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PRACTICA N 8 Anlisis microbiolgico del agua BACTERIOLOGA Y LABORATORIO CLNICO CONTROL Y SEGURIDAD ALIMENTARIA Angarita Bautista Leidy Yudith

Cdigo: 02171043, Parada Crdenas Geisel Yelene Cdigo: 04172026. RESUMEN El agua es una fuente de vida, constituye un alimento para los seres vivientes y puede ser adems un vector de grmenes peligrosos. Esta prctica tuvo por objeto indagar la contaminacin dada por microorganismos. El anlisis de salmonella sobre carne cruda se hizo de la siguiente manera: 1. PRE-enriquecimiento en medio liquido no selectivo, 2. Enriquecimiento liquido no selectivo (caldo selenito), 3. Aislamiento diferencial sobre medio slido selectivo (agar salmonella shiguella, siembra por agotamiento), de donde se har la confirmacin de salmonella por medio de la bioqumica. El recuento de listeria monocytogenes se llevo a cabo en avena; en donde el mtodo utilizado fue en primer lugar un PRE-enriquecimiento en medio liquido no selectivo, siembra en medio slido diferencial (agar palcam) a partir del anterior, del cual se obtuvieron dos clases de colonias a las que se les realizo gran y una de la morfologa de las colonas fue cocobacilos gram positivos que posteriormente se le realizo catalasa dando un resultado positivo. Teniendo estas caractersticas y para confirmar la presencia de listeria se realiz bioqumica a este tipo de colonia y los resultados fueron determinantes para decir que no se trataba de listeria monocytogenes. ABSTRACT The meat, meat products, milk, eggs are susceptible to the attack of microorganisms like the salmonella; in the same way the pasteurized raw milk, raw meats, chicken for another microorganism like it is the listeria monocytogenes. This practice had for object to investigate in the contamination given by these microorganisms it has more than enough

raw meat and it trenches. These toxiinfecciones is very common if they are not kept in mind the BPM. The salmonella analysis has more than enough raw meat it was made in the following way: 1. Pre-enrichment between I not liqudate selective, 2. Enrichment not liquidates selective (broth selenito), 3. differential Isolation on half accustomed to selective (agar salmonella shiguella, siembra for exhaustion), of where the salmonella confirmation will be made by means of the biochemistry. The recount of listeria monocytogenes you carries out in oat; where the used method was a pre-enrichment in the first place between I not liquidate selective, siembra between having been accustomed to differential (agar palcam) starting from the previous one, of which two classes of colonies were obtained those that are carried out great and one of the morphology of the colonas was cocobacilos positive gram that later on is carried out catalasa giving a positive result. Having these characteristics and to confirm the listeria presence you biochemical relized to this colony type and the results were decisive to say that it was not listeria monocytogenes. Palabras Claves Gram: Procedimiento de coloracin de las bacterias. Las bacterias se dividen, segn se tien con esta solucin, en grampositivas y gram-negativas. Toxiinfeccin: es una enfermedad originada en el hombre al ingerir alimentos que contienen microorganismos viables o las toxinas que se producen cuando stos se multiplican en los alimentos. Catalasa: es una enzima que se encuentra en organismos vivos y cataliza la descomposicin del perxido de hidrgeno (H202) en oxgeno y agua. Colonia: Una colonia de bacterias se define como toda la descendencia que proviene de una sola bacteria (UFC: Unidad Formadora de Colonia), se caracteriza por estar formada de un solo tipo de bacteria Bacteria:
son organismos unicelulares y pueden ser benficas o patgenas. La mayora de las bacterias pueden vivir y replicarse fuera de un ambiente celular (extracelulares), mientras otras requieren de otras clulas para poder replicarse (intracelulares).

INTRODUCCION Las toxiinfecciones alimentaras provocadas por los microorganismos patgenos del genero salmonella y listeria tiene gran importancia por el gran nmero de personas infectadas y por la industrializacin de alimentos que favorecen la diseminacin de estos agentes. Debemos tener en cuenta que la listeriosis humana afecta
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principalmente a personas de la tercera edad, mujeres embarazadas y nios recin nacidos y personas que tienen comprometido su sistema inmunitario. La bacteria causa con mucha frecuencia una infeccin sangunea generalizada (septicemia) o una inflamacin de las membranas que cubren el cerebro (meningitis). Salmonella sp. es un gnero de la familia Enterobacteriaceae. Su amplia distribucin en el ambiente se debe a la existencia de numerosos reservorios a partir de los cuales se pueden contaminar los alimentos y el agua. Este microorganismo es el agente causal de varias

enfermedades infecciosas entre las que se encuentran las fiebres entricas, gastroenteritis, toxiinfecciones alimentarias y la fiebre tifoidea. MATERIALES Pipetas estriles 1ml y 10 ml Asa redonda Balanza 1 Tubo con caldo Selenito de 10ml 2 agua Peptona por 225ml c/d Agar Salmonella- Shigella Agar sangre 1 sacarosa Incubadora Licuadora estril Tenedor y cuchillo estril

Laboratorio de Control y Seguridad Alimentaria, Practica N 6 Septiembre 2008____________________ 3 DIA: AISLAMIENTO DIFERENCIAL METODO SOBRE MEDIO SLIDO SELECTIVO SALMONELLA Muestra, carne de res cruda 1 DIA: PRE-ENRIQUECIMIENTO Pesar 25 gr de carne cruda. Sembrar por agotamiento en agar salmonella shigella. Tomar una asada del caldo selenitocisteina

Trasferirlos a 225 ml Agua peptona 1% (Dilucin 10-1) Mezclar.

Llevar a incubar a 37C por 24 horas 4 DIA: CONFIRMACION BIOQUIMICA

Incubar a 37C por 18 a 24 horas 2 DIA: ENRIQUECIMIENTO EN MEDIO LQUIDO NO SELECTIVO Tomar 1 ml de la dilucin hecha el da anterior del (caldo de PRE-enriquecimiento dilucin 10-1)

Buscar en el agar salmonellashigella. El crecimiento tpico de colonias de SALMONELLA.

Realizar a los diferentes tipos de colonias Gram., oxidasa, catalasa.

inocular en Caldo Selenito-cistena Mezclar

Realizar identificacin Bioqumica a (colonia que sea: bacilo Gram.Negativo, catalasa positiva, oxidasas negativo.

Citrato, TSI, LIA, SIM, Indol. Incubar a 42C por 18 horas En bao serolgico

__ TECNICA DE LISTERIA Muestra, Avena Leche Casera. 1 DIA: PRE-ENRIQUECIMIENTO EN MEDIO LQUIDO NO SELECTIVO Tomar 25 ml de avena Transferirlos a 225 ml Agua peptona 1% (Dilucin 10-1) Homogenizar

Recuento De Salmonella spp. y Listeria monocytogenes. Realizar identificacin Bioqumica a (colonia que sea: bacilo gram-positivo, catalasa positiva y oxidasa negativo).

Movilidad, Fermentacin de carbohidratos TSI, Siembra en caldo VP-RM

RESUMEN

El alimento analizado en esta prctica fue la carne res cruda y avena en leche casera, Resultando: Avena En Leche Casera: Recuento Listeria Inform monocytoge e nes
Colonias pequeas, grises puntiformes con alfa hemlisis, coloracin: bacilos cortos gram positivos Catalasa: positiva Oxidasa: negativa Movilidad: negativa Rojo De Metilo: negativo Voges Proskauer: positivo TSI: A/A Sacarosa: negativa Glucosa: negativa Sim: negativo Negativo para Listeria monocytog enes

Incubar a 37C por 18 a 24 horas 2 DIA: ENRIQUECIMIENTO NO SELECTIVO Con un asa tomar del la dilucin Del da anterior (Caldo PRE-enriquecimiento Dil 101)

Norm a

Sembrarla por agotamiento en el Agar sangre

Incubar a 37C por 24 horas 3 DIA: IDENTIFICACION Buscar en el agar sangre el crecimiento tpico de colonias de listeria.

Negativo

Realizar a los diferentes tipos de colonias Gram., oxidasa, catalasa.

Laboratorio de Control y Seguridad Alimentaria, Practica N 6 Septiembre 2008____________________

P.R. Hayes. Microbiologa e higiene de los alimentos. Editorial Acribia 1995. Pascual A. Mara del Rosario. Microbiologa alimentaria: Metodologa Analtica para los Alimentos. Editorial Daz santos. 2000.

Carne res cruda: Recuento Salmonella Informe spp.


Colonias grande negra de forma irregular, brillante, cremosa. Coloracin: bacilos Gram. Negativos CITRATO: positivo TSI: A/A con produccin de H2S y gas, LIA: K/K SIM: produccin de H2S INDOL: negativo

Norma

HOBBS. Betty. Toxicologa de Acribia. 1997.

Higiene y los alimentos.

KONEMAN. Elmer. Diagnostico Microbiolgico. Edt. Panamericana. 1999. http://www.nlm.nih.gov/medlineplu s/spanish/ency/article/001380.htm http://www.seimc.org/control/revi_ Bacte/listeria.htm http://www.inhem.sld.cu/Publicacio nes/listos%20para %20publicar/SalmonellaVaccimonit or.pdf

Negativo

Demostrando que en el procedimiento del almacenamiento y conservacin de la avena casera y carne cruda cumpli con las normas INVIMA establecidas exigidas para el consumo humano. BIBLIOGRAFIA
W.C. Frazier. Microbiologa de los alimentos, Editorial Acribia. 1995. Merck, Manual Cultivo, 2000. de Medios de