Giulia Lemos de Meneses

1 - FIBROSE CSTICA Fibrose cstica, ou mucoviscidose, uma doena gentica que se manifesta em ambos os sexos. O gene defeituoso transmitido pelo pai e pela me (embora nenhum dos dois manifeste a doena) e responsvel pela alterao no transporte de ons atravs das membranas das clulas. Isso compromete o funcionamento das glndulas excrinas que produzem substncias (muco, suor ou enzimas pancreticas) mais espessas e de difcil eliminao. Sintomas A fibrose cstica afeta os aparelhos digestivos e respiratrios e as glndulas sudorparas. A obstruo dos ductos pancreticos pela secreo mais viscosa impede que as enzimas digestivas sejam lanadas no intestino. O paciente tem m absoro de nutrientes e no ganha peso, apesar de alimentar-se bem. Apresenta tambm maior nmero de evacuaes dirias e elimina fezes volumosas, com odor forte e gorduroso. Essa obstruo por secreo mais espessa tambm pode acometer os ductos biliares. A bile retida no fgado favorece a instalao de um processo inflamatrio. Entretanto, o aparelho respiratrio a rea mais delicada da doena. O pulmo produz muco espesso que pode ficar retido nas vias areas e ser invadido por bactrias. Outros sintomas so tosse com secreo produtiva, pneumonias de repetio, bronquite crnica. A alterao do transporte inico nas glndulas sudorparas compromete a reabsoro de cloro. Nveis aumentados de cloro ajudam a reter gua e sdio o que deixa o suor mais salgado. Mulheres portadoras de fibrose cstica tm mais dificuldade para engravidar porque o muco cervical mais espesso dificulta a passagem dos espermatozides. J 98% dos homens so estreis, embora tenham desempenho e potncia sexual absolutamente normais. Diagnstico Teste do suor: especfico para diagnstico de fibrose cstica. Nveis de cloro superiores a 60 milimoles por litro, em duas dosagens, associados a quadro clnico caracterstico, indicam que a pessoa portadora da doena; Teste do pezinho: feito rotineiramente nas maternidades para trs doenas congnitas, deve incluir a triagem para fibrose cstica. Embora existam falsos positivos, resultado positivo sinal de alerta que no deve ser desprezado; Nos recm-nascidos, a fibrose cstica pode provocar obstruo ileomeconial. Portanto, se a criana no eliminar naturalmente mecnio nas primeiras 24, 48 horas de vida, preciso dar continuidade investigao; Teste gentico: identifica apenas os tipos mais freqentes da doena, porque as mutaes do gene so muitas e os kits, padronizados. Mesmo assim, esse teste cobre aproximadamente 80% dos casos. Prevalncia Vinte por cento da populao so portadores assintomticos do gene da fibrose cstica, uma doena que acomete mais os brancos puros, mais rara nos negros e muito rara nos orientais. Em pases de grande miscigenao racial, a enfermidade pode manifestar-se em todo o tipo de populao, mais cedo se o espectro das mutaes do gene for mais grave e, mais tardiamente, se for mais leve. Tratamento fundamental para o tratamento da fibrose cstica garantir a reidratao e a reposio de sdio, especialmente nos dias de calor:

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Boa nutrio do paciente, por meio de dieta rica em calorias sem restrio de gorduras; Suplementao de enzimas pancreticas para auxiliar a digesto; Reposio das vitaminas lipossolveis A,D,E,K; Fisioterapia respiratria para facilitar a higiene dos pulmes e evitar infeces; O tratamento de fibrose cstica evolui bastante nas ltimas dcadas. Isso garante aos pacientes vida mais longa e de boa qualidade. fundamental desmistificar a restrio de gorduras. A dieta deve ser hipercalrica, hiperproteica e com teor normal de gordura, considerando as necessidades da faixa etria para um crescimento e desenvolvimento normais, respeitando custos, hbitos alimentares e intolerncia pessoal. Os pacientes com Fibrose Cistica tm necessidades calricas elevadas, pelo prprio metabolismo, trabalho respiratrio, infeco bacteriana e m absoro. Em geral, deve-se ofertar 20% a 50% de calorias alm das necessidades para a faixa etria, observando-se o ganho ponderal e crescimento do paciente. Isto mais importante que o clculo apurado da dieta. Nos pacientes Fibrose Cistica recomendvel o dobro do normal de ingesto protica e 35% da energia ingerida deve ser derivada de gorduras. A mal nutrio tem repercusses diretas no agravamento da doena pulmonar e, por isso, muitas vezes h indicaes de teraputica de suporte mais agressiva, como sondas gstricas ou enterais e mesmo gastrostomia. Recomendaes Procure afastar qualquer indcio de sentimento de culpa se seu filho for portador de fibrose cstica. Voc to culpado por ter-lhe transmitido esse gene quanto por ter transmitido o gene que lhe deu a cor dos olhos ou o tom da pele; Verifique se o teste do pezinho inclui a triagem para a fibrose cstica, quando nascer uma criana em sua famlia; Esteja atento boa nutrio do portador de fibrose cstica. Paciente bem nutrido pode atingir as curvas normais de peso e altura; Convena o paciente a praticar atividade fsica. Natao, por exemplo, ajuda a trabalhar a musculatura da caixa torcica; No se esquea de que os portadores da doena, desde que adequadamente tratados, conseguem levar vida normal e de boa qualidade. TRIAGEM: Mtodo A: Triagem de uma mutao j conhecida na famlia do paciente em estudo por seqenciamento direto. Mtodo B: Anlise dos xons 10 e 11 por seqenciamento direto. Este teste inclui a anlise das mutaes mais comuns na populao brasileira, DF508 (no xon 10) e G542X (no xon 11) do gene CFTR que correpondem a cerca de 48% dos alelos com mutao; este teste tambm tem o potencial de identifiicar novas mutaes nestas duas regies do gene CFTR. MtodoC: Triagem de mutaes nos xons 7, 10, 11, 19, e 21 por PCR, dHLPC e seqenciamento. Estes xons foram selecionados para anlise por conterem aproximadamente 55% das mutaes associadas a FC estudada no Brasil. Mtodo D: Triagem completa dos 27 xons do gene CFTR por dHPLC e seqenciamento 2 DOENA DE TAY-SACHS (TSD)

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TRIAGEM Triagem para TSD realizado com dois possveis objetivos: Testes transportadora procura detectar se um indivduo no afetado pela doena est a levar a uma cpia de uma mutao. Muitas pessoas que procuram triagem de portadores so casais de populaes em situao de risco que esto procurando para comear uma famlia. Alguns indivduos e casais que procuram triagem de portadores esto cientes dos resultados dos testes ou doena gentica nos antepassados ou membros da famlia vivos. Teste pr-natal visa determinar se o feto tem herdaram duas cpias defeituosas, um de cada pai. Em testes pr-natais, geralmente h uma maior informao sobre a histria da famlia e as mutaes so conhecidas com preciso. Testes de pr-natal para TSD geralmente realizada quando ambos os pais no podem ser descartados como possveis portadores. Em alguns casos, o estado da me portadora pode ser conhecido, enquanto o pai desconhecido ou no est disponvel para testes. Teste pr-natal pode ser realizado por ensaio de atividade enzimtica HEX A em clulas fetais obtidas por bipsia de vilo corial ou amniocentese. Se uma mutao real foi identificada em ambos os pais, ento mais preciso tcnicas de anlise de mutao usando PCR esto disponveis. Obs: Trs abordagens tm sido usadas para impedir ou reduzir a incidncia de doena de TaySachs na populao judaica Ashkenazi: Diagnstico pr-natal. Se ambos os pais so identificados como transportadores, os testes genticos pr-natal pode determinar se o feto herdou uma cpia defeituosa do gene de ambos os pais. Para os casais que esto dispostos a interromper a gravidez, isso elimina o risco de Tay-Sachs, mas o aborto levanta questes ticas para muitas famlias. Vilosidades corinicas amostragem (CVS), que pode ser realizada aps a 10 semana de gestao, a forma mais comum de diagnstico pr-natal. Ambos CVS e amniocentese apresentam riscos de desenvolvimento para o feto que tm de ser equilibrados com os benefcios possveis, especialmente nos casos em que o estado de portador de apenas um dos pais conhecido Seleo de parceiros. Em crculos judaicos ortodoxos, o Yeshorim Dor organizao realiza um programa de rastreio annimo para que os casais que esto aptas a conceber uma criana com TaySachs ou outra doena gentica pode evitar o casamento. Nomi Stone of Dartmouth College descreve esta abordagem. "Judaica ortodoxa estudantes do ensino mdio so dadas exames de sangue para determinar se eles tm o gene de Tay-Sachs. Em vez de receber resultados diretos quanto ao seu estado de portador, cada pessoa recebe um nmero de identificao de seis dgitos. Casais podem chamar uma linha direta, se ambos so portadores, eles sero considerados "incompatveis". Os indivduos no so informados de que so portadores diretamente para evitar qualquer possibilidade de estigmatizao ou discriminao. Se as informaes foram liberados, as operadoras poderiam se tornar dificuldades para casar dentro da comunidade. " Diagnstico gentico pr-implantatrio. Ao recuperar os ovos da me para fertilizao in vitro e conceber uma criana fora do tero, possvel testar o embrio antes da implantao. Apenas os embries saudveis so selecionados para a transferncia para o tero da me. Alm de Tay-Sachs, PGD tem sido utilizada para prevenir a fibrose cstica, anemia falciforme, doena de Huntington, e outras doenas genticas. No entanto, este mtodo caro. Ela exige invasivas tecnologias mdicas, e est fora das possibilidades financeiras de muitos casais. 3 BETA-TALASSEMIA

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B01 L01/ 02 - Beta Talassemia (Beta Tal) Informaes Gerais Talassemia ou anemia mediterrnea um tipo de anemia hereditria causada pela reduo ou ausncia da sntese da cadeia de hemoglobina, uma protena situada no interior dos glbulos vermelhos e que tm a funo de transportar o oxignio. Caracterizam-se por uma alterao quantitativa da sntese de globinas beta e so classificadas como talassemias beta zero (ou Talassemia quando no h sntese de globinas, e talassemias beta mais (ou Talassemia 0) +) quando h alguma taxa de sntese. Consequentemente as globinas alfa, que so sintetizadas normalmente, acumulam-se nos eritrcitos, durante a eritropoiese, causando agregao e precipitao (Naoum, et al., 2010). A conseqncia de uma eritropoiese ineficaz hemlise e hiperesplenismo que resultam em anemia grave com anoxia, cardiopatias que so importantes causas de bito na talassemia maior, hipermetabolismo com emagrecimento, febre, aumento do nvel de cido rico e gota, e a necessidade de transfuses repetidas de sangue. Anemias como Beta Talassemia tambm se apresentam com sintomas de crescimento deficiente da criana, e deformao ssea (Naoum, et al., 2010). Produtos para o Diagnstico de Beta Talassemia
Cdigo e Nome do GENOTEST B01 L01 - Beta Talassemia (Anlise de 23 mutaes) B01 L02 - Beta Talassemia (Anlise de 5 mutaes) Gene Analisado

Cadeia Beta da Globina Cadeia Beta da Globina

Aplicabilidade Utilidade Clnica: Diagnosticar e determinar a gravidade do quadro de Beta Tal em indivduos sintomticos. Confirmar o diagnstico de Beta Tal realizado por metodologias laboratoriais convencionais de anlises clnicas. Fazer a triagem da doena em consultas de planejamento familiar, ou em familiares de indivduos afetados. Averiguar se a Beta Tal a causa: o Do crescimento deficiente e da presena de distrbios alimentares em crianas. o De deformao ssea num individuo. o Da presena de anemia de causa desconhecida Indicao: Para pacientes com sintomas de Beta Tal ou pessoas assintomticas com histrico familiar de Beta Tal. Confirmar o diagnstico e determinar a gravidade do quadro de Beta Tal para indivduos que apresentaram resultado positivo para o teste de diagnstico clnico para Beta Tal. Mtodo Laboratorial

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O laboratrio clnico utiliza para o diagnstico de Beta Talassemia a tcnica de amplificao de mutao refratria (PCR-ARMS) com especificidade de alelo para a deteco da mutao do gene da beta globina. As mutaes associadas Beta Talassemia so definidas a partir da anlise dos fragmentos de DNA por eletroforese em gel de agarose.

Cdigo do GENOTEST B01 L01

Nome Beta Talassemia (Anlise de 23 mutaes)

Gene Analisado Cadeia Beta da Globina

Lcus do Gene Cdon 15 (TGGTAG), FS 16 (- C), Cdon 5 (-CT), IVS 1 - 25 (25 deleo de nucleotdeo), IVS II - 1 (G - A), IVS II - 837 (T - G), Cdon 30 (G C), Cdon 30 (G - A), Cap + 1 (A - C), -88 (C-T), FS 47 - 48 (+ATCT), IVS 1 - 1 (G-A), FS 57 - 58 (+C), IVS 1 - 110 (G A), IVS 1 - 128 (T G), IVS 1 - 130 (G C), IVS 1 - 130 (G A), deleo de 10.3 kb IVS 1-5 (G-C), IVS 11(G-T), FS 41-42(CTTT), FS 8-9(+G) e deleo de 619 pares de base

B01 L02

Beta Talassemia (Anlise de 5 mutaes)

Cadeia Beta da Globina

A sensibilidade e a especificidade deste teste so >98%, com a presena de DNA genmico em todas as clulas analisadas. Material Biolgico Necessrio Sangue Capilar Mtodo de Coleta O dedo do paciente ser superficialmente perfurado pela agulha de uma lanceta e o Sangue Capilar (1 a 5 gotas) ser depositado em um papel de filtro para transporte. Conservao para envio Temperatura ambiente.