ropas, equipos, etc. La severidad de los signos clnicos en un ani- mal infectado depende de: la especie afecta- da, el estado inmunitario, la dosis, la va de exposicin y la cepa viral. Existen diferencias en la probabilidad de infectarse y en la importancia como fuente de infeccin entre individuos de diferentes especies domsticas. Aunque el bovino y el ovino requieren dosis infectantes mnimas semejantes por va aergena (15 a 25 UI), el bovino tiene mayores probabilidades de infectarse por que inspira un volumen de aire 17 veces mayor que el ovino por unidad de tiempo. Por el mismo motivo, un bovino infectado es una mayor fuente de virus. El porcino tiene una especial importancia como diseminador de virus ya que puede eliminar concentraciones de virus equivalentes a 100- 3000 bovinos por el aire expirado. La importancia de una especie animal como fuente de infeccin est dada por la canti- dad y el tiempo que libera virus al medio un individuo infectado, por la cantidad de ani- males presentes y por el grado de movilidad que tengan los individuos de esa especie. Por este motivo, generalmente y en nuestro pas especialmente, el bovino es considerado el principal reservorio de la infeccin. CONTROL Y ERRADICACIN El control y erradicacin del VFA estn basa- dos en tres principios bsicos que general- mente se usan en forma combinada. Las con- diciones epidemiolgicas, la capacidad tc- nica y operativa y la disponibilidad de recur- sos humanos, econmicos y financieros La Fiebre Aftosa (FA) es una enfermedad viral, altamente transmisible, de curso agudo que afecta a los animales biungulados; se caracteriza por fiebre y presencia de vescu- las principalmente en la cavidad bucal, hoci- co, espacios interdigitales y rodetes corona- rios de las pezuas. Est clasificada como enfermedad de la Lista A de la Oficina Internacional de Epizootias (OIE), organismo de referencia para la Organizacin Mundial de Comercio (OMC) en temas relacionados con la salud animal. El agente etiolgico es un virus pertenecien- te a la familia picornaviridae de 23 a 30 nm de dimetro. Existen siete serotipos diferen- tes: A, O, C, SAT1, SAT2, SAT3 y Asia1. La infeccin con un serotipo no confiere inmu- nidad contra los otros. Adems, dentro de cada serotipo, se pueden diferenciar nume- rosos subtipos cuyo grado de proteccin cru- zada es muy variable. En la Argentina se han identificado, hasta el presente, los tipos A, O y C, y al igual que en el resto del continente americano no se ha detectado jams otro tipo diferente a los mencionados. Ms de 90 especies animales son suscepti- bles al virus de Fiebre Aftosa (VFA), entre las especies domsticas ms importantes se pueden citar a la bovina, ovina, caprina y porcina. La principal va de entrada de la infeccin es la respiratoria y en menor grado la digestiva. Otras vas de ingreso del agen- te son a travs de abrasiones en la piel o en las mucosas. La principal fuente de infeccin es un animal infectado, otras fuentes de importancia son productos o subproductos de origen animal conteniendo el agente y 'U6HUJLR-'XII\ Instituto de Patobiologa, INTA, Castelar Fiebre aftosa Un Enemigo para Siempre Controlar las fuentes de infeccin, evitar el contacto entre estas fuentes y los animales susceptibles al virus, aumentar la resistencia y evitar el contacto entre el ganado infectado son principios insoslayables en la lucha contra esta enfermedad `o`a1 1 evitar el contacto entre las fuentes de infec- cin y los animales susceptibles el virus desaparecera de la poblacin en forma natu- ral y progresiva por la eliminacin de los reservorios de virus y de las fuentes de infec- cin o por la inactivacin del agente en estas ltimas. En pases libres en donde no se practica la vacunacin, ante el ingreso del VFA, el nfa- sis es puesto en el control de las fuentes de infeccin y en evitar el contacto entre ani- males susceptibles y las fuentes de infec- cin. Lo primero, se hace mediante la detec- determinan la importancia relativa que se da a cada uno de estos principios en la estrate- gia a aplicarse. Estos principios son: Controlar las fuentes de infeccin Reducir la susceptibilidad de los animales Evitar el contacto entre los animales sus- ceptibles y las fuentes de infeccin Si se pudiesen controlar las fuentes de infec- cin o se pudiese aumentar la resistencia de los animales al VFA de manera de que ya no sean susceptibles a la infeccin o se lograse `o`a1 11 LAS VACUNAS La eficacia de la vacuna es la capacidad de lograr los objetivos para los que fue desarro- llada bajo condiciones ideales. El objetivo primario de la vacuna es proteger contra la enfermedad, reducir la probabilidad de infec- cin y reducir la capacidad de diseminar virus en el caso de que el animal se infecte. La cantidad y el tipo de anticuerpos produci- dos por el individuo como respuesta a la vacunacin determinarn el grado de protec- cin, dependiendo este, de la cepa viral, la masa antignica y la formulacin usada en la elaboracin del inmungeno. La eficacia (o potencia) de las vacunas puede ser evaluada por medio de pruebas directas como la de proteccin contra la generalizacin podal (PGP), consistente en el desafo por descarga viral de animales pri- movacunados. Esta es la prueba aceptada internacionalmente como de referencia. Una alternativa a esta, es el uso de pruebas indi- rectas como el test de ELISA en fase lquida para la titulacin de anticuerpos a tiempos posvacunacin preestablecidos. Esta requiere del conocimiento de la existencia y tipo de correlacin entre PGP y los ttulos de anti- cuerpos inducidos por las cepas especficas contenidas en las vacunas analizadas. La potencia e inocuidad de todas las series de vacunas autorizadas para ser usadas en el programa de vacunacin sistemtica deben haber sido controladas y aprobadas median- te pruebas oficiales estandarizadas y recono- cidas. La efectividad de la campaa de vacunacin, no podr ser buena sino est sustentada en una vacuna eficaz, pero esto no es suficien- te y debe ser complementado con una correcta cobertura vacunal, frecuencia de vacunacin, duracin de perodos vacunales, intervalo entre vacunaciones, provisin, dis- tribucin y mantenimiento de los inmunge- nos y aplicacin. Asimismo, la corresponden- cia entre la cepa vacunal y la presente en el campo ser determinante de la efectividad. La planificacin, implementacin y control de una campaa efectiva de vacunacin implica necesariamente la participacin de diferentes sectores y niveles relacionados con la industria pecuaria. cin precoz y destruccin y eliminacin inmediata de los animales infectados y con- tactos, la desinfeccin de personas y equi- pos y la eliminacin de materiales potencial- mente infectados; lo segundo, se logra mediante la cuarentena de los estableci- mientos o reas infectados y la imposicin de restricciones a los movimientos de anima- les, productos y subproductos de origen ani- mal y vehculos potenciales del agente. En oportunidades en que la efectividad de las medidas descriptas no pueden ser garan- tizadas o existen condiciones muy favorables para la transmisin viral (Ej.: alta densidad animal) esas acciones son complementadas mediante la vacunacin en anillo, destinada a reducir la susceptibilidad de los animales y as disminuir la difusin del virus. Los ani- males vacunados son posteriormente sacrifi- cados en forma progresiva. En pases libres en donde se practica la vacu- nacin, ante la presencia del VFA se acta de manera semejante a la descripta para los pa- ses libres que no vacunan pero la vacunacin en anillo se practicara en todos los casos. En pases infectados en donde se practica la vacunacin sistemtica se podra diferenciar entre aquellos casos en que la presencia de focos es frecuente y aquellos en que el nmero de focos es espordico o se est en las ltimas etapas para lograr la erradica- cin. En la primer situacin, presencia de focos frecuente, evitar el contacto entre suscepti- bles y fuentes de infeccin y lograr el con- trol de estas ltimas debe implementarse con el mismo rigor que en lugares en donde no se vacuna. Sin embargo, el sacrificio de los animales no suele practicarse por resultar muy oneroso, tcnicamente complicado e incluso poco efectivo. La gran particularidad de esta situacin es la importancia fundamental que adquiere la reduccin de la susceptibilidad de los indivi- duos en el control de la infeccin. Actualmente, la nica forma prctica de lograr esto es mediante la vacunacin. Por esto, es conveniente aclarar conceptos rela- cionados con la eficacia de las vacunas y con la efectividad de las campaas de vacuna- cin. `o`a1 1 En la segunda situacin, en que el nmero de focos es espordico o se est en las ltimas etapas para lograr la erradicacin, el sacrifi- cio de los animales infectados y contactos es una alternativa vlida que acelerar el proce- so de eliminacin del virus de un rea o pas. LIBRES DE AFTOSA Una vez logrado el control y posterior erradi- cacin del VFA de pas (o rea), se enfrenta- r el desafo ms grande, esto es mantener la condicin de libre. Para esto, un pas deber contar con un sis- tema de prevencin adecuado y constituido por tres niveles con los siguientes objetivos: Primario: evitar la introduccin de agentes infecciosos y la exposicin de los animales susceptibles a estos agentes. Secundario: detectar precozmente la presen- cia de la enfermedad o del agente y tomar las primeras medidas para su control. Terciaria: controlar la enfermedad, erradicar el agente y recuperar la condicin de libre. La prevencin primaria debe reducir el riesgo asociado con el envo, hacia nuestro pas, de animales, productos o subproductos que pue- dan vehiculizar el VFA; vigilar que en los pasos fronterizos, puertos y aeropuertos se cumplan las restricciones al ingreso de animales y pro- ductos establecidos por las autoridades; con- trolar la destruccin de manera segura de los residuos de puertos y aeropuertos internacio- nales y controlar que los laboratorios que manipulan o tienen virus activo con fines de investigacin, diagnstico o produccin de vacunas cumplan con las normas de bioseguri- dad correspondientes. La prevencin secundaria debe ser capaz de detectar tempranamente cualquier sospecha de enfermedad confundible con FA, realizar el diagnstico confirmatorio o diferencial y tomar las primeras medidas destinadas a controlar un eventual ingreso de virus. Los trabajadores rurales, productores, transportistas de ganado, personal de ferias y frigorficos son los indivi- duos que tienen las mayores probabilidades de ver un animal con signos clnicos compatibles con FA y es por eso que deben mantenerse campaas permanentes de difusin y motiva- cin destinados a ellos. Por su parte, la res- puesta a una denuncia de sospecha debe ser inmediata, efectiva e informar al denunciante y otros interesados de los resultados obtenidos o el sistema se resentir a corto plazo. Tambin, debe incluir actividades de vigilancia activa como el anlisis de monitoreos serolgicos, estudios en reas de riesgo, resultados de labo- ratorios y mataderos, controles en frigorficos, mantenimiento de un banco de secuencias genmicas de cepas de VFA, etc. La prevencin terciaria debe primero controlar el problema, luego eliminar el agente y final- mente llevar a cabo estudios que sirvan para comprobar la ausencia y ser reconocidos como libres por la comunidad internacional (como eliminar el virus ya ha sido tratado). La efectividad de las medidas para evitar el reingreso del VFA a un pas son independien- tes del hecho de que se est o no vacunando en forma sistemtica a la poblacin bovina u otra susceptible. La vacunacin de una espe- cie (o especies) susceptible no reduce el ries- go de introduccin del VFA al pas, sino que confiere cierto grado de proteccin a individuo en el caso de ser expuesto a un agente infec- cioso como el VFA. Esto, implica que los bene- ficios de la vacunacin se ponen de manifies- to solo en caso de que los animales sean expuestos al agente, para lo cual el mismo debe estar presente. Ante el ingreso del VFA a un pas libre, la diferencia entre tener la poblacin vacunada versus tener la poblacin sin vacunar es que la menor susceptibilidad que tendrn los animales en el primer caso reducir significativamente la probabilidad de difusin de la infeccin. Como consecuencia, el posterior control y eliminacin podran resultar ms fciles de llevar a cabo. En con- traposicin, la deteccin de la presencia de la enfermedad o del agente en poblaciones vacu- nadas podra pasar inadvertida por ms tiem- po ya que probablemente los signos clnicos seran leves o incluso podran estar ausentes. Por lo tanto, el inicio de las medidas para el control podra verse demorado. CONCLUSIONES En los ltimos aos la introduccin de FA en pases que estaban libres desde hace dcadas ha puesto en evidencia las dificultades enor- mes que se enfrentan actualmente y que deberemos enfrentar en el futuro para prote- `o`a1 13 ger a los pases contra la introduccin de agentes infecciosos exticos. Estos casos, tambin han mostrado la variedad de las pro- bables vas de ingreso: animales vivos ingre- sados ilegalmente (Taiwn), residuos de bar- cos (Sudfrica), importacin de animales (Francia, Holanda, Irlanda), etc. Por todo esto, es claro que la lucha contra la FA demanda en el mbito internacional una estrategia regional y en el nacional un grado de compromiso significativo de todos los sec- tores relacionados con la industria pecuaria y la comunidad en general. Cualquier estrategia que se implemente para el control, la erradicacin y el mantenimien- to de la condicin de libre requerir de un apoyo poltico y econmico permanente para que las actividades de prevencin, de capaci- tacin de personal, de investigacin y desarrollo y de informacin y concientizacin de la poblacin en general se mantengan a travs del tiempo, an muchos aos, despus de la eventual desaparicin del VFA de nues- tro pas. La erradicacin de la Fiebre Aftosa, solamen- te, no garantizar al pas nuevos y mejores mercados para sus animales y productos de origen animal, pero su presencia los hace inaccesibles o accesibles en condiciones eco- nmicas claramente desfavorables. Virus de la Fiebre Aftosa Diagnstico rpido y diferencial con otros virus vesiculares Dra. Karina G. Trono Instituto de Virologa, INTA Castelar En el Instituto de Virologa de INTA Castelar se dispone actualmente de una prueba de diagnstico rpida para la deteccin del Virus de la Fiebre Aftosa en animales que cur- san la infeccin. A su vez esta prueba permite detectar el tipo de VFA presente en la muestra analizada, a saber: VFA tipo A, O C. Se trata de una metodologa molecular (RT-PCR) para el diagnstico rpido del Virus de la Fiebre Aftosa (VFA) de animales en pie, diferencial de otros virus que causan patolo- ga vesicular indistinguible, el Virus de la Estomatitis Vesicular o VSV y el Virus de la Enfermedad Vesicular del Cerdo o SVDV. Esta metodologa, que se utiliza actualmente en los laboratorios de referencia mundia- les para el diagnstico inicial del VFA a fin de tener un primer resultado inequvoco y precoz, consta de una nica reaccin donde se analiza simultneamente la presencia de secuencias genticas especficas para cada uno de los virus mencionados. A su vez la prueba es altamente especfica, ya que no permite detectar secuencias de virus estre- chamente relacionados (como el Virus Coxsackie B5 y otros enterovirus porcinos, con quienes el virus SVDV puede cruzar serolgicamente). Junto a la estandarizacin del diagnstico se puso a punto una prueba de RT-PCR que permite el diagnstico especfico de tipo viral de VFA (A-O-C). El principio de esta prue- ba consiste en la deteccin de secuencias genticas de la protena viral denominada VP1. Como resultado de aplicar esta metodologa sobre tejidos infectados se obtiene la tipificacin del virus presente en dicho material. Esta metodologa, que sirve para el Diagnstico de VFA en cualquier especie afectada se encuentra disponible y ha sido puesta a disposicin del SENASA para su utilizacin en la deteccin rpida e inequvoca del VFA en posibles casos sospechosos. Para mayor informacin: Instituto de Virologa CICVyA. INTA Castelar Tel. (011) 4621-1447/1278/1676 interno 110. Fax (011) 4621-1743 E-mail: ktrono@cicv.inta.gov.ar / ffernandez@cicv.inta.gov.ar `o`a1 14 E> HEKC N=B= Fiebre Aftosa. R. Casas Olascoaga; I. Gomez; F. Rosenberg; Aug de Mello;V. Astudillo; Magallanes N (Editores). OPS 1999. Manual on the preparation of national animal disease emergency preparedness plans. W. Geering; P. Roeder;T. Obi. FAO, Animal Health Manual N 6. 1999. Manual on livestock disease surveillance and information systems. FAO, Animal Health Manual N 8. 1999. New technologies in the fight against transboundary animal diseases. AFOAnimal Production and Health Paper 144. 1999. Cdigo Zoosanitario. Office International des pizooties. 2001 Investigacin Alfalfa antiaftosa Dr. Andrs Wigdorovitz Instituto de Virologa, INTA Castelar Se ha logrado recientemente la produccin de plantas transgnicas de alfalfa que expresan la protena VP1 del Virus de la fiebre Aftosa. El desarrollo se realiz en el Instituto de Virologa del Centro de Investigaciones en Ciencias Veterinarias del INTA Castelar, donde hace ms de veinte aos se cre la vacuna oleosa que actualmente se utiliza en los planes de control. La expresin de antgenos en plantas presenta ventajas potenciales con respecto a los sistemas convencionales. La vacuna antiaftosa utilizada actualmente es polivalente y a virus inactivo, lo que implica un laborioso y costoso proceso de elaboracin (cultivos de tejidos y laboratorios de alta seguridad). En cambio, cuando se utiliza una planta para producir antgenos no es necesaria la utilizacin de cultivos celulares ni de laboratorios de alta seguridad. Adems presenta la posibilidad de emplearla como inmungeno oral. Se encontr en la alfalfa el blanco ptimo para este desarrollo porque constituye una especie instalada en la Argentina como la principal fuente de forraje para la produccin de carne y leche. Adems, es un elemento fundamental para el mantenimiento y recu- peracin de la productividad de los suelos. Entre los distintos caminos alternativos que existen para obtener las plantas transgni- cas de alfalfa, la estrategia utilizada fue la transformacin con Agrobacterium tumefa- ciens, bacteria que tiene per se la caracterstica de incorporar establemente genes a la planta que infecta. As, se logr introducir en las plantas de alfalfa los genes de inte- rs. Para el caso de VP1, de las cien plantas producidas, se seleccion la planta que mejor expres la protena del virus. Dicha planta fue utilizada para vacunar o alimentar a los ratones, los cuales generaron una respuesta especfica de anticuerpos capaz de protegerlos contra el desafo experimental con el virus infeccioso. Es importante tener en cuenta que -a diferencia de los bovinos- los ratones son monogstricos por lo que nuestros resultados no son extrapolables al husped natural. Actualmente se est trabajando en la optimizacin de la expresin de la protena VP1 y en la expresin de la poliprotena (P1) del virus de la fiebre aftosa en plantas de alfal- fa, con el fin de lograr, en un futuro, contar con inmungenos ms eficientes. Los primeros tres aos de trabajos fueron financiados por la Secretara de Ciencia y Tcnica SECyT-BID 802 OC-AR PID 168.