ESCUELA DE CIENCIAS BSICAS, TECNOLOGA E INGENIERA

LABORATORIO DE QUMICA ANALTICA E INSTRUMENTAL

INFORMES LABORATORIO

Presentado a: Ing. MANUEL LOZANO RIGUEROS

Presentado por: DIANA CATALINA CASTIBLANCO SORIANO Cd. 53012233 Grupo de Laboratorio No. 2 Grupo Curso Virtual 301101_1

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA UNAD CEAD JOS ACEVEDO Y GMEZ INGENIERA DE ALIMENTOS QUMICA ANALTICA E INSTRUMENTAL BOGOT D.C., 2010

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INFORME PRCTICA DE LABORATORIO NO. 5 ESPECTROFOTOMETRA VISIBLE I CURVA DE ABSORCIN

1. OBJETIVOS DE LA PRCTICA 1.1 GENERAL Aplicar los conceptos de espectrofotometra para hacer una curva de absorcin. 1.2 ESPECFICOS Identificar las partes de un espectrofotmetro. Aprender a manejar un espectrofotmetro. Elaborar patrones para hacer curva de absorcin. Realizar curva de absorcin de un compuesto qumico. Elaborar la curva de absorcin caracterstica de un compuesto qumico. Determinar la longitud de onda ptima para un anlisis espectrofotomtrico.

2. MARCO TERICO 2.1 ESPECTROFOTOMETRA Este mtodo de anlisis ptico es el ms utilizado en las investigaciones qumicas y biolgicas. El espectrofotmetro es un instrumento que permite comparar la radiacin absorbida o transmitida por una solucin que contiene una cantidad desconocida de soluto y una que contiene una cantidad conocida de la misma.

2.2 PRINCIPIO DE LA ESPECTROFOTOMETRA Un haz de luz atraviesa una sustancia, parte de la energa es absorbida; la energa radiante no puede producir ningn efecto sin ser absorbida. Entonces, las sustancias absorben ciertas longitudes de onda de la luz blanca que incide sobre ellas y solo se puede ver aquellas longitudes de onda no absorbidas. La espectrofotometra visible se usa con radiaciones del espectro electromagntico, en el rango de la luz visible de 400 a 800 nm. La absorcin y la transmitancia de la luz dependen de la cantidad de concentracin de la sustancia y la distancia recorrida

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COMPONENTES DE UN ESPECTROFOTMETRO . Lmpara

MONOCROMADOR Detector de Luz

LUZ BLANCA

Luz de Color Io

Muestra a Analizar

If

3. PROCEDIMIENTO PREPARACIN DE SOLUCIN KMnO4

Tomar alcuota de 25 ml de KMnO4 y llevar a baln aforado a y completar a 100 ml.

LECTURA EN EL ESPECTROFOTMETRO
Colocar el dial en longitud de onda en el valor 380 nm y seleccionar lecturas en %T

Colocar la solucin en la buretra de 25 ml

El portaceldas vaco ajustar hasta 0%T

Marca los 10 tubos de ensayo

Colocar una celda con agua destilada y colocar la lectura en 100%T

En el primer tubo de ensayo colocar KMnO4 1ml e ir aumentando de a 1 ml en los otros 9 tubos de ensayo Llenar otra celda con el patrn tubo No. 8, leer en la pantalla el valor de %T Luego aadir a los 10 tubos de ensayo con KMnO4 agua destilada y completar 15 ml, cada uno. Hacer lo anterior cambiando la longitud de onda y registrar los valores de %T

Tapar los tubos agitar suavemente y conservar al abrigo de la luz.

4. REACTIVOS Permanganato de Potasio 0.02 N. Agua destilada

5. EQUIPOS Y MATERIALES Espectrofotmetro Celdas de Lectura

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Agua Destilada Solucin patrn de KMnO4 a 0.02 N Gradilla para tubos de ensayo 10 Tubos de ensayo Soporte universal Pinzas para bureta Bureta de 25 ml con llave de tefln Pipeta aforada de 25 ml Baln aforado de 100 ml Papel celofn

5. CLCULOS Tabla No. 2. ppm de Mn en los 10 tubos patrn

Alcuota de Solucin ml 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 KMnO4 mg/15ml 0,16 0,32 0,47 0,63 0,79 0,95 1,11 1,26 1,42 1,58 KMnO4 mg/ml 0,01 0,02 0,03 0,04 0,05 0,06 0,07 0,08 0,09 0,11 KMnO4 mg/L 1,05 2,11 3,16 4,21 5,27 6,32 7,37 8,43 9,48 10,53 Mn mg/L 0,37 0,73 1,10 1,47 1,83 2,20 2,57 2,93 3,30 3,67

6. RESULTADOS El ajuste se realiz al patrn No. 8 (2.93 mg/L de Mn) Tabla No.1 Lectura del Tubo de Ensayo No. 8 en el espectrofotmetro T% Absorbancia 380 11,6 0,93930 396 26 0,58503 400 42 0,37675 410 59 0,22915 420 66 0,18046 430 64 0,19382 440 46,7 0,33068 450 43 0,36653 460 29,7 0,52724 470 15,3 0,81531

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480 490 500 510 520 530 540 550 560 570 580 590 600

7 1,9 0,7 0,2 8 19 22 35 40 48 51 57 65

1,15490 1,72125 2,15490 2,69897 1,08092 0,71670 0,65758 0,45223 0,39794 0,32331 0,29073 0,24413 0,18709

En la grfica No. 1 se presenta el comportamiento de la longitud de onda seleccionada y el porcentaje de transmitancia respectivo, donde ms adelante se concluir la discusin de los resultados experimentales y con la observacin visual se elegir la lectura para el permanganato de potasio. 7. DISCUSIN DE RESULTADOS Teniendo en cuenta que se realiz medicin a diferentes longitudes de onda comprendidas en los valores de 380 nm a 600 nm, la regin de onda donde el in permanganato preparada por un patrn de 2,93 mg/L de Mn recibe el mnimo porcentaje de transmitancia es 510 cuyo valor se correlacion como el mximo valor de absorbancia que es 2,69 8. RELACIN DE LA PRCTICA DE ESPECTROFOTOMETRA VISIBLE I CURVA DE ABSORCIN DEL LABORATORIO DE QUMICA CON LA INGENIERA DE ALIMENTOS. La espectrofotometra es una tcnica utilizada en laboratorios para el anlisis de alimentos, un ejemplo es en la industria del vino para medir los polifenoles como antioxidante, teniendo los taninos y antocianos; medir la intensidad de colorante; tambin para determinar concentraciones de minerales y elementos traza en los alimentos que son esenciales en la salud humana. 12. CONCLUSIONES Los principales elementos de un espectrofotmetro, son los generadores de haz de radiacin, los monocromadores, la rendija seleccionadora de onda, el detector y el registrador el cual convierte la seal del detector en un valor til ya sea en porcentaje de transmitancia o de absorbancia

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Para realizar una curva de absorcin es necesario realizar patrones, en este caso de permanganato de potasio, con valores conocidos y tomar lecturas en varios rangos o longitudes de onda. Se determino que el mnimo valor de porcentaje de transmitancia es el mximo valor de absorbancia y se utilizo el valor encontrado para la determinacin de manganeso en un patrn. 13. BIBLIOGRAFA

Skoog, Douglas A., West, Donal M., Holler, F. James y Crouch, Stanley R. 2005. Fundamentos de Qumica Analtica. Mxico. Thomson. Pg. 353. Gutirrez Rodrguez, Jos Humberto. 2006. Mdulo Qumica Analtica e Instrumental. Bogot D.C., Unad. Pgs. 717-720 www.fao.org.docrep/010/ah833s/AH833S22.html Elementos Traza en Alimentos. www.wikipedia.org Espectrofotometra. Anlisis de Minerales y

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INFORME PRCTICA DE LABORATORIO NO.6 ESPECTROFOTOMETRA VISIBLE II CURVA DE CALIBRACIN

1. OBJETIVOS DE LA PRCTICA 1.2 GENERAL Aplicar los conceptos de espectrofotometra para hacer una curva de calibracin a partir de una serie de soluciones preparadas y una solucin problema. 1.3 ESPECFICOS Determinar los valores de porcentaje de transmitancia a las soluciones preparadas Determinar los valores de absorbancia a partir del porcentaje de transmitancia (Ley de Beer Lamber) Realizar curva de calibracin para el Manganeso. Ajustar con mnimos cuadrados la curva de calibracin obtenida Hallar la concentracin de una solucin problema a partir de la ecuacin de la recta ajustada.

2. MARCO TERICO 2.1 ESPECTROFOTOMETRA Este mtodo de anlisis ptico es el ms utilizado en las investigaciones qumicas y biolgicas. El espectrofotmetro es un instrumento que permite comparar la radiacin absorbida o transmitida por una solucin que contiene una cantidad desconocida de soluto y una que contiene una cantidad conocida de la misma. 2.2 LEY DE BEER LAMBERT. . Dice que la cantidad de luz absorbida por un cuerpo depende la concentracin en la solucin y la distancia recorrida por la luz. 2.3TRASMITANCIA Y ABSORCIN DE LAS RADIACIONES Al hacer pasar una cantidad de fotones o de radiaciones, por las leyes anteriores, hay prdida que se expresa: It es la intensidad de la luz que sale de la cubeta y que a llegar a la celda fotoelctrica. Io es la intensidad con la que sale al atravesar la celda T es la Transmitancia

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La ecuacin simplificada de la Ley de Beer Lambert

Comprende a la mnima ecuacin que relaciona la concentracin (c), la absorbancia de la muestra (A), el espesor recorrido por la radiacin (d) y el factor de calibracin (). Tambin, absorbancia es: Lo que es igual a:

2.4 AJUSTE DE MNIMOS CUADRADOS Tcnica analtica que busca encontrar la funcin que mejor se aproxime a los datos, de acuerdo de mnimo error cuadrtico. 3. PROCEDIMIENTO PREPARACIN DE SOLUCIN KMnO4
Tomar alcuota de 25 ml de KMnO4 y llevar a baln aforado a y completar a 100 ml.

LECTURA EN EL ESPECTROFOTMETRO
Leer en el espectrofotmetro las en la soluciones de los 10 tubos de ensayo del laboratorio anterior

Colocar la solucin en la buretra de 25 ml

Marca los 10 tubos de ensayo

Tomar datos

En el primer tubo de ensayo colocar KMnO4 1ml e ir aumentando de a 1 ml en los otros 9 tubos de ensayo

Hacer clculos
Luego aadir a los 10 tubos de ensayo con KMnO4 agua destilada y completar 15 ml, cada uno.

Realizar curva de calibracin

Tapar los tubos agitar suavemente y conservar al abrigo de la luz.

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3. MATERIALES Y EQUIPOS
Espectrofotmetro Vis Celdas de lectura Gradilla para tubos de ensayo 10 tubos de ensayo Soporte universal Pinzas para bureta Bureta de 25 o 50 ml con llave de tefln Pipeta aforada de 25 ml Baln aforado de 100 ml

4. REACTIVOS Permanganato de Potasio 0.02 N. Agua destilada desmineralizada

5. FORMULAS DE CLCULO Absorbancia es igual al logaritmo de la diferencia del porcentaje de la luz incidente y el porcentaje de luz transmitida; puesto que la luz incidente es el 100%, se puede escribir que: A = log (100% - %T) = 2 log %T Ajuste por mnimos cuadrados Y = ax + b, Donde: a = pendiente de la recta b = corte con el eje x Tambin se puede establecer la siguiente correlacin en la cual Y= Absorbancia de la muestra, y X es igual a la concentracin de la muestra. Por lo tanto Abs= a * mg/L + b

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6. RESULTADOS Tabla No. 3. Valores de %T y Absorbancia de los 10 Tubos.

Alcuota de Solucin ml 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 KMnO4 mg/15ml 0,16 0,32 0,47 0,63 0,79 0,95 1,11 1,26 1,42 1,58 KMnO4 mg/ml 0,01 0,02 0,03 0,04 0,05 0,06 0,07 0,08 0,09 0,11 KMnO4 mg/L 1,05 2,11 3,16 4,21 5,27 6,32 7,37 8,43 9,48 10,53 Mn mg/L 0,37 0,73 1,10 1,47 1,83 2,20 2,57 2,93 3,30 3,67 T% 69,7 65,1 60,3 60,3 56,6 50,1 55,5 46,5 41,4 43,9 Absorbancia 0,157 0,186 0,220 0,220 0,247 0,300 0,256 0,333 0,383 0,358

Tabla No. 4. Ajuste de Mnimos Cuadrados

N1 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 (x1)^2 a b Mn mg/L (x1) 0,4 0,7 1,1 1,5 1,8 2,2 2,6 2,9 3,3 3,7 20,17 406,69 6,46E-02 1,356E-01 Absorbancia (y1) 0,157 0,186 0,220 0,220 0,247 0,300 0,256 0,333 0,383 0,358 2,6587 (x1)(y1) 0,057 0,137 0,242 0,322 0,453 0,660 0,656 0,975 1,264 1,311 6,0782 (x1)^2 0,134 0,538 1,210 2,151 3,361 4,840 6,588 8,604 10,890 13,444 51,76 Aborbancia Ajustada 0,16 0,18 0,21 0,23 0,25 0,28 0,30 0,33 0,35 0,37

En la grfica 2, se puede observar la dispersin, la lnea de ajuste de absorbancia y su respectiva ecuacin.

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7. DISCUSIN DE LOS RESULTADOS La curva analtica para la determinacin de Manganeso fue determinada por medio de la preparacin de 10 tubos de los cuales al primero se le aadi 1 ml y los siguientes se les aumentaba 1 ml ms por cada tubo hasta llegar a 10 ml de KMnO4, llevado a un volumen total de 15 ml con agua destilada, la mnima relacin en esta preparacin fue de 0,16 ml KMNO4 /15 ml y la mxima fue de 1,58 ml KMNO4 /15 ml, partiendo de esta relacin se encontr la nueva concentracin de permanganato como sustancia total dando valores mximos y mnimos para la curva de calibracin el mnimo valor fue de 1,05 mg KMnO4/L y el mximo fue de 10,53 mg KMnO4/L, y despus se midi las respectivas absorbancias, las cuales partieron originalmente del porcentaje de transmitancia que aplicando una ecuacin matemtica permite hallar la Absorbancia por medio del porcentaje de Transmitancia, esta relacin estableci que para el primer patrn contemplado como 1,05 mg KMnO4/L el porcentaje de transmitancia es de 69,7 y despejando la ecuacin da como resultado 0,157 unidades de absorbancia, por otra parte para el valor de 10,53 mg KMnO4/L estableci un porcentaje de transmitancia igual a 43,9 y su respectivo valor de absorbancia es de 0,358. Cuando se desea realizar una determinacin cuantitativa se puede verificar la pureza en este caso la sustancia de permanganato. En los alimentos, esta sustancia como tal carece de valor ya que ningn alimento lleva en su composicin permanganato de potasio, pero si lleva trazas de manganeso, es por ello que se establece la relacin de mg de Manganeso por Litro de muestra (ppm). Por ello a partir de las cantidades establecidas para permanganato por medio de clculos matemticos es posible transformar a unidades de mg Mn/L, para nuestra curva de estudio encontramos que la mnima concentracin de Manganeso fue de 0,37 mg Mn/L el porcentaje de transmitancia de esta concentracin es de 69,7 y despejando la ecuacin da como resultado 0.157 unidades de absorbancia, por otra parte para el valor de 3,67 mg Mn/L que corresponde al mximo valor de manganeso se pudo establecer un porcentaje de transmitancia igual a 43,9 y su respectivo valor de absorbancia es de 0,358. Por medio de la frmula de mnimos cuadrados se estableci el comportamiento de la recta dando como resultado que el intercepto en y (b) es 1,356 x 10-01 y el valor de su pendiente (a) es de 6,46x 10-02. Utilizando la ecuacin , es posible determinar la concentracin del metal manganeso para cualquier absorbancia que no se salga de los lmites anteriormente relacionados (grfica No. 2). De esta forma se halla la concentracin de Mn mg/L, y teniendo en cuenta que el valor de R2 representa la linealidad de los datos, donde el valor ideal es 1, obtuvimos R2=0.913, esto indica y como se puede observar en la grfica que los tubos 6, 7 y 9 se dispersan lejos de la lnea ajustada, lo que quiere decir que fallo el proceso de medicin y hubo un error accidental donde prevaleci el fallo

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humano a falta de experiencia en el manejo del instrumental de laboratorio, en este caso cuando se estaba aplicando el permanganato de potasio a los tubos de ensayo. 8. RELACIN DE LA PRCTICA DE ESPECTROFOTOMETRA VISIBLE II CURVA DE CALIBRACIN DEL LABORATORIO DE QUMICA CON LA INGENIERA DE ALIMENTOS. Este anlisis y realizacin de clculos son importantes para la ingeniera de alimentos, ya que tomar resultados y realizar los diferentes clculos y grficas permiten interpretar mejor lo que sucede con el analito. Por otra parte, el espectrofotmetro se convierte en una herramienta importante en la qumica instrumental debido a que por este mtodo se pueden determinar una variedad de sustancias las cuales desarrollan color y pueden ser ledas. Se pueden determinar metales como el hierro utilizando fenantrolina en ph acido, o determinar arsnico en forma de arsina, o plomo por coloracin con ditizona, o sustancias ms complejas como almidn por coloracin de antrona sulfrica o nitritos por medio de reactivo de Griess, etc., ya que existe variedad de tcnicas las cuales son aplicables a la espectrofotometra. 9. CONCLUSIONES Por medio de patrones de solucin se puede tomar lectura por parte del espectrofotmetro, teniendo en cuenta que se deben seguir parmetros de las buenas practicas de laboratorio, para hallar valores con un bajo valor de error y as poder lograr una curva de calibracin del equipo adecuada para la determinacin de manganeso La recta de ajuste a todos los puntos por medio del mtodo de mnimos cuadrados es una forma de ver los errores que suceden en laboratorio y tambin como tcnica analtica. Por medio de esta tcnica se pudo establecer los valores de intercepto y dependientes, datos tiles en la ecuacin de la recta y los cuales sirven para hallar despus la concentracin de una sustancia, partiendo solamente de su transmitancia o absorbancia.

10. BIBLIOGRAFA Skoog, Douglas A., West, Donal M., Holler, F. James y Crouch, Stanley R. 2005. Fundamentos de Qumica Analtica. Mxico. Thomson. Pg. 729-735. www.wikipedia.org Mnimos cuadrados.