Crescimento e renovao Celular

O nosso planeta apresenta uma grande diversidade de seres vivos distribudos

pelos ambientes mais diversos.

A Biodiversidade uma riqueza inesgotvel!

Apesar das diferenas existentes entre os seres vivos, h uma unidade estrutural
e funcional comum a todos a clula a unidade bsica da vida. Esta semelhana tambm se revela a nvel molecular os organismos apresentam os mesmos constituintes bioqumicos.

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Como possvel explicar a grande diversidade de seres vivos que

existem na natureza?
Por muito diferentes que os organismos sejam entre si, a partir de uma nica
clula que se origina um indivduo.

Esta clula contm toda a informao necessria para o desenvolvimento do indivduo.

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Podemos questionarmo-nos:

Onde se encontra armazenada toda a informao hereditria e como

transmitida descendncia?

Que processos so responsveis pela unidade e variabilidade celular?

Como explicar o crescimento dos seres vivos e a regenerao dos tecidos?

Como explicar o facto de as clulas de um indivduo no serem todas iguais?

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1.1 DNA e Sntese Proteica

O suporte fsico da informao necessria para o desenvolvimento de um ser vivo permaneceu desconhecido at meados do sc.XX.
Em finais do sc. XIX, o bioqumico alemo Miescher, a partir de clulas com grandes

ncleos , isolou uma substncia de elevado peso molecular nuclena.

Substncia actualmente designada por cido desoxirribonucleico, permaneceu ignorada durante quase um sculo.

Considerava-se,

de

forma

generalizada,

que

as

protenas

nucleares

eram

as

macromolculas portadoras da informao gentica.

Grande complexidade e diversidade das protenas, comparadas com o DNA;
Existncias de doenas hereditrias associadas falta de determinadas enzimas.

S em meados sc. XX que foram feitas experincias que atriburam ao DNA o suporte fsico da informao dos seres vivos. Em 1928, Frederick Griffith (bacteriologista) deu o 1 passo para a identificao da molcula suporte da informao gentica.

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Experincia de Griffith (1928)
Bactrias tipo R desprovidas de cpsula (rugosas) Bactrias tipo S com cpsula (lisas)

Qual das estirpes patognica para os

ratos? Qual a possvel explicao para o

aparecimento de bactrias vivas do tipo S,

no sangue dos ratos do quarto lote?

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Experincia de Griffith (1928)
Bactrias tipo R desprovidas de cpsula (rugosas) Bactrias tipo S com cpsula (lisas)

Concluses:
As bactrias do tipo S so virulentas para os ratos, causando a pneumonia;
As bactrias do tipo R no so patognicas;

As bactrias mortas do tipo S conseguem

transmitir a sua informao s do tipo R,

passando estas a adquirir a capacidade virulenta

(adquirem cpsula que as protegem do sistema

imunitrio dos ratinhos);

Esta informao dever ser uma substncia qumica que consegue transformar a bactria principio transformante.

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Experincia de Avery (1944)
Em 1944, Avery cultivou bactrias lisas, matou-as pelo calor e triturou-as. Separaram-se os seus constituintes qumicos (glcidos, protenas, lpidos e DNA). Adicionando cada um destes constituintes, separadamente, a bactrias rugosas no patognicas e, seguidamente, injectando-as em ratos, observou que apenas o DNA (cidos nucleicos) transformava as bactrias rugosas em lisas patognicas (os ratos morriam). Estas observaes permitiram concluir que esta biomolcula DNA era responsvel pela transmisso da informao gentica.

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Experincia de Hershey e Chase, 1952
Em 1952, Alfred Hershey e Martha Chase utilizaram vrus que infectam bactrias, designados

por isso bacterifagos. Estes contriburam para confirmar, definitivamente, que a molcula
de DNA o suporte fsico da informao gentica.
Cpsula proteica

Bacterifago T2

DNA

Ciclo reprodutivo do Fago

Fago liga-se bactria.

Fago injecta apenas na bactria o DNA.

O DNA do Fago utiliza a clula hospedeira para produzir protenas que iram constituir novas cpsulas e DNA. A lise das bactrias liberta novos Fagos.

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Experincia de Hershey e Chase, 1952
Situao A - fagos foram cultivados em meio contendo enxofre radioactivo 35S (logo as protenas ficaram radioactivas) e foram infectar bactrias no radioactivas. Situao B - fagos foram cultivados em meio com fsforo radioactivo 32P (logo o DNA ficou radioactivo) e foram infectar bactrias no radioactivas.
Fago
Bactria DNA Cpsula radioactiva DNA do Fago

Cpsula radioactiva

Situao A Cpsula Radioactiva

Centrifugao Sedimentao de acordo com a densidade

DNA no radioactivo

Cpsula no radioactiva

Situao B DNA radioactivo

DNA radioactivo Centrifugao Sedimentao de acordo com a densidade

DNA radioactivo

Concluso: Desta experincia concluiu-se que o DNA (cidos nucleicos) responsvel pela informao que conduz formao de novos vrus.

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Tipos de cidos nucleicos veculos da informao gentica Os cidos nucleicos so polmeros portadores da informao gentica. DNA cido desoxirribonucleico suporte da informao
biolgica, onde esto inscritas as caractersticas de cada

organismo contm a linguagem da vida.

RNA

cido

ribonucleico

indispensvel

ao

processamento da informao biolgica.

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Localizao dos cidos nucleicos na clula
ncleo

nucleide

Clula procaritica

Clula eucaritica

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Composio qumica dos cidos nucleicos: DNA e RNA
Os cidos nucleicos* so polmeros constitudos por unidades bsicas designadas
nucletidos.

DNA
Nuclesido Base Azotada (A, T, G ou C)

Grupo fosfato

Nucletido
Timina (T)

Aucar - Pentose (desoxirribose)

Nucletido do DNA Cadeia polinucleotdica do DNA

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Composio qumica dos cidos nucleicos: DNA e RNA

RNA
Base azotada (A, G, C, ou U)

Grupo fosfato

Uracilo (U)

Aucar - Pentose (ribose)

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Composio qumica dos cidos nucleicos: DNA e RNA
Do ponto de vista qumico a diferena entre estes dois tipos de cidos nucleicos reside:
na pentose

DNA Desoxirribose
C5H10O4

RNA Ribose
C5H10O5

tipos de bases azotadas (DNA - T, A, C ou G) (RNA U, A, C ou G)

Uracilo (U)

Timina (T)

Citosina (C)

Adenina (A)

Guanina (G)

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Composio qumica dos cidos nucleicos: DNA e RNA
As bases azotadas presentes nos nucletidos podem dividir-se em dois tipos

Uracilo (U)

Timina (T)

Citosina (C)

Adenina (A)

Guanina (G)

Bases pirimdicas Anel simples

Bases pricas Anel duplo

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Composio qumica dos cidos nucleicos: DNA e RNA
Os nucletidos estabelecem ligaes entre si, formando cadeia polinucleotdicas.

Reaco de sntese

Ligao covalente do tipo fosfodister

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Composio qumica dos cidos nucleicos: DNA e RNA
Os nucletidos estabelecem ligaes entre si, formando cadeia polinucleotdicas.
Cada novo nucletido liga-se pelo grupo fosfato ao

carbono 3 da pentose do ltimo nucletido da cadeia,

repetindo-se o processo na direco 5 3.

Deste modo, ao ltimo nucletido que tem o carbono 3

com o grupo OH livre, pode ligar-se um novo nucletido

pelo grupo fosfato.

Cada cadeia de nucletidos possui um grupo fosfato livre numa das extremidades, denominada extremidade 5, e um grupo hidroxilo (OH-) livre na outra extremidade, a 3.
A adio de nucletidos faz-se no sentido 5 3

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Estrutura do DNA
A estrutura da molcula de DNA s foi decifrada aps terem sido analisados os resultados
de vrias experncias:
Experincia de Erwin Chargaff e colaboradores (1944-1952)

Anlises

relativas

composio

quantitativa

percentual dos diferentes nucletidos revela que, em cada espcie, os valores de adenina so muito prximos dos da timina e os valores da guanina muito

prximos da citosina.
Quantidade de Quantidade de

Regra de Chargaff

Bases Pricas (A+G)

Bases Pirimdicas (T+C)

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Estrutura do DNA
Rosalind Franklin e Maurice Wilkins, utilizando a difraco de raios X, bombardearam
amostras de DNA cristalizado, tendo obtido radiogramas da difraco que reflectem a

configurao das partculas do cristal.

A configurao em cruz indica que o DNA apresenta a forma de uma hlice.

Observaes realizadas com o microscpio electrnico revelaram que a espessura de uma molcula de DNA (2nm) dupla da de uma cadeia polinucleotdica (1nm).

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Ficha de Trabalho
Modelo de dupla hlice de DNA proposto por Watson e Crick
Ligao de hidrognio

1.
2.

Quais os tipos de ligaes entre os nucletidos de uma cadeia?

Como se associam os nucletidos entre duas cadeias polinucleotdicas?

3.
4. 5.

Com base nos dados da figura, explique os resultados de Chargaff.

Explique, com base na figura, o significado da afirmao: O DNA uma molcula formada por

duas cadeias complementares antiparalelas.

Estabelea uma relao entre a posio ocupada pelas bases azotadas na molcula de DNA e o

seu carcter hidrofbico.

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Estrutura do DNA
Em 1953, o geneticista James Watson e o fsico Francis Crick sintetizaram num modelo

nico e coerente o que se sabia at ao momento sobre a estrutura do DNA o modelo

de dupla hlice.
Ligao de hidrognio

longa

molcula

formada

por

duas

cadeias

polinucleotdicas enroladas em hlice, assemelha-se a

uma escada de corda enrolada helicoidalmente.

As bandas laterais da hlice so formadas por grupos fosfato, alternando com molculas de aucares e os degraus centrais so pares de bases ligadas entre si por pontes de hidrognio. A adenina liga-se somente timina por duas ligaes hidrognio; a guanina liga-se somente citosina por trs ligaes hidrognio (esta constncia justifica a regra de CHargaff) verifica-se uma complementariedade entre as cadeias da molcula de DNA.

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Estrutura do DNA Modelo de Dupla Hlice

Cada cadeia desenvolve-se em sentidos opostos,

iniciando-se na extremidade 5 e terminando na extremidade 3. Assim, as cadeias complementares da molcula de DNA so cadeias antiparalelas, ou seja, extremidade

livre

de

uma

cadeia

corresponde

extremidade 3livre da outra.

A estrutura de DNA a mesma em todos as

espcies; O nmero de nucletidos, a sua natureza e

sequncia diferem entre as molculas de DNA;

Pode, pois, falar-se em universalidade e

variabilidade da molcula de DNA.

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Estrutura do RNA
A molcula de RNA , normalmente, formada por uma cadeia simples de

nucletidos, apresentado dimenses muito inferiores molculas de

DNA.

Contudo, em determinadas regies, a molcula de RNA pode dobrar-se

devido ao estabelecimento de pontes de hidrognio entre as bases complementares (adenina emparelha com o uracilo e a guanina com a citosina).

As molculas de RNA so sintetizadas a partir do DNA (devido a complementariedade de

bases) e podem apresentar, sob o ponto de vista de estrutura e funo, trs formas distinta:

o RNA mensageiro (mRNA), o RNA de transferncia (tRNA) e o RNA ribossmico (rRNA).

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Principais diferenas entre o RNA e o DNA
DNA Duas cadeias polinucleotdicas.

RNA
Uma cadeia polinucleotdica. A pentose a ribose.

A pentose a desoxirribose.
As bases azotadas presentes so A, T, G e C. A quantidade constante em todas as clulas

As bases azotadas presentes so A, G, U e C.

A quantidade varia de clula para clula e dentro da mesma clula de acordo com a actividade metablica.

somticas da mesma espcie.

Quimicamente muito estvel.

Permanente. Somente uma forma bsica.

Quimicamente pouco estvel. Pode ser temporria, existindo por curtos perodos.

Apresenta trs formas bsicas: mensageiro, e em menor

transferncia e ribossmico. Encontra-se no ncleo e citoplasma.

Encontra-se

no

ncleo,

quantidade nos cloroplastos e mitocndrias.

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Replicao do DNA
A informao gentica encontra-se codificada na sequncia de nucletidos que

constituem o DNA. Para que toda a informao seja transferida ao longo de geraes a molcula de DNA
necessita de se auto-reproduzir.

Como que a molcula de DNA se replica?

Existem trs modelos tericos possveis para a replicao do DNA.
DNA original
Aps um ciclo de replicao

Hiptese semiconservativa- cada uma das cadeia serviria de molde para uma nova cadeia e, consequentemente, cada uma das novas molculas de DNA seria formada por uma cadeia antiga e uma cadeia nova.

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Replicao do DNA
Como que a molcula de DNA se replica?
Aps um ciclo de replicao

DNA original

Hiptese conservativa- admitia que a molcula progenitora de DNA mantinha-se integra, servindo apenas de molde para a formao da molcula-filha, a qual seria formada por duas novas cadeias de nucletidos.
Aps um ciclo de replicao

DNA original

Hiptese dispersiva- admitia que cada molcula-filha seria formada por pores da molcula inicial e por regies sintetizadas de novo, a partir de nucletidos presentes na clula.

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Replicao do DNA
Investigaes realizadas por Meselson e Stahl permitiram esclarecer o mecanismo de
replicao do DNA.
Cultivaram bactrias E. coli num meio de cultura que continha o istopo pesado de As
15N.

bactrias

produziram
15N,

bases

azotadas contendo

que ficaram

integradas no seu DNA. Depois de vrias geraes neste meio,

s bactrias foram transferidas para um

meio com istopo normal
14N.

Deste meio, foram retiradas algumas bactrias no tempo zero, aps vinte
Gerao parental Primeira Gerao Segunda Gerao

minutos e ao fim de quarenta minutos. Em cada uma das situaes, o DNA foi extrado e analisado.

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Replicao do DNA
Os resultados das experincias de Meselson e Stahl podem ser interpretados tendo como base o modelo semiconservativo de replicao do DNA.
As bactrias cultivadas em
15N

incorporam

esse azoto, formando um DNA mais denso

que se deposita prximo do fundo do tubo

sujeito a centrifugao. Num meio com

cada molcula
15N 14N,

na primeira gerao,
DNA apresenta uma

de

densidade intermdia, j que possui uma

cadeia com (da gerao parental) e outra

com
Gerao parental Primeira Gerao Segunda Gerao

14N

(formada por nucletidos com azoto

presente no meio). Na segunda gerao, metade das molculas so formadas por duas cadeias com uma cadeia com
15N 14N

e a

outra metade das molculas formada por

e outra com
14N.

Pode,

Cadeia me

Nova cadeia

assim, verificar-se que os resultados apoiam o

modelo semiconservativo.

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Replicao do DNA

Primeira replicao

Segunda replicao

O modelo conservativo no consistente com os resultados, replicao, uma vez que, ter aps sido molcula a primeira deveriam observadas formada

Hiptese conservativa

molculas de DNA com dois valores de densidade:

um correspondente

exclusivamente
Hiptese semiconservativa

com

cadeias

pesadas

(DNA

parental) e outro correspondente molcula formada exclusivamente por cadeia leves. O modelo dispersivo consistente com os dados obtidos na 1 gerao, pois o modelo prev que se observem molculas de DNA com densidade intermdia.

Hiptese dispersiva

No entanto, segundo o modelo, na 2 gerao

todas as molculas deveriam continuar a ter a

mesma densidade, embora menos densas que as

da 1 gerao. Em vez disso, surgem 50%de cadeias leves e 50% de cadeias com densidade intermdia.