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Mejora de la produccin de licopeno y b-caroteno por Blakeslea trispora con oxgeno-vectores Colmillo Xu, Qi-Peng Yuan *, Yan Zhu

Facultad de Ciencias de la Vida y la Tecnologa, la Universidad de Beijing de Tecnologa Qumica, Beijing 100029, PO Caja de 75, la Repblica Popular China Recibido el 15 de enero de 2006, recibido en forma revisada 26 de julio 2006, aceptado 18 de agosto 2006

Abstracto Licopeno y la produccin de b-caroteno se incrementaron cuando el oxgeno-vectores, n-hexano y n-dodecano, se aadieron a los cultivos de Blakeslea trispora debido a las concentraciones de oxgeno disuelto mayor. Con el 1% (v / v)n-hexano o n-dodecano aadido en el medio, el licopeno la produccin fue de 51% o 78% ms alto y la produccin de b-caroteno fue de 44% o65% ms alto que el del control, respectivamente. El ms alto de licopeno y b-caroteno de produccin, 533 mg l 1 y 596 mg l 1, se obtuvieron al 1% (v / v)n-dodecano y el 0,1% (w / v) Span 20 se sumaron, que fueron de 2,1 veces y 1,8 veces el control, respectivamente.

introduccin Licopeno y b-caroteno, dos tipos de carotenoides importantes solubles en grasa, son nutrientes esenciales en la dieta humana, ya que prevenienen enfermedades cardiovasculares, regula el sistema inmunolgico y son considerados como agentes anti cancergenos y antioxidantes. Las fuentes clsicas, natural de carotenoides son las frutas, vegetales y microorganismos. El zygomycete, Blakeslea trispora, se utiliza a escala industrial para producir el beta-caroteno, y un proceso semi-industrial tambin ha sido desarrollado para la produccin de licopeno . B. trispora es un microorganismo aerbico y el suficiente suministro de oxgeno puede mejorar el crecimiento celular y la sntesis de carotenoides. Sin embargo, la alta viscosidad del caldo de fermentacin, la intervencin del crecimiento micelial de B. trispora y la baja solubilidad de oxgeno en el agua da como resultado una deficiencia de oxgeno disuelto en el medio de fermentacin . Cmo aumentar la concentracin de oxgeno disuelto en el medio Es muy importante para el cultivo de B. trispora. Un enfoque para lograr un mejor suministro de de oxgeno es mediante la adicin de oxygenvectors, lo que puede aumentar la solubilidad aparente de oxgeno en el medio. Oxygen-vectors son lquidos hidrofbicos en la que el oxgeno tiene una mayor solubilidad que en agua. La hemoglobina, los perfluorocarbonos y los hidrocarburos son generalmente utilizados como vectores de oxgeno en la biotecnologa . Los hidrocarburos son ms favorecidos por fermentacin a gran escala porque son ms baratos en comparacin con la hemoglobina y perfluorados. En este trabajo, los efectos de dos oxygenvectors, n-hexano y n-dodecano, en la produccin de licopeno y b-caroteno por B. trispora se han investigado con el fin de mejorar la eficiencia de la fermentacin.

3. Resultados y discusin 3.1. Efectos de las concentraciones de oxgeno en los vectores licopeno y la produccin de b-caroteno La ventaja de utilizar oxgeno vectores en la fermentacin es que podra aumentar la tasa de transferencia de oxgeno de la fase gaseosa a los microorganismos sin necesidad de suministro de energa extra. Las concentraciones de oxgeno vectores de tener alguna influencia en oxgeno solubilidad. Con el 1% (v / v) n-hexano o el n-dodecano concentracin de oxgeno disuelto del medio lleg a la valor mximo y luego descendi ligeramente con una mayor aumento de los vectores de oxgeno (Tablas 1 y 2). los resultados fueron consistentes con los experimentos se inform anteriormente sobre el comportamiento reolgico de la emulsin y la razn puede ser que en la regin de pendiente roto, hay un notable incremento en la viscosidad aparente, lo que podra afectar a la transferencia de tasas de oxgeno. La cantidad de n-hexano o n-dodecano se determin en experimentos preliminares, y as fue encontraron que no vari sustancialmente en el curso de fermentaciones. Mientras tanto, la espuma de la fermentacin del medio fue casi sin cambios, con o sin n-hexano o n-dodecano. As, n-hexano o n-dodecano no tiene anti-espuma y el efecto nutricional en el proceso de fermentacin. El licopeno es uno de los intermediarios en la biosntesis de bcarotene en B. trispora. La acumulacin de licopeno puede ser obtenidas por mejora de cepas y mutagnesis o por la introduccin de los inhibidores de la sntesis de la adenilato (aminas terciarias o compuestos que contienen nitrgeno heterocclicos tales como la nicotina, piridina e imidazol) en el medio . Con la adicin de un inhibidor, la acumulacin de b-caroteno en este microorganismo se inhibi en el nivel del licopeno ciclasa y la acumulacin de licopeno se ha logrado. La nicotina, un inhibidor de licopeno ciclasa , provoc la acumulacin de licopeno en el bcaroteno cepas productoras cuando se presenta en la medio en l mmol 5? 1. En este trabajo, B. trispora b-caroteneproducing Las cepas utilizadas fueron el licopeno y la b-caroteno contenidos con diferentes concentraciones de oxgeno-vectores se investigado. Licopeno y b-caroteno en B. trispora se generalmente sintetizados a partir de acetil-CoA a travs de la vinculacin y reacciones de desaturacin [17]. Una alta concentracin de oxgeno disuelto podra promover las reacciones de desaturacin y licopeno y b-caroteno en la sntesis de B. trispora. Como se muestra En las Tablas 1 y 2, el licopeno y beta-caroteno contenido aumenta cuando las concentraciones de oxgeno lleg a vectores 1% (v / v) para las concentraciones de oxgeno disuelto mayor. Sin embargo, si la concentracin de n-hexano o n-dodecano se

demasiado alto, podra influir en la actividad de algunas enzimas relacionadas afectando negativamente a la sntesis de licopeno y beta-caroteno. Con 1% (v / v) n-hexano, n o dodecano aadido en el medio, la produccin de licopeno fue de 51% o 78% ms alto que el de la el control y la produccin de b-caroteno fue de 44% o 65% ms alto, , respectivamente. 3.2. Efectos de la adicin de tiempo de oxgeno vectores en licopeno y b-caroteno de produccin Los vectores de oxgeno, n-hexano o n-dodecano, se han aadido a el caldo con una concentracin final de 1% (v / v) en los das 0, 1, 2, 3 y 4, respectivamente, y la biomasa, el licopeno y la b-caroteno produccin de B. trispora despus de la cultura 5 das se muestran en la Los cuadros 3 y 4. El momento ptimo aadiendo fue en el da 0. aunque licopeno y b-caroteno son metabolitos secundarios que mostraron despus de un fuerte aumento de la tasa de crecimiento de las clulas comenzaron a disminuir [18], el oxgeno abundante en la etapa inicial de crecimiento fue beneficioso a la sntesis de licopeno y b-carotene.With la adicin de n-dodecano a 0 da, el licopeno y la b-caroteno produccin B. trispora alcanz 435 mg l? 1 y 549 mg l? 1, que fueron del 70% y el 64% ms alto que el del control, respectivamente. 3.3. Efectos del oxgeno-vectores y agente activo de superficie en licopeno y la produccin de b-caroteno Un agente activo de superficie, tales como Span 20 podra disminuir la agregacin de B. trispora y aumentar la permeabilidad de la pared celular, y por lo tanto, mejorar la captacin de sustrato y b-caroteno formacin [8,18]. Como se muestra en los cuadros 5 y 6, el licopeno y b-caroteno contenido fue mejorado por la adicin de n-hexano, n-dodecano y Span 20, respectivamente. Con la adicin de nhexane o n-dodecano, el licopeno y el contenido de b-caroteno ligeramente superior a la de Span 20 solo. el ms alto la produccin de licopeno y b-caroteno, 533 mg l? 1 y 596 mg l? 1, se obtuvieron con la adicin de 1% (v / v) ndodecane y el 0,1% (w / v) Span 20 al mismo tiempo, que se De 2,1 veces y 1,8 veces el control, respectivamente. En la actualidad, el licopeno se obtiene comercialmente qumicos sntesis [19] o por la extraccin de los tomates [20,21]. Sin embargo, la produccin de licopeno de B. trispora se mucho mayor que la de los tomates reportados por Sharma [22], lo cual es prometedor para su produccin industrial. asimismo, el produccin de b-caroteno de B. trispora ha sido utilizado en un a escala industrial. Oxgeno vectores y Span 20 son baratos, , no txico y puede mejorar la produccin de licopeno y bcarotene que son beneficiosos para la cultura de masas.

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