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MICROBIOLÓGICO POR
AGENTES QUÍMICOS E FÍSICOS
Definição de Termos Frequentemente Utilizados
Existem tratamentos que tanto podem inibir o crescimento, como também matar
determinados microrganismos dependendo das condições. Em determinadas situações é
necessário eliminar todos os microrganismos de um objecto. No entanto, outras
situações requerem apenas a destruição parcial da população microbiana.
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forem removidos o crescimento é retomado, estes agentes designam-se bacteriostático,
fungistático.
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Composição da população: a eficiência de um agente microbiano varia muito
com a natureza dos organismos a serem tratados, isto porque os microrganismos diferem
grandemente quanto à sua susceptibilidade. Os endosporos bacterianos são muito mais
resistentes aos agentes antimicrobianos do que a maioria das células vegetativas e as
células jovens são menos resistentes que células maduras.
Calor: é um dos métodos mais utilizados para destruir microrganismos. Pode ser
aplicado tanto o calor húmido como o calor seco. Devido ao calor ser tão utilizado no
controlo microbiano, é essencial que existam parâmetros de medida da eficiência da
morte pelo calor:
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TDP (thermal death point): a mais baixa temperatura à qual uma suspensão
microbiana é morta em 10 minutos.
TDT (thermal death time): o tempo mais curto necessário para matar todos os
organismos numa suspensão microbiana a uma temperatura específica e sob condições
definidas.
Valores de D e Z de alguns
organismos patogénicos:
- Calor húmido:
mata eficazmente bactérias,
vírus e fungos. A exposição a
água a ferver durante 10 min é suficiente para destruir células vegetativas e esporos
eucarióticos. Infelizmente a temperatura de ebulição da água (100ºC) não é elevada o
suficiente para destruir endosporos bacterianos, estes podem sobreviver horas na
ebulição. Assim concluímos que a ebulição não esteriliza.
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Condições aproximadas
para a morte pelo calor
húmido:
Esterilização por calor húmido: deve ser realizada a temperaturas acima dos 100ºC para
destruir todos os esporos bacterianos, isto requer o uso de vapor saturado sob pressão. É
conseguida com auxílio de um AUTOCLAVE:
- numa atmosfera de vapor de água, isenta de ar, todas as bactérias são mortas, mesmo
sob a forma esporulada, em 20 min – 115/120ºC.
- água é fervida para produzir vapor que é libertado para o interior da câmara do
autoclave; o ar que inicialmente se encontra no interior da câmara é forçado a sair até
que a câmara esteja cheia de vapor saturado e que os outlets estejam fechados; vapor
saturado e quente continua a entrar na câmara até que sejam atingidos os valores de
temperatura e pressão desejados (geralmente 121ºC), a esta temperatura o vapor
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saturado destrói todas as células vegetativas e endosporos de um volume pequeno em 10
a 12 min mas o tratamento continua até aos 15 min para maximizar a segurança.
Indicadores de esterilização:
- Calor seco: os itens a serem esterilizados são colocados num forno a 160-
170ºC durante 2-3 horas. A morte bacteriana resulta da oxidação dos constituintes
celulares e desnaturação de proteínas (destruição de microrganismos a temperatura
vizinha da de carbonização da matéria orgânica). Apesar de ser menos eficaz que a
esterilização por calor húmido, o calor seco não provoca a corrosão do vidro ou metais e
pode ser utilizado para esterilizar pós, óleos, etc. No entanto, o calor seco não é
indicado para materiais termossensíveis, como alguns plásticos e borracha.
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- Outros processos de controlo microbiano pelo calor:
- Pasteurização (leite):
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Ultrafiltração: excelente forma de reduzir a população microbiana em soluções de
material temossensível e por vezes também pode ser utilizada para esterilizar soluções.
O filtro remove os microrganismos mas não os destrói. Existem dois tipos de filtros:
- Filtros de profundidade
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microrganismos a serem manipulados (vírus tumorais, DNA recombinante,
Mycobacterium tuberculosis) dentro da câmara e impede a contaminação do ar.
Hotes de fluxo laminar de alta segurança contendo filtros HEPA (poro de 0,2 μm).
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Características de um desinfectante desejável:
- largo espectro
- activo em fracas concentrações e na presença de matéria orgânica
- não tóxico para as pessoas
- não corrosivo
- inodoro, ou odor agradável
- baixa tensão superficial
- solúvel em água e em lípidos
- estável e barato
- acção rápida
- não ser afectado por factores ambientais (luz)
- compatível com sabões, detergentes e outros produtos químicos
- efeito residual na superfície
- não poluente
Fenóis e derivados
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Actividade:
- bactericida contra as formas vegetativas incluindo o M. tuberculosis
- sem acção sobre endosporos, à temperatura ambiente
Vantagens:
- activos contra M. tuberculosis
- efectivos na presença de matéria orgânica
- mantêm-se activos nas superfícies bastante tempo após aplicação
Desvantagens:
- odor desagradável
- podem causar irritação da pele
Álcoois
Aplicações:
- anti-sepsia da pele e instrumentos médicos (termómetros)
- desinfecção e descontaminação de superfícies e bancadas
Compostos Halogenados
Actividade:
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- importantes agentes antimicrobianos
Aplicações:
Pastilhas de cloro
Aldeídos
Actividade:
- eficazes contra formas vegetativas e esporos
- podem ser utilizados como químicos esterilizantes
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Actividade: destroem formas vegetativas microbianas, mas não são esporicidas nem
actuam contra o M. tubercolosis.
Vantagens:
- estáveis
- não tóxicos
- suaves e não irritantes
Gases esterilizantes
Actividade:
- microbicida e esporicida
- o Oet é um agente alquilante de elevado poder penetrante
Aplicações:
- material descartável empacotado em papel ou polietileno
- artigos de plástico (caixas de petri, seringas, suturas, catateres)
- Oet é explosivo e tem acção irritante nas mucosas. Requer a utilização de
câmaras especiais que controlam a concentração de Oet, temperatura e humidade
- condições de esterilização: 5 a 8 hrs a 38ºC ou 3 a 4 hrs a 54ºC, 40-50% de
humidade, concentração Oet 700 mg/l
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Níveis de actividade dos desinfectantes:
Técnica:
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- série de diluições do fenol e do desinfectante em estudo, inoculam-se com as
bactérias (Salmonella typhi e Staphylococcus aureus)
- colocar em banho de água a 20 ou 37ºC
- subculturas em meio novo com intervalos de 5 min e incubar 2 ou mais dias
A diluição que inibe o crescimento ao fim de 10 min de contacto mas que não inibe ao
fim de 5 min é utilizada para calcular o índice de fenol.
Prescott, Harley, and Klein’s MICROBIOLOGY, de Joanne M. Willey, Linda M. Sherwood e Christopher J.
Woolverton, Edição Internacional – 7ª edição, McGrawHill, Cap. 7
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