Different Types of Vaccine

Whole virus vaccines. either live or killed, constitute the vast majority of vaccines in use at present. However, recent advances in molecular biology had provided alternative methods for producing vaccines. Listed below are the possibilities;1. 2. 3. 4. 5. 6. Live whole virus vaccines Killed whole virus vaccines Subunit vaccines;- purified or recombinant viral antigen Recombinant virus vaccines Anti-idiotype antibodies DNA vaccines

1. Live Vaccines Live virus vaccines are prepared from attenuated strains that are almost or completely devoid of pathogenicity but are capable of inducing a protective immune response. They multiply in the human host and provide continuous antigenic stimulation over a period of time, Primary vaccine failures are uncommon and are usually the result of inadequate storage or administration. Another possibility is interference by related viruses as is suspected in the case of oral polio vaccine in developing countries. Several methods have been used to attenuate viruses for vaccine production. Use of a related virus from another animal - the earliest example was the use of cowpox to prevent smallpox. The origin of the vaccinia viruses used for production is uncertain. Administration of pathogenic or partially attenuated virus by an unnatural route - the virulence of the virus is often reduced when administered by an unnatural route. This principle is used in the immunization of military recruits against adult respiratory distress syndrome using enterically coated live adenovirus type 4, 7 and (21). Passage of the virus in an "unnatural host" or host cell - the major vaccines used in man and animals have all been derived this way. After repeated passages, the virus is administered to the natural host. The initial passages are made in healthy animals or in primary cell cultures. There are several examples of this approach: the 17D strain of yellow fever was developed by passage in mice and then in chick embryos. Polioviruses were passaged in monkey kidney cells and measles in chick embryo fibroblasts. Human diploid cells are now widely used such as the WI-38 and MRC-5. The molecular basis for host range mutation is now beginning to be understood. Development of temperature sensitive mutants - this method may be used in conjunction with the above method. 2. Inactivated whole virus vaccines

These were the easiest preparations to use. The preparation was simply inactivated. The outer virion coat should be left intact but the replicative function should be destroyed. To be effective, non-replicating virus vaccines must contain much more antigen than live vaccines that are able to replicate in the host. Preparation of killed vaccines may take the route of heat or chemicals. The chemicals used include formaldehyde or betapropiolactone. The traditional agent for inactivation of the virus is formalin. Excessive treatment can destroy immunogenicity whereas insufficient treatment can leave infectious virus capable of causing disease. Soon after the introduction of inactivated polio vaccine, there was an outbreak of paralytic poliomyelitis in the USA use to the distribution of inadequately inactivated polio vaccine. This incident led to a review of the formalin inactivation procedure and other inactivating agents are now available, such as Betapropiolactone. Another problem was that SV40 was occasionally found as a contaminant and there were fears of the potential oncogenic nature of the virus. Live vs Dead vaccines Feature Dose low high no. of doses need for adjuvant Duration of immunity antibody response CMI (Cell Mediated Immunity) Reversion to virulence single no many years IgG,IgA good possible multiple yes less IgG poor not possible Live Dead

Because live vaccines replicate inside host cells, bits of virus antigen are presented to the cell surface and recognized by cytotoxic cells Potential safety problems Live vaccines 1. 2. 3. 4. 5. 6. Underattenuation Mutation leading to reversion to virulence Preparation instability Contaminating viruses in cultured cells Heat lability Should not be given to immunocompromized or pregnant patients

Killed vaccines 1. Incomplete inactivation 2. Increased risk of allergic reactions due to large amounts of antigen involved Present problems with vaccine development include 1. Failure to grow large amounts of organisms in laboratory 2. Crude antigen preparations often give poor protection. eg. Key antigen not identified, ignorance of the nature of the protective or the protective immune response. 3. Live vaccines of certain viruses can (1). induce reactivation, (2) be oncogenic in nature 3._Subunit Vaccines Originally, non-replicating vaccines were derived from crude preparations of virus from animal tissues. As the technology for growing viruses to high titres in cell cultures advanced, it became practicable to purify virus and viral antigens. It is now possible to identify the peptide sites encompassing the major antigenic sites of viral antigens, from which highly purified subunit vaccines can be produced. Increasing purification may lead to loss of immunogenicity, and this may necessitate coupling to an immunogenic carrier protein or adjuvant, such as an aluminum salt. Examples of purified subunit vaccines include the HA vaccines for influenza A and B, and HBsAg derived from the plasma of carriers. 4. Recombinant viral proteins Virus proteins have been expressed in bacteria, yeast, mammalian cells, and viruses. E. Coli cells were first to be used for this purpose but the expressed proteins were not glycosylated, which was a major drawback since many of the immunogenic proteins of viruses such as the envelope glycoproteins, were glycosylated. Nevertheless, in many instances, it was demonstrated that the non-glycosylated protein backbone was just as immunogenic. Recombinant hepatitis B vaccine is the only recombinant vaccine licensed at present. An alternative application of recombinant DNA technology is the production of hybrid virus vaccines. The best known example is vaccinia; the DNA sequence coding for the foreign gene is inserted into the plasmid vector along with a vaccinia virus promoter and vaccinia thymidine kinase sequences. The resultant recombination vector is then introduced into cells infected with vaccinia virus to generate a virus that expresses the foreign gene. The recombinant virus vaccine can then multiply in infected cells and produce the antigens of a wide range of viruses. The genes of several viruses can be inserted, so the potential exists for producing polyvalent live vaccines. HBsAg, rabies, HSV and other viruses have been expressed in vaccinia.

Hybrid virus vaccines are stable and stimulate both cellular and humoral immunity. They are relatively cheap and simple to produce. Being live vaccines, smaller quantities are required for immunization. As yet, there are no accepted laboratory markers of attenuation or virulence of vaccinia virus for man. Alterations in the genome of vaccinia virus during the selection of recombinant may alter the virulence of the virus. The use of vaccinia also carries the risk of adverse reactions associated with the vaccine and the virus may spread to susceptible contacts. At present, efforts are being made to attenuate vaccinia virus further and the possibility of using other recombinant vectors is being explored, such as attenuated poliovirus and adenovirus. 5. Synthetic Peptides The development of synthetic peptides that might be useful as vaccines depends on the identification of immunogenic sites. Several methods have been used. The best known example is foot and mouth disease, where protection was achieved by immunizing animals with a linear sequence of 20 aminoacids. Synthetic peptide vaccines would have many advantages. Their antigens are precisely defined and free from unnecessary components which may be associated with side effects. They are stable and relatively cheap to manufacture. Furthermore, less quality assurance is required. Changes due to natural variation of the virus can be readily accommodated, which would be a great advantage for unstable viruses such as influenza. Synthetic peptides do not readily stimulate T cells. It was generally assumed that, because of their small size, peptides would behave like haptens and would therefore require coupling to a protein carrier which is recognized by T-cells. It is now known that synthetic peptides can be highly immunogenic in their free form provided they contain, in addition to the B cell epitope, T- cell epitopes recognized by T-helper cells. Such T-cell epitopes can be provided by carrier protein molecules, foreign antigens. or within the synthetic peptide molecule itself. Synthetic peptides are not applicable to all viruses. This approach did not work in the case of polioviruses because the important antigenic sites were made up of 2 or more different viral capsid proteins so that it was in a concise 3-D conformation. Advantages of defined viral antigens or peptides include: 1. 2. 3. 4. Production and quality control simpler No NA or other viral or external proteins, therefore less toxic. Safer in cases where viruses are oncogenic or establish a persistent infection Feasible even if virus cannot be cultivated

Disadvantages: 1. 2. 3. 4. May be less immunogenic than conventional inactivated whole-virus vaccines Requires adjuvant Requires primary course of injections followed by boosters Fails to elicit CMI.

6. Anti-idiotype antibodies The ability of anti-idiotype antibodies to mimic foreign antigens has led to their development as vaccines to induce immunity against viruses, bacteria and protozoa in experimental animals. Anti-idiotypes have many potential uses as viral vaccines, particularly when the antigen is difficult to grow or hazardous. They have been used to induce immunity against a wide range of viruses, including HBV, rabies, Newcastle disease virus and FeLV, reoviruses and polioviruses. 7. DNA vaccines Recently, encouraging results were reported for DNA vaccines whereby DNA coding for the foreign antigen is directly injected into the animal so that the foreign antigen is directly produced by the host cells. In theory these vaccines would be extremely safe and devoid of side effects since the foreign antigens would be directly produced by the host animal. In addition, DNA is relatively inexpensive and easier to produce than conventional vaccines and thus this technology may one day increase the availability of vaccines to developing countries. Moreover, the time for development is relatively short which may enable timely immunization against emerging infectious diseases. In addition, DNA vaccines can theoretically result in more long-term production of an antigenic protein when introduced into a relatively nondividing tissue, such as muscle. Indeed some observers have already dubbed the new technology the "third revolution" in vaccine developmenton par with Pasteur's ground-breaking work with whole organisms and the development of subunit vaccines. The first clinical trials using injections of DNA to stimulate an immune response against a foreign protein began for HIV in 1995. Four other clinical trials using DNA vaccines against influenza, herpes simplex virus, T-cell lymphoma, and an additional trial for HIV were started in 1996. The technique that is being tested in humans involves the direct injection of plasmids loops of DNA that contain genes for proteins produced by the organism being targeted for immunity. Once injected into the host's muscle tissue, the DNA is taken up by host cells, which then start expressing the foreign protein. The protein serves as an antigen that stimulate an immune responses and protective immunological memory. Enthusiasm for DNA vaccination in humans is tempered by the fact that delivery of the DNA to cells is still not optimal, particularly in larger animals. Another concern is the possibility, which exists with all gene therapy, that the vaccine's DNA will be integrated into host chromosomes and will turn on oncogenes or turn off tumor suppressor genes. Another potential downside is that extended immunostimulation by the foreign antigen could in theory provoke chronic inflammation or autoantibody production Presentation of immunogenic proteins and peptides Proteins separated from virus particles are generally much less immunogenic than the intact particles. This difference in activity is usually attributed to the change in configuration of a

protein when it is released from the structural requirements of the virus particle. Many attempts have been made to enhance the immunogenic activity of separated proteins. Adjuvants Used to potentiate the immune response 1. Functions to localize and slowly release antigen at or near the site of administration. 2. Functions to activate APCs to achieve effective antigen processing or presentation Materials that have been used include;1. Aluminum salts 2. Mineral oils 3. Mycobacterial products, eg. Freud's adjuvants Immunostimulating complexes (ISCOMS) 1. An alternative vaccine vehicle 2. The antigen is presented in an accessible, multimeric, physically well defined complex 3. Composed of adjuvant (Quil A) and antigen held in a cage like structure 4. Adjuvant is held to the antigen by lipids 5. Can stimulate CMI 6. Mean diameter 35nm In the most successful procedure, a mixture of the plant glycoside saponin, cholesterol and phosphatidylcholine provides a vehicle for presentation of several copies of the protein on a cage-like structure. Such a multimeric presentation mimics the natural situation of antigens on microorganisms. These immunostimulating complexes have activities equivalent to those of the virus particles from which the proteins are derived, thus holding out great promise for the presentation of genetically engineered proteins. Similar considerations apply to the presentation of peptides. It has been shown that by building the peptide into a framework of lysine residues so that 8 copies instead of 1 copy are present, the immune response induced was of a much greater magnitude. A novel approach involves the presentation of the peptide in a polymeric form combined with T cell epitopes. The sequence coding for the foot and mouth disease virus peptide was expressed as part of a fusion protein with the gene coding for the Hepatitis B core protein. The hybrid protein, which forms spherical particles 22nm in diameter, elicited levels of neutralizing antibodies against foot and mouth disease virus that were at least a hundred times greater than those produced by the monomeric peptide. Immunization and Herd Immunity

The following questions should be asked when a vaccination policy against a particular virus is being developed. 1. 2. 3. 4. What proportion of the population should be immunized to achieve eradication. What is the best age to immunize? How is this affected by birth rates and other factors How does immunization affect the age distribution of susceptible individuals, particularly those in age-classes most at risk of serious disease? 5. How significant are genetic, social, or spatial heterogeneities in susceptibility to infection? 6. How does this affect herd immunity? A basic concept is that of the basic rate of the infection R0. for most viral infections, R0 is the average number of secondary cases produced by a primary case in a wholly susceptible population. Clearly, an infection cannot maintain itself or spread if R0 is less than 1. R0 can be estimated from as B/(A-D);B = life expectancy, A = average age at which infection is acquired, D = the characteristic duration of maternal antibodies. The larger the value of R0, the harder it is to eradicate the infection from the community in question. A rough estimate of the level of immunization coverage required can be estimated in the following manner: eradication will be achieved if the proportion immunized exceeds a critical value pinc = 1-1/R0. Thus the larger the R0, the higher the coverage is required to eliminate the infection. Thus the global eradication of measles, with its R0 of 10 to 20 or more, is almost sure to be more difficult to eradicate than smallpox, with its estimated R0 of 2 to 4. Another example is rubella and measles immunization in the US. Rubella (A = 9 years) has an Ro roughly half that of measles (A = 5 years) and indeed rubella has been effectively eradicated in the US while the incidence of measles have declined more slowly. Why do we not require 100% coverage to eradicate an infection? Immunization has both a direct and indirect effect. The susceptible host population is reduced by mass immunization so that the transmission of infection has become correspondingly less efficient and eventually, the infection will be unable to maintain itself. Average age of infection Measles 4-5 Pertussis 4-5 Mumps 6-7 Rubella 9-10 Diptheria 11-14 Polio 12-15 Epidemic period 2 3-4 3 3-5 4-6 3-5 R0 15-17 15-17 10-12 7-8 5-6 5-6 Critical coverage 92-95 92-95 90-92 85-87 80-85 80-85

Diferentes tipos de vacuna Las vacunas con virus. ya sea en vivo o muerto, constituyen la gran mayora de las vacunas actualmente en uso. Sin embargo, avances recientes en biologa molecular ha proporcionado mtodos alternativos para la produccin de vacunas. A continuacin se enumeran las posibilidades; 1. Las vacunas con virus vivo 2. Vacunas de virus muertos todo 3. Las vacunas de subunidades, - purificado o antgeno viral recombinante 4. Las vacunas recombinantes del virus 5. Anticuerpos anti-idiotipo 6. Las vacunas de ADN 1. Las vacunas vivas Vacunas de virus vivos son preparados a partir de cepas atenuadas que son casi o totalmente desprovisto de patogenicidad, pero son capaces de inducir una respuesta inmune protectora. Se multiplican en el husped humano y proporcionar la estimulacin antignica continua durante un perodo de tiempo, las fallas primarias vacuna son poco frecuentes y suelen ser el resultado de inadecuadas de almacenamiento o de la administracin. Otra posibilidad es la interferencia de virus relacionados, como se sospecha en el caso de la vacuna oral contra la poliomielitis en los pases en desarrollo.Varios mtodos han sido utilizados para atenuar los virus para la produccin de vacunas. El uso de un virus relacionado con el de otro animal - el primer ejemplo fue el uso de la vacuna para prevenir la viruela. El origen de los virus vaccinia utilizadas para la produccin es incierta. Administracin de patgenos o virus atenuados parcialmente por una va no natural - de la virulencia del virus a menudo se reduce cuando se administra por una va no natural.Este principio se utiliza en la inmunizacin de los reclutas del ejrcito contra el sndrome de distrs respiratorio del adulto utilizando el tipo de adenovirus en vivo entricamente recubiertas 4, 7 y (21). El paso del virus en un "husped no natural" o de la clula husped - las principales vacunas utilizadas en el hombre y los animales han sido obtenidos de esta manera.Despus de repetidos pasajes, el virus se administra al husped natural. Los pasajes iniciales se hacen en animales sanos o en cultivos celulares primarios. Hay varios ejemplos de este enfoque: la cepa 17D de la fiebre amarilla fue desarrollado por el paso en ratones y luego en embriones de pollo. Poliovirus se pasaron en las clulas de rin de mono y el sarampin en fibroblastos de embrin de pollo. Clulas diploides humanas son ampliamente utilizados, como la WI-38 y MRC-5. Las bases moleculares de la mutacin gama de huspedes est empezando a ser entendido. El desarrollo de mutantes sensibles a la temperatura - este mtodo puede ser usado en conjunto con el mtodo anterior. 2. Las vacunas inactivadas de virus enteros Estos eran los ms fciles los preparativos para su uso. La preparacin se inactiva simplemente. La capa externa del virin se debe dejar intacta, pero la funcin de

replicacin debe ser destruida. Para ser eficaz, no repeticin de las vacunas de virus debe contener antgeno mucho ms que las vacunas vivas que son capaces de replicarse en el husped. Preparacin de las vacunas muertas pueden tomar la ruta de calor o productos qumicos. Los productos qumicos utilizados incluyen formaldehdo o betapropiolactona. El agente tradicional para la inactivacin del virus de formalina.Tratamiento excesivo puede destruir la inmunogenicidad, mientras que un tratamiento insuficiente puede dejar virus infeccioso capaz de causar enfermedad. Poco despus de la introduccin de la vacuna contra la polio inactivada, se produjo un brote de poliomielitis paraltica en el uso de EE.UU. para la distribucin de la vacuna antipoliomieltica inactivada inadecuadamente. Este incidente llev a una revisin del proceso de inactivacin con formalina y otros agentes de inactivacin ya estn disponibles, tales como beta-propiolactona. Otro problema fue que el SV40 fue encontrado en ocasiones como un contaminante y se teme a la naturaleza potencial oncognico de los virus. Las vacunas vivas contra Muertos Caracterstica Live Dead Dosis bajas de alta no. de mltiples dosis nica necesario para el tratamiento adyuvante no s Duracin de la inmunidad de muchos aos menos la respuesta de anticuerpos IgG, IgA IgG CMI (inmunidad mediada por clulas) bien pobres Reversin a la virulencia posible, no es posible Debido a que las vacunas vivas se replican en las clulas husped, los bits del antgeno del virus se presentan en la superficie celular y reconocidas por las clulas citotxicas Problemas potenciales de seguridad Las vacunas vivas 1. Underattenuation 2. Mutacin que conduce a la reversin a la virulencia 3. Preparacin de la inestabilidad 4. Virus contaminantes en cultivos de clulas 5. Labilidad de calor 6. No se debe administrar a pacientes inmunodeprimidos o embarazadas Las vacunas muertas 1. Inactivacin incompleta 2. Aumento del riesgo de reacciones alrgicas debido a la gran cantidad de antgeno involucrado Problemas actuales con el desarrollo de vacunas incluyen 1. Falta de crecimiento de grandes cantidades de microorganismos en el laboratorio 2. Preparaciones crudas de antgenos a menudo dan poca proteccin. por ejemplo.Antgeno clave no identificadas, el desconocimiento de la naturaleza de la proteccin o la respuesta inmune protectora. 3. Las vacunas vivas de ciertos virus puede (1). inducir la reactivacin, (2) ser oncognicos en la naturaleza

Las vacunas 3._Subunit En un principio, no repeticin de las vacunas se obtuvieron a partir de preparaciones crudas de virus de los tejidos animales. A medida que la tecnologa para el cultivo de los virus a ttulos altos en los cultivos celulares avanzados, se hizo lo posible para purificar el virus y antgenos virales. Ahora es posible para identificar los sitios pptido que abarca los sitios antignicos principales de antgenos virales, a partir de que las vacunas de subunidades altamente purificado se puede producir. El aumento de la purificacin puede conducir a la prdida de inmunogenicidad, y esto puede hacer necesario el acoplamiento a una protena portadora inmunognica o adyuvante, tal como una sal de aluminio.Ejemplos de vacunas de subunidades purificadas incluyen las vacunas contra la HA de la gripe A y B, HBsAg y derivados del plasma de los transportistas. 4. Protenas recombinantes virales Protenas del virus se han expresado en bacterias, levaduras, clulas de mamferos, y los virus. Las clulas de E. coli fueron los primeros en ser utilizados para este propsito, pero las protenas expresadas no glicosilada, que era una gran desventaja ya que muchas de las protenas inmunognicas del virus como el glicoprotenas de la envoltura, glicosilada fueron. Sin embargo, en muchos casos, se demostr que el esqueleto de la protena no glicosilada fue tan inmunognica. La vacuna recombinante contra la hepatitis B es la nica vacuna recombinante con licencia en la actualidad. Una aplicacin alternativa de la tecnologa del ADN recombinante es la produccin de vacunas de virus hbridos. El ejemplo ms conocido es la vacuna, la secuencia de ADN que codifica el gen extrao se inserta en el vector plasmdico con un promotor del virus vaccinia y vacuna secuencias de la timidina quinasa. El vector de recombinacin resultante se introduce en las clulas infectadas con el virus vaccinia para generar un virus que expresa el gen extrao. La vacuna con virus recombinante puede multiplicarse en las clulas infectadas y producir los antgenos de una amplia gama de virus. Los genes de varios virus se puede insertar, por lo que existe la posibilidad de producir vacunas vivas polivalentes. HBsAg, la rabia, el VHS y otros virus han sido expresadas en la vacuna. Las vacunas de virus hbridos son estables y estimular la inmunidad celular y humoral.Son relativamente baratos y fciles de producir. Siendo las vacunas vivas, pequeas cantidades son necesarias para la inmunizacin. Hasta el momento, no hay marcadores de laboratorio aceptados de la atenuacin o la virulencia del virus de la vaccinia para el hombre. Las alteraciones en el genoma del virus vaccinia en la seleccin de recombinantes puede alterar la virulencia del virus. El uso de la vacuna tambin conlleva el riesgo de reacciones adversas asociadas con la vacuna y el virus puede propagarse a los contactos susceptibles. En la actualidad, se estn haciendo esfuerzos para atenuar an ms el virus vaccinia y la posibilidad de utilizar otros vectores recombinantes se est estudiando, como poliovirus atenuados y el adenovirus. 5. Los pptidos sintticos El desarrollo de pptidos sintticos que pueden ser tiles como vacunas depende de la identificacin de sitios inmunognicos. Varios mtodos han sido utilizados. El ejemplo ms conocido es la enfermedad de la fiebre aftosa, donde la proteccin se logra mediante la inmunizacin de animales con una secuencia lineal de 20 aminocidos. Las vacunas de

pptidos sintticos que tienen muchas ventajas. Sus antgenos estn definidos con precisin y libre de componentes innecesarios que pueden estar asociados con efectos secundarios. Son estables y relativamente barato de fabricar.Adems, menos de garanta de calidad se requiere. Los cambios debidos a la variacin natural de los virus puede ser fcilmente acomodado, lo que sera una gran ventaja para los virus inestables, tales como la gripe. Los pptidos sintticos no fcilmente estimular las clulas T. Se supona en general que, debido a su pequeo tamao, los pptidos que se comportan como haptenos y por lo tanto requieren de acoplamiento a una protena portadora que es reconocido por las clulas-T. Ahora se sabe que los pptidos sintticos pueden ser altamente inmunognica en su forma libre siempre que contengan, adems de los eptopos de clulas B, clulas T eptopos reconocidos por las clulas T-helper. Como eptopos de clulas T puede ser proporcionada por las molculas de protena transportadora, los antgenos extraos. o dentro de la molcula de pptido sinttico s mismo. Los pptidos sintticos no son aplicables a todos los virus. Este enfoque no ha funcionado en el caso de poliovirus, porque los sitios antignicos importantes fueron compuestos de dos o ms diferentes protenas de la cpside viral por lo que era de forma concisa en 3-D conformacin. Ventajas de definir antgenos virales o pptidos incluyen: 1. Produccin y control de calidad ms sencillo 2. No NA protenas virales o de otro tipo o externos, por lo tanto menos txicos. 3. Ms seguro en los casos en que los virus son oncognicos o establecer una infeccin persistente 4. Factible, incluso si el virus no puede ser cultivada Desventajas: 1. Puede ser menos inmunognicas que las convencionales virus completo inactivado, vacunas 2. Requiere adyuvante 3. Requiere por supuesto principal de las inyecciones seguidas de refuerzos 4. No para obtener CMI. 6. Anticuerpos anti-idiotipo La capacidad de los anticuerpos anti-idiotipo que imitan antgenos extraos ha dado lugar a su desarrollo como vacunas para inducir inmunidad contra los virus, bacterias y protozoos en animales de experimentacin. Anti-idiotipos tiene muchos usos potenciales, como las vacunas virales, sobre todo cuando el antgeno es difcil de cultivar o peligrosos.Se han utilizado para inducir la inmunidad contra una amplia gama de virus, incluyendo el VIH, la rabia, la enfermedad de Newcastle y el virus de FeLV, reovirus y los poliovirus. 7. Las vacunas de ADN Recientemente, los alentadores resultados fueron reportados por las vacunas de ADN por el cual es directamente de ADN que codifica para el antgeno extrao se inyecta en el animal para que el antgeno extrao est directamente producida por las clulas del husped. En teora, estas vacunas es extremadamente segura y carente de efectos secundarios ya que los antgenos extranjeros se veran directamente producida por el

animal husped. Adems, el ADN es relativamente barato y fcil de producir que las vacunas convencionales y por lo tanto esta tecnologa algn da podra aumentar la disponibilidad de vacunas para los pases en desarrollo. Adems, el tiempo de desarrollo es relativamente corto, que puede permitir la vacunacin oportuna contra las enfermedades infecciosas emergentes. Adems, las vacunas de ADN, tericamente, puede dar lugar a ms largo plazo la produccin de una protena antignica cuando se introduce en un tejido relativamente no se dividen, como los msculos. De hecho, algunos observadores han llamado la nueva tecnologa de la "tercera revolucin" en el desarrollo de vacunas-a la par con Pasteur trabajo pionero con el conjunto del organismo y el desarrollo de vacunas de subunidades. Los primeros ensayos clnicos el uso de inyecciones de ADN para estimular una respuesta inmune contra una protena extraa empez para el VIH en 1995. Otros cuatro ensayos clnicos con vacunas de ADN contra la gripe, virus del herpes simple, linfoma de clulas T, y un ensayo adicional para el VIH se iniciaron en 1996. La tcnica que se est probando en seres humanos consiste en la inyeccin directa de plsmidos - bucles de ADN que contienen genes de las protenas producidas por el organismo siendo objeto de la inmunidad. Una vez inyectado en el tejido muscular del husped, el ADN es captado por las clulas husped, que luego comenzar expresando la protena extraa. La protena acta como un antgeno que estimula una respuesta inmune y la memoria inmunolgica protectora. El entusiasmo por la vacuna de ADN en los seres humanos se ve atenuado por el hecho de que la entrega del ADN a las clulas todava no es ptimo, sobre todo en animales ms grandes. Otra preocupacin es la posibilidad que existe con la terapia gnica, que el ADN de la vacuna ser integrado en los cromosomas de acogida y se activan los oncogenes o desactivar genes supresores de tumores. Otra desventaja potencial es que la inmunoestimulacin extendida por el antgeno extrao en teora, podra provocar la inflamacin crnica o la produccin de autoanticuerpos Presentacin de las protenas y los pptidos inmunognicos Protenas separadas a partir de partculas de virus son generalmente mucho menos inmunognicas que las partculas intactas. Esta diferencia en la actividad se suele atribuir a los cambios en la configuracin de una protena cuando se libera de los requisitos estructurales de la partcula viral. Muchos intentos se han hecho para mejorar la actividad inmunognica de las protenas separadas. Adyuvantes Se utiliza para potenciar la respuesta inmune 1. Funciones para localizar y liberar lentamente el antgeno en o cerca del sitio de administracin. 2. Funciones para activar vehculos blindados para lograr el procesamiento de antgenos eficaz o la presentacin Los materiales que se han utilizado son: 1. Las sales de aluminio 2. Aceites minerales 3. Productos de micobacterias, por ejemplo. Adyuvantes de Freud Complejos inmunoestimulantes (ISCOMS)

1. Un vehculo de la vacuna alternativa 2. El antgeno es presentado en un complejo de acceso, multimrica, fsicamente bien definidos 3. Compuesto de adyuvante (Quil A) y el antgeno a cabo en una jaula como la estructura 4. Adyuvante se lleva a cabo con el antgeno de los lpidos 5. Puede estimular el CMI 6. La media de 35 nm de dimetro En el procedimiento de mayor xito, una mezcla de la planta de glucsido de saponina, colesterol y fosfatidilcolina provee un vehculo para la presentacin de varias copias de la protena en una estructura en forma de jaula. Este tipo de presentacin multimrica imita la situacin natural de los antgenos de los microorganismos. Estos complejos inmunoestimulantes tienen actividades equivalentes a las de las partculas de virus del que se derivan de las protenas, manteniendo as una gran promesa para la presentacin de las protenas de la ingeniera gentica. Consideraciones similares se aplican a la presentacin de pptidos. Se ha demostrado que el pptido mediante la construccin en un marco de residuos de lisina para que ocho copias en lugar de una copia estn presentes, la respuesta inmune inducida fue de una magnitud mucho mayor. Un nuevo enfoque consiste en la presentacin del pptido en una forma polimrica combinada con eptopos de clulas T. La secuencia codificante para el pie y el pptido aftosa virus se expresa como parte de una protena de fusin con el gen que codifica para la protena central de la hepatitis B. La protena hbrida, que forma partculas esfricas de 22 nm de dimetro, provoc niveles de anticuerpos neutralizantes contra el virus de la fiebre aftosa que fueron por lo menos cien veces mayor que las producidas por el pptido monomrico. Vacunacin y la inmunidad de grupo Las preguntas siguientes deben ser hechas en caso de vacunacin contra un virus en particular se est desarrollando. 1. Qu proporcin de la poblacin deben ser vacunados para lograr la erradicacin. 2. Cul es la mejor edad para vacunar? 3. Cmo es esto afectados por las tasas de natalidad y otros factores 4. Cmo la inmunizacin afecta a la distribucin por edades de los individuos susceptibles, en particular los de las clases de edad con mayor riesgo de enfermedad grave? 5. Qu importancia tienen las heterogeneidades genticos, sociales o espaciales en la susceptibilidad a la infeccin? 6. Cmo afecta esto a la inmunidad de grupo? Un concepto bsico es el de la tasa bsica de la R0 infeccin. para la mayora de las infecciones virales, R0 es el nmero promedio de casos secundarios producidos por un caso primario en una poblacin totalmente susceptible. Est claro que una infeccin no se puede mantener o propagacin si R0 es inferior a 1. R0 puede estimarse a partir de B / (AD), B = esperanza de vida, A = edad media a la que la infeccin se adquiere, D = la duracin caracterstica de los anticuerpos maternos. Cuanto mayor sea el valor de R0, ms difcil es erradicar la infeccin de la comunidad en cuestin. Una estimacin aproximada del nivel de cobertura de la inmunizacin requerida

puede estimarse de la siguiente manera: la erradicacin se lograr si la proporcin de vacunados excede un valor crtico pinc = 1-1/R0. As, cuanto mayor sea el R0, mayor ser la cobertura se requiere para eliminar la infeccin. As, la erradicacin mundial del sarampin, con sus R0 de 10 a 20 o ms, es casi seguro que ser ms difcil de erradicar que la viruela, con su estima R0 de 2 a 4. Otro ejemplo es la rubola y la vacunacin contra el sarampin en los EE.UU.. La rubola (A = 9 aos) tiene un Ro aproximadamente la mitad de sarampin (A = 5 aos) y de hecho la rubola ha sido efectivamente erradicado en los EE.UU., mientras que la incidencia de sarampin se han reducido ms lentamente. Por qu no se requiere 100% de cobertura para erradicar una infeccin? La inmunizacin tiene tanto un efecto directo e indirecto. La poblacin husped susceptible se reduce la inmunizacin en masa para que la transmisin de la infeccin se ha convertido en consecuencia menos eficientes y, finalmente, la infeccin no podrn mantenerse. El promedio de edad de la epidemia de infeccin perodo crtico R0 cobertura Sarampin 4-5 15-17 feb 92-95 La tos ferina 3-4 4-5 15-17 92-95 Las paperas 6-7 10 al 12 03 90 a 92 La rubola 10.09 03.05 08.07 85-87 Difteria 11-14 4-6 5-6 80-85 Polio 12-15 3-5 5-6 80-85