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REVISTA BRASILEIRA DE CRIMINALSTICA, V. 1, N.

1, 2011

A Revista Brasileira de Criminalstica (RBC) surgiu do antigo anseio da comunidade de Peritos Criminais em ver a produo cientfica divulgada em revista especializada genuinamente brasileira. Mais recentemente, um grande grupo de Peritos Criminais tem se reunido virtualmente em um grupo de discusses on-line. Nesse frum, reacendeu a chama desse antigo desejo e Peritos de todos os recantos do Brasil se dispuseram a tirar a revista do campo das idias e a materializar a Revista Brasileira de Criminalstica. A Associao Brasileira de Criminalstica ABC, cumprindo o seu papel de instituio de nvel nacional, colheu a idia e patrocinou toda a estrutura. MISSO A Revista Brasileira de Criminalstica destina-se a publicao de artigos originais que contribuam para a promoo, a divulgao e o desenvolvimento cientfico e tecnolgico das cincias forenses, referentes aos resultados de pesquisas, avanos, projetos tcnico-cientficos e relatos de caso relacionados criminalstica, incluindo as interfaces com outros ramos da cincia, como Fsica, Qumica, Biologia, Odontologia, Farmacologia, Informtica, Contabilidade, Engenharias, entre outras.

ASSOCIAO BRASILEIRA DE CRIMINALSTICA Centro Comercial Sudoeste, CLSW 504, Bl. B, Sl. 155
Setor Sudoeste, Braslia - Distrito Federal CEP. 70.673-000 PRESIDENTE Iremar Paulino da Silva (IC/DF)

CORPO EDITORIAL ngela Tonietto (IC/GO) Bruno Telles (IC/DF) Charles Albert Andrade (IC/DF) Claudemir Rodrigues Dias Filho (IC/SP) Elvis Medeiros de Aquino (IC/SP) Juliano de Andrade Gomes (IC/DF) Maria Paula O. Valadares (IC/SP)

Associao Brasileira de Criminalstica Revista Brasileira de Criminalstica. Vol. 1, n. 1 (2011) / Associao Brasileira de Criminalstica, Braslia: ABC, 2011Iv, 46p.:il..; 29,7cm. Editores: ngela Tonietto; Bruno Telles; Charles Albert Andrade; Claudemir Rodrigues Dias Filho; Elvis Medeiros de Aquino; Juliano de Andrade Gomes; Maria Paula O. Valadares Peridico Cientfico, Associao Brasileira de Criminalstica, 2011 1. Criminalstica. 2. Medicina Legal. 3. Cincias Forenses. I. Tonietto, ngela. II. Telles, Bruno. III. Andrade, Charles Albert. IV. Dias Filho, Claudemir Rodrigues. V. Aquino, Elvis Medeiros de. VI. Gomes, Juliano de Andrade. VII. Valadares, Maria Paula O.. VIII. ABC PROJETO GRFICO Corpo editorial da RBC EDITORAO E DIAGRAMAO Corpo editorial da RBC A Revista Brasileira de Criminalstica uma publicao da ABC. Os artigos publicados na Revista so de inteira responsabilidade dos autores. Proibida a utilizao para fins comerciais de matria publicada. Incio de circulao: novembro de 2011. Periodicidade: semestral. Endereo eletrnico: http://www.rbc.org.br/ojs/ Revista Brasileira de Criminalstica, v. 1, n. 1, 2011.

REVISTA BRASILEIRA DE CRIMINALSTICA, V. 1, N.1, 2011

SuMRIO
Editorial........................................................................................................................................................................ 4 O nascimento da Revista Brasileira de Criminalstica ..................................................................................... 5 Artigos Cientficos ....................................................................................................................................................... 7 Incorporando graus de liberdade de rotao em modelo padro de acidente de trnsito modelo de espalhamento entre dois veculos F.H.S.O. Vieira ...................................................................................................................................... 8 Avaliao comparativa de teste imunocromatogrfico para identificao forense de sangue humano P. Longo; C.R. Dias Filho; M.P.O. Valadares; E.C. Alonso; S.P.S. Gonalves; E. Auler-Bittencourt ........................................................................................................................... 16 Espectroscopia Raman: um novo mtodo analtico para investigao forense em cruzamento de traos J.A. Gomes; M.S. Sercheli ................................................................................................................... 22 Valorao de danos nos casos de minerao de ferro no Brasil A. Tonietto; J.J.M.C. Silva................................................................................................................... 31 Efeito da escopolamina sobre o desenvolvimento de Chrysomya putoria (Diptera: Calliphoridae) e sua importncia para a estimativa do intervalo ps-morte P.J. Thyssen, M.D. Grella .................................................................................................................... 39 Resenhas .................................................................................................................................................................... 43 Percias em locais de morte violenta E. Cunico ............................................................................................................................................. 44 Medicina legal e criminalstica P.E.G. da Costa Filho.......................................................................................................................... 45

EDITORIAL

CORPO EDITORIAL DA RBC / REVISTA BRASILEIRA DE CRIMINALSTICA, V. 1, N.1, 5-6 (2011)

O nascimento da Revista Brasileira de Criminalstica


O argumento de que toda teoria cientfica conjectural e provisria coloca em xeque a idia de que a induo observacionista e o empirismo clssico explicitam uma verdade cientfica absoluta e imutvel. Esse pensamento, difundido na sociedade do sculo XX, alerta aqueles que lidam na interface entre as leis naturais e as leis dos homens, as leis jurdicas. Perito o nome dado a este profissional que, etimologicamente, equivale a aquele que sabe e, por este motivo, ocupa um nicho importante no meio judicial: o de auxiliar o julgador, observando, reportando e analisando a materialidade luz das cincias naturais. Em sendo a cincia dotada de verdades provisrias, que dizer do perito que no faz cincia? Do perito que permanece com aplicao de conceitos e teorias retrogradas? Que ainda usa da falcia do argumento de autoridade para justificar a aplicao de um conhecimento emprico s questes judiciais? Quando exposto da forma supra, projetamos, por nsia, tratar-se de um passado remoto, sem qualquer ligao concreta com o momento CSI do qual colhemos os frutos. Mas isso no verdade nem na ptria-me do CSI. um relatrio do National Academy of Sciences (academia nacional de cincias norte-americana) de 2009 reconheceu que muito das chamadas cincias forenses no lastreado em cincia slida, sem referncias mincia de uma experimentao rigorosa. As conseqncias so evidentes: um servio judicial prestado sociedade eivado de vcios e baseado em provas materiais cujas anlises so, no mnimo, questionveis sob a ptica cientfica. No Brasil, cada vez mais Peritos Criminais so importados das carreiras acadmicas. Acostumados a buscar informaes em peridicos cientficos, o cientista, quando se veste de Perito Criminal procede da mesma maneira. Afinal, o problema distinto, mas a cincia a mesma. Tal procedimento se justifica no apenas pela lgica em racionalizar um problema, mas tambm pela aplicao de um dos Princpios da Criminalstica Brasileira, o chamado Princpio da Anlise, enunciado de maneira que a anlise pericial deve sempre seguir o mtodo cientfico. Carente de um repositrio cientfico nacional, o perito brasileiro recorre a peridicos internacionais para dar suporte aos seus exames e as suas concluses. O problema que as particularidades nacionais, ou mesmo regionais, nem sempre convergem, e a aplicao de certos mtodos descritos em outros pases se torna controversa. Deste contexto, nasce a Revista Brasileira de Criminalstica (RBC): uma publicao peridica de um antigo anseio da comunidade de Peritos Criminais em ver a produo cientfica divulgada em revista especializada genuinamente brasileira. A RBC destina-se publicao de artigos que contribuam para a promoo, a divulgao e o desenvolvimento cientfico e tecnolgico das cincias forenses, referentes aos resultados de pesquisas, avanos, projetos tcnico-cientficos e relatos de caso relacionados criminalstica, incluindo as interfaces com outros ramos da cincia, como Fsica, Qumica, Biologia, Odontologia, Farmacologia, Informtica, Contabilidade, Engenharias, entre outras. A iniciativa, entretanto, explicita a dualidade da atividade pericial criminal nacional. Na prtica, o perito ora policial, ora cientista, mas muitas vezes est mais prximo da polcia que da academia. Talvez por isso so pouco freqentes as trocas de experincias e a difuso de mtodos cientificamente validados na comunidade de Peritos Criminais brasileiros. A RBC tambm almeja mudar esse quadro. No pode o perito deixar de lado a sua face cientfica, sem a qual perde robustez a prova material decorrente dos apontamentos periciais. Seus trabalhos cientficos devem ser publicados e divulgados a uma comunidade cientfica que se empenhar em discuti-los tecnicamente. A RBC a matriz nacional para tal. Outra conseqncia dessa argumentao que a publicao neste neonato peridico no deve se restringir a estudos de Perito Criminais. Acadmicos interessados em questes relacionadas s cincias forenses tambm contribuem para o desenvolvimento cientfico da percia brasileira e, portanto, so bem-vindos a submeter seus trabalhos.
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CORPO EDITORIAL DA RBC / REVISTA BRASILEIRA DE CRIMINALSTICA, V. 1, N.1, 5-6 (2011)

Com o apoio dos Peritos Criminais e da comunidade cientfica que orbita a criminalstica, a RBC se consolidar como um repositrio cientfico, de acesso gratuito a todos os interessados em cincias forenses no stio da revista: www.rbc.org.br/ojs. Como tal, fomentar o fortalecimento da percia brasileira, livre do empirismo clssico e independente de influncias falaciosas. Corpo Editorial da RBC ngela Tonietto (IC/GO) Bruno Telles (IC/DF) Charles Albert Andrade (IC/DF) Claudemir Rodrigues Dias Filho (IC/SP) Elvis Medeiros (IC/SP) Juliano de Andrade Gomes (IC/DF) Maria Paula Oliveira Valadares (IC/SP)

ARTIGOS CIENTFICOS

F.H.S.O. VIEIRA / REVISTA BRASILEIRA DE CRIMINALSTICA, V. 1, N.1, 8-15 (2011)

Incorporando graus de liberdade de rotao em modelo padro de acidente de trnsito modelo de espalhamento entre dois veculos
F.H.S.O. Vieira *
Instituto de Criminalstica, Superintendncia da Polcia Tcnico Cientfica do Estado de So Paulo, So Paulo (SP), Brasil *Endereo de e-mail para correspondncia: flavio.fhsov@policiacientifica.sp.gov.br. Recebido em 16/04/2011; Revisado em 31/07/2011; Aceito em 19/08/2011

RESuMO Neste trabalho apresentado de modo detalhado um modelo simples onde introduzido o grau de liberdade de rotao no espalhamento entre dois veculos, sendo o modelo padro apresentado em detalhes na referncia [3]. So adotadas aqui as mesmas aproximaes no rigorosas quanto a dissipao de energia e de momento no vrtice de interao entre os veculos, sendo este efeito desconsiderado. O objetivo principal o estabelecimento de um modelo terico com a incorporao de graus de liberdade de rotao, sem haver a pretenso da aplicao imediata dele em decorrncia das limitaes quanto informao de parmetros como o momento de inrcia, por exemplo. mostrado que a simples introduo da rotao acrescenta termos de contribuio nas velocidades iniciais dos veculos, porm uma discusso detalhada sobre este ganho deixada para trabalho futuro. Tal modelo aqui apresentado encontra-se em monografia de formao de curso da ACADEPOL / So Paulo do ano de 2006 de autoria do presente. Palavras-Chave: acidente, trnsito, rotaes, fsica, modelo. ABSTRACT This paper presents in detail a simple model where rotational degree of freedom is introduced in the scattering of two vehicles, being the classical model presented in detail in reference [3]. It is adopted here the same non rigorous approximations in relation to energy dissipation and momentum in the vertex of interaction among two vehicles, being disregarded this effect. The main objective is to establish a theoretical model with rotational degrees of freedom incorporation, without having the intention of its immediately application due to limitations regardless to parameters information, such as inertia momentum, for example. It is shown that the simple introduction of rotation add terms of contribution on vehicles initial speeds, but a detailed discussion of this gain is left for a future work. The model presented here is part of authors monograph in ACADEPOL Professional Course, So Paulo in 2006. Keywords: accident, traffic, rotational, physics, model.

1. INTRODuO Seria oportuno questionarmos se os modelos de pontos materiais usualmente empregados em clculos de acidentes de trnsito corresponderiam ao caso geral da realidade. A resposta negativa, pois tudo feito idealizando os veculos como pontos materiais, sendo eles descritos apenas pelas suas coordenadas no plano cartesiano (x, y), e suas interaes se resumindo a trocas de energia e momento linear entre si e o pavimento, o que acaba por esquecer que ambos os veculos so corpos materiais extensos e que, por isso, podem apresentar, alm do movimento de translao no plano, os movimentos intrnsecos de rotaes. Tecnicamente, diz-se que a dinmica completa do evento em duas dimenses requer dois graus de liberdade para descreverem a dinmica do centro de massa de um dos veculos coordenadas x e y e um grau de liberdade para descrever as rotaes em torno do centro de massa e do eixo perpendicular ao plano, passando por este ponto.

Cada grau de liberdade novo que acrescido a um modelo representa uma liberdade a mais para o sistema trocar energia e momento com os demais graus de liberdade. Na situao colocada de haver a possibilidade dos veculos girarem por exemplo, existir tanto o efeito de troca de parte da energia cintica translacional para energia cintica rotacional como tambm da transferncia de parte do momento linear para o momento angular. A desconsiderao deste simples fato acarreta uma estimativa de velocidade inicial de coliso subestimada, privilegiando desnecessariamente os condutores, uma vez que o efeito pode ser acrescido isso ser mostrado paulatinamente. 2. CONSTRuINDO O MODELO Assumindo que os dois veculos envolvidos no fenmeno sejam, em boa aproximao, corpos rgidos, ou seja, no sofrem deformaes aparentes de grande monta com a coliso; a aproximao dos corpos leva ao contato fsico entre eles, onde ocorre uma transferncia

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Figura 1. Zona de interao entre dois veculos; o primeiro contato entre os corpos provoca uma transferncia de energia e momento, sendo uma frao desse momento absorvida pelos corpos na forma de momento angular. Caso no houvesse esta absoro, a conservao do momento linear seria vlida, dada pela expresso:

de energia e momento linear. Contudo, como so corpos extensos, os momentos lineares comunicados num especfico brao de alavanca, em relao ao centro de massa, parcialmente absorvido em momento angular atravs da relao:

em que r representa o brao de alavanca e s a poro de momento linear absorvida durante a interao. Esta sistemtica est ilustrada na Fig.(1). Por conseqncia da transferncia de parte do momento linear para o momento angular, a lei da conservao do momento linear no mais verdadeira, ou seja, a soma dos momentos lineares do canal de sada no igual soma dos momentos lineares do canal de entrada, como mostra a equao:

de embates. Do modelo clssico [3], o clculo do momento linear de sada dos veculos da zona de interao conhecido e pode ser a alternativa procurada. Pois caso seja possvel a realizao de um clculo da frao absorvida do momento linear, pode-se reconstruir a soma vetorial e, assim, obter o momento linear total resultante na interao, recuperando a conservao do momento linear novamente. De fato, algo do tipo pode ser feito; basta notar a ntima relao existente entre toda a energia dissipada na rotao do corpo atravs do atrito dos pneus com o pavimento e a energia de rotao presente no corpo. A energia de rotao de um corpo conhecida e dada por:

com I representando o momento de inrcia. O momento angular escrito em funo de expresso como: um reflexo dessa diminuio de momento linear no sistema a diminuio da abertura do ngulo do canal de sada, como est esquematizado na Fig.(1). Outro reflexo marcante que, como os veculos adquirem momento angular e, portanto, rotao, eles esto com seu eixo antero-posterior desalinhado em relao trajetria retilnea descrita pelo seu centro de massa, conforme ilustrado tambm pela Fig.(1). Este ltimo efeito torna-se bastante delicado do ponto de vista da percia de acidente de trnsito, pois o perito, desconhecendo, no local, a zona de interao, se extrapolar a direo dos eixos antero-posteriores dos veculos buscando o stio da coliso para aplicar aquele modelo clssico [3], incorrer numa falsa determinao dele e, com isso, em vrios erros, acarretando um trabalho final digno de questionamentos e anlises de erros. uma alternativa deve ser buscada para resolver o problema de transferncia de momento linear, nascido na zona de interao, para a construo de um novo modelo

. Sendo to somente a poro absorvida para provocar rotao, o mdulo do momento angular , ento, escrito como . Desse modo, assumindo que toda a energia de rotao adquirida pelo veculo no instante do embate tenha sido comunicada instantaneamente a ele, a expresso da energia ser:

E=

r 2s2 2I .

E dissipar completamente atravs do trabalho feito pela fora de atrito do pavimento com os pneus. O clculo desta dissipao deve ser feito com certo cuidado e ateno, pois o movimento giratrio feito em torno do centro de massa e, no geral, este no se

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encontra eqidistante dos eixos das rodas. Isso est bem ilustrado na Fig.(2). Da esttica do veculo, a soma das componentes nos eixos igual ao peso total e a resultante dos torques nula, ou seja,

Tal sistema fornece como resultado para cada eixo as seguintes relaes:

Com elas resta, finalmente, efetuar o clculo da energia dissipada pela fora de atrito em cada eixo quando o veculo girado de um ngulo , assim

uma vez encontrado o mdulo do vetor , devem ser analisados tambm qual sua direo e sentido para que seja posteriormente decomposto de forma correta no sistema de coordenadas. Isto bastante simples, pois a direo do vetor no pode ser outra seno aquela perpendicular direo de incidncia do veculo na zona de interao, uma vez que ele o responsvel pela mudana desta direo. J o sentido corresponde quele compatvel com o movimento giratrio executado pelo corpo. Como o esquema apresentado pela Fig.(3) deixa claro. Recuperada a conservao do momento linear no exato instante da interao entre os dois veculos, pelo conhecimento de , pode-se proceder mesma sistemtica realizada na referncia [3], realizando a conexo entre as velocidades de entrada com as velocidades de sada da zona de interao, ou seja, desenvolver a expresso: .

onde corresponde fora de atrito sobre o eixo i e T o coeficiente de atrito transversal entre o pavimento e o pneu, o qual no corresponde, a priori, ao coeficiente de atrito longitudinal comumente empregado nos clculos usuais em acidentes de trnsito, uma vez que este valor dependente das caractersticas do pneu usado sobre um especfico pavimento estando nisto os parmetros geomtricos do tamanho do pneu, superfcie de contato e os desenhos dos sulcos nesta, elementos que diferem com a alterao do eixo de deslocamento , por esse motivo a diferena ser mantida no desenvolvimento do modelo, j que a igualdade no pode ser assegurada de antemo. Igualando a energia total de rotao dissipada com esta ltima expresso, obtm-se o valor procurado do momento linear absorvido na zona de interao, sendo ele:

3. INSERINDO ROTAES NA COLISO Antes do desenvolvimento do modelo fsico de embate com efeitos de rotao, seria oportuna a dedicao ao entendimento do fenmeno. Conforme apresentado na Fig.(4), o fenmeno est dividido em trs regies bem distintas, sendo a primeira aquela onde os veculos com as rodas travadas convergem ao stio de coliso, imprimindo marcas retilneas de frenagem de comprimento l no pavimento, que possibilitam estimar a velocidade inicial antes do travamento das rodas atravs da relao:

Figura 2. O centro de massa dos veculos no se encontra eqidistante dos eixos das rodas, acarretando uma distribuio de peso diferente para cada eixo.

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ngulo de incidnc ia

Figura 3. Esquema da direo e sentido do vetor

em relao ao ngulo de incidncia do veculo na zona de interao.

Veculo 1

Veculo 2

2
Marc as de frenagem d as bandas traseiras; Marc as de frenagem d as bandas dianteiras; T rajetria do centro de m assa do vec ulo;
Figura 4. Ilustrao do embate entre dois veculos considerando-se os efeitos de rotao. A maior diferenciao em relao ao modelo clssico sem rotao so as marcas curvas de frenagem encontradas na terceira regio. Nos extremos superior e inferior mostrada a variao angular sofrida pelo eixo antero-posterior entre o fim e o incio do fenmeno.

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Em seguida, na segunda regio, os dois veculos adentram no stio onde ambos trocam entre si energia e momentos de acordo com tudo aquilo discutido na seo 2. Por fim, ambos seguem para a terceira e ltima regio, com uma composio de dois tipos de movimento: um sendo a translao retilnea do centro de massa, e, o outro, a rotao em torno do centro de massa. Tal composio de movimentos promover impresses no retilneas de marcas de frenagem no pavimento, havendo inclusive um entrelaamento entre elas ou mesmo marcas de derrapagem, cabendo ao perito prestar muita ateno a este fato. Isto porque no ser mais o comprimento destas marcas pneumticas usado nos clculos, mas sim o comprimento retilneo entre o

centro de massa do veculo e o stio de coliso; sendo este ltimo comprimento bem menor do que aquele outro, uma vez ser somente considerada a frenagem da translao do centro de massa do corpo. uma observao muito importante a se fazer entre este novo modelo e o clssico, onde se olha para os veculos como pontos materiais, que mesmo nas situaes onde no haja marcas de frenagem curvilneas na regio III, ou canal de sada, ainda assim ter ocorrido uma rotao do corpo uma vez que a direo de incidncia do eixo antero-posterior diferente da direo encontrada no canal de sada; havendo ai uma clara rotao do corpo. Enfim, em qualquer embate real haver necessariamente um efeito de rotao.

A discusso do novo modelo se inicia pela zona de interao com a aplicao da equao de conservao do momento linear, ou seja, ; que escrita no sistema de coordenadas imposto na Fig.(4), leva ao par de equaes:

que, devidamente solucionadas, encaminha ao seguinte resultado:

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Assim, as duas equaes podem ser 0escritas em apenas uma, desde que os ngulos de incidncia e escape sejam reescritos segundo a nomenclatura i e i , respectivamente, para i = 1,2 . Desse modo tem-se:

para i,j=1,2. O valor da velocidade u i pode ser determinado conhecendo o deslocamento retilneo i efetuado pelo centro de massa do veculo i do centro do stio da coliso at o ponto de imobilizao. Vale frisar novamente que este deslocamento no corresponde ao comprimento da marca de frenagem do canal de sada. Isto to somente acontece se a marca de frenagem for uma reta e s. A equao que fornece o resultado ento: Existindo como comentado no incio uma contribuio positiva para as velocidades inicias com os termos que carregam o momento de inrcia dos veculos, o resultado clssico [3] obtido fazendo os momentos de inrcia iguais a zero. 4. MTODOS DE AFERIO DE PARMETROS um conjunto para ser discutido aquele assim chamado de conjunto estrutural, uma vez que ele envolve parmetros da estrutura do veculo, quais sejam: distncia do eixo do embate at o centro de massa ri e distncia do eixo de rolamento frontal e posterior ao centro de massa do veculo a e b , respectivamente , conforme ilustra a Fig.(5). A determinao das variveis do conjunto estrutural est associada determinao de uma grandeza no tatevel ou visvel no corpo do veculo, chamada de centro de massa, e, por isso, no pode ser feita no local da ocorrncia, pois requer uso de instrumental no disponvel ao perito no local. O procedimento mais simples para esta determinao envolve a necessidade de uma balana para que a fora em cada um dos eixos de rolamento seja determinada F 1 e F2 , conforme mostrado na Fig.(2), considerando nesta medio no s a massa do

ui = 2 i g i .
De modo semelhante, procede-se para a obteno 0 da velocidade inicial Vi a partir da velocidade Vi f e do deslocamento do centro de massa i no canal de entrada do veculo i, que coincide com as marcas de frenagem; sendo o resultado apresentado igual a
2 Vi 0 = Vi f + 2 i g i .

A reunio destas trs ltimas equaes fornece o resultado procurado para a descrio de uma coliso entre dois veculos num plano levando em considerao o efeito de rotao, sendo ele:

para i,j=1,2.

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Figura 5. Disposio das grandezas do conjunto estrutural, medidas em relao ao centro de massa do veculo.

veculo como tambm as massas distribudas em seu interior na devida posio onde se encontravam quando da coliso, seja massa humana condutor e passageiros ou no bagagens diversas , uma vez que tudo isso influi na posio do centro de massa do corpo. Desse modo, F1 e F2 so as foras aplicadas sobre o eixo de rolamento anterior e posterior, respectivamente, de acordo com a Fig.(2), assim como a e b so as distncias de ambos os eixos ao centro de massa e, por fim, e a distncia entre os dois eixos de rolamento, ou seja, e = a + b . Como as expresses numricas para as foras nos eixos so conhecidas, facilmente derivam-se os resultados para a e b em funo delas e o parmetro e , sendo eles:

a=

e e b= F F 1+ 1 1+ 2 F2 e F1 .

Determinada a posio do centro de massa, a diferena encontrada do eixo de embate at ele representa o valor da varivel ri . Encerrando, com isso, as variveis do conjunto estrutural. A importncia da distribuio real de massas no veculo quando da coliso para o problema deve ser salientada, pois, sem esta considerao, tem-se uma determinao com margem de erro significativa do centro de massa e, assim, por consequncia, de todas as variveis do conjunto estrutural. Resta a discusso a respeito dos momentos de inrcia I i dos veculos. Infelizmente a indstria automobilstica, brasileira e internacional, no dispe de tabelas informativas sobre o valor numrico desta grandeza para os seus modelos, pelo menos para o conhecimento do presente autor. Os projetistas de veculos atm-se somente

preocupao de manter seus projetos estveis quando em situaes extremas de testes como aderncia e equilbrio dos veculos em curvas a velocidades limites para deslizamento e a segurana dos passageiros em acidentes de coliso frontal , esquecendo-se quase por completo da dinmica desenvolvida pelo corpo quando num acidente face aos seus vrios graus de liberdade rotacionais e vibracionais. Em inmeros tratamentos que sejam realizados visando a incorporao de graus de liberdade de rotaes, a necessidade do conhecimento do momento de inrcia se far presente; isto porque ele est para as rotaes assim como a massa est para as translaes. Portanto, embora neste trabalho no seja apresentada uma discusso a respeito da sua relevncia dentro da dinmica de rotaes, nem estratgias de estimativas especficas apresentadas para burlarem o seu desconhecimento, tudo isso no implica na impossibilidade de faz-lo, apenas que o papel do momento de inrcia necessita ser mais discutido e modelos serem propostos, inclusive despertando ateno da indstria automobilstica para a aferio deste parmetro fsico de seus veculos. 5. CONCLuSES Neste trabalho foi apresentado um modelo com a introduo de graus de liberdade de rotao a um clssico modelo de clculo em acidentes de trnsito, no sendo levado em considerao efeitos dissipativos no vrtice de interao, como comumente considerado; ilustrando o aparecimento de termos adicionais no valor das velocidades iniciais dos veculos, estando eles relacionados com o acrscimo de um grau a mais de liberdade para o armazenamento e troca de momento e energia. Fica assim ilustrado como o procedimento de se conceber estrutura aos objetos envolvidos no clculo tambm concebe aumento nos valores e padres de energia cintica inicial dos processos.

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Em trabalho futuro ser apresentada discusso detalhada a respeito do ganho conferido pela introduo da rotao e o papel das variveis envolvidas com base na expresso final obtida, tratando de um estudo matemtico. Por hora, as questes relativas ao desconhecimento dos parmetros momento de inrcia e do coeficiente de atrito transversal so deixadas em aberto pelo presente autor e sugeridas como matrias para outros trabalhos. AGRADECIMENTOS Sinceros agradecimentos s pessoas do Dr. Adilson Pereira e do Dr. Oswaldo Negrine, pelas revises realizadas no trabalho inicial no ano de 2006; bem como

ao referee, pelas sugestes apresentadas, possibilitando uma orientao mais objetiva do contedo aqui exposto e explicitando mais temas para motivao de trabalhos futuros. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS [1] R.F. Arago. Acidentes de Trnsito, aspectos tcnicos e jurdicos. 3 Edio. Millennium, Brasil (2003) 408p. [2], J.B. Marion; S.T Thornton. Classical Dynamics of particles and systems. 5 Edio. Brooks Cole Thomson Learning, Estados unidos (2004) 672p. [3] O. Negrine Neto; R. Kleinbing. Dinmica dos acidentes de trnsito, anlises, reconstrues e preveno. 2 Edio. Millennium, Brasil (2006) 264p.

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P. LONgO / REVISTA BRASILEIRA DE CRIMINALSTICA, V. 1, N.1, 16-21 (2011)

Avaliao comparativa de teste imunocromatogrfico para identificao forense de sangue humano


P. Longo a; C.R. Dias Filho b; M.P.O. Valadares c; E.C. Alonso d; S.P.S. Gonalves e; E. Auler-Bittencourt e,*
a b

Perito Criminal Ncleo de Percias Criminalsticas de Araraquara (Instituto de Criminalstica de So Paulo), Brasil Perito Criminal Equipe de Percias Criminalsticas de Americana (Instituto de Criminalstica de So Paulo , Brasil c Perito Criminal Ncleo de Percias em Crimes Contra a Pessoa (Instituto de Criminalstica de So Paulo), Brasil d Graduando em Cincias Biolgicas do Instituto de Biocincias (Universidade de So Paulo), Brasil e Perito Criminal Ncleo de Biologia e Bioqumica (Instituto de Criminalstica de So Paulo), Brasil Endereo de e-mail para correspondncia: eloisa.eaab@policiacientifica.sp.gov.br Recebido em 20/04/2011; Revisado em 23/08/2011; Aceito em 08/09/2011

RESuMO A determinao de especificidade humana pode indicar a presena de sangue humano, mesmo em amostras antigas provindas de investigaes criminais, contaminadas ou em estado de putrefao. O presente estudo visa analisar se h concordncia entre os resultados obtidos pelos testes de orientao e especfico para sangue humano utilizados rotineiramente na anlise forense em comparao com o teste imunocromatogrfico para deteco da hemoglobina humana. O resultado alcanado por meio do anticorpo anti-hemoglobina humana mostrou-se eficiente na deteco qualitativa de hemoglobina humana em amostras de sangue depositadas em peas e locais de crime. Palavras-chave: identificao de sangue; teste imunocromatogrfico; amostras biologicas; identificaes criminais; biologia forense. ABSTRACT The determination of human specificity may indicate the presence of human blood, even in ancient samples originated from criminal investigations, contaminated or in a state of putrefaction. This study aims to examine whether there is consistency between the results obtained by guidance and specific human blood tests used routinely in forensic analysis in comparison with the immuno-chromatographic test for human hemoglobin detection. The diagnosis using antibody anti-human hemoglobin has been shown to be effective in the qualitative detection of human hemoglobin in blood stains in crime related objects and at crime scenes. Keywords: blood identification; immuno-chromatographic test; biological samples; criminal investigations; forensic biology.

1. INTRODuO A identificao de sangue e de sua origem humana em amostras provindas de investigaes criminais no Estado de So Paulo tem sido realizada nos laboratrios do Ncleo de Biologia e Bioqumica (NBB) do Instituto de Criminalstica (IC) atravs dos mtodos baseados no reagente Kastle-Meyer (para ensaios presuntivos) e no teste indireto de Coombs (para determinao de especificidade humana). Alguns laboratrios policiais da Alemanha e da Sua utilizam o teste imunocromatogrfico para identificao de sangue humano. Esses testes se utilizam de anticorpo anti-hemoglobina humana que aplicados em amostras de material biolgico obtidas em investigao criminal podem indicar a presena de sangue humano, mesmo em amostras antigas, contaminadas ou em estado de putrefao [1]. Assim, esses testes tm se mostrado eficazes e robustos, com grande aplicao percia criminal.

Baseado no diagnstico por meio do anticorpo anti-hemoglobina humana, o Feca-Cult One Step Teste [2] um teste imunocromatogrfico em forma de tira ou dispositivo (Fig.(1)), originalmente desenvolvido para a deteco de hemoglobina humana em fezes. A interpretao do resultado rpida, por meio da presena de cor em regies especficas da tira. Sua utilizao forense foi posteriormente adaptada por Hochmeister et al. [1]. O presente estudo visa analisar se h concordncia entre os resultados obtidos pelos testes Kastle-Meyer, Coombs e o Feca-Cult para constatao da presena de sangue humano em peas criminais. Busca tambm comparar a sensibilidade da determinao de sangue humano em amostras diludas empregando-se os testes Coombs e Feca-Cult; e avaliar se h influncia da oxidao de materiais que constituem as peas de exames sobre o resultado destes testes.

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2.3. Procedimento de coleta de amostras As amostras para teste com o Feca-Cult foram obtidas utilizando-se trs procedimentos, denominados A, B e C, de acordo com os parmetros estabelecidos, concentrao e quantidade da amostra. O procedimento A foi utilizado com amostras mais concentradas e em maior quantidade e consistiu em esfregar a parte estriada da haste do aplicador (Fig.(3)) sobre a mancha (Fig.(4)) e introduzir no tubo coletor, agitando o tubo vigorosamente, de maneira a assegurar uma boa difuso e homogeneizao da soluo. Os procedimentos B e C foram utilizados com amostras menos concentradas e em menor quantidade. B consistiu em recortar um fragmento da amostra e introduzir no orifcio do tubo coletor para a extrao do material com a soluo (Fig. (5)). Em C, um pedao da amostra colocado em um tubo de ensaio junto com o contedo de soluo de 1 tubo coletor (Fig.(6)). O tubo agitado e deixa-se extraindo por alguns segundos.

Figura 1. esquerda, formas de apresentao do Kit Feca-Cult, tira (superior) ou dispositivo (inferior). direita, tubo coletor contendo suspenso de protena e conservantes.

2. MATERIAL E MTODO 2.1. Material Os testes foram realizados com o kit Feca-Cult One Step Teste, na forma de tira, produzido por Alamar Tecno Cientfica Ltda. O kit fornecido (Fig.(1)) contm tiras de teste com reagentes imobilizados em uma membrana em uma protena matriz com azida sdica e tubos coletores contendo uma suspenso de protena e conservantes [2]. 2.2. Princpio do teste imunocromatogrfico A tira do teste contm uma membrana primpregnada com anticorpo monoclonal anti-hemoglobina humana, na rea da linha teste, e anticorpo de cabra anticamundongo, na rea da linha controle. uma almofada com anticorpo policlonal anti-hemoglobina humanaconjugado de ouro coloidal colocado no final da membrana, na rea de aplicao da amostra. Quando a hemoglobina humana estiver presente na amostra dissolvida na suspenso de protenas e conservantes, a mistura do conjugado ouro coloidal e a amostra extrada movem-se ao longo da membrana cromatograficamente por ao de capilaridade. Esta mistura, ento, migra para a rea da linha teste e forma uma linha visvel com o complexo de anticorpos com a hemoglobina humana. Na ausncia da hemoglobina humana na amostra extrada, no h formao de nenhuma faixa de cor visvel na rea da linha teste. Portanto, a presena de uma faixa de cor na rea da linha teste indica um resultado positivo (Fig. (2)). uma faixa colorida dever sempre aparecer na rea da linha controle para validao do teste [2], [3].

Figura 3. Ilustrao do tubo coletor do Feca-Cult, contendo uma haste aplicadora imersa em suspenso de protenas e conservantes [2].

Aps a extrao das amostras em A e B, a extremidade do tubo coletor foi rompida e foram dispensadas 3 gotas na extremidade absorvente da tira (Fig.(7)). No procedimento C, a soluo da amostra extrada no tubo de ensaio foi gotejada 3 vezes sobre a extremidade absorvente da tira com o auxlio de uma pipeta. O resultado foi lido em 5 minutos.

Figura 2. Interpretao do teste. A presena da linha controle (C) indica a validade do teste; a reao colorimtrica na linha teste (T) revela resultado positivo para sangue humano.

Figura 4. Procedimento A: esfrega-se a parte estriada da haste do aplicador sobre a mancha

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Figura 5. Procedimento B: introduz-se um fragmento da amostra pelo orifcio do tubo coletor

Figura 6. Procedimento C: um pedao da amostra colocado em um tubo de ensaio junto com o contedo de soluo de 1 tubo coletor.

com o teste de Kastle-Meyer, foram tambm analisadas pelo teste de Coombs [3]. O teste sorolgico de Coombs ou Teste da Antiglobulina Humana identifica a presena de uma protena presente no soro do sangue humano na superfcie dos glbulos vermelhos, a globulina. Esse teste detecta anticorpos incompletos de grupos sanguneos no soro (teste indireto da antiglobulina). Anticorpos incompletos so aqueles que falham em aglutinar glbulos vermelhos suspensos em salina. Na reao da antiglobulina, glbulos vermelhos envolvidos com anticorpos incompletos, como anti-Rh IgG, so aglutinados por anti-IgG, o qual liga as molculas de IgG atravs de pontes aos glbulos vermelhos vizinhos. O fundamento do mtodo que a globulina humana inibe a atividade do soro antiglobulina humano, o qual perde a capacidade de aglutinar glbulos vermelhos sensibilizados por anticorpos incompletos. Se uma mancha de sangue contm globulinas do soro humano e incubada com anti-soro globulina humano, essas globulinas neutralizam o anti-soro e quando so adicionadas clulas O Rho(D) (fornecidas no kit do teste sorolgico de Coombs) sensibilizadas com anticorpos incompletos, nenhuma aglutinao ocorre, sendo a mancha de sangue, portanto, de origem humana. A formao de aglutinao significa que a mancha de sangue no contm globulina humana e que o antisoro globulina humano ficou livre para formar pontes, aglutinando os glbulos vermelhos sensibilizados. A sensibilidade do teste da ordem de 1:50.000 [3]. 2.5 Avaliao da sensibilidade dos testes para deteco de sangue humano 2.5.1 Coleta do material para determinao de sensibilidade dos testes

Figura 7. Aps macerada a amostra nos procedimentos, dispensam-se 3 gotas na extremidade absorvente da tira.

2.4. Testes de identificao de sangue e de especificidade humana A hemoglobina uma protena conjugada que est presente nos glbulos vermelhos do sangue e tem papel fundamental nesses testes. constituda pela protena globina e pelo grupo heme [3]. O reagente de Kastle-Meyer funciona como indicador aps a adio de perxido de hidrognio amostra em soluo fisiolgica. O teste baseado na atividade cataltica do heme da hemoglobina que atua sobre o perxido e libera oxignio que oxida o indicador do reagente, fenolftalena, dando colorao rosa soluo. O teste pode fornecer resultados falso-positivos com outras substncias, mas reaes negativas so prova da ausncia ou de quantidades no detectveis de heme [3]. Os trabalhos consultados apresentaram diferentes sensibilidades para o reagente: 1:1.000 e 1:1.000.000 [3], [4]. No presente trabalho, apenas as amostras positivas

Foram coletados 5 mL de sangue humano por puno venosa para serem empregados nas diluies, com especial ateno para a medio dos volumes empregados nos procedimentos antes da coagulao 2.5.2 Diluentes empregados As seqncias de diluio foram efetuadas distintamente com gua destilada, soluo fisiolgica (NaCl 0,9 %) e soluo salina tamponada do tubo coletor do Feca-Cult. 2.5.3 Mtodo empregado Foi transferido 1 mL de sangue humano in natura para cada um dos trs recipientes contendo os diluentes especificados temperatura ambiente, a partir dos quais foram efetuadas as diluies de 1:1.000, 1:2.000, 1:3.000, 1:4.000, 1:5.000, 1:6.000, 1:7.000, 1:14.000, 1:28.000, 1:56.000, 1:112.000, 1:224.000, 1:448.000, 1:500.000, 1:896.000 e 1:1.000.000. O teste de Coombs foi aplicado para as diluies de 1:1.000 a 1:7.000, enquanto o Feca-

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Cult foi aplicado em todas as diluies. 2.6 Avaliao da influncia de oxidao de peas sobre o resultado dos testes de Coombs e Feca-Cult Foram analisadas lminas de ao oxidadas e no oxidadas encaminhadas ao Ncleo de Percias Criminalsticas (NPC) de Araraquara para pesquisa de sangue humano, comparando-se os resultados dos testes de Coombs e Feca-Cult. 3. RESuLTADOS E DISCuSSO 3.1. Procedimento de coleta de amostras um total de 130 amostras foram analisadas atravs dos procedimentos A, B e C. O procedimento A mostrou-se prtico, porm bastante limitado. Pde ser usado quando houve manchas hematides concentradas em objetos rgidos, tais como faca, de modo que a substncia hemtica se aderia facilmente s estrias da haste do tubo coletor. Foi utilizado em 12 amostras (9,23%) dos testes. J o procedimento B se mostrou pouco prtico, devido ao orifcio do tubo coletor possuir dimetro de cerca de 2 mm, o que dificulta a insero de um fragmento de amostra maior; sendo utilizado em apenas 15 amostras (11,54%) dos testes. O procedimento C apresentou-se relativamente prtico e serviu para qualquer concentrao de amostra. Foi o mais utilizado, sendo empregado em 103 amostras (79,23%). 3.2. Comparao entre os testes de Kastle-Meyer, de Coombs e Feca-Cult A Tabela (1) expressa os resultados dos testes de Coombs e Feca-Cult. Os resultados para Coombs/ Feca-Cult +/+, NR/- e -/-, que equivalem a 95,4% dos resultados, indicaram concordncia entre os testes.
Tabela 1. Resultado dos testes de Kastle-Meyer, de Coombs e FecaCult das amostras analisadas (n=130). Kastle-Meyer + + + Coombs + NR -* Feca-Cult + + + No de amostra 86 (66,2%) 30 (32,1%) 8 (6,2%) 5 (3,8%) 1 (0,8%)

as amostras que tiveram resultados divergentes entre o Feca-Cult e o Coombs foram obtidas de peas com substncia hematide em baixa quantidade, o que pode ter sido detectado pelos testes de Kastle-Meyer e FecaCult, mas no pelo teste de Coombs, devido a sua menor sensibilidade. O resultado negativo para o mtodo de KastleMeyer foi obtido em apenas uma amostra de uma faca que particularmente se encontrava em estado avanado de oxidao. O resultado positivo para o Feca-Cult indicou presena de hemoglobina humana [2]. No entanto, o mtodo de Kastle-Meyer, que resulta positivo quando da presena de hemoglobina [4], no constatou a presena de sangue. Essa divergncia pode ser explicada pela sensibilidade varivel do reagente de Kastle-Meyer. Diferentes sensibilidades para o mtodo foram citadas por diferentes autores, diferindo em at mil vezes [3], [4]. Assim, o reagente de Kastle-Meyer pode ter sensibilidade inferior quela atribuda ao FecaCult. Outra possibilidade seria de que o elevado grau de oxidao da pea pode ter suprimido a capacidade da hemoglobina de reduzir o perxido de hidrognio no mtodo de Kastle-Meyer. O teste de Coombs foi excepcionalmente realizado nessa amostra negativa para sangue genrico, mas resultou negativo, o que era esperado devido sua menor sensibilidade quando comparado ao Kastle-Meyer. 3.3. Comparao da sensibilidade dos testes de deteco de sangue humano Os resultados obtidos, conforme cada concentrao e os diluentes empregados encontram-se nas Tab.(2) e (3). Os resultados expostos na Tab.(2), ilustrados da Fig.(8), apontaram a deteco de sangue humano nas solues de concentrao at 1/4.000 empregandose o teste de Coombs, tendo-se como solvente a soluo fisiolgica e a soluo salina tamponada. Para as concentraes de sangue de 1/5.000 a 1/7.000, os resultados foram negativos, observando-se no microscpio ptico as aglutinaes caractersticas destes resultados negativos. Para as amostras diludas em gua destilada, todos os tubos apresentaram aglutinaes, caracterizando os resultados negativos para o mtodo sorolgico empregado. Assim, para as concentraes diludas de sangue humano, a hemlise das hemcias, ocasionada pela gua destilada, impossibilitou sua aglutinao, gerando resultados falso-negativos em concentraes que deveriam ser detectadas pelo mtodo sorolgico. Portanto, para que haja a preservao do sangue, a coleta das amostras em locais de crime deve ser efetuada com soluo fisiolgica ou salina tamponada. O teste Feca-Cult apontou resultados positivos nas concentraes de 1/5.000 a 1/7.000, no detectadas pelo mtodo sorolgico, evidenciando sua maior sensibilidade (Fig.(8)).

(+) positivo; (-) negativo; (NR) no realizado * realizado na tentativa de se esclarecer o resultado divergente.

Apenas 6 (4,6%) amostras indicaram divergncia entre Coombs e o Feca-Cult. Testes imunocromatogrficos para especificidade humana, como o Feca-Cult, apresentam resultado positivo para sangue total diludo at 1:1.000.000. No teste de Coombs, resultados positivos so obtidos com sangue total diludo at 1:50.000 [3]. Logo, o Feca-Cult vinte vezes mais sensvel que o teste de Coombs na identificao de sangue humano. Todas

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Tabela 2. Resultados da deteco de sangue humano empregando-se como diluente gua destilada, soluo fisiolgica e salina tamponada, comparando-se os testes de Coombs e Feca-Cult. Concentrao 1/1000 1/2000 1/3000 1/4000 1/5000 1/6000 1/7000 (+) positivo; (-) negativo. gua destilada Coombs Feca- Cult + + + + + + + Soluo Fisiolgica Coombs + + + + Feca- Cult + + + + + + + Salina Tamponada Coombs + + + + Feca- Cult + + + + + + +

resultados tambm foram observados nas amostras diludas com soluo salina tamponada fornecida com o kit. Ressalta-se que a faixa positiva da membrana revelou-se mais intensa na diluio empregando-se a salina em comparao soluo fisiolgica (Fig.(9)).

Figura 8. Ilustrao dos resultados positivos apontados na Tab.(2) obtidos pelo mtodo de membrana reativa Feca-Cult. Da esquerda para a direita, os resultados referem-se s concentraes de 1/1.000 a 1/7.000.

Na Tabela (3), foram apontados os resultados provenientes do mtodo Feca-Cult para concentraes acima de 7.000 vezes de diluio. Os resultados obtidos apontaram para a deteco de sangue humano em concentraes extremamente reduzidas quando comparados aos resultados obtidos pelo mtodo sorolgico atualmente empregado pelos Ncleos de Percias Criminalsticas.
Tabela 3. Resultados da deteco de sangue humano em diferentes diluentes e concentraes: gua destilada, soluo fisiolgica e salina tamponada, empregando-se o Feca-Cult. Concent. Feca- Cult Soluo fisiolgica + + + + + + + Salina tamponada + + + + + + + -

Figura 9. Membranas reativas Feca-Cult resultantes da anlise de solues de sangue humano com concentrao de 1/500.000, diludas em gua destilada (1), soluo fisiolgica (2) e soluo salina tamponada (3).

gua destilada

1/14.000 + 1/28.000 + 1/56.000 + 1/112.000 + 1/224.000 + 1/448.000 + 1/500.000 + 1/896.000 + 1/1.000.000 + (+) positivo; (-) negativo.

Os melhores resultados foram obtidos nas leituras das membranas reativas efetuadas com as amostras diludas em gua destilada, onde se obteve resultado positivo para sangue humano na concentrao de 1/1.000.000. A lise das hemcias pela gua destilada pode ter auxiliado na deteco de sangue humano em concentraes abaixo de 1:500.000, disponibilizando mais hemoglobina na soluo devido ruptura dos eritrcitos, quando comparada com as solues contendo hemoglobinas ntegras das diluies efetuadas com as outras duas solues testadas. Conforme Fig.(10), nota-se que a intensidade das coloraes da fita teste muito semelhante para todos os solventes utilizados na diluio, ainda que a concentrao da soluo com gua destilada seja a metade (1/1.000.000) das demais (1:500.000). 3.4 Avaliao da influncia de oxidao de peas sobre o resultado dos testes de Coombs e Feca-Cult Os resultados dos testes de Coombs e Feca-Cult da anlise de influncia de oxidao sobre o resultado destes testes esto expressos na Tab.(4).

As amostras que continham o sangue humano diludo em soluo fisiolgica revelaram resultados positivos at a concentrao de 1/500.000. Estes

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Tabela 4. Resultados da deteco de sangue humano em amostras oxidadas e no oxidadas Pea Lmina de ao oxidada 1 Lmina de ao oxidada 2 Lmina de ao oxidada 3 Lmina de ao oxidada 4 Lmina de ao oxidada 5 Lmina de ao no oxidada 1 Lmina de ao no oxidada 2 Lmina de ao no oxidada 3 Lmina de ao no oxidada 4 (+) positivo; (-) negativo. Coombs + + + + + Feca-Cult + + + + + + -

quantidades muito baixas de substncia, o uso da gua destilada fornece resultados mais sensveis com o uso do Kit Feca-Cult, apesar de apresentar resultado falsonegativo no exame sorolgico atravs do mtodo de Coombs. J a soluo fisiolgica e a salina tamponada podem ser utilizadas para as demais concentraes em ambos os testes. O ao oxidado parece no afetar o resultado do Feca-Cult, o que nos sugere que o resultado negativo para Kastle-Meyer e positivo para Feca-Cult observado na comparao entre os trs testes deve ser explicado pela hiptese mais parcimoniosa levantada, baseada na possvel diferena de sensibilidade existente entre estes testes. Deste modo, a anlise em amostras suspeitas de sangue depositadas em peas criminais por meio do anticorpo anti-hemoglobina humana mostrou-se eficiente na deteco qualitativa de hemoglobina humana. Vale apontar como vantagem em relao aos demais testes especficos para sangue humano a rapidez do resultado e a facilidade de aplicao do teste imunocromatogrfico. AGRADECIMENTOS Agradecemos a colaborao tcnica dos seguintes Peritos criminais do Ncleo de Biologia e Bioqumica, Helena Maria Ferreira Castro, Ione de Freitas Araujo, Ricardo Lopes Ortega, Rosely Galo Soares; Sonia Regina Eugnio Mazzoni, Maria Aparecida Avelino, Maria Luisa Almeida Prado Oliveira e Sousa, Roberta Hirschfeld Campolongo e, em especial, tcnica de laboratrio, Sueli Felix dos Santos Oliveira. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS [1] M.N. Hochmeister; B. Budowle; R. Sparkes; O. Rudin; C. Gehrig; M. Thali; L. Schmidt; A. Cordier; R. Dirnhofer. Validation studies of an immunochromatographic 1-step test for the forensic identification of human blood. J Forensic Sci 44: 597602 (1999). [2] Feca-Cult One Step Teste: Membrana reativa para determinao de sangue oculto. Diadema: Alamar Tecno Cientfica Ltda. Bula do teste. (abr. 2008). [3] M.C.T. Sawaya; M.R.S. Rolim. Manual prtico de medicina legal no laboratrio. Juru, Brasil (2009). 230p. [4] D.B. Dupr. Blood or Taco Sauce? J Chem Educ 73: 60-64 (1996).

Observa-se concordncia de 88,9% (n=9) entre os testes de Coombs e Feca-Cult. A exceo se d na lmina oxidada 3, cujo resultado do Feca-Cult se revelou em trs minutos, mesmo tempo de revelao das amostras de sangue humano diludo entre 1:500.000 e 1:1.000.000. Isso pode explicar o resultado negativo do teste de Coombs para esta lmina, considerando a diferena de sensibilidade deste mtodo quando comparado com o Feca-Cult: provvel que a concentrao de sangue fosse inferior detectvel por Coombs, mas acima do limite de deteco pelo Feca-Cult. 4. CONCLuSES O Feca-Cult apresentou concordncia de 95,4% com os resultados obtidos com a mtodo para deteco de sangue utilizado rotineiramente em anlises forenses. Pode-se ainda sugerir que foi mais eficaz, identificando aparentemente sangue humano em concentraes no detectveis pelos outros mtodos. Deve-se analisar a concentrao da substncia hemtica para se estabelecer qual o solvente mais adequado para cada situao. Em concentraes e

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Espectroscopia Raman: um novo mtodo analtico para investigao forense em cruzamento de traos
J.A. Gomes, M.S. Sercheli*
Seo de Delitos de Trnsito, Instituto de Criminalstica, Polcia Civil do Distrito Federal, Braslia (DF), Brasil *Endereo de e-mail para correspondncia: mauricio.sercheli@gmail.com. Tel.: +55-61-3362-5954. Recebido em 17/05/2011; Revisado em 15/09/2011; Aceito em 21/09/2011

RESuMO Em Documentoscopia, o exame de tinta in-situ, sobre a superfcie de um determinado suporte, um desafio para a cincia forense. Hoje em dia, a Cromatografia Gasosa acoplada ao Espectrmetro de Massa (GC-MS) e a Cromatografia Lquida de Alta Eficincia (HPLC) so as principais tcnicas utilizadas para tal anlise, apesar de que tais tcnicas micro-deterioram o documento analisado. Nesse contexto, a Espectroscopia Raman tem se mostrado uma tcnica promissora e bastante adequada, pois propicia a direta identificao e caracterizao das tintas encontradas na prpria superfcie do papel, de modo no destrutivo. Assim sendo, este trabalho utiliza-se da Espectroscopia Raman, atravs de medidas experimentais, para inicialmente identificar e diferenciar tintas de caneta, sendo que uma ateno especial foi dada s tintas de tonalidade preta, as quais so difceis de serem distinguidas pelas tcnicas atuais. Posteriormente, foram selecionados e analisados alguns cruzamentos entre as tintas que apresentaram espectros distintos, ou seja, aquelas tintas que possuem diferentes composies qumicas, com o objetivo de identificar a sequncia cronolgica dos lanamentos. O mtodo baseia-se num tratamento matemtico simples dos espectros Raman, obtidos em diferentes profundidades na regio do cruzamento. Salienta-se a obteno de sucesso na utilizao desse procedimento, bem como de outro processo empregado para o mesmo propsito: o mapeamento bidimensional na superfcie da regio de interseco entre as tintas, seguido da anlise de correlao (programa Wire3.2, Renishaw, uK) com os espectros coletados individualmente nas tintas envolvidas no cruzamento. Palavras-chave: Espectroscopia Raman; Tintas de caneta; Cruzamento de traos. ABSTRACT In the field of Questioned Document Examination, in-situ pens ink investigation, on the surface of a particular medium, is a challenge to Forensic Science. Nowadays, Gas Chromatography-Mass Spectrometer (GC-MS) and High Performance Liquid Chromatography (HPLC) are the main techniques used for such analysis, despite their questioned document micro destructive potential. In this context, Raman spectroscopy became the new promising technique in this area, since it performs the direct identification and characterization of inks on the surface of the paper, in a nondestructive way. Therefore, this study utilizes the Raman spectroscopy to, firstly, identify and differentiate ink pen through experimental measurements, and special attention was given to black tone, which are difficult to be distinguished by current techniques. Secondly, some intersecting lines constituted by inks that had different spectra, i.e., those inks that have different chemical compositions, were selected and analyzed, with the main purpose of identifying the tracing chronological sequence. The method is based on a simple mathematical treatment of Raman spectra obtained at different depths in the region of intersection lines. The success in using this procedure is related as well as other process employed for the same objective: the two-dimensional surface mapping of the intersection region, followed by statistical correlation analysis (Wire3.2 software, Renishaw, uK) of spectra individually collected in the intersection involved inks. Keywords: Raman spectroscopy; Ink pen; Intersecting lines.

1. INTRODuO Com o surgimento de diversos tipos de canetas no mercado mundial, para atender determinadas especificaes, com base em suas aplicaes e usos comerciais, as tintas de canetas so fabricadas de acordo com suas propriedades fsicas, como densidade, cor, viscosidade, tenso superficial e resistncia gua. Esses critrios so alcanados controlando a composio qumica das tintas, que pode variar consideravelmente ao ser modificada a concentrao de componentes como corantes, solventes e realadores de viscosidade. Na maioria das vezes, preciso, no exame documentoscpico, mtodos para identificao e classificao destas tintas,

para a elaborao de um laudo pericial conclusivo. notrio que cada documento tem uma maneira peculiar de ser produzido. Em regra, no ocidente, os textos so redigidos de cima para baixo e da esquerda para a direita. Desta forma, acrscimos de traos, normalmente, podem contrariar esta sequncia natural de direo. Desse modo, ao adicionar escritos em documentos j elaborados, os novos traos podero cruzar com os do texto primitivo e, assim, muitas vezes, se for demonstrado que este trao est por cima do outro, quando deveria estar por baixo, o acrscimo se tornar evidente. Portanto, surge a necessidade de se verificar a prioridade de lanamentos, largamente discutida em Documentoscopia [1].

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Atualmente, as identificaes de tintas, bem como a anlise destas em cruzamento de traos, ainda so um desafio para a cincia forense. Dentre as principais tcnicas utilizadas [2],[3] para elucidar tais questes, temos: (i) a inspeo ocular, o uso de lupas ou at mesmo de microscpios tcnicas que, muitas vezes, nos do a ntida idia de um trao sobre o outro quando na realidade temos o oposto, desta forma, preciso tomar o devido cuidado, pois matrizes mais fortes parecem estar sobre as matrizes mais fracas e nem sempre temos os estreitamentos, as descontinuidades, os arrastes, etc; (ii) o exame da luz filtrada tcnica que requer a necessidade das tintas apresentarem diferentes propriedades ticas, sendo quase invivel a utilizao para tintas de tonalidade preta; (iii) a cromatografia gasosa acoplada ao espectrmetro de massa, a cromatografia lquida de alta eficincia, a espectroscopia no infravermelho e a fluorescncia de raios-x tais tcnicas apresentam como desvantagem a micro-deteriorao da amostra analisada [4]. nesse contexto que surge a espectroscopia Raman, uma tcnica que tem se mostrado bastante promissora [4], devido a diversos fatores: (i) alta capacidade de identificar compostos qumicos; (ii) preparao da amostra desnecessria, conseguindo realizar medidas diretamente sobre o material ou at mesmo em material acondicionado em sacos plsticos ou vidros; (iii) exame rpido, no invasivo e no destrutivo, permitindo a direta identificao e caracterizao das tintas encontradas na prpria superfcie do papel. Assim, essa importante caracterstica de preservao do vestgio material, aps o exame pericial ter sido realizado, est em acordo com o Cdigo de Processo Penal Brasileiro [5], o qual dispe sobre a possvel conservao do material probatrio para a realizao, caso seja necessrio, de um novo exame. Tal mtodo utiliza-se de um laser especfico de baixa potncia, centrado num ponto particular da amostra atravs de um microscpio. O feixe laser interage com os compostos qumicos presentes na amostra, de tal forma que a luz retroespalhada em diferentes frequncias, dependendo tanto dos elementos qumicos quanto de suas ligaes moleculares. Portanto, em princpio, podem-se distinguir todas as composies qumicas de diferentes tintas. No entanto, se as tintas possurem a mesma composio qumica, evidentemente, seus espectros Raman sero idnticos. Dessa maneira, a espectroscopia Raman, em anlise de tintas, fornecer uma resposta baseada nas caractersticas inerentes de cada tinta, distinguindoas quimicamente. Assim, devido possibilidade de distino de cada composio, a ordem cronolgica da sobreposio de camadas de tintas ser determinada, solucionando a questo do cruzamento de traos. Os objetivos deste trabalho so essencialmente dois: (i) realizar um estudo atravs da espectroscopia Raman com o intuito de distinguir diferentes tintas

de caneta, principalmente as de cor preta, difceis de serem analisadas por outras tcnicas; (ii) e, em especial, tambm atravs da espectroscopia Raman, propor um mtodo de anlise que resolva o problema da sequncia cronolgica de linhas em cruzamento de traos, ou seja, um mtodo analtico e objetivo que determine qual trao foi escrito primeiro. 2. PROCEDIMENTO ExPERIMENTAL 2.1. Preparao da Amostra Neste trabalho, foram estudadas 17 canetas diferentes. No total, essas canetas possuam 23 tipos de tintas, nas quatro principais cores utilizadas: sendo cinco na cor preta, nove na cor azul, sete na cor vermelha e duas na cor verde (veja a Tab.(1)). As amostras estudadas consistiam em traos aplicados diretamente sobre papel sulfite branco, de tamanho A4, de modo a simular a escrita. Os padres de traos coletados foram: horizontais, verticais e inclinados (ngulo de 45o). Alm disso, uma srie de amostras de traos cruzados, ortogonais entre si, foi preparada usando diferentes canetas, sendo que ateno especial foi dada ao estudo de tinta na tonalidade preta. O tempo de coleta entre todos os traos foi da ordem de 45 minutos, o que resulta em uma maior probabilidade de mistura de tintas no cruzamento e tambm maior dificuldade na soluo da ordem cronolgica. A prioridade de lanamentos era conhecida. 2.2. Espectroscopia Raman O espectrmetro Raman utilizado neste experimento foi o Renishaw inVia Raman microscope, fabricado pela Renishaw, uK. Na aquisio dos espectros foram utilizados lasers com excitao em comprimentos de onda de 514 nm e 785 nm e o intervalo mximo de medida do deslocamento Raman ficou compreendido entre 100 e 3200 cm-1. O feixe de laser foi focado num ponto especfico da amostra utilizando-se um microscpio com quatro objetivas (5x, 20x, 50x e 100x). Trs tipos de medidas foram efetuadas: (i) pontual, em regio fora do cruzamento, para a identificao e classificao da tinta de caneta; (ii) em profundidade, fora e dentro da regio do cruzamento entre dois traos (variao de 20 m entre medidas consecutivas) e (iii) mapeamento bidimensional em regio que abrangesse, alm dos traos isolados, o prprio cruzamento (da ordem de 20.000 espectros coletados na regio analisada). Os dois ltimos mtodos foram utilizados com o objetivo de se determinar qual dos traos foi lanado primeiro.

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Tabela 1. Especificao das diversas canetas examinadas, separadas por cores, cdigos e marcas. Cor preta 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Preta-1a, CIS 4 cores Preta-2b, BIC 4 cores Preta-5c, Mega Star Preta-8d, Uni pin Preta-14e, BIC Cor azul Azul-1a, CIS 4 cores Azul-2b, BIC 4 cores Azul-3c, Crown Azul-6d, Congresso de analtica Azul-7e, uni-ball Azul-9f, Seguros BRB Azul-10g, BIC Azul-16h, Pilot Azul-17i, caneta tinteira Cor vermelha Vermelha-1a, CIS 4 cores Vermelha-2b, BIC 4 cores Vermelha-4c, Pilot BP-S Vermelha-11d, Slim basic Vermelha-12e, BIC Vermelha-13f, Mega Star Vermelha-15g, Pilot ball Cor verde Verde-1a, CIS 4 cores Verde-2b, BIC 4 cores -

3. RESuLTADOS E DISCuSSO 3.1. Identificao das tintas

independentemente da orientao dos traos e da regio escolhida.

Figura 1. Exemplo de uma das regies selecionadas, apontada pela seta, para se coletar os dados para a amostra preta-1a, utilizando-se uma objetiva de 50x.

Figura 2. Espectros Raman coletados, com laser de 514 nm e objetiva de 50x, para um exemplo de cada cor de tinta estudada, aleatoriamente selecionada.

Para o estudo de identificao das tintas, foram coletadas medidas Raman, utilizando objetiva de 50x (veja um exemplo de uma das regies selecionadas, apontada por uma seta, para a amostra preta-1a, na Fig. (1)). Atravs do uso do laser de 514 nm obtiveram-se os melhores resultados para as cores de tonalidade preta, azul e verde. Entretanto, para as tintas na cor vermelha, o laser de Hlio e Nenio (He-Ne), cujo o comprimento de onda de 785 nm, gerou os melhores resultados. Para uma mesma tinta foram coletados espectros Raman em diversas posies, bem como em diferentes orientaes dos traos, a saber: verticais, horizontais e inclinados (ngulo de 45). Os demais resultados, no apresentados neste trabalho, mostram que os espectros Raman, para uma determinada tinta, so idnticos,

A Figura (2) mostra um espectro Raman, aleatoriamente selecionado, para cada uma das tonalidades de tinta estudadas aqui. Os espectros so facilmente distinguveis, devido diferena em suas composies qumicas. Alm disso, para tintas de mesma tonalidade (veja as Figs.(3) a (6)), em especial na cor preta, na maioria dos casos, possvel distinguir caractersticas espectrais, como posio do pico e intensidade relativa entre os picos, que so exclusivas de cada tinta individualmente, mesmo que grande percentual do espectro seja idntico. Contudo, existem padres emergentes dos dados coletados revelando que algumas tintas examinadas possuem assinaturas semelhantes, o que evidencia uma relativa concordncia entre suas frmulas, a qual pode ser atribuda a um determinado fornecedor de tinta.

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Figura 3. Espectros Raman coletados, com laser de 514 nm e objetiva de 50x, para todas as nove canetas de tinta na cor azul estudadas.

Figura 4. Espectros Raman coletados, com laser de 514 nm e objetiva de 50x, para todas as cinco canetas de tinta na cor preta estudadas.

Figura 5. Espectros Raman coletados, com laser de 785 nm e objetiva de 50x, para todas as sete canetas de tinta na cor vermelha estudadas.

Figura 6. Espectros Raman coletados, com laser de 514 nm e objetiva de 50x, para as duas canetas de tinta na cor verde estudadas.

Das nove diferentes canetas analisadas na cor azul (Fig.(3)), cinco foram possveis de se distinguir. Das cinco diferentes canetas na cor preta (Fig.(4)), trs foram possveis de se distinguir. Das sete diferentes canetas na cor vermelha (Fig.(5)), seis foram possveis de se distinguir. As duas diferentes canetas na cor verde foram possveis de se distinguir (Fig.(6)). As tintas de canetas da mesma cor que no foram possveis de serem diferenciadas, ou seja, que possuem espectros Raman idnticos em ambos os comprimentos de onda utilizados, como por exemplo, a caneta BIC e a caneta BIC 4 cores, bem como as canetas de propaganda (Congresso de Analtica, Seguros BRB, Mega Star, etc.), permitem inferir que as tintas podem ter sido provenientes de um mesmo fornecedor/lote. 3.2. Cruzamento profundidade de traos mapeamento da

Dependendo da especificidade de cada tinta utilizada, pode-se identificar a ordem cronolgica dos traos. Vale salientar que, na interseco de dois traos, diferentes, organizaes nas camadas de tintas podem

acontecer: as tintas podem formar camadas discretas, pode ocorrer difuso parcial na interface das camadas ou, at mesmo, as tintas podem se misturar completamente, tornando-as indistinguveis [6]. Nesse sentido, foram efetuadas medidas experimentais em pontos prximos ao cruzamento de traos (com o intuito de se coletar espectros de cada tinta separadamente) e no prprio cruzamento, em trs ou seis profundidades diferentes (com o objetivo de se verificar qual tinta foi escrita primeiro). Os dados foram coletados entre duas tintas na tonalidade azul e entre duas tintas na tonalidade preta. Para tanto, utilizou-se o laser com comprimento de onda de 514 nm. Salienta-se que, no cruzamento, os traos eram ortogonais entre si e tambm foi utilizada a objetiva de 50x. Primeiramente, o resultado das medidas no cruzamento de traos entre tintas de cor azul (azul-1a e azul-17i) pode ser visualizado na Fig.(7). Os espectros Raman foram coletados com laser de 514 nm, sobre os traos isolados de cada tinta (espectros superior e inferior) e em profundidade sobre o cruzamento dos traos entre essas tintas, sendo que o trao da caneta 17i estava localizado abaixo do trao da caneta 1a.

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As profundidades de cada medida esto diferenciadas por cores, sendo que foram realizadas trs medidas a partir da superfcie do papel com cerca de 20 m de distncia entre cada medida. As linhas verticais mostram os picos Raman analisados para definio da ordem dos lanamentos.

muito parecidos, com diversos picos iguais. Nessa anlise, foi realizado um maior detalhamento das medidas, que envolveu seis profundidades distintas, conforme ilustra a Fig.(8). Note que os espectros aparecem no grfico na ordem inversa da profundidade, ou seja, o espectro superior corresponde medida Raman mais profunda, decrescendo a profundidade de cima para baixo. primeira vista, os espectros so extremamente semelhantes. Mas, um olhar com maior ateno revela sutis diferenas. Para saber onde atacar o problema devese estudar atentamente os espectros individuais de cada tinta utilizada no cruzamento e fazer uma subtrao, de um pelo outro, para verificar quais principais picos os diferenciam. Na Figura (9), os espectros individuais de cada tinta isolada so apresentados, ampliados na regio de interesse. Note que o pico de 1141 cm-1 (linha vertical esquerda) somente est presente no espectro da tinta 2b (linha pontilhada vertical esquerda). Assim, esse foi o ponto espectral escolhido para abordar o problema da ordem cronolgica no cruzamento.

Figura 7. Espectros Raman coletados, com laser de 514 nm, sobre os traos isolados de cada tinta (azul-1a na cor verde e azul-17i na cor vermelha) e em trs diferentes profundidades sobre o cruzamento entre essas tintas, sendo que o trao da caneta 17i estava localizado abaixo do trao da caneta 1a. As profundidades de cada medida esto diferenciadas por cores (rosa, azul e azul claro), de modo que Alto significa na superfcie do papel, Meio significa cerca de 20 m abaixo da superfcie e Baixo da ordem de 40 m abaixo da mesma superfcie. As linhas verticais mostram os picos Raman analisados para definio da ordem dos lanamentos.

Analisando os trs espectros centrais da Fig.(7) pode se notar que eles so uma mistura dos espectros individuais de cada tinta isoladamente. Essa anlise bem ilustrativa, j que se consegue visualizar o surgimento do pico situado prximo de 1575 cm-1 (linha vertical direita), caracterstico do espectro Raman da tinta azul-17i, a partir da superfcie, onde praticamente no existia, at a regio mais profunda. Note que o espectro da superfcie do papel (Alto), assemelhase ao espectro do azul-1a, enquanto que o espectro a uma profundidade de 40 m da superfcie (Baixo), assemelha-se ao espectro do azul-17i. Dessa forma, fica evidente que a tinta azul-1a est lanada sobre a 17i, ou seja, a azul- 1a foi lanada em momento posterior. No entanto, na maior parte dos casos, no possvel fazer esse tipo de identificao apenas visualmente. Assim, este trabalho cientfico sugere, alm dessa nova anlise por profundidade, um tratamento matemtico prtico e objetivo para elucidar os problemas mais difceis. Nesse contexto, para explicar o novo mtodo, uma anlise sobre o cruzamento de tintas de cor preta ser apresentada a seguir. Trata-se do cruzamento entre duas tintas de canetas concorrentes no mercado brasileiro, das quais as tonalidades e composies qumicas so muito semelhantes. Alm disso, para dificultar o problema, os espectros Raman tambm so

Figura 8. Espectros Raman coletados, com laser de 514 nm, sobre o cruzamento de traos de tintas de cor preta, com o trao da caneta 1a localizado abaixo do trao da caneta 2b. As profundidades de cada medida esto diferenciadas por cores, sendo que o zero a superfcie do papel. A regio pontilhada mostra os picos Raman que foram analisados atravs de um tratamento matemtico simples.

A Figura (10) mostra a regio de anlise ampliada (rea pontilhada da Fig.(8)). Agora mais fcil visualizar que esse pico (1141 cm-1) fica cada vez mais evidente conforme as medidas aproximam-se da superfcie. No entanto, para ter certeza de que no se trata de um provvel decrscimo da intensidade da medida com a profundidade, o que induziria a um falso positivo, prope-se um tratamento matemtico. O tratamento matemtico consiste na comparao entre as intensidades relativas dos picos localizados em 1141 cm-1 e de 1177 cm-1, conforme ilustrado nas Figs.(11) e (12).

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Figura 9. Detalhe das regies de interesse dos espectros Raman coletados, com laser de 514 nm, para os traos de tintas de cor preta, isoladamente. O espectro de cor vermelha referente tinta da caneta 2b e o de cor preta tinta da caneta 1a. As linhas verticais pontilhadas mostram a principal diferena entre os espectros, ou seja, a ausncia do pico localizado em 1141 cm-1 para a tinta da caneta 1a.

(faixa de pontos no eixo X) em torno dos quais esto localizados todos os picos em diferentes profundidades. A escolha de uma faixa de pontos ao invs do ponto exato do pico se deve ao fato de haver pequena variao da posio do pico (cerca de 1-3 cm ), em funo da profundidade, devido a pequenas mudanas em propriedades fsicas locais. Futuramente, o ideal montar um sistema de deteco do pico atravs da derivada nula. Assim, tomaramos sempre o valor mximo dos picos. Dessa maneira, depois de se calcular as intensidades relativas de cada pico, ou seja, a altura normalizada do pico em 1177 cm-1 e do pico em 1141 cm-1, divide-se uma pela outra. Assim, pode-se obter a proporo entre os picos. Nas Figuras (11) e (12), visualmente, pode-se notar que a proporo entre as alturas destes picos na tinta 2b acentuadamente menor do que a proporo na tinta 1a que tende ao infinito, j que o pico no existe nessa tinta. Assim, ao calcular as propores entre os picos para as diferentes profundidades, haver a possibilidade de identificao da ordem cronolgica do lanamento dos traos. Como se conhece a proporo entre os picos da tinta 2b, a tendncia dos valores encontrados em funo da profundidade ao se aproximar desse valor conhecido, resultaria na maior proporo de tinta 2b naquela localizao de profundidade. Nesse sentido, a Fig.(13) abaixo mostra os resultados obtidos nesse caso de cruzamento de tintas de cor preta.

Figura 10. Detalhe dos espectros Raman realizados sobre o cruzamento de traos de tintas de cor preta, com o trao da caneta 1a localizado abaixo do trao da caneta 2b, correspondente aos picos da regio pontilhada da Fig.(2).

As intensidades dos picos normalmente so adquiridas atravs do clculo da integral (rea abaixo) da curva pretendida. Como existe uma sobreposio de picos, essa maneira de obteno da intensidade absoluta de cada pico seria complexa, j que a identificao dos picos isolados seria necessria. O modelo proposto mais simples, pois usa intensidades relativas. Como os picos no sofrem alargamento, pois no se trabalha com variaes de temperatura ou variaes magnticas nas amostras, as intensidades relativas so proporcionais s alturas dos picos. Sendo assim, em um processo automtico, calcula-se as alturas mdias de cada pico a partir da linha de base, calculada e ilustrada por uma reta vermelha nos grficos acima. Essas alturas mdias, em torno dos picos, sero obtidas e em seguida normalizadas pela intensidade de cada pico. Note que se obtm a altura mdia do pico por uma questo de otimizao, pois o modelo alimentado com os deslocamentos Raman

Figura 11. Detalhe dos picos de interesse, com o tratamento matemtico, do espectro Raman coletados para o trao de tinta da caneta 2b de cor preta, isoladamente. A reta de cor vermelha a linha de base calculada para ambos os picos. As linhas pontilhadas mostram a regio de pontos do espectro que entraram no clculo da mdia da altura dos picos.

No cruzamento em que o trao da caneta 1a est abaixo do trao da caneta 2b, a variao das propores entre as intensidades dos picos, em funo da profundidade, est representada no grfico pela linha entre as figuras quadradas. Pode-se verificar que em regies mais profundas o valor est em torno de 3,30,1, enquanto que logo acima da superfcie do papel o valor tende a 2,40,1. Mesmo considerando o erro nas

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medidas, encontrou-se uma funo decrescente do valor da proporo, aproximando-se do valor da proporo entre os picos da tinta 2b. O valor mdio da proporo na tinta 2b de 2,30,1, encontrado atravs do mesmo estudo de profundidade, realizado fora do cruzamento, somente onde havia a tinta 2b (crculos preenchidos da Fig.(13)), em regio prxima do cruzamento. Dessa forma, pode-se concluir que em regies mais profundas encontra-se uma mistura com maior quantidade de tinta 1a, enquanto que na superfcie encontra-se maior quantidade de tinta 2b. O mesmo exame foi replicado no cruzamento inverso, ou seja, naquele em que o trao da caneta 2b est abaixo do trao da caneta 1a. Da, o resultado deve ser ao contrrio do exposto acima, como pode se notar no grfico dos tringulos da Fig.(13). Neste caso, apesar da medida mais profunda ter sido feita a apenas 40 m abaixo da superfcie, nota-se claramente que em regies mais profundas o valor mais prximo do valor conhecido da proporo da tinta 2b, enquanto que ao se aproximar da superfcie esse valor cresce, prevalecendo uma maior concentrao da tinta 1a. Dessa maneira, a ordem cronolgica de lanamento dos traos foi mais uma vez identificada com sucesso. 3.3. Cruzamento de traos mapeamento bidimensional No sentido de empregar outro mtodo para a determinao da sequncia cronolgica de lanamentos em cruzamento de traos, novas medidas foram efetuadas nas proximidades e na prpria regio do cruzamento de traos entre duas tintas na tonalidade azul (azul-2b/BIC-4cores na vertical e azul-7e/uni-ball na horizontal). O objetivo era mapear toda a regio e verificar qual tinta foi lanada posteriormente (veja na Fig.(14) a regio mapeada). Assim, aproximadamente 20.000 espectros foram coletados com o foco, dado por uma objetiva de 20x, na superfcie do papel. Salienta-se que, no cruzamento, como pode ser verificado na Fig. (14), os traos eram ortogonais entre si e as medidas foram feitas utilizando-se o laser de comprimento de onda de 514 nm. Os espectros foram analisados utilizando-se o programa Wire3.2 (Renishaw, uK). Dessa forma, foi selecionado o modo mapa atravs de componentes (DCLS), o qual permite, atravs de uma superposio linear dos componentes do espectro, mostrar como resultado a identificao de qual espectro melhor representa os espectros selecionados. Nesse caso, selecionaram-se trs espectros como padres de comparao: um espectro individual da tinta azul-2b, um espectro individual da tinta azul-7e e um espectro das fibras da folha de papel, todos coletados na regio prxima do cruzamento.

Figura 12. Detalhe dos picos de interesse, com o tratamento matemtico, do espectro Raman coletados para o trao de tinta da caneta 1a de cor preta, isoladamente. A reta de cor vermelha a linha de base calculada para ambos os picos. As linhas pontilhadas mostram a regio de pontos do espectro que entraram no clculo da mdia da altura dos picos.

Figura 13. Propores entre as intensidades normalizadas dos picos de interesse dos espectros Raman da Fig.(10), realizados nos cruzamentos de traos, em funo das profundidades das medidas. Enquanto as figuras quadradas vazadas () representam as medidas no cruzamento em que o trao da caneta 1a est abaixo do trao da caneta 2b, as figuras triangulares vazadas () representam as medidas no cruzamento em que o trao da caneta 2b est abaixo do trao da caneta 1a. As figuras circulares preenchidas () representam as medidas no trao da caneta 2b isoladamente.

As Figuras (15), (16) e (17) mostram, nas cores azul e amarelo, o principal componente da anlise da correlao dos espectros Raman do mapeamento 2D com, respectivamente, o espectro Raman da tinta da caneta 7e (Fig.(15)), das fibras do papel (Fig.(16)) e da tinta da caneta 2b (Fig.(17)). Ainda, a Figura (18) mostra graficamente o resultado final da anlise de correlao dos espectros Raman dos trs padres selecionados com os 20.000 espectros Raman do mapeamento 2D. Podemos inferir dessa figura que a tinta 2b (em amarelo) est sobre a tinta da caneta 7e (em azul), corroborando, assim, o novo mtodo de anlise proposto para determinar a sequncia cronolgica de linhas em cruzamentos de traos, ou seja, qual trao foi escrito primeiro.

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Figura 14. Regio prxima ao cruzamento de traos das tintas de cor azul das canetas 7e (horizontal) e 2b (vertical), ampliada atravs da objetiva de 20x, onde foi realizado o mapeamento 2D de espectros Raman.

Figura 15. Principal componente da anlise da correlao dos espectros Raman do mapeamento 2D com o espectro Raman da tinta da caneta 7e (horizontal), em azul claro.

Figura 16. Principal componente da anlise da correlao dos espectros Raman do mapeamento 2D com o espectro Raman da fibra do papel, em azul claro.

Figura 17. Principal componente da anlise da correlao dos espectros Raman do mapeamento 2D com o espectro Raman da tinta da caneta 2b (vertical), em amarelo.

Figura 18. Composio das principais componentes da anlise da correlao dos espectros Raman do mapeamento 2D com os espectros Raman isolados das fibras do papel (agora na cor verde) e das tintas azuis das canetas 7e (azul) e 2b (amarelo).

4. CONCLuSES E PERSPECTIvAS Os espectros Raman coletados para uma mesma tinta de caneta apresentam excelente reprodutibilidade quando medidos nos traos produzidos em trs direes

(horizontal, vertical e inclinado), bem como em diversas posies. Os resultados apresentados mostram que a espectroscopia Raman pode ser usada para identificar e distinguir tintas com pequenas variaes na composio qumica, com especial destaque para a tonalidade preta, cuja anlise difcil e delicada por outras tcnicas de anlise. No que concerne ao estudo do cruzamento de traos de tintas, dois tipos de anlise foram apresentados e discutidos, mostrando-se que essa tcnica pode ser usada para se determinar uma sequncia cronolgica de traos. Entretanto, necessrio que as tintas possuam composies qumicas diferentes. Contudo, evidente que ainda h muitas questes a serem abordadas para uma completa investigao, tais como o efeito de diferentes papis como substratos e da presso da caneta utilizada na escrita, por exemplo. A anlise forense de tintas em documentos requer uma srie de caractersticas que vo ao encontro daquelas inerentes ao instrumento Raman, tais como: microscpio para visualizao e medio da amostra; baixa potncia do laser que evita danos ao material analisado; variados comprimentos de onda de laseres para ampliar o leque de

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aplicaes; e extensa biblioteca de resultados de espectros para comparao e identificao direta de materiais. Dessa forma, a Espectroscopia Raman apresenta-se como uma tcnica promissora para o desenvolvimento da anlise forense em documentoscopia. No futuro, espera-se utilizar a espectroscopia Raman para criar uma extensa biblioteca de tintas de canetas, de impressoras, de carimbos, etc. Ainda, pretende-se elaborar protocolos para exames documentoscpicos, tanto na identificao e classificao de diversos tipos de tintas, bem como na determinao da sequncia cronolgica de traos em cruzamentos de tintas. AGRADECIMENTOS Os autores agradecem aos seguintes colegas de trabalho, peritos criminais do Instituto de Criminalstica da Polcia Civil do Distrito Federal IC/PCDF, pelo apoio e incentivo realizao deste trabalho: Sr. Celso Nenev (Diretor), Sra. Ivete Shimabuko (Diretora da Diviso de Percias Internas), Sra. Ftima Soraggi (Chefe da Seo de Percias Documentoscpicas) e Sr.Clemilton Cavalcante.

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS [1] J. Del Picchia Filho; C.M.R. Del Picchia and A.M.G. Del Picchia. Tratado de Documentoscopia: da falsidade documental. 2 edio, Editora Pillares (2006) 400-401. [2] J. Zieba-Palus; M. Kunicki. Application of the microFTIR spectroscopy, Raman spectroscopy and XRF method examination of inks. Forensic Sci Int, 158: 164172 (2006). [3] F.A. Morsy; S.I. El-sherbiny; M. Awadalla. A systematic approach to Egyptian ballpoint ink analysis for forensic science application. Forensic Sci Int, 4: 1-13 (2005). [4] 15th International Forensic Science Symposium Interpol Lyon, 2007. [5] Decreto-Lei n 3.689, de 3 de outubro de 1941. Cdigo de Processo Penal, Artigos 170 e 181, Brasil (2009). [6] M. Claybourn; M. Ansell; using Raman Spectroscopy to solve crime: inks, questioned documents and fraud. Sci Justice, 40: 261-271 (2000).

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A. TONIETTO / REVISTA BRASILEIRA DE CRIMINALSTICA, V. 1, N.1, 31-38 (2011)

Valorao de danos nos casos de minerao de ferro no Brasil


A. Tonietto a*, J.J.M.C. Silva b
a

Seo de Meio Ambiente, Instituto de Criminalstica, Superintendncia de Polcia Tcnico-Cientfica, Goinia (GO), Brasil. b rea de Licenciamento Ambiental, IBAMA, Brasilia (DF), Brasil. *Endereo de e-mail para correspondncia: angelatonietto@gmail.com.Tel.: +55-62-32019574; fax: +55-62-32011289. Recebido em 24/05/2011; Revisado em 24/08/2011; Aceito em 08/09/2011.

RESuMO No Brasil, a minerao de ferro representa mais de 60% do valor total da produo mineral. Este setor da economia gera grandes impactos ambientais na regio do Quadriltro Ferrfero-MG, onde ocorre grande parte da extrao de ferro. Trata-se de uma regio de Bioma Mata Atlntica, o qual considerado Patrimnio Nacional e sua vegetao tem lei especfica de proteo e uso. O problema associado s mineradoras de ferro est na realizao de atividades em desrespeito s licenas emitidas e/ou o no cumprimento do Plano de Recuperao de reas Degradadas. Conforme a Lei de Crimes Ambientais, essa prtica configura crime ambiental, com pena de deteno e multa. Para a edio da multa citada na referida lei, necessrio que se proceda valorao dos danos ambientais causados. Vrios so os mtodos de valorao de danos disponveis na literatura. Entretanto, muitos so de difcil aplicabilidade por implicarem em altos custos e longo tempo de execuo. Para efeitos de percia ambiental criminal, necessrio que o mtodo aplicado seja de rpida execuo, simples, barato e que obedea ao princpio da proporcionalidade. Assim, este trabalho teve por objetivo propor um mtodo de valorao de danos nos casos de no cumprimento das exigncias da licena ambiental concedida s mineradoras de ferro com lavra em regio de Mata Atlntica. O mtodo proposto apresenta uma parcela objetiva, uma parcela subjetiva, e uma parcela de lucro cessante, e, por ser simples, visa imediata aplicabilidade em percias ambientais criminais. Palavras-chave: minerao de ferro, Mata Atlntica, valorao de danos ambientais, percia, multa. ABSTRACT In Brazil, iron mining represents more than 60% of mineral production total value. This economy section generates large environmental impacts in Quadriltro Ferrfero region, Minas Gerais state, where much of iron extraction occurs. This is an Atlantic Forest Biome region, which is considered National Patrimony and its vegetation has a specific law regarding protection and use. The problem associated with iron mining is related to activities performed in disagreement to provided Licenses and/ or Degraded Areas Rehabilitation Plan nonfulfillment. According Brazilian Environmental Crimes Law, this practice sets environmental crime, penalized with detention and fine. For the fine edition cited in that law, it is necessary to proceed to an environmental damage valuation. Even though the availability of several environmental damage valuation methods described in the literature, many of them are complex, implying high costs and long execution time. For environmental crime purposes, it is necessary a faster, simpler and cheaper method that is also in accordance with the proportionality principle. This study aimed to propose a damage valuation method for those cases in which License requirements are not accomplished by iron mining companies in Atlantic forest exploitation region. The proposed method presents three parts: an objective, a subjective, and an outgoing profit, and, for being simple, intends to its immediate applicability in forensic environmental crime. Keywords: iron minig, Atlantic Forest, environmental damage valuation, expertise, penalty.

1. INTRODuO Valorar para valorizar os recursos ambientais brasileiros tem sido uma das misses do desenvolvimento em bases sustentveis que o Brasil elegeu aps o retorno democracia em 1988. O conceito de desenvolvimento sustentvel est legalmente contemplado desde 1981, com a Poltica Nacional do Meio Ambiente (Lei 6.938, de 1981). Segundo a referida lei, a Poltica Nacional do Meio Ambiente visa compatibilizao do desenvolvimento econmico-social com a preservao da qualidade do meio ambiente e do equilbrio ecolgico. Em outras palavras, a satisfao das necessidades do presente sem comprometer a capacidade das futuras geraes. Dentre os recursos ambientais, no Brasil, os

recursos minerais tm um lugar de destaque. O ferro, por exemplo, um importante produto de exportao na balana comercial brasileira [1]. Considerando que o desenvolvimento sustentvel deve levar em conta os impactos na sociedade, na economia e no ambiente, qualquer explotao tem que ter todos esses efeitos valorados. O ferro um dos elementos mais abundantes da crosta terrestre e tambm o mais explotado entre todos os metais. Os principais minerais que contm ferro so: hematita (Fe2O3), magnetita (Fe3O4), goethita (FeO/OH) e siderita (FeCO3). As formaes ferrferas compostas de hematita e slica, denominadas itabiritos, constituem os maiores depsitos de ferro. Do total de minrio de ferro produzido, 99% so utilizados na fabricao de ao e

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ferro fundido [1]. As reservas medidas e indicadas no Brasil totalizam 28,9 bilhes de toneladas de minrio, distribudas nos estados de Minas Gerais, Par, Mato Grosso do Sul, Alagoas, Amazonas, Bahia, Cear, Gois, Pernambuco, Rio Grande do Norte e So Paulo. Entretanto, a maior parte est concentrada nos trs primeiros estados mencionados, correspondendo a 67%, 16% e 15,5%, respectivamente. Por deter 7,2% das reservas mundiais, o Brasil ocupa o quinto lugar entre os pases detentores de maiores quantidades de minrio. Alm da grande quantidade, os minrios brasileiros tambm so considerados de alta qualidade, devido aos altos teores de ferro [1]. No Brasil, a minerao uma das atividades econmicas mais importantes [2]. Em 2000, o pas era o segundo maior produtor mundial de minrio de ferro [2]. Em 2008, a produo brasileira de minrio de ferro totalizou 351,2 milhes de toneladas. Nesse ano, o valor da produo atingiu 27,7 bilhes de reais, representando 61,2% do valor total da produo mineral brasileira [1]. Mas, ainda que economicamente importante, ela causa impactos negativos nas esferas social (como as condies subumanas dos seus trabalhadores, a prostituio de menores, a questo da destruio das terras indgenas, a agresso sade humana) e ambiental (poluio dos recursos hdricos, assoreamento, destruio da fauna e da flora) [2]. A produo de minrio de ferro no Brasil se desenvolve em minas a cu aberto [1]. A metade dessas minas de grande porte situa-se nos estados de Minas Gerais na regio denominada como Quadriltero Ferrfero (Itabira, Mariana, Rio Piracicaba, Itabirito, Baro de Cocais) , do Par (na Serra de Carajs) e do Mato Grosso do Sul (nos municpios de Corumb e Ladrio) [3] - [5], sendo o Quadriltero Ferrfero uma das principais regies produtoras de minrio de ferro do mundo [6]. Apesar de as minas de ferro e mangans da Serra de Carajs-PA serem consideradas modelo mundial de equilbrio entre a atividade de minerao e a preservao ambiental [6], o setor da minerao de ferro que tem o maior potencial de gerao de impactos ambientais na regio do Quadriltero Ferrfero [7]. Considera-se impacto ambiental toda reao que provoque um desequilbrio das relaes constitutivas do ambiente. uma ao pode causar danos diretos ao meio ambiente e destes, surgirem impactos que, em geral, resultam em novos danos. Neste ltimo caso, danos indiretos. Assim o dano ambiental caracteriza-se por prejuzos diretos e indiretos ao meio ambiente [8]. As atividades mineradoras causam danos diretos ao meio ambiente que se refletem em impactos e danos indiretos. Antes de se proceder valorao destes danos ambientais, necessrio graduar ou qualificar os impactos ambientais causados, ou seja, preciso identificar as alteraes que provocaram o desequilbrio das relaes constitutivas do meio ambiente aquelas alteraes

que ultrapassaram a resilincia e a resistncia daquele ecossistema afetado. Os impactos podem ser diretos ou indiretos, curtos ou de longo prazo, reversveis ou irreversveis. Determinado ecossistema pode apresentar maior ou menor resistncia ao impacto em questo. A resistncia apresentada por determinado ecossistema funo da sua capacidade de resilincia [8]. Aps a qualificao do impacto ambiental, passa-se valorao do dano decorrente. A valorao de danos nos locais de extrao mineral possui desafios. Cada mina nica na sua essncia, pois est inserida em um ecossistema especfico, com clima, geologia, geomorfologia, solo, cobertura vegetal e fauna especficos da localidade afetada [9]. Portanto, em se tratando de valorao de danos nos casos de minerao, cada rea deve ser valorada de forma nica, conforme suas caractersticas particulares. A literatura oferece vrios mtodos de valorao de danos. O mtodo mais adequado ser funo do tipo, magnitude e localizao do dano em questo, ou seja, a adoo do mtodo depender do objetivo da valorao [10]. Cada mtodo de valorao possui suas vantagens e desvantagens cabendo ao avaliador entender todas elas antes de fazer a sua escolha. Os mtodos de valorao de danos baseiam-se na tentativa de fornecer um valor econmico relacionado aos recursos e servios ambientais perdidos ou danificados. Esse valor pode ser desagregado em valor de uso que pode ser direto, indireto e de opo e valor de no uso, ou seja, o valor de existncia, um conceito muito prximo ao conceito do valor de estimao. Eles podem ser mtodos diretos de valorao ou mtodos indiretos de valorao. Entre os frequentemente citados esto os mtodos de Produtividade Marginal, de Custos Evitados, de Custos de Controle, de Custos de Reposio e de Custos de Oportunidade correspondendo aos mtodos indiretos de valorao e os mtodos de Avaliao Contingente, de Preos Hednicos e de Custo de Viagem mtodos diretos de valorao [10]-[12]. Em geral, os mtodos diretos de valorao (Avaliao Contingente, Preos Hednicos e Custo de Viagem) so dispendiosos e demorados e nem sempre se justificam. Principalmente nos casos de percia ambiental criminal ou para efeito de aplicao de multas, onde devem ser preferidos mtodos que permitam o atendimento de prazos legais e administrativos e que estejam dentro do oramento das instituies de percia e fiscalizao. Em geral, os danos podem ser avaliados utilizando mtodos simplificados e de baixo custo [13]. Contudo, estes mtodos devem obedecer aos critrios de simplicidade, reconhecimento legal, transparncia e proporcionalidade [14]. No processo de licenciamento de uma jazida podem ocorrer irregularidades que vo desde a no execuo de medidas mitigadoras apontadas no Estudo de Impacto Ambiental (EIA) at a execuo de atividades em desrespeito s licenas emitidas (Licena

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Prvia, Licena de Instalao e Licena de Operao). De acordo com o artigo 55 da Lei 9.605, de 1998, configura crime ambiental executar pesquisa, lavra ou extrao de recursos minerais sem a competente autorizao, permisso, concesso ou licena, ou em desacordo com a obtida e aqueles que deixam de recuperar a rea pesquisada ou explorada, nos termos da autorizao, permisso, concesso ou licena, tambm podem incorrer na mesma pena (deteno, de seis meses a um ano, e multa). Como mostrado, as intervenes ambientais, hoje, devem ser parte integrante dos projetos de extrao mineral. Entretanto, as empresas de minerao continuam com prticas de recuperao de curto prazo, mesmo aps o advento da exigncia do PRAD (Plano de Recuperao de reas Degradadas) nos processos de licenciamento ambiental [15]. Essas prticas de curto prazo consistem, geralmente, na transposio de solo, plantio de espcies pioneiras e um curto perodo de avaliao. O PRAD tende a apresentar tcnicas que demandariam acompanhamento a longo prazo. Contudo, recuperao, no Brasil, no necessita de um retorno ao status quo ante, ou seja, no , necessariamente, uma restaurao do ambiente, podendo, inclusive, o uso de espcies exticas, conforme entendimentos contidos no art. 2 da Lei 9.985, de 2000. O PRAD, por ser exigncia do Licenciamento Ambiental, incorporado ao procedimento na fase prvia (fase de Licena Prvia). Contudo, depende de monitoramento do empreendedor cobrado pelo orgo ambiental competente para que seja cumprido conforme as exigncias. Portanto, a empresa que desrespeita estas diretrizes, ou seja, que no faz a interveno ambiental como previsto, pode ser multada e responder civil e criminalmente por danos ao meio ambiente. As reas degradadas em desacordo com a licena obtida pela empresa devem ser periciadas com a conseqente fixao do montante do prejuzo causado, conforme o artigo 19 da Lei 9.605, de 1998 (percia de constatao do dano ambiental), para que seja possvel calcular valores de fiana e multa. Assim, fundamental que a valorao de danos ambientais causados pelo no cumprimento das exigncias da licena ambiental concedida s mineradoras de ferro seja feita com base em metodologias funcionais, que resultem em fixao de multa coerente com o crime ambiental causado, a fim de cumprir sua funo educativa. Contudo, a destinao desta multa ser para o fundo penitencirio. Considerando que a maioria das minas de extrao de ferro situa-se em Minas Gerais, o objetivo deste artigo propor um mtodo de valorao de danos para os casos de no cumprimento das exigncias da licena ambiental concedida s mineradoras de ferro com lavra em regio de Mata Atlntica. Mtodo este que possa ser aplicado em percias ambientais criminais. O mtodo aqui apresentado baseia-se no mtodo Custo de Restaurao, praticado atualmente pela percia da Polcia

Civil do Distrito Federal [13], [16]. 2. METODOLOGIA Para a elaborao deste trabalho, foram consultados artigos cientficos publicados em revistas brasileiras, bem como dissertaes de Mestrado e teses de Doutorado depositadas em bibliotecas digitais de universidades brasileiras e livros relacionados ao tema. Foram consultados cerca de 150 trabalhos para inicialmente entender a problemtica relacionada ao tema e, ento, viabilizar a proposio de uma metodologia de valorao de danos nos casos de minerao de ferro em regies de Mata Atlntica. Os valores monetrios aqui apresentados foram baseados em stios disponveis na internet. O mtodo de avaliao pelo Custo de Restaurao leva em conta trs parcelas: uma objetiva, uma subjetiva e uma relacionada ao lucro cessante (que considera o fator tempo). A parcela objetiva corresponde ao custo de restaurao imediato, e de fcil identificao. Nesta parcela esto a recomposio da topografia, a reposio da camada frtil do solo e o replantio da cobertura vegetal. Para o clculo da parcela objetiva do dano, foi estabelecido como valor o preo de mercado de mudas de espcies nativas do Bioma Mata Atlntica, considerando espcies pioneiras e no pioneiras, e o preo de mercado relativo aquisio de terra, regularizao da morfologia do solo e outros servios, baseados em tabela utilizada pelo Departamento de Estradas de Rodagem, bem como o preo de mercado de fertilizantes e corretivos qumicos. Os preos das mudas de espcies nativas da Mata Atlntica foram consultados em stios de viveiros do estado de Minas Gerais, e os preos relacionados recomposio topogrfica e da camada frtil do solo foram obtidos no portal do Governo da Paraba (tabela de valores com vigncia de abril a junho de 2010). A parcela subjetiva representada por fatores de correo especficos para determinada fitofisionomia e determinado tipo de vegetao de Mata Atlntica, conforme for o caso em questo. Esses fatores de correo foram estipulados com base na Lei 11.428, de 2006 (Lei da Mata Atlntica). O ndice de correo relacionado varivel tempo (correspondente ao lucro cessante) foi estabelecido com base na taxa atual de juros de flutuao do mercado, que varia de 6% a 12% anuais. O mtodo no tem a funo punitiva; apenas considera o custo de restaurao da rea. Para fins de punio, o Ministrio Pblico pode propor a multiplicao do valor obtido por um fator qualquer, a critrio dele. 3. RESuLTADOS E DISCuSSO 3.1. Minerao de ferro O estado de Minas Gerais possui um grande potencial minerrio. Em funo disso, os problemas ambientais decorrentes das atividades de extrao mineral so relevantes, especialmente na regio do Quadriltero

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Ferrfero, onde se concentra grande parte das atividades de minerao no estado [17]. O Quadriltero Ferrfero uma regio montanhosa, localizada entre os Biomas Mata Atlntica e Cerrado ambos considerados hotspots [18], [19] e que apresenta potencial minerrio para ferro, ouro, mangans, alumnio e topzio [20]. A minerao de ferro no Brasil, sozinha, representa mais de 50% do valor total da produo mineral brasileira, em Reais. Devido ao potencial da regio do Quadriltero Ferrfero para extrao de minrio, grande parte das terras e dos remanescentes de Mata Atlntica pertence a empresas mineradoras [21]. Considerando o alto grau de ameaa que existe em relao a esse Bioma, especificamente na regio do Quadriltero Ferrfero, fundamental a aplicao de multas proporcionais ao dano ambiental causado, visando garantir uma proporcionalidade entre a multa aplicada e o dano ambiental. A Constituio Federal de 1988 diz que competncia comum da unio, dos Estados, do Distrito Federal e dos Municpios fiscalizar as concesses de direitos de pesquisa e explorao de recursos minerais (art. 23, XI, CF/88) e complementa, de forma explcita, com a obrigao de recuperar o meio ambiente degradado (art. 225, 2, CF/88). Tratam-se dos princpios do poluidor-pagador e usurio-pagador. Na esfera cvel, tambm existe a obrigao de reparar o dano ambiental causado, que pode ser cobrada do usurio do recurso mineral ou do poluidor, independentemente de culpa ou dolo. Quanto s sanes em matria ambiental, a Lei 9.605, de 1998, nos artigos 54, 3, e 55, prev penas para aqueles que deixarem de cumprir exigncias da autoridade competente nos casos de risco ou dano ambiental grave ou irreversvel. Portanto, os projetos desenvolvimentistas da minerao de ferro tambm esto sujeitos ao cumprimento da legislao ambiental brasileira. No caso de atividades de minerao, necessrio o prvio licenciamento pelo rgo ambiental competente (art. 10 da Lei 6.938, de 1981). O pedido de licenciamento ambiental deve apresentar todas as informaes tcnicas a respeito do empreendimento, bem como o Estudo de Impacto Ambiental e seu respectivo Relatrio de Impacto Ambiental (EIA/RIMA) (art. 225, 1 e 2, inciso IV, da Constituio Federal e Resoluo CONAMA n 01, de 1986). Alm do EIA/RIMA, deve ser apresentado um Plano de Recuperao de rea Degradada (PRAD), considerando o impacto da atividade de minerao. Este deve ser implementado ao final da explorao, visando o retorno a uma forma de uso do solo e estabilidade do meio ambiente (art. 2, VII, da Lei 6.938/81, regulamentado pelo Decreto 97.632/89). Como a atividade mineradora extremamente impactante, o meio ambiente raramente preservado. Assim, a reparao ao status quo ante, ou seja, a restaurao, bastante difcil. Por este motivo, as exigncias do licenciamento ambiental so, em sua

maioria, de natureza compensatria [22]. 3.2. Minerao em regio Mata Atlntica O Bioma Mata Atlntica, considerado Patrimnio Nacional pela Constituio Federal de 1988 (art. 225, 4), o nico Bioma brasileiro que possui legislao especfica e tem mais de trs quartos de sua flora degradados. A lei 11.428, de 2006, dispe sobre a conservao, proteo, regenerao e utilizao da vegetao nativa desse Bioma. De acordo com seu artigo 2, as formaes florestais nativas e ecossistemas associados so Floresta Ombrfila Densa, Floresta Ombrfila Mista (ou Mata de Araucrias), Floresta Ombrfila Aberta, Floresta Estacional Semidecidual, Floresta Estacional Decidual, os manguezais, as vegetaes de restingas, os campos de altitude, os brejos interioranos e os encraves florestais do Nordeste. A referida lei, em seu artigo 6, pargrafo nico, deixa explcito que a utilizao da Mata Atlntica deve observar, dentre outros princpios, o princpio do usurio-pagador. As mineradoras, portanto, devem possuir mecanismos de compensao social, econmica e ambiental em funo da atividade que exercem. Neste caso, esses mecanismos devem constar no Estudo de Impacto Ambiental, no Relatrio de Impacto Ambiental e no Plano de Recuperao de reas Degradadas. Assim, de acordo com de Almeida [13], a valorao dos danos ambientais baseia-se no licenciamento ambiental, pois este o instrumento que define restries e condies para a proteo do meio ambiente. Ao deixarem de cumprir com o acordado, portanto, as mineradoras incorrem em crime ambiental, e os danos causados devem, consequentemente, ser valorados pela percia criminal ambiental. Ressalte-se que a avaliao dos danos limita-se s alteraes causadas no meio ambiente que direta ou indiretamente causaram uma degradao ambiental, no considerando a avaliao do meio ambiente em si. Ou seja, no o meio ambiente que avaliado, mas o custo das aes necessrias para retornar o ambiente alterado condio mais prxima anterior [13]. 3.3. Valorao de danos decorrentes da minerao de ferro Vrios so os mtodos de valorao de danos. Entretanto, para efeito de percia oficial, o mtodo a ser adotado deve ser prtico, de rpida execuo, de fcil compreenso e baixo custo, considerando o volume de demanda e os reduzidos recursos dos rgos responsveis pelos laudos ambientais [14]. E, acima de tudo, o mtodo adotado deve valer-se do princpio da proporcionalidade, o qual dita que quanto maior for a degradao, maior o valor final do custo total para restaurao do dano apurado [23]. O mtodo aqui proposto, assim como os mtodos j descritos na literatura, apresenta uma parcela objetiva,

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uma parcela subjetiva e uma parcela que funo do tempo. Esta ltima sempre decorre dos impactos da primeira, e, portanto, de mais difcil mensurao. A parcela objetiva do mtodo compreende o custo mnimo de reparao do dano, que compreende a devoluo da terra retirada com vistas recomposio topogrfica e da camada frtil do solo, seguido pelo plantio de mudas em nmero e espcie compatvel com o cenrio anterior [13]. A parcela subjetiva, por ser de difcil mensurao, sujeita-se ao critrio de subjetividade admitido pelo avaliador. Essa parcela subjetiva compreende, por exemplo, a complexidade do ecossistema degradado. Por fim, considera-se o tempo durante o qual a rea ficou sob o efeito da degradao [13]. um critrio para considerar o efeito dos danos diretos e indiretos no tempo seria a correo dos valores apurados utilizandose a taxa bancria de juros. Este valor ainda passvel de alterao em juzo, por acordo entre as partes. Por exemplo, ao invs de ser considerada a taxa de juros de um emprstimo, sugerida em laudo pericial, pode ser admitida a taxa de juros da poupana, se determinado pelo juiz. A Tabela (1) apresenta algumas espcies nativas da Mata Atlntica com a respectiva densidade de ocorrncia. Todas as mudas das espcies consideradas so vendidas a dois reais cada, podendo esse valor ser inferior se forem adquiridas mais de 5000 mudas na mesma compra. A densidade de cada uma dessas espcies se faz importante para efeitos de clculo do dano ambiental. Quanto maior a ocorrncia daquela espcie por metro quadrado, maior ser a quantidade de mudas a serem compradas para a restaurao da rea degrada.

A varivel regularizao da morfologia do solo, ou recomposio topogrfica, incorporada no clculo por ser fundamental para a estabilizao da paisagem. Nos casos de recuperao da rea degradada, a recomposio topogrfica seria a primeira e mais importante etapa, pois sobre ela que as etapas seguintes ocorrem, incluindo o desenvolvimento da comunidade vegetal. Aps essa etapa, a reposio de macro e micronutrientes se daria logo em seguida, pois a extrao de minrio de ferro representa a retirada dos minerais do solo, que, portanto, devem ser reintroduzidos artificialmente [30]. Segundo Furtini Neto et al. [31], a demanda das plantas por nutrientes mais intensa nos estgios iniciais de desenvolvimento. Tanto a Tab.(1) quanto a Tab.(2) apresentam os valores relacionados ao Custo de Reparao Objetivo (CRO). O valor final do CRO, portanto, dado por: CRO = (quantidade de mudas em funo da densidade de sua ocorrncia na natureza) + regularizao da morfologia do solo + (fertilizantes x quantidade) + (corretivos qumicos para o solo x quantidade). Os fatores relacionados ao Custo de Restaurao Subjetivo (CRS) levam em considerao a fitofisionomia de Mata Atlntica afetada (Tab.(3)) e o tipo de vegetao de Mata Atlntica que sofreu o dano ambiental (Tab.(4)), de forma que, como aqui proposto, aquele que degradou uma rea de maior importncia ecolgica, raridade ou grau de preservao, tenha causado um prejuzo maior do que aquele que desmatou uma rea j degradada ou de menor impacto ecolgico indireto. Para a parcela subjetiva, a escolha dos respectivos fatores de correo (Tab.(4)) foi baseada no artigo 8 da lei

Tabela 1. Valores adotados na avaliao de danos ambientais em regio de Mata Atlntica para espcies arbreas nativas. Nome cientfico Cariniana estrellensis Cedrela fissilis Copaifera langsdorffii Croton urucurana* Genipa americana Hymenaea courbaril Peltophorum dubium** Pterogyne nitens* Enterolobium contortisiliquum** Nome popular Jequitib-branco Cedro rosa Copaba Sangra Dgua Genipapo Jatob Canafstula Amendoim bravo Timboril/Timbava Famlia Lecythidaceae Meliaceae Caesalpiniaceae Euphorbiaceae Rubiaceae Caesalpiniaceae Caesalpiniaceae Caesalpiniaceae Mimosaceae Densidade / 2.500 m2

10 20 10 5 22 20 20,75 28 19,5

As espcies com (*) representam as espcies pioneiras. As espcies com (**) so consideradas espcies secundrias iniciais (Fonte: IanelliSrvin, [24]; Nogueira Jnior, [25]; Campos & Landgraff [26]; Oliveira et al. [27], Veiga et al. [28], Longhi et al. [29]).

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Tabela 2. Valores adotados para a parcela objetiva relacionada regularizao da morfologia do solo e sua correo qumica. Descrio Transporte de solo/areia em caminho basculante (t.Km) Material adicional (solo) para terraplenagem (m3) Recomposio de camada frtil do solo (m3) Plantio de arvore/arbustos nativos (m2) Fertilizantes Corretivos qumicos Fertilizante de liberao controlada (NPK*) (22,5 Kg) Calcrio dolomtico (t) Custo (R$)

0,74 4,44 2,54


8,53 349,90

Regularizao da morfologia do solo

16,00

* (N) nitrognio, (P) fsforo e (K) potssio (macronutrientes). Fonte: http://www.der.pb.gov.br/index.php?option=com_content&view=article&id=32&Itemid=86; http://www.mfrural.com.br/;http://comprar-vender.mfrural.com.br/detalhe.aspx?cdp=43286&nmoca=corretivos-calcario-dolomitico; Tabela 3. Fatores de correo para cada fitofisionomia de Mata Atlntica degradada. Fitofisionomia Floresta Ombrfila Densa Floresta Ombrfila Mista (ou Mata de Araucrias) e Floresta Ombrfila Aberta Estacional Semidecidual e Floresta Estacional Decidual Campos de Altitude Brejos interioranos Encraves Manguezal e Restinga

Fator de correo
1,5 2,0 2,5 3,0 3,5 4,0 4,5

Tabela 4. Fatores de correo para o tipo de vegetao de Mata Atlntica que sofreu o dano ambiental vegetao Secundria no estgio inicial de recuperao Secundria no estgio mdio de recuperao Secundria no estgio avanado de recuperao Primria

Fator de Correo
1,0 2,0 3,0 4,0

11.428, de 2006, no qual consta que o corte e a supresso da vegetao do Bioma Mata Atlntica devem ser feitos de maneira diferenciada para vegetao primria ou secundria e ainda considerar o estgio de regenerao da vegetao secundria. Nesse caso, o CRS (custo de restaurao subjetivo) obtido a partir da multiplicao entre o fator de correo para a fitofisionomia e o fator de correo em funo da vegetao nativa. A varivel tempo correspondente ao tempo decorrido entre o dano ambiental e a data em que a rea comea a ser restaurada e ao tempo necessrio para que as mudas atinjam altura e densidade prximas condio anterior ao dano baseia-se no tempo mnimo para restabelecimento da altura florestal prxima altura da mata antes da ocorrncia do dano e com densidade de indivduos semelhante. De acordo com Thoen [32], esse tempo corresponde a 10 anos. Essa varivel incorporada na forma de lucro cessante, ou seja, o tempo em que os servios ambientais deixam de ser fornecidos entre a data em que ocorreu o dano e a data em que

a rea comea a ser restaurada somado ao tempo necessrio para o restabelecimento de uma condio mnima semelhante condio original (neste caso, 10 anos). VT = CRO x CRS x tempo decorrido entre o dano e a restaurao x 1.06n (taxa atual de juros anual de flutuao do mercado elevado ao nmero de meses). CRS = fator de correo para a fitofisionomia x fator de correo em funo da vegetao nativa. VT = valor total. Se a explorao ilegal do minrio de ferro ocorrer nas hipteses listadas no artigo 11 da lei 11.428, de 2006, o valor total do dano ambiental deve considerar mais um fator de correo, sugerido aqui que seja proporcional quantidade de minrio retirada ilegalmente (Custo de Restaurao Objetivo 2, CRO2). Nesse contexto, o clculo deve incluir os custos para a reposio de todo o

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volume retirado de forma ilegal, como mostrado abaixo: CRO2 = [CRO + reposio do minrio de ferro retirado em excesso (m3)] x o custo de movimentao. VT = CRO2 x CRS x (1+6%) (taxa atual de juros anual de flutuao do mercado). Assim, empresas que no atendem compensao ambiental, prevista no licenciamento, e/ ou que no realizam o PRAD aps o esgotamento da mina ferem diretamente o artigo 32, II, da Lei 11.428, de 2006, que prev recuperao de rea equivalente rea do empreendimento, com as mesmas caractersticas ecolgicas, na mesma bacia hidrogrfica como medida compensatria, obrigao esta que deve ocorrer juntamente com a obrigao do disposto no artigo 36 da Lei no 9.985, de 2000, apoiar a implantao e manuteno de unidade de conservao. importante deixar claro que o objetivo da valorao do dano ambiental atm-se, apenas, ao fornecimento de um valor de referncia para a definio de multa e penas. A valorao do dano no prope aes de recuperao da rea degradada. Essa proposio funo do rgo ambiental competente. A valorao deve considerar os preos de mercado de mudas cujas famlias so representativas em nmero de espcies e em abundncia de indivduos no Bioma Mata Atlntica. Tambm pode ser considerado o preo das mudas de espcies que sejam tolerantes a altas concentraes de metais pesados no substrato. Assim, o valor usado pode se basear no preo das mudas de espcies facilitadoras, tolerantes a altas concentraes de metais pesados no substrato e com crescimento clonal, espcies normalmente priorizadas na definio de programas de recuperao de reas degradadas por minerao de ferro [33]. 4. CONCLuSES As sugestes de clculo aqui apresentadas certamente no representam uma compensao ideal para o dano total causado por uma mineradora que deixa de cumprir parte do acordado na Licena Ambiental ou no cumpre o constante no Plano de Recuperao de reas Degradadas. A degradao de reas nativas de Mata Atlntica, alm do dano ambiental, tambm representa um dano social e econmico a partir do momento em que se considera o potencial biotecnolgico de inmeras espcies desconhecidas e ainda no pesquisadas e o valor econmico associado a esse potencial, como potencial biotecnolgico relacionado produo de novos frmacos, reduo de aditivos qumicos na indstria alimentcia, promoo do crescimento vegetal para realizao de agricultura sustentvel e tantos outros ainda desconhecidos. Entretanto, os clculos apresentados so sugestes prticas e objetivas, de fcil aplicao na rea pericial criminal, requisitos freqentemente

exigidos pelos profissionais da rea em virtude da grande demanda de trabalho e do tempo escasso para emisso dos laudos (prazo de 10 dias, conforme Decreto-Lei n 3.689, de 1941). Apesar de todo modelo proposto ser uma simplificao da realidade, o valor total calculado a partir das frmulas propostas representa uma quantia expressiva a ser paga pela empresa causadora do dano. No caso, a responsabilidade civil pelo dano ambiental objetiva, conforme artigo 14, 1, da Lei 6.938, de 1981. Assim, alm da multa criminal, possvel que seja editada, tambm, a multa de cunho administrativo. Em se tratando de grandes empresas, as despesas com controle ambiental na atividade de minerao, incluindo a revegetao de reas degradadas, so inferiores a 1% do custo de investimentos de uma grande lavra [34]. Informao esta que chama responsabilidade a percia ambiental oficial no sentido de incorporar variveis tantas quantas forem possveis sempre levando em considerao a praticidade, objetividade e simplicidade a fim de edio de multa em valor que mostre ao minerador pelo menos parte do valor que o meio ambiente possui, e sua funo seja, de fato, educativa. H alguns anos, os rgos responsveis pela regulamentao das minas de superfcie tm priorizado metas de longo prazo, incluindo o uso futuro da terra [15]. Esse tipo de ao representa a integrao, aos ecossistemas, de reas com suas funes ecolgicas recuperadas, permitindo o desenvolvimento econmico com menor passivo ambiental [33]. Para a incorporao do desenvolvimento sustentvel nas grandes empresas de minerao, seria interessante emitir uma certificao para os minerais produzidos em consonncia com as normas de controle ambiental. REFERNCIAS [1] C.A.G. Jesus. Ferro/Ao. In: Economia mineral do Brasil - 2009. Departamento Nacional de Produo Mineral (DNPM), 2009. Disponvel em: <http://www.dnpm. gov.br/conteudo.asp?IDSecao=68&IDPagina=1461> Acesso em: 09 jul. 2010. [2] M.L. Barreto. Minerao e desenvolvimento sustentvel: desafios para o Brasil, CETEM/MCT, Brasil (2001) 215p. [3] J.C.F. Pinheiro. A minerao brasileira de ferro e a reestruturao do setor siderurgico. Tese de Doutorado, Instituto de Gocincias, universidade Estadual de Campinas (2000). [4] L.P. Lamoso. A explorao do minrio de ferro no Brasil e no Mato Grosso do Sul. Tese de Doutorado, Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras, universidade de So Paulo (2001). [5] D.J. Germani. A Minerao no Brasil: relatrio Final. Centro de Gesto e Estudos Estratgicos: Rio de Janeiro (2002) 79p. [6] E.R. Cabral; Institucionalizao da questo ambiental e explorao mineral no Par e Minas Gerais: valorizao

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Efeito da escopolamina sobre o desenvolvimento de Chrysomya putoria (Diptera: Calliphoridae) e sua importncia para a estimativa do intervalo ps-morte
P.J. Thyssen*, M.D. Grella
Departamento de Biologia Animal, Instituto de Biologia, UNICAMP, Campinas (SP), Brasil * E-mail para correspondncia: thyssenpj@yahoo.com.br. Tel.: +55-19-35216299. Recebido em 28/06/2011; Aceito em 01/09/2011

RESuMO A presena de drogas nos tecidos de um corpo pode afetar o desenvolvimento de larvas de moscas necrfagas que so encontradas alimentando-se neste substrato. Essa observao j foi constatada para vrias drogas tais como herona, cocana, certos analgsicos, e compostos anfetamnicos e benzodiazepnicos, entre outras. Assim, neste estudo investigamos o efeito da escopolamina uma droga amplamente usada como analgsico sobre a taxa de desenvolvimento de larvas de Chrysomya putoria (Diptera: Calliphoridae), visando tambm avaliar e quantificar as conseqncias de tal interferncia para a estimativa do intervalo ps-morte (IPM). Os resultados aqui obtidos mostram claramente que a escopolamina afetou significativamente a taxa de desenvolvimento de imaturos de C. putoria, quando presente em seu substrato alimentar. Tendo em vista que o IPM em muitos casos calculado levando em considerao o peso ou a idade dos imaturos coletados em um corpo, a no considerao deste fator de interferncia negativa pode conseqentemente levar a uma subestimativa do tempo de morte em at 48 horas, em certos casos. Palavras-chave: Mosca varejeira; Entomologia Forense; Toxicologia; Brasil. ABSTRACT The presence of drugs in the tissues of a corpse may affect the development of the necrophagous fly larvae feeding on the body. This observation has already been reported for several drugs such as heroine, cocaine, several analgesics, and amphetamines and benzodiazepines compounds, among others. In this study we investigated the effect of scopolamine - a drug widely used as analgesic - on the rate of development of larvae of Chrysomya putoria (Diptera: Calliphoridae), to also evaluate and quantifying the consequences of this interference for estimating the postmortem interval (PMI). The results obtained here clearly show that scopolamine has significantly affected the developmental rate of the immatures of C. putoria, when present in their substrate. Since the PMI in many cases is calculated taking into account the weight or age of the immatures collected in a body, the failure to consider this factor of negative interference may therefore lead to an underestimation of the time of death up to 48 hours in certain cases. Keywords: Blowfly; Forensic Entomology; Toxicology; Brazil.

1. INTRODuO Corpos de animais em decomposio so fontes alimentares temporrias para diversos organismos tais como fungos, bactrias, artrpodes e at mesmo vertebrados [1]. Neste micro-habitat formado, os imaturos de dpteros e colepteros (Insecta) so as Ordens predominantes durante quase toda a colonizao [2]. Dentro do contexto forense, o estudo de insetos e outros artrpodes associado aos demais procedimentos periciais tem como principal propsito levantar informaes e vestgios que possam ter valia para o andamento ou concluso de um processo investigativo [3]. Desse modo, os dados entomolgicos podem ser transformados em provas contundentes para a condenao ou refutao do libi de um suspeito de crime ao demonstrar se houve, por exemplo, movimentao de um cadver de um local para outro ou quando usados para estimar o intervalo ps-morte (IPM), ou seja, o

tempo decorrido desde a morte at a descoberta do corpo [4]-[5]. Atualmente, um ramo mais recente da entomologia forense a Entomotoxicologia tem revelado novas abordagens e alternativas para deteco de drogas ou toxinas em cadveres, em especial queles que se apresentam em avanado estgio de decomposio e com suspeita de envenenamento, dada a no disponibilidade dos lquidos corporais como, por exemplo, sangue e urina, ou de tecidos moles, que constituem rgos internos primariamente pesquisados para este fim [6]. Nesse caso, a identificao de uma substncia que tenha sido consumida pela vtima antes do bito pode ser obtida por meio do exame das larvas de insetos que so encontradas alimentando-se dos tecidos cadavricos, uma vez que elas incorporam a substncia em seus tecidos larvais por meio do processo metablico ps-digesto. Entre as tcnicas usualmente empregadas na identificao de substncias, esto a cromatografia [7]

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Tabela 1. Mdias para o peso registrado (mg) (xSD) a cada 12 h durante o desenvolvimento larval de Chrysomya putoria exposta s diferentes concentraes de escopolamina e em relao ao grupo controle, onde (a) representa o fim do segundo estdio larval; (b) marca o fim do terceiro estdio larval; (c) incio da fase de pupa; e (d) 100% de mortalidade dos indivduos no segundo estdio. Idade (h) 12 24 36 48 60 72 84 96 108 120 132 144 156 168 180 192 204 Grupos experimentais Controle 0,20,01 0,70,01 2,10,45 6,21,30 15,42,51 (a) 25,95,12 37,64,14 41,15,87 49,01,93 46,22,60 (b) 46,14,95 42,12,64 35,63,83 (c) 0,25 x DL 0,20,01 0,70,01 1,70,39 4,20,77 10,21,31 (a) 21,02,23 33,44,31 39,82,17 45,62,76 44,53,50 (b) 44,52,51 39,32,05 35,51,14 (c) 0,5 x DL 0,10,01 0,40,01 0,90,01 3,10,53 6,61,52 (a) 10,12,11 19,43,16 28,73,71 35,63,94 38,63,53 43,42,45 39,93,28 (b) 42,72,89 37,12,17 32,92,50 (c) 1 x DL 0,10,01 0,30,01 0,50,01 1,00,01 2,50,58 4,00,91 6,71,43 (a) 10,93,02 16,74,92 20,68,10 24,06,76 24,65,47 23,15,56 26,82,82 28,91,60 (b) 28,62,96 24,94,29 (c) 2 x DL 0,10,01 0,20,01 0,20,01 0,30,01 0,50,01 (d) -

Tabela 2. Intervalo de emergncia (h) e taxa de viabilidade (%) de Chrysomya putoria em relao aos diferentes grupos experimentais. *No grupo 2 x DL a mortalidade de 100% dos indivduos foi registrada no segundo estdio larval, assim os mesmos parmetros relatados para os demais grupos no puderam ser observados. Grupos experimentais* Controle 0,25 x DL 0,5 x DL 1 x DL Intervalo de emergncia (h) 254 252 288 312 Taxa de viabilidade (%) 95.6 93.2 76.2 69.2

que tambm se encontra includo em demais preparaes comerciais [16]. Neste estudo, investigamos o efeito da escopolamina sobre a taxa de desenvolvimento larval de Chrysomya putoria (Wiedemann) (Diptera: Calliphoridae), uma mosca assinalada como de importncia forense na regio Sudeste do Brasil [17], objetivando avaliar e quantificar as conseqncias de tal interferncia para a estimativa do IPM. 2. METODOLOGIA Os espcimes usados neste estudo foram obtidos de colnias de moscas adultas de C. putoria estabelecidas em laboratrio, a partir de coletas em campo realizadas na rea urbana do municpio de Campinas (22o5402S, 47o 0339O), Estado de So Paulo, Brasil. Para tanto foram usadas armadilhas adaptadas para este fim contendo iscas como peixe e vsceras de frango, as quais permaneceram expostas por um perodo de 24 h. Aps a coleta, os espcimes foram submetidos a baixas temperaturas (-20C durante 90 segundos) para permitir a correta triagem e identificao do organismo foco deste estudo [18], sendo ento transferidos para gaiolas plsticas transparentes (30x30x50 cm), mantidas em sala climatizada (271C, 12 h de fotofase e 7010% de uR), onde os adultos foram alimentados com soluo aucarada e gua ad libitum. uma poro de 50 g de carne bovina moda crua foi oferecida para as fmeas para estimular a oviposio. Os ovos depositados pelas fmeas foram mantidos sobre esse substrato at que as

e a imunohistoqumica [8]. Pelo fato de certas substncias poderem afetar o desenvolvimento das larvas ditas necrfagas, tal como fora registrado para herona [9], cocana [10], escopolamina [11], alguns analgsicos e compostos anfetamnicos e benzodiazepnicos [12]-[14], estudos que investigam e quantificam este grau de interferncia sobre os aspectos biolgicos de diferentes espcies ganham elevada importncia. Isto porque o IPM estimado pelos mtodos entomolgicos na maioria das vezes usa como parmetro o tempo de vida ou a idade do inseto, levando em conta as possveis influncias que pairam sobre este ciclo. A escopolamina, comercialmente mais conhecida como Buscopan (Boehringer Ingelheim), est entre os primeiros analgsicos de ampla utilizao no Brasil atuando como depressor do sistema nervoso central [15]. Registros de intoxicao por esse alcalide no so raros, tanto por ingesto deliberada quanto acidental, uma vez

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larvas eclodissem, permitindo assim iniciar a montagem dos grupos experimentais. Considerando que a dose letal (DL) de escopolamina para o homem de 1270 mg/kg, quatro grupos experimentais foram montados com as seguintes concentraes: 0,25 x DL; 0,5 x DL; 1 x DL e 2 x DL. Paralelamente um grupo controle, sem adio da droga, foi mantido sob as mesmas condies para avaliar o efeito do tratamento. Para cada grupo foram feitas trs rplicas, das quais eram retiradas amostras aleatoriamente para registro da massa corporal das larvas (10 espcimes a cada 12 h, desde a ecloso da larva at a pupariao ou enquanto era possvel encontrar imaturos vivos) e do tempo de desenvolvimento (considerando cada estdio e o estgio imaturo total) frente cada tratamento, alm do clculo da taxa de viabilidade (percentagem de sobrevivncia at atingir o estgio adulto). Cada rplica era representada por um grupo de 150 larvas acondicionadas em potes plsticos, devidamente identificados e contendo dieta artificial prpria para o desenvolvimento de insetos necrfagos [19]. Nos grupos experimentais, cujo objetivo era observar o efeito da droga sobre o desenvolvimento, foram acrescidas diferentes concentraes de escopolamina na e durante o preparo da dieta. Para comparar o efeito dos tratamentos sobre a taxa de desenvolvimento larval considerando a variao do peso como varivel resposta foi feita uma ANOVA de um fator com auxlio do programa estatstico S.A.S. [20]. 3. RESuLTADOS E DISCuSSO A taxa de desenvolvimento de C. putoria, mensurada pelo ganho de massa corprea, foi significativamente influenciada pela presena de escopolamina (F= 3,383; p= 0,0141) no substrato alimentar utilizado por esta espcie, como mostrado na Fig. 1. A mesma observao vlida com relao ao tempo total de vida do inseto em seu estgio imaturo, ou seja, desde a ecloso at a pupariao Tab.(1) incluindo o intervalo de emergncia (que antecede o nascimento dos adultos) Tab.(2), principalmente quando em exposio s altas concentraes da droga. Se fosse levada em conta apenas a fase larval para estimar o IPM, por exemplo, imaturos provenientes dos grupos 0,5 x DL (= 635 mg/kg) e 1 x DL (= 1270 mg/kg) atingiriam a fase de pupa somente 24 e 48 h depois do grupo controle, respectivamente, sendo que os intervalos so ainda maiores quando adicionados os limites de tempo at o nascimento dos adultos, de 58 e 106 h, respectivamente, ou 2,4 e 4,4 dias. Essa observao, em conjunto com a publicada por Oliveira e colaboradores [21] que registraram um efeito similar da escopolamina sobre o desenvolvimento da espcie Chrysomya megacephala (Fabricius) (Diptera: Calliphoridae), justifica a relevncia na investigao da presena de tal substncia nos tecidos/rgos de um cadver, assim

50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0

peso (mg)

controle 0,5 x DL 2 x DL

0,25 x DL 1 x DL

12

24

36

48

60

72

84

96

108

120

132

144

156

168

180

192

204

idade (horas)

Figura 1. Curvas de desenvolvimento de Chrysomya putoria na fase larval criada sob diferentes concentraes de escopolamina em relao ao grupo controle.

como nas larvas de insetos que so recolhidas do corpo, quer seja na busca da causa da morte [22] ou para estimar o tempo de bito. um dos primeiros trabalhos que corrobora a possibilidade do uso de insetos para aferir um caso de morte causado por overdose de barbitricos foi feito por Beyer e colaboradores [23], o qual denota a aplicao prtica da entomotoxicologia tal como presumido acima. Neste, os autores registram como foi feita a deteco de fenobarbital em tecidos larvais de Cochliomyia macellaria (Fabricius, 1805) (Diptera: Calliphoridae) a partir de cromatografia gasosa (CG) e cromatografia de camada fina (em ingls TLC). possvel salientar ainda que apenas concentraes a partir de 0,5 x DL exeram um efeito inibidor no crescimento de C. putoria, visto que as larvas submetidas concentrao de 0,25 x DL (= 317,5 mg/ kg) apresentaram ganho de massa corprea e tempo de desenvolvimento prximos ao controle. A taxa de viabilidade registrada para C. putoria decresceu medida que as concentraes de escopolamina na qual cada grupo tratado foi exposto aumentavam, exceto para 0,25 x DL Tab.(2). Para os imaturos expostos a 2 x DL (= 2540 mg/kg) as conseqncias passam a ser negativas ou deletrias, visto que 100% dos indivduos morreram decorridas apenas 60 h de ecloso, com um ganho de peso bem inferior ao que fora observado no grupo controle at as 24 h de vida. Assim, em casos que envolvam o encontro de larvas que apresentem este tipo de padro de desenvolvimento ecloso dos ovos, porm retardo no crescimento ou alta mortalidade , a exposio a uma substncia txica, no se restringindo somente a escopolamina, deve ser prioritariamente considerada. Demais estudos que vem sendo conduzidos com vrias espcies de moscas das famlias Calliphoridae e Sarcophagidae (Diptera), por serem estas as pioneiras na colonizao de cadveres, expostas diversas classes de substncias sugerem que o desenvolvimento larval responde diferentemente tanto em relao ao tipo e concentrao da droga quanto a espcie considerada

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P.J. THySSEN / REVISTA BRASILEIRA DE CRIMINALSTICA, V. 1, N.1, 39-42 (2011)

para o estudo. Embora as observaes aqui feitas estejam restritas a apenas poucas espcies de moscas, no se pode descartar que variaes similares sobre o desenvolvimento larval possam ocorrer com outras espcies de varejeiras que eventualmente se alimentem em tecidos contendo escopolamina ou seus metablitos. 4. CONCLuSES Os resultados aqui obtidos mostram claramente que a escopolamina afeta significativamente a taxa de desenvolvimento de imaturos de Chrysomya putoria, quando presente em seu substrato alimentar. Tendo em vista que o IPM em muitos casos calculado levando em considerao o peso ou a idade dos imaturos coletados em um corpo, a no considerao deste fator de interferncia negativa pode conseqentemente levar a uma subestimativa do tempo de morte. AGRADECIMENTOS Este estudo contou com o apoio da Fundao de Amparo Pesquisa do Estado de So Paulo (FAPESP) na forma de concesso de bolsa e auxlio pesquisa, modalidade Projeto Temtico (processos n 06/55206-9, 05/54480-7 e 04/08544-0). REFERNCIA BIBLIOGRFICA [1] K.G.V. Smith. A manual of forensic entomology, Cornell university Press, united States of America (1986) 205p. [2] P. Nuorteva. Sarcosaprophagous insects as forensic indicators. In: Tedeshi, C.G.; Eckert, W.G.; Tedeshi, L.G. (eds.). Forensic medicine: a study in trauma and environmental hazards, united States of America (1977) 1072-1095. [3] P.J. Thyssen. Entomologia Forense. In: C.B. Marcondes. Entomologia mdica e veterinria, Atheneu, Brasil (2011) 129-137. [4] B. Keh. Scope and applications of forensic entomology. Ann. Rev. Entomol. 30: 137-154 (1985). [5] S.L. Van Laerhoven; G.S. Anderson. Insect succession on buried carrion in two biogeoclimatic zones of British Columbia. J. Forensic Sci. 38: 702-707 (1999). [6] F. Introna; C.P. Campobasso; M.L. Goff. Entomotoxicology. Forensic Sci. Int. 120: 42-47. (2001). [7] L.M.L. Carvalho; A.X. Linhares; J.R. Trigo. Determination of drug levels and the effect of diazepam on the growth of necrophagous flies of forensic importance in southeastern Brazil. Forensic Sci. Int. 120: 140-144 (2001). [8] B. Bourel; L. Fleurisse; V. Hdouin; J.C. Cailliez; C. Creusy; D. Gosset; M.L. Goff. Immunohistochemical contribution to the study of morphine metabolism in Calliphoridae larvae and implications in forensic entomotoxicology. J. Forensic Sci. 46: 596-599 (2001). [9] F. Introna; C. Dico; Y.H. Caplan; J.E. Smialek. Opiate analysis in cadaveric blowfly larvae as an indicator of narcotic intoxication. J. Forensic Sci. 35: 118122 42

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RESENHAS

E. CuNICO / REVISTA BRASILEIRA DE CRIMINALSTICA, V. 1, N.1, 44 (2011)

Percias em locais de morte violenta


E. Cunico a
a

Seo de Crimes Contra a Pessoa, Instituto de Criminalstica do Paran,Curitiba (PR), Brasil *Endereo de e-mail para correspondncia:edimarcunico@gmail.com. Recebido em 29/07/2011; Aceito em 12/09/2011

1. RESENHA Esta obra foi publicada em dezembro de 2010 como resultado 15 anos de atuao como Perito Criminal no Estado do Paran, e est focada nas necessidades do Perito Criminal que atende os Locais de Morte Violenta contemplados no captulo dos Crimes Contra a Vida do Cdigo Penal Brasileiro: homicdio, induzimento, auxlio e instigao ao suicdio, infanticdio e aborto. Na sua essncia, a obra est dividida em trs partes: a. Conhecimentos bsicos para o atendimento aos locais de morte; b.Procedimentos essenciais para o atendimento aos locais de morte; c. Elaborao do laudo de exame pericial. So 388 pginas com mais de 300 fotografias coloridas mostrando todos os tipos de feridas e os detalhes dos locais de morte, trazendo a realidade dos locais de morte violenta e sua importncia como o crime nmero um da humanidade. Essencial para o Perito Criminal, para os profissionais da segurana pblica, dos rgos Policiais, do Ministrio Pblico, do Judicirio e das reas do Direito Penal e Processual. Os ttulos desenvolvidos nesta obra so os seguintes: A Morte e a Legislao Brasileira Aes Mecnicas, Armas e Instrumentos Armas de Fogo Traumatologia Forense Processos Asfxicos Energia Termoqumica, Eltrica e Explosiva Abortamento e Infanticdio Toxicologia Forense (Co-autora: Dra. Miriam Machado Cunico) Tanatologia Forense Identificao Forense Levantamento de Local de Morte Corpo de Delito Papiloscopia Forense Atendimento aos Locais de Morte Locais de Morte Tpicos Documentos Tcnicos Laudo Genrico.

Percias em Locais de Morte violenta / Edimar Cunico. 1. Ed. Curitiba: Edio do Autor, 2010. Nmero de pginas: 388 Formato: 15 cm por 21 cm Brochura ISBN 978-85-910554-0-1

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P.E.g. DA COSTA FILHO / REVISTA BRASILEIRA DE CRIMINALSTICA, V. 1, N.1, 45 (2011)

Medicina legal e criminalstica


P.E.G. da Costa Filho a
a Instituto de Criminalstica, Polcia Civil do Distrito Federal, Braslia (DF), Brasil *Endereo de e-mail para correspondncia: pauloenio@yahoo.com.br. Tel.: +55-61-33625655; fax: +55-61-33625658. Recebido em 31/08/2011; Aceito em 15/09/2011

1. RESENHA DESCRITIvA Medicina Legal e Criminalstica aborda, de forma geral, os conceitos e assuntos mais importantes relacionados a essas duas reas do conhecimento. indicado para profissionais dos cargos de Delegado das Polcias Civil e Federal, Perito Mdico-legista, Perito Odontolegista, Perito Criminal e Papiloscopista Policial, entre outros, mas tambm para interessados em concursos para provimento de vagas nas reas policial e pericial, para curiosos e amantes do assunto. Nessa obra, o leitor encontrar assuntos como Medicina Legal e direitos humanos, percias e peritos, documentos mdico-legais, Antropologia Forense, Traumatologia Forense, Toxicologia Forense, Tanatologia Forense, Psicopatologia Forense, Sexologia Forense, Gentica Forense, local de crime, corpo de delito, alm de vestgios, indcios e provas no processo penal. Os tpicos mais importantes encontram-se ilustrados com figuras e comentados por meio de citaes de outros autores e da legislao brasileira vigente. Como curiosidade e forma de contribuio ao leitor, os epnimos (aqueles que emprestam seu nome a alguma coisa) aparecem ao longo do texto, com definies sucintas e explicaes de sua importncia. Como se no bastasse, a obra est estruturada com base nos temas mais cobrados nas provas de concursos recentes. Alm disso, o leitor tambm conta com a possibilidade de verificar o conhecimento prprio mediante 77 testes, com questes de provas passadas, apresentados nesta edio. Todas as proposies so comentadas e justificadas conforme sua correo ou incorreo, trazendo explicaes e reflexes de maneira simples e detalhada. Assim, essa obra, que de forma alguma objetiva exaurir todos os temas relacionados Medicina Legal e Criminalstica, proporciona ao leitor uma ferramenta importante no preparo necessrio para atingir seus objetivos profissionais e estudantis, alm de configurar como pea importante para pesquisa e auxlio ao profissional durante o exerccio do trabalho policial e pericial.

Medicina Legal e Criminalstica / Paulo Enio Garcia da Costa Filho. 1. Ed. Braslia: Vestcon, 2010. Nmero de pginas: 234 Formato: 21 cm por 15,1 cm ISBN 978-85-381-0392-9

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F.H.S.O. VIEIRA / REVISTA BRASILEIRA DE CRIMINALSTICA 1(1), 8-16 (2011)

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