Guas de clases prcticas y seminarios

AUTORA PRINCIPAL
Araceli Lantigua Cruz Dra. en Medicina, Especialista de Segundo Grado en Gentica Clnica. Doctora en Ciencias Mdicas. Profesora Titular de Gentica Mdica. Jefe del Departamento Docente de Gentica Mdica del ICBP "Victoria de Giron" ISCM-H. Coordinadora Docente del Centro Nacional de Gentica Mdica.

COLECTIVO DE AUTORES
Rolando Hernndez Fernndez Doctor en Medicina, Especialista de Segundo Grado en Bioqumica Clnica. Profesor Titular de Bioqumica. Jefe del Departamento de Bioqumica del ICBP "Victoria de Girn". Jorge Quintana Aguilar Doctor en Medicina, Especialista de Segundo Grado en Gentica Mdica. Profesor Auxiliar de Gentica Mdica. Laboratorio de Citogentica del Centro Nacional de Gentica Mdica. Departamento Docente de Gentica Mdica del ICBP "Victoria de Girn" ISCM-H. Estela Morales Peralta Doctora en Medicina, Especialista de Segundo Grado en Gentica Mdica. Profesora Auxiliar de Gentica Mdica. Grupo de Asistencia Mdica del Centro Nacional de Gentica Mdica. Departamento Docente de Gentica Mdica del ICBP "Victoria de Giron" ISCM-H. Brbara Barrios Garca Licenciada en Biologa. Doctora en Ciencias Biolgicas. Profesora Titular de Gentica Mdica. Jefe del laboratorio de Errores Congnitos del Metabolismo. Departamento Docente de Gentica Mdica del ICBP "Victoria de Giron" ISCM-H. Iris Rojas Betancourt. Doctora en Medicina, Especialista de Segundo Grado en Gentica Mdica. Profesora Auxiliar de Gentica Mdica. Grupo de Asistencia Mdica del Centro Nacional de Gentica Mdica. Departamento Docente de Gentica Mdica del ICBP "Victoria de Giron" ISCM-H. Marcos Martn Ruiz. Doctor en Medicina, Especialista de Segundo Grado en Gentica Mdica. Profesor Auxiliar de Gentica Mdica. rea de Investigaciones del Centro Nacional de Gentica Mdica. Departamento Docente de Gentica Mdica del ICBP "Victoria de Girn" ISCM-H.

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Guas de clases prcticas y seminarios

Dra. Araceli Lantigua Cruz

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La Habana, 2004
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Datos CIP- E ditorial Ciencias Mdicas Lantiga Cruz Araceli Introduccin a la Gentica Mdica/ Araceli Lantiga Cruz... [y otros]. La Habana: Editorial Ciencias Mdicas; 2004. XIV. 292p. Fig. Tab. Incluye ndice general. Incluye 19 acpites con sus autores. Bibliografa al final de la obra ISBN 959-212-114-1 1.GENETICA MEDICA 2.LIBROS DE TEXTO QZ50

Edicin: Lic. Damiana Martn Laurencio y Lic. Daysi Bello lvarez Diseo: Ac. Luciano O. Snchez Nez Composicin y emplane: Mara Pacheco Gola

Araceli Lantigua Cruz, 2004 Sobre la presente edicin: Editorial Ciencias Mdicas, 2004

Editorial Ciencias Mdicas Centro Nacional de Informacin de Ciencias Mdicas Calle I No. 202 esq. a Lnea, piso 11, El Vedado, Ciudad de La Habana, CP 10400, Cuba Correo electrnico: ecimed@infomed.sld.cu Telfonos: 553375, 8325338

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AGRADECIMIENTOS

A la Lic. Marcia Cobas Ruiz quien con sus exigencias y aliento impuls la realizacin de esta obra en un muy poco tiempo. Al Prof. Dr. Francisco Morales Calatayut quien descubri en los materiales complementarios escritos para auxiliar a los estudiantes de medicina en la nueva asignatura de Gentica Mdica, la posibilidad real de realizar un texto dirigido a ellos y estimular la realizacin del mismo con valiosas orientaciones. Al Prof. Dr. Rolando Hernndez Fernndez quien revis rigurosamente cada captulo del texto y con sus crticas y orientaciones metodolgicas colabor a dar un sentido docente y prctico al objetivo de orientar a los a los estudiantes hacia la comprensin de los aspectos bsicos de la Gentica Mdica.

DEDICATORIA

Al Comandante Fidel Castro Ruz, por la visin del futuro del desarrollo de la Gentica Mdica y su repercusin en las Ciencias Mdicas, por su eterno sentimiento de justicia social e igualdad de posibilidades para todos y por mostrarnos con su sabia conduccin que un mundo mejor es posible. A los estudiantes de Ciencias Mdicas de Cuba quienes sern sus lectores principales y que nos han motivado ha poner en sus manos un texto que responda a las exigencias de la enseanza de los fundamentos de la gentica dirigidos a su aplicacin en la medicina.

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PRLOGO

Este Texto ha sido diseado para los estudiantes de Ciencias Mdicas, se ha adaptado al programa de la asignatura Gentica Mdica, pero puede ser de utilidad para estudiantes de educacin especial, de sicologa, docentes involucrados en la docencia de preuniversitario y estudiantes y profesionales que de algn modo necesiten de conocimientos generales de gentica dirigidos hacia el humano y en especial a la medicina. Aunque no es un texto dirigido a estudios avanzados de postgrado, podra tambin ser de utilidad para todas las especializaciones mdicas en especial para la Medicina General Integral y en un primer nivel de informacin, para estudiantes de diplomados y maestras relacionados con Gentica Mdica y Asesoramiento Gentico. Se ha nombrado Introduccin a la Gentica Mdica porque contiene elementos de Biologa Celular y Molecular, de Embriologa y de las Leyes de Mendel escritos con el enfoque que se requiere para que el estudiante tenga esta informacin asequible. Cada Captulo ha sido diseado teniendo en cuenta los conocimientos sobre las leyes y principios de la gentica general y humana necesarios para la comprensin de los fundamentos de la Gentica Mdica. Cuenta con un captulo introductorio en el cual se enfocan antecedentes histricos del desarrollo de la Gentica Mdica y de la clasificacin etiolgica de los defectos genticos. Los captulos 2,3 , 4 y 5 facilitan contenidos bsicos actualizados de la biologa celular y molecular, las caractersticas de la meiosis, piedra angular para la comprensin de la trasmisin hereditaria de los genes y caracteres, el fenmeno de la fecundacin y los primeros estadios de divisiones celulares del cigoto hasta la formacin del blastocisto, enfocando en los mismos los momentos biolgicos ms significativos para la comprensin de mecanismos genticos cuyas anormalidades originan enfermedades genticas y defectos congnitos. En los captulos 6, 7 y 12 se abordan los fundamentos tcnicos, mtodos y herramientas necesarios para el estudio con fines diagnstico del material gentico, as como la forma en que se exponen sus resultados y su interpretacin. En los captulos del 8 al 11 se exponen conocimientos acerca de los defectos cromosmicos y de mutaciones simples del ADN y su repercusin en la etiologa de enfermedades genticas.

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Los captulos 13, 14 y 15 proporcionan conocimientos bsicos que permiten comprender las posibilidades de aplicacin de las nuevas tecnologas moleculares del AND, del estudio de la gentica poblacional y su repercusin en la epidemiologa de enfermedades genticas. Todos estos conocimientos en funcin de la comprensin de objetivos preventivos en la prctica mdica y en proporcionar informacin sobre principios tcnicos del desarrollo de investigaciones sobre el genoma humano. El captulo 16 explica los fundamentos genticos de la herencia de rasgos cuantitativos enfocados al estudio de malformaciones especficas y al novedoso tema de las enfermedades comunes en general, pero sobre todo a aquellas que se aprecian como el resultado de la prolongacin de la vida y que por las dificultades de la comprensin de sus caractersticas genticas y de la participacin ambiental en ellas se les denomina tambin como enfermedades complejas. En el captulo 17 se aborda la etiologa de los defectos congnitos y se detallan aspectos relacionados con los genes y mecanismos celulares que participan en la morfognesis, cuyas mutaciones explican su origen gentico y que adems, proporcionan conocimientos que permiten la comprensin de la accin de teratgenos que interfieren con estos mecanismos jerrquicamente programados. El captulo 18 est dedicado a la prevencin de las enfermedades genticas. Proporciona informacin acerca del Asesoramiento Gentico y de sus tcnicas y da la oportunidad de integrar todos los conocimientos expuestos en los captulos anteriores, finalmente en el captulo 19 se expone un ejemplo de programa de atencin de una enfermedad gentica en el nivel primario de Salud para el cual se seleccion la enfermedad gentica ms frecuente en nuestro pas, la anemia de clulas falciformes. Aunque el texto fue diseado en un tiempo breve, su contenido ha sido largamente meditado y en cada captulo se han tenido en cuenta los progresos que el desarrollo de la gentica en los ltimos aos, sobre todo aquellos surgidos como una consecuencia de los extraordinarios avances tcnicos en los estudios del ADN y de los nuevos conocimientos surgidos como producto de las investigaciones que se desarrollan en el Proyecto del Genoma Humano. Esperamos que en este texto los estudiantes de Ciencias Mdicas encuentren los aspectos fundamentales de la gentica humana relacionados con las variaciones genticas del desarrollo y se apoderen de las bases y herramientas necesarias para abordar la comprensin, atencin y prevencin de aquellas, que por las caractersticas de su patognesis requieren de atencin mdica y educativa especializada. Los autores.

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NDICE

1. INTRODUCCIN / 1 Antecedentes / 1 Las enfermedades genticas / 5 2. PANORAMA DE LA BIOLOGA CELULAR Y MOLECULAR / 7 La Biologa Celular / 7 La membrana plsmtica / 8 El sistema de endomembranas / 9 El citoesqueleto / 11 Los ribosomas / 11 El ncleo celular / 12 El ciclo celular / 13 Las ciclinas / 14 Las protenas kinasas dependientes de ciclinas (Cdk) / 16 Los inhibidores de las Cdk (CDI/CKI) / 17 Fosfoprotenas fosfatasas / 17 La Biologa Molecular / 18 Estructura del ADN / 18 La transmisin de la informacin gentica / 20 La replicacin del ADN / 20 La mitosis / 25 3. LA EXPRESIN DE LA INFORMACIN GENTICA / 27 La transcripcin / 27 La traduccin / 30 La conservacin de la informacin gentica / 34 Las mutaciones / 35 Consecuencias de las mutaciones / 36 Reordenamiento de la informacin gentica / 37 La comunicacin intercelular / 38 4. DE LA MEIOSIS AL BLASTOCISTO / 42 La meiosis / 42 Espermatognesis / 47 La ovognesis / 49

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El vulo / 50 La fecundacin / 51 La primera divisin mittica del cigoto / 51 Resumen / 52 5. LAS LEYES DE MENDEL / 54 Los experimentos mendelianos / 55 Cruzamiento monohbrido / 56 Anlisis del cruzamiento mendeliano para el carcter color del cotiledn de las semillas / 57 Cruzamiento mendeliano para dos caracteres / 60 Retrocruces / 62 Cruzamiento trihbrido / 63 Resumen / 64 6. LOS CROMOSOMAS HUMANOS Y SU ESTUDIO / 65 Cromatina nuclear / 65 Los cromosomas / 66 Estudio de los cromosomas humanos en clulas en interfase: Cromatina sexual / 67 El cariotipo humano / 69 Tcnicas para la obtencin de cromosomas / 70 Mtodo de coloracin para anlisis cromosmico comn / 71 Resumen / 74 7. CITOGENTICA MOLECULAR / 75 Tcnicas de hibridacin in situ / 75 Mtodos de hibridacin in situ / 76 Resumen / 79 8. MUTACIONES QUE AFECTAN A LOS CROMOSOMAS HUMANOS / 80 Anormalidades o defectos cromosmicos / 81 Aberraciones cromosmicas de nmero / 81 Las aneuploidas como eventos precigticos / 82 Las aneuploidas como eventos postcigticos / 85 La anafase retardada / 86 Aberraciones cromosmicas de estructura / 86 Inversiones y su repercusin en la gametognesis / 92 Las translocaciones / 92 Gametognesis en translocaciones / 93 El fenotipo como expresin de aberraciones cromosmicas no balanceadas / 94 Expresin de las aberraciones cromosmicas autosmicas no balanceadas / 95 Anormalidades de estructuras anatmicas por defecto del desbalance genmico en la morfognesis / 95 Efectos en el crecimiento y desarrollo / 98 Efectos en el sistema nervioso / 98 Caractersticas fenotpicas de las aberraciones de cromosomas sexuales / 99

Resumen / 102 9. TRASMISIN DE SIMPLES MUTACIONES / 104 Determinacin del sexo / 104 Herencias mendelianas en el humano / 107 Simbologa para la confeccin del rbol genealgico / 107 Herencias dominantes, autosmica y ligada al cromosoma X / 109 Herencia autosmica dominante / 109 Herencia dominante ligada al cormosoma X / 111 Resumen de las herencias dominantes / 113 Herencias recesivas, autosmica y ligada al cromosoma X / 113 Herencia autosmica recesiva / 113 Herencia recesiva ligada al cromosoma X / 115 Resumen de las herencias recesivas / 116 Herencia ligada al cromosoma Y / 117 Fenmenos que dificultan el anlisis de la segregacin mendeliana / 117 Herencias influidas por el sexo y limitadas al sexo / 117 Penetrancia de un gen o de una mutacin especfica / 118 Expresividad de un gen o mutacin especfica / 118 Efecto pleitrpico de un gen o mutacin especfica / 119 Heterogeneidad gentica / 119 Inactivacin del cromosoma X / 119 Nuevas mutaciones con expresin dominante / 120 Efecto de letalidad de un genotipo especfico / 120 Resumen / 121 10. INTERFERENCIAS BIOLGICAS DE LA TRANSMISIN DE SIMPLES MUTACIONES / 122 Mutaciones dinmicas / 122 Impronta genmica / 125 Disomas uniparentales / 126 Mosaicismos germinales / 127 Herencia mitocondrial / 127 Otras caractersticas de la transmisin de simples mutaciones y de su expresin / 129 Herencia dignica / 129 Prdida de heterocigocidad / 129 Resumen / 130 11. MUTACIONES MONOGNICAS QUE AFECTAN A DIFERENTES CLASES DE PROTENAS / 131 Clasificacin de las protenas segn su patrn de expresin / 131 Defectos de protenas enzimticas / 132 Protenas de transporte y almacenamiento / 136 Protenas estructurales de clulas y de rganos / 136 Protenas involucradas en la homeostasis / 137 Protenas que se expresan durante el desarrollo / 137

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Protenas involucradas en la proliferacin y diferenciacin celular / 138 Protenas que actan en el metabolismo intercelular y la comunicacin entre las clulas / 138 Resumen / 140 12. MTODOS Y APLICACIONES DE ADN RECOMBINANTE / 141 Clonacin del ADN / 141 Clonacin in vivo / 142 Enzimas de restriccin y ligasas. Su papel en la clonacin / 142 Vector / 143 Transformacin del organismo huesped y obtencin del ADN especfico / 145 Mtodos de anlisis molecular / 146 Reaccin en cadena de la polimerasa (PCR) / 147 Mtodo de Southern (Southern Blotting) / 149 Northern Blotting y Western Blotting / 150 Estudios de marcadores moleculares por ligamiento / 151 Polimorfismo de longitud de fragmentos de restriccin / 151 Secuenciacin de ADN / 152 Resumen / 153 13. LIGAMIENTO Y RECOMBINACIN / 154 Ligamiento. Concepto y clasificacin / 154 Clculo de la frecuencia de recombinacin y fase de posicin entre genes ligados / 160 Localizacin de genes ligados / 164 Factores que pueden afectar el entrecruzamiento en animales y plantas / 167 Anlisis de ligamiento en el hombre / 167 Construccin de mapas fsicos / 168 Mapas genticos / 175 Mapas genticos por tcnicas de Biologa Molecular / 181 Resumen / 183 14. MARCADORES GENTICOS / 184 Marcadores genticos / 184 Sistemas de grupos sanguneos como marcadores genticos / 184 Vas de sntesis del sistema ABO / 186 Sistema Rh / 188 Sistema MN / 188 Gentica del sistema de histocompatibilidad mayor (MHC) / 189 Polimorfismos de longitud de fragmentos de restriccin del ADN (RFLP) / 191 Resumen / 192 15. LOS GENES EN LAS POBLACIONES HUMANAS / 193 La gentica poblacional / 194 Ley de Hardy - Weinberg / 194 Determinacin de frecuencias fenotpicas, genotpicas y gnicas entre dos alelos con dominancia completa / 196

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Determinacin de frecuencias fenotpicas, genotpicas y gnicas entre dos alelos codominantes / 198 Determinacin de frecuencias fenotpicas, genotpicas y gnicas entre alelos mltiples / 199 Frecuencias de genes y genotipos de genes ligados al cromosoma X / 201 Factores que pueden alterar el equilibrio de Hardy - Weinberg en una poblacin / 202 Matrimonios no al azar / 202 Mutaciones / 203 Seleccin contra mutaciones dominantes / 204 Seleccin contra mutaciones recesivas / 204 Seleccin contra mutaciones ligadas al cromosoma X / 204 Ventajas selectivas de heterocigticos / 205 Resumen / 206 16. HERENCIA MULTIFACTORIAL / 208 Frecuencias de genotipos y fenotipos para rasgos discontinuos / 209 Frecuencias de genotipos y fenotipos para rasgos continuos / 211 Herencia multifactorial / 213 Heredabilidad / 214 Modelo de predisposicin gentica / 216 Defectos congnitos de herencia multifatorial / 217 Herencia multifactorial de enfermedades comunes / 218 Susceptibilidad gentica / 219 Riesgos de susceptibilidad gentica / 220 Demostracin de la existencia de un componente gentico en la expresin de una enfermedad comn / 221 Mtodos para demostrar heterogeneidad gentica en la herencia multifactorial / 223 Caractersticas comunes a todo rasgo en el que se sospeche herencia multifactorial / 224 Resumen / 225 17. DEFECTOS CONGNITOS DE ORIGEN GENTICO Y AMBIENTAL / 226 Tipos de defectos congnitos / 227 Defectos congnitos y morfognesis / 228 Mecanismos moleculares y celulares del desarrollo embrionario / 229 Eventos moleculares / 230 Eventos celulares / 232 Induccin embrionaria / 235 Control gentico del desarrollo / 235 Genes de segmentacin / 236 Genes hometicos / 237 Cajas pareadas (PAX) / 237 Genes con cajas HMG (Grupo de Alta Movilidad o Higth Movility Group) / 238 Genes T / 238 Factores de transmisin en dedos de zinc / 238

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Genes de transduccin de seales / 239 Receptores de factores de crecimiento fibroblstico / 239 Desarrollo embrionario de las extremidades / 239 Aspectos esquemticos generales para el estudio del desarrollo del esqueleto / 240 Embriologa descriptiva de las extremidades / 241 Origen embrionario de los tejidos y estructuras componentes de las extremidades / 242 Bases moleculares del patrn de formacin del esqueleto apendicular / 242 Etiologa ambiental de defectos congnitos / 244 Agentes teratgenos exgenos / 245 Susceptibilidad gentica al efecto de teratgenos / 247 Condiciones endocrinometablicas maternas anormales / 247 Defectos congnitos de las extremidades / 248 Defectos congnitos debido a fuerzas mecnicas / 249 Defectos congnitos debido a disrupciones / 249 Resumen / 250 18. PREVENCIN DE LAS ENFERMEDADES GENTICAS Y ASESORAMIENTO GENTICO / 251 Servicios de gentica / 251 Servicios asistenciales - preventivos de base individual - familiar / 251 Programas de prevencin con base poblacional / 253 Asesoramiento gentico / 256 Evolucin del concepto de asesoramiento gentico / 256 Modelo mdico - preventivo / 257 Modelo basado en la toma de decisiones (aos 60) / 258 Modelo psicoteraputico / 258 Definicin de asesoramiento gentico / 259 Objetivos del asesoramiento gentico / 260 Principales razones por las que se solicita asesoramiento gentico / 261 Principios del asesoramiento gentico / 261 Componentes bsicos del asesoramiento gentico / 261 Estimacin del riesgo / 263 Clasificacin del riesgo gentico / 265 Comunicacin / 271 Soporte o basamento del asesoramiento gentico / 272 Mtodos de acceso al feto / 273 Aspectos prcticos del asesoramiento gentico / 277 Aspectos psicolgicos del asesoramiento gentico / 280 Aspectos ticos del asesoramiento gentico y de la gentica mdica / 281 19. ANEMIA DE CLULAS FALCIFORMES: UN PROGRAMA DE NIVEL PRIMARIO DE ATENCIN / 284 Anemia A Hemates falciformes / 284 Resumen / 287 REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS / 288

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