DUPLICACIN DEL DNA PROCARIOTICO.

dnaA dnaB dnaC Rep Protenas del Primosoma n n1 n2 i Primasa

Replisoma DNA Pol III E o DNA Pol C + dnaA DnaB dnaC Rep N n1 n2 i Primasa

Replicacin del DNA en bacterias Iniciacin: desenrollamiento y apertura de la doble hlice en el punto OriC especficamente en los nueve meros y trece mero. El cromosoma bacteriano (E. Coli) es una doble hlice circular. Intervienen un grupo de enzimas y protenas: Al conjunto de protenas dnaA, dnaB, dnaC, n, n, n, i, y primasa, se le llama Primosoma (complejo de protenas que preparan la duplicacin). El primosoma con la DNA polimerasa III se le denomina Replisoma. Un conjunto de ms de 20 protenas con funcin de ATP asa denominada DnaA reconoce a OriC (una secuencia de 245 pares de bases). DnaA se requiere para desenrollar el DNA dplex. Dentro de ORI C existen 9 y 13 sitios que se repiten y se llaman nueve meros y trece meros. Estos se caracterizan por poseer los nucletidos GATC en los cuales la Adenina esta metilada. Interviene la helicasa DnaB que llega con la protena DnaC y comienza el desenrrollamiento.de la doble hlice. Una pequea protena bsica ( 4x ) llamada SSB impide que la doble hlice se cierre. . La protena rep es otra helicasa que facilita el desenrollamiento rompiendo los puentes hidrgeno.. En bacterias existen unas 12 helicasas Paralelamente actan las topoisomerasas I y III y II y IV que eliminan la tensin generada por la torsin en la horquilla de replicacin.La protena Dna A no hidroliza su ATP hasta que no llegue la DNA polimerasa. Llegan n, n, ni En eucariontes hay 20,000 origenes de replicacin. Elongacin: sntesis de dos nuevas hebras de DNA. Es necesario que un cebador de RNA sea sintetizado por una primasa o cebadorasa (RNA polimerasa dependiente de DNA ) puesto que la DNA polimerasa III es incapaz de iniciar la sntesis por si sola. La DNA polimerasa III sintetiza las nuevas hebras en sentido 5-3, ya que la lectura se hace en el sentido 3-5. La duplicacin es semiconservativa y discontinua. Detrs de la DNA Pol 3 interviene la DNA polimerasa I que tiene 3 funciones enzimticas: elimina el RNA cebador, polimeriza al rellenar el hueco creado por la eliminacin del cebador y tiene actividad de proofreading. Las DNA polimerasas 2, 4 y 5 corrigen daos causados por agentes fsicos. La cadena 5-3 (hebra lder) es leda por la DNA polimerasa III en modo continuo. La cadena 3-5 (hebra retrazada) se sintetiza en modo discontinuo o sea en fragmentos de 1000 a 2000 nucletidos, los fragmentos de Okazaki que despus hay que unir a travs de una DNA ligasa. En la hebra rezagada la DNA polimerasa I elimina el cebador y rellena el hueco creado por su eliminacin. Terminacin: Existen seales de terminacin. La replicacin se para en dos secuencias terminadoras de 23 pb reconocidas por las protenas Tus que inhiben la actividad de las helicasas.

Enzimas y Protenas que intervienen en la Replicacin Bacteriana Protena DnaA, En Eucarin: 6 Protenas del CRO forman Complejo Reconocimien Origen DnaB (helicasa) 35 nt / sec En Eucarin : Mcm2-7 heterohexamerica. DnaC Protena rep ( helicasa ) Primasa Funcin Protenas iniciadoras, se unen a oriC; promueven la abertura de la doble hlice; Comienza el desenrollamiento de la doble hlice. (dependiente de ATP) La presencia de tau aumenta 10X Forma complejos con dnaB; suministra dnaB al DNA. Desenrolla la doble hlice para dar paso a la polimerasas. Sintetiza el RNA cebador. 11 bases en E. coli. 8-12 en eucariontes. (Protena enlazante de hebras sencillas). Estabiliza las regiones de un solo filamento. Catalizar el relajamiento del DNA sper enrollado, cortando solo una hebra. Igual que la anterior, pero corta ambas hebras. Sintetiza DNA de 5-3. Dimero asimtrico. Elimina el cebador y rellena brechas. Une los extremos del DNA. REPARACION de daos al DNA.

SSB Eucarin: Protena Replicacin A Topoisomerasa Iy 3 Topoisomerasa II en E coli se llama girasa. Topo 4 . DNA polimerasa E o III. Gram neg. DNA pol C o III C en gram + DNA polimerasa I DNA ligasa DNA polimerasa II, IV y V

HACE MS PROCESATIVA LA DNA POLIMERASA III BACTERIANA Le permite ir a altas VELOCIDADES: ABRAZADERA O PINZA BETA.

DUPLICACIN EN EUCARIOTAS La replicacin en eucariota ocurre durante la fase S del ciclo de vida de la clula. Iniciacin: formacin de miles de horquillas de replicacin. Los cromosomas eucariticos son lineales y poseen muchos sitios de iniciacin, puesto que sus DNA polimerasas actan lentamente en comparacin con las procariticas. Se forman horquillas de replicacin, las cuales se abren bidireccionalmente. La DNA polimerasa alfa tiene un dominio de primasa y un dominio de polimerasa.. La primasa pone un cebador de RNA de unos 10 nt. y luego en el extremo 3 del mismo, la misma enzima con su actividad de polimerasa aade un fragmento de unos 300 nucletidos: el DNA iniciador Llega el factor de replicacin C con una protena A que desplaza a la pol alfa y atrae a PCNA que sirve de abrazadera y hace procesativa a la verdadera enzima que polimeriza: la DNA polimerasa epsilon. Elongacin: sntesis por DNA polimerasa psilon en hebra lider y pol delta en la rezagada. Terminacin: como cada cromosoma es lineal, la duplicacin termina cuando se replica cada uno de los cromosomas que se encuentran en el ncleo. Un problema que plantea la forma lineal de los cromosomas es que cuando se duplican, el extremo 5 de una hebra permanece sin rellenar cuando se elimina el cebador de RNA. Esto se corrige gracias a una enzima la telomerasa que es capaz de rellenar el hueco dejado al eliminarse el cebador de RNA. Protena DNA polimerasa alfa-primasa La nica pol con actividad d primasa DNA polimerasa beta DNA polimerasa gama DNA polimerasa delta DNA polimerasa epsilon DNA polimerasa eta RNAasa H1 y FEN 1 DNA polimerasa zeta Funcin Pone el Primer y alarga unos nucletidos 300 nt Reparacin de DNA Duplica DNA mitocondrial Enzima que polimeriza el DNA de La hebra rezagada.Rellena el hueco FEN1 Enzima que polimeriza y repara la hebra lder Reparacin de DNA Quita el nt que une el RNA con el DNA i y elimina el cebador Reparacin de dimeros de timina

Hace PROCESATIVA a la DNA pol delta en EUCARIONTES : PCNA. (Antigeno Nuclear de Proliferacin Celular.) y la Protena de Replicacin C que le sirve de ancla.