Area Carrera Asignatura Laboratorio

: QUIMICA : ANALISTA QUIMICO : MICROBIOLOGIA APLICADA : PRE-LABORATORIO

Metodologa para el trabajo Microbiolgico y preparacin de placas para cultivo Objetivos: 1) Reconocer los implementos caractersticas de un laboratorio microbiolgico, normas y comportamiento 2) Explicar las tcnicas de manejo de material microbiolgico estril 3) Preparar y esterilizar material para uso en laboratorio microbiolgico Introduccin: El bacterilogo, tanto como su personal de apoyo son los responsables de actuar correctamente dentro del laboratorio, a fin de evitar cualquier riesgo microbiolgico personal y/o ambiental. En el laboratorio microbiolgico, especialmente cuando se procede a la toma de muestras, siembras y otras tcnicas similares, es imprescindible: Evitar entrada de personas ajenas al lugar Evitar salidas innecesarias, procurando para ello preparar previamente el material a utilizar Evitar hablar, toser, estornudar durante los procedimientos ms delicados Utilizar siempre delantal cerrado Usas antiparras No fumar, ni comer en el laboratorio Lavar prolijamente manos, muecas y uas antes de comenzar el trabajo Trabajar con pelo tomado, sin joyas ni pauelos No tomar contacto con puertas, telfono, libros u otros, con las manos contaminadas Trabajar con puertas y ventanas cerradas, y evitar movimientos bruscos que provoquen corrientes de aire Una vez terminado todo el trabajo, se debe esterilizar todo el material directamente contaminado; limpiar y desinfectar reas de trabajo El delantal debe colocarse en una bolsa plstica antes de abandonar el laboratorio y llevar para el lavado. Lavarse prolijamente las manos antes de salir al exterior Primera Parte Procedimiento Demostrativo Se reconocern las dependencias, instrumentos y utensilios disponibles en el laboratorio microbiolgico: autoclave, estufa de cultivo, material de vidrio de uso microbiolgico, asas para la siembra de muestras, etc.

1) Se explicar el manejo del material de uso microbiolgico: placas de Petri, trabajo junto al mechero, apertura y cierre de placas, almacenamiento de placas, envoltura previa a la esterilizacin, manejo y esterilizacin de asas de cultivo, pipetas estriles, tubos de ensayo con algodn card, uso de guantes de ltex contaminados, preparacin de un medio de cultivo, placas de cultivo comerciales. Segunda Parte Trabajo Prctico 1) El alumno deber envolver tubos y placas de vidrio limpias y secas, en papel kraft y sellarlas con cinta para autoclave. 2) El alumno preparar medios de cultivo para su grupo de trabajo, segn instrucciones entregadas por el profesor 3) El ayudante del laboratorio proceder a esterilizar en autoclave: placas de Petri, tubos y el medio de cultivo recin preparado por alumnos 4) Durante el procedimiento de esterilizacin (que puede tomar entre 40 50 minutos) el alumno deber PRACTICAR las normas demostradas de: a) b) c) d) e) Manejo de guantes contaminados Apertura, cierre y almacenamiento de placas con microorganismos Manejo del mechero Manejo de asas de siembra Manejo de tubos con algodn card

5) Una vez retirados del autoclave, las placas y el medio de cultivo se practicarn: vaciado del medio de cultivo en tubos y placas 6) El alumno deber abrir sus placas junto al mechero encendido, y vaciar aprox., 20 mL de medio de cultivo por placa y 5 mL por tubo. Una vez vaciado, revisar placas que tengan burbujas y si las tiene, deber sacarlas haciendo uso de una pipeta (segn demostracin). Colocar tubos en gradilla segn posicin inclinada, tapados con algodn card. 7) Esperar que placas y tubos gelifiquen (10 minutos) 8) Guardar a 4C hasta prxima semana