A HISTRIA DAS VACINAS: UMA TCNICA MILENAR

Deus no pode querer que sua obra seja maculada, permitindo que se inocule no homem a linfa de um ser inferior, como a vaca.
Papa Pio VII

AO PERCEBEREM QUE OS SOBREVIVENTES de um ataque

Antigos instrumentos de variolizao. Acervo Casa de Oswaldo Cruz.

de varola no voltavam a sofrer da doena, muitos povos tentaram provocar a molstia numa forma mais branda. Os primeiros registros desta prtica, que recebeu o nome de variolizao, remontam aos chineses. Era conhecida entre diversos povos da frica e da sia, como hindus, egpcios, persas, circassianos, georgianos, rabes. Na Turquia, no incio do sculo XVIII, duas inoculadoras de origem grega ficaram famosas uma delas, a Tessaliana, chegou a imunizar cerca de 40 mil pessoas. As tcnicas diferiam: algodo, com p de crostas ou pus inserido no nariz, vestir roupas ntimas de doentes, incrustar crostas em arranhes, picar a pele com agulhas contaminadas, fazer um corte na pele e colocar um fio de linha infectado ou uma gota de pus. Embora a variolizao parea ter sido praticada em algumas regies da Frana, na Esccia, no Pas de Gales e na Itlia, atribui-se sua introduo na Europa Lady Mary Wortley Montagu, mulher do embaixador britnico na Turquia, que fez inocular seus filhos. De Londres, a prtica se espalhou pelo continente, popularizada pela adeso da aristocracia. Foram imunizados as princesas reais Amlia e Caroline, na Inglaterra, Lus XVI, na Frana, Catarina II, na Rssia.

A VARIOLIZAO LOGO CHEGOU S AMRICAS.

Instrumentos de variolizao, obtidos em 1966 no Malawi. Foto de I.D. Ladnyi. Acervo Organizao Mundial da Sade.

Instrumentos de variolizao utilizados no Afeganisto. Acervo Johns Hopkins University.

Jesutas inocularam ndios no Brasil, e Zabdiel Boylston imunizou 243 pessoas durante uma epidemia em Boston, em 1721. Na mesma cidade, em 1764, novo surto de varola levou criao de dois hospitais particulares para inoculao. John Adams, mais tarde presidente dos Estados Unidos, submeteu-se ao tratamento. Este era prolongado trs a quatro semanas de internao e de duas a trs em convalescena. Aps ver seus exrcitos ao norte devastados pela varola, mudando o curso da guerra, George Washington ordenou a variolizao compulsria de suas tropas em 1777. Desde sua introduo na Europa, a variolizao sempre enfrentou uma oposio ferrenha, que se agravou com a comprovao de que cerca de 2% dos inoculados morriam e muitos desenvolviam formas graves da doena. Com isso, em muitos locais, a prtica foi suspensa.

George Washington, retratado por Gilbert Stuart, variolizou suas tropas. Galeria Nacional de Washington.

A PRIMEIRA VACINA
um mdico ingls, observou que um nmero expressivo de pessoas mostrava-se imune varola. Todas eram ordenhadoras e tinham se contaminado com cowpox, uma doena do gado semelhante varola, pela formao de pstulas, mas que no causava a morte dos animais. Aps uma srie de experincias, constatou que estes indivduos mantinham-se refratrios varola, mesmo quando inoculados com o vrus. Em 14 de maio de 1796, Jenner inoculou James Phipps, um menino de 8 anos, com o pus retirado de uma pstula de Sarah Nelmes, uma ordenhadora que sofria de cowpox O garoto contraiu uma infeco extremamente benigna e, dez dias depois, estava recuperado. Meses depois, Jenner inoculava Phipps com pus varioloso. O menino no adoeceu. Cena de vacinao, meados do sculo XIX, Era a descoberta da vacina. Acervo Casa de Oswaldo Cruz. A partir de ento, Jenner comeou a imunizar crianas, com material retirado diretamente das pstulas dos animais e passado brao a brao. Em 1798, divulgava sua descoberta no trabalho Um Inqurito sobre as Causas e os Efeitos da Vacina da Varola. Jenner enfrentou srias resistncias. A classe mdica demonstrava ceticismo. Os variolizadores fizeram ferrenha oposio. Grupos religiosos alertavam para o risco da degenerao da raa humana pela contaminao com material bovino: a vacalizao ou minotaurizao, como foi chamada. Mas, em pouco tempo, a vacina conquistou a Inglaterra. Em 1799, era criado o primeiro instituto vacnico em Londres e, em 1802, sob os auspcios da famlia real, fundava-se a Sociedade Real Jenneriana para a Extino da Varola.
Jenner! No posso negar nada a Jenner, afirmou Napoleo, atendendo a um pedido de libertao de priosioneiros ingleses. Quadro de Jacques Louis David. Galeria Nacional de Washington.

EDWARD JENNER,

A DESCOBERTA DE JENNER LOGO SE ESPALHOU pelo mundo. A partir de 1800, a Marinha britnica

Ao lado, mo da ordenhadora Sarah Nelmes. Desenho de John Neidl.

A vacinao no tempo do Consulado, Frana. Acervo Casa de Oswaldo Cruz.

comeou a adotar a vacinao. Napoleo Bonaparte introduziu-a em seus exrcitos e fez imunizar seu filho. Nas Amricas, chegou pelas mos do mdico Benjamin Waterhouse, de Harvard, popularizando-se, a partir de 1801, quando o presidente Thomas Jefferson foi vacinado. O imunizante chegou a Portugal, em 1799, dentro de um pequeno frasco. D. Pedro, futuro imperador do Brasil, e seu irmo foram inoculados. Em 1804, o marqus de Barbacena trouxe a vacina para o Brasil, transportando-a pelo Atlntico, por seus escravos, que iam passando a infeco vacinal, um para o outro, brao a brao, durante a viagem. A oposio vacina jamais cessou. Camponesas francesas recusavam-se a imunizar seus filhos na esperana de que a varola lhes trouxesse tal degradao fsica, que os tornasse inaptos para o servio militar e, portanto, para a guerra. Vacinadores eram obrigados a pagar para conseguir voluntrios que se deixassem inocular, conservando o vrus vacinal. Para muitos, a imunizao causava repulsa, porque o fluido vacinal era conservado em jovens confiados caridade pblica, muitos portadores de doenas venreas e outras molstias. Foram registrados casos de sfilis, erisipela e hepatite B (esta ltima uma doena ainda desconhecida) associados vacina. Mas nada contribuiu tanto para a resistncia vacinao quanto as epidemias de varola na dcada de 1820, quando um grande nmero de imunizados adoeceu. Descobriu-se, ento, que a proteo no era eterna. Era preciso revacinar-se. Alm disso, a conservao da linfa brao a brao no s adulterava o fluido vacinal, como, com o tempo, fazia com que este perdesse sua potncia. A soluo foi retornar ao vrus original: o da cowpox ou varola das vacas. Apesar de toda a oposio, a vacinao aos poucos foi se generalizando, mesmo que sob presso governamental. Ela se tornou obrigatria na Baviera, em 1807, na Dinamarca, em 1810, na Sucia, em 1814, em vrios Estados germnicos, em 1818, na Prssia, em 1835, e, finalmente, na Inglaterra, em 1853.

Jenner vacinando o filho. Acervo Casa de Oswaldo Cruz.

REVOLUO NA CINCIA
A 6 DE JULHO DE 1885, chegava
TRPLICE
Em 1888, Emile Roux e Alexander Yersin descobriram que o bacilo da difteria produzia uma toxina poderosa, responsvel pelos sintomas da doena. Em 1891, Emil Behring injetava doses subletais desta toxina, provocando o aparecimento de molculas antitxicas (anatoxinas), capazes de proteger contra a infeco e de ser transferidas para outros animais, imunizando-os. Ao aplicar este produto num caso agudo de difteria, deu incio soroterapia que logo empregou tambm no ttano, junto com Shisaburo Kitasato. Por esta descoberta, Behring recebeu o primeiro Prmio Nobel de Medicina. Em 1897, Paul Erhlich desenvolveu mtodos para a padronizao das toxinas. E. Loewenstein e Alexander Glenny provaram, em 1904, que toxinas poderiam ser inativadas por substncias qumicas, no caso formol, mantendo seu potencial imunizante, mas sem causar infeco. Essa descoberta levou ao desenvolvimento dos primeiros toxides: diftrico e tetnico. Coube a Gaston Ramon desenvolver uma vacina antitetnica, a partir do toxide tetnico. Louis Sauer, Pearl Kendrick e Grace Eldering desenvolveram os primeiros imunizantes contra coqueluche (pertussis). Em 1942, Kendrick descobriu que sua vacina funcionava melhor na presena dos toxides diftrico e tetnico, j que os trs componentes agiam como adjuvantes entre si. Combinou-os ento para formar a vacina DPT ou trplice bacteriana a primeira a imunizar contra mais de um microorganismo. ao laboratrio de Louis Pasteur um menino alsaciano de 9 anos, Joseph Meister, que havia sido mordido por um co raivoso. Pasteur, que vinha desenvolvendo pesquisas na atenuao do vrus da raiva, injetou na criana material proveniente de medula de um coelho infectado. Ao todo, foram 13 inoculaes, cada uma com material mais virulento. Meister no chegou a contrair a doena. A 26 de outubro, o cientista francs comunicava Academia de Cincias a descoberta do imunizante contra a raiva, que chamou de vacina em homenagem a Jenner. Louis Pasteur j era famoso quando salvou Meister. Desenvolvera pesquisas sobre fermentao, elaborando um mtodo para conservao da cerveja, a pasteurizao. Formulou a teoria da origem microbiana das doenas. Comprovou que o carbnculo era causado por um microorganismo e descobriu o estafilococo. Desenvolveu imunizantes contra a clera das galinhas e o carbnculo do gado. As vacinas de Pasteur A Raiva Vencida. LIlustration. Acervo Casa de Oswaldo Cruz. foram as primeiras obtidas seguindo uma metodologia cientfica. Fundador da moderna microbiologia e da medicina experimental, Pasteur revolucionou a cincia ao desenvolver um imunizante produzido vontade por um mtodo que podia ser generalizado.
Emile Roux. Acervo Casa de Oswaldo Cruz. Ao lado, Pasteur reconheceu o papel dos microorganismos na fermentao. Acervo Casa de Oswaldo Cruz.

Louis Pasteur. Acervo Casa de Oswaldo Cruz.

A vacina BCG foi introduzida no pas pela Liga Brasileira contra a Tuberculose. Acervo Casa de Oswaldo Cruz.

BCG
Em 1909, Albert Calmette e Camille Guerin, do Instituto Pasteur, comunicavam Academia de Cincias Francesa o desenvolvimento de um bacilo de virulncia atenuada, proveniente de sucessivas culturas em bile de boi, com capacidade imunizante contra a tuberculose. Era o BCG, que, aps uma srie de testes, passou a ser regularmente utilizado como vacina. Primeiro imunizante bacteriano atenuado, o BCG foi introduzido no Brasil em 1925 e atualmente aplicado em crianas recm-nascidas.

IMUNIZANTE TROPICAL
EM 1936, MAX THEILER E HENRY SMITH,
VACNIA
Os problemas decorrentes da linfa humana levaram difuso da vacina antivarilica de origem animal, aperfeioada a partir das descobertas da microbiologia. Conseguia-se a vacnia (vrus vacinal), raspando-se a pele de vitelos com cowpox (varola de vaca). O produto obtido era, ento, filtrado, para evitar a contaminao por outros agentes patognicos. A vacnia Poxvirus officinale um mutante obtido no laboratrio pela passagem seriada do vrus da varola de vaca em pele de vitelo ou de coelho. Foram realizadas vrias tentativas de cultura do vrus vacnico fora do vitelo, mas a produo da vacina contra a varola s sofreu uma grande modificao com a introduo da tcnica de cultivo de vrus em embrio de pinto. Mais tarde, ela passou a ser liofilizada, isto , ter sua umidade retirada, transformando-se numa pastilha e sendo reconstituda no momento da aplicao. Este processo deu maior estabilidade vacina. No Brasil, a vacina cultivada em ovo embrionado foi implantada pelo ento Instituto Oswaldo Cruz, que j dominava essa tecnologia, usada na produo do imunizante contra a febre amarela. Foram diversas as tcnicas de vacinao contra a varola: escarificao (inciso na pele), presso mltipla (esfregar uma agulha paralelamente pele), puno mltipla (vrias picadinhas com uma agulha), broca (rodar um tubo capilar cortado com a vacina sobre a pele), injeo intradrmica e pistola. da Fundao Rockefeller, chegaram cepa 17D da febre amarela, vrus atenuado por passagens em crebro de ratos e em embrio de pinto. No ano seguinte, a vacina foi testada pela primeira vez no Brasil. Em 1940, foi desenvolvido estudo de campo no sul de Minas Gerais, com a imunizao de mais de 5 mil pessoas. A pesquisa deu subsdios para os ltimos ajustes na forma final do imunizante. A vacina contra a febre amarela a primeira no mundo a usar o sistema de lotes-sementes, isto , os lotes originais do vrus atenuado so submetidos a uma nova passagem em ovos embrionados, dando origem a lotes secundrios que serviro de fonte para a produo do imunizante. Desde o final da dcada de 30, a vacina contra a febre amarela vem sendo fabricada em Manguinhos. Hoje, a Fiocruz a maior produtora mundial deste imunizante.

Inoculao em ovos. Acervo Casa de Oswaldo Cruz.

Extrao da linfa varilica da barriga do vitelo. Acervo Casa de Oswaldo Cruz.

Um dos primeiros liofilizadores, desenvolvido por Camus e Fasquelles e utilizado a partir de 1917. Foto de R. Netter. Acervo Organizao Mundial da Sade.

Bulk vacinal. Acervo Bio-Manguinhos.

NOVOS AVANOS
NENHUM IMUNIZANTE CONTRIBUIU TANTO
Marcha do Dime. Acervo Casa de Oswaldo Cruz.

para a popularizao das vacinas como o contra a poliomielite. Conhecida desde a Antiguidade, a doena passou a assumir importncia como problema de sade pblica no final do sculo passado, ao irromper de forma epidmica nos Estados Unidos e na Europa. O impacto causado pela viso de crianas paralticas levou a populao americana a uma mobilizao sem precedentes nas Marchas do Dime, em que pessoas saram s ruas, em todo o pas, pedindo um dime (moeda de 10 centavos) para a pesquisa de uma vacina contra a plio. Bilhes de dlares foram arrecadados. Em 1949, Jonas Salk desenvolveu uma vacina a partir de vrus inativados (mortos), que foi testada em 45 mil crianas nos Estados Unidos, em 1954. Foi o primeiro imunizante no mundo a ser produzido em cultura de tecidos (clulas de rim de macaco) e reunir mais de uma subespcie de vrus (poliovrus I, II e III). No mesmo ano, Albert Sabin desenvolveu a vacina atenuada contra a plio, a primeira a ser aplicada por via oral. Por mimetizar o mecanismo de infeco do vrus selvagem, com a excreo do microorganismo atenuado no ambiente, a vacina Sabin facilita a obteno de altos nveis de imunidade coletiva.

HEPATITE B
Vrus da poliomielite. Acervo Organizao Mundial da Sade.

Envasamento da vacina antiplio. Foto de Luiz Hagen. Acervo Bio-Manguinhos.

O desenvolvimento da tecnologia do DNA recombinante abriu caminho para uma nova gerao de imunizantes. O primeiro a ser comercializado foi a vacina contra hepatite B. O primeiro passo a seleo de um pedao do genoma do vrus, capaz de estimular o sistema de defesa do organismo, mas no de infectar e causar a doena. Utilizando ferramentas da engenharia gentica, esta seqncia inserida num microorganismo no patognico para o homem (no caso, o fungo Saccharomyces cerrevisae ou a bactria Escherichia coli). Assim, o micrbio vetor passa a expressar (produzir) uma protena do vrus da hepatite B, provocando a formao de anticorpos.

Albert Sabin. Acervo Casa de Oswaldo Cruz.