CONCURSO APARATOS DE MATERIAL Y EXPERIMENTOS DE LABORATORIO

Refresco daino
Modalidad

Experimento

Autor: Jos Humberto Ramrez Leyva1 Colegios Sinaloa A.C. Asesora: QFB Margarita Leyva Snchez

Culiacn Sinaloa, Mxico. Enero de 2010

Torre de la paz #6986. Fracc. Las torres. beto_ramirez292@hotmail.com Tel. (667) 7 60 20 32

Introduccin Problemtica:
En la actualidad es cada vez ms fcil encontrar refrescos de diferentes sabores que consumir en un establecimiento que variedad de aguas frescas. Prcticamente obligando al mercado al consumo de estas bebidas. Los efectos de la publicidad, as como la presencia en todos los establecimientos, el consumo de refresco es cada vez ms frecuente. Se ha escuchado reciente mente por medios de comunicacin acerca de los daos multilaterales que puede ocasionar el consumo prolongado de estas bebidas, cosa que se ha venido mencionando con mucha anterioridad como educacin nutricional. Estas bebidas contienen muchas sustancias, que pueden causar daos al organismo, ya sea por las elevadas

concentraciones de azcar, los sabores concentrados, el dixido de carbono, el pH, entre otros.

Objetivo:
Demostrar el dao que ocasiona el consumo del refresco en la flora intestinal humana mediante evidencia experimental. Emplear las

competencias adquiridas en la materia de microbiologa para la elaboracin de un experimento que nos permita el anlisis de los resultados obtenidos y obtener como conclusin la cantidad de dao que ocasiona el consumo de estas bebidas. Se llegue a implementar como tcnica de laboratorio para la demostracin y que los estudiantes creen conciencia respecto a uno de los daos que ocasiona el consumo de refresco.

Hiptesis:
El pH cido de las bebidas carbonatadas, afecta seriamente a la flora gastrointestinal, al estar por debajo de los valores mnimos que estas bacterias pueden soportar, afectando la accin simbitica que ejercen en beneficio del cuerpo humano.

Fundamentos tericos
Segn Higashida (2005)1, una de las principales reglas de la alimentacin es la inocuidad de los alimentos que se ingieren, esto significa que no ocasione dao al organismo. En unos estudios de investigacin realizados por el Centro de Investigaciones Economicas y Politicas de Accion Comunitaria de Mexico (CIEPAC) se sealan varios puntos por los que las empresas que fabrican y comercializan las colas no son socialmente responsables. Algunos de sus ingredientes pueden ser nocivos, como el cido fosfrico, un corrosivo de uso industrial. La combinacin de este cido con azcar refinada y fructuosa dificulta la absorcin de hierro, lo que puede generar anemia y mayor facilidad para contraer infecciones, principalmente en nios, ancianos y mujeres embarazadas.2 Denominamos flora intestinal a un conjunto de bacterias que viven en el intestino, en una relacin con nosotros que a veces es de comensalismo y otras de simbiosis. La gran mayora de estas bacterias no son dainas para nosotros, y muchas son beneficiosas. Se calcula que tenemos en nuestro interior unas 2000 especies bacterianas diferentes, de las cuales 100 solamente pueden llegar a ser perjudiciales.3 Ayudan en ocasiones a la absorcin de nutrientes y forman un ecosistema complejo que se autorregula y se mantiene en equilibrio. En otras ocasiones

son imprescindibles para la sntesis de determinados compuestos, como la Vitamina K y algunas del complejo B. Tambin tienen efectos colaterales, como la produccin de gases, responsables del olor caracterstico de las heces. Algunas de ellas pueden causar infecciones de cualquier gravedad. La microflora entrica normal desempea un papel relevante en la proteccin frente a la invasin por grmenes patgenos y en el mantenimiento de las funciones fisiolgicas del intestino. Est compuesta en un 99.9% por microorganismos que no requieren de oxigeno o anaerobios ( 1011 /g de heces normales) en su mayor parte bacteroides y menos por Clostridium ,peptoestreptococos y peptococos. Los aerobios estn formados por E. coli 107 /g de heces normales y en menor proporcin por Klebsiella, Proteus y enterococos. La sustitucin o desequilibrio de esta flora, por alteraciones de la motilidad, antibiticos o quimioterapia da lugar a un aumento de la susceptibilidad de adquirir infecciones intestinales. Incluso en gastroenteritis viral, se ha sugerido que aparecen desequilibrios de la flora bacteriana. La flora intestinal normal interviene en el mantenimiento de un pH cido y en la produccin de cidos grasos voltiles, as como en la actuacin de forma sinrgica con los mecanismos del husped que impiden la fijacin de los patgenos a las clulas intestinales, cmo mecanismos de defensa ante la infeccin entrica En resumen, la flora intestinal cumple un papel en la mantencin de la salud, la prevencin de enfermedades y el equilibrio del ecosistema gastrointestinal, donde no slo se influye a s misma sino que interacta con el ambiente, el sistema nervioso central, el sistema endocrino y, lo que es ms importante, con el sistema inmune.4

Segn Carpenter (1982)5 en su libro de microbiologa, indica que el pH optimo para el crecimiento de Escherichia coli en el intestino es de 6.0-8.0 e indica que el pH mnimo es de 4.3, as como el mximo es de 9.5. De igual forma, los lactobacillus su pH ptimo es de 5.4-6.4, el mnimo es de 3.8-4.4 y el mximo de 7.2. El crecimiento y la actividad microbiana son alterados notablemente por el pH del medio, pero hay diferencias amplias entre las necesidades de pH de especies. Cada especie crece solamente los ciertos lmites de pH, y el crecimiento ms rpido o abundante aparece en una zona limitada por pH ptimo. Los antibiticos se caracterizan e identifican por su espectro

antimicrobiano. El espectro es estimado al calcular o medir la capacidad de una substancia qumica para inhibir varios microorganismos, (Carpenter 1982)

Materiales utilizados
Medios de cultivo EMB Hisopos esteriles Tubo de ensayo Muestra fecal humana Mechero Papel filtro Tijeras Regla Agua destilada Tres muestras de refresco comercial sabores de distintos

Metodologa
Se tom una muestra de heces fecales humanas (sin problemas gastrointestinales) y se inocul en un medio de cultivo EMB. Se puso a incubar en la estufa de cultivo a 37 C por 24 h. una vez obtenido los

desarrollos, se tom con un asa previamente esterilizada unas cuantas colonias verdes con brillo verde metlico. Y se diluy en un tubo con agua destilada. Se agit y con un hisopo se inocul la muestra diluida por todo el medio de cultivo. Se puso en el medio de cada caja de Petri un crculo de papel filtro impregnado con las muestras de refresco. Se introdujeron a incubar a la misma temperatura. A las 24 horas. Se mide el halo de inhibicin que produjo la presencia del refresco. Se emplean mtodos matemticos para estimar el halo de inhibicin que hubiera ocurrido si se hubiera empleado el tamao de un antibiograma. Las muestras de refresco empleadas se depositan en pequeos vasos de precipitados y se les mide el pH empleando un potencimetro porttil marca HANNA modelo HI 98107. Se calibr con buffers de referencia de pH de 4 y 7. Posteriormente se procedi a medir el pH de las muestras. Operaciones matemticas Todas las muestras se analizaron por duplicado al momento de emplear el mtodo de antibiogramas. Se midieron los halos de inhibicin y se obtuvo un promedio.

Resultados
A las 24 horas de incubacin, se observaban claramente los halos de inhibicin en todas las muestras. (Ver tabla 1 e imagen 1) El refresco sabor de cola obtuvo un promedio de 4.25 cm, este tiene un pH de 2.6. El refresco de sabor naranja present el mismo promedio de halo de inhibicin y su pH es de 3.2 (Ver imagen 2). Por ultimo, el de sabor limn cre un halo de inhibicin promedio de 3.2 cm y su pH es de 3.2.

Halo

de Halo

de Promedio 2

pH

inhibicin # 1 inhibicin # cm Sabor cola Sabor naranja Sabor limn 3.5 3 4.5 4.5 cm 4 4

4.25 4.25

2.6 3.2

3.2

3.2

Tabla 1. Halos de inhibicin creados por la presencia de refresco en un cultivo de coliformes en medio de cultivo EMB.

4.5 4 3.5 3 2.5 2 1.5 1 0.5 0 Cola Naranja Limn

Halo inhibicin cm pH

Grafica 1. Relacin de halos de inhibicin obtenidos respecto el pH de la muestra.

Imagen 1 y 2. Fotografa de los medios de cultivo EMB utilizados, en los cuales se observa los desarrollos obtenidos. Fotografa del halo de inhibicin obtenido por el refresco sabor naranja en un cultivo de coliformes.

Discusin
El refresco sabor cola obtuvo un halo de inhibicin igual al obtenido por el refresco de naranja, sin embargo los pH varan en 0.6 unidades. Por lo que el pH no es el nico causante de la accin bactericida de la sustancia. Esto lo podemos corroborar ya que tanto el refresco sabor naranja como limn tenan un pH similar de 3.2 y haba una diferencia de 1.05 cm en la longitud del dimetro de los halos de inhibicin. Por lo tanto, el pH es un factor importante en la eliminacin de bacterias presentes, ms no el nico. Pudiera ser posiblemente la concentracin de CO2 de la solucin acuosa, o radica en el concentrado de la receta secreta de estas bebidas. Me gustara poder reproducir el experimento con bacterias patgenas para experimentar si el consumo del refresco resultara benfico como auxiliar en el combate a infecciones gastrointestinales.

Conclusin
Consumir bebidas carbonatadas ocasiona un dao a la flora bacteriana, eliminando coliformes presentes al contacto. Se eliminan bacterias

simbiticas, benficas y necesarias para el hombre en el correcto funcionamiento del metabolismo de los alimentos ingeridos. Se debe reducir al mximo posible el consumo de refresco. Ya que de manera prolongada, pudiera afectar seriamente a la flora intestinal y propiciar condiciones de desventaja a esta en contra de agentes patgenos que competiran por colonizar nuestro sistema digestivo, en caso de la ingesta de algn alimento contaminado.

Reconocimiento
A mi asesora QFB Margarita Leyva Snchez, maestra de microbiologa quien me ha asesorado en la mayora de mis proyectos relativos a la materia.

Bibliografa
1

Higashida H. B. 2008 Ciencias de la Salud sexta edicin, Mc Graw Hill.

Pp 280.
2

http://www1.up.edu.pe/boletin/01i.php?pantalla=noticia&id=512&bolnum_ke

y=74&serv_key=13
3

McFall-Ngai

M. (2007). Adaptive

immunity:

care

for

the

community. Nature. Vol. 445. n. 153. ISSN 0028-0836

4

http://www.pediatraldia.cl/flora_intestinal_normal.htm Carpenter P. L. 1982. Microbiologa cuarta edicin, Nueva Editorial

Interamericana pp 244, 245, 270, 271.