Bidens pilosa e herbicidas inibidores da ALS

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CURVAS DE DOSE-RESPOSTA DE BITIPOS RESISTENTE E SUSCETVEL DE Bidens pilosa L. AOS HERBICIDAS INIBIDORES DA ALS
Pedro Jacob Christoffoleti
Depto. de Produo Vegetal - USP/ESALQ, C.P. 9 - CEP: 13418-900 - Piracicaba, SP. Bolsista CNPq. e-mail <pjchrist@esalq.usp.br>

RESUMO: A resistncia de plantas daninhas aos herbicidas um fenmeno de ocorrncia mundial, sendo caracterizada como uma reduo na resposta de uma populao a produtos qumicos, em sua dose recomendada, como resultado de sua aplicao sucessiva. O nmero de casos de resistncia registrados no Brasil tem aumentado significativamente nos ltimos anos, porm poucos estudos cientficos tm sido feitos para elucidar este fenmeno. Sendo assim, foram conduzidos experimentos com o objetivo de elaborao de curvas de doseresposta comparativa entre dois bitipos da planta daninha pico-preto (Bidens pilosa L.), sendo um resistente (R) e outro suscetvel (S) aos herbicidas inibidores da ALS. Para isso, foram utilizados trs herbicidas do grupo qumico das sulfonilurias e um do grupo qumico das imidazolinonas. No estdio de trs a quatro pares de folhas, as plantas R e S de B. pilosa foram pulverizadas com os herbicidas chlorimuron-ethyl, metsulfuronmethyl, nicosulfuron e imazethapyr, em doses correspondentes a mltiplos de 0,0; 0,001; 0,01; 0,1; 1,0; 10; 100 e 1000 vezes a dose recomendada para aplicao de campo. A partir dos resultados da porcentagem de fitotoxicidade foi feito o ajuste das curvas de dose-resposta. As relaes entre o C50 do bitipo resistente e o C50 do bitipo suscetvel (R/S) foram de 40,92; 173,84; 57,47 e 57,16 para os herbicidas chlorimuron-ethyl, nicosulfuron, metsulfuron-methyl, e imazethapyr, respectivamente. O bitipo R de B. pilosa apresenta elevado nvel de resistncia cruzada aos herbicidas inibidores da ALS, do grupo qumico das sulfonilurias e imidazolinonas. Palavras-chave: planta daninha, resistncia aos herbicidas, sulfoniluria, imidazolinona

RATE-RESPONSE CURVES OF RESISTANT AND SUSCEPTIBLE Bidens pilosa L. BIOTYPES TO ALS-INHIBITOR HERBICIDES
ABSTRACT: Weed herbicide resistance is a phenomenon defined as a response reduction of a population to a chemical product sprayed at a recommended rate, as a result of its continuous application. The incidence of herbicide-resistant weeds in Brazil has increased lately, but few scientific studies have been conducted to elucidate the phenomenon. In this regard, experiments aiming to build rate-response curves comparing a resistant (R) and a susceptible (S) biotype of the weed Bidens pilosa L., to ALS inhibitor herbicides, were set up. At the stage of three to four leaves, biotypes R and S of B. pilosa were sprayed with the herbicides chlorymuron-ethyl, metsulfuronmethyl, nicosulfuron and imazethapyr, at multiples of 0.0; 0.001, 0.01, 0.1; 1.0; 10; 100 and 1,000 of the recommended field rates. Results lead to the building of percentage control rate-response curves. The ratio between the C50 of the resistant biotype, divided by the C50 of the susceptible biotype, were 40.92; 173.84; 57.47 and 57.16 for the herbicides chlorymuron-ethyl, nicosulfuron, metsulfuron-methyl and imazethapyr, respectively. The R biotype of B. pilosa had a high degree of resistance in relation to all ALS inhibitor herbicides studied, being also cross resistant to imidazolinone and sulfonylurea. Key words: weed, herbicide resistance, sulfonylurea, imidazolinone

INTRODUO
A comprovao cientfica da resistncia de populaes de plantas daninhas aos herbicidas pode ser feita atravs de ensaios de campo, casa-de-vegetao e laboratrio. Ryan (1970) foi o primeiro pesquisador a publicar dados referentes comprovao cientfica de resistncia aos herbicidas inibidores do fotossistema II. Populaes da planta daninha Senecio vulgaris, infestantes de viveiros comerciais de mudas de pinus tratadas durante 11 anos consecutivos com herbicidas do grupo qumico das triazinas, no eram mais controladas satisfatoriamente por estes herbicidas. A
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partir de sementes coletadas desta rea, e de reas onde estes herbicidas nunca tinham sido aplicados como forma de controle da planta daninha S. vulgaris, Ryan (1970) desenvolveu um protocolo de casa-de-vegetao para comprovao cientfica da resistncia da planta daninha aos herbicidas do grupo qumico das triazinas. A comprovao da resistncia de bitipos de plantas daninhas aos herbicidas atravs de experimentos de casa-de-vegetao apresenta diversas vantagens em relao a outros mtodos cientficos de deteco, porm existem aspectos negativos de seu uso (Truelove & Hensley, 1982). Dentre as desvantagens, destaca-se que os mecanismos de resistncia das plantas no so

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determinadas por este tipo de experimento, adicionado ao fato de que a sua conduo demorada. Por outro lado, como vantagens, evidencia-se a possibilidade de teste de um grande nmero de plantas, alm de no ser necessrio o uso de mo-de-obra especializada na instalao dos testes. Apesar das desvantagens, esta metodologia de teste da resistncia de bitipos de plantas daninhas a herbicidas est sendo usada como indispensvel na comprovao cientfica, complementando os resultados de campo e laboratrio. Atravs da curva de dose-resposta, determinado o ndice C50, ou seja, a dose de herbicida necessria para controlar 50% da populao. Este ndice usado para comparao entre os bitipos resistentes e suscetveis. O uso de regresso no linear descrito por Streibig et al. (1993) o mtodo mais adaptado para elaborao de curva de dose-resposta entre herbicida e planta daninha. Uma adaptao desse modelo e de outros originalmente apresentados na literatura foi proposta por Seefeldt et al. (1995). Esses autores sugerem que o modelo log-logstico apresenta inmeras vantagens em relao a outros mtodos de anlise. A principal delas que um dos termos integrantes da equao no linear o C 50 , facilitando assim a comparao do nvel de resistncia dos bitipos testados. Desta forma, o modelo log-logstico pode ser preferencialmente utilizado nas determinaes de curvas de dose-resposta de plantas daninhas a herbicidas (Seefeldt et al., 1995). Na literatura existem diversos trabalhos que procuram determinar a relao entre o C 50 do bitipo resistente e o C 50 do bitipo suscetvel, quantificando assim a resistncia de bitipos de plantas daninhas aos herbicidas inibidores da ALS (Hall et al., 1998; Boutsalis & Powles, 1995; Chaves et al., 1997; Friesen et al., 1993). Para isso podem tambm ser usadas curvas de crescimento comparativas, descritas por Causton et al. (1978) e Hunt (1982); e assim elaborar modelos matemticos de estudos de diferenciao entre os bitipos R e S (France & Thornley, 1984). Os valores de C50 tm sido usados no apenas nos estudos de caracterizao de resistncia de bitipos de plantas daninhas, mas tambm na determinao da seletividade de variedades tolerantes de cultivos, comparadas com variedades no melhoradas para essa caracterstica. Pornprom & Yong (1997) utilizaram a metodologia do C 50 para estudo da tolerncia de cultivares melhorados de pimenta. As bases fisiolgicas da seletividade dos herbicidas nicosulfuron e primisulfuron foram determinadas por Carey et al. (1997), sendo que a sensibilidade diferencial de cinco espcies de plantas foi determinada atravs dos valores de C50. Hart et al. (1993) conduziram estudos em casa-devegetao e laboratrio para determinar o grau de dominncia monognica de variedades de beterraba aucareira resistente aos herbicidas do grupo qumico das sulfonilurias, comparando beterraba diplide
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homozigota e heterozigota. Determinaram o C50 atravs de doses crescentes dos herbicidas primisulfuron, thifensulfuron e chlorimuron-ethyl. Lovell et al. (1996) testaram a resistncia de bitipos das plantas daninhas Kochia scoparia e Xanthium strumarium provenientes de reas tratadas com herbicidas inibidores da ALS na regio oeste dos Estados Unidos. Dentre os testes in vivo efetuados, foram determinadas curvas de dose-resposta dos bitipos resistentes e suscetveis. A partir das equaes utilizadas para representar os dados foi possvel determinar o C50 das populaes e diferenciar, assim, o nvel de resistncia entre as populaes. O bitipo de Kochia scoparia proveniente do estado de Idaho apresentou uma relao C50 (resistente)/ C50(suscetvel) de 160, sendo que para o bitipo proveniente de Montana, esta relao foi de 170. No Brasil, o primeiro relato sobre o uso do C50 como forma de comprovao e determinao do nvel de resistncia de um bitipo de planta daninha foi feito por Christoffoleti et al. (1996). Foram conduzidos diversos experimentos em condies de casa-de-vegetao, utilizando bitipos resistentes e suscetveis de Bidens pilosa, e doses crescentes de herbicidas inibidores da ALS. O C 50 foi determinado para os herbicidas imazethapyr, nicosulfuron, metsulfuron-methyl e chlorimuron-ethyl, que baseado nos resultados de fitomassa coletada 21 dias aps a aplicao dos herbicidas, foram 370, 39, 26 e 12 vezes maior para o bitipo resistente, comparado com o bitipo suscetvel, respectivamente. O objetivo deste experimento foi caracterizar o nvel de resistncia de um bitipo da planta daninha Bidens pilosa aos herbicidas inibidores da ALS, em condies de casa-de-vegetao, atravs de curvas de dose-resposta.

MATERIAL E MTODOS
As sementes de B. pilosa supostamente resistente foram obtidas de uma rea localizada no municpio de So Gabriel do Oeste, no Estado de Mato Grosso do Sul (longitude 54o33' W e latitude de 19o56' S), em uma propriedade cultivada com soja, na qual herbicidas inibidores da ALS tinham sido aplicados por pelo menos oito anos sucessivos. No entanto, nas safras 93/94 e 94/95, foram observadas falhas no controle do pico-preto por estes herbicidas em alguns talhes da propriedade. Na safra 95/96, foi escolhido um dos talhes onde ocorreram falhas de controle para coleta de sementes. Para a coleta das sementes suscetveis foram escolhidas plantas de uma rea localizada aproximadamente 25 km de distncia do talho, dentro da cidade de So Gabriel do Oeste, MS. Nessa rea, existia uma horta comunitria h muitos anos, onde com certeza os herbicidas inibidores da ALS nunca tinham sido

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aplicados, bem como a rea era isolada completamente daquelas com suspeita de resistncia. Essa populao de plantas daninhas foi considerada como suscetvel e procedente da mesma regio geogrfica. Foram escolhidas, no mnimo, 50 plantas, sadias e com sementes maduras, de onde foram coletadas aproximadamente 100 g de sementes. Procurou-se coletar aproximadamente a mesma quantidade de sementes de cada planta, ou seja, no mnimo 20 inflorescncias de cada uma. As sementes foram, ento, acondicionadas em sacos de papel, para posterior transporte at o laboratrio do Departamento de Produo Vegetal da USP/ESALQ, onde foram armazenadas em local seco e temperatura ambiente, aguardando o momento da instalao dos experimentos. No dia 15/03/97, foram plantadas 10 sementes de cada bitipo da planta daninha B. pilosa resistente (R) e suscetvel (S) aos herbicidas inibidores da ALS. As sementes foram semeadas a 1 cm de profundidade em vasos de 12 cm de dimetro, contendo uma mistura de solo e terra vegetal. Os vasos foram colocados em casade-vegetao e as plantas foram irrigadas diariamente. Quatorze dias aps o plantio, cada vaso foi desbastado para quatro plantas por vaso para os bitipos R e S. Os herbicidas foram aplicados quando as plantas de B. pilosa apresentavam-se no estdio de trs a quatro pares de folhas, 15 dias aps o plantio. A aplicao foi feita com pulvrizador pressurizado com ar comprimido na presso de 207 kPa, em cmara de asperso, utilizando uma ponta de pulverizao do tipo Teejet 11002E, com jato de distribuio uniforme. O volume de calda utilizado nas aplicaes de todos os tratamentos foi de 200 Lha-1. A aplicao iniciou-se s 8h00 e terminou s 12h30, quando a temperatura ambiente era de 27oC e umidade relativa do ar de 70%. Aps a aplicao dos herbicidas, os vasos foram colocados em casa-de-vegetao, e somente foram irrigados no dia seguinte, garantindo assim a absoro foliar do herbicida. Os tratamentos utilizados no experimento consistiram de quatro herbicidas, sendo trs sulfonilurias (chlorimuron-ethyl - contendo 750 g L -1, metsulfuron-methyl contendo 750 g L-1, e nicosulfuron contendo 750 g L-1), e uma imidazolinona (imazethapyr contendo 750 g L -1). As doses utilizadas para cada herbicida seguiram uma escala logartmica, a partir da dose recomendada, ou seja, 0,0; 0,001; 0,01; 0,1; 1,0; 10; 100 e 1.000 vezes a dose recomendada, equivalendo para o chlorimuoron-ethyl a 0; 0,02; 0,2; 2; 20; 200, 2.000 e 20.000 g i.a.ha-1; para o nicosulfuron a 0,0; 0,005; 0,05; 0,5; 5; 50; 500 e 5.000 g i.a. ha-1; para o metsulfuronmethyl a 0,0; 0,003; 0,03; 0,3; 3; 30; 300 e 3.000 g i.a. ha-1, e para o imazethapyr a 0,0; 0,1; 1; 10; 100; 1.000; 10.000 e 100.000 g i.a. ha-1. Em todos os tratamentos herbicidas, foi adicionado surfactante no inico, na dose de 0,25 % v/v.
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Vinte e um dias aps a aplicao dos herbicidas, foram feitas as avaliaes visuais de fitotoxicidade dos herbicidas. A fitotoxicidade foi baseada no vigor, e clorose da planta, comparada com a testemunha, sendo atribudo 0% quando no existia efeito fitotxico do herbicida, ou seja, a parcela tratada era semelhante testemunha sem herbicida, e 100% quando as plantas da parcela estavam completamente mortas. Os resultados da avaliao visual de fitotoxicidade foram inicialmente submetidos anlise de varincia, na qual as doses foram consideradas variveis independentes, com o objetivo de observar se o aumento da dose de herbicida resultou em efeito significativo na resposta das plantas, e servindo de base para o teste de preciso no ajuste do modelo no linear. Em seguida, os dados foram analisados utilizando modelos no lineares de ajuste de uma curva de dose-resposta. A relao entre doses de um herbicida e a respostas das plantas de fundamental importncia para o entendimento de diversos aspectos relacionados com a seletividade e eficcia dos herbicidas. Para isso, diversos mtodos tm sido usados; porm, para esta pesquisa utilizou-se o modelo proposto por Seefeldt et al. (1995). A equao matemtica (Seefeldt et al., 1995), que relaciona a resposta da planta com a dose x do herbicida a seguinte:
y = f(x) = C + D-C DC = C+ x b 1 + exp(b(log( x ) log(C 50 ))) 1+ ( ) C 50

Onde: D=limite superior da curva; C=limite inferior da curva; b=declividade da curva, e C 50 =dose correspondente a 50% de resposta. O limite superior da curva D corresponde resposta mdia da testemunha e o limite inferior da curva C a resposta mdia com doses altas de herbicida. O parmetro b descreve a declividade da curva em torno do C50. Para ajuste da equao e obteno dos parmetros estatsticos os dados foram submetidos a anlise de regresso no linear. Valores iniciais de D, C e C50 foram utilizados [(modelo proposto por Seefeldt et al. (1995))] para que as iteraes fossem executas e assim obter as melhores estimativas atravs da combinao desses valores. Para estimativa dos valores iniciais examinou-se a tendncia dos valores originais em grfico e assim foi possvel visualizar os valores iniciais de C, D e C50. Para os valores de b foram feitas diversas tentativas com valores variando entre 1 e 6. A partir das equaes, foram construdos grficos, usando a escala logartmica para as doses do herbicida (varivel independente). Para a porcentagem de fitotoxicidade em relao testemunha (varivel dependente) foi empregada escala linear.

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RESULTADOS E DISCUSSO
A anlise de varincia conjunta dos dados de porcentagem de fitotoxicidade dos dois bitipos (R e S) foi significativa para os quatro herbicidas, mostrando efeito dos tratamentos. Quando as curvas de dose-resposta de dois bitipos (R e S) de uma mesma espcie de planta daninha, a determinado herbicida, so paralelas, indicao que a causa da resistncia do bitipo R decorrente da menor afinidade do herbicida ao seu stio de ao (Streibig et al., 1993). Quando as curvas no so paralelas, o mecanismo de resistncia envolve outros fatores adicionais modificao do local de ao. Inicialmente, optou-se por analisar os resultados de porcentagem de fitotoxicidade fazendo-se o teste de paralelismo, para verificar se as curvas dos bitipos, dentro de cada herbicida, so paralelas, ou seja, apresentam o mesmo valor de b (declividade da curva no ponto de inflexo). O teste F, que verifica a preciso dos ajustes paralelos e no paralelo, baseado na soma dos quadrados do resduo (SQrI) dos respectivos modelos em relao a SQrII do modelo geral, de acordo com a seguinte frmula:
II (SQ e SQeI ) GLII GLIe e F= SQeI GLIe

Nenhum dos modelos serve como bom ajuste dos dados nas curvas de dose-resposta, pois a SQrI dos modelos paralelo e no paralelo so significativamente superiores SQrII do modelo geral. A principal razo para a baixa preciso dos ajustes porque foi assumido que os valores de C nos dois modelos seriam os mesmos e prximos de zero. No entanto, para o bitipo resistente, mesmo na dose mais alta, o valor obtido no menor

que 30%. Desta forma, nenhum dos modelos ajusta satisfatoriamente os dados, e assim no foi possvel concluir se as curvas so paralelas entre si. No entanto, o intervalo de confiana obtido dos valores de b para os dois bitipos, no ajuste do modelo no paralelo no so coincidentes, indicando assim o possvel no paralelismo das curvas (Tabela 1). O teste de paralelismo das curvas de doseresposta comprovou ser pouco indicado para esta pesquisa. A resistncia dos bitipos de plantas daninhas aos herbicidas inibidores da ALS so decorrentes de alterao do local de ao (Guttieri et al., 1992; Ponchio et al., 1996; Saari et al., 1990; Shaner, 1991 e Simpson et al., 1995), portanto o teste de paralelismo deveria indicar que as curvas so paralelas. Outro fato que evidencia a baixa preciso deste teste que o bitipo R de B. pilosa utilizada nesta pesquisa foi o mesmo pesquisado por Ponchio (1997), que atravs de bioensaios in vitro, comprovou ser a resistncia causada por uma alterao no stio de ao. Assim, foi feita a anlise de regresso no linear para cada bitipo dentro de cada herbicida. Os resultados dos termos da equao loglogstica (parmetros C, D, C50 e b) encontram-se na Tabela 2. Para a anlise, foram utilizados os resultados da porcentagem de fitotoxicidade em relao testemunha. A escala porcentual foi utilizada para satisfazer exigncia do modelo log-logstico proposto por Seefeldt et al. (1995). Os valores de D no diferem, quando comparado o bitipo resistente com o bitipo suscetvel, dentro de cada herbicida; no entanto, os valores de C diferem entre si. As equaes ajustaramse de forma bastante precisa, pois os valores de R2 foram bastante prximo de um, explicando mais de 90% da variabilidade dos dados entre as diversas doses dos herbicidas. Em todos os herbicidas, os ajuste da curva de dose-resposta para o bitipo resistente foi de preciso inferior ao bitipo suscetvel (Tabela 2).

Tabela 1 - Valores de b (declividade da curva) e seu intervalo de confiana, obtidos atravs do modelo de ajuste log-logstico no paralelo, dos dados de porcentagem de fitotoxicidade dos bitipos R e S de B. pilosa, dos herbicidas chlorimuron-ethyl, nicosulfuron, metsulfuron-methyl e imazethapyr. L imi te do i ntervalo de confia na Herbicida Mod elo Bitip o Va lo r de b infe rio r superio r C hlorimuron-e thyl No paralelo R 0,3 7 0,3 1 0,4 2 S 0,6 8 0,5 7 0,8 0 Paralelo ReS 0,5 1 0,4 2 0,5 9 Ni cosulfuro n No paralelo R 0,4 7 0,3 8 0,5 6 S 0,9 5 0,7 5 1,1 6 Paralelo ReS 0,6 4 0,5 3 0,7 6 Metsulfuron-me thyl No paralelo R 1,6 0 1,1 9 0,6 7 S 0,5 8 0,4 8 2,0 1 Paralelo ReS 0,9 3 0,7 3 1,1 3 Imazetha pyr No paralelo R 0,4 4 0,3 3 0,5 6 S 1,2 8 0,8 3 1,7 4 Paralelo ReS 0,6 8 0,5 1 0,8 4
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O valor de C do chlorimuron-ethyl para o bitipo suscetvel negativo (Tabela 2), o que irreal, pois no existem resultados de porcentagem de fitotoxicidade negativa. No entanto, para a previso da dose-resposta, este resultado pode ser considerado normal, pois o intervalo de confiana do valor de C suficientemente grande para incluir valores maiores ou iguais a zero. Para o clculo dos valores de C50 baseado na dose de ingrediente ativo do herbicida, o C50 da equao (Tabela 2) foi multiplicado pelas doses recomendadas de ingrediente ativo utilizado, respectivamente 20; 50; 3,0 e 100 g para os herbicidas chlorimuron-ethyl, nicosulfuron, metsulfuron-methyl e imazethapyr (Tabela 4). Os valores de C50 para o bitipo resistente foram superiores ao do bitipo suscetvel para os quatro herbicidas estudados, pois os limites dos intervalos de confiana no foram coincidentes para nenhum C50 do bitipo R e S dentro de cada herbicida (Tabela 3). Desta forma, a relao R/S, que corresponde diviso do C50 do bitipo R pelo C50 do bitipo S, foi superior a um para os quatro herbicidas, comprovando assim a resistncia do bitipo R de B. pilosa aos herbicidas estudados.

O nvel de resistncia caracterizado pela relao entre o C 50 do bitipo resistente e o C 50 do bitipo suscetvel de 40,92; 173,84; 57,47 e 57,16 para os herbicidas chlorimuron-ethyl, nicosulfuron, metsulfuronmethyl, e imazethapyr, respectivamente. Os valores de R/ S representam ndices de tolerncia do bitipo resistente em relao ao bitipo sucetvel para um controle de 50% e nunca deve ser interpretado que o bitipo resistente tolera R/S mais herbicida que o suscetvel. Este ndice, portanto serve apenas de comparao entre os bitipos, porque a obteno destes ndices resultante de dados de casa-de-vegetao e no de campo. O bitipo R de B. pilosa apresenta resistncia cruzada aos herbicidas inibidores da ALS, ou seja, resistente tanto para as sulfonilurias (chlorimuron-ethyl, nicosulfuron e metsulfuron-methyl) quanto imidazolinonas (imazethapyr) (Tabela 3). A partir das equaes log-logsticas foram elaborados os grficos de dose-resposta (Figura 1). As mdias dos valores originalmente coletadas no experimento foram tambm plotadas no grfico para verificao visual da preciso do ajuste das curvas. A

Tabela 2 - Parmetros das equaes das curvas de dose-resposta com os bitipos resistente (R) e suscetvel (S) de B. pilosa, aos herbicidas chlorimuron-ethyl, nicosulfuron, metsulfuron-methyl e imazethapyr. Herbicid a Chlorimuro n-e thyl Ni cosulfuro n Me tsulfuron-me thyl Imazetha pyr Bitip o R S R S R S R S Parmetro da equa o D 95,88 98,12 96,28 97,23 97,73 95,68 95,25 95,74 C 35,19 -1,84 42,25 3,16 25,46 1,89 49,99 5,62 C 50 23,33 0,57 43,46 0,25 13,22 0,23 44,02 0,77 b 0,73 0,68 1,74 1,80 1,12 1,58 3,46 1,35 R2 0,93 0,97 0,94 0,98 0,93 0,98 0,95 0,97

Tabela 3 - Resultados dos valores de C50 do bitipo de B. pilosa resistente (R) e suscetvel (S) aos herbicidas chlorimuronethyl, nicosulfuron, metsulfuron-methyl e imazethapyr, e relao R/S.
Herbicid a C hlorimuro n-e thyl Ni cosulfuro n Me tsulfuron-me thyl Imazetha pyr Resistente (R) 46 6,6 0 217 3,0 0 3 9,6 6 440 2,0 0 Susce tvel (S) 11,4 0 1 2,5 0 0,6 9 7 7,0 0 R/S 4 0,9 2 17 3,8 4 5 7,4 7 5 7,1 6

C50 = dose do herbicida em gramas do ingrediente ativo por hectare necessrio para proporcionar 50% de controle da planta daninha. R/S = diviso do C50 do bitipo R pelo C50 do bitipo S.

Tabela 4 - Resultados dos valores de C50 do bitipo de B. pilosa resistente (R) e suscetvel (S) aos herbicidas chlorimuronethyl, nicosulfuron, metsulfuron-methyl e imazethapyr, e relao R/S correspondente diviso do C50 do bitipo resistente pelo C50 do bitipo suscetvel. Herbicida C hlorimuron-e thyl Ni cosulfuron Me tsulfuron-me thyl Imazetha pyr Resistente (R) 46 6,6 0 217 3,0 0 3 9,6 6 440 2,0 0 Susce tvel (S) 11,40 1 2,50 0,69 7 7,00 R/S 4 0,9 2 17 3,8 4 5 7,4 7 5 7,1 6

C50 = dose do herbicida em gramas do ingrediente ativo por hectare necessrio para proporcionar 50% de controle da planta daninha. Scientia Agricola, v.59, n.3, p.513-519, jul./set. 2002

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100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0

CHLORIMURON-ETHYL

100 90 80 70 % controle

NICOSULFURON

% controle

Suscetvel Resistente

Suscetvel

Resistente

60 50 40 30 20 10 0

0,02 0,2 2 20 200 Chlorimuron ethyl - g i.a. ha-1

2000 20000

0,5 50 nicosulfuron - g i.a. ha-1 IMAZETHAPYR

5000

100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 % controle

METSULFURON-METHYL

Suscetvel % controle

Resistente

100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0
0

Suscetvel Resistente

0,003

0,03

0,3

30

300
-1

3000

metsulfuron methyl - g i.a. ha

1 100 10000 imazethapyr - g i.a. ha-1

Figura 1 - Curva de dose-resposta da porcentagem de fitotoxicidade dos bitipos resistente (R) e suscetvel (S) de B. pilosa com os herbicidas chlorimuron-ethyl, nicosulfuron, metsulfuron-methyl e imazethapyr usando o modelo log-logstico.

partir destes grficos pode-se observar a diferena de porcentagem de fitotoxicidade entre os dois bitipos, verificando-se que o bitipo R no atinge 100% fitotoxicidade de mesmo em doses altas, bastante acima da recomendada. O bitipo resistente no foi controlado totalmente por nenhum dos herbicidas, mesmo em altas doses, porm este fato deve se a limitao das doses utilizadas no experimento. Os testes de paralelismo das curvas de doseresposta no foram suficientemente confiveis para concluir se o bitipo R de B. pilosa estudado tem como mecanismo de resistncia alterao no stio de ao dos herbicidas inibidores da ALS. O bitipo R de B. pilosa tem resistncia cruzada aos herbicidas do grupo qumico das sulfonilurias (chlorimuron-ethyl, nicosulfuron e metsulfuron-methyl) e ao herbicida do grupo das imidazolinonas (imazethapyr).

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
BOUTSALIS, P.; POWLES, S.B. Resistance of dicot weeds to acetolactate synthase (ALS) inhibiting herbicides in Australia. Weed Research, v.35, p.149-155, 1995. CAREY, J.B.; PENNER, D.; KELLS, J.J. Physiological basis for nicosulfuron and primisulfuron selectivity in five plant species. Weed Science, v.45, p.22-30, 1997. CAUSTON, D.R.; ELIAS, C.O.; HADLEY, P. Biometrical studies of plant growth. I. The Richards function and its application in analyzing the effects of temperature on leaf growth. Plant Cell Evironm, v.1, p.163-184, 1978. CHAVES, L.; VALVERDE, B.E.; GARITA, I. Resistance of Ixophorus unisetus to acetolactate synthase inhibiting herbicides. Manejo Integrado de Pragas, n.44, p.20-25, 1997. CHRISTOFFOLETI, P.J.; PONCHIO, J.A.R.; BERG, C.V.D.; VICTORIA FILHO, R. Imidazolinone resistant B. pilosa biotypes in the Brazilian soybean areas. In: 1996 MEETING OF THE WEED SCIENCE SOCIETY OF AMERICA, Norfolk, 1996. Abstract. Norfolk, 1996, v.36, p.10. FRANCE, J.; THORNLEY, J.H.M. Mathemathical models in agriculture. Kent: Butherworths,1984. 335p. FRIESEN, L.F.; MORRISON, I.N.; RASHID, A.; DEVINE, M.D. Response of a chlorosulfuron resistant biotype of Kochia scoparia to sulfonylurea and alternative herbicides. Weed Science, v.41, p.100-106, 1993. GUTTIERI, M.J.; EBERLEIN, C.V.; MALLORY-SMITH, C.A.; THILL, D.C.; HOFFMAN, D.L. DNA sequence variation in domain A of the acetolactate synthase genes of herbicide resistant and susceptible weed biotypes. Weed Science, v.40, p.670-676, 1992. HALL, L.M.; STROMME, K.M.; HORSMAN, G.P. Resistance to acetolactate synthase inhibitors and quinclorac in a biotype of false cleavers (Galium spurium). Weed Science, v.46, p.390-396, 1998. HART, S.E.; SAUNDERS, J.W.; PENNER, D. Semidominant nature of monogenic sulfonylureia herbicide resistance in sugarbeet (Beta vulgaris). Weed Science, v.41, p.317-324, 1993. HUNT, R. Plant growth curves, the functional approaches to plant growth analysis. Sheffield: Edward Arnold, 1982. 246p.

AGRADECIMENTOS
Ao Departamento de Produo Vegetal da Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Universidade de So Paulo, e ao Conselho Nacional de Desenvolvolvimento Cientfico e Tecnolgico (CNPq) pelo apoio financeiro.
Scientia Agricola, v.59, n.3, p.513-519, jul./set. 2002

Bidens pilosa e herbicidas inibidores da ALS

LOVELL, S.T.; WAX, L.M.; SIMPSON, D.M.; McGLAMERY, M. Using in vivo acetolactate synthase (ALS) assay for identifying herbicide-resistant weeds. Weed Technology, v.10, p.936-942, 1996. PONCHIO, J.A.R. Resistncia de B. pilosa aos herbicidas inibidores da enzima acetolactato sintase. Piracicaba, 1997. 139p. Tese (Doutorado) - Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz, Universidade de So Paulo. PONCHIO, J.A.R.; CHRISTOFFOLETI, P.J.; MELO, M.; VICTORIA FILHO, R. ALS enzyme assay from B. pilosa biotypes of the Brazilian areas to determine the sensitivity to imidazolinone and sulfonylurea herbicides. In: 1996 MEETING OF THE WEED SCIENCE SOCIETY OF AMERICA, Norfolk, 1996. Abstract. Norfolk, 1996. p.79. PORNPROM, T.; YONG, P.J. Assessment of ALS-inhibiting herbicide tolerance in pepper cultivars. Weed Science, v.17, p.325-333, 1997. RYAN, G.F. Resistance of common groundsel to simazine and atrazine. Weed Science, v.18, p.614-620, 1970. SAARI, L.L.; COTTERMAN, J.C.; PRIMIANI, M.M. Mechanism of sulfonylurea resistance in the broadleaf weed Kochia scoparia. Plant Physiology, v.93, p.55-65, 1990.

519

SEEFELDT, S.S.; JENSEN, S.E.; FUERST, E.P. Log-logistic analysis of herbicide dose-response relationship. Weed Technology, v.9, p.218-227, 1995. SHANER, D.L. Mechanisms of resistance to acetolactate synthase acetohydroxyacid synthase inhibitors. In: CASELEY, J.C.; CUSSANS, G.W.; OATKIN, R.K. Herbicide resistance in weeds and crops. Oxford: Buttlerworth-Heinemann, 1991. p.187-198. SIMPSON, D.M.; STOLLER, E.W.; WAX, L.M. An in vivo acetolactate synthase assay. Weed Technology, v.9, p.17-22, 1995. STREIBIG, J.C.; RUDEMO, M.; JENSEN, J.E. Dose-response curves and statistical models. In: STREIBIG, J.C; KUDSK, P. (Ed.) Herbicide bioassay. Boca Raton: CRC Press, 1993. p.30-35. TRUELOVE, B.; HENSLEY, J.R. Methods of testing for herbicide resistance. In: LeBARON, H.; GRESSEL, J. (Ed.) Herbicide resistance in plants. New York: John Willey & Sons, 1982. chap.7, p.117-131.

Recebido em 25.11.99

Scientia Agricola, v.59, n.3, p.513-519, jul./set. 2002