Taller de Laboratorio 2011 Pablo Manduca

EXPERIENCIA DE SACHS
Fundamento Terico: La ms importante funcin realizada por los cloroplastos es la fotosntesis, proceso en la que la materia inorgnica es transformada en materia orgnica (fase oscura) empleando la energa bioqumica (ATP) obtenida por medio de la energa solar, a travs de los pigmentos fotosintticos y la cadena transportadora de electrones de los tilacoides (fase luminosa). Otras vas metablicas de vital importancia que se realizan en el estroma, son la biosntesis de protenas y la replicacin del ADN.

Fase luminosa o fotoqumica La energa luminosa que absorbe la clorofila se transmite a los electrones externos de la molcula, los cuales escapan de la misma y producen una especie de corriente elctrica en el interior del cloroplasto al incorporarse a la cadena de transporte de electrones. Esta energa puede ser empleada en la sntesis de ATP mediante la fotofosforilacin, y en la sntesis de NADPH. Ambos compuestos son necesarios para la siguiente fase o Ciclo de Calvin, donde se sintetizarn los primeros azcares que servirn para la produccin de sacarosa y almidn. Los electrones que ceden las clorofilas son repuestos mediante la oxidacin del H2O, proceso en el cual se genera el O2 que las plantas liberan a la atmsfera. Fase oscura o biosinttica En la fase oscura, que tiene lugar en la matriz o estroma de los cloroplastos, tanto la energa en forma de ATP como el NADPH que se obtuvo en la fase fotoqumica se usa para sintetizar materia orgnica por medio de sustancias inorgnicas. La fuente de carbono empleada es el dixido de carbono, mientras que como fuente de nitrgeno se utilizan los nitratos y nitritos, y como fuente de azufre, los sulfatos. Sntesis de compuestos de carbono: descubierta por el bioqumico norteamericano Melvin Calvin, por lo que tambin se conoce con la denominacin de Ciclo de Calvin, se produce mediante un proceso de carcter cclico en el que se pueden distinguir varios pasos o fases.

Taller de Laboratorio 2011 Pablo Manduca En primer lugar se produce la fijacin del dixido de carbono. En el estroma del cloroplasto, el dixido de carbono atmosfrico se une a la pentosa ribulosa-1,5-bisfosfato, gracias a la enzima RuBisCO, y origina un compuesto inestable de seis carbonos, que se descompone en dos molculas de cido-3-fosfoglicrico. Se trata de molculas constituidas por tres tomos de carbono, por lo que las plantas que siguen esta va metablica se llaman C3. Si bien, muchas especies vegetales tropicales que crecen en zonas desrticas, modifican el ciclo de tal manera que el primer producto fotosinttico no es una molcula de tres tomos de carbono, sino de cuatro (un cido dicarboxlico), constituyndose un mtodo alternativo denominado va de la C4, al igual que este tipo de plantas. Con posterioridad se produce la reduccin del dixido de carbono fijado. Por medio del consumo de ATP y del NADPH obtenidos en la fase luminosa, el cido 3-fosfoglicrico se reduce a gliceraldehdo 3-fosfato. ste puede seguir dos vas, consistiendo la primera de ellas en regenerar la ribulosa 1-5-difosfato (la mayor parte del producto se invierte en esto) o bien, servir para realizar otro tipo de biosntesis: el que se queda en el estroma del cloroplasto comienza la sntesis de aminocidos, cidos grasos y almidn. El que pasa al citosol origina la glucosa y la fructosa, que al combinarse generan la sacarosa (azcar caracterstico de la savia) mediante un proceso parecido a la gluclisis en sentido inverso. La regeneracin de la ribulosa-1,5-difosfato se lleva a cabo a partir del gliceraldehdo 3-fosfato, por medio de un proceso complejo donde se suceden compuestos de cuatro, cinco y siete carbonos, semejante a ciclo de las pentosas fosfato en sentido inverso (en el ciclo de Calvin, por cada molcula de dixido de carbono que se incorpora se requieren dos de NADPH y tres de ATP). Objetivo: Comprobar mediante al reactivo (lugol) la presencia de almidn en las hojas de malvn.

Materiales Planta de malvn o geranio cartulina tijera Hilos de colores 2 vasos de bohemia de 250ml 2 vasos de bohemia de 100ml 2 Soportes 2 mecheros Alcohol 95 2 cajas de Petri Lugol Microscopio Porta y cubre objetos

Procedimientos Escoger una planta de malvn o geranio, a una de sus hojas colocarle dos trozos de cartulina a la misma altura, uno en el haz y otro en el envs Exponer la planta al sol durante varios das. Al cabo de ese tiempo arrancar: Una hoja sin cubrir. La hoja cubierta con cartulina.

Taller de Laboratorio 2011 Pablo Manduca Identificar las hojas con diferentes nmeros o letras. Con las dos hojas se hace lo siguiente Colocarlas en agua hirviendo por varios minutos (fijacin). Tratar cada una de las hojas por 10 minutos en alcohol caliente, para ello se colocan las hojas dentro de vasos de bohemia de 100ml con alcohol y se calienta a bao mara (disolucin de la clorofila) Colocar cada hoja en un recipiente que contenga lugol durante 30minutos Enjuagar las hojas con agua (bajo la canilla o dentro de un recipiente).

Observaciones: La hoja que permaneci cubierta con la cartulina estcompletamente decolorada. La hoja que estuvo cubierta con una tira, presenta un color azul en toda su superficie, a excepcin de la zona que se tap. Conclusiones: Los vegetales con clorofila, al estar expuestos a la luz, son capaces de efectuar la sntesis o elaboracin de los glcidos, principalmente el almidn: esto es la fotosntesis.

Taller de Laboratorio 2011 Pablo Manduca Para que esta sntesis se produzca, clorofila y luz son indispensables En la zona que no se tie es por que no tenia almidn, ya que estuvo tapada y al no recibir la luz del sol no puede formar almidn por la fotosntesis Si las plantas verdes que contienen los cloroplastos hacen la fotosntesis con ayuda de la luz solar, si las plantas no reciben la luz solar no se cumple la fotosntesis y no forma almidn