LABORATRIO DE QUMICA (Q121)

TRABALHO PRTICO N. 6
DEPARTAMENTO DE QUMICA E BIOQUMICA

DETERMINAO ESPECTROFOTOMTRICA DE UM CORANTE ALIMENTAR

1. Introduo

A espectrofotometria de ultravioleta e visvel

A possibilidade de tomos e molculas sofrerem transies de estado por absoro de

radiao electromagntica em regies de comprimento de onda bem definidas est na base de vrios
tipos de tcnicas espectroscpicas, de enorme importncia em anlise qualitativa e quantitativa.
Neste trabalho ir ser utilizada a espectrofotometria de ultravioleta e visvel como tcnica analtica
quantitativa.
A absoro de radiao electromagntica por molculas conduz a vrios tipos de excitao,
tais como a excitao electrnica, vibracional e rotacional. Devido s diferentes energias que so
necessrias para os vrios tipos de transio envolvidos, existem vrios tipos de espectroscopia em
zonas caractersticas de comprimento de onda. A espectrofotometria em que se usa radiao na zona
de ultravioleta e visvel (UV-vis) uma das tcnicas mais vulgarmente utilizadas em anlise
quantitativa.
Num espectro de ultravioleta e visvel representa-se, normalmente, a absorvncia medida para
uma soluo em funo do comprimento de onda da radiao incidente. No caso da
espectrofotometria UV-vis, as bandas correspondentes absoro de radiao ocorrem a valores
caractersticos de comprimento de onda, correspondentes energia necessria para excitar os
electres de molculas ou ies, do estado fundamental ao primeiro estado electrnico excitado.
A lei de Beer-Lambert uma relao fundamental da espectrofotometria e estabelece a
existncia de uma relao linear entre a absorvncia de uma soluo e a concentrao de uma
espcie absorvente, de acordo com a expresso:

A=alc
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em que A representa a absorvncia medida, a representa a absortividade, l corresponde espessura

interna da clula (comprimento do percurso ptico) e c a concentrao da espcie absorvente.
Quando se exprime a concentrao em mol dm-3 (ou mol.L-1), a lei de Beer-Lambert
expressa na forma:

A=lc
em que se designa por absortividade molar. A absorvncia uma grandeza adimensional, como se
ver adiante a partir da definio de transmitncia e da relao desta com a absorvncia. Assim, as
unidades em que se exprime habitualmente a absortividade molar so mol-1 dm3 cm-1 (ou mol-1 L
cm-1).

Num espectrofotmetro, quando um feixe de radiao monocromtica de intensidade Io

incide sobre uma soluo contida num recipiente de faces transparentes, planas e paralelas, com um
percurso ptico l, uma fraco dessa radiao absorvida pela soluo, sendo a restante transmitida
(figura 1).

Figura 1 - Representao esquemtica do percurso da radiao electromagntica

num espectrofotmetro de ultravioleta-visvel.

A fraco da radiao incidente transmitida pela amostra designada por transmitncia, T:

T = I / Io
em que I representa a intensidade do feixe luminoso que, aps atravessar a soluo, chega ao
detector e Io a intensidade do feixe luminoso incidente.
A relao entre absorvncia, A, e transmitncia, T, a seguinte:

A = - log T = - log (I / Io)

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Nos espectrofotmetros modernos, as medies espectrofotomtricas podem ser expressas em

transmitncia, % de transmitncia, absorvncia ou concentrao. Para anlise quantitativa utiliza-se
a absorvncia, pois esta grandeza proporcional concentrao, conforme se viu anteriormente,
atravs da Lei de Beer-Lambert.
Geralmente, o valor de comprimento de onda seleccionado para a determinao de uma dada
espcie qumica absorvente corresponde ao mximo de absoro registado no espectro. Quando
possvel encontrar um valor de comprimento de onda a que somente uma espcie absorve, a
determinao quantitativa dessa espcie facilmente realizada usando, por exemplo, uma curva de
calibrao, em que se representa a absorvncia em funo da concentrao da espcie.

Os corantes alimentares

Os corantes alimentares so compostos que apresentam uma cor intensa e que so adicionados
aos alimentos no sentido de realar a sua colorao e torn-los mais agradveis vista.
A utilizao de corantes em alimentos encontra-se bem regulamentada e bastante restritiva.
Nos Estados Unidos da Amrica os corantes permitidos em alimentos apresentam a denominao
FD&C, correspondendo indicao de que so permitidos em alimentos (food, F), medicamentos
(drugs, D) e cosmticos (cosmetics, C). Na Europa, a denominao oficial menos intuitiva,
apresentando nomes do tipo E-xxx, idnticos aos apresentados por outros tipos de aditivos
alimentares. As listas de corantes permitidos nos alimentos so da responsabilidade de cada pas, o
que significa que em alguns casos existem diferenas de pas para pas.
O corante alimentar estudado neste trabalho o Ponceau 4R, o sal trissdico do cido E)-7hidroxi-8-((4-sulfonatonaftalen-1-il)diazenil)naftaleno-1,3-dissulfnico, cuja frmula molecular
C20H11N2O12S3Na3, e cuja frmula de estrutura se apresenta na figura 2.

Figura 2 - Frmula de estrutura do corante alimentar Ponceau 4R (nome comercial).

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2. Material e reagentes
Pipetas volumtricas de 1,00 a 10,00 cm3
Bales volumtricos de 50,00 cm3
Espectrofotmetro de UV-Vis
Corante alimentar Ponceau 4R

3. Realizao prtica

3.1 Preparao de solues padro do corante

Utilize a soluo padro fornecida (100 mg/dm3) para preparar, por diluio rigorosa (utilize
pipetas volumtricas de 1,00 a 10,00 cm3 e bales volumtricos de 50,00 cm3), 4 solues padro do
corante alimentar. Tenha em ateno que a absorvncia das solues padro preparadas deve estar
compreendida entre 0,1 e 0,9.

3.2 Anlise espectrofotomtrica

Na figura 3 representa-se o espectro na zona do visvel do corante Ponceau 4R, o corante
alimentar que se pretende determinar. Com base nessa figura seleccione o comprimento de onda
mais adequado para fazer a determinao espectrofotomtrica deste corante.

0,200
max= 505 nm
Abs
A

0
400

500

/
/ nm

600

700

nm
nmnm

Figura 3 - Espectro de absoro de uma soluo de Ponceau 4R, 2,00 mg/dm3.

nm

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a) Com gua desionizada na clula espectrofotomtrica, ajuste o valor da absorvncia para zero ao
comprimento de onda seleccionado.
b) Mea a absorvncia das solues padro preparadas, ao comprimento de onda seleccionado.
c) Mea a absorvncia da amostra fornecida, ao comprimento de onda seleccionado.
d) Construa a curva de calibrao com os dados obtidos em b) e determine a concentrao do
corante na amostra.

Bibliografia
M. Lurdes Gonalves, Mtodos Instrumentais para Anlise de Solues. Anlise Quantitativa, 4
ed. Fundao Calouste Gulbenkian, Lisboa, 2001.

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RELATRIO
TRABALHO PRTICO N. 6
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Relatrio TP6

Realizado em ...... / ...... / ......

Nome ....................................................................................................................................
Nome ....................................................................................................................................

Turma..........

DETERMINAO ESPECTROFOTOMTRICA DE UM CORANTE ALIMENTAR

1. Apresente os clculos efectuados para a preparao das solues padro de corante.

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2. Complete a tabela com os resultados obtidos.

Soluo

Concentrao / ..

Absorvncia

1
2
3
4
amostra

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3. Construa a curva de calibrao (grfico absorvncia vs. concentrao) com os dados da tabela.

4.

Com base no valor de absorvncia da amostra e nos parmetros da curva de calibrao (ajustada

por regresso linear), determine a concentrao do corante nessa amostra e a respectiva incerteza
associada.
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5. Sabendo que a espessura interna da clula 1,0 cm, estime o valor da absortividade molar, , do
corante.
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