A gua uma das substncias mais comuns e mais importantes na superfcie da Terra, foi nela que a vida evoluiu na gua e nela que se processam os principais processos bioqumicos (Larcher, 1995). Os tecidos moles das plantas so constituidos em 90% a 95% por gua. Apesar de terem de garantir uma percentagem to elevada de gua no seu corpo as plantas no se podem deslocar para a ir buscar. Assim, a compreenso da forma como as plantas a vo obter, distribuir pelos diferentes tecidos do seu corpo e como a conseguem armazenar um dos aspectos fundamentais da Fisiologia Vegetal.
1.1. A ESTRUTURA MOLECULAR DA GUA:
A importncia da gua para a vida provm das suas caractersticas fsicas e qumicas que por sua vez resultam da sua estrutura molecular (Kramer & Boyer, 1995). Quando os dois tomos de hidrognio e o de oxignio se combinam para formar gua h uma partilha dos electres de valncia, aos pares, entre os tomos de hidrognio e o do oxignio (figura 1).
Figura 1: Representao esquemtica da estrutura da molcula de gua onde se podem observar os pares de electres compartilhados (sombreados), e os pares isolados do oxignio (chavetas). Retirado de Sutcliffe (1968), fig. 2.1, pag. 6
Neste tipo de ligao, conhecida como covalente, cada tomo contribui com um electro; os dois pares de electres compartilhados que constituiem a ligao so mantidos juntos por ambos os ncleos. As ligaes covalentes so muito fortes, e assim, a molcula de gua extremamente estvel. A distribuio de cargas elctricas na molcula de gua assimtrica: os electres no compartilhados do oxignio encontram-se num lado, enquanto que os dois ncleos dos tomos de hidrognio se encontram no outro (figura 1). Desta assimetria resulta um lado da molcula carregada negativamente e o outro lado positivamente, formando o que se chama um dpolo (Larcher, 1995). Como consequncia do carcter dipolar da gua, o seu lado positivo atrado por cargas negativas e o seu lado negativo atrado por cargas positivas. Assim, quando se dissolvem sais em gua, aqueles dissociam-se em ies positivos (caties) e ies negativos (anies), cada um dos quais se encontra envolvido por uma concha de molculas de gua orientadas (figura 2), que so as responsveis pela separao dos ies em solues aquosas (Taiz & Zeiger, 1998). A espessura da concha depende da intensidade de carga superfcie.
Li +
Na +
(A)
(B)
K +
Rb +
Cs +
Aumento do peso atmico Diminuio da densidade de carga Aumento do raio do io
Figura 2: A) e B) orientao das molculas de gua em relao a superfcies carregadas; C) dimenses relativas de caties hidratados, as reas sombreadas representam a concha de molculas de gua que envolve cada io. Retirado de Sutcliffe (1968), fig. 2.3, pag. 7
Outra consequncia da elevada polaridade da gua a sua capacidade para formar as chamadas pontes de hidrognio, isto , ligaes entre tomos electro- negativos, como o oxignio ou o azoto, atravs dum ncleo de hidrognio (figura 3). Estas pontes de hidrognio, ainda que fracas (a sua energia de ligao pequena, cerca de 20 kJ mol -1 , em comparao com a energia da ligao covalente O H que de cerca de 450 kJ mol -1 permitem uma certa estrutura mesmo na gua lquida (Taiz & Zeiger, 1998).
(C)
Figura 3: Exemplos de pontes de hidrognio (linhas ponteadas): a) entre um grupo de tomos AH e outro grupo de tomos B; b) entre duas molculas de gua; c) entre duas molculas de amnia; d) entre um grupo hidroxilo e uma molcula de gua; e) entre um grupo carbonilo e um grupo imino. Retirado de Noggle e Fritz (1976), fig. 3, pag.379
Para alm das pontes de hidrognio existem ainda as chamadas foras de Van der Waals que so foras de atraco molcular ainda mais fracas que as pontes de hidrognio, cerca de 4.2 kJ mol 1 . Em molculas neutras, isto , no polares, estas foras resultam do facto dos electres estarem permanentemente em movimento, de modo que o centro de cargas negativas nem sempre corresponde ao centro de cargas positivas (Kramer & Boyer, 1995). As molculas de gua no estado slido (gelo) encontram-se dispostas simetricamente numa estrutura em que as pontes de hidrognio formam uma malha. O tomo de oxignio de cada molcula de gua est rodeado de tomos de hidrognio de outras molculas numa disposio tetradrica, de tal modo que os tomos de oxignio formam anis de 6 membros. Esta estrutura chamada aberta porque o espao dentro de cada anel suficiente para acomodar outra molcula de gua (figura 4). No estado lquido as pontes de hidrognio quebram-se e formam-se continuamente por rotao e vibrao das molculas de gua, o que causa ruptura e reestruturao da malha com uma grande rapidez, talvez bilies de vezes por segundo. A grande quantidade de pontes de hidrognio presentes na gua no estado lquido, responsvel pelas caractersticas nicas e biologicamente importantes da gua (Kramer & Boyer, 1995).
Figura 4: Esquema da estrutura aberta da gua no estado slido. Retirado de Kramer & Boyer (1995), fig. 2.7, pag. 24
1.2. PROPRIEDADES FSICAS E QUMICAS DA GUA:
1.2.1. ESTADO FSICO:
Quanto maior for o peso molecular dum composto, maior a probabilidade de ser um slido ou um lquido a uma temperatura de 20 C. Quanto menor for o seu peso molecular maior ser a probabilidade de ser um lquido ou um gas mesma temperatura. Para um composto passar do estado slido para o lquido, ou do lquido para o gasoso, isto , para quebrar as foras que ligam as suas molculas umas s outras, necessrio tanto mais energia, quanto mais pesadas forem as molculas. Por exemplo, o metano (peso molecular, PM = 16), o etano (PM = 30) e o propano (PM = 44), que so hidrocarbonetos de baixo peso molecular, assim como a amnia (PM = 17), e o dixido de carbono (PM = 44) so todos gases a 20 C. No entanto, a gua (PM = 18) a esta temperatura um lquido. A explicao para isto que as pontes de hidrognio constituem uma fora de atraco entre as molculas de gua que particularmente elevada, inibindo a sua separao e escape na forma de vapor. Por outro lado, os hidrocarbonetos, no estado lquido, tm apenas foras de Van der Waals a ligarem as suas molculas e, assim, necessitam de pouca energia para as conduzir ao estado gasoso.
1.2.2. COMPRESSIBILIDADE:
Para todos os efeitos prticos os lquidos so incompressveis. Assim, as leis da hidralica so aplicveis aos organismos vivos porque estes so constitudos em grande parte por gua.
1.2.3. CALOR ESPECFICO:
Calor especfico a quantidade de energia necessria para aumentar de 1 C, uma unidade de massa duma substncia. So necessrios 4.184 J para aumentar de 1 C um grama de gua pura. O calor especfico da gua pura varia apenas ligeiramente ao longo de toda a gama de temperaturas em que a gua se encontra no estado lquido, e o valor mais alto de todas as substncias conhecidas, com excepo da amnia lquida (Hopkins, 1995). Este valor to elevado devido ao arranjo molecular da gua, que permite que os tomos de hidrognio e oxignio vibrem livremente, quase como se fossem ies livres. Assim, podem absorver grandes quantidades de energia sem que haja grandes aumentos de temperatura.
1.2.4. CALOR LATENTE DE VAPORIZAO E DE FUSO:
So necessrios 2 452 J para converter 1 g de gua a 20 C, a 1 g de vapor de gua a 20 C. Este calor latente de vaporizao, invulgarmente alto, de novo causado pela tenacidade das pontes de hidrognio e, assim, da larga quantidade de energia necessria para que uma molcula de gua no estado lquido se separe das restantes. Uma consequncia deste elevado calor latente de vaporizao que as folhas arrefecem sempre que perdem gua por transpirao. Para fundir 1 g de gelo a 0 C so necessrios 335 J. Este valor de novo muito elevado e deve-se igualmente s pontes de hidrognio que existem entre as molculas de gua, embora devido estrutura aberta do gelo, cada molcula de gelo estabelea um nmero menor de pontes de hidrognio com as molculas adjacentes (Hopkins, 1995).
1.2.5. MAIOR DENSIDADE NO ESTADO LQUIDO:
Quando o gelo funde o volume total da gua diminui. Isto deve-se a que no estado lquido as molculas se organizam mais eficientemente que no estado slido, ficando cada uma rodeada por outras 5 ou 6 molculas, em oposio ao estado slido em que, como vimos anteriormente, cada molcula de gua est rodeada apenas por 4 outras. O resultado desta diferena de organizao que a gua expande-se quando solidifica e, assim, o gelo tem uma densidade menor que a gua lquida. Deste modo, durante o Inverno o gelo flutua nos lagos e correntes de gua em vez de ir para o fundo, onde poderia permanecer sem derreter durante o Vero seguinte (Kramer & Boyer, 1995).
1.2.6. VISCOSIDADE:
A viscosidade dum fluido indica a sua resistncia a fluir, isto , a dificuldade duma camada deslizar ao longo doutra camada. Como as pontes de hidrognio podem restringir o deslizar de camadas adjacentes de lquidos, a viscosidade da gua relativamente elevada em comparao com solventes que estabeleam poucas ou nenhumas pontes de hidrognio, como por exemplo a acetona, o benzeno, e outros solventes orgnicos com molculas pequenas. O diminuir da viscosidade com o aumentar da temperatura reflecte a quebra das pontes de hidrognio e tambm o diminuir de outras foras de atraco, como as de Van der Waals, devido ao aumentar do movimento trmico das molculas (Kramer & Boyer, 1995).
1.2.7. ADESO E COESO:
Devido sua polaridade a gua atrada por muitas outras substncias, ou seja, capaz de molhar superfcies formadas por essa substncia. o caso das molculas de protenas e os polisacridos das paredes celulares, que so tambm altamente polares. Esta atraco entre molculas diferentes chamada adeso, e devida s pontes de hidrognio que se estabelecem entre molculas. A atraco entre molculas semelhantes chamada coeso. So as foras de coeso que conferem gua uma fora de tenso invulgarmente elevada, isto , a tenso mxima que uma coluna ininterrupta de gua pode sofrer sem quebrar extremamente elevada (Hopkins, 1995). Numa coluna de gua fina e confinada, como as que existem no xilema dum caule, a fora de tenso pode atingir valores muito elevados (cerca de 30 MPa) de modo a que a coluna de gua puxada sem quebrar at ao topo de rvores. Este valor representa cerca de 10% da fora de tenso do fio de cobre ou de alumnio, o que de facto considervel (Taiz & Zeiger, 1998).
1.2.8. TENSO DE SUPERFCIE:
a coeso entre molculas de gua que permite explicar a elevada tenso de superfcie deste composto. As molculas superfcie dum lquido esto continuamente a ser puxadas para o interior do lquido pelas foras de coeso, enquanto que na fase gasosa h menos molculas que, por isso, esto demasiado distantes para exercer uma fora nas que esto superfcie (figura 5). Assim, uma gota de gua actua como se estivesse coberta por uma pele apertada e elstica. a tenso de superfcie que faz com que uma gota tenha uma forma esfrica, e que permite que certos insectos andem sobre a gua. A tenso de superfcie da gua maior que a da maior parte dos lquidos.
Figura 5: Demonstrao esquemtica da tenso de superfcie. As foras de atraco entre as molculas de gua adjacentes (setas mais espessas) so maiores que entre as molculas de gua e ar (setas mais finas). Esta diferena faz com que as molculas superfcie tendam a ser puxadas para o interior da gua lquida. Retirado de Hopkins (1995), fig. 2.3, pag. 27
1.2.9. SOLUBILIDADE:
Uma das caractersticas principais da gua a sua capacidade de dissolver quase todas as substncias em quantidades superiores maioria dos lquidos. A aco dissolvente da gua depende de pelo menos um de trs tipos de interaces entre as molculas de gua e as molculas de solutos: 1. Substncias no ionizveis, mas polares: So substncias que contm oxignio ou azoto na forma de grupos OH, NH 2 , a sua solubilizao devida formao de pontes de hidrognio entre as suas molculas e as da gua. 2. Substncias ionizveis: A sua solubilidade deve-se ao carcter dipolar da gua que lhe confere uma constante dielctrica, isto , a capacidade de neutralizar a atraco entre cargas electricas, muito elevada. Cada io em soluo tem como que uma concha de molculas sua volta. Esta concha actua como um campo de isolamento elctrico que diminui a fora de atraco entre ies com cargas opostas, mantendo-os afastados na soluo. 3. Substncias no polares: Como por exemplo a alanina e outros amino cidos neutros. Estes compostos dissolvem-se na gua por causa das foras de Van der Waals.
1.2.10. A DISSOCIAO DA GUA E A ESCALA DE pH:
Algumas das molculas de gua separam-se em ies hidrognio (H + ) e hidroxilo (OH - ) no processo chamado dissociao ou ionizao. A tendncia para que estes ies se recombinem uma funo da probabilidade para que ocorram colises entre eles, o que por sua vez depende do nmero relativo de ies presentes na soluo. A lei da aco de massas pode ser expressa matematicamente igualando o produto das concentraes molal (m = moles por quilo de gua) a uma constante: |H + | . |OH - | = K Numa soluo diluida, as concentraes molal so virtualmente iguais s concentraes molar (M = moles por litro de soluo final). A temperaturas prximas dos 20 C, K =10 -14 , e assim, em gua pura a concentrao quer de |H + |, quer de|OH - | igual a 10 -7 M. A concentrao de ies hidrognio expressa por uma escala de pH, em que pH = - log |H + |. Ou seja, o pH igual ao valor absoluto da concentrao do io hidrognio, expresso como um expoente negativo de 10. Por exemplo, quando |H + | = 10 -4 , ento o pH = 4. A neutralidade expressa por pH = 7 (|H + | = |OH - |); valores abaixo de 7 indicam acidez, e valores acima de 7 indicam alcalinidade. As unidades de pH so mltiplos de 10 numa escala logartmica, e como tal no podem ser nem adicionados, nem subtrados. De facto, so necessrios 10 vezes menos H + para mudar o pH duma soluo tamponizada de 7 para 6, que de 6 para 5.
1.3. AS PRINCIPAIS FUNES DA GUA NOS VEGETAIS:
1.3.1. NA ESTRUTURA:
1. a substncia mais abundante em plantas em crescimento activo, podendo constituir cerca de 90 % do peso fresco de muitos orgos. Embora em sementes e em tecidos muito lenhificados possam ter valores muito inferiores: 15 % ou mesmo menos. 2. o constituinte principal do protoplasma. 3. Forma um meio contnuo atravs da planta. Devido s suas propriedades (viscosidade, tenso superficial, grandes foras de adeso e coeso) a gua penetra na maioria dos espaos capilares, estabelecendo um meio contnuo atravs das paredes celulsicas e permeando totalmente o corpo da planta. Este volume de gua actua como absorvente de calor e permite, em parte, a tamponizao da temperatura interna. 4. Permite o desenvolvimento de presso de turgescncia que d um elevado grau de rigidez ao contedo celular e parede celular envolvente. Nas plantas herbceas esta presso que representa, em parte, o esqueleto que fornece suporte aos caules. 5. A entrada e sada de gua de certos tecidos ou clulas responsvel por uma srie de micromovimentos nas plantas, como por exemplo nas clulas guarda dos estomas, e no movimento dos fololos de Mimosa pudica.
1.3.2. NO CRESCIMENTO:
1. A taxa de crescimento das plantas superiores mais sensvel e a sua resposta mais rpida ao estabelecer duma situao de carncia hdrica que a qualquer outro factor ambiental capaz de estabelecer uma situao de stress. 2. A fase de elongamento celular depende da absoro de gua.
1.3.3. NO TRANSPORTE:
1. Para alm de ser o meio onde se processa o transporte de substncias vrias nas plantas, tambm o veculo de transporte. 2. o meio atravs do qual os gmetas mveis efectuam a fertilizao. 3. um dos meios mais importantes na dissiminao de esporos, frutos, sementes, etc.
1.3.4. METABOLISMO:
1. Funes relacionadas com a capacidade de dissolver substncias vrias. Por exemplo, os nutrientes minerais entram na planta dissolvidos na gua (soluo do solo). As substncias que no formam verdadeiras solues, como acontece com muitas protenas, formam sistemas coloidais com gua e ao mudarem do estado sol ao gel, contribuem para os movimentos citoplsmicos. O oxignio e o dixido de carbono necessrios respirao e fotossntese encontram-se dissolvidos na gua, dependendo ambos os processos da solubilidade daqueles gases na gua. 2. A gua o meio onde se processam vrias reaces bioqumicas, muitas das quais dependem, para ocorrer, que os reagentes estejam na forma inica. Por outro lado, tanto os produtos como os reagentes de muitas reaces difundem-se na gua e graas sua movimentao de e para os stios onde ocorrem as reaces que existe uma certa regulao da taxa a que aquelas reaces ocorrem. 3. Fornece os ies H + e OH - . 4. um reagente importante, principalmente nas reaces de condensao e hidrlise.
1.3.5. OUTRAS FUNES:
1. um dos factores ambientais mais importantes na distribuio dos vegetais na biosfera. 2. A existncia de uma carncia hdrica pode predispr as plantas hospedeiras a ataques de agentes patognicos. 3. Contribui de forma decisiva para a tamponizao da temperatura das plantas atravs da transpirao.
1.4. O CONCEITO DE POTENCIAL HDRICO:
1.4.1. DEFINIO:
A actividade bioqumica do protoplasma mais inflenciada pelo estado termodinmico da gua que pela quantidade total de gua que contm. O estado termodinmico da gua numa clula vegetal pode ser comparado com o potencial qumico da gua pura e a diferena expressa em termos de energia potencial. Uma maneira prtica de conhecermos o estado hdrico duma planta atravs da medio do seu potencial hdrico (representado pela letra grega psi - +), que o trabalho necessrio para elevar a gua ligada ao nvel potencial da gua pura (Larcher, 1995). A gua s se move espontneamente duma zona de potencial qumico mais elevado para uma zona de potencial qumico mais baixo. medida que a gua se move ao longo do gradiente do seu potencial qumico, liberta energia livre, de modo que este fluxo tem a capacidade de realizar trabalho. O potencial qumico tem unidades de energia (J mol -1 ). No entanto, em fisiologia vegetal, habitual exprimir o estado hdrico em termos de potencial hdrico (+) utilizando unidades de presso. Isto pode ser obtido dividindo o potencial qumico pelo volume parcial molal da gua ( = 18.05 x 10 -6 m 3 mol -1 a 20 C), e usando a seguinte definio de potencial hdrico:
em que, w o o potencial qumico da gua num estado de referncia que consiste em gua pura e livre mesma temperatura, presso atmosfrica, e a uma altura de referncia (Jones, 1992). Como consequncia desta definio o potencial hdrico (+) zero quando a gua est disponvel em grandes quantidades, diminuindo para valores negativos quando a gua se torna mais escassa. Assim, pelo menos em sistemas vegetais, valores mais elevados de potencial hdrico, so geralmente menos negativos (Jones, 1992). Disto resulta que a gua nos sistemas vegetais desloca-se sempre de potenciais hdricos menos negativos para os mais negativos. Durante muitos anos o bar foi usado como unidade de potencial hdrico, no entanto, a unidade apropriada do S.I. o Pascal (1 Pa = 1 N m -2 = 10 -5 bar), e o potencial hdrico normalmente expresso em MPa (1 MPa = 10 bar).
1.4.2. OS COMPONENTES DO POTENCIAL HDRICO:
O potencial hdrico total pode ser repartido em vrios componentes. Destes, um ou mais podem ser relevantes para um dado sistema:
em que, + t , + p , + m e + g so os componentes devidos, respectivamente s foras osmticas, de presso, mtricas e gravitacionais. + O termo + t , pode tambm ser representado por + s , e chamado potencial osmtico ou potencial de solutos. Este termo representa o efeito que a existncia de solutos tem no potencial hdrico do sistema em considerao. Os solutos reduzem a energia livre da gua no sistema, uma vez que a diluem. Este efeito primariamente um efeito de entropia, isto , a mistura de solutos e gua aumenta a desordem do sistema. Este efeito de entropia da dissoluo de solutos pode ser revelado em vrios efeitos fsicos conhecidos como propriedades coligativas. Estas propriedades tm este nome porque actuam em conjunto. Elas dependem do nmero de partculas e no da natureza do soluto. Assim, a presena de solutos reduz a presso de vapor duma soluo, aumenta o seu ponto de ebulio e baixa o seu ponto de congelao (Taiz & Zeiger, 1998). Em muitos casos, em vez de potencial osmtico, que negativo, muitos autores preferem o termo presso osmtica (H = -+ t ). Pode demonstrar-se que o potencial osmtico est relacionado com a fraco molar da gua (x w ) ou com a sua actividade (a w ), da seguinte forma (Jones, 1992):
em que, w um coeficiente de actividade que mede o afastamento do comportamento ideal duma soluo, 9 a constante dos gases perfeitos (8.314 m 3 Pa mol -1 K -1 ), e T a temperatura em graus kelvin (K). medida que a concentrao em solutos aumenta, x w e + t diminuem. Ainda que w seja igual a 1 em solues muito diludas, a maioria dos sistemas vegetais mostra um desvio deste comportamento ideal. Uma aproximao muito til da equao anterior, e que razoavelmente correcta para muitas solues biolgicas, a relao de vant Hoff (Jones, 1992):
em que, c s a concentrao de solutos expressa em mol m -3 de solvente. Muitas plantas tm um potncial osmtico (+ t ) na ordem de - 1 Mpa (H = 1 Mpa). Usando a equao anterior, substituindo o valor 9T a 20 C (8.314 m 3 Pa mol -1 K -1 x 293 K = 2436 m 3 Pa mol -1 ), teremos c s = + t / -9T = (-10 6 Pa) / (-2436 m -3 Pa mol -1 ) = 4.105 x 10 -4 x 10 6 mol m -3 ~ 411 mol m -3 , ou mais correctamente 411 osmol m -3 . (NOTA: Um osmole anlogo a um mole, uma vez que contm o nmero de Avogadro de partculas osmoticamente activas, por exemplo: um mol de NaCl tem 2 osmol). + O termo + p , representa a presso hidrosttica da soluo ou potencial de presso. Presses positivas elevam o potencial hdrico e as negativas reduzem-no. A presso hidrosttica positiva no interior das clulas pode ser referida comopresso de turgescncia (P) ou turgidez. O valor de + p pode ser negativo, por exemplo no xilema, ou entre as paredes das clulas onde se podem desenvolver foras de tenso ou presso hidrosttica negativa (Taiz & Zeiger, 1998). A presso hidrosttica medida como desvio presso ambiente. Como a gua no estado de referncia est presso ambiente, ento por definio + p = 0 MPa para gua no estado padro. Assim, o valor de + p de gua pura num copo = 0 MPa, ainda que o valor da sua presso absoluta seja 1 atmosfera (~ 0,1 MPa). A gua sujeita a um vaco perfeito tem um + p = -0,1 MPa, mas o valor da sua presso absoluta de 0 MPa. Consequentemente importante ter sempre presente a diferena entre o + p e a presso absoluta (Taiz & Zeiger, 1998). + O termo + m designado por potencial mtrico (+ m ), semelhante a + t , ex-cepto que a reduo de a w resulta de foras existentes superfcie de slidos. Este componente pode ser muito importante quando se estuda o potencial hdrico de solos, sementes, paredes celulares, etc. A distino entre + m e + t at certo ponto arbitrria uma vez que difcil decidir se as partculas so solutos ou slidos, de forma que + m
muitas vezes incluido em + t (Jones, 1992). + A componente gravitacional, potencial gravitacional (+ g ), resulta de diferenas na energia potencial devidas a uma diferena na altura do nvel de referncia, sendo positivo se o nvel estiver acima do nvel de referncia, e negativo se estiver abaixo:
em que, w a densidade da gua e h a altura acima do nvel de referncia. Ainda que frequentemente negligenciado em sistemas vegetais, o + g aumenta 0.01 Mpa m - 1 acima da altura do solo, e por isso deveria ser incluido sempre que se estudam rvores altas (Jones, 1992).
1.4.3. AS RELAES HDRICAS DAS CLULAS VEGETAIS:
As clulas vegetais funcionam como osmmetros com um compartimento interno, o protoplasto, envolto pela membrana plasmtica semipermevel, isto , permevel gua e impermevel aos solutos. O grau de semipermeabilidade duma membrana a qualquer soluto dada pelo coeficiente de refleco (o), que varia entre 0 para uma membrana completamente permevel, a 1 para uma membrana perfeitamente semipermevel. Uma vez que a gua permeia facilmente a membrana plasmtica, o potencial hdrico dentro das clulas equilibra-se com o ambiente circundante dentro de segundos, ainda que seja preciso mais tempo para todas as clulas num tecido se equilibrarem com uma soluo exterior (Jones, 1992). Outra caracterstica importante das clulas vegetais que esto encaixadas numa parede celular relativamente rgida que resiste expanso, permitindo, assim, que se gere uma presso hidrosttica interna. Os componentes do potencial hdrico que so relevantes numa clula vegetal so os potenciais osmtico e de presso (Jones, 1992): ou A diferena de presso entre o interior e o exterior da parede duma clula vulgarmente chamada presso de turgescncia (P). Para um dado contedo celular em solutos a presso de turgescncia diminui medida que o potencial hdrico da clula diminui (fica mais negativo). O potencial hdrico da maior parte das espcies vegetais situa-se entre os -0.5 e os -3.0 Mpa. As relaes hdricas das clulas vegetais (e tecidos) podem ser convenientemente descritos pelo diagrama de Hofler - Thoday (figura 6) que mostra a interdependncia do volume celular, de +, de + t e de + p , medida que a clula perde gua. Numa clula completamente trgida (turgidez mxima) + = 0, de modo que + t = + p . Neste ponto do grfico, o contedo hdrico da clula ou tecido, expresso como fraco do contedo hdrico mximo, isto , em turgidez mxima, tem de ser 1. A esta fraco d-se o nome de contedo hdrico relativo (u). medida que que sai gua da clula, o seu volume diminui, de modo que a presso de turgescncia, gerada devido extenso elstica da parede celular, diminui quase linearmente com o volume da clula at ao ponto de turgescncia zero (quando + p = 0). Na maioria das plantas, mesmo que o contedo hdrico diminua mais, a presso de turgescncia mantm-se perto de 0. No entanto, h dados que parecem indicar que se que se desenvolvem presses negativas em certas clulas rgidas, tais como os ascsporos de Sordaria sp. medida que o volume diminui, o potencial osmtico diminui curvilineamente, como de esperar da relao de vant Hoff que mostra que -+ t est inversamente relacionado com o volume (Jones, 1992). O emurchecimento das folhas geralmente observvel quando se atinge o ponto de turgescncia zero. A este ponto d-se o nome de plasmlise incipiente devido observao que quando se colocam tecidos em solues de potencial hdrico mais negativoas clulas ficam plasmolisadas, isto , a membrana das clulas separa-se da parede celular causando danos possivelmente irreparveis. No entanto, em tecidos em situao normal na parte area no deve ocorrer plasmlise devido s foras capilares da interface ar-gua nos microcapilares das paredes das clulas que evitam que eles fiquem secos, de forma que toda a tenso suportada pela parede e no pela membrana. Tambm no ocorre plasmlise sempre que os tecidos estejam submersos em solues cujos solutos sejam demasiadamente grandes para penetrar nas paredes das clulas, porque tal como acontece com os tecidos da parte area, a tenso gerada suportada pela parede e no pela membrana. Uma caracterstica importante na determinao das curvas da figura 6, a elasticidade das paredes das clulas. Se a parede for muito rgida, o potencial hdrico e os seus componentes mudam com relativa rapidez para qualquer perda de gua. A rigidez da parede pode ser descrita pelo mdulo global da elasticidade da parede (c B ), que pode ser definido pela equao (Jones, 1992):
ainda que alguns autores normalizem esta equao para V o , o volume da clula quando trgida, em vez de V. importante notar que este mdulo global de elasticidade diferente do mdulo da elasticidade do material que compe a parede e depende, at certo ponto, da estrutura do tecido e da natureza das interaces entre clulas. Nas clulas vegetais c B pode apresentar valores entre 1 a 50 Mpa, indicando os valores mais altos paredes com pouca elasticidade ou tecidos com clulas pequenas. Os tecidos vegetais no so slidos nem homogneos e, quando so comprimidos perdem gua pelo que no surpreendente que c B mostre um comportamento no linear aumentando muitas vezes com o aumento da presso de turgescncia, duma forma aproximadamente hiperblica a partir de valores prximos de zero - situao de zero de presso de turgescncia. O diagrama de Hofler-Thoday , de facto, mais apropriado para clulas isoladas, uma vez que as vrias clulas num tecido apresentam dimenses diferentes e podem apresentar diferentes elasticidades e contedos em solutos, alm de que num tecido h uma componente de presso devida s clulas vizinhas. Assim, as propriedades hdricas dum tecido, ainda que possam ser representadas por este tipo de diagrama, so diferentes das clulas individuais que compem o referido tecido.
Turgidez mxima
Potencial de presso, + p
(MPa)
Potencial osmtico, + t (Mpa) ou Potencial hdrico, + (MPa)
Plasmlise incipiente
Emurchecimento
Figura 6: Diagrama de Hofler-Thoday ilustrando as relaes entre o potencial hdrico (+), o potencial osmtico (+ t ), o potencial de presso (+p) e o contedo hdrico relativo (u), medida que a clula ou o tecido, em turgidez mxima, perde gua. A linha a tracejado abaixo do ponto de turgidez zero representa uma possvel turgidez negativa em clulas de paredes muito rgidas. Retirado de Jones (1992), fig. 4.3, pag. 78
As concentraes em solutos nas paredes das clulas e no xilema so geralmente muito baixas, diminuindo em menos de 0.1 Mpa o valor do potencial hdrico. Nos vasos condutores do xilema a componente principal a presso, que pode atingir valores muito negativos (por vezes abaixo de - 6.0 MPa em certas plantas do deserto sujeitas a forte deficit hdrico). No entanto, as paredes dos vasos do xilema so suficientemente rgidas para suportar tais tenses sem sofrerem grandes deformaes.
1.5. OS PROCESSOS ENVOLVIDOS NO TRANSPORTE DE GUA:
Um dos objectivos da Fisiologia Vegetal compreender a dinmica da gua medida que flui para dentro ou fora das clulas; de ou para o solo e atravs da planta para a atmosfera. O movimento de uma substncia de uma regio para outra designado por translocao. Os mecanismos de translocao podem ser activos ou passivos dependendo de requererem ou no energia metablica para ocorrerem. muitas vezes difcil distinguir entre ambos, mas no caso da gua a sua translocao nas plantas claramente um processo passivo (Hopkins, 1995). O movimento passivo da maior parte das substncias pode ser explicada por difuso ou por fluxo em massa. No caso da gua pode ocorrer um tipo especial de difuso chamado osmose (Hopkins, 1995).
1.5.1. A DIFUSO: As molculas da gua numa soluo no esto estticas, mas sim em permanente movimento, colidindo umas com as outras, trocando energia cintica. A difuso o processo atravs do qual as molculas de substncias diferentes se misturam devido sua agitao trmica ao acaso (figura 7). Esta agitao leva ao movimento ao acaso de substncias de locais onde existem com maior energia livre para locais de menor energia livre. Desde que no existam outras foras a actuar sobre as molculas, a difuso faz com que as molculas se desloquem de zonas de concentrao mais elevada para zonas de concentrao mais baixa, isto , ao longo de um gradiente decrescente de concentraes (Taiz e Zeiger, 1998). Ou, no caso da gua, ao longo de um gradiente decrescente de potencial hdrico (menos negativo para mais negativo). Este processo foi examinado quantitativamente por A. Ficks que, em 1855 formulou a que ficou conhecida por 1 Lei de Fick da difuso e que nos diz que:
Em que J a densidade de fluxo, isto , a quantidade da substncia que atravessa a unidade de rea por unidade de tempo (mol m -2 s -1 ); D o coeficiente de difuso, uma constante de proporcionalidade que mede a facilidade com que a substncia em difuso se move no meio em questo; A e l so respectivamente a area da seco transversal e o comprimento da via de difuso. O termo AC representa a diferena de concentraes entre os dois locais em que ocorre difuso, isto , ogradiente de concentraes. AC a fora motriz para a difuso simples. No caso dos gases conveniente utilizar a diferena em densidade (g m -3 ) ou presso de vapor (kPa) em vez de concentrao (Hopkins, 1995).
Figura 7: O movimento trmico da molculas leva difuso a mistura gradual das molculas que conduz dissipao da diferena de concentraes. A difuso mais rpida para gases. A separao inicial das molculas descrita graficamente na parte superior da figura e os perfis de concentrao correspondentes na parte inferior. Com o decorrer do tempo o misturar e o casualizar das molculas diminui o movimento lquido. Em equilbrio os dois tipos de molculas esto dispostas ao acaso (uniformemente) Retirado de Taiz & Zeiger (1998), fig. 3.6, pag. 66
1.5.2. O FLUXO EM MASSA: O segundo processo pelo qual a gua se move o fluxo em massa que consiste no movimento concertado de grupos de molculas, em massa, em resposta aplicao de uma fora exterior tal como a gravidade ou presso (Hopkins, 1995). o caso de gua a movimentar-se num cano (cilindro), ou num rio. No caso do fluxo da gua num cano, a densidade de fluxo dada pela lei de Poiseuille que se pode equacionar da seguinte meneira:
Em que r o raio da seco do cilindro; q a viscosidade da gua (~1 x 10 - 3 kgm -1 s -1 a 20 C) e AP o gradiente de presso (fora motriz), ou em termos de volume em deslocao:
Este parmetro exprime-se em m 3 s -1 , e mostra-nos que o fluxo em massa da gua atravs de um cilindro extremamente sensvel ao seu raio, variando na quarta potncia do raio!(Jones, 1992).
1.5.3. A OSMOSE: O movimento de um solvente, tal como a gua, atravs de uma membrana chamado de osmose. Ainda que a gua possa ser absorvida e perdida pelas clulas vegetais com relativa rapidez, estes dois processos so significativamente limitados pela membrana plasmtica que funciona como uma barreira ao movimento de substncias. A relao entre uma determinada membrana e um dado soluto pode ser caracterizada pelo coeficiente de refleco. Duas condies extremas podem descrever a passagem de solutos por uma membrana (Nobel, 1991): + Impermeabilidade em relao a um soluto (membrana semipermevel) que leva a um coeficiente de refleco mximo e igual a um; + A no selectividade que leva a um coeficiente de refleco mnimo e igual a zero. Um coeficiente de refleco igual a zero corresponde ao movimento dum soluto atravs duma barreira com poros muito largos que no consegue distinguir entre as molculas do solvente e do soluto. Um coeficiente de refleco igual a um representa a impermeabilidade total a esse soluto. Para que ocorra osmose necessrio que o coeficiente de refleco seja superior a zero (Nobel, 1991). As membranas das clulas vegetais so semipermeveis, isto , permitem o movimento de pequenas molculas sem carga elctrica (como o solvente) mais rapidamente que o movimento de molculas maiores ou com carga elctrica (solutos). Para que o transporte de substncias como ies inorgnicos, acares, amino cidos e outros metabolitos possa ocorrer atravs das vrias membranas das clulas so necessrias protenas de transporte especiais, os transportadores ou carriers (Taiz & Zeiger, 1998). Tal como a difuso molcular e o fluxo em massa, a osmose ocorre espontaneamente em resposta a uma fora motriz que um gradiente de potencial hdrico. No caso do movimento da gua nas clulas vegetais, o mecanismo de osmose envolve a combinao de, por um lado, a difuso de molculas simples de gua atravs da bicamada lipdica da membrana; e por outro lado, de fluxo em massa atravs de pequenssimos poros de dimenses moleculares cheios de gua (Taiz & Zeiger, 1998). Em qualquer dos casos o gradiente de potencial hdrico entre ambos os lados da membrana que a fora motriz para o movimento (figura 8).
Figura 8: A gua pode passar atravs das membranas das plantas (A) por difuso de molculas individuais atravs da bicamada lipdica da membrana e (B) por fluxo em massa de molculas de gua atravs de um poro formado por protenas integrais da membrana chamadas aquaporinas. Retirado de Taiz & Zeiger (1998), fig.3.8, pag. 68
Durante muitos anos no se poude provar que a gua passava atravs de poros microscpicos na membrana das plantas. Mas no incio dos anos 90 descobriram-se molculas integrais da membrana que formavam canais selectivos para a gua e a que foi dado o nome de aquaporinas. Na figura 9 podemos ver uma representao da topologia geral das aquaporinas. A capacidade das aquaporinas transportarem gua atravs da membrana pode ser regulado pelo seu estado de fosforilao. Isto quer dizer que as clulas podem regular a sua permeabilidade gua ao acrescentarem ou removerem grupos fosfato a resduos de amino cidos especficos na aquaporina (figura 10). Esta modulao da actividade da aquaporina pode alterar a taxa a que ocorre o movimento da gua atravs da membrana (Taiz & Zeiger, 1998)
Figura 9: Topologia geral das aquaporinas. Podemos ver a sequncia primria da aquaporina da membrana plasmtica PM28A que representativa de todas as protenas intrinsecas da membrana (PIPs) e protenas intrinsecas do tonoplasto (TIPs). Ambos os terminais N- e C- esto localizados no lado citoslico, enquanto que os trs loops esto voltados para o apoplasto (PIPs) ou para o vacolo (TIPs). As boxes NPA (Asn-Pro-Ala) esto indicadas a cinzento escuro, e os locais de fosforilao representados aqui por Ser115 e Ser274 da Aquaporina PM28A. Os grupos fosfato esto representados pela letra P a branco em fundo cinzento. Retirado de Kjellbom et al (1999), fig. 3, pag. 313
Figura 10: Modelo para a osmoregulao citoslica de uma clula envolvendo a regulao da capacidade de transporte de aquaporinas (a azul) da membrana plasmtica e do tonoplasto por fosforilao ou defosforilao. Quando a planta sente um potencial hdrico mais baixo no apoplasma, as aquaporinas defosforilam, baixando a permeabilidade da membrana plasmtica, minimizando a perda de gua. As aquaporinas do tonoplasto permanecem abertas permitindo qua a gua se desloque para o citosol para compensar a gua perdida para o apoplasto. Abreviaes: PK, protena cinase; P grupo fosfato. Retirado de Kjellbom et al. (1999), fig.4, pag. 314
2. O MOVIMENTO DA GUA NO SPAC:
2.1. O CONCEITO DE CONTNUO SOLO-PLANTA-GUA- ATMOSFERA (SPAC): Uma forma de se estudar as relaes hdricas das plantas considerar que o movimento da gua atravs do solo para o interior das razes, seguido do movimento no interior das plantas e por fim a sua sada para o exterior na forma de vapor, so processos fortemente interligados. Assim, existiria um contnuo de gua desde o solo at a atmosfera atravs da planta (SPAC) que permitiria tratar o movimento da gua como um sistema anlogo ao do fluxo elctrico num sistema condutor, podendo portanto ser descrito de uma forma anloga da Lei de Ohm (Kozlowski & Pallardy, 1997):
em que I o fluxo elctrico que ocorre devido a uma diferena de potencial V atravs de um condutor que apresenta a resistncia R. Assim, nas plantas temos:
Em que J H2O o fluxo de gua atravs da parte do sistema em considerao, A+ a diferena de potencial hdrico entre os dois pontos do sistema em que se estuda o movimento, e r a sua resistncia (Kozlowski & Pallardy, 1997). Podemos considerar quatro segmentos ou etapas no movimento da gua no SPAC: + Trajecto da gua no solo at rizoderme; + Trajecto radial radicular desde a rizoderme at ao xilema; + Trajecto ascencional do xilema da raiz at s clulas das folhas; + Trajecto do vapor de gua da cmara estomtica at atmosfera. Se considerarmos que existe um fluxo constante (steady-state) atravs da planta ento teremos:
O conceito do SPAC proporciona uma teoria unificadora na qual o movimento da gua atravs do solo, das razes, dos caules e das folhas e a sua evaporao para o ar pode ser estudado em termos de foras motrizes e resistncias a operar em cada segmento. Este conceito tambm til se se pretender estudar a forma como vrios factores, da planta ou ambientais, podem afectar o movimento da gua ao influenciar quer as foras motoras, quer as resistncias ou ainda ambas. Por exemplo, o decrscimo de gua no solo causa um aumento na resistncia do movimento da gua em direco s razes, e causa tambm uma diminuio na fora motriz para este movimento, isto , no gradiente de potencial hdrico (Kozlowski & Pallardy, 1997). Este conceito tambm til para a formulao de modelos para o movimento da gua no SPAC (figura11).
Figura 11: (a) Representao muito simplificada duma planta; (b) Rede de resistncias correspondentes aos vrios segmentos do SPAC; (c) Modelo simplificado em que o modelo ramificado de (b) aparece como uma srie linear de resistncias hidralicas: do solo (Rs ); das razes (Rr); do caule (Rst) e das folhas (Rl), cada uma das quais est representada por uma simples resistncia; (d) O memso que em (c) mas incluindo as capacitncias (C) dos tecidos correspondentes. E representa a direco e a intensidade da transpirao. Retirado de Kozlowski & Pallardy (1997), fig. 11.5, pag. 243
No entanto, h que ter conscincia que este conceito de SPAC uma simplificao extrema do que se passa nas plantas. Assim, podemos indicar algumas das principais crticas a este conceito (Kozlowski & Pallardy, 1997): + O SPAC assume condies constante ao longo do seu trajecto que raramente existem nas plantas; + Dentro da planta, o fluxo varia dentro entre segmentos equivalentes do trajecto. Por exemplo, numa rvore o fluxo no xilema diferente entre vrios ramos, uma vez que partes diferentes da copa duma rvore recebem irradincias diferentes e tm exigncias evaporativas diferentes; + Vrios estudos que envolvem o SPAC so dificultados pelo facto de na fase lquida a gua se movimentar em funo de gradientes de potencial hdrico (figura 12) e na fase gasosa se movimentar em funo de gradientes de presso.
Figura 12: Exemplo da variao do potencial hdrico (+) e dos seus componentes [osmtico (+ t ) e de presso (+p)] ao longo dos vrios segmentos do SPAC. Retirado de Kozlowski & Pallardy (1997), fig.11.3 pag. 241
2.2. A CONDUO DA GUA NA PLANTA:
A gua absorvida pelas razes conduzida a todas as partes do corpo duma planta. Este processo de conduo da gua ocorre em todas as plantas superiores (vasculares) num sistema especial - os feixes vasculares. Nestas plantas, a conduo da gua depende da absoro no sistema radicular, e da perda de gua particularmente atravs das folhas, podendo a distncia entre estes dois tipos de orgos ser considervel. O corpo da planta entre as razes e as folhas preenchido no s pelos feixes vasculares, mas tambm por outros tecidos que tambm participam na conduo da gua. Como vimos anteriormente, a gua move-se sempre segundo um gradiente decrescente de potencial hdrico (do menos negativo para o mais negativo) desde o solo hmido at atmosfera. Este gradiente permite o movimento e conduo vertical da gua e tambm o movimento lateral dentro do corpo da planta. Teoricamente o movimento da gua da planta para o solo tambm possvel. Do ponto de vista da localizao pode considerar-se que a conduo da gua dentro da planta ocorre das seguintes maneiras (no sequnciais): + conduo da gua da epiderme para os feixes vasculares das razes e depois para os caules e folhas; + conduo da gua dos feixes vasculares para os espaos intercelulares dos parnquimas esponjoso e em paliada do mesfilo das folhas, assim como para as clulas da epiderme das folhas; + conduo da gua dos feixes vasculares das razes e parte area para as diferentes clulas e tecidos, assim como para os parnquimas e tecidos de proteco do caule e razes; + conduo da gua atravs do conjunto de tecidos condutores, isto , feixes vasculares de caules e folhas. Dos tipos de conduo acima referidos, os 3 primeiros constituem a conduo extrafascicular, enquanto que o quarto constitui a conduo fascicular.
2.2.1. A CONDUO EXTRAFASCICULAR DA GUA: A conduo extrafascicular da gua por vezes tambm chamada paren- quimatosa, horizontal, directa ou ainda de pequena distncia. Esta conduo ocorre quer na clula propriamente dita, isto , na parede da clula, citoplasma, organelos citoplsmicos e vacolos, quer duma clula para as clulas e tecidos adjacentes. O movimento da gua ocorre pelas seguintes vias (Steudle & Peterson, 1998): + Via apoplstica: realiza-se atravs do apoplasto que representa a ligao de todas as paredes celulares e espaos intercelulares (figura 13 A); + Via simplstica: realiza-se atravs do simplasto que representa a ligao de todas as clulas do corpo atravs dos plasmodesmos (figura 13 B). Estes atravessam as paredes celulares de clulas contguas, permitindo que exista uma continuidade citoplsmica entre as clulas adjacentes (figura 14); + Via transcelular: passagem de clula para clula (figura 13 C). A gua ao movimentar-se atravs do apoplasto ou do simplasto no tem de atravessar nenhuma membrana. Mas na via transcelular tem de atravessar duas membranas plasmticas por camada de clulas. A via transcelular usada especialmente pela gua, uma vez que graas s aquaporinas as membranas so muito permeveis gua. No entanto, este via negligvel para solutos.
Figura 13: Vias para o movimento da gua num tecido vegetal, representado por uma camada de quatro clulas em srie. (A) Via apoplstica nas paredes das clulas, trao azul; (B) Via simplstica mediada pelos plasmodesmos, trao vermelho; (C) Via transcelular, trao amarelo. Retirado de Steudle & Paterson (1998), fig. 2, pag. 781
Em qualquer momento, existe um equilbrio dinmico no movimento da gua entre a via apoplstica e simplstica, devido facilidade com que a gua se desloca entre as duas vias (Steudle & Paterson, 1998).
2.2.2. A CONDUO FASCICULAR DA GUA:
O transporte fascicular da gua tambm chamado vertical ou de longa distncia e ocorre ao longo do eixo longitudinal das plantas vasculares, num sistema especfico de tecidos que constituiem os feixes vasculares. Esta conduo da gua ocorre quer num feixe vascular completo, consistindo de xilema e floema, quer num incompleto, em que um destes tecidos falta ou no est completamente desenvolvido. Quando a direco do movimento essencialmente para baixo, no floema, e os solutos transportados so na sua maioria fotoassimilados fala-se em fluxo de assimilao. Quando o movimento essencialmente ascencional, no xilema, e os solutos so na sua maioria sais inorgnicos, ento trata-se do fluxo transpiracional(Sebanek, 1992).
Figura 14: Estrutura de plasmodesmos. (A) Vista longitudinal de plasmodesmos atravessando as paredes de duas clulas jovens da endoderme; (B) Corte transversal de um plasmodesmo mostrando a sua natureza tubular. PM Membrana plasmtica; DT Desmotbulo Retirado de Salisbury & Ross (1992), fig. 7-8, pag. 141
2.3. O MOVIMENTO DA GUA NO SOLO:
A gua proveniente da precipitao penetra no solo e infiltra-se gradualmente at chegar toalha fretica. Em solos altamente permeveis a taxa de percolao de vrios metros por ano, em solos argilosos de cerca de 1 2 m e, em solos muito compactos, pode ser de apenas alguns centmetros por ano. Uma parte da gua infiltrada, a chamada gua capilar, retida e armazenada nos poros do solo. A quantidade de gua retida como gua capilar e aquela que se infiltra como gua gravitacional depende da natureza do solo e das dimenses e distribuio dos seus poros (figura 15). Poros com menos de 10 m de dimetro retm a gua por capilaridade, enquanto que os poros maiores (> 60 m de dimetro) deixam a gua infiltrar-se mais rapidamente (Larcher, 1995). A capacidade de armazenamento da gua num solo, isto , o contedo em gua em saturao depois da gua gravitacional se ter infiltrado para camadas mais profundas, constitui a chamada capacidade de campo dum solo e expressa em g de H 2 O por 100 g de solo (% peso seco) ou por 100 ml de solo. Os solos de granulado mais fino e os que so mais ricos em substncias orgnicas armazenam mais gua que os que tm um granulado mais grosso (Larcher, 1995).
Figura 15: O estado da gua em solos saturados (a parte esquerda do esquema) e em solos bem arejados (parte direita). Retirado de Larcher (1995), fig. 4.6, pag. 225
A gua que permanece num solo depois da passagem da gua gravitacional retida nos poros por capilaridade; pode ficar presa aos colides do solo e, no caso dos solos salinos, pode ficar osmoticamente ligada a ies. Assim, a energia livre da gua no solo, tal como acontece no interior das plantas, reduzida por certos factores. Na maioria dos solos as contribuies para o potencial hdrico total dadas pelo potencial osmtico, assim como pelo potencial de presso, podem ser desprezadas. No potencial hdrico dos solos a componente crucial o potencial mtrico ou capilar que a energia com que a gua capilar retida por foras superficiais. Este potencial pode ter valores bastante considerveis para solos com poros muito finos. A componente capilar do potencial mtrico pode ser descrito pela frmula (Larcher, 1995):
em que o a tenso de superfcie da gua e d o dimetro do poro (em m). A fora com que a gua retida aumenta gradualmente medida que o solo seca, uma vez que os poros maiores vo ficando vazios e a gua capilar permanece apenas nos mais finos (menos de 0,2 m). Em solos arenosos com uma estrutura granular mais larga a transio particularmente abrupta, enquanto que em solos argilosos, em que os poros so mais pequenos, o potencial hdrico varia mais gradualmente (Larcher, 1995).
2.4. O MOVIMENTO DA GUA DO SOLO PARA O XILEMA DA RAIZ:
2.4.1. A ENTRADA DA GUA NA RAIZ: A planta pode retirar gua do solo desde que o potencial hdrico das suas razes mais finas seja mais negativo que o da soluo do solo na rizosfera. A taxa de entrada de gua na planta pode ser descrita pela equao (Larcher, 1995):
em que W abs a quantidade de gua que as razes absorvem por unidade de tempo e proporcional area de absoro A ou rea activa; ao gradiente de potencial hdrico entre a raiz e o solo (+ solo - + raiz ) e inversamente proporcional ao somatrio das resistncias ao movimento da gua no solo e passagem do solo para o interior da raiz (Er). Embora durante o perodo de crescimento as zonas mais velhas (proximais) fiquem com uma superfcie suberizada (periderme), a area activa vai sempre aumentando devido ao crescimento contnuo no pice radicular. As razes normalmente apresentam potenciais hdricos de alguns dcimos de MPa, o que suficiente para absorver a maior parte da gua capilar da maioria dos solos. Isto pode ser visto na figura 16: um valor de apenas 0,2 MPa nas razes permite-lhes retirar dois teros da gua armazenada num solo arenoso; j um solo argiloso que consegue reter a gua com mais firmeza devido aos seus poros serem finos, perde metade da sua gua capilar para as razes com um potencial hdrico de apenas 0,6 MPa. At um certo ponto as plantas conseguem obter mais gua dos solos diminuindo activamente o potencial hdrico das suas razes. As hidrfitas, isto , as espcies que vivem em locais de grande humidade podem diminuir o seu potencial hdrico para valores na ordem de 1 MPa; as plantas de interesse agrcola de zonas hmidas podem baix-lo at 1 ou 2 MPa; as mesfitas podem chegar aos 4 MPa e as plantas de regies secas (xerfitas) podem chegar aos 6 MPa (Larcher, 1995). Devido extraco da gua do rizosfera pelas razes a gua vai movimentando-se a partir de zonas de maior humidade. Este movimento ocorre apenas ao longo de alguns mm por capilaridade e muito lento.
Figura 16: Diagrama onde se pode ver as relaes entre o potencial hdrico do solo e o seu contedo em gua para um solo arenoso e outro argiloso. O valor convencional para a capacidade de campo de 0,015 MPa, e para o ponto de emurchecimento permanente (PEP) de 1,5 MPa. Abaixo dos 5 MPa toda a gua est ligada higroscopicamente. Os valores mdios para os vrios tipos de plantas dependem do tipo de solo (textura, dimenses dos poros) e da vegetao. Estes valores podem ser menores devido ao ajustamento das plantas a situaes de deficincia hdrica. As setas indicam os valores de potencial hdrico radicular que permitem retirar dois teros da gua dum solo arenoso e metade da gua num solo argiloso. Retirado de Larcher (1995), fig.4.7, pag. 226
2.4.2. O MOVIMENTO RADIAL RADICULAR DA GUA:
No solo o movimento da gua faz-se essencialmente por fluxo em massa. No entanto, assim que a gua fica em contacto com a rizoderme o seu movimento torna- se mais complexo (Taiz & Zeiger, 1998). Para se poder perceber a complexidade do movimento da gua na raiz h que conhecer um pouco melhor a sua anatomia (figura 17)
Figura 17: Esquema dum corte transversal duma raiz primria de trigo (Triticum aestivum), na zona pilosa, mostrando as trs vias para o movimento radial radicular da gua. Adaptado de Salisbury e Ross (1992), fig.7.7, pag. 140
Assim, teremos do exterior para o interior: + O sistema drmico constituido, em razes jovens, por uma epiderme, em que algumas clulas tm um formato diferente, constituindo projeces para o solo, e que so os plos radiculares; + O sistema fundamental, constituido por vrias camadas de clulas - o cortex, e a camada mais interna que a endoderme com caractersticas especiais de que falaremos mais adiante. + O sistema vascular em que a camada mais externa o periciclo, e em que o floema e o xilema se dispem alternadamente ao longo dos raios. Nas plantas sujeitas a um regime hdrico adequado ao seu bom desenvolvimento o movimento da gua da rizoderme at endoderme ocorre segundo trs vias: a apolplstica; a simplstica e a transcelular. Em termos experimentais as duas ltimas so difceis de distrinar e consideram-se como um movimento de clula a clula (Steudle, 2001). Como vimos anteriormente a gua movimenta-se sempre segundo um gradiente decrescente de potencial hdrico (do menos negativo para o mais negativo). De acordo com a estrutura radicular o fluxo da gua atravs da raiz tanto pode ser hidrulico (diferenas de presso) como osmtico (diferenas de potencial osmtico). A contribuio relativa destas duas componentes do potencial hdrico para o movimento da gua varia com as condies. Como no h membranas atravs da via aploplstica o fluxo hidrulico domina nesta via. O fluxo pelo apoplasto realizado atravs dum meio poroso sem qualquer capacidade selectiva, isto , o seu coeficiente de refleco igual ou perto de zero. Consequentemente diferenas de potencial osmtico das clulas no causam praticamente nenhum movimento da gua (Steudle, 2001). J na via clula a clula, tm de ser considerados os gradientes osmticos para alm dos hidrulicos. Ao contrrio das paredes, as membranas tm capacidade selectiva e o seu coeficiente de refleco prximo de um (Steudle, 2001). As respostas das razes a vrios factores diferem dependendo de se estabelecer, entre a soluo do solo e o xilema, uma diferena de presso hidrosttica ou uma diferena de potencial osmtico. As diferenas desaparecem na presena de barreiras apoplsticas que interrompem completamente o fluxo apoplstico, ou ento na presena de membranas totalmente permeveis gua. Ambas as situaes extremas existem nas razes das plantas (Steudle, 2001). Devido s caractersticas das suas paredes a endoderme considerada como sendo a barreira principal ao movimento apoplstico da gua e sais minerais provenientes da soluo do solo (figura 18). No entanto, h muitos dados que indicam que em certas situaes de stresse, abaixo da epiderme se forma uma camada de clulas com caractersticas semelhantes endoderme e que a exoderme (Schreiber et al., 1999). Esta tambm pode desempenhar um papel muito importante enquanto barreira ao movimento apoplstico (figura 19). As barreiras ao movimento clula a clula so dadas pela maior ou menor abertura das aquaporinas que dependen muito do metabolismo (Zimmerman et al., 2000)
2.4.3. FACTORES QUE AFECTAM A ABSORO DA GUA:
A taxa de absoro da gua pelo sistema radicular depende de factores quer endgenos, quer exgenos. Dos endgenos importante salientar o desenvolvimento dos plos radiculares e o seu potencial hdrico. Dos exgenos, os mais importantes so a temperatura, a presena de O 2 e CO 2 , a humidade do solo, e as propriedades do perfil da vegetao.
Figura 18: Maturao da endoderme numa plntula de milho (Zea mays L.). Seces transversais foram examinadas ao microscpio ptico aps colorao com Vermelho Sudo III (corante lipoflico). (a) Seco a 4 cm do pice, onde se pode observar a endoderme primria com Bandas de Caspary (setas brancas); (b) Seco a 12 cm do pice. transio entre a endoderme primria (setas) e secundria com lamelas de suberina (coradas a vermelho); (c) Seco a 20 cm do pice, o desenvolvimento secundrio j se completou e cada clula da endoderme apresenta uma lamela de suberina; (d) Incio do desenvolvimento tercirio com paredes secundrias em forma de U sobre a lamela de suberina; (e) Estado avanado do desenvolvimento tercirio com uma deposio de material de parede secundria em U mais desenvolvida. Retirado de Schreiber et al. (1999), fig. 1, pag. 1269
Figura 19: Seces transversais de razes de milho (Zea mays L.) com 8 dias de vida desenvolvidas aeropnicamente (sem meio lquido ou slido, em elevada humidade relativa, mist) de forma a desenvolver uma exoderme. (A) Seco a 50 mm do pice coradas com berberine-aniline observada em UV/violeta (390-420 nm): ex exoderme madura (estado secundrio) com bandas de Caspary (setas); en endoderme (estado primrio) com bandas de Caspary (setas); emx xilema inicial maduro; lmx metaxilema tardio imaturo; (B) clulas da endoderme a 80 mm do pice com bandas de Caspary (setas); (C) clulas da exoderme a 80 mm do pice com lamela de suberina (ex); (D) clulas da endoderme a 200 mm do pice com lamela de suberina (setas); (E) clulas da exoderme a 200 mm do pice com lamela de suberina (ex). Retirado de Zimmermen et al. (2000), fig. 1, pag. 306
2.4.3.1. Desenvolvimento dos plos radiculares:
O crescimento dos plos radiculares aproximadamente de 0.2 a 0.4 mm por hora, isto , 5 a 10 mm por dia (Sebanek,1992). Pensa-se que a causa principal do grande crescimento dos plos radiculares a imobilidade da gua num solo parcialmente seco. A superfcie total dos plos radiculares representa uma enorme rea de absoro da gua do solo (figura 20).
Figura 20: Os plos radiculares e a absoro da gua. (A) Plos radiculares do rabanete (Raphanus sativus ); (B) Os plos radiculares aumentam a absoro da gua pela capacidade de penetrar nos espaos capilares cheios de gua entre as partculas de solo; (C) Os plos radiculares aumentam vrias vezes o volume do solo a partir no qual uma raiz pode extrair gua. Hopkins (1995), Fig. 3.17, pag. 61
2.4.3.2. Potencial hdrico dos plos radiculares:
Se o potencial hdrico dos plos radiculares for mais baixo que o da gua do solo, ento, entrar gua para o seu interior. Se o potencial hdrico dos plos aumentar (ficar menos negativo), a gua pode deixar de entrar para o seu interior, o crescimento das plantas inibido ou pode mesmo parar, as plantas murcham e diminui a produo (Sebanek, 1992).
2.4.3.3. Temperatura:
O efeito de baixas temperaturas na absoro da gua pelo sistema radicular das plantas muito importante. Por exemplo, em pepino (Cucumber sativus), em tabaco (Nicotiana tabacum), e noutras espcies ocorre uma diminuio acentuada da absoro da gua a temperaturas de 5 a 10 C, que pode mesmo parar completamente a temperaturas abaixo dos 4 C levando paragem do crescimento e morte da planta (Sebanek,1992).
2.4.3.4. Oxignio e dixido de carbono:
A falta de oxignio pode parar a absoro de gua pelo sistema radicular levando paragem do crescimento. No solo o contedo ptimo em oxignio da ordem dos 10 a 12 %. Do mesmo modo um nvel demasiado elevado ou demasiado baixo em CO 2 inibe, ou pode mesmo parar, a absoro de gua pelas plantas. O contedo ptimo em CO 2 do solo de cerca de 5 a 15 % (Sebanek, 1992).
2.4.3.5. Humidade do solo:
A absoro ptima de gua pelas plantas ocorre de 60 a 70 % da capacidade mxima do solo. Para prados, plantas hortcolas e plntulas de espcies lenhosas em viveiros, este valor pode atingir os 80 % (Sebanek, 1992)
2.4.3.6. Perfil da vegetao:
Em condies ptimas, o chamado perfil da vegetao, isto , a camada radicular da maior parte das plantas cultivadas, situa-se entre 1.7 a 3.0 m de profundidade. No entanto, existem plantas com sistemas radiculares mais superficiais e outras com sistemas radiculares mais profundos. Por exemplo, a batata (Solanum tuberosum) e a alfafa (Medicago sativa) apresentam sistemas radiculares que se estendem a 0.6 e 16.0 m, respectivamente. A grandeza do sistema radicular pode ser definida em funo da profundidade pela largura do sistema radicular. Normalmente, a extenso em largura das razes proporcional sua extenso em profundidade (figura21 A e B). As razes podem desenvolver-se extensivamente, quando h poucas razes para um grande volume de solo: o caso das espcies em que so colhidas as razes; ou de certas rvores como o pinheiro ou a btula. As razes tambm se podem desenvolver intensivamente, quando o nmero de razes por volume de solo elevado, como o caso dos cereais (Sebanek, 1992).
Figura 21: Sistema radicular de uma macieira (Malus sp. ) (A) Extenso em largura e (B) Extenso em profundidade Retirado de Perz (1999), pag. 125 e 126 2.5. O MOVIMENTO ASCENCIONAL DA GUA:
A existncia de plantas terrestres altas s se tornou possvel quando as plantas adquiriram, no decorrer da evoluo, um sistema vascular que permitiu um movimento rpido da gua para a parte area onde ocorre a transpirao. As plantas terrestres sem um sistema vascular e com mais de 20 ou 30 cm de altura s poderiam existir num ambiente extremamente hmido, onde praticamente no ocorresse transpirao. Isto explica-se pelo facto do movimento da gua por difuso de clula a clula ser demasiado lento para evitar a desidratao da parte area das plantas a transpirar. A importncia do sistema vascular pode ser demonstrado pelo facto de uma rvore, num dia quente de Vero, mover cerca de 200 litros de gua desde as razes at superfcie evaporante das folhas a mais de 20 ou 30 metros de altura (Kozlowski & Pallardy, 1997). Para a maioria das plantas o xilema constitui a parte mais longa da via de conduo da gua no seu interior. Assim, numa planta com um metro de altura, cerca de 99,5% do transporte da gua ocorre no xilema e em rvores mais altas o movimento no xilema representa uma percentagem ainda maior (Taiz & Zeiger, 1998). Quando comparado com a complexidade do transporte radial atravs da raiz, a via no xilema aparece como sendo muito simples e com pouca resistncia. Isto deve- se em parte s suas caractersticas que veremos a seguir.
2.5.1. CARACTERSTICAS DO XILEMA:
O xilema consiste de quatro tipos de clulas: os traquedios, os elementos xilmicos, as fibras, e o parnquima xilmico. + As clulas do parnquima, sobretudo nas plantas lenhosas, so as nicas que esto vivas. Estas clulas ocorrem essencialmente nos raios que aparecem radialmente na madeira das rvores, mas tambm existem clulas do parnquima espalhadas pelo xilema; + As fibras so clulas de esclernquima dispostas ao longo dos feixes e que lhes conferem resistncia; + Os traquedios e os elementos xilmicos dispostos verticalmente so as clulas que esto envolvidas no transporte da soluo xilmica. Duma maneira geral, as gimnosprmicas tm apenas traquedios, enquanto que praticamente todas as angiosprmicas tm elementos xilmicos e traquedios (Taiz & Zeiger, 1998). Estes dois tipos de clulas so alongadas, embora os traquedios sejam mais compridos e estreitos que os vasos xilmicos (figura 22). Tanto os traquedios como os elementos xilmicos funcionam como elementos mortos, isto , depois de terem sido formados por crescimento e diferenciao de clulas meristemticas, morrem e os seus protoplastos (clula vegetal sem parede) so absorvidos por outras clulas. No entanto, antes de morrerem, as suas paredes sofrem alteraes que so muito importantes para o transporte da gua. Uma das mudanas a formao da parede secundria, que consiste largamente em celulose, lenhina e hemi-celuloses, e que cobre a parede primria (Salisbury & Ross, 1992). As paredes secundrias conferem uma fora de compresso considervel s clulas o que evita que entrem em colapso sob as tenses extremas a que por vezes esto sujeitas. Estas paredes, lenhificadas, no so permeveis gua como as paredes primrias. Quando se formam no cobrem completamente as paredes primrias, originando as pontuaes que so zonas circulares, finas, onde as clulas adjacentes esto separadas apenas pelas paredes primrias (Salisbury & Ross, 1992).
Figura 22: Traquedios (A e B) e traqueias (C a G) de diversas plantas, vistos lateralmente. Apenas se apresenta um tero do traquedio B. de notar os diferentes tipos de pontuaes nas paredes laterais destas clulas, e os diferentes tipos de perfuraes que existem nas paredes dos topos das traqueias. Retirado de Noggle e Fritz (1976), fig. 9, pag. 437
Estas pontuaes podem ser simples e, ento, so apenas um buraco redondo na parede secundria, ou podem ser estruturas complexas chamadas pontuaes areoladas, nas quais a parede secundria se estende sobre a pontuao e a parede primria fica mais espessa no centro da pontuao formando o toro (figura 23). A figura mostra que o toro pode funcionar como uma vlvula, fechando quando a presso num lado superior presso no outro (Salisbury & Ross, 1992).
Figura 23: Diagrama duma pontuao areolada dum traquedio de pinheiro (Pinus sp.). Se a presso dum lado da pontuao for superior presso do outro lado, o toro empurrado de maneira que veda o orifcio, impedindo o fluxo atravs dele. Retirado de Salisbury e Ross (1992), fig. 5.7 (a), pag. 99
Os topos das clulas dos traquedios sobrepem-se. As pontuaes nas zonas de sobreposio permitem que a gua suba de um traquedio para outro, ao longo das filas de traquedios. As pontuaes que existem em grande nmero nos lados dos traquedios tambm permitem a passagem de gua entre clulas adjacentes. Por vezes estas clulas presentam espessamento espiralados como os que resistem compresso nos tubos dos aspiradores. Os elementos xilmicos esto tpicamente reforados com estes espessamentos que podem ser circulares, espiralados, etc., Apresentam tambm placas de perfurao nos topos que apresentam aberturas nas quais a parede secundria no se forma e a parede primria e a lamela mdia se dissolvem, permitindo o movimento rpido da gua. Os elementos xilmicos (cada um uma clula) esto alinhados formando grandes tubos, constituidos por vrias clulas e que constituiem as traqueiasque se estendem de alguns centmetros a vrios metros em certas rvores. A resistncia ao fluxo da gua consideravelmente menor nas angiosprmicas que nas gimnosprmicas, em parte devido s placas de perfurao, mas tambm devido a que as traqueias tm dimetros mais largos que os traquedios (Salisbury & Ross, 1992). Por outro lado a transferncia entre traquedios ocorre apenas atravs das pontuaes das extremidades que se sobrepem, enquanto que a transferncia entre traqueias ocorre ao longo duma distncia considervel atravs das pontuaes laterais de duas traqueias adjacentes, em contacto. As traqueias so muito mais longas que os traquedios, de modo que, medida que a gua sobe na planta, tem de passar pelas pontuaes com menos frequncia. H dados que mostram que que o fluxo de gua nas traqueias , de facto, muito mais rpido que nos traquedios.
2.5.2. A TEORIA DA COESO-TENSO PARA A ASCENO DA GUA:
Em 1727 um fisiologista chamado Hales sugeriu que a gua nas plantas entrava facilmente nas razes, mas que s poderia ascender na planta graas transpirao. Esta ideia foi mais desenvolvida nos finais do sculo 19 com Sachs e Strasburger que indicaram a transpirao como sendo a fora motriz para a asceno da gua no xilema, mas no explicaram como isto era possvel. S em 1895 que Ashkenasy primeiro e depois Dixon e Joly perceberam que a gua confinada em pequenos tubos como o xilema desenvolve elevadas foras de coeso e capaz de suportar grandes tenses (Kozlowski e Pallardy, 1997). Estas ideias levaram chamada teoria da coeso-tenso que a mais aceite (ainda que muito controversa) para explicar a subida da gua em plantas a transpirar. Esta teoria assenta em 4 pressupostos (Kozlowski & Pallardy, 1997): + A gua tem foras de coeso internas muito elevadas, e, quando confinada em pequenos tubos de paredes molhveis, como o caso do xilema, pode suportar grandes tenses que podem chegar aos 30 MPa. (NOTA: paredes molhveis quer dizer paredes formadas por substncias com as quais as molculas de gua podem estabelecer foras de adeso); + A gua na planta constitui um sistema contnuo atravs das paredes das clulas saturadas de gua desde as superfcies evaporantes das folhas at s superfcies absorventes das razes; + Quando a gua se evapora de qualquer parte da planta, mas sobretudo das folhas, a reduo do potencial hdrico na superfcie evaporante causa uma deslocao de gua do xilema para essa superfcie; + Devido s foras de coeso entre as molculas de gua, a perda de gua por evaporao causa uma tenso na soluo do xilema que transmitida atravs das colunas contnuas de gua at s razes, onde reduz o potencial hdrico causando um influxo de gua para o seu interior. De acordo com estas premissas, a teoria da coeso-tenso estabelece quer um mecanismo, quer uma fora motriz para o fluxo da gua atravs das plantas. A diferena de potencial hdrico entre a atmosfera e o solo deveria ser mais do que suficiente para providenciar a fora motriz para a subida da gua at ao topo das rvores mais altas. No entanto, este mecanismo requer, para poder operar, elevadas tenses no xilema e difcil de imaginar como que esta tenses podem ser mantidas durante a distncia necessria. Por exemplo, difcil construir uma bomba mecnica que puxasse gua do topo de uma coluna de gua com mais de 10 metros (equivalente a 1 bar de presso) sem que haja falha por cavitao. muito mais fcil utilizar presses positivas aplicadas na base. Assim, a questo crtica saber-se se a tenso de superfcie da gua suficiente para manter estados de alta tenso e se assim for, quais so as condies para manter essa elevada tenso (Steudle, 2001). A fora de tenso da gua (ou de qualquer fluido) muito difcil de medir, no como uma barra de metal. Por outro lado, a fora de tenso de uma coluna de gua vai depender do dimetro da conduta, das propriedades das suas paredes e da existncia de gases ou solutos. Mesmo assim, existem alguns dados bastante consistentes que apontam para que gua pura, sem gases dissolvidos suporta tenses de cerca de -25 a 30 MPa a 20 C. Estes valores so cerca de 10% da fora de tenso do fio de cobre e cerca de 10 vezes superior tenso necessria para levar uma coluna de gua ininterrupta ao topo das rvores mais altas (Hopkins, 1995). A gua no xilema, sob tenso, tem de permanecer no estado lquido a presses muito abaixo da sua presso de vapor. A 20 C a presso de vapor da gua de 2,3 kPa ou 0,0023 MPa. Uma coluna de gua sob tenso est, portanto, num estado fisicamente instvel. Os fsicos chamam a esta condio estado metaestvel, ou seja, um estado em que podem facilmente ocorrer mudanas, mas em que essas mudanas s ocorrem, de facto, devido a um estmulo externo. A estabilidade fsica pode acontecer numa coluna de gua sob tenso pela introduo de uma fase de vapor. As molculas de gua na fase de vapor tm muito baixa coeso o que permite que o vapor se expanda rapidamente causando a ruptura da coluna de gua e, assim, atenuando a tenso (Hopkins, 1995). A origem duma fase gasosa no xilema explica-se pelo facto da gua no xilema conter vrios gases dissolvidos, como o dixido de carbono, o oxignio e o azoto. Quando a coluna de gua est sob tenso, h uma tendncia para estes gases sairem da soluo. primeiro formam-se bolhas submicroscpicas na interface entre a gua e as paredes dos traquedios ou das traqueias, provavelmente em pequenas fendas ou poros hidrofbicos das paredes. Estas pequenas bolhas podem redissolver-se ou podem coalescer e expandir rapidamente preenchendo a conduta. Este processo de formao rpida de bolhas de ar no xilema chamado cavitao (do latim cavus = oco). A bolha grande de gas constitui uma obstruo na conduta a que se d o nome de embolia (do grego embolus = rolha) (Hopkins, 1995). A embolia tem implicaes muito srias para a teoria da coeso-tenso, uma vez que uma traqueia que sofre embolia deixa de poder transportar gua. De facto, a probabilidade elevada de ocorrer cavitao do xilema foi apresentada como sendo a objeco principal teoria da coeso-tenso quando esta foi formulada (Hopkins, 1995). Em 1966, Milburn e Johnson desenvolveram o mtodo acstico para a deteco da cavitao do xilema. Em experincias laboratoriais com tubos finos de vidro, estes autores observaram que a relaxao rpida da tenso que segue a cavitao produz uma onda de choque que pode ser ouvida como um clique. Utilizando microfones sensveis possvel ouvir estes cliques quando so produzidos nas plantas por cavitao no xilema. Utilizando folhas de rcino (Ricinus communis) em stresse, estes autores puderam demonstrar que existe uma relao bastante evidente entre a cavitao e a tenso no xilema o que suportaria, de certa forma, a teoria da coeso-tenso (Hopkins, 1995). Nos finais dos anos 80, Sperry e os seus colegas desenvolveram um outro mtodo baseado nas alteraes da condutncia hidrulica, isto , uma forma de medir a capacidade total dum tecido para conduzir gua. O mtodo acstico apenas contava o nmero e a frequncia das cavitaes, mas o mtodo hidrulico permitia avaliar o impacto das embolias na capacidade de transportar gua do tecido. Estes autores estudaram um talho de ceres (Acer saccharum) e verificaram que durante a Primavera as embolias ocorriam essencialmente no tronco principal e reduziam a condutncia hidrulica em 31% devido ao stresse de carncia hdrica. No Inverno, a condutncia do tronco principal reduzia-se de 60% e nos troncos secundrios a reduo podia atingir os 100%. Este aumento das embolias no Inverno estaria provavelmenete ligada a ciclos de congelao-descongelao. A solubilidade dos gases muito baixa no gelo e, assim, quando a gua congela os gases so forados a sair da soluo; quando se d a descongelao as pequenas bolhas de gases expandem-se e causam a cavitao (Hopkins, 1995). O mecanismo principal para minimizar os efeitos das embolias prende-se com a estrura do xilema. A embolia fica simplesmente contida dentro dum traquedio ou dum elemento do xilema. Nos elementos que apresentam pontuaes areoladas a embolia fica retida pela estrutura da pontuao (figura 24). A diferena de presso entre a traqueia que sofreu a embolia e a adjacente que est cheia de gua faz com que o toro fique comprimido contra o bordo da pontuao, evitando que a bolha de gas passe para o outro lado. A tenso de superfcie impede que a bolha passe atravs das pequenas aberturas das placas de perfurao entre elementos xilmicos contguos. No entanto, a gua vai continuar a fluir lateralmente atravs das pontuaes contornando, assim, o elemento bloqueado (figura24). Para alm de permitir que a gua contorne o elemento bloqueado as plantas tambm podem tentar reparara embolia evitando os danos a longo prazo. Isto pode acontecer noite quando h pouca transpirao. A reduo da tenso no xilema permite que os gases se redissolvam na soluo do xilema (Hopkins, 1995).
Figura 24: As bolhas de ar que se formam no xilema ficam contidas no elemento do xilema ou no traquedio. A diferena de presso resultante da embolia faz com que o toro vede as pontuaes areoladas que existem no elemento afectado. A tenso de superfcie evita que as bolhas passem atravs das perfuraes terminais dos elementos. A gua continua a fluir volta do elemento xilmico bloqueado. Retirado de Hopkins (1995), fig. 3.15, pag. 57
No caso das plantas herbceas os gases podem ser forados a redissolverem- se devido presso radicular, de que falaremos mais adiante. No caso das plantas lenhosas a explicao no to simples. Algumas espcies como a vinha (Vitissp.) ou o cer (Accer saccharum) desenvolvem uma forte presso radicular no incio da Primavera que pode estar relacionada com esta necessidade de recuperar os danos causados pelas embolias do Inverno. Por outro lado, a maioria das espcies lenhosas produz xilema secundrio novo todas as Primaveras. Este xilema novo forma-se antes do desenvolvimento das gemas e podem satisfazer as necessidades da planta em termos de condutncia hidrulica, substituindo o xilema velho e no funcional (Hopkins, 1995).
2.5.3. A TEORIA DA PRESSO RADICULAR:
Sempre que por qualquer motivo uma planta no estiver a transpirar desenvolve-se uma presso positiva nos vasos xilmicos da raiz e da base dos caules (figura 25). Os ies minerais so acumulados activamente pelas clulas da raiz e so bombeados para dentro do xilema, onde, devido ausncia de transpirao, o movimento de gua negligvel causando um aumento da concentrao dos sais. Este aumento em sais provoca uma diminuio do potencial osmtico no xilema, o que causa uma entrada de gua por osmose (Taiz & Zeiger, 1998). O movimento da gua, atravs dos tecidos da raiz para o cilindro central, ocorre atravs das paredes das clulas. No entanto, a gua tem de passar pelas membranas e protoplastos das clulas da endoderme, porque as suas paredes so impermeveis gua. Todo o anel formado pelas clulas da endoderme actua como uma simples mem-brana, com uma soluo concentrada no lado do xilema, e uma soluo diluda no lado do cortex. Assim, a raiz funciona como um osmmetro, com a gua a difundir-se em resposta a uma diferena de concentraes, do solo atravs da membrana endoderme para o xilema. Isto causa o aumento da presso nas clulas do xilema. A parede impermevel da endoderme tambm impede que os sais bombeados para o xilema se difundam de novo para o crtex e para o exterior da raiz. Quando se destaca, ao nvel do solo, o caule de uma planta que no esteja a transpirar, a superfcie de corte exuda grande quantidade de fluido (figura 26). Se se colocar um manmetro na extremidade cortada, observar-se- que as razes esto a produzir uma certa presso (figura 25), a chamada presso radicular (Taiz & Zeiger, 1998).
Figura 25: Experincia que mostra a existncia de presso radicular. A soluo excretada pela base do caule est sujeita a uma presso que pode ser lida no manmetro de mercrio. Retirado de Galston, Davies e Satter (1980), fig. 6.17, pag. 161
A presso radicular s poder ser a causa da asceno da soluo xilmica nas plantas muito jovens, antes das folhas estarem completamente desenvolvidas e a transpirao se tornar um processo dominante.
Figura 26: Exemplos de exsudao da soluo xilmica devida presso radicular, em feijoeiro (Phaseolus vulgaris) esquerda e tomateiro (Lycopersicon esculentum) direita. As fotografias foram retiradas 5 minutos aps a exciso do caule de plantas bem regadas. Retirado de Hopkins (1995), fig.3.10, pag.53.
2.6. AS PERDAS DE GUA PELA PLANTA:
2.6.1. A TRANSPIRAO:
De toda a gua absorvida pelo sistema radicular apenas uma pequena fraco fica retida na planta. A maior parte evaporada pela parte area para o ar circundante. Verificou-se que, numa planta de milho, cerca de 98 % da gua absorvida evaporada pela planta, 1.8 % retida na planta e apenas 0.2 % utilizada na fotossntese. A esta perda de gua pelas plantas, na forma de vapor, d-se o nome de transpirao. A transpirao nas plantas pode ser cuticular, lenticular e estomtica (Salisbury & Ross, 1992). A primeira uma interface lquido-vapor na qual ocorre a evaporao, as outras duas so uma via estrutural para o movimento do vapor que existe entre um espao j preenchido com vapor de gua e a atmosfera .
2.6.1.1. Tipos de transpirao nas plantas:
+ A transpirao cuticular: Nas paredes exteriores das clulas da epiderme de todos os orgos da parte area de plantas herbceas, nas folhas e caules jovens das restantes plantas, existe uma estrutura chamada cutcula. A cutcula apresenta duas zonas (figura 27): a mais exterior e que constitui a cutcula propriamente dita, formada essencialmente por cutina; e a camada cuticular constituida por placas de celulose e cutina. Na cutcula propriamente dita podem existir depsitos de ceras e cristais de outras substncias lipdicas (Mazliak, 1975). A camada cuticular pode conter quantidades variveis de gua dependendo da hidratao da cutcula. Assim, a transpirao cuticular ocorre a uma taxa que depende no s do dficite de vapor de gua da atmosfera, mas tambm da rea da superfcie da gua exposta ao ar. A perda de gua pela cutcula geralmente muito pequena, com excepo das plantas sem estomas funcionais, como musgos e fetos. Nas conferas e nas rvores de folha caduca, a transpirao cuticular pode representar, respectivamente, de 1/30 a 1/40 e de 1/8 a 1/12 da transpirao estomtica. Nas folhas jovens, a transpirao cuticular pode constituir 1/3 a 1/2 da transpirao total (Sebanek, 1992).
Figura 27: Esquema da cutcula. Adaptado de Mazliak (1975), fig. 108, pag. 263
+ A transpirao lenticular: Na grande maioria das plantas existem zonas da periderme, quer dos caules, quer das razes, em que as clulas tm um arranjo menos estruturado, podendo ou no ter as paredes suberizadas. A estas zonas d-se o nome de lentculas (figura 28).
Figura 28: Esquema duma lentcula em Sambucus nigra. Retirado de Fahn (1974), fig. 181, pag. 405
As clulas, de maiores dimenses, do tecido complementar apresentam numerosos espaos intercelulares o que leva a pensar que a funo das lentculas est relacionada com as trocas gazosas, embora a sua importncia a nvel da planta, como um todo, seja aparentemente diminuta. + A transpirao estomtica: A transpirao estomtica consiste na sada de vapor de gua da planta, atravs dos estomas situados na epiderme duma folha ou caule verde e representa um dos processos de maior importncia na interaco entre a planta e o ambiente. Por esta razo, e porque quando consideramos a transpirao como um todo, a componente estomtica largamente dominante, passaremos a tratar a transpirao como se fosse apenas estomtica.
2.6.1.2. A importncia fisiolgica da transpirao:
A perda de gua, na forma de vapor, que a planta experimenta na transpirao no parece ser um processo lgico em organismos que habitam um meio essencialmente seco, como o meio terrestre. Assim, levanta-se a questo de saber qual a vantagem selectiva da transpirao. evidente que as plantas terrestres precisam de absorver CO 2 da atmosfera, e possvel que o mecanismo estomtico tenha evoludo nesse sentido, sendo a transpirao, aparentemente um mal necessrio. No entanto, verificou-se que, em certos casos, a transpirao tem uma importncia fisiolgica indiscutvel (Salisbury e Ross, 1992): + No transporte de nutrientes minerais: os minerais que so absorvidos pelas razes movem-se para a parte area no fluxo transpiracional. Embora tambm haja movi-mento de sais minerais em plantas que no transpiram, no h dvidas que o fluxo transpiracional permite que a absoro de sais minerais a partir do solo se processe a uma taxa mais elevada. + Turgidez ptima: verificou-se experimentalmente que as plantas num ambiente de 100 % de humidade relativa no crescem to bem como em situaes em que existe uma certa transpirao. Pensa-se que existe uma turgidez ptima acima e abaixo da qual as funes celulares das plantas so menos eficientes. Se as plantas no podem transpirar, as clulas tornam-se demasiado trgidas e as clulas no crescem mesma taxa que quando existe uma certa carncia hdrica. + Arrefecimento das folhas: na natureza a transpirao desempenha um papel muito importante no arrefecimento das folhas. A evaporao da gua um processo muito importante no arrefecimento de qualquer corpo. Quando 1 g de gua se evapora a 20 C absorve 2.45 kJ do ambiente (calor latente de vaporizao). As plantas evaporam grandes quantidades de gua para a atmosfera e assim, dissipam grandes quantidades de energia.
2.6.1.3. Periodicidade da transpirao nas plantas:
Todos os factores exgenos e endgenos que afectam a transpirao esto sujeitos a alteraes durante o dia, originando uma periodicidade dirna na taxa a que este processo ocorre. Para a maior parte das plantas durante a noite a taxa de transpirao geralmente baixa, perto de zero, aumentando depois do nascer do Sol at atingir um mximo ao meio-dia. Da parte da tarde a transpirao comea a diminuir at atingir, ao entardecer, os valores mnimos, semelhantes aos da noite (Sebanek, 1992). Durante a ontogenia, a evoluo da taxa de transpirao diferente consoante as espcies. Nos estdios iniciais do desenvolvimento, por exemplo de cereais, a taxa de transpirao muito elevada, registando-se os valores mximos no final do estdio de afilhamento, seguido de um decrscimo abrupto com valores mnimos no final do estdio de crescimento rpido e no incio da antese. Existe outro pico de transpirao durante a florao, seguido de um decrscimo depois do estdio de maturao lctea e que continua at ao fim da maturao cerosa. Por exemplo, em cultivares de trigo (Triticum sp.) de Primavera ou Inverno, o consumo de gua varia, respectivamente, de 0.8 a 1.0 litro e de 1.0 a 1.2 litros, por afilhamento. Em campos irrigados, um afilhamento duma planta de trigo pode precisar de 2 litros de gua (Sebanek, 1992).
2.6.1.4. Trajecto do vapor de gua da folha para a atmosfera:
Quando os estomas esto fechados, a densidade de presso de vapor nos espaos intercelulares est muito perto da saturao. Nestas condies o potencial da gua nas paredes das clulas est muito prximo de zero, assim como o potencial hdrico das clulas do mesfilo com o qual aquela gua est em equilbrio (Meidner & Sheriff, 1976). Quando os estomas abrem e comea a difuso do vapor para o exterior, desenvolve-se um gradiente de presso de vapor entre as paredes das clulas, local de evaporao, e a cmara estomtica. Normalmente, a densidade de presso de vapor na cmara estomtica no desce abaixo dos 96 % de saturao, o que corresponde a um valor de potencial hdrico (+) da ordem dos -5.0 Mpa. Em vez dum equilbrio esttico desenvolve-se um gradiente dinmico de potenciais hdricos entre a gua nas paredes das clulas e a fase de vapor. Assim que a densidade de vapor deixa de ser 100 % de saturao, o potencial hdrico da fase vapor torna-se mais negativo que o da fase lquida. A 20 C, para uma humidade relativa de 99 % o + de -1.37 Mpa, e para 98 % de -2.72 Mpa (figura 29). O potencial hdrico das paredes das clulas diminui, essencialmente devido s foras matriciais, medida que a gua perdida por evaporao e os meniscos dos poros se retraiem para capilares mais estreitos. No entanto, desde que o potencial hdrico das clulas permanea razoavelmente alto, continua a haver um movimento de gua para as paredes das clulas. Mesmo quando o potencial hdrico das clulas diminui drsticamente, devido perda de turgidez ou diminuio do potencial osmtico, o sistema contnuo de gua na planta permite o fornecimento de gua para as clulas do mesfilo, assim como para os locais de evaporao (Meidner & Sheriff, 1976).
Figura 29: Representao esquemtica das linhas de fluxo de vapor entre a cmara estomtica e a atmosfera exterior. A rea da parede interna da epiderme representa um tero da superfcie interna total da cmara. Retirado de Meidner e Sheriff (1976), fig. 2.1, pag. 29
O grau de saturao mantido nos espaos intercelulares, quando os estomas abrem, depende da taxa de difuso do vapor para o exterior, e esta depende por sua vez, da resistncia estomtica e da densidade de presso de vapor da atmosfera (Meidner & Sheriff, 1976). Convm salientar que a taxa potencial de evaporao dentro duma folha substancialmente maior que a existente numa superfcie de gua com a mesma rea que a folha. Isto deve-se a que a rea total de evaporao, ou seja, as paredes interiores da epiderme e as paredes das clulas do mesfilo, podem ser de sete a trinta vezes superiores rea da folha. Apesar de tudo o que foi dito, a folha pode ser considerada como um orgo que retm a gua. Pensa-se que a parede interna da epiderme na proximidade do poro estomtico o local principal de evaporao dentro da folha, como se pode observar na figura 29. Nestes locais criada uma diferena de densidade de vapor relativamente maior que a das paredes do mesfilo, mais afastadas do poro estomtico, acelerando a evaporao. Verificou-se igualmente que o tecido epidrmico tem uma condutividade hidralica relativamente elevada, de forma que a gua perdida por evaporao facilmente renovada. Assim, a maior parte do volume de ar entre as clulas do mesfilo permanece perto da saturao e a perda de vapor das paredes destas clulas comparativamente lenta, permitindo a reteno da gua lquida. Alm disto, a condutividade hidralica das paredes exteriores do mesfilo diminui com a carncia hdrica, evitando um decrscimo demasiado drstico no espao de ar da folha (Meidner & Sheriff, 1976).
2.6.2. A GUTAO:
Alm da perda de gua na forma de vapor que ocorre na transpirao, as plantas tambm perdem gua na forma lquida no processo denominado gutao (figura 30). Este ocorre quando o ar est saturado de vapor de gua, de modo que a transpirao diminui ou pra.
Figura 30: Exemplo de gutao: As setas indicam gotas de soluo xilmica exsudadas atravs de hidtodos em folhas de plntulas de milho (Zea mays) Coleco particular (2001)
Esta sada de gua no estado lquido ocorre atravs de estruturas chamadas hidtodos (figura 31). Estes secretam gua que levada para a superfcie da folha pelos traquedios terminais dos feixes vasculares. Esta gua passa atravs dos espaos intercelulares do parnquima do hidtodo que no possui cloroplastos e que denominado epitema. Os espaos intercelulares abrem para o exterior atravs de poros especiais que so originariamente estomas que permanecem sempre abertos.
Figura 31: (A) Esquema dum corte dum hidtodo numa folha de Ribes viburnifolium. (B) Poro que resulta de um estoma modificado. Retirado de Fahn (1974), fig. 116, pag. 262
3. FISIOLOGIA ESTOMTICA:
3.1. A ESTRUTURA DOS ESTOMAS:
A palavra estoma proveniente do grego e originalmente significa boca. O pro estomtico formado entre duas clulas guarda, que so clulas especializadas da epiderme (figura 32). Estas clulas podem ser de dois tipos: elpticas (em forma de rim), e de gramneas (em forma de alter). Muitas vezes utiliza-se, incorrectamente, o termo estoma para designar no apenas o poro, mas tambm as clulas guarda e outras clulas adjacentes que formam o complexo estomtico. Se as clulas adjacentes so morfologicamente diferentes das restantes clulas da epiderme chamam-se clulas subsidirias, se so semelhantes denominam-se clulas vizinhas (Weyers & Meidner, 1990). As clulas guarda s apresentam plasmodesmos entre elas e no apresentam qualquer tipo de coneco com as restantes clulas do complexo estomtico. Assim, todos os compostos importados para o seu interior tm de atravessar a membrana plasmtica. Esta caracterstica do complexo estomtico extremamente importante em termos fisiolgicos. Alm dos estomas a epiderme no apresenta espaos intercelulares. As paredes mais exteriores da epiderme e das clulas guarda apresentam cutcula que continua numa forma mais fina nas paredes ventral e laterais das clulas guarda, e nas paredes interiores das clulas da epiderme que limitam uma cmara subestomtica (Weyers & Meidner, 1990). A figura 33 mostra um modelo de clulas guarda elpticas em seco transversal e vistas superfcie.
Figura 32: Estomas das trs espcies mais usadas em estudos de fisiologia estomtica. a) Commelina communis que uma monocotilednea com um complexo hexactico, isto , apresenta seis clulas subsidirias; b) Vicia faba, que uma dicotilednea sem clulas vizinhas morfologicamente especializadas; o complexo denomina-se anomoctico; c) Zea mays, que uma monocotilednea com clulas guarda do tipo das gramneas e um par de clulas subsidirias, isto , com um complexo paractico. Retirado de Weyers e Meidner (1990), fig. 2.1, pag. 3
3.2. A FREQUNCIA ESTOMTICA:
A frequncia estomtica (ou densidade estomtica) duma epiderme com estomas varia com as espcies, entre os 20 e os 2 000 poros mm -2 , sendo na maioria das plantas de 40 a 350. O nmero total de estomas numa folha pode ser calculado a partir do produto da frequncia pela rea foliar, embora a frequncia no seja uniforme na superfcie foliar. A frequncia dos estomas em relao s clulas epidrmicas pode ter maior interesse fisiolgico que o seu valor absoluto. Assim, pode ser mais apropriado calcular o ndice estomtico, dado por:
Figura 33: Diagrama dum estoma elptico aberto, em seco transversal e superfcie. A escala pode ser retirada da largura do poro (A), que de 10 m; as outras dimenses esto em proporo para folhas de plantas herbceas, as folhas de plantas lenhosas tendem a ter clulas de menores dimenses. (B) - comprimento do poro; (C) - largura da clula guarda; (D) - profundidade da clula guarda; (E) - abertura entre as orlas exteriores (abertura eisodial); (F) - comprimento das clulas guarda; (G) - largura do par de clulas guarda. Quando observadas ao microscpio ptico, as orlas cuticulares e outras caractersticas da parte ventral das clulas guarda vem-se como uma srie de linhas concntricas, algumas das quais no estaro em foco. Retirado de Weyers e Meidner (1990), fig. 2.2, pag. 4
Quando as clulas completam a sua diferenciao, o ndice estomtico torna- se independente do tamanho da folha. Se se puder determinar a frequncia e a mdia da rea dos poros, ento a rea total dos poros estomticos pode ser calculada como uma percentagem da rea foliar. Este valor situa-se geralmente entre os 0.3 a 2 % se o dimetro mdio do poro for cerca de 6 m (Weyers & Meidner, 1990).
3.3. MECANISMO DA DEFORMAO DAS CLULAS GUARDA E ALTERAES NAS DIMENSES DO PORO:
3.1. A FUNO DAS PAREDES DAS CLULAS GUARDA:
As clulas guarda alteram a sua turgidez e o seu volume durante o movimento estomtico. A sua deformao resulta do espessamento e extensibilidade das paredes no ser igual em todas. Vendo de cima, a abertura dum estoma elptico deve-se essencialmente expanso das clulas guarda nos plos. A parte central das paredes dorsal e ventral tambm se estende e, como as paredes esto ligadas nos plos, tendem a curvar-se para o exterior criando um poro elptico entre as paredes ventrais. Estas deformaes so facilitadas pela orientao das microfibrilhas das paredes, como se pode ver na figura 34 a). Nas clulas guarda das gramneas que podemos observar na figura 34 b), a parte central bastante rgida e afastada quando os plos se expandem, formando uma abertura quase rectangular (Weyers & meidner, 1990).
Figura 34: Alteraes nas dimenses das clulas guarda, vistas de cima, e a influncia da orientao das microfibrilhas e da espessura das paredes. a) Orientao das microfibrilhas nas paredes dum estoma elptico (Vicia faba): as setas indicam a direco da expanso das clulas guarda e o movimento durante a abertura do estoma. b) Diagrama correspondente para as clulas dum estoma de gramneas (Zea mays): os plos bulbosos e de paredes finas das clulas parecem estar ligados por pros ao longo da parede comum. O alargamento das partes terminais das clulas causa o afastamento das paredes centrais rgidas, permitindo a abertura do pro que raramente excede 4 m de largura. De notar as diferenas nas escalas. Retirado de Weyers e Meidner (1990), fig. 2.3, pag. 7
3.2. A IMPORTNCIA DAS CLULAS VIZINHAS: As formas, tamanhos, o arranjo espacial e as caractersticas das outras clulas do complexo estomtico so importantes para que ocorram as mudanas de abertura dos estomas. A comparao dos complexos estomticos antes e depois da abertura do pro mostra que o aumento de volume das clulas guarda parcialmente compensado pelo decrscimo de volume das clulas vizinhas. A parede dorsal das clulas guarda em expanso faz uma protuberncia para o interior das clulas vizinhas (figura 35). Estas mudanas no volume so devidas ao movimento osmtico da gua que segue o aumento do contedo em solutos das clulas guarda, o que tambm modifica as relaes de turgescncia entre as clulas guarda e as vizinhas (Weyers & meidner, 1990).
Figura 35: Exemplo das deformaes experimentadas pelas diferentes paredes das clulas guarda durante o movimento de abertura do poro estomtico. Adaptado de Weyers & Meidner (1990), fig.2.4, pag. 8
A maior profundidade de contacto efectivo das clulas vizinhas d origem chamada vantagem mecnica destas clulas. A relao entre a turgescncia das clulas guarda e a das clulas vizinhas e a abertura estomtica pode ser modelada pela seguinte equao (Weyers & Meidner, 1990):
em que, A a abertura estomtica; A o uma constante com as mesmas unidades de A; + pg e + pn so, respectivamente, os potnciais de presso das clulas guarda e vizinhas; b g e b n indicam o efeito em A da mudana duma unidade de turgescncia em ambos os tipos de clulas, permanecendo os outros parmetros constantes. Os valores de b g so positivos e os de b n negativos. O valor absoluto da razo entre b n e b g geralmente maior que 1 e chamado de razo de antagonismo (AR). Este parmetro permite quantificar a vantagem mecnica das clulas vizinhas. Estimativas de AR variam muito com as espcies, sendo de 1.6 para Tradescancia virginiana e de 3.1 para Commelina communis. O valor de AR varia tambm com a largura do pro (Weyers & Meidner, 1990). Existiriam valores positivos de A o se o pro estivesse aberto mesmo quando + pg e + pn tivessem valores de zero. Esta situao j foi descrita mas parece ser muito rara. Quando A o tem valor negativo, necessrio que haja um aumento da presso no interior das clulas guarda antes que o pro abra (mesmo que as clulas vizinhas no estejam trgidas). fase de aumento de turgescncia nas clulas guarda antes do pro abrir foi dado o nome de fase de tenso, e fase em que o aumento de turgescncia causa a abertura estomtica foi dado o nome de fase motora (Weyers & meidner, 1990). Este assunto, aparentemente de interesse meramente terico, permite-nos compreender certos resultados, como por exemplo, na situao em que AR>1 os estomas fecham se a turgescncia da epiderme est a aumentar e abrem se a turgescncia da epiderme diminuir (Weyers & Meidner, 1990).
3.4. RELAES OSMTICAS E BIOQUMICAS DAS CLULAS DO COMPLEXO ESTOMTICO:
As alteraes em + pg e + pn que originam os movimentos estomticos podem ocorrer devido a alteraes do potencial hdrico de um destes tipos de clulas (+ g ou + n ) ou devido a alteraes dos seus potenciais osmticos (+ tg ou + tn ). Devido grande diferena de volume entre as clulas guarda e as vizinhas (as clulas guarda podem ser dez vezes mais pequenas), a abertura estomtica mais influenciada por alteraes nos solutos das clulas guarda que nos das clulas vizinhas, apesar da vantagem mecnica destas ltimas (Weyers & Meidner, 1990). Muitos dados obtidos at agora mostram que o potencial osmtico das clulas guarda diminui, isto , fica mais negativo quando os estomas abrem. Na fava (Vicia faba), foram registados valores de potencial osmtico de -1.9 MPa para estomas fechados e -3.5 MPa para estomas abertos. Como as clulas guarda praticamente duplicam o seu volume durante a abertura, este aumento da concentrao de solutos ocorre apesar da diluio (Salisbury & Ross, 1992). Em resumo, os estomas abrem devido absoro de gua pelas clulas guarda, e esta absoro causada pela concentrao de solutos que provoca uma diminuio do potencial osmtico.
3.4.1. OS SOLUTOS DAS CLULAS GUARDA NO MOVIMENTO ESTOMTICO:
Desde os anos 60 que se sabe que medida que os estomas abrem, ies potssio (K + ) se deslocam das clulas vizinhas para as clulas guarda (Salisbury & Ross, 1992). Na figura 36 podemos ver um esquema que representa as trocas do io K + e H + , entre as clulas guarda e as subsidirias.
Figura 36: Mudanas quantitativas na concentrao em K + (m = molal) e nos valores de pH dos vacolos das vrias clulas que constituem o complexo estomtico. So apresentados valores para estomas abertos ( esquerda), e fechados ( direita). Retirado de Salisbury e Ross (1992), fig. 4.10, pag. 79
Na segunda metade dos anos 90, trabalhos realizados pela equipa de E. Zeiger na Universidade da California L.A. chamaram a ateno para a importncia da sacarose como osmtico no funcionamento estomtico. Estudos sobre o contedo em solutos das clulas guarda mostraram que o potssio mais importante no incio do dia, mas depois a sua concentrao diminui ao mesmo tempo que a concentrao em sacarose aumenta, atingindo um pico na fase do dia em que a abertura estomtica mxima (figura 37).
Figura 37: Abertura dos estomas, contedo relativo em potssio (K + ) e em sacarose nas clulas guarda de folhas de faveira (Vicia faba L.) ao longo do dia. O contedo em sacarose foi determinado por HPLC e expresso em pmoles por par de clulas guarda (GC). O K + foi determinado por colorao e est expresso em percentagem de rea da clula guarda coberta pela colorao. Retirado de Talbott & Zeiger (1998), fig.1, pag.330
Assim, segundo Talbott e Zeiger (1998) so quatro os solutos claramente implicados na osmoregulao das clulas guarda: o io potssio (K + ); o io cloro (Cl - ); o io malato (malato 2 ) e a molcula de sacarose. O cloro e o malato funcionam como counterions do potssio, e o seu contedo relativo vai depender da espcie e das condies em que as plantas se desenvolveram. Assim, com excepo das Liliaceae, como a cebola (Allium cepa), que no acumulam amido nos seus cloroplastos e por isso utilizam exclusivamente o Cl - , o io malato aparenta ser o counterion principal do K + . O contedo relativo destes solutos pode ser regulado, segundo estes autores, pelo menos por trs vias distintas: + A via do K + e do Cl - : Esta via envolve a absoro destes ies do apoplasto, e a sntese do io malato a partir de esqueletos de carbono derivados da hidrlise do amido (figura 38). Esta via est associada com o abrir dos estomas, em folhas intactas, s primeiras horas do dia quando a luz relativamente mais rica nos comprimentos de onda azuis (c.d.o.), ou em estomas isolados submetidos a luz azul ou branca.
Figura 38: Via de regulao do contedo das clulas guarda nos diferentes ies que ocorre no incio do dia em folhas intactas ou em estomas isolados quando iluminados com luz azul ou branca. Nesta via o potssio (K + ) e o cloro (Cl - ) so provenientes do apoplasto em associao com a extruso de protes (H + ) enquanto que o io malato formado a partir da hidrlise do amido. Retirado de Talbott & Zeiger (1998), fig. 3a), pag. 333
+ A via da sacarose proveniente da hidrlise do amido: Esta via pode ser inferida pelo facto da acumulao em sacarose no ser afectada pelo DCMU (3-(3,4-diclorofenil)-1,1-dimetilureia, agente que bloqueia o fluxo electrnico na fotossntese) e pela hidrlise elevada do amido quando os estomas isolados so iluminados com luz azul (figura 39). + A via da sntese de sacarose a partir de fotoassimilados nas clula guarda: Nesta via a acumulao em sacrose afectada pelo DCMU e ocorre na ausncia de hidrlise de amido (figura 40). Esta via implicaria a capacidade das clulas guarda realizarem fotossntese a taxas suficientemente elevadas para permitir explicar esta acumulao em sacarose.
Figura 39: Via de osmoregulao das clulas guarda que opera em fase mais adiantada da abertura estomtica em ilumonao por luz azul e que envolve a sntese de sacarose a partir da hidrlise amido. Talbott & Zeiger (1998), fig. 3b, pag.333
Se hoje em dia no h polmica sobre a importncia da sacarose na abertura estomtica, j o mesmo no se pode dizer sobre a sua origem. Para Ritte et al. (1999) o aumento de sacarose nas clulas guarda no pode ser explicado pela realizao de fotossntese, mas antes pela absoro deste acar do exterior e a partir da hidrlise do amido no interior das clulas guarda. Segundo estes autores, a reduo fotossinttica do carbono pode apenas explicar 10% do carbono reduzido necessrio para abrir os estomas, se os solutos principais forem o K + e o malato, e apenas 2% do carbono reduzido se os solutos principais forem hexoses. Estes autores observaram que protoplastos de clulas guarda de ervilheira (Pisum sativum L.) absorvem hexoses em simporte com protes. No entanto, este mecanismo s pode ser efectivo na manuteno da abertura estomtica quando as taxas de fotossintese e transpirao so muito elevadas. Ou seja, este mecanismo seria insuficiente para explicar o iniciar da abertura estomtica, mas permitiria manter os estomas abertos.
Figura 40: Via de osmoregulao das clulas guarda observada em fase adiantada da abertura estomtica em folhas intactas ou em estomas isolados iluminados por luz vermelha (luz actnica na fotossntese). Talbott & Zeiger (1998), fig. 3c, pag.333
3.4.2. MECANISMOS DO MOVIMENTO DOS SOLUTOS PARA DENTRO E PARA FORA DAS CLULAS GUARDA:
+ O potssio (K + ) Existem dados que apontam para que a absoro de potssio pelas clulas guarda, quando os estomas abrem, condicionada pelo funcionamento duma bomba protnica dependente de ATP, que exporta H + para o exterior das clulas guarda (H + ATPase) e que activada pela luz vermelha e luz azul. Esta bomba protnica cria uma hiperpolarizao da membrana que leva entrada de K + para as clulas guarda por canais rectificadores de potssio em direco ao interior (inward-rectifying K + channels - ) (Schroeder et al., 2001). A sada do potssio das clulas guarda devido aco de factores que diminuem a abertura estomtica parece realizar-se devido a uma depolarizao da membrana causada pela sada de anies por canais especializados, que causa por uma lado a inibio de e por outro lado a activao de canais rectificadores de potssio em direco ao exterior (outwards-rectifying K + channels - ) (Schroeder et al., 2001). + O cloro (Cl - ) Nalgumas espcies o io Cl - acompanha a entrada de potssio, para dentro das clulas guarda por cotransporte com protes ou antiporte com ies hidrxilo. A sada do cloro das clulas guarda parece realizar-se atravs de dois tipos de canais para anies (S-type e R-type) que resultam da depolarizao da membrana devida a factores, como a hormona cido Abscsico (ABA), que estimulam o fecho estomtico (Schroeder et al., 2001). + O io malato (malato 2- ) O io malato, como se viu anteriormente, sintetizado nas clulas guarda quando os estomas esto a abrir luz. Quando os estomas so induzidos a fechar o io malato sai das clulas guarda essencialmente devido aos canais de anies que j vimos anteriormente para o cloro. + A sacarose Existem dados que apontam que a absoro de sacarose do apoplasto volta das clulas guarda por simporte com protes suficiente para manter a abertura estomtica (Ritte et al., 1999). Quando os estomas so induzidos a fechar o transporte da sacarose inibido e provavelmente a sacarose presente nas clulas guarda rapidamente metabolizada.
3.5. FACTORES QUE AFECTAM A ABERTURA ESTOMTICA:
Os estomas controlam a difuso de CO 2 para dentro das folhas para que possa ocorrer fotossntese e a difuso de vapor de gua para fora das folhas no processo da transpirao. Uma regulao eficaz da abertura estomtica fundamental para que as plantas possam ter um bom desenvolvimento. Assim, as clulas guarda possuem uma rede muito sofisticada de vias de sinalizao que respondem a uma multiplicidade de factores internos e externos, de forma a controlar a abertura estomtica. A compreenso desses factores e das respostas que induzem da parte das clulas guarda constituem hoje em dia um dos campos de maior desenvolvimento em Fisiologia Vegetal. Atendendo complexidade destas respostas o seu estudo detalhado est fora do contexto destes apontamentos, pelo que nos limitaremos a um estudo muito superficial dos principais factores exgenos.
3.5.1. CONCENTRAO EM CO 2 : Os estomas so sensveis presena de CO 2 , fechando sempre que a concentrao em CO 2 aumenta quer na cmara estomtica devido a um aumento da respirao mitocondrial, quer devido a uma aumento do CO 2 atmosfrico. Concentraes elevadas de CO 2 causam um aumento da concentrao de clcio citoslico [Ca 2+ ] cit , este causa uma depolarizao da membrana plasmtica com a consequente activao do canal de anies do tipo S; da activao duma e da modulao dum canal de anies do tipo R (figura 41) (Cousson, 2000 e Schroeder, 2001). O(s) sensor(es) para o CO 2 no esto ainda claramente definidos. Cousson em 2000 sugeriu que o aumento em CO 2 sentido pelo decrscimo na produo e extruso de protes (figura 40), mas para outros autores os sensores podero estar localizados nos cloroplastos das clulas guarda onde causariam um decrscimo dos nveis do carotenide zeaxantina (Zhu et al., 1998, cit. em Schroeder, 2001), ou ainda pela regulao da concentrao em zeaxantina causada pela alterao da taxa de fixao fotossinttica do CO 2 nos cloroplastos (Zeiger, 2000).
Figura 41: Esquema demonstrativo dos processos de percepo e de transmisso envolvidos na resposta das clulas guarda ao CO2. A - , anio; PEP, fosfoenolpiruvato; PEPcase, fosfoenolpiruvato carboxilase. Retirado de Cousson (2000), fig. 10, pag. 494
3.5.2. RADIAO:
Os estomas respondem luz vermelha e luz azul aumentando as suas aberturas. Pensa-se que o receptor da luz vermelha a clorofila e o efeito da radiao com estes c.d.o. est relacionado com a fotossntese, quer directamente na reduo fotossinttica do CO 2 (Talbott & Zeiger, 1998) quer pelo aumento do teor em ATP utilizado no funcionamento das H + -ATPase necessrias para a entrada do K + nas clulas guarda (Schroeder, 2001). Demonstrou-se recentemente que o receptor para a luz azul nas clulas guarda um carotenoide zeaxantina localizado nos cloroplastos. A absoro da luz azul causa uma reaco fotoqumica, presumivelmente uma isomerizao da molcula de zeaxantina que o primeiro passo na cascata de transmisso do sinal que terminar na activao duma H + -ATPase (figura 42). Esta bomba protnica, como vimos anteriormente, activar uma que causar o fluxo de ies K + para o interior da clula guarda (Zeiger, 2000).
3.5.3. TEMPERATURA Estudos da abertura estomtica em funo da temperatura mostram um ptimo de temperatura bastante largo, entre os 32 e os 38 C, para muitas espcies. No entanto, a variao pequena, sendo Q 10 = 2 entre 18 e 35 C, e assim, os efeitos directos de pequenas mudanas de temperatura (2 ou 3 C), so geralmente pouco significativos dentro desta gama de valores (Sebanek, 1992). Em contrapartida, os efeitos indirectos podem ser muito importantes. Por exemplo, o aumento de temperatura de apenas dois ou trs graus, vai aumentar dras-ticamente o gradiente de difuso do vapor de gua, de que resulta um aumento da trans-pirao e possivelmente o aumento da carncia hdrica da folha (Sebanek, 1992).
3.5.4. VENTO: Os efeitos dos movimentos do ar nas taxas de transpirao so muito complexas. O aumento do vento reduz a camada de ar adjacente s folhas (boundary layer), o que se traduz num aumento da transpirao, mas a longo prazo a taxa de transpirao diminui devido ao fecho estomtico (Kramer & Boyer, 1995).
3.5.5. NUTRIO: importante um fornecimento adequado de potssio durante o crescimento das plantas, devido especialmente s suas funes no mecanismo estomtico. As plantas que sofreram, durante o seu desenvolvimento, duma carncia nutricional em potssio no conseguem abrir tanto os estomas como as restantes (Sebanek, 1992). Para alm do potssio, tambm uma carncia em azoto altera o funcionamento estomtico, possivelmente por aumentar a resistncia radicular entrada de gua. Uma deficincia em fsforo causa um fecho estomtico antes das folhas perdere m a turgescncia (Kramer & Boyer, 1995), pelo que este elemento dever estar directamente envolvido na fisiologia das clulas guarda.
Figura 42: Transduo da recepo da luz azul nas clulas guarda. A luz azul sentida pelo carotenoide zeaxantina na antena dos cloroplastos das clulas guarda. Violanxantina e zeaxantina so os constituintes principais do ciclo das xantofilas. O mutante de Arabidopsis thaliana npq 1 apresenta uma deficincia na de-epoxidase da violaxantina e por isso no pode acumular zeaxantina. A concentrao nas clulas guarda em zeaxantina vai depender do pH do lmen dos cloroplastos, que modulado pelas taxas do transporte electrnico nas membranas dos tilacides e pelo consumo de ATP e de NADPH na fixao de CO2 no Ciclo de Calvin. A regulao das concentraes em zeaxantina pela taxa de fixao fotossinttica do CO2 nos cloroplastos das clulas guarda proporciona a estas clulas um mecanismo de deteco do CO2. A grandeza da resposta luz azul depende da concentrao em zeaxantina e do nmero de fotes azuis absorvidos. A cascata iniciada pela excitao da zeaxantina pela luz azul e o sinal transmitido ao citoplasma onde activa uma proteina cinase (serina/treonina). A proteina cinase fosforila o terminal C duma H + -ATPase e, assim, activa a enzima. Uma proteina 14-3-3 liga-se ATPase fosforilada e estabiliza-a. A desfosforilao dissocia a proteina 14-3-3 e inactiva a H + -ATPase. Retirado de Zeiger (2000), fig.1, pag. 184
O clcio um mensageiro secundrio de grande importncia na fisiologia das clulas guarda, e uma carncia nutricional neste elemento vai causar grandes alteraes no funcionamento dos estomas.
3.5.6. HUMIDADE: As clulas guarda reagem a diferenas de humidade do ambiente muito rapidamente (figura 43). Assim, h dados que apontam para uma maior abertura dos estomas de certas espcies, quando em ambientes de elevada humidade relativa, e uma menor abertura em ambientes mais secos (Kramer & Boyer, 1995)
Figura 43: Resposta da condutncia estomtica ( - ) humidade relativa do ar. Esta resposta foi observada para um potencial hdrico foliar ( ), praticamente constante. Retirado de Willmer (1983), fig. 5.7, pag. 79
3.5.7. DISPONIBILIDADE DO SOLO EM GUA: Pensou-se durante muito tempo que os estomas respondiam carncia hdrica atravs da regulao da sua abertura de acordo com o estado hdrico da planta. Hoje sabe-se que, este feedback no existe. De facto, existem numerosos dados que mostram que vrias espcies fecham os estomas com a diminuio do teor em gua do solo, mesmo que o estado hdrico da planta no tenha mudado. Isto , os estomas fecham mesmo quando as folhas no esto em carncia hdrica, desde que pelo menos parte do sistema radicular esteja a experimentar falta de gua (figura 44). Esta resposta dos estomas pode ser considerada como uma resposta feedforward, na qual um sinal das razes que esto a sofrer seca transmitido s folhas, de modo a que estas reduzam a perda de gua (transpirao) antes da planta, como um todo, sofrer carncia hdrica (Mansfiels & Davies, 1985).
Figura 44: Potencial de presso, potencial hdrico (+), potencial osmtico (+ t ), e condutncia estomtica de folhas de plantas de milho (Zea mays) cujo sistema radicular foi dividido entre vasos. Num grupo destas plantas ambos os vasos eram bem regados, permitindo que a totalidade do sistema radicular ficasse bem regada ( ). Noutro grupo de plantas, apenas um dos vasos era regado, pelo que metade do sistema radicular estava a sofrer carncia hdrica ( ).Retirado de Mansfield e Davies (1985), fig. 5, pag. 161
4. O STRESSE DA SECA:
4.1. INTRODUO:
O Stresse , na maior parte das definies, um desvio significativo das condies ptimas para a vida, o que origina mudanas e respostas a todos os nveis do organismo. Estas respostas so inicialmente reversveis mas podem tornar-se permanentes. Mesmo se o acontecimento causador de stresse for temporrio, a vitalidade da planta diminui com o prolongar do stresse. Quando a capacidade da planta para se ajustar atingida, o que era at a um dano latente, passa a doena crnica ou dano irreversvel (Larcher, 1995). O stresse ambiental pode ser causado por um input energtico demasiado grande ou insuficiente; ou por um turnover demasiado rpido ou demasiado lento de um substrato; ou ainda ser o resultado de influncias externas inadequadas ou inesperadas (figura 45) (Larcher, 1995). Entre os agentes causadores de stresse abioticos muitos so climticos, exercendo os seus efeitos na atmosfera e no solo (Larcher, 1995): + Entre os factores atmosfricos temos a radiao excessivamente elevada ou insuficiente; a temperatura que tambm pode ser excessiva ou insuficiente, podendo esta ltima ser acompanhada por geada, gelo ou neve; precipitao deficiente e seca; ventos fortes, etc. + No solo podem ocorrer concentraes elevadas de sais, ou deficincias minerais; acidez ou alcalinidade excessivas; solos instveis, areias movedias, guas de escorrncia; deficincia em oxignio nas zonas em que os solos so muito compactos, ou esto encharcados. Os stresses biticos so particularmente comuns em locais onde a densidade populacional elevada, ou onde as plantas so muito utilizadas por animais ou microorganismos. Para alm dos factores naturais os seres humanos so responsveis por muitos stresses fsicos e qumicos aos quais as plantas no so capazes de desenvolver qualquer mecanismo de defesa (Larcher, 1995). Embora seja necessrio, para facilitar o estudo, tratar cada stresse separadamente, na natureza eles no ocorrem isoladamente e influenciam-se mutuamente.
Figura 45: Factores ambientais causadores de stresse e algumas das suas mltiplas interrelaes. Retirado de Larcher (1995), fig. 6.9, pag. 332
4.2. O BALANO HDRICO:
4.2.1. O BALANO HDRICO ENQUANTO EQUILBRIO DINMICO: O balano hdrico a diferena entre a gua absorvida e a gua perdida. Os processos bsicos envolvidos no balano hdrico duma planta so: a absoro, a conduo e a perda de gua. Para que o balano hdrico duma planta seja mantido a nveis razoveis, ou seja positivo, necessrio que as taxas a que estes trs processos ocorrem se ajustem. O balano torna-se negativo sempre que a absoro de gua for inferior transpirao. Se os estomas diminuirem a sua abertura devido a este deficit, ento a transpirao pode diminuir sem que haja alterao na absoro e um balano prximo de zero pode ser restabelecido aps uma passagem transitria por valores positivos. Assim, o balano hdrico duma planta est continuamente a oscilar entre desvios positivos e negativos. Estas oscilaes podem ser de curta ou de longa durao (Larcher, 1995). + As oscilaes de curta durao reflectem a aco combinada dos vrios mecanismos reguladores do estado hdrico, particularmente mudanas na abertura estomtica (figura 46).
Figura 46: Oscilaes de curta durao na absoro e perda de gua; balano hdrico e potencial hdrico de folhas de algodoeiro. Durante a fase de transpirao rpida o contedo hdrico das folhas diminui e o potencial hdrico torna-se mais negativo. A quantidade de gua que passa pelo pecolo (absoro) segue uma curva de 180 desfasada com a do potencial hdrico. As flutuaes na transpirao so causadas por oscilaes na abertura estomtica. Retirado de Larcher (1995), fig. 4.26, pag.247
+ As oscilaes ao longo do dia afastam-se mais do equilbrio, particularmente na mudana entre o dia e a noite (figura 47). Durante o dia o balano hdrico vai ficando, quase sempre, gradualmente negativo. Durante a noite, se houver gua no solo, o balano hdrico restaurado para valores prximos de zero. por isso que em certos estudos se deve determinar o potencial hdrico das folhas ao nascer do Sol antes dos estomas abrirem, isto , o potencial hdrico basal (Pre-Dawn). A razo que este potencial hdrico exprime o equilbrio no SPAC e portanto o seu valor igual em qualquer um dos seus componentes: solo, raiz, xilema ou folhas. Quando se comea a desenvolver um balano negativo nas folhas, ocorre imediatamente uma medida regulatria de curta durao que consiste numa transferncia de gua dos tecidos que a tm, como sejam os parnquimas cortical e flomico. + As oscilaes sazonais. Durante os perodos de seca o contedo hdrico frequentemente no totalmente restabelecido durante a noite, de modo que o deficit acumula-se de dia para dia at que volte a chover (figura 47)(Larcher, 1995).
Figura 47: Diagrama esquemtico do abaixamento gradual do potencial hdrico das folhas, razes e solo durante uma semana de seca. A flutuaes maiores ocorrem nas folhas uma vez que esto sujeitas transpirao durante o dia. O balano hdrico no restabelecido durante a noite (zona a escuro nas abcissas) de modo que o potencial hdrico basal gradualmente mais negativo de dia para dia. Retirado de Larcher (1995), fig.4.27, pag. 247
4.2.3. INDICADORES DO BALANO HDRICO: Como dificil quantificar a absoro radicular da gua, valores exactos do balano hdrico so difceis de obter. Assim, normalmente determinam-se estimativas do seu valor indirectamente atravs da determinao do contedo em gua ou do potencial hdrico da planta. Um balano negativo manifesta-se sempre por uma diminuio da turgidez e do potencial hdrico dos tecidos (Larcher, 1995). + Contedo hdrico relativo (Relative Water Content RWC):
+ Deficit de saturao hdrica (Water Saturation Deficit WSD):
+ Potencial osmtico (+ t ): Oscilaes no balano hdrico afectam a turgidez e o contedo em solutos das clulas. O potencial osmtico torna-se mais negativo quando o balano hdrico negativo. No entanto, este abaixamento tambm devido a uma osmoregulao, isto , acumulao de acares, aminocidos como a prolina, e ies orgnicos no vacolo. Como indicador do balano hdrico o valor medido em dada planta em dada circunstncia comparado com o seu ptimo (isto , quando a transpirao e a absoro se equilibram) e com o valor mnimo (mais negativo) em condies de extrema falta de gua (figura 48).
Figura 48: Gama de valores de potencial osmtico de tipos ecolgicos diferentes. A sub-gama que se encontra na no rectngulo a cinzento mostra como se determina a gama osmtica para cada grupo. Cada barra representa o valor mximo e o mnimo de potencial osmtico encontrado para todas as espcies individuais estudadas num grupo particular. Retirado de Larcher (1995), fig.4.35, pag. 252
+ Potencial hdrico (+): O potencial hdrico das folhas pode ser um indicador do balano hdrico mais sensvel que o potencial osmtico, sobretudo em situaes de pequenas carncias hdricas.
4.3. EFEITOS DA SECA NA FISIOLOGIA DAS PLANTAS:
O termo seca indica um perodo sem precipitao aprecivel, durante o qual o contedo em gua do solo reduzido de tal modo que as plantas sofrem de falta de gua. Frequentemente, mas no invariavelmente a secura do solo est associada a uma forte evaporao causada pela secura do ar e elevados nveis de radiao (Larcher, 1995). Algumas das primeiras respostas ao stresse parecem ser mediadas predominantemente por acontecimentos biofsicos mais do que por alteraes de reaces qumicas causadas pela desidratao (Taiz & Zeiger, 1998). Na figura 49 podemos observar a sequncia de acontecimentos que vo surgindo gradualmente medida que o stresse de seca se vai desenvolvendo.
4.3.1. ALTERAES NO CRESCIMENTO medida que o contedo em gua diminui, a clula encolhe cada vez mais e as paredes relaxam, os solutos ficam cada vez mais concentrados e a membrana plasmtica torna-se mais espessa, uma vez que cobre uma rea menor. Como a perda de turgidez o primeiro efeito biofsico da carncia hdrica, as actividades relacionadas com a turgidez so as mais sensveis ao deficit hdrico (Taiz & Zeiger, 1998).
Figura 49: Respostas das plantas a situaes de seca. a) A sensibilidade das vrias funes e processos celulares durante o desenvolver de uma carncia hdrica. As linhas horizontais mostram a gama de potencial hdrico para a qual, na maioria das plantas ocorre uma resposta clara; a linha vertical a tracejado mostra o incio do fechar dos estomas. b) Desenvolvimento temporal das respostas moleculares a uma perturbao da turgidez. Retirado de Larcher (1995), fig.6.58, pag. 385
O crescimento celular um processo dependente da turgidez e consequentemente extremamente sensvel deficincia hdrica. O crescimento celular pode ser descrito pela equao de Lockhart:
em que RGR a taxa de crescimento relativo (Relative Growth Rate); + p o potencial de presso (turgidez); Y o ponto limite, isto , a presso abaixo da qual a parede celular resiste a deformao plstica (irreversvel); e m a extensibilidade da parede, ou seja, a sensibilidade da parede presso (Taiz & Zeiger, 1998). Esta equao mostra que um decrscimo na turgidez causa um decrscimo na taxa de crescimento. Alm disso, a equao mostra que no preciso que a turgidez diminua at zero para que o crescimento pare. Isto acontece assim que + p for igual a Y. Em condies de boa hidratao, Y inferior a + p em apenas 0,1 ou 0,2 MPa, o que faz que alteraes de crescimento ocorram para pequena variaes de turgidez (Taiz & Zeiger, 1998). Em folhas intactas a carncia hdrica no s diminui a turgidez mas tambm diminui m e aumenta Y. Em plantas sem stresse a extensibilidade da parede (m) normalmente maior quando a soluo da parede celular ligeiramente cida. Em carncia hdrica m diminui em parte devido inibio do transporte de protes atravs da membrana plasmtica, o que causa um aumento do pH na parede celular. Os efeitos do stresse em Y pior compreendido, mas provavelmente envolve alteraes complexas da estrutura das paredes (Taiz & Zeiger, 1998). A carncia hdrica no limita apenas a dimenso das folhas individuais, mas tambm o nmero de folhas duma determinada planta, porque diminui quer o nmero quer o crescimento dos ramos. O processo do crescimento dos caules menos estudado, mas provavelmente afectado pelas mesmas foras que limitam o crescimento foliar durante o stresse (Taiz e Zeiger, 1998)
4.3.2. ALTERAES NA REA FOLIAR FOLIAR A area foliar total no permanece constante depois da maturao das folhas. Se as plantas sofrerem stresse de carncia hdrica aps um grande desenvolvimento das folhas, ento estas entram em senescncia e finalmente caiem (figura 50). Este ajustamento da rea foliar uma mudana de longo termo que melhora muito a aptido das plantas para sobreviverem num ambiente com uma limitao hdrica. De facto, muitas espcies do deserto deixam cair as suas folhas durante os perodos de seca, e voltam a criar outras novas aps uma chuvada. Este ciclo, absciso-renovo, pode ocorrer vrias vezes durante uma estao. A absciso durante o stresse hdrico resulta largamente do aumento da sntese e da sensibilidade dos tecidos hormona etileno (Taiz & Zeiger, 1998).
Figura 50: As folhas de plantas jovens de algodoeiro (Gossypium hirsutum) caiem em resposta ao stresse hdrico. As plantas esquerda foram regadas durante todo o perodo experimental. As palantas ao centro e direita foram sujeitas respectivamente a um stresse moderado e a um stresse severo antes de serem regadas outra vez. As que foram severamente stressadas s mantiveram um tufo de folhas no topo do caule. Retirado de Taiz e Zeiger (1998), fig.25.5, pag.728.
4.3.3. ALTERAES NO SISTEMA RADICULAR: Ainda que as relaes raiz-parte area dependam duma rede complexa de processos nutricionais e do desenvolvimento, podemos considerar que existe um balano funcional entre a absoro de gua pelas razes e a fotossntese na parte area. Este balano pode ser exposto da seguinte maneira: a parte area duma planta crescer at ficar to grande que a absoro de gua pelas suas razes se tornar limitante para um crescimento maior; inversamente um sistema radicular crescer at que a sua necessidade em fotoassimilados iguale a quantidade que produzida na parte area (Taiz & Zeiger, 1998). A expanso foliar muito mais sensvel que a fotossntese a uma limitao da absoro em gua. A inibio do desenvolvimento das folhas reduz o consumo de carbono e de energia e, assim, uma proporo maior dos fotoassimilados pode ser atribuida s razes, permitindo-lhes continuar a crescer. Simultaneamente os pices radiculares no solo seco comeam a perder turgidez. Tudo isto leva a que o crescimento radicular se processe essencialmente para as zonas que permanecem hmidas. Assim, frequente ver um sistema radicular essencialmente superficial quando todas as camadas esto hmidas e quando as camadas superficiais comeam a secar uma proliferao de razes mais profundas (Taiz & Zeiger, 1998). O aumento do crescimento das razes para as camadas hmidas, mais profundas, depende da distribuio de fotoassimilados para os pices radiculares. Normalmente, os frutos predominam sobre as razes em termos de preferncia para a distribuio de fotoassimilados que assim so desviados das razes. Esta competio entre frutos e razes para os fotoassimlados permite explicar porque razo as plantas so mais sensveis a um deficit hdrico na fase da reproduo que na fase vegetativa (Taiz e Zeiger, 1998).
4.3.4. ALTERAES NA ABERTURA ESTOMTICA Quando o stress decorre mais rapidamente ou quando a planta desenvolveu a sua rea foliar antes do incio do stresse ocorrem outras respostas para protegerem a planta contra a dessecao, como por exemplo o fecho estomtico (figuras 51 e 52). H muitos dados que apontam para que a hormona cido abscsico (ABA) esteja envolvida (Taiz & Zeiger, 1998).
Figura 51: Diagrama das mudanas na transpirao ao longo do dia medida que a humidade do solo diminui (curvas 1 a 5). As setas indicam o movimento dos estomas induzidos pelas mudanas no balano hdrico. A rea a escuro mostra a zona em que a transpirao exclusivamente cuticular. 1. transpirao sem restries; 2. limitao da transpirao durante o meio dia medida que os estomas fecham; 3. fecho estomtico do meio dia; 4. interrupo total da transpirao estomtica devida ao fecho persistente dos estomas (s ocorre transpirao cuticular); 5. transpirao cuticular consideravelmente reduzida devido contraco da membrana. Retirado de Larcher (1995), fig. 4.29, pag. 248
As respostas estomticas desidratao foliar variam grandemente dentro duma mesma espcie e entre espcies. Os estomas de algumas espcies atrasadoras de dessecao (dehydration-postponing), como o gro de bico (Vigna unguiculata) e mandioca (Manihot esculenta) so particularmente sensveis ao decrscimo da disponibolidade em gua. A sua condutncia estomtica e a sua transpirao diminuiem de tal forma que o seu potancial hdrico permanece pouco alterado durante a seca (Taiz & Zeiger, 1998).
Figura 52: A transpirao diurna de jovens plantas de Pinus radiata; a) com bastante disponibilidade em gua; b) depois de 9 dias sem gua; c) depois de 12 dias sem gua. Retirado de Larcher (1995), fig. 4.30, pag. 249
4.3.5. ALTERAES NA FOTOSSNTESE: A taxa de fotossntese lquida na folha (expressa por unidade de rea foliar) raramente to sensvel a um stresse moderado como a expanso foliar (figura 53). A razo para isto que a fotossntese muito menos sensvel a alteraes de turgidez do que a expanso foliar. O stresse hdrico geralmente afecta quer a condutncia estomtica, quer a actividade fotossinttica na folha. No incio do estabelecimento da seca, a eficincia fotossinttica do uso da gua - WUE (Water Use Efficiency - CO 2 absorvido na fotossntese por vapor de gua perdido na transpirao) pode aumentar porque o fecho parcial dos estomas vai afectar mais a transpirao que a absoro do CO 2 . No entanto, medida que o stresse se torna mais severo a WUE vai diminuindo e a inibio do metabolismo da folha vai sendo mais inibido (Taiz & Zeiger, 1998).
Figura 53: Efeitos do stresse hdrico na fotossntese e expanso foliar no girassol (Helianthus annuus). Esta espcie tpica na sua resposta, uma vez que a expanso foliar muito mais sensvel desidratao que a taxa de fotossntese. Retirado de Taiz & Zeiger (1998), fig. 25.4, pag.730
4.3.6. ALTERAES NA TRANSLOCAO DE CARBOHIDRATOS: O transporte flomico, est dependente da fotossntese e tambm da utilizao dos fotoassimilados nas zonas de consumo ou armazenamento. O stresse hdrico diminui a fotossntese e o consumo de fotoassimilados nas folhas. Como a translocao est dependente da turgidez poder-se-ia pensar que assim que o potencial hdrico diminuisse no floema devido ao stresse, o movimento de fotoassimilados ficaria tambm diminuido. No entanto, h dados que apontam para que a translocao s afectada muito mais tarde quando outros processos, como a fotossntese, j foram muito afectados (figura 54).
Figura 54: Efeitos relativos do stresse hdrico na fotossntese e translocao do sorgo (Sorghum bicolor). As plantas foram expostas a 14 CO2 durante um intervalo pequeno. A radioactividade fixada no folha foi tomada como medida da fotossntese, e a perda da radioactividade depois da remoo da fonte de 14 CO2 foi tomada como medida da taxa de translocao. Ainda que a fotossntese tenha sido afectada para baixos nveis de stresse, a translocao no foi afectada at ao stresse se tornar muito severo. Retirado de Taiz & Zeiger (1998), fig. 25.6, pag.731
A insensibilidade relativa da translocao seca permite que a planta mobilize e use as reservas quando so necessrias (por exemplo no enchimento do gro), mesmo quando o stresse muito severo. Pensa-se que a translocao contnua do carbono um factor chave em quase todos os aspectos da resistncia seca (Taiz & Zeiger, 1998).
4.3.7. AJUSTAMENTO OSMTICO: medida que o solo seca o seu potencial mtrico (+ m ) torna-se cada vez mais negativo. As plantas s conseguem absorver gua enquanto o seu potencial hdrico for mais negativo que que o do solo. O ajustamento osmtico, ou acumulao de solutos pelas clulas, um processo pelo qual o potencial hdrico pode diminuir sem que haja diminuio na turgidez (Taiz & Zeiger, 1998). O ajustamento osmtico no deve ser confundido com um aumento na concen- trao de solutos que ocorre durante a desidratao e a diminuio de volume celular. No ajustamento osmtico o aumento na concentrao de solutos independente das alteraes no volume das clulas resultantes da perda de gua. Tipicamente as alteraes no potencial osmtico anda volta dos 0,2 a 0,8 MPa, excepto nas plantas particularmente adaptadas a condies de secura. Normalmente os sais usados no ajustamento osmtico so ies inorgnicos como o potssio; cidos orgnicos; acares; amino cidos, etc. Os sais inorgnicos so armazenados no vacolo de forma a no interferirem com o metabolismo do citoplasma. Os orgnicos, que no interferem com o metabolismo, so chamados solutos compatveis e so acumulados no citoplasma de forma a manter o equilbrio hdrico entre o vacolo e o citoplasma (Taiz e& Zeiger, 1998). As folhas que so capazes de ajustamento osmtico mantm a turgidez para potenciais hdricos mais baixos, o que lhes permite continuarem a crescer e facilita a manuteno da abertura estomtica durante mais tempo. Na figura 55 podemos comparar o comportamento de duas espcies ao longo de um perodo de seca: a beterraba (Beta vulgaris) que uma espcie que capaz de ajustamento osmtico e o gro de bico (Vigna unguiculata), uma espcie que conserva a gua atravs de um melhor controlo da abertura estomtica. Ao longo da experincia, a beterraba manteve sempre o potencial hdrico foliar mais negativo que o gro de bico, mas a fotossntese e a transpirao foram apenas ligeiramente superiores na beterraba. A grande diferena entre as duas espcies foi o potencial hdrico. Estes resultados mostram que o ajustamento osmtico promove tolerncia desidratao, mas no muito eficaz em termos de produtividade duma cultura (Taiz & Zeiger, 1998).
Figura 55: Perda de gua e ganho de carbono em beterraba (Beta vulgaris), uma espcie com ajustamento osmtico e em gro de bico (Vigna unguiculata) uma espcie sem ajustamento osmtico. Ambas foram cultivadas em vasos e sujeitas a stresse hdrico. Ainda que o potencial hdrico da beterraba seja mais negativo devido ao seu ajustamento osmtico, a perda de gua total e o ganho em carbono foram pouco afectados. Retirado de Taiz e Zeiger (1998), fig.25.7, pag. 732
4.3.8. RESISTNCIA CONDUO DA GUA: medida que o solo seca a resistncia ao fluxo da gua vai aumentando. No entanto, a resistncia ao fluxo da gua dentro da planta ainda maior. Isto pode ser explicado por vrias razes (Taiz & Zeiger, 1998): + medida que perdem gua as clulas encolhem. Quando as razes encolhem a sua superfcie deixa de estar em contacto com as partculas de solo que seguram a gua. Por outro lado, os plos radiculares partem-se muitas vezes quando so puxados pela retraco da raiz. + Formao da exoderme (ver anteriormente, na pag. 31, e fig. 19, pag 33) + A cavitao do xilema (ver anteriormente, na pag. 41 e 42 e fig. 24 na pag 43)
4.3.9. ALTERAES NA CUTCULA: Uma resposta comum ao stresse hdrico a produo duma cutcula espessa que reduz a perda de gua pela epiderme (transpirao cuticular). Uma cutcula muito espessa tambm reduz a permeabilidade ao CO 2 , no entanto, a fotossntese foliar permanece inalterada uma vez que as clulas que esto sob a cutcula no so fotossintticas. Como a transpirao cuticular muito baixa, alteraes na cutcula s podem ser significantes nos casos de stresse muito severo, ou em casos em que areias levadas pelo vento a arrastam ou destroem.
4.4. MECANISMOS DE SOBREVIVNCIA SECA:
Os mecanismos de sobrevivncia das espcies xerfitas, isto , das espcies que sobrevivem em regies secas so sumariados na figura 56 (Larcher, 1995). As espcies resistentes seca so capazes de suportar perodos de seca. As perspectivas de uma planta sobreviver a um stresse de seca extremo so tanto maiores: + quanto mais tempo forem capazes de evitar o decrscimo do potencial hdrico do protoplasma (fuga dessecao); + quanto mais o protoplasma aguentar a dessecao sem ficar danificado (tolerncia dessecao). No entanto, no necessrio que uma planta seja resistente seca para viver numa zona rida. H espcies que escapam seca pela regulao do seu crescimento e reproduo, de forma a que ocorram no breve perodo em que h gua (fuga seca que no deve ser confundido com fuga dessecao!).
4.4.1. ESTRATGIA DE FUGA SECA: As espcies que seguem esta estratgia no so verdadeiramente resistentes, uma vez que a sobrevivncia dos perodos secos requer apenas a escolha do momento da produo de sementes resistentes seca ou orgos perenes especialmente protegidos contra a dessecao (Larcher, 1995). + As pluvioterfitas: so plantas vasculares efmeras que germinam a seguir a uma chuvada forte e completam rapidamente o seu ciclo de vida. A maioria destas espcies so anuais de Inverno (figura 57, k) , passando o perodo de seca na forma de sementes. + As gefitas: tm orgos subterrneos suculentos tais como rizomas, bolbos ou tubrculos. No perodo das chuvas conseguem desenvolver rapidamente uma parte area utilizando carbohidratos armazenados e florindo e frutificando num curto perodo de tempo (figura 57, i) e j).
Figura 56: Mecanismos de sobrevivncia das plantas das regies secas (xerfitas). Retirado de Larcher (1995), fig.6.63, pag. 388
4.4.2. MECANISMOS DE FUGA DESSECAO: A dessecao retardada por todos os mecanismos que permitem que a planta mantenha um contedo hdrico favorvel apesar do ar e do solo estarem secos sua volta. Isto pode ser conseguido atravs do aperfeioamento da absoro da gua; pelo aperfeioamento da capacidade de conduo da gua; pela reduo da perda de gua; e pelo armazenamento da gua (Larcher, 1995).
4.4.2.1. Aperfeioamento da absoro da gua: Esta estratgia implica a existncia dum sistema radicular extenso com uma grande rea de superfcie de absoro que pode ser ainda melhorada por um rpido crescimento para camadas de solo mais profundas (figura 57, d) e e). As razes das plantas das estepes e dos desertos podem atingir profundidades muito grandes. Grande parte destes sistemas radiculares pode ser suberizado ou pode armazenar gua. Para estas espcies a situao pode tornar-se grave quando no existe espao para o sistema radicular se expandir. As plantas com grandes sistemas radiculares (especialmente as rvores) que se desenvolvem em solos pouco profundos so particularmente sensveis seca. Este tambm o caso das plantas que se tenta colocar nos telhados, tneis, etc. Mesmo nas zonas hmidas as plantas a utilizar nestas condies devem ser resistentes seca, pois so as nicas que se aguentam com pouca gua armazenada num volume limitado de solo (Larcher, 1995).
Figura 57: Alguns exemplos de formas que permitem s plantas sobreviverem seca. a) rvores de folha caduca que armazenam gua nos troncos; b) suculentas que armazenam gua no caule; c) suculentas que armazenam gua nas folhas; d) rvores e arbustos de folha persistente e raiz principal profunda; e) arbustos de folha caduca frequentemente espinhosos; f) arbustos de caules clorofilinos; g) tufos de ervas com gemas de renovo protegidas pelas banhas das folhas e sistema radicular extenso; h) plantas de hbito em roseta; i)gefitas com razes de armazenamento; j)gefitas com bolbos ou tubrculos; k) pluvioterfitas (plantas anuais); l) plantas tolerantes dessecao do tipo poiquilohdricas. Retirado de Larcher (1995), fig.6.64, pag. 389
4.4.2.2. Aperfeioamento da conduo da gua: A capacidade de conduo da gua aumentada pelo alargamento da rea do sistema vascular, as plantas apresentam mais xilema e maior venao (figura 58) e a reduo da distncia de transporte, isto , entre-ns mais pequenos (figura 57, h). Se a superfcie de transpirao for reduzida simultaneamente, a rea relativa do sistema de conduo aumentada, mesmo que a rea absoluta (rea da seco transversal do sistema de conduo) permanea inaltervel (Larcher, 1995).
4.4.2.3. Reduo da transpirao: A capacidade de reduzir a transpirao permite que as plantas tenham uma melhor gesto da gua disponvel no solo. Uma adaptao modulativa acontece quando as plantas fecham atempadamente, mas reversvelmente os estomas. Uma adaptao modificativa ocorre quando folhas que se desenvolvem em perodos de seca apresentam estomas mais pequenos mas mais numerosos (figura 58)(Larcher, 1995).
Figura 58: Densidade estomtica e venao de folhas de feijoeiro (Phaseolus vulgaris) desenvolvido com boa disponobilidade em gua (parte superior), ou com falta de gua (parte inferior). Este tipo de alteraes morfolgicas podem ocorrer devido a um aumento de cido abscsico (ABA) endgeno, ou a aplicao exgena de ABA. Retirado de Larcher (1995), fig.6.65, pag. 390
As folhas das plantas genticamente adaptadas tm as paredes da epiderme mais fortemente cutinizadas e com maiores camadas de ceras. Os estomas esto presentes apenas na face inferior, so mais pequenos e esto frequentemente escondidos por baixo de plos ou em criptas estomticas (figura 59). Deste modo o ar volta dos estomas fica
Figura 59: Exemplos de estruturas foliares de plantas xerfitas. a) Seco transversal da folha de aloendro (Nerium oleander) com uma hipoderme muito espessada e parnquima clorofilino em palissada (a cinzento); podemos ver os estomas dentro de criptas estomticas que os protegem do efeito do vento. b) folha de uma Asteraceae californiana (Hemizonia luzulifolia ssp. rudis), que armazena gua numa substncia intercelular de natureza pectnica (a cinzento); c) folha cilndrica de Zygophyllum simplex, uma planta suculenta do deserto do Norte de Africa, com clornquima externo (a cinzento) que rodeia um tecido armazenador de gua (hidrnquima) muito extenso e situado no centro do orgo. Retirado de Larcher (1995), fig. 6.66, pag. 391
mais humedecido e a resistncia causada pela camada adjacente (boundary layer) aumenta. Outra forma de reduzir eficazmente as perdas de gua enrolando as folhas de forma a reduzir a superfcie transpirante. As folhas de plantas que se desenvolvem em situaes de carncia hdrica so mais alongadas e apresentam uma rea especfica menor (Specific Leaf Area) (Larcher, 1995):
4.4.2.4. Suculncia: Os mecanismos de armazenamento de gua podem ser considerados como os mais perfeitos para evitar a dessecao, especialmente se associados com mecanismos de reduo da superfcie e uma elevada resistncia da epiderme transpirao. Uma medida da capacidade de armazenar gua pode ser dada pelo grau de suculncia (Larcher, 1995):
A gua armazenada aps as ltimas chuvadas pode ser suficiente para atrasar o fecho total dos estomas por vrias semanas. Duma maneira geral as plantas suculentas armazenam as suas reservas em tecidos prprios localizado no interior de folhas ou caules (figura 59 c). Uma forma especial de conservar a gua ligando-a mucilagens em canais prprios e em espaos intercelulares. Esta forma de armazenar gua pode proteger a planta de uma desidratao muito sbita e de um encolher muito severo das folhas (Larcher, 1995). O movimento da gua armazenada nos vrios tecidos e orgos (troncos e ramos mais largos das rvores, e orgos de armazenamento subterrneo de plantas herbceas) torna-se mais importante durante perodos prolongados de seca. No Baobab (Adansonia digitata rvore smbolo do Senegal figura 57, a) h dados obtidos no Kenia que mostram que o tronco pode fornecer cerca de 400 litros de gua s folhas num nico dia. Mesmo em zonas temperadas o movimento de gua dos troncos pode ser muito importante. Assim, verificou-se que 30 a 50% da gua transpirada durante a transpirao do meio dia dum pinheiro com 40 anos proveniente do tronco e ramos. Durante os perodos de seca a primeira gua armazenada a ser usada a da base dos troncos, e depois gradualmente vai sendo usada a que est a nveis mais acima at chegar aos ramos.
4.4.2. MECANISMOS DE TOLERNCIA DESSECAO: A tolerncia dessecao uma capacidade especfica do protoplasma de tolerar uma perda de gua severa. Entre as talfitas (espcies no vasculares) as algas das zonas intertidais so muito tolerantes dessecao. A maior parte dos lquenes so capazes de tolerar dessecao completa durante meses e s vezes anos, recomeando a sua actividade metablica assim que se rehidratam (Larcher, 1995). Existem igualmente cormfitas (plantas vasculares) que so completamente tolerantes dessecao. o caso das chamadas plantas de ressureio (resurrection plants) que exitem nas famlias das Myrothamnaceae, Scrophulariaceae, Laminaceae, Cyperaceae, Poaceae, Liliaceae e Velloziaceaedas regies secas da Asia Central, America do Sul e sobretudo da Africa do Sul. Duma maneira geral estas plantas so perenes, as suas folhas so pequenas e enrolam-se frequentemente, o seu crescimento pequeno e a sua capacidade reprodutiva pequena. So plantas que no tm capacidade de retardar a dessecao e como tal ficam desidratadas muito depressa (Larcher, 1995). Todas as plantas capazes de tolerar a dessecao sobrevivem a uma desidratao extrema do protoplasma por uma transio para um estado anabitico no qual o metabolismo est praticamente parado. medida que ocorre a desidratao, o estado anabitico levado a cabo pela sntese de protenas capazes de permanecerem estveis numa situao desidratao e pela incorporao de carbohidratos (rafinose e trehalose) estabilizadores dos fosfolpidos das membranas. Nalgumas espcies a diminuio do volume das clulas retardada pela gelificao da soluo celular. Outro factor que contribui para a tolerncia dessecao a capacidade que o protoplasma destas espcies tem de se rehidratar duma forma coordenada quando volta a dispr de gua. Passo a passo, as condies necessrias reactivao do metabolismo energtico (primeiro a respirao e depois a fotossntese) so restabelecidas de novo pela reconstruo dos componentes celulares.