OBJETIVOS Conocer las partes principales y el manejo de un espectrofotmetro UV-Visible y verificar las condiciones del equipo.

CONSIDERACIONES TEORICAS La espectroscopia ultravioleta-visible o espectrofotometra ultravioleta-visible (UV/VIS) es una espectroscopia de fotones y una espectrofotometra. La radiacin absorbida por las molculas desde esta regin del espectro provoca transiciones electrnicas que pueden ser cuantificadas. La espectroscopia UV-visible se utiliza para identificar algunos grupos funcionales de molculas, y adems, para determinar el contenido y fuerza de una sustancia. Se utiliza de manera general en la determinacin cuantitativa de los componentes de soluciones de iones de metales de transicin y compuestos orgnicos altamente conjugados. Se utiliza extensivamente en laboratorios de qumica y bioqumica para determinar pequeas cantidades de cierta sustancia, como las trazas de metales en aleaciones o la concentracin de cierto medicamento que puede llegar a ciertas partes del cuerpo. El principio de la espectroscopia ultravioleta-visible involucra la absorcin de radiacin ultravioleta visible por una molcula, causando la promocin de un electrn de un estado basal a un estado excitado, liberndose el exceso de energa en forma de calor. La luz visible o UV es absorbida por los electrones de valencia, stos son promovidos a estados excitados (de energa mayor). Al absorber radiacin electromagntica de una frecuencia correcta, ocurre una transicin desde uno de estos orbitales a un orbital vaco. Las diferencias entre energas varan entre los diversos orbitales. Algunos enlaces, como los dobles, provocan coloracin en las molculas ya que absorben energa en el visible as como en el UV, como es el caso del -caroteno. Cuando un haz de radiacin UV-Vis atraviesa una disolucin conteniendo un analito absorbente, la intensidad incidente del haz (Io) es atenuada hasta I. Esta fraccin de radiacin que no ha logrado traspasar la muestra es denominada transmitancia (T) (T = I/Io). Por aspectos prcticos, se utilizar la absorbancia (A) en lugar de la transmitancia (A = -logT), por estar relacionada linealmente con la concentracin de la especie absorbente segn la Ley de Beer-Lambert: A = lc (: coeficiente de absortividad molar, l: camino ptico, c: concentracin de la especie absorbente). Longitud de onda: se define como la distancia entre los picos adyacentes y puede ser medida en metros, centmetros, o nanometros (10 * meters). Frecuencia: es el nmero de ondas por ciclos usualmente sus unidades estn dadas en Hertz que son ciclos por segundos (Hz).

Se rige por una ley muy importante: la ecuacin de Beer-Lambert.

LEY DE LAMBERT-BEER Una expresin para la ecuacin de Beer-Lambert es la siguiente:

Donde: es el rango de luz captado por el tubo de fotocolorimetra, es el rango de luz que sale del tubo de fotocolorimetra y que va a llegar a la celda fotoelctrica donde es captada y medida es la capacidad de captacin del has del campo electromagntico, es la longitud del tubo de fotocolorimetra en cm, es la concentracin de la muestra ya ubicada en el tubo de fotocolorimetra. La ley de Beer permite cuantificar la concentracin de una muestra por UV, tambin puede ser expresada de la siguiente manera: A = Cl donde: : es la Absorbancia : es el Coeficiente de extincin (Caracterstico de cada sustancia). : es el Largo del paso de la cuba (cm). : es la Concentracin (moles/l). La zona de longitudes de onda que se registra en un espectro UV-Vis es de entre 200 y 800 nm. En esta zona no absorben dobles ni triples enlaces aislados. Slo van absorber enlaces pi conjugados y heterotomos con pares de electrones no compartidos (O, N), como los grupos cromforos. CARACTERISTICAS DEL EQUIPO Las muestras en solucin se ponen en una pequea celda de Si. Se utilizan dos lmparas: una de H o deuterio para la regin UV, y una de W / halgeno para la regin visible Se utiliza tambin una celda de referencia que contiene slo solvente si se trata de un espectrofotmetro de doble haz. La luz pasa simultneamente por la celda de muestra y la celda de referencia. El espectrmetro compara la luz que pasa por la muestra con la que pasa por la celda de referencia. La radiacin transmitida es detectada y el espectrmetro obtiene el espectro de absorcin al barrer la longitud de onda de la luz que pasa por las celdas.

CALCULOS Y RESULTADOS 1) EXACTITUD FOTOMETRICA PARA LA LAMPARA DE DEUTERIO A) Datos:

Datos experimentales (tomados de espectrogramas): d= 10 mm

Se calcula

Comparando con dato terico de 656.1 nm

B) Datos:

Datos experimentales (tomados de espectrogramas): d= 14 mm

Se calcula

Comparando con dato terico de 486.1 nm

2) ANCHO DE BANDA ESPECTRAL Datos experimentales (tomados de espectrogramas): ABE= 7 mm

3) EXACTITUD FOTOMETRICA PARA EL VAPOR DE BENCENO Datos:

Datos experimentales (tomados de espectrogramas)de cada uno de los picos del espectro: d1= 20.5 mm d2= 35 mm d3= 47.5 mm d4= 59 mm d5= 70 mm d6= 79.5 mm

Se calcula

Comparando con datos tericos Teorico Experimental % error 266.8 269.75 1.106 259.6 262.5 1.117 253.6 256.25 1.045 247.8 255.5 3.107 242.2 245 1.156 237.0 240.25 1.371 4) LINEALIDAD FOTOMETRICA Solucin inicial de K2Cr2O7 de 100 ppm Preparar sol. De 10 ml a partir de la inicial C1=25 ppm C3=75 pm C2=50 pm C4=100 pm Calculo de vol. A utilizar de sol. Inicial C1V1=C2V2 V1=(C2V2)/C1 V1= (25 ppm*10ml)/100 ppm =2.5 ml C1V1=C3V3 V1=(C3V3)/C1 V1= (50 ppm*10ml)/100 ppm =5 ml C1V1=C4V4 V1=(C4V4)/C1 V1= (75 ppm*10ml)/100 ppm =7.5 ml C1V1=C1V1 V1=(C1V1)/C1 V1= (100 ppm*10ml)/100 ppm =100 ml Datos:

Datos de absorbancia experimental A1teo=.237 A3teo=.680 A2teo=.470 A4teo=.891 Construccin grafica de calibracin ABSORVANCIA VS CONCENTRACION

OBSERVACIONES Y CONCLUSIONES

Se pudo observar que la manipulacin del equipo es sencilla, no tiene mayor dificultad ms que hacerlo con cuidado y con responsabilidad ya que se trata de un equipo caro y con varios aos de uso. La importancia de esta prctica radica en que debemos conocer el estado del equipo antes de realizar las dems prcticas para as no tener contratiempos y tener la seguridad de que los resultados del anlisis sean correctos. En conclusin podemos decir que de acuerdo a los resultados obtenidos, el quipo aun da resultados aceptables comparando con los tericos, lo que nos indica que podemos confiar en los resultados obtenidos del quipo.