Universidad Nacional Abierta y a Distancia Escuela de Ciencias Bsicas, tecnologa e Ingeniera Unidad de Ciencias Bsicas

QUMICA ANALTICA E INSTRUMENTAL

GUA DE PRCTICAS DE LABORATORIO

Qco. MANUEL LOZANO RIGUEROS

Bogot, D.C. agosto de 2008

NDICE

pg Introduccin 3 Prctica 1.Determinacin de Acidez y pH en un alimento..........4 Prctica 2. Determinacin de cloruros10 Prctica 3. Determinacin de cenizas y calcio en un alimento 14 Prctica 4. Determinacin de pH y cido Actico en un vinagre 18 Prctica 5. Espectrofotometra Visible I Curva de Absorcin 26 Prctica 6. Espectrofotometra Visible II Curva de Calibracin 31

INTRODUCCIN Al ser el curso de Qumica Analtica Instrumental metodolgico, requiere de la realizacin de eventos prcticos supervisados por el tutor que garanticen la posibilidad de que el estudiante adquiera las destrezas, habilidades y competencias necesarias para la realizacin de trabajo experimental ya sea para su realizacin como jefe de proceso responsable del control de calidad de un producto o para explorar su capacidad como investigador y dedicarse a este campo que permite conocer y explotar mejor los recursos disponibles de nuestro pas de manera sostenible, con una concepcin humanista de desarrollo. Con estas actividades se le brinda al estudiante la posibilidad de acercarse al concepto de riesgo, conocer el tipo de sustancias que va a manejar, las precauciones recomendadas y las normas institucionales para el trabajo de laboratorio. Esta experiencia debe enriquecerlo, no generarle situaciones que atenten contra su vida. Si es cuidadoso, protege su cuerpo y tiene una actitud proactiva, encontrar en el trabajo experimental otra experiencia de construccin y verificacin del conocimiento. Ms adelante, encontrar instrucciones para la elaboracin del informe de su experiencia prctica. La ciencia se construye con el mtodo que vamos a aplicar en estas sesiones prcticas y el conocimiento se incrementa a travs de la construccin del artculo cientfico. En la vida profesional se debe escribir informes de actividades, luego es una oportunidad para ejercitar esa destreza. Sin embargo, el objetivo no es escribir documentos extensos, se tiene que ser concreto y describir lo que realmente se hizo, con palabras propias, resaltando lo que se ha aprendido y las conclusiones sin copiarlo de otros textos. Por ltimo, todas las prcticas de laboratorio deben ser preparadas con anterioridad. Con ellas se pretende comprobar la teora, desarrollar nuestras capacidades de observacin y afianzar las actitudes en el espacio denominado laboratorio.

PRCTICA 1 DETERMINACIN DE LA ACIDEZ Y EL pH DE UN ALIMENTO Objetivos Estandarizar o valorar soluciones usando patrones primarios. Utilizando soluciones estandarizadas, determinar el ndice de acidez de un alimento. Expresar el ndice de acidez obtenido en diferentes unidades de concentracin. A partir de la concentracin de acidez, calcular el pH matemticamente. Teora La acidez es una propiedad que presentan los alimentos y que muchas veces est relacionada con el metabolismo de los organismos vivos de donde proviene y se utiliza con fines analticos para determinar propiedades relacionadas con su conservacin. En la leche y derivados lcteos puede determinar el grado de frescura, es decir, como han sido obtenidos y si se han observado los procedimientos que se siguen para su conservacin. En el caso de la leche cruda, si se deja cierto tiempo en contacto con el aire y a temperatura ambiente, se descompone, detectndose ordinariamente por cambios en el aroma y sabor caractersticos y si es muy avanzada la descomposicin, se presenta separacin en dos o ms capas. Qumicamente, se puede caracterizar un descenso en el pH y un incremento en la acidez correspondiente al cido lctico. No obstante, existen productos madurados donde se busca, de forma controlada, aumentar su acidez. Otro ejemplo es la carne; cuando el ganado ha sido subalimentado o sometido a intenso ejercicio antes del sacrificio, por procesos normales de metabolismo se disminuye el contenido de glucgeno en el msculo, que impide la disminucin del pH y la desnaturalizacin de las protenas al alcanzar su punto isoelctrico, disminuyendo la capacidad de retener agua, propiedad favorable para la textura y la pigmentacin de la carne. El pH queda en valores de 6,6 y la cantidad de cido lctico es muy pequea, produciendo una carne de baja calidad. En frutas y hortalizas se pueden presentar variaciones en su carcter cido debido a la presencia o ausencia de cidos orgnicos provenientes de la degradacin de los carbohidratos que producen principalmente cido ctrico y cido mlico. El contenido de cido vara con las fases de maduracin y senescencia, pero en las frutas tienen un rango de 2,4 (ctricas) hasta 5,0 (banano), mientras que en los vegetales el rango va de 5,0 a 7,0. Los cidos ms abundantes en los tejidos vegetales son el ctrico y el mlico; el primero predomina en las frutas ctricas, fresa y pia y en los vegetales en las papas, leguminosas, tomate y hortalizas de hoja. El cido mlico se encuentra en manzanas, ciruelas, albaricoques y en los vegetales en la lechuga, brcoli y coliflor. Otros cidos importantes son el oxlico que se encuentra en las espinacas y el tartrico en las uvas. En los cereales y derivados, la determinacin de la acidez es una prueba utilizada para evaluar la calidad del grano y de la harina puesto que dependiendo del grado de infestacin

y la humedad pueden ocurrir fermentaciones indeseables, responsables de la aparicin de cidos que normalmente no se encuentran en esos productos. En la determinacin analtica de la acidez se suelen expresar los resultados en el cido ms importante. La frmula y el peso equivalente de los cidos ms comunes son: cido ctrico: (C6H8O7)
CH2 COOH | HO C COOH | CH2 COOH

Eq = P.M./ 3 = 64 g/Eq.

Ka = 8 x 10-4

cido mlico: (C4H6O5)

HO CH COOH | CH2 COOH

Eq = P.M./2 = 67 g/Eq.

cido tartrico: (C4H6O6)

COOH | HO C H | H C OH | COOH

Eq = P.M./2 = 75 g/Eq.

La forma ms sencilla de determinar la acidez de un alimento es por titulacin cido-base. sta es una reaccin qumica que se puede representar, si es entre el cido clorhdrico y el hidrxido de sodio, as: HCl + NaOH NaCL + H2O La reaccin se considera completa cuando el nmero de equivalentes de la solucin valorante es igual al nmero de equivalentes de la solucin del analito. Dicho de otra forma, cuando los miliequivalentes del cido han sido igualados con los miliequivalentes de la base. VA x NA = VB x NB = miliequivalentes (1) Por otra parte, se sabe que los miliequivalentes en gramos de un cido o una base son iguales al Peso Molecular dividido por el nmero de H+ o de OH- utilizados por el cido o la base. En general,
PM + # H o de OH

1000 miliequivalentes =

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Esto permite calcular tambin el nmero de miliequivalentes de las dos sustancias reaccionantes cuando se conocen los volmenes y las normalidades o calcular la normalidad o concentracin de uno de los dos reaccionantes conociendo los miliequivalentes o el peso del otro.

Sin embargo en la prctica cmo se puede detectar el punto final? Se debe encontrar un medio que detecte el punto equivalente. En las titulaciones cidobase hay un cambio brusco del pH al aadir un pequeo exceso del valorante. Por lo tanto, hay dos formas generales de detectar el punto final: con un indicador que detecte el cambio en pH hacindolo manifiesto mediante la aparicin o desaparicin de un color o con un aparato que mida directamente el pH y en el que se puedan seguir con detalle sus cambios. En la presente prctica, se va a emplear el primero, dejando lo referente al pHmetro para una prctica posterior. Un indicador cidobase es en s un cido o una base dbil cuyas distintas formas protonadas tienen diferentes colores. Para hallar el indicador ms apropiado se debe calcular el pH en el punto de equivalencia o conocer el punto final y seleccionar el ms cercano o que coincida con ese cambio. En este caso, se va a emplear la fenolftalena que tiene un rango de viraje entre 8,0 y 9,6, siendo incolora a pH inferior a 8 y rosada a pH superior a 9,6. Una aplicacin inmediata de lo anterior es la titulacin de una solucin desconocida, utilizando soluciones de concentracin conocida. En anlisis de alimentos, lo corriente es valorar soluciones de concentracin desconocida de cidos; Esto se hace utilizando soluciones de concentracin conocida de bases. Sin embargo, a las soluciones de bases no se les puede conocer directamente la concentracin debido a que las ms corrientes (hidrxidos de sodio, potasio y amonio) no permiten su pesada o medicin con un grado de precisin suficiente. Por ello, es necesario despus de preparar sus soluciones, valorarlas con un estndar o patrn primario de tipo cido. Un estndar o patrn primario es una sustancia altamente ionizable, no voltil ni oxidante, muy estable al aire (no debe ser higroscpica en exceso ni delicuescente), de alto peso molecular perfectamente definido y debe permitir su secado a 100-110C sin descomponerse. En la prctica actual, se va a emplear como estndar o patrn primario el biftalato de potasio o ftalato cido de potasio, cuyo P.M. es 204,22 g. Para la valoracin del hidrxido de sodio, se parte de una cantidad conocida de biftalato de potasio, la cual se titula entonces contra la solucin desconocida de hidrxido de sodio, utilizando como indicador la fenolftalena. En el punto final, cuando la solucin cambie de incoloro a rosado, se tendr la siguiente igualdad: NB =
Peso Bif x 1000 204,2 x VB

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Una vez valorada la solucin de hidrxido de sodio, se hacen dos titulaciones adicionales; Se valora una solucin de cido clorhdrico recin preparada y se titula una solucin preparada a partir del jugo o alimento. En el primer caso, aplicando directamente la ecuacin (1), se halla la Normalidad de la solucin. Para el segundo caso, se aplicara una variante: Peso c. Cit. =
VB X NB X 64 1000 = (4)

De los conocimientos generales de qumica vistos en la segunda unidad, se debe recordar que un cido dbil se disocia incompletamente en agua, dando una solucin en la cual la Ka =
H3O Molar cido
+ 2

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De esta ecuacin, se puede despejar H3O+, as: H3O+2 = Ka X Molar cido Por lo tanto, una vez conocida la concentracin del cido en % o cualquier otra unidad, se puede convertir en Molar cido y a partir de la frmula anterior se puede hallar H3O+2 Posteriormente, utilizando la frmula pH = log Se puede despejar el pH.
1 + H3O

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Procedimiento Valoracin de la solucin de Hidrxido de sodio Pesar en balanza analtica, utilizando un vidrio de reloj o un vaso de precipitados de 50 mL, 0,5 g del biftalato de potasio, calidad reactivo analtico, previamente secado a 100110C y conservado dentro del desecador. Registrar el peso exacto en el cuaderno de laboratorio. Pasar el biftalato pesado a un erlenmeyer de 250 ml, ayudndose con un frasco lavador y aadir alrededor de 100 ml de agua destilada, agitando suavemente hasta su disolucin. Agregar 2 gotas de solucin de fenolftalena. Purgar y llenar la bureta con la solucin recin preparada de hidrxido de sodio, enrasando a cero. Titular la solucin de biftalato hasta obtener una coloracin rosa que persista 30 segundos. Registrar en el cuaderno el valor obtenido.

Valoracin de la solucin de cido Clorhdrico Medir con pipeta aforada 25 ml de la solucin de cido clorhdrico. Depositarlos en un erlenmeyer de 250 ml y agregar 2 gotas de solucin de fenolftalena. Desde la bureta ir agregando lentamente con agitacin la solucin de hidrxido de sodio hasta la aparicin de una coloracin dbilmente rosada que persista 30 segundos. Anotar en el cuaderno de laboratorio el volumen de hidrxido empleado. Valoracin de la acidez del alimento Dependiendo de la muestra trada al laboratorio (frutas ctricas, leche, harina, vino, uvas), establecer previamente con el tutor el tratamiento previo por realizar al tipo de muestra o consultar los mtodos definidos por los manuales de laboratorio para obtener la solucin de los cidos del alimento.

Para los alimentos lquidos, generalmente se puede tomar directamente una alcuota de 10 ml, depositarla en un erlenmeyer de 250 ml, agregar 2 gotas de fenolftalena y alrededor de 100 ml de agua destilada, procediendo a titular con la solucin estandarizada de hidrxido de sodio hasta color rosado persistente por 30 segundos. Registrar el volumen utilizado en el cuaderno de laboratorio. En unos pocos casos, habr necesidad de hacer diluciones previas, tomando 10 ml del alimento, depositndolos en un baln aforado de 100 ml y completando a volumen con agua destilada. De esta solucin, se toman alcuotas de 25 ml en erlenmeyers de 250 ml, aadiendo 2 gotas de fenolftalena, 100 ml de agua destilada y goteando la solucin estandarizada de hidrxido de sodio hasta color rosado persistente por 30 segundos. En cualquier caso, se deben calcular las diluciones de tal manera que no se sobrepasen los 25 mL de la escala de la bureta utilizada en la titulacin para minimizar errores de procedimiento, sin perder la exactitud del mtodo. Materiales y equipo Balanza analtica Vidrio de reloj Esptula pequea Soporte Universal Pinzas para bureta Bureta de 25 ml con llave de tefln Estufa de laboratorio Desecador Pinzas cortas para crisol Pipetas aforadas de 1, 10 y 25 ml Balones aforados de 100 y 250 ml Erlenmeyer de 250 ml Vasos precipitados de 50 y 250 ml Frasco lavador Biftalato de potasio R.A. Hidrxido de sodio R.A. cido clorhdrico R.A. Solucin alcohlica de fenolftalena al 1% Tratamiento de los datos e informe Hacer los clculos para encontrar la Normalidad de la solucin de hidrxido de sodio utilizando el volumen empleado en la titulacin y registrarla en el cuaderno. Hacer los clculos para encontrar la Normalidad de la solucin de cido clorhdrico utilizando el volumen empleado en la titulacin y registrarla en el cuaderno. Con el volumen de hidrxido de sodio empleado para titular el alimento y los datos de la dilucin si fue necesario realizar alguna, hacer los clculos para encontrar el porcentaje peso a volumen de acidez, expresada como cido ctrico y registrarla en el cuaderno. Con el porcentaje de acidez hallado, calcular el pH de la solucin y registrarlo en el cuaderno. Buscar en fuentes bibliogrficas apropiadas el porcentaje y tipo de acidez del alimento

utilizado, anotando los resultados hallados en el cuaderno de laboratorio junto con la fuente bibliogrfica utilizada y comparar los resultados obtenidos. Elaborar el informe correspondiente conforme a las indicaciones dadas.

PRCTICA 2 DETERMINACIN DE CLORUROS Objetivos Aplicar los fundamentos de la tcnica analtica volumetra de precipitacin. Describir los cambios que ocurren durante una titulacin argentimtrica. Conocer los fundamentos de los mtodos de Mohr y de Volhard para a determinacin de cloruros. Determinar cuantitativamente los cloruros presentes en una muestra, utilizando el mtodo de Volhard. Expresar el contenido de cloruros en diferentes unidades.

Teora Tal como se estableci en la parte terica de la primera experiencia de laboratorio, al agregar nitrato de plata a una solucin neutra o dbilmente cida de un haluro (cloruro, yoduro, bromuro), se precipita cuantitativamente haluro de plata, de acuerdo a las reacciones: Ag+ + Cl- AgClblanco Ag+ + I- AgIamarillo Ag+ + Br- AgBrcaf Con base en estas reacciones, numerosos qumicos establecieron mtodos para la determinacin cuantitativa de haluros, utilizando soluciones de nitrato de plata de concentracin conocida ya que aunque los haluros de plata formados son sensibles a la luz directa o a la artificial semejante a la diurna, presentndose un oscurecimiento (fundamento de la fotografa), este fenmeno no afecta el resultado final. 5.3.1.Tcnica de Mohr. Utiliza una tcnica directa, aadiendo desde una bureta la solucin de nitrato de plata y como indicador, un cromato alcalino, el cual reacciona con la primera gota en exceso de plata, segn la reaccin: 2Ag+ + CrO4= Ag2CrO4rojo Dando un color rojo a la solucin. En este punto, de acuerdo a la teora general de volumetra, puede decirse que: VAgNO3 X NAgNO3 = meq AgNO3 = meqClSiendo 1000 meqCl- = PMCl- /1 La ventaja que tiene este mtodo es que se pueden valorar directamente las soluciones de nitrato de plata empleando como patrn primario cloruro de sodio R.A. A pesar de la sencillez del mtodo, es poco utilizado sin embargo en el anlisis rutinario, porque el cromato de plata es ms insoluble que el cloruro y en el punto final, el cloruro ya precipitado tiende a transformarse en aquel, lo cual da una cierta imprecisin. 2AgClblanco + CrO4= Ag2CrO4rojo + 2Cl-

Volhard, emplea una tcnica indirecta, por la cual los cloruros de la muestra son precipitados utilizando una solucin en exceso de nitrato de plata. A continuacin, el cloruro de plata formado es retirado de la solucin por filtracin o se asla utilizando ciertos compuestos orgnicos que se adsorben fuertemente eliminndolo de la solucin. Luego, se valora el nitrato de plata que qued sin reaccionar en la reaccin anterior, utilizando una solucin valorada de tiocianato o sulfocianuro de amonio, empleando como indicador una solucin de alumbre frrico amnico, el cual suministra iones Fe+3 que reaccionan con la primera gota en exceso de sulfocianuro dando a la solucin un color rojo, segn las reacciones: Ag+ + CNS- AgCNS blanco Fe+3 + CNS- Fe(CNS)+2rojo El punto final de esta tcnica es ms preciso. Sin embargo, el tiocianato de sodio, potasio o amonio no son patrones primarios o estndar, siendo necesario valorarlos contra soluciones de nitrato de plata las que a su vez se valoran con cloruro de sodio R.A. Se tiene entonces que VAgNO3 X NAgNO3 = meq AgNO3 = meqCl- + meq CNS De donde meqCl- = meq AgNO3 - meq CNS Y adems, meqCNS- = VCNS- X NCNSSiendo 1000 meqCNS- = PM CNS- /1 Un factor de interferencia para cualquiera de las dos tcnicas es la presencia de aniones bromuro, yoduro, tiocianato, cianuro y sulfuro, y otros, todos los cuales precipitan en las condiciones de la determinacin analtica, o la presencia de agentes reductores del catin plata como el estao (II), hipofosfitos, formaldehdo, hidroquinona y celulosa. Para evitar estas interferencias, cuando se trabaja con sustancias de origen orgnico se debe calcinar la muestra antes de realizar el anlisis, ya que las altas temperaturas descomponen todos estos compuestos, volatilizando el bromo y el yodo formados. Procedimiento. Estandarizacin de la solucin de nitrato de plata. Aunque de acuerdo con lo expuesto en la parte terica, el nitrato de plata no es patrn o estndar primario, siendo necesario en trabajos estrictos, la valoracin de sus soluciones contra cloruro de sodio R.A., en trabajos rutinarios o si no se requiere mucha exactitud, se puede asumir que, debido a que rene algunas de las condiciones propias de un estndar primario, puede ser empleado como tal, siendo suficiente con la determinacin exacta de su peso para efectuar el clculo de concentracin de las mismas. Si se decide realizar la estandarizacin por motivos de enseanza o porque no se cuenta con nitrato de plata de pureza suficiente (R.A), pesar utilizando una balanza analtica, en un vidrio de reloj, un pesasustancias o un vaso de precipitados de 50 mL, alrededor de 0,1 g de cloruro de sodio R.A. registrando el peso en el cuaderno de laboratorio. Transferir analticamente la masa pesada a un erlenmeyer de 250 mL, ayudndose con un embudo y

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un frasco lavador. Agregar 50 ml de agua destilada y con pipeta graduada un mililitro de solucin de cromato de potasio al 5 %. Purgar, llenar y llevar a cero la bureta con la solucin de nitrato de plata recin preparada y agregarla lentamente al estndar de cloruro de sodio, hasta obtener un color rojonaranja. Anotar el volumen utilizado en el cuaderno de laboratorio Preparar un blanco tomando un volumen de agua semejante al usado con el estndar, aadir con la punta de la esptula una porcin pequea de carbonato de calcio, agitar, aadir un mililitro de la solucin de cromato de potasio al 5 % y titular con la solucin de nitrato de plata hasta obtener un color rojonaranja. Anotar el valor en el cuaderno de laboratorio como volumen del blanco.

Estandarizacin de la solucin de sulfocianuro o tiocianato Tomar una alcuota de 25 mL de nitrato de plata, depositndola en un erlenmeyer de 250 mL. Agregue 10 mL de cido ntrico 6 M, 50 mL de agua destilada, 5 mL del indicador alumbre frrico amnico y 1 ml de benceno o nitrobenceno. Purgar, llenar y llevar a cero la bureta con la solucin de tiocianato recin preparada y agregarla lentamente sobre el nitrato de plata, con mucha agitacin, hasta obtener un color rojo. Anotar el volumen utilizado en el cuaderno de laboratorio.

Preparacin de la muestra Pesar 0,5 g de sal de cocina utilizando una balanza analtica, en un vidrio de reloj, pesa sustancias o vaso de precipitados de 50 mL, diluir con agua y transferir cuantitativamente a un baln aforado de 100 mL, ayudndose con un embudo si es necesario. Completar a volumen y homogenizar.

Determinacin de cloruros en la muestra De la muestra preparada en el apartado anterior, tomar una alcuota de 10 ml con una pipeta aforada y trasvasarlos a un erlenmeyer de 250 mL. Agregar 10 mL de cido ntrico 6 M, 50 mL de agua destilada y utilizando pipeta aforada aadir 25 ml de la solucin de nitrato de plata previamente estandarizada y 1 ml de benceno o nitrobenceno. Agitar muy bien y aadir 5 mL del indicador alumbre frrico amnico. Purgar, llenar y llevar a cero la bureta con la solucin de tiocianato recin preparada y estandarizada y agregarla lentamente sobre el nitrato de plata sobrante, con mucha agitacin, hasta obtener un color rojo. Anotar el volumen utilizado en el cuaderno de laboratorio.

Materiales y equipos Balanza analtica Soporte universal Pinzas para bureta Esptula Bureta de 25 ml con llave de tefln Pesasustancias de 30 ml Vidrio de reloj

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Vaso de precipitados de 50 ml Baln aforado de 250 ml Baln aforado de 100 ml Pipeta aforada de 25 ml Pipeta aforada de 10 ml Pipeta graduada de 5 ml Erlenmeyer de 250 ml Frasco lavador Probeta de 100 ml Cloruro de sodio R.A. Solucin de nitrato de plata 0,1N Solucin de sulfocianuro de amonio, de sodio o de potasio 0,1N Solucin saturada de alumbre frrico amnico Solucin de cido ntrico 6N Solucin de cromato de potasio al 5% Benceno o nitrobenceno.

Clculos e informe Calcular las normalidades de las soluciones de nitrato de plata y de sulfocianuro de potasio. Con estos datos y los del peso de muestra y teniendo en cuenta la dilucin realizada y las relaciones expuestas, calcular la concentracin en cloruro de sodio de la muestra de sal de cocina en % peso a peso. Elaborar el informe correspondiente conforme a las indicaciones dadas.

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PRCTICA 3 DETERMINACIN DE CENIZAS Y CALCIO Objetivos Aprender la tcnica de determinacin de cenizas en un alimento por calcinacin en mufla elctrica. Realizar la preparacin de una muestra de alimento a partir de sus cenizas con el fin de determinar cuantitativamente sus componentes minerales. Preparar y valorar una solucin de permanganato de potasio. Determinar cuantitativamente el calcio de un alimento por permanganimetra y expresar los resultados en diferentes bases y unidades Aprender a buscar informacin en fuentes bibliogrficas, comparndola con la obtenida en circunstancias reales. Teora Las cenizas corresponden al residuo inorgnico proveniente de la incineracin de la materia orgnica. En los alimentos, su composicin y cantidad depende de la naturaleza del alimento calcinado y del mtodo correspondiente. Los derivados lcteos lquidos tienen del 0,5 al 1 %, mientras que las grasas y los aceites prcticamente no contienen cenizas, las margarinas, mayonesas y aceites para ensaladas contienen principalmente cloruro de sodio; En las frutas, depende del contenido de humedad, frescas pueden contener entre 0,2 y 0,8 % mientras que secas pueden alcanzar el 3,5 %. Las nueces van del 1,5 al 2,5 %. En el pescado del 1 al 2 %, en carnes, especialmente las procesadas, puede llegar al 12 %. Dos de los elementos minerales que generalmente se determinan en las cenizas de la mayora de alimentos son el calcio y el fsforo (harinas, leches y sus derivados). En esta prctica se utilizarn los fundamentos de la permanganimetra con el fin de determinar el contenido de calcio presente en algunas de estas muestras que seleccionar el estudiante segn su inters. En el mtodo ms corriente para obtener las cenizas, la muestra se somete a calefaccin hasta peso constante en una mufla elctrica a 550-600C. El residuo en estas condiciones est formado principalmente por los carbonatos de los metales alcalinos y alcalino trreos o los xidos de los dems metales. As, p.ej., el calcio se tendr como carbonato. Al tratar las cenizas con cido clorhdrico, el carbonato sufre una reaccin ya conocida: CaCO3 + 2 HCl Ca++ + CO2 + H2O + 2ClAl agregar ion oxalato a la solucin que contiene el calcio, precipita oxalato de calcio en un estado cristalino que depende del medio y la temperatura. As, si el medio es alcalino con presencia de amoniaco y cloruro de amonio, a 50-60C y se permite la precipitacin lenta, se obtienen cuantitativamente cristales grandes que permiten su filtracin. Ca++ + C2O4= CaC2O4 El precipitado obtenido se deja madurar manteniendo la temperatura a 50-60C por lo menos hora para que adquiera un tamao adecuado facilitando la filtracin y posterior lavado del

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exceso de oxalatos, que ms adelante puede interferir en la determinacin cuantitativa. Una vez filtrado y lavado el oxalato de calcio (o el de sodio en el caso de la valoracin del permanganato) se hace reaccionar con cido sulfrico para poner en libertad el cido oxlico, segn las reacciones: CaC2O4 + H2SO4 C2O4= + CaSO4 Y Na2C2O4+ H2SO4 C2O4= + 2Na+ + SO4= El cual se valora con una solucin estandarizada de permanganto de potasio, en caliente, para que sea rpida y cuantitativa: C2O4= + MnO4- + 8 H+ Mn++ + 2 CO2+ 4 H2O De donde, VMnO4- X NMnO4- = meq MnO4y meq MnO4- = meqCa++ Un mol de oxalato reacciona con un mol de calcio y los pesos equivalentes dependen del nmero de electrones transferidos por la molcula durante la reaccin, as el oxalato libera dos electrones luego su peso equivalente ser la mitad del peso molecular; mientras que para el calcio ser la mitad del peso atmico. Por consiguiente, 1000 meqCa++ = PACa /2 Se pueden presentar algunas interferencias en el mtodo; todos los metales, excepto los alcalinos forman oxalatos insolubles, sin embargo el magnesio no precipita cuando se tiene el buffer de amoniaco cloruro de amonio. Aunque el permanganato de potasio es un estndar primario, sus soluciones se van reduciendo muy rpidamente, cambiando su concentracin, debido a las partculas de polvo y trazas de sales amoniacales en el agua destilada. Por eso es necesario estandarizarlas en el momento de su uso, lo cual se hace corrientemente con oxalato de sodio que tambin es un estndar primario.

Procedimiento Determinacin de las cenizas. En un crisol de porcelana previamente tarado1 a 500 550 C en la mufla, pesar utilizando una balanza analtica, 5 g de una muestra homogenizada de queso. Registrar los datos en el cuaderno de laboratorio. Calcinar Inicialmente la muestra en la vitrina, utilizando un mechero bunsen hasta que se dejen de emitir humos espesos. A continuacin, manipulndolos con pinzas largas se colocan los crisoles en la mufla, dejndolos all unas tres horas a 500-550C, verificando que

Siempre que utilicemos la expresin material tarado, significa que se ha colocado en la estufa o la mufla por una hora, se ha dejado enfriar y luego se determina exactamente su masa. Se debe manipular con unas pinzas largas para crisol y en un desecador.

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se han logrado cenizas blancas o grises o hasta obtener un peso constante. Para los clculos se utiliza el ltimo dato registrado. Diligenciar el cuadro 3.1. con los datos obtenidos: 3.1. Determinacin de cenizas
Peso crisol vaco a Peso crisol + muestra b Peso de Muestra b - a c Peso crisol + cenizas d Peso de cenizas d - a e % cenizas e x 100 / c

Solubilizacin de las cenizas. Una vez determinado y registrado el peso de las cenizas, se aaden 5 mL de cido clorhdrico (1:1) y se evaporan en la vitrina utilizando un bao de mara. Repetir el tratamiento dos veces ms, llevando los ltimos 5 ml de cido clorhdrico (1:1) a un baln aforado de 100 ml, lavando muy bien el crisol con agua caliente. Completar a volumen con agua destilada. Si se observa algn depsito en el fondo del baln, filtrar una porcin de unos 50 ml. Si la solucin est transparente, omitir el filtrado. Determinacin del calcio. Tomar con pipeta aforada de 25 mL, una alcuota de la solucin resultante de la solubilizacin de las cenizas y pasarla a un vaso de precipitados de 250 mL, calentar a ebullicin, adicionar lentamente 10 mL de la solucin saturada de oxalato de amonio, tres gotas de fenolftalena al 1 %, y lentamente solucin de hidrxido de amonio (1:1) hasta reaccin alcalina agitando con una varilla de vidrio. Mantener la ebullicin por 5 minutos agitando permanentemente y dejar en reposo el precipitado de oxalato de calcio durante una hora en un sitio tibio. Finalmente filtrar por decantacin con papel de filtro cuantitativo y lavar con agua caliente hasta fin de cloruros, pasar el papel con el precipitado a un erlenmeyer de 250 mL, aadir 100 mL de agua destilada y 10 mL de solucin de cido sulfrico (1:1), triturar con una varilla de vidrio para destrozar el papel de filtro y disolver el precipitado, calentar a ebullicin. y titular con la solucin estandarizada de permanganato de potasio 0,1N hasta obtener la coloracin rosada persistente por 30 segundos. Registrar el volumen consumido en el cuaderno de laboratorio.

Materiales y equipo Balanza analtica Soporte universal Trpode de hierro Malla de asbesto Mechero bunsen Mufla elctrica de laboratorio Desecador Pinzas largas para crisol Guantes de carnaza Mortero y mano

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Bao mara de anillos concntricos Crisol o cpsula de porcelana de 30 ml Frasco lavador Baln aforado de 100 ml Pipeta graduada de 5 ml Embudo pequeo Papel de filtro cuantitativo Vaso de precipitados de 50 ml Vaso de precipitados de 400 ml Erlenmeyer de 250 ml Baln aforado de 250 ml Pipeta aforada de 25 ml Pipeta aforada de 10 ml Agitador de vidrio Permanganato de potasio R.A Agua destilada cido sulfrico R.A. Oxalato de sodio R.A. cido sulfrico solucin 1:1 cido sulfrico, solucin al 5% Vol/Vol Nitrato de plata, solucin al 0,5% Oxalato de amonio, solucin saturada Solucin fenolftalena al 1% cido clorhdrico solucin 1:1 Hidrxido de amonio solucin 1:! Clculos e informe Determinar el % de cenizas, diligenciando el cuadro 6.1. A partir del peso de oxalato de calcio y el volumen de permanganato de potasio utilizado, calcular la concentracin de ste en Normalidad. A partir del peso de muestra y de cenizas (cuadro 6.1.), de la alcuota de solucin de cenizas y el volumen de permanganato utilizado en su valoracin calcular el % de calcio en mg Ca por 100 g de cenizas y mg de Calcio por 100 g de muestra. Comparar con los valores dados en los manuales de laboratorio, tablas de composicin de alimentos y otros, determinando el % de error. Elaborar el informe correspondiente conforme a las indicaciones dadas.

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PRCTICA 4 DETERMINACIN DE pH Y CIDO ACTICO EN UN VINAGRE Objetivos Identificar los componentes de un medidor potenciomtrico de pH. Aprender a calibrar y utilizar un medidor de pH. Determinar el pH de un alimento - vinagre. Determinar el contenido de cido actico en un vinagre. Elaborar las grficas de neutralizacin de un cido dbil y un cido fuerte y compararlas. A partir de las grficas de neutralizacin del cido actico y del cido clorhdrico, hallar los volmenes y pH de neutralizacin. A partir del volumen de neutralizacin del vinagre, hallar el % de cido actico. A partir del pH del vinagre, utilizando las relaciones pertinentes, calcular la concentracin de cido actico y compararla con la obtenida a partir del volumen de neutralizacin. Aprender a buscar informacin en fuentes bibliogrficas, comparndola con la obtenida en circunstancias reales

Teora El ndice de acidez de un alimento es la propiedad qumica cuantitativa que puede utilizarse como un parmetro de calidad al estar en estrecha relacin con el pH, factor que permite controlar el efecto perjudicial de algunos microorganismos que son txicos por s mismos o por las toxinas que producen. Se puede definir como la cantidad en gramos o en miligramos presentes en 100 gramos de un alimento. Segn la cantidad presente y considerada como normal, se puede establecer el grado de conservacin del alimento. En esta prctica se tendr la oportunidad de aplicar los principios tericos y metodolgicos de la potenciometra en el registro del pH y su variacin en funcin del titulante en la determinacin de la concentracin de un cido dbil - cido actico - en una muestra comercial de vinagre o de un alimento que ha sido procesado y conservado en esa sustancia y a partir de estas caractersticas, calcular el ndice de acidez del alimento analizado, comparndolos con los obtenidos en las mismas condiciones de trabajo para un cido fuerte. Potenciometra cido base La potenciometra es la medida de una f.e.m. producida en una celda galvnica a travs de la cual la corriente que pasa es virtualmente cero, por lo que no tienen lugar cambios importantes en la concentracin de las especies electroactivas y la variable que interesa es la modificacin del potencial de un electrodo sencillo (semicelda) en que tiene lugar la variacin de la concentracin de uno o de ambos componentes. Como el potencial de un electrodo sencillo se puede medir directamente, el par de electrodos de la celda consiste en un electrodo de referencia que mantiene el potencial constante y un electrodo indicador cuyo potencial depende de la composicin de la solucin electroltica que en nuestro caso tiene iones hidronio e hidroxilo. No vale la pena repetir aqu todos los conceptos concernientes a las celdas galvnicas y potenciomtricas, pero el estudiante, debe revisar los captulos correspondientes del mdulo de qumica analtica. Igualmente, debe tener presente que el medidor de pH desarrollado a

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partir de los conceptos ya estudiados, es un potencimetro que mide diferencias de potencial muy pequeas a travs de una celda potenciomtrica muy refinada formada por electrodos, siendo el ms corriente de stos, el combinado, que incluye el electrodo de referencia y el indicador. La potenciometra cido- base permite la elaboracin de las curvas de titulacin al poder registrar la variacin del pH (o de la f.e.m.) en funcin del volumen del titulante. El comportamiento del sistema que se est midiendo es exactamente el mismo que se discuti en la prctica de volumetra cido-base, slo que la deteccin del punto de equivalencia se hace mediante la utilizacin del medidor de pH. Concentracin de hidronios y pH Una de las propiedades ms importantes del agua, que le ha valido su ttulo como solvente universal es la posibilidad de establecer enlaces de hidrgeno ya sea con sustancias orgnicas o inorgnicas. La interaccin con algunas sustancias de carcter inico le permiten modificar su conductividad elctrica y la reaccin consigo misma u autoprotlisis le confiere la capacidad ambivalente de ser cido o base, lo cual se expresa mediante la reaccin: H2O + H2O
cido conjugado cido Base

H3O+

OH-

(1)

Base conjugada

Desde el punto de vista del equilibrio qumico, se puede expresar la constante de equilibrio para esta reaccin as:
KEQ = [H3O+] [OH-] [H2O]
2

(2)

Teniendo en cuenta que en general se trabaja con un litro de solucin, al hallar su molaridad, se encuentra que el denominador es muy grande y casi constante: [H2O] = 55,6 g/mol (3)

por lo que reemplazando en la ecuacin anterior y despejando, se tiene la siguiente relacin: KEQ(55,6)2 = [H3O+] [OH-] (4) Esta expresin de equilibrio se denomina constante del producto inico del agua KW , que a temperatura ambiente tiene un valor de 1X10- 14, de donde se deduce que en el agua pura la concentracin molar de los iones hidronio y de los iones hidroxilo es de 1X10- 7: KW = [H3O+] [OH-] = 1X10- 14 [H3O+] = [OH-] = 1X10- 7 (5) (6)

Para no trabajar con potencias negativas, se comenz a trabajar con el concepto de pK, por el cual pK = log 1/ K y por extensin se tienen el pH y el pOH, as: pH = log 1/ [H3O+] y pOH = log 1/ [OH-] de tal manera que reemplazando en (5), pH + pOH = 14

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cidos y bases dbiles y fuertes Un protn no existe solo en solucin sino que trata de asociarse a una base, en nuestro caso al agua para formar el hidronio (H3O+); La mayor o menor facilidad de ceder o recibir protones determina la fuerza de los cidos y las bases. As, los cidos y las bases fuertes los ceden o reciben fcilmente, mientras que los considerados dbiles lo hacen muy lento y hasta cierto lmite estableciendo un equilibrio qumico donde se identifica un par de cidos conjugados y de bases conjugadas. La disociacin de los cidos y las bases dbiles es una reaccin reversible que se puede representar as: MA [M+] [A-] Su ecuacin de equilibrio qumico ser:
[M ] [A ] KEQ = [MA]
(donde el smbolo [ ] significa moles/L).
+ -

Los cidos y bases monoprticas dbiles son sustancias que al disolverse en agua pierden o ganan un protn, hasta alcanzar un equilibrio qumico de poca extensin, como ocurre con los cidos frmico, actico y lctico o con el amoniaco: CH3COOH + H2O CH3COO- + H3O+
Actico

NH3 + H2O NH4+ + OHAmonaco

Las constantes de equilibrio son: [CH3COO-] [H3O+]

Ka = [CH3COOH] Kb = [NH4 ] [OH ] [NH3]
+ -

Puesto que para la mayora de cidos y bases dbiles, los valores de Ka y Kb son menores de 10-5, se pueden reemplazar por las siguientes expresiones:
[H3O ] Ka =
+ 2

[OH ] Kb = [NH3]

- 2

[CH3COOH]

De tal manera que por ejemplo, en el caso de un cido dbil, se puede despejar su [H3O+],
as:

[H3O+] 2 = [CH3COOH] x Ka (Ka del cido Actico = 1,7 x 10-5) En el caso de un cido fuerte, la [H3O+] es directamente proporcional a la concentracin del cido:
[H3O ] = [cido]
+

Manejo del medidor de pH Para la descripcin que sigue, se tiene en cuenta la Figura 7.1. la cual se ajusta en general a la de un medidor de pH tpico.

20

8 24
medidor de pH
3

3
C

5 4

4
FUNCION mV/pH pH

Figura 7.1. Esquema de la pantalla de control de un medidor de pH 1- Indicador de encendido. Permite conocer si el aparato est conectado a la red de energa elctrica. El testigo estar luminoso cuando el botn de encendido se encuentre en la posicin ON. 2- Pantalla de lectura. Suministra el valor de la medida que se ha realizado con el equipo. Por lo general da dos tipos de lectura: en unidades de pH o en milivoltios cuando se est determinando una f.e.m. (Dependiendo del modelo, en esta misma pantalla es posible observar otra informacin, por ejemplo, temperatura, etc.) 3- Compensador manual de temperatura. Este botn permite seleccionar la temperatura en que se quiere realizar la medicin de pH o de la f.e.m., con el fin de asegurar su reproducibilidad. 4- Botn para ajuste del pH neutro. Permite calibrar este valor en la escala de pH. 5- Botn para ajuste de la pendiente. Interviene en la calibracin de la escala de pH, especialmente para asegurar la reproducibilidad de la medida que se va a realizar con la muestra. 6- Botn para seleccionar las funciones. Permite establecer el rango de medicin del equipo ya sea en unidades de pH (medidor de pH) o en milivoltios (potencimetro). En el procedimiento se especificar el uso de cada uno de los anteriores controles.

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Procedimiento. Calibracin del medidor de pH Conectar el aparato. Algunos de ellos necesitan estar enchufados algunos minutos antes de ser utilizados ya que requieren estabilizar sus circuitos. No olvidar que los electrodos deben estar ya conectados al equipo antes de encenderlo. Mientras se estabiliza el equipo, disponer de dos vasos de precipitados de 100 mL muy limpios y secos: en el primero colocar unos 50 mL de la solucin buffer estndar de pH = 7,0, en el segundo 50 mL de la solucin buffer de pH = 4,0 En el medidor de pH, seleccionar en el botn (3) el valor de la temperatura que tengan las soluciones buffer y la muestra y con el botn (6) , seleccionar medicin de pH. Retirar la cubierta del electrodo, lavarlo con agua destilada utilizando un frasco lavador, recogiendo las aguas de lavado en un vaso de precipitados. Secar suavemente el electrodo con un trozo de papel de filtro. Sumergir el electrodo en la solucin buffer de pH = 7,0. Esperar hasta que estabilice la lectura en la pantalla en ese valor, si no lo hace, con el botn (4) ajustarlo al de la solucin buffer (una vez realizado el ajuste, no volver a mover este botn durante la sesin de trabajo). Sumergir el electrodo completamente seco en la solucin buffer de pH = 4,0 y esperar hasta que se estabilice a la lectura del buffer. Si no ocurre ajustarlo utilizando el botn (5) ; Alcanzado el valor, por ningn motivo se debe volver a tocar ese botn durante el resto de la sesin de trabajo. El medidor de pH se encuentra calibrado. Dejarlo con el botn (6) en la posicin neutra. Mientras se efectan las mediciones, se debe mantener el electrodo sumergido en agua destilada, secndolo cada vez que se vaya a utilizar. Lectura del pH de la muestra Tomar en un vaso de precipitados de 100 ml unos 50 ml del vinagre, retirar el electrodo del agua destilada, secarlo suavemente con papel de filtro y sumergirlo en el vinagre. Mover el botn (6) a la posicin de medicin de pH y esperar a que se estabilice la lectura. Anotarla en el cuaderno de laboratorio. Neutralizacin del cido clorhdrico Hacer un montaje con el soporte universal, un agitador magntico, las pinzas para bureta, una bureta de 25 ml y el electrodo de manera que al colocar un vaso de precipitados de 250 ml, la bureta queda aproximadamente en la mitad del vaso. Tomar con pipeta aforada una alcuota de 25 ml de solucin de cido clorhdrico 0,1N y depositarla en un vaso de precipitados de 250 ml, aadir 50 ml de agua destilada y colocar el vaso en el montaje descrito de manera que la bureta quede aproximadamente en la mitad del vaso y el electrodo quede sumergido sin tocar las paredes ni el fondo del vaso. Agregar un imn recubierto de tefln. Purgar, llenar y llevar a cero la bureta con solucin de hidrxido de sodio 0,1N, Colocarla en

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el montaje anterior con las pinzas para bureta. Retirar el electrodo del agua destilada, secarlo suavemente con papel de filtro y sumergirlo en el vaso de precipitados. Encender el agitador magntico y graduarlo en una velocidad apropiada. Mover el botn (6) a la posicin de medicin de pH, esperar a que se estabilice la lectura y comenzar a agregar el hidrxido de sodio, en porciones de 0,5 ml al comienzo, anotando los volmenes agregados y los pH ledos en el cuaderno de laboratorio. En la medida en que se vayan viendo las variaciones en el pH, ir disminuyendo los volmenes de NaOH agregados, de tal manera que habr una parte en que se debern aadir volmenes de 0,1 ml. Con los datos tomados, elaborar una tabla como la siguiente: Tabla 4.1. Neutralizacin del cido clorhdrico
Vol NaOH
0 0,5 1 1,5 etc. 0 - 0,5 - 0,5 - 0,5 etc. Lectura1 Lectura2 Lectura3 Lectura4 etc. 0 Lectura1 Lectura2 Lectura2 Lectura3 Lectura3 Lectura4 etc. 0 Lectura1 Lectura2 / 0,5 Lectura2 Lectura3 / 0,5 Lectura3 Lectura4 / 0,5 etc.

Vol

pH

pH

pH / Vol

Continuar agregando hidrxido de sodio y anotando las lecturas hasta que se alcance un pH entre 10 y 11. Al terminar, detener el agitador magntico, girar el botn (6) a la posicin de cero, retirar el electrodo, enjuagarlo y sumergirlo en agua destilada.

Neutralizacin del vinagre Tomar con pipeta aforada 25 ml del vinagre y llevarlos a un baln aforado de 250 ml, completando a volumen con agua destilada Utilizar el mismo montaje del apartado anterior. Tomar con pipeta aforada una alcuota de 25 ml de solucin preparada anterior y depositarla en un vaso de precipitados de 250 ml, aadir 50 ml de agua destilada y colocar el vaso en el montaje de manera que la bureta quede aproximadamente en la mitad del vaso y el electrodo quede sumergido sin tocar las paredes ni el fondo del vaso. Agregar un imn recubierto de tefln. Llenar y llevar a cero la bureta con la solucin de hidrxido de sodio 0,1N, Colocarla en el montaje anterior con las pinzas para bureta. Retirar el electrodo del agua destilada, secarlo suavemente con papel de filtro y sumergirlo en el vaso de precipitados. Encender el agitador magntico y graduarlo en una velocidad apropiada. Mover el botn (6) a la posicin de medicin de pH, esperar a que se estabilice la lectura y comenzar a agregar el hidrxido de sodio, en porciones de 0,5 ml inicialmente, anotando los volmenes agregados y los pH ledos en el cuaderno de laboratorio. En la medida en que se vayan viendo las variaciones en el pH, ir disminuyendo los volmenes de NaOH agregados, de tal manera que habr una parte en que se debern aadir volmenes de 0,1 ml. Con los datos tomados, elaborar una tabla como la siguiente: Tabla 4.2. Neutralizacin del vinagre
Vol NaOH
0 0,5 1 1,5 0 - 0,5 - 0,5 - 0,5 Lectura1 Lectura2 Lectura3 Lectura4 0 Lectura1 Lectura2 Lectura2 Lectura3 Lectura3 Lectura4 0 Lectura1 Lectura2 / 0,5 Lectura2 Lectura3 / 0,5 Lectura3 Lectura4 / 0,5

Vol

pH

pH

pH / Vol

23

etc.

etc.

etc.

etc.

etc.

Continuar agregando hidrxido de sodio y anotando las lecturas hasta que se alcance un pH entre 10 y 11. Al terminar, detener el agitador magntico, girar el botn(6) a la posicin de cero, retirar el electrodo, enjuagarlo y sumergirlo en agua destilada. Materiales y equipo Medidor de pH Electrodo combinado Vaso de precipitados de 250 ml Vaso de precipitados de 100 ml Soporte universal Pinzas para bureta Agitador magntico Imanes recubiertos en tefln Bureta de 25 ml llave de tefln Pipeta aforada de 10 ml Pipeta aforada de 25 ml Baln aforado de 250 ml Frasco lavador Solucin buffer pH 7,0 Solucin Buffer pH 4,0 Hidrxido de sodio 0,1N cido clorhdrico 0,1N Clculos e informe A partir de los valores de pH hallados para el vinagre y el cido clorhdrico, calcular las [H3O+] y las [cido], utilizando las relaciones de la seccin 7.3. Expresarlas como % peso a volumen. Comparar con los datos obtenidos en manuales, tablas de composicin, etc. Con los datos de la tabla 7.1. elaborar una grfica en papel milimetrado, de tal manera que en el eje x se tenga el volumen de NaOH y en el eje y pH / vol. A partir de ella, hallar el volumen de neutralizacin del cido clorhdrico. Con los datos de la tabla 7.1. elaborar una grfica en papel milimetrado, de tal manera que en el eje x se tenga el volumen de NaOH y en el eje y el pH. A partir de ella, interpolando el valor hallado en la grfica anterior para el volumen de neutralizacin, hallar el pH de neutralizacin del cido clorhdrico. Con este pH, calcular la [H3O+] para el cido clorhdrico. Compararla con la obtenida por lectura directa del pH. Con los datos de la tabla 7.2. elaborar una grfica en papel milimetrado, de tal manera que en el eje x se tenga el volumen de NaOH y en el eje y pH / vol. A partir de ella, hallar el volumen de neutralizacin del cido actico. Con los datos de la tabla 7.1. elaborar una grfica en papel milimetrado, de tal manera que en el eje x se tenga el volumen de NaOH y en el eje y el pH. A partir de ella, interpolando el valor hallado en la grfica anterior para el volumen de neutralizacin, hallar el pH de neutralizacin para el cido actico. Con este pH, calcular la [H3O+] para el cido actico. Compararla con la obtenida por lectura directa del pH.

24

Comparar las grficas de volumen de neutralizacin Vs pH obtenidas para los dos cidos. Qu diferencias y semejanzas se encuentran? Cmo se explican? Elaborar el informe correspondiente conforme a las indicaciones dadas.

25

PRCTICA 5 ESPECTROFOTOMETRA VISIBLE I CURVA DE ABSORCIN Objetivos Aprender a preparar patrones para elaborar una curva de calibracin. Identificar los componentes de un espectrofotmetro Uv/Vis. Aprender a calibrar y utilizar un espectrofotmetro. Elaborar la curva de absorcin caracterstica de un compuesto qumico. Determinar la longitud de onda ptima para un anlisis espectrofotomtrico. Teora Espectrofotometra Se da el nombre general de espectrofotometra o mtodos espectrofotomtricos a los mtodos de anlisis qumico basados en la absorcin de energa radiante de cualquier regin del espectro electromagntico, en particular Infrarrojo, Visible, Ultravioleta y Rayos X. Prcticamente toda sustancia que al solubilizarse produce una solucin que absorba radiacin en los intervalos mencionados, es susceptible de ser usada en estos mtodos. De ah la importancia de esta metodologa para el anlisis de sustancias tanto orgnicas como inorgnicas. Bloques instrumentales Los equipos usados para esta tcnica son los colormetros, fotmetros y espectrofotmetros, los cuales se diferencian bsicamente en sus componentes, que les confieren mayor o menor sensibilidad para detectar y registrar pequeas diferencias de intensidad de energa, de una longitud de onda determinada, entre la emitida por una fuente y la absorbida por pequeas cantidades de la sustancia absorbente, en orden creciente de sensibilidad y complejidad desde los colormetros, ms sencillos y menos sensibles, pasando por los fotmetros, hasta los espectrofotmetros. En esta prctica se va a emplear un espectrofotmetro Visible, por lo que la descripcin general se refiere a estos equipos. En la Figura 5.1. se esquematiza un diagrama de bloques que ilustra los componentes bsicos de los equipos utilizados en estas tcnicas: Figura 5.1. Bloques fundamentales de los espectrofotmetros.

FUENTE DE ENERGA RADIANTE

CELDA PARA LA MUESTRA

MONOCROMADOR
(3) (1) (2) (4)

DETECTOR

Fuentes de energa radiante Deben cumplir ciertos requisitos bsicos para poderse emplear en anlisis qumico. La ms

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utilizada es una lmpara de wolframio, accionada por una fuente de energa elctrica de voltaje regulado. Produce radiacin principalmente en el rango visible, con un porcentaje importante en el cercano infrarrojo el cual sin embargo, no se puede utilizar para anlisis debido a la temperatura tan baja y al material del bulbo que evita su transmisin adecuada. Monocromadores Tienen como funcin seleccionar los fotones de una longitud de energa determinada. Su eficiencia aumenta desde los monocromadores de filtro hasta los de rejilla pasando por los de prisma. Los equipos ms sencillos como los colormetros emplean monocromadores de filtro, en tanto que los fotmetros usan de prisma o de rejilla y los espectrofotmetros, rejilla, complementada con lentes y espejos. Los monocromadores de prisma, dependiendo de su composicin, dispersan la energa incidente en rayos de diferente longitud de onda, que siguen diferente camino dentro del prisma y al emerger del monocromador, tal como esquematiza la Figura 8.2. Utilizando un mecanismo manual o automtico que permite hacer girar el prisma sobre su eje, se puede seleccionar la radiacin de la longitud de onda requerida para el anlisis de tal manera que a la muestra y al detector solamente llega la radiacin seleccionada. Figura 5.2. Esquema de un monocromador de prisma

Luz blanca incidente

energa emergente

prisma Para el rango visible, los prismas se elaboran de vidrio y para el Uv de cuarzo fundido.

radiaciones de diferente

Celdas para la muestra En espectrofotometra Visible y Ultravioleta que son las ms comunes, se emplean celdas de vidrio y cuarzo, respectivamente, cilndricas o rectangulares para soluciones acuosas o de solventes orgnicos, construidas de tal manera que la distancia entre sus paredes se conoce con precisin, generalmente de 1 cm y corresponde al paso de luz. Detectores Los ms usados son clulas fotoelctricas, con diferentes modelos dependiendo del rango de longitud de onda y de la casa fabricante. Generalmente se disean para que comuniquen su respuesta a un registrador o actualmente para que tengan una salida que se puede conectar a un computador.

Espectros de absorcin Son las grficas obtenidas al localizar en papel milimetrado los pares de coordenadas longitud de onda en el eje de las X vs Absorcin en % de Transmitancia en el eje de las Y. En ellas se aprecian las fluctuaciones de mximos y mnimos obtenidas para la muestra al ir variando la y registrar la Transmitancia obtenida. En compuestos orgnicos, los espectros obtenidos son muy complejos con varios mximos y mnimos, en tanto que en compuestos

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inorgnicos, generalmente se obtienen dos mximos, siendo, en cualquier caso, el mayor de ellos el que define la longitud de onda de mxima absorcin, que es una caracterstica del compuesto en el solvente usado. Manejo del espectrofotmetro Para el manejo del espectrofotmetro, referirse a la Figura 8.3. Figura 8.3. Diagrama de un espectrofotmetro y sus controles principales
1 3 4 2

(1) Pantalla de lectura, donde dependiendo de la posicin del control 2, se pueden observar las lecturas en Absorbancia, %T u otras, segn el modelo de instrumento. (2) Control para cambiar la lectura del instrumento. (3) Portaceldas. (4) Control de longitud de onda (5) Encendido y 0%T (6) Ajuste 100%T

Procedimiento Preparacin de la solucin de trabajo De la solucin patrn de permanganato de potasio suministrada, (0,02N), tomar una alcuota de 25 ml con pipeta aforada y llevar a un baln aforado de 100 ml, completando a volumen con agua destilada.

Preparacin de los patrones de lectura Colocar la solucin de trabajo en la bureta. Marcar 10 tubos de ensayo e ir agregando solucin de trabajo, segn la Tabla 8.1. Con otra bureta, llena con agua destilada, ir completando el volumen de cada tubo hasta 15 cm3. Tapar los tubos con cuadritos de papel celofn y agitarlos suavemente, sin introducir aire, para homogenizar las soluciones. Conservar al abrigo de la luz, en las gavetas de cada grupo. Tabla 5.1. Preparacin de los patrones de lectura
N tubo 1 2 3 4 Alcuota Solucin de trabajo ml 1 2 3 4 Volumen de agua destilada 14 13 12 11 KMnO4 mg/ 15 ml KMnO4 mg/ml Mn mg/litro

28

5 6 7 8 9 10 7 8 9 10

5 6 8 7 6 5

10 9

Elaboracin de la grfica de absorcin Para el manejo del espectrofotmetro, referirse a la Figura 5.3. Ajuste del instrumento Conectar el instrumento a 110 voltios, encenderlo con el botn (5) y dejar que se estabilice durante diez minutos. Lectura de la curva espectral Elaborar en el cuaderno de laboratorio una tabla como la N 5.2. Tabla N 5.2.
Longitud de onda Porcentaje de Transmitancia %T

380 390 etc.

Leer Leer etc.

Girar el dial (4) de longitud de onda hasta el valor de 380 nm. Con el botn (2), seleccionar las lecturas en %T. Con el portaceldas (3) vaco, girar el botn (5) hasta que la escala en la pantalla (1) seale 0%T. Abrir el portaceldas y colocar una celda con agua destilada (blanco de reactivos). Girar el botn (6) hasta que la escala seale 100%T. Llenar otra celda con el patrn del tubo N5 y sin mover ninguno de los controles del aparato, leer en la pantalla el valor de %T y anotarlo en la tabla elaborada. Retirar la celda del patrn; Con el portaceldas vaco cambiar la longitud de onda a 390 nm y con el botn (5) rectificar el 0%. Colocar en el portaceldas el tubo con agua destilada y ajustar con (6) el 100%T. Retirar el blanco del portaceldas, colocar en su lugar el patrn N 5 y sin mover ningn control, observar la lectura en la pantalla y anotarla en la Tabla 8.2. en el cuaderno de laboratorio. Continuar cambiando y registrando los valores de %T obtenidos hasta el lmite de longitud de onda del equipo, haciendo las lecturas en los alrededores de las menores transmitancias

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con la mnima divisin de la escala que permita el aparato. Al finalizar, guardar el patrn N 5 para la siguiente prctica. Materiales y equipos Espectrofotmetro Vis Celdas de lectura Agua destilada Solucin patrn de KmnO4 0,02N Gradilla para tubos de ensayo 10 tubos de ensayo Soporte universal Pinzas para bureta Bureta de 25 o 50 ml con llave de tefln Pipeta aforada de 25 ml Baln aforado de 100 ml Papel celofn

Clculos e informe Teniendo en cuenta la dilucin de la solucin patrn, de KmnO4 0,02N y las diluciones efectuadas, hacer los clculos y completar la tabla N 8.1. Con los datos de la Tabla N 8.2., elaborar en papel milimetrado una grfica de tal manera que en el eje X se siten los valores de longitud de onda y en el eje Y los valores correspondientes de %T. A partir de la grfica anterior, determine visualmente la longitud de onda a la cual se obtuvo la menor lectura de %T y reportarla como longitud de onda de mxima absorcin. Elaborar el informe correspondiente, siguiendo las pautas dadas en el Apndice 1.

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PRCTICA 6 ESPECTROFOTOMETRA VISIBLE II CURVA DE CALIBRACIN Objetivos

Leer en un espectrofotmetro los valores de %T para una serie de soluciones preparadas

a partir de una solucin de trabajo

Utilizando la ley de Beer Lambert, convertir los valores de %T en Absorbancia.

Elaborar la grfica o curva de calibracin para el manganeso. Determinar estadsticamente la mejor recta que se ajuste a la curva anterior. A partir de la ecuacin de la recta ajustada, obtener la concentracin de una solucin problema.

Teora Ley de Beer Lambert A partir de investigaciones, se ha determinado que el nmero de fotones absorbidos es directamente proporcional al nmero de tomos o molculas absorbentes presentes en la muestra. Entonces, si sobre la muestra contenida en un recipiente transparente (celda) se hace incidir una radiacin, al otro lado del recipiente se obtendr una radiacin de menor intensidad. Esto se puede representar esquemticamente en la Figura 6.1. siguiente: Figura 61. Diagrama fundamental de la absorcin de energa radiante I0 Radiacin incidente
Solucin en anlisis Concentracin c

I Radiacin transmitida

I < I0 b En la cual, se denomina intensidad de radiacin (I) el nmero de fotones por unidad de tiempo y de volumen, siendo I0 la radiacin incidente de longitud de onda , b el camino que recorre la radiacin dentro de la muestra con una concentracin de la especie absorbente en unidades de peso/volumen c e I la radiacin transmitida de longitud de onda . Los investigadores Beer y Lambert, descubrieron la ley combinada de su nombre que establece que:
I0 Log

donde:

= a.b.c. = A I a = Constante denominada Absortividad b = Camino recorrido

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c= Concentracin de la especie absorbente en unidades de peso/volumen. y A = Absorbancia Adems, el trmino I0 / I se denomina Transmitancia, siendo su smbolo T y I0 / I X 100 = %T. Igualmente, se puede establecer que la Absorbancia es igual al logaritmo de la diferencia del porcentaje de la luz incidente y el porcentaje de luz transmitida; Puesto que la luz incidente es el 100%, se puede escribir que: A = log (100% - %T) = 2 log %T Manejo del espectrofotmetro Para el manejo del espectrofotmetro, referirse a la Figura 6.2. Figura 6.2. Diagrama de un espectrofotmetro y sus controles principales
1 3 4 2

(1) Pantalla de lectura, donde dependiendo de la posicin del control 2, se pueden observar las lecturas en Absorbancia, %T u otras, segn el modelo de instrumento. (2) Control para cambiar la lectura del instrumento. (3) Portaceldas. (4) Control de longitud de onda (5) Encendido y 0%T (6) Ajuste 100%T Ajuste por mnimos cuadrados En la obtencin de datos experimentales, como los obtenidos en los mtodos espectrofotomtricos, en los que un conjunto de ellos son funcin de otro conjunto, se obtiene con frecuencia una dispersin de puntos por los que supuestamente pasa una lnea recta. Se debe determinar entonces por donde pasa la recta Y = ax + b, donde a = pendiente de la recta y b = corte con el eje x de tal manera que ligue lo ms cercanamente posible a la mayor cantidad de dichos puntos. La forma ms sencilla de hacerlo es emplear una calculadora que tenga la funcin correspondiente, con lo cual solamente se deben ir entrando las parejas de datos xy y al terminar, arroja como resultados los valores de los parmetros a y b y el coeficiente de

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linealidad r. Si no se dispone de una calculadora con esta funcin, se pueden hallar a y b en la siguiente forma, tomando como modelo el ejemplo de la Tabla 6.1. Tabla N 6.1. Ejemplo de valores xy para clculo de mnimos cuadrados
N1 Concentracin Absorbancia ppm (X1) (y1) 1 5 0,071 2 10 0,145 3 15 0,210 4 20 0,285 5 25 0,335 75 1,046 (X1)2 = 5625

(X1) (y1) 0,355 1,450 3,150 5,700 8,375 19,030

(X1) 25 100 225 400 625 1375

Reemplazando estos valores en las ecuaciones para hallar los parmetros a y b, se tiene: (5) (19,030) (75) (1,046) a= = 13,26 x 10 -3 (5) (1375) (5625) b= (1375) (1,046) (75) (19,030) = 8,8 x 10 -3 (5) (1375) (5625)

El valor de b se hace igual a cero, porque cualquier curva de calibracin sencilla debe pasar por el origen2. Por consiguiente, la ecuacin de la grfica que se ajusta a los puntos de la Tabla N9.1.ser: A = 13,26 x 10 3c Con esta ecuacin, se vuelven a calcular los valores de Absorbancia para cada concentracin, obtenindose los de la Tabla 6.2 Tabla N 6.2. Absorbancia ajustada
Concentracin Absorbancia ajustada 0,067 0,134 0,200 0,267 0,334

ppm (X1)
5 10 15 20 25

Con los datos de la Tabla N 6.2. se traza la recta que sirve como curva de calibracin de trabajo.

Sin embargo, depende del tipo de grfica; Si se hace el mtodo de adicin estndar, el valor numrico de b obtenido por el mtodo de mnimos cuadrados es completamente vlido.

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Procedimiento Elaboracin de la curva de calibracin Ajuste del instrumento Conectar el instrumento a 110 voltios, encenderlo con el botn (5) y dejar que se estabilice durante diez minutos.

Lectura de los patrones y a solucin problema Elaborar en el cuaderno de laboratorio una tabla como la N 6.3. Tabla N 6.3.
N1
2

Mn mg/litro (X1) 1 2 3 4 5

Absorbancia (y1) (X1) (y1) (X1)

6 7 8 9 10 (X1)2 = P P(dil) Donde los valores de la columna 2 son los calculados para la ltima columna de la Tabla N 51. de la Prctica 5. Girar el dial (4) de longitud de onda hasta el valor de de mxima absorcin obtenido en la Prctica 5. Con el botn (2), seleccionar las lecturas en A. Con el portaceldas (3) vaco, girar el botn (5) hasta que la escala en la pantalla (1) seale 0%T. Abrir el portaceldas y colocar una celda con agua destilada (blanco de reactivos). Girar el botn (6) hasta que la escala seale 100%T. Llenar otra celda con el patrn del tubo N1 y sin mover ninguno de los controles del aparato, leer en la pantalla el valor de A y anotarlo en la tabla elaborada. Retirar la celda del patrn, colocar en su lugar el patrn N 2 y sin mover ningn control, observar la lectura en la pantalla y anotarla en la Tabla 9.3. en el cuaderno de laboratorio.

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Continuar cambiando los patrones en el portaceldas, sin mover los controles del aparato y registrando los valores de A obtenidos hasta leerlos todos. Finalmente leer la muestra problema. Anotar todos los datos obtenidos en la Tabla N 9.3 en el cuaderno de laboratorio. Si el valor ledo para la muestra problema, est por encima del mayor obtenido para los patrones, hacer una dilucin, tomando 25 ml con una pipeta aforada, llevndolos a un baln aforado de 50 ml y completando a volumen con agua destilada, leyendo esta solucin y registrando el valor de A obtenido en la Tabla N 9.3 en el cuaderno de laboratorio. Ajuste por mnimos cuadrados Con una calculadora corriente, calcular y completar la Tabla N 6.3. y a partir de los datos hallados, calcular a y b de acuerdo a lo expuesto en un apartado anterior Con los valores hallados para a y b, reemplazar en A= bx +c Y haciendo c= 0, calcular los diferentes valores de A, llenando la Tabla 6.4. Tabla N 6.4. Absorbancia ajustada
Mn Absorbancia ajustada

mg/litro (X1)

Con los datos de 6.4. Trazar en una hoja de papel milimetrado la grfica, cuidando de tomar en el eje de las x los valores de concentracin y en el eje de las y los de Absorbancia. Trazar la recta correspondiente y utilizando el valor de Absorbancia leda para la muestra (o su dilucin), interpolar en la recta obtenida para calcular el valor de la concentracin de la muestra.

Materiales y equipos Espectrofotmetro Vis Celdas de lectura Agua destilada Soluciones de KmnO4 preparadas en la Prctica N8 Gradilla para tubos de ensayo 10 tubos de ensayo Pipeta aforada de 25 ml Baln aforado de 50 ml

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Clculos e informe Diligenciar completamente las Tablas pedidas, a partir de ellas, elaborar la grfica solicitada en papel milimetrado y finalmente hallar la concentracin de la solucin problema. Con toda esta informacin, Elaborar el informe correspondiente, siguiendo las pautas dadas en las Guas para elaboracin de informes.

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