piruvato-1 + NADH + H+ lactato-1 + NAD+ E ' = +0.13V (5-22)

Por convencin, un valor positivo para la diferencia en potenciales de reduccin corresponde a un flujo real de electrones. Bajo condiciones bioqumicas estndar (1 M de reactantes y productos y pH 7.0), la reaccin proceder de reactantes a productos, como se escribi en la ecuacin 5-22. La reduccin de una cetona por el NADH para producir un alcohol es una reaccin favorable. La reaccin de laenzima lactato deshidrogenasa sirve como un prototipo para las reacciones de oxidorreduccin de aldehdos y cetonas con nucletidos de piridina; nos referiremos a esta reaccin prototpica a menudo durante el estudio de la bioqumica.

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CAMBIO DE ENERGA LIBRE ESTNDAR Cualquier reaccin real ocurre con un cambio de energa libre negativo. Por convencin, un valor positivo en la diferencia de los potenciales de reduccin (E) se asocia a un cambio factible. Entonces se obtiene la siguiente relacin. G = -nF E' (5-23)

Donde n es el nmero de moles de electrones transferidos, F es el coeficiente de energa-voltaje, o constante de Faraday (96.485 kJ [equivalente V]-1). E' es la diferencia de los potenciales de reduccin estndar. Esta ecuacin tiene una amplia aplicacin en bioenergtica. Convierte voltaje a energa, y viceversa. Esta expresin describe la relacin entre el cambio de energa libre estndar y la diferencia en los potenciales de reduccin estndar. Adems de la constante de equilibrio, se obtienen datos de energa libre estndar a partir de la diferencia de los potenciales de reduccin estndar. Para la reaccin de la enzima lactato deshidrogenasa bajo condiciones estndar, G' = -2 x 96.485 kJ V-1 mol-1 x 0.13 V G' = -25.1 kJ mol-1 (5-24) (5-25)

La reaccin es exergnica; el equilibrio favorece grandemente la formacin de los productos. Para convertir el voltaje a energa por mol, se multiplica el voltaje por n veces la constante de Faraday. Para convertir energa por mol a voltaje se divide la energa entre n veces la constante de Faraday. RADICALES LIBRES DE OXGENO, SUPERXIDO, PERXIDO E HIDROXILO Propiedades qumicas del oxgeno La importancia del oxgeno, del agua y de los alimentos (energa) para el

bienestar de los seres humanos es bastante reconocida. De estos tres componentes esenciales, la falta de oxgeno es la que lleva ms rpidamente a la muerte. Considrense las propiedades del oxgeno que le permiten sustraer electrones de otras sustancias con facilidad. El oxgeno molecular tiene deficiencia de electrones puede ilustrarse como se muestra en seguida, donde los puntos representan electrones. Cada tomo de oxgeno carece de un octeto completo de electrones. Adems, la molcula de oxgeno contiene dos electrones no compartidos. La reduccin completa del oxgeno para formar agua puede indicarse normalmente como en la ecuacin 5-26. Las x indican electrones derivados del hidrgeno. La reduccin del oxgeno molecular a agua incluye cuatro electrones y cuatro protones.

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O2 + 2 H2 2 H20

(5-26)

El oxgeno es un buen agente oxidante porque esta deficiente en electrones. Adems, es electronegativo y tiene gran tendencia a atraer electrones hacia si mismo (a oxidar a otras sustancias), pero poca tendencia a dar sus electrones. La oxidacin del agua para formar oxgeno molecular es altamente endergnica. INTERMEDIARIOS REACTIVOS DEL OXGENO La reaccin del oxgeno con un solo electrn ocasiona la formacin del radical aninico superxido (fig. 5-3). La formacin del superxido puede ocurrir por una reaccin espontnea (no enzimtica) del oxgeno con el ion ferroso, otros metales o metabolitos de oxidorreduccin reactivos. El superxido es una sustancia reactiva txica que puede causar la modificacin de protenas celulares, cidos nucleicos y lpidos en las membranas. La superxido dismutasa cataliza la conversin de dos aniones superxido (y dos protones) a oxgeno y perxido de hidrgeno (fig. 5-3). Una dismutacin es una reaccin en la cual dos molculas idnticas son convertidas a sustancias diferentes. Aqu, una molcula de superxido es oxidada y la otra es reducida. Los perxidos resultan de la reaccin del oxigeno con dos electrones. La superxido dismutasa juega un papel clave en la proteccin contra la toxicidad del oxgeno. Las superxido dismutasas se encuentran en todos los organismos aerobios y estn ausentes de los anaerobios obligados. Las clulas humanas contienen dos tipos de dismutasa. La enzima del citoplasma consiste en dos subunidades idnticas, las cuales tienen ambas un tomo de cobre y un tomo de zinc. La enzima mitocondrial contiene dos tomos de manganeso por protena monomrica, Las superxido dismutasas de las bacterias tambin poseen dos tomos de manganeso. La reduccin de dos electrones del oxgeno molecular produce perxido de hidrgeno. El perxido de hidrgeno es una sustancia reactiva que puede modificar macromolculas celulares y es txica. El perxido de hidrgeno se convierte a oxgeno y agua por la catalasa o por la glutatin peroxidasa (fig. 5-3). Las soluciones de perxido de hidrgeno se usan como desinfectantes y para el tratamiento de infecciones de heridas. El perxido de hidrgeno tambin es producido por leucocitos y macrfagos que matan a las bacterias invasoras.

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Un tercer derivado de oxgeno txico es el radical libre hidroxilo, el cual es ms reactivo y txico que el superxido y que el perxido. El radical libre hidroxilo se puede formar a travs de una reaccin del perxido de hidrogeno con hierro ferroso por la reaccin de Fenton. Tambin se forma por la reaccin del superxido con el perxido de hidrogeno por la reaccin de Haber- Weiss (fig. 5-4). Adems, el radical libre de hidroxilo puede formarse por radilisis del agua producida por rayos csmicos, rayos X y otras radiaciones electromagnticas. El radical libre de hidroxilo reacciona con macromolculas celulares y las modifica. Puede ser destruido por su reaccin con ascorbato, caroteno o vitamina E. Estas acciones pueden participar en los efectos antioxidantes benficos y protectores de estas vitaminas. El radical libre del hidroxilo tambin puede ser destruido por su reaccin con el glutatin (fig. 5-3). En la figura 5-5 se resumen las reacciones txicas del oxigeno y sus metabolitos. Hipoxia Hipoxia es un trmino que denota oxigenacin insuficiente de las clulas. Esta alteracin puede producirse por una variedad de causas. El asma, el enfisema y el edema pulmonar son comunes de hipoxia. La produccin alterada de energa puede causar dao y muerte celular. La participacin del oxgeno en la produccin de ATP se expondr ms adelante.

El aire atmosfrico contiene 20% de oxigeno. La hipoxia puede tratarse con 100% de oxgeno. Sin embargo, en condiciones poco comunes, respirar 100% de oxgeno puede conducir a procesos oxdativos indeseables. A veces se necesita tratar a lactantes prematuros (< 44 semanas de gestacin) con 100% de oxgeno para su supervivencia. Este tratamiento puede conducir a alteraciones visuales mas tarde en el

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desarrollo en la forma de fibroplasia retrolenticular, trastorno ocular que se cree es debido a angiognesis aberrante en la etapa de desarrollo del ojo. En la teraputica a menudo deben considerarse estas discrepancias. ACCION BACTERICIDA DE LOS LEUCOCITOS Metabolitos txicos de oxigeno Los leucocitos ingieren y degradan microorganismos durante reacciones inflamatorias. Este proceso implica fagocitosis, degradacin lisosmica del microorganismo y generacin de metabolitos txicos de oxigeno. Esta respuesta se acompaa de un gran consumo de oxigeno mientras el oxigeno molecular es convertido a superxido. Esta reaccin esta catalizada por una enzima leucocitaria llamada NADPH oxidasa. Esta enzima se localiza en la membrana plasmtica o en la membrana plasmtica invaginada que se combina con el lisosoma para formar un derivado fagolisosmico. El superxido forma perxido de hidrgeno no enzimtico o en una reaccin catalizada por la superxido dismutasa. El peroxido de hidrogeno puede actuar directamente en las bacterias, o convertirse a hipoclorito o al radical libre hidroxilo (fig. 5-6). Estos una agentes son bactericidas. Enfermedad crnica granulomatosa

El granuloma es un tipo de inflamacin. La enfermedad granulomatosa crnica es un trastorno raro debido a deficiencia de la oxidasa de NADPH (fig. 5-6). La actividad enzimtica depende de dos protenas de membrana y dos protenas del citoplasma. Casi la mitad de los casos estn ligados al cromosoma X (los que se deber deficiencia de las protenas de membrana), y la otra mitad son recesivos autosmicos (los debidos a deficiencia procede las protenas citoplsmicas). Los individuos afectados desarrollan infecciones bacterianas recurrentes durante los primeros dos aos de vida. El tratamiento es sintomtico. Los neutrfilos de los individuos con enfermedad granulomatosa crnica muestran movilidad normal y fagocitosis. Los neutrfilos son incapaces de generar anin superxido y no pueden destruir microorganismos positivos a catalasa. Paradjicamente, las bacterias positivas catalasa son destruidas por el perxido producido por los neutrfilos y las bacterias negativas a catalasa son productoras de perxido, pero son menos sensibles al mismo. Las bacterias positivas a catalasa cultivadas de lugares infectados de individuos afectados incluyen bacterias

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grampositivas y gramnegativas con Staphylococcus aureus, Shigella, Salmonella y Escherichia coli. Las bacterias negativas a catalasa (no encontradas en sitios infectados) incluyen Streptococcus y Haemophillus influenzae

EI deterioro de la disponibilidad de oxgeno por oclusin patolgica de vasos sanguneos produce enfermedades graves. A menudo los seres humanos sufren dao cerebral o muerte debido a ataques, e incapacidad o muerte debido a oclusin de las arterias coronarias. Las clulas cerebrales sobreviven entre 3 y 5 minutos sin oxgeno, y mueren cuando las condiciones de anoxia duran ms tiempo. Las clulas del corazn, del hgado y del rin pueden sobrevivir de 30 minutos a dos horas sin oxgeno. En contraste, los fibroblastos del msculo esqueltico y las clulas de la piel pueden sobrevivir varias horas sin oxgeno. Se ha informado de una forma familiar de esclerosis amiotrfica lateral (enfermedad de Lou Gehrig), trastorno enceflico degenerativo, que al parecer se debe a una anormalidad de la superxido dismutasa del citoplasma o de cobre y zinc. El superxido se forma en clulas y tejidos despus de isquemia y reperfusin. La inyeccin intravenosa de superxido dismutasa se est probando clnicamente despus de oclusin coronaria con el fin de disminuir la posible toxicidad del superxido despus de esos daos patolgicos.

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