INFORME PRACTICO

RECUENTO DE GLOBULOS BLANCOS OBJETIVOS.-Esta practica tiene elpropocito de ensearnos ah realizar elconteo respectivo y de laforma correcta de los globulos blancos (leucocitos), ya que este conteo nos permitir saber si hay alguna anomali (deficiencia o aumento) uqe puede ser causante alguna enfermedad ya que se sabe que los leucocitos son parte de nuestra defensa inmunitaria

OBJETIVO Aprender a realizar el conteo de plaquetas existentes en un milmetro cbico de sangre total e identificar morfolgicamente las plaquetas coloreadas con Wright en extendidos de sangre perifrica y apreciar su nmero por campo. OBJETIVO Realizar el conteo de plaquetas existentes en un milmetro cbico de sangre total Identificar morfolgicamente las plaquetas coloreadas con Wright en extendidos de sangre perifrica y apreciar su nmero por campo. Correlacionar la prctica con la teora expuesta en clase.

RECURSOS Muestra de sangre con anticuagulante EDTA Pipeta Cmara de de recuento de Neubauer Cubre objetos Microscopio

PROCEDIMIENTO El conteo de plaquetas se realiza en sangre anticuagulada con EDTA y diluida con mediante el uso de la pipeta

METODO Mezcle cuidadosamente, por inversin por lo menos 10 veces, la sangre anticuagulada con el fin de obtener una muestra homognea Llene la pipeta con la muestra de sangre hasta la marca 1.0 exactamente Elimine el exceso de sangre de las paredes externas de la pipeta para no contaminar la solucin diluente Aspire el lquido diluente hasta la marca 101 exactamente Sujeta la pipeta entre los dedos ndice y pulgar, desprenda la boquilla y deje en

reposo durante 3 minutos Agite durante 10 minutos Descarte hasta la mitad del bulbo con el fin de eliminar el lquido del capilar e inmediatamente llene la cmara Llene la cmara de Neubauer en ambos lados y coloque en ambiente hmedo por 10 minutos. El ambiente hmedo se logra cubriendo la cmara con una Caja de Petri que llevar adherido un disco de papel de filtro humedecido Coloque la cmara en el microscopio. Enfoque con objetivo de 40X y observe el llenado de la cmara. No debe haber agregados plaquetarios. Cuidadosamente enfoque el cuadrado central Disminuya la intensidad de la luz. As le ser ms fcil distinguir y contar las plaquetas Las plaquetas se reconocen como estructuras pequeas, opacas, redondas o alargadas, medianamente refrctiles, y a veces con prolongaciones El nmero est determinado por el conteo de los 25 cuadrados en que se subdivide el cuadrado central, descartando las plaquetas que tocan las lneas derecha e inferior. Clculo El nmero de plaquetas por mm se calcula de acuerdo con: 1. Volumen del rea contada: 0.1 mm (1x1x0.1) 2. Dilucin utilizada : 1:100 3. Nmero de clulas contandas Plaquetas /mm Nmero de clulas contadas X 1 X dilucin Volumen de rea contada Plaquetas/mm = B X 10 X 100 Plaquetas /mm = B X 1000 Valores de Referencia El rango normal para el recuento de plaquetas es de 150.000 a 400.000xmm

OBSERVACIONES Las plaquetas se cuentan ms fcilmente utilizando microscopio de contraste de fase, pero si el microscopio de luz se adeca correctamente y el conteo se hace con un estricto control de calidad el resultado ser igualmente confiable. Especial atencin debe tenerse con las soluciones diluentes. Estas no deben estar contaminadas, pues tanto las partculas como las bacterias pueden similar plaquetas. Los lquidos diluentes se deben mantener refrigerados y filtrar antes de su uso. La limpieza de la cmara de Neubauer y de las pipetas es importante en este procedimiento, Si se observan agregados en el recuento, el procedimiento debe repetirse. El uso de EDTA como anticoagulante ayuda a disminuir la agregacin plaquetaria. El rango de error para el recuento de plaquetas en el microscopio de luz es de 16 25%. No se debe informar el recuento de plaquetas sin confrontarlo con el extendido de sangre

perifrica, coloreado con Wright.

IDENTIFICACIN DE LAS PLAQUETAS COLOREADAS CON WRIGHT Los extendido hechos directamente con sangre sin anticoagulante se colorean Wright para observar su apariencia tintorial, su morfologa y su nmero. RECURSOS Sangre sin anticoagulante Portaobjetos o cubreobjetos Colorante de Wright Microscopio Aceite de inmersin Material bibliogrfico Presentacin en Power point

METODO Realice por lo menos cuatro extendidos en cubreobjetos o en portaobjetos, segn lo prefiera. Coloree con Wright Coloque al microscopio y observe en 10X para calificar la calidad de la muestra en cuanto a coloracin y extensin. Si el extendido est tcnicamente perfecto coloque el objetivo de 100X e identifique las plaquetas. Estas presentan una tonalidad levemente basfila, lo cual permite detallar una zona central granular llamada crommero y una zona perifrica ms clara denominada hilmero. Observe el tamao de la plaqueta circulante. Normalmente est entre 2 y 4 Correlacione el nmero de plaquetas observadas con el recuento obtenido en cmara. Usualmente se observan de 8 a 20 plaquetas individuales por campo con objetivo de 100X Informe la presencia de agregados planetarios como un hallazgo normal. Su ausencia puede estar asociada con ingestin de medicamentos que inhiben el proceso de agregacin. Anormalidades de tamao o granularidad se deben observar e informar