UNIVERSIDADE FEDERAL DO MATO GROSSO UFMT FACULDADE DE ENGENHARIA FLORESTAL

VALESKA LORENA FAGUNDES PEREIRA

RELATRIO DE BIOQUIMICA Reaes de Identificao de Carboidratos e Caracterizao Lipdios

VALESKA LORENA FAGUNDES PEREIRA

RELATRIO DE BIOQUIMICA Reaes de Identificao de Carboidratos e Caracterizao Lipdios

Trabalho apresentado a Professora Mariana, como parte das atividades avaliativas da disciplina de Bioqumica, do segundo semestre do curso de Engenharia Florestal da UFMT.

Cuiab MT Novembro de 2011.

1. INTRODUO

Todos os alimentos so constitudos por substncias qumicas, tais como: protenas, lipdios, carboidratos, fibras, minerais, vitaminas e gua. Estas substncias qumicas so responsveis por funes vitais no organismos, correspondentes as suas necessidades de crescimento, de energia, de elaborao e manuteno tecidual e de equilbrio biolgico. Este trabalho se dedicar aos carboidratos e lipdeos.

1.1 Carboidratos

Os carboidratos so compostos orgnicos, constitudos por Carbono (C), Hidrognio (H) e Oxignio (O) e so produzidos atravs da fotossntese, processo realizado por organismos capazes de sintetizar molculas orgnicas atravs da luz solar, na sua maioria so plantas. Tambm so conhecidos como glicdios ou sacardeos por estar no grupo das substncias doces que conhecemos como glicose e sacarose tendo um ou vrios grupos alcolicos (OH) e um grupo aldedo (-CHO) ou cetnico (-CO-), ou seja, possuem na sua estrutura um grupo aldedo H-C =O ou cetona R- C-R.

Estes compostos orgnicos ainda podem ser classificado segundo suas cadeias como:

Monossacardeos: so os menores e mais simples carboidratos, que, se hidrolisados a compostos de menor peso molecular, correspondem a menor unidade estrutural de um carboidrato. De acordo com o nmero de carbonos os monossacardeos podem ser classificados em: 3C= triose , 4C= tetrose , 5C= pentose , 6C= hexose, 7C= heptose. Os monossacardeos importantes para a nutrio humana so: glicose, frutose e galactose. A glicose o monossacardeo bsico dos carboidratos e encontrado em maior quantidade na natureza. o nico carboidrato constituinte dos polissacardeos amido, glicognio e celulose. Os

monossacardeos so classificados de acordo com a natureza qumica do

grupo carbonila e pelo nmero de seus tomos de carbono. Os que tm grupos aldedicos so aldoses e os que tm grupos cetnicos, formam as cetoses.

Oligossacardeos: So polmeros contendo de 2 a 10 unidades de monossacardeos unidos por ligaes glicosdicas. So nomeados segundo o nmero de molculas de monossacardeos: dissacardeos, trissacardeos, tetrassacardeos. Os mais importantes so os dissacardeos os quais contm dois monossacardeos. Para formar dissacardeos, oligossacardeos ou mesmo polissacardeos, necessrio que os monossacardeos se unam entre si atravs de ligaes glicosdicas. Exemplos de dissacardeos os quais se hidrolisam em duas molculas de monossacardeos: Sacarose - glicose + frutose ; Maltose - glicose +glicose; Lactose - glicose +galactose .

Polissacardeos: So polmeros de alto peso molecular dos monossacardeos. Os polissacardeos contm mais que 12 unidades de monossacardeos dispostos de forma linear ou ramificada. Os que mais se encontram distribudos na natureza so: no reino vegetal, o amido, a celulose e as pectinas; e, no reino animal, o glicognio. A sua solubilidade em gua depende do peso molecular (diminui medida que aumenta o peso molecular)

1.2. Lipdios

Os lipdios biolgicos constituem um grupo de compostos que, apesar de quimicamente diferentes entre si, exibem possui como caracterstica comum a insolubilidade em gua. As funes biolgicas dos lipdeos so to diversas quanto sua qumica. Estes compostos orgnicos so formados a partir de carbono, hidrognio e oxignio encontrados em diversos alimentos na forma de gordura e/ou leos. Em muitos organismos, gorduras e leos so as principais formas de armazenamento de energia. As gorduras e leos so formados por trs molculas de cidos graxos ligados a uma molcula de glicerol podendo ter de quatro a vinte e quatro ou mais tomos de carbonos sendo saturados ou insaturados.

Existem vrios tipos de lipdios: leo e gorduras, fosfolipdios, ceras e esterides. leos e gorduras so importantes substncias de reserva de energia em diversos organismos. Os fosfolipdios so lipdios associados a um grupo fosfato, da o nome desse grupo. Eles so os tipos de lipdios presentes na membrana plasmtica de todas as clulas. As ceras so comuns, por exemplo, em certas plantas e ficam depositadas sobre a superfcie de folhas, atuando como um revestimento que impede a perda de gua do corpo. Os triacilgliceris so lipdios mais comuns em alimentos, formados predominantemente por produtos de condensao entre glicerol e cidos graxos, usualmente conhecidos como leos ou gorduras.

2. OBJETIVOS

2.1 Reao de identificao de carboidratos

Objetivou-se com est aula prtica iniciar os estudantes na execuo de testes qualitativos para reconhecimento de carboidratos, bem como conhecer o significado e a aplicao dos testes Iodo, Benedict, Seliwanoff e Tollens, na identificao de carboidratos desconhecidos.

2.2 Reaes de caracterizao de Lipdios

Objetivou-se com este trabalho prtico ensinar aos alunos como executar testes qualitativos para o reconhecimento dos lipdios; entender o mecanismos da hidrlise dos lipdios e tambm os significados dos testes realizados.

3. MATERIAS E MTODOS

3.1 Trabalho prtico n3 - Reaes de identificao de carboidratos

a. Teste do Iodo

Este teste usado na diferenciao de homopolissacardeos de outros carboidratos. Procedimento: Pipetou-se 0,1ml de 5 solues de carboidratos (Amido, Sacarose, Glicose, Frutose, Lactose) em cinco tubos e adicionou-se, 2 gotas de soluo de Lugol, nos mesmos cinco tubos. Analisou-se os resultados.

b. Teste de Benedict: Este teste usado para diferenciar carboidratos redutores de no redutores. Procedimento: Pipetou-se 0,5ml de 5 solues de carboidratos em tubos de em saio e, acrescentou-se 1ml de reagente de Benedict, nos cinco tubos. Aqueceu-os em banho fervente.Observou-se os resultados.

c. Teste de Seliwanoff

O teste permite diferenciar aldoses de cetoses. Procedimentos: Pipetou-se 1ml de soluo de Glicose em um tubo de ensaio, e 1ml de soluo de FrutoseEm ambos foi adicionado 1ml do reativo de Seliwanoff. Levou-os em banho fervente por 3 minutos. Aps este procedimento observou-se os resultados.

d. Teste de Tollens:

Esta reao baseia-se na ao redutora do carboidrato sobre o on prata (Ag+), com formao de um espelho de prata metlica (Ag) nas paredes do tubo. Procedimento: Pipetou-se em tubo de ensaio 2ml de Nitrato de prata 0,1N, 5ml da soluo NaOH 0,2N. Para dissolver o precipitado foi adicionado amnia concentrada gota a gota e, agitou-se o tubo.Adicionou-se 1ml da soluo de glicose e aqueceu-o diretamente na chama. Observou-se o resultado.

3.2 Trabalho prtico n4 - Reaes de caracterizao de lipdeos

Os lipdeos so substncias orgnicas heterogneas, de origem animal ou vegetal, que tm uma propriedade em comum: ser relativamente insolveis em gua e facilmente solveis em solventes orgnicos (Clorofrmio, Benzeno, ter, Acetona, lcool a

quente). Cumprem vrias funes no organismo: armazenamento de energia, componentes de membranas, componentes de alguns sistemas enzimticos, funes hormonais, isolantes trmicos. So largamente empregados na alimentao.

a.- Solubilidade:

Procedimento: Preparou-se a seguinte srie de tubos: Tubo 1 - 1,0 ml de gua destilada; Tubo 2 - 1,0 ml de lcool etlico; Tubo 3 - 1,0 ml de clorofrmio; Tubo 4 - 1,0 ml de benzeno. Acrescentou-se a cada um dos tubos 0,5 ml de leo. Agitou-os e, observou-se os resultados. ????? b.- Estabilizao de uma emulso:

Procedimento: No tubo 1, colocou-se 0,5 ml de leo , preencheu o tubo quase completamente com gua e agito-o fortemente. No tubo 2: colocou-se 0,5 ml de leo, adicionou algumas gotas de NaOH a 10% e preencheu-o quase completamente com gua, agitou-se fortemente. Depois deixou o tubo em repouso e observou-se os resultados.

c.- Adio de Halognios:

Halogenao a reao do cido graxo insaturado com um halognio, formando cido graxo saturado halogenado.

Procedimento: Preparou-se a seguinte srie de tubos: Tubo 1: 1,0 ml de gua; Tubo 2: 1,0 ml de leo; Tubo 3: uma pitada de gordura. Acrescentou-se a cada tubo 3 ml de clorofrmio e agitou-os. Acrescentou em todos o tubos 5 gotas do reativo de HubI (6g de HgCl2 + 5,2g de iodo + 200 ml de lcool 95%). Agitou-os, novamente e observou-se os resultados.

4. RESULTADOS E DISCUSSO

4.1 Trabalho prtico n3 - Reaes de identificao de carboidratos a. Teste do Iodo O resultado indicou, atravs da colorao azul, que apenas o amido se liga ao iodo, isso porque o iodo s se liga a cadeias longas, logo a Frutose, Lactose, Glicose e Sacarose no reagem, por possurem cadeias menores. Os

homopolissacardeos do tipo Amido formam com o Iodo um complexo colorido. Pela colorao resultante pode-se identificar, por exemplo: azul amido; avermelhado glicognio; roxo avermelhado dextrinas dependendo da estrutura e extenso molecular; incolor inulina.

b. Teste de Benedict O resultado deste teste deu positivo para frutose, lactose e glicose, apresentando, os mesmos, uma colorao escuro alaranjada. Isso acontece devido ao fato destes carboidratos apresentarem grupos carbonila livres, sendo os mesmos carboidratos redutores. O amido e a sacarose ficam da mesma cor, o que indica que estes no so carboidratos redutores. Os resultados encontrados justificam-se, uma vez que os ons cpricos (Cu2+) estabilizados em soluo por agentes complexantes (azul) so reduzidos, a quente, pelos grupos carbonila (livres ou potenciais) das aldoses ou cetoses, formando-se o xido cuproso (Cu2O) de cor vermelho-tijolo.

c. Teste de Seliwanoff Os resultados encontrados foram positivos, sendo caracterizados pela colorao avermelhada nos tubos, que indica a formao do complexo entre furfural ou HMF com o resorcinol, indicando a presena de aldoses e cetoses. O teste ainda permite diferenciar aldoses de cetoses, que sob a ao desidratante do HCl so ambas transformados em derivados do furfural, que se condensam com o resorcinol formando um composto vermelho de composio incerta, porm, a reao com cetoses rpida e mais intensa do que a reao com aldoses.

d. Teste de Tollens

Este teste tambm apresentou resultados positivo para presena de aldedo ou e outro grupo redutor. A presena destes foi identificada pela formao de um precipitado escuro de prata e a formao de espelho de prata. Isso acontece devido a ao redutora do carboidrato sobre o on prata (Ag+), com formao de um espelho de prata metlica (Ag) nas paredes do tubo.

4.2 Trabalho prtico n4 - Reaes de caracterizao de lipdeos

a) Solubilidade (olhar resultados) A gua destilada polar, o lcool etlico tambm polar e o clorofrmio apolar, como o leo apolar, o nico que ele se ligar o clorofrmio.

b) Estabilizao de uma emulso

Os resultados mostraram que no tubo 1 (gua e leo), as substncias no se misturaram. Isso devido a caracterstica polar da gua e apolar do leo, que os torna imiscveis. Observou-se que o lquido contido no primeiro tubo se separou rapidamente em uma camada de gua e outra de leo. No segundo tubo (leo, gua e NaOH) persistiu, num primeiro instante, uma emulso de aspecto leitoso. A primeira emulso instvel. Aps a adio do NaOH formou-se uma pequena quantidade de sabo com o cido olico livre de leo e a emulso se estabilizou. Essa reao tem como resultado a liberao do glicerol e formao de sais de cidos graxos, originados pela incorporao do sdio molcula de cido graxo.

c) Adio de Halognios Nesta reao o cido graxo insaturado reage com um halognio, formando cido graxo saturado halogenado. Se houver dupla ligao, o iodo ser consumido e a colorao caracterstica da soluo de iodo diminuir de intensidade. Os resultados encontrados indicaram que no tubo 2 ( com leo ) houve adio de iodo s

insaturaes. Isso ocorre devido ao descoramento doreativo pelo fato dos leos vegetais serem poliinsaturados,podendo, o iodo se ligar as instauraes. Na gua, na gordura animal (saturada) e na margarina (polihidrogenada), no h insaturaes para a adio do iodo, no havendo, portanto, o descoramento do reativo.

5. QUESTIONRIOS 5.1 Aula Prtica n 3 Reaes de identificao de Carboidratos

1. Como possvel identificar rapidamente se o polissacardeo de uma soluo glicognio ou amido? R: So dois homopolissacardeos, para diferenci-los basta adicionar iodo, o Amido ter uma colorao Azul e o Glicognio uma colorao avermelhada. 2. Se voc deixar cair soluo de iodo na camisa ocorrer formao de mancha colorida? Explicar. R: 3. Um dissacardeo no capaz de reduzir Cu++ em meio alcalino. Aps sua hidrlise verificou-se que ele era composto de glicose e frutose. Qual esse dissacardeo e por que isso ocorre? R: 4. O que um acar redutor? R: Os acares redutores possuem grupos aldedos e cetonas livres na cadeia e so chamados redutores por atuarem como agentes redutores,isto ,que sofrem oxidao(doam eltrons). 5. O glicognio um acar redutor? Justifique. R: No. Cada ramificao do glicognio termina com uma unidade de acar no redutor (sem o carbono anomrico livre). 6. A maltose, a lactose e a sacarose so acares redutores? Justifique. R: A maltose e a lactose so acares redutore, possuem carbono anomrico. A

sacarose, sendo formada por glicose e frutose, pode tornar-se um acar redutor se sofrer ao enzimtica ou hidrlise cida. 7. Uma amostra de urina d reao positiva com o reativo de Benedict. O que isso pode significar? R: Significa a presena de acar no organismo da pessoa, e visualizado pela colorao que vai do azul (negativo) passando pelo verde, amarelo, laranja at o vermelho-tijolo.

5.2 Aula Prtica n 4 Reaes de caracterizao de lipdeos

1. Considerando a estrutura molecular dos lipdeos explique por que eles so insolveis em gua e facilmente solveis em solventes orgnicos (Clorofrmio, Benzeno, ter, Acetona, lcool)? R: Pois os lipdeos so apolares como os solventes orgnicos citados, e deiferentes da gua que polar.

2. Como o NaOH capaz de estabilizar a soluo de leo e gua? Faa um esquema que mostre a formao de sabo atravs da reao do NaOH com o cido olico livre de leo. R:

3. O que caracteriza o teste de adio de Halognios como positivo? Por que este teste capaz de identificar cidos graxos insaturados? R: Pois o Iodo se liga a gordura insaturada.

4. Esquematize o que ocorre na prtica 1.c (adio de Halognios) quando o reativo de HubI adicionado s solues.

6. CONCLUSO

7. REFERNCIAS

VIEIRA, Ricardo. Fundamentos de Bioqumica: Textos didticos. Universidade Federal do Par, 2003.
NELSON, D. L.; COX, M. M. Lehninger: Princpios de Bioqumica. 4. ed. So Paulo, 2002.