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BACTRIOLOGIQUES
Cocci Gram positif Aro anarobie facultatif, non exigeant Catalase +, oxydase , , , Coagulase, dgradation du mannitol, novobiocine. Milieux slectifs: Chapman, Baird Parker
OBJECTIFS
A la fin de cet expos, l apprenant sera capable de raliser et d interpreter les rsultats d un antibiogramme de S.aureus
Pus divers Hmoculture Prlvements nasaux Prlvements cutans Urines LCR Aliments
DEROULEMENT
I-GENERALITES II-TECHNIQUES DE L ANTIBIOGRAMME III-INTERPRETATIONS
II-ANTIBIOTIQUES TESTER
Btalactamines:
Pnicilline G Oxacilline 5g
II-PHNOTYPES
Mcanisme
Phnotype sauvage Pnicillinase (rare) Modification de PLP2a gne mecA (cible)
BORSA Pase hyperproduite Souches borderline 7 MODSA Modif. PLP (non 2a) Absence de Pase
DE RSISTANCE AUX
BTALACTAMINES
Pnicilline G Pnicilline A Carbox/ Urido ATB + inhibiteur de Pnicilline M btalactamase Cphalosporines Carbapnmes
Aminosides:
Kanamycine Amikacine Gentamicine
S R R
S S R
S S R
S S R
Cefoxitine: pour rechercher la rsistance loxacilline Novobiocine: diagnostic Compos vibriostatique O129: diagnostic
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NORMES NCCLS)
ATTENTION:
PLP = enzymes de synthse constituants paroi,4 PLP chez S.aureus, si meti R ajout PLP2a faible affinit pour B lactamines Meti-R par modification PLP2a peut tre homogne ou hterogne ( sous-population dans zone inhibition) Meti-R
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Tests complmentaires Screening test loxacilline Recherche de la PLP2a Dtermination de la CMI Recherche de la pnicillinase: en cas de problme dinterprtation lATBgramme Recherche de la rsistance aux glycopeptides.
ATTENTION
Detection avec un disque de Peni G:
STAPHYLOCOQUES
ET BTALACTAMINES
-Absence de Pnicillinase si diamtre>30mm , et la bordure de la zone d inhibition est floue (zone fantme) -Presence de Pnicillinase si bordure nette avec colonies de grande taille en bordure ,quelque soit diamtre d inhibition (squater)
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RECHERCHE DE LA MTHICILLINO-RSISTANCE
Technique Test la cefoxitine (30g) Screening test MRSA
-Antibiogramme -MH -0,5 Mc Farland -MH 4% NaCl -Oxacilline 6g/ml -0 5 Mc Farland 0,5 -Ensemencement / spot -Agglutination
Contrle de qualit
S.aureus ATCC 25923
Observation
Normes NCCLS: : R si 19mm CASFM R si 25mm Culture= rsistant
S.aureus ATCC 29213 S.aureus ATCC 43300 S.aureus S aureus ATCC 43866 (Tmoins) Contrle selon Kit
II-STAPHYLOCOQUES
ET MACROLIDES
Technique rapide, recommande en cas de diagnostic durgence et ou dinfection grave. (tmoin) Technique de rfrence Obligatoire pour la confirmation des SCN MetiR. Trs sensible, rapide. Pas 13 toujours une expression phnotypique 16
Selon technique
MACROLIDES
SA (SB) S S S S R S (R) R S Pristina S S S S ? ? S/R S17
S R R S S S S R
Souche tester
Inactivation enzymatique
L LSa Sa
Efflux
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LSa E
Antagonisme (E-linco)
Souche MRSA +
Souche MRSA -
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18
DE
Rponse valable pour: pnicilline A, carboxy et urido-pnicilline Rsistance croise toutes les btalactamines Rponse valable pour lazithromycine Rponse valable pour la lincomycine * Rponse valable pour les synergistines Rsistance dexpression faible in vitro, tenir compte du diamtre de la kanamycine Rsistance croise tous les aminosides utiliss en thrapeutique Tout diamtre <17mm est une indication la CMI
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RCAPITULATIF
Mcanismes de rsistance (3)
STAPHYLOCOQUES
ET AMINOSIDES
Lecture interprtative
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Sauvage K KT KTG
S R R R
S S R R
S S S R
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Je vous remercie
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