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ASIGNATURA
: Bioqumica Nutricional
TEMA
DOCENTE
INTEGRANTES
AULA
: 303
CICLO
V Semestre.
2011
LIMA PER
Prctica N 5
DETERMINACIN DE FE EN SANGRE
I. OBJETIVOS
Conocer las funciones del fierro en el organismo que se encuentran suspendidas en el plasma sanguneo. Identificar las diferentes patologas debido al nivel elevado o disminucin del fierro en suero.
Determinacin de fe en sangre Es una determinacin analtica en la que se mide el hierro que hay en la sangre, y poder diagnosticar los casos de ANEMIAS principalmente la ferropnica o microctica. El hierro se utiliza por el organismo principalmente como parte de la hemoglobina que es la protena transportadora de oxgeno a los tejidos. Por ello el 70 % del hierro del organismo se encuentra en esta protena el 30 5 restante se encuentra depositado en forma de ferritina y de hemosiderina para su posible utilizacin. El hierro es captado por la transferrina partir de su ingesta en la dieta.
La determinacin del hierro srico nos indicar la cantidad de hierro unido a la transferrina. El cuerpo de un adulto contiene 4 gramos de hierro. El 70% est concentrado en la hemoglobina que transporta el oxgeno desde los pulmones al resto del cuerpo. Este metal conforma la mioglobina de los msculos y es parte de numerosas enzimas. 2
Nuestro cuerpo no absorbe el total del hierro de los alimentos, tan slo alcanza en promedio un 10% del total ingerido y este porcentaje vara an ms entre alimentos. El hierro que proviene de animales es ms absorbido que el procedente de fuentes vegetales. Hasta los 6 meses de edad se requieren 7 miligramos de hierro. Este requerimiento aumenta con la edad alcanzando los 18 miligramos en adolescentes y hasta 22 miligramos en la madre lactante. Entre las etapas de adolescencia y la adultez, la mujer requiere ms hierro que el hombre debido a la menstruacin, gestacin y lactancia.
Los taninos: sustancias presentes en el t, el caf, el vino, etc. Los oxalatos: presentes en espinacas, chocolate amargo, remolacha, t, etc. Los fitatos: en la cubierta de granos de cereal. La carencia de vitaminas. El exceso de ciertos minerales (fsforo, calcio, cinc, cobalto, cadmio, manganeso, plomo...) que compiten con los mecanismos de transporte del hierro. El dficit de cobre. Una dieta pobre en protenas.
Consideraciones especiales
Los medicamentos incluyen: - colestiramina, - cloramfenicol, - colchicina, - deferoxamina, - meticilina, - alopurinol - testosterona.
que
pueden reducir el
hierro
3.1 MATERIALES
Micropipetas Tubos de ensayo Tubos Gradilla Piceta Mandil Jeringa Ligadura Algodn Alcohol 70 Plumones o lapiceros marcadores Cmara
Muestras Sangre H20 St (Muestra estndar) M.P. (Muestra Problema) Muestra blanco
Determinacin de Fe en sangre
Tres tubos
Rotular
Agregar
ST (Muestra estndar)
St 500ml
Agregar
B (Muestra Blanca)
Luego agregar 1 gta. Luego Leer a 560 nm Espectrofotmetro Incubar 15min a o T ambiente Rvo. Color
V.- PROCEDIMIENTO
Para la Determinacin de Fe en sangre y para poder hallar la concentracin de M.P. (Muestra Problema) realizamos lo siguiente: a) Conseguir la muestra de sangre con mucho cuidado y con supervisin del docente encargado. Luego procedemos a extraer sangre.
b) Despus conseguimos 3 tubos, rotulamos (B, St, MP). A continuacin agregamos para el tubo blanco 500ml de H2O. Para el tubo St agregamos 500ml de St. Y 500ml de MP para el ltimo tubo de ensayo.
MP
Blanco
St
c) Enseguida agregamos 1 gta. de Reactivo de color a cada tubo. Incubamos 15 min a T ambiente. Luego leer 560 nm al espectrofotmetro.
d) Finalmente realizamos el clculo por medio de la frmula para la concentracin de muestra problema y Analizamos los resultados. MP = Abs. x MP X Abs. x St St
VI. RESULTADOS
Presentamos los resultados con los valores correspondientes, dados en la prctica realizada. Analizaremos por criterio personal el resultado de la muestra.
St = 0.034
MP = 0.075
VII. CLCULOS Para la concentracin de muestra problema utilizamos la frmula luego anotamos y analizaremos los resultados.
MP =
Abs. x MP Abs. x St
St
i) Reemplazando valores:
MP =
0.075 nm 0.034 nm
100ug/dL
MP = 220.58 ug/dL 7
Puede ser que hubo alguna falla en el proceso al momento en agregar algn
reactivo para la prctica.
Para este tipo de mtodo es necesario que la persona se encuentre en ayunas. Si falta el hierro en el organismo se disminuye la formacin de hemoglobina y por
ello los glbulos rojos aparecen pequeos, plidos, que es lo define una anemia microctica o hipocroma.
Los
niveles
aumentados
de
Hierro
pueden
indicar:
Hemocromatosis,
VIII. CONCLUSIONES
dieta, la alteracin en su absorcin intestinal, aumento en su consumo (nios en crecimiento, mujeres embarazadas), o por un aumento de prdidas (hemorragias, menstruacin, perdidas gastrointestinales ocultas, etc.)
En los valores puede haber ciertas diferencias por la tcnica o por criterios
de normalidad propios de laboratorios concretos, a veces en el rango de valores y otras veces por las unidades a las que se hace referencia. A veces las unidades se ofrecen en mol/l unidades SI.
IX. CUESTIONARIO
1. Qu sucede cuando los valores de Fierro estn elevados y que cuando estn disminuidos?
Valores Normales Niveles normales de Hierro en adultos hombres de 80 a 180 g/dl Niveles normales de Hierro en adultos mujeres de 60 a 160 g/dl. Niveles normales de Hierro en nios menores de 1 ao de 100 a 250 g/dl. Niveles normales de Hierro en nios de 50 a 120 g/dl En estos valores puede haber ciertas diferencias por la tcnica o por criterios de normalidad propios de laboratorios concretos, a veces en el rango de valores y otras veces por las unidades a las que se hace referencia. A veces las unidades se ofrecen en mol/l unidades SI.
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Tcnicas analticas El aporte de hierro y los depsitos deben ser evaluados por mtodos
directos e indirectos, pero no existe un nico indicador ideal para valorar el estado del hierro en cualquier circunstancia clnica. Las medidas directas incluyen la flebotoma, el aspirado de mdula sea y la biopsia, la biopsia heptica acompaada de la medicin cuantitativa de la concentracin de hierro no-hemo. Estos mtodos permiten la determinacin de los depsitos de hierro de manera cuantitativa, especfica y sensible, sin embargo, tienen la desventaja de ser mtodos traumticos. Los mtodos indirectos son fciles y prcticos, pero son objeto de posibles interferencias y fallan
en aspectos como la especificidad, sensibilidad o ambos. Estos mtodos incluyen la medicin ferritina. del hierro srico, la transferrina, los receptores de transferrina y la
Mtodo colorimtrico (fenantrolina) Mtodo de plasma de acoplamiento inductivo Determinacin de hierro al estado de xido frrico Espectrofotometra determinacin de hierro Determinacin de hierro (Mtodo AOAC 944.02) Mtodo colorimtrico para la determinacin de hierro srico sin desproteinizacin. Mtodo Ferene Determinacin de hierro en fase solida por espectrofotometra derivada de segundo
orden.
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3. Mencione alguna tcnica no colorimtrica de deteccin de fierro. Mtodo espectromtrico de absorcin atmica
Es un mtodo instrumental que est basado en la atomizacin del analito en matriz lquida y que utiliza comnmente un nebulizador pre-quemador (o cmara de nebulizacin) para crear una niebla de la muestra y un quemador con forma de ranura que da una llama con una longitud de trayecto ms larga, en caso de que la transmisin de energa inicial al analito sea por el mtodo "de llama". La niebla atmica es desolvatada y expuesta a una energa a una determinada longitud de onda emitida ya sea por la dicha llama, una Lmpara de Ctodo hueco construida con el mismo analito a determinar o una Lmpara de Descarga de Electrones (EDL). Normalmente las curvas de calibracin no cumplen la Ley de Beer-Lambert en su estricto rigor. La temperatura de la llama es lo bastante baja para que la llama de por s no excite los tomos de la muestra de su estado fundamental. El nebulizador y la llama se usan para desolvatar y atomizar la muestra, pero la excitacin de los tomos del analito es hecha por el uso de lmparas que brillan a travs de la llama a diversas longitudes de onda para cada tipo de analito. En AA la cantidad de luz absorbida despus de pasar a travs de la llama determina la cantidad de analito existente en la muestra. Hoy da se utiliza frecuentemente una mufla de grafito (u horno de grafito) para calentar la muestra a fin de desolvatarla y atomizarla, aumentando la sensibilidad. El mtodo del horno de grafito puede tambin analizar algunas muestras slidas o semislidas. Debido a su buena sensibilidad y selectividad, sigue siendo un mtodo de anlisis comnmente usado para ciertos elementos traza en muestras acuosas (y otros lquidos). Otro mtodo alternativo de atomizacin es el Generador de Hidruros.
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4. Es necesario realizar ayuno para determinacin de fierro. Por qu? Para la mayor parte de los perfiles bioqumicos, como es el caso de la determinacin de fierro en sangre el paciente debe estar en ayunas de 12 a 14 horas, lo que significa que puede cenar entre las 6 y 7 pm del da previo a la determinacin y acudir al laboratorio entre las 7:30 y 8 am. La razn especfica del por qu se debe tomar en ayunas est en que los nutrientes ingeridos tardan ms o menos 12 horas en llegar a su destino. Si se toman durante el perodo de no ayuno se van a medir los que estn viajando en la sangre causando interferencia en la prueba, falseando los resultados. Ayunar significa que la muestra no debe tomarse antes de transcurridas 12 horas de haber ingerido la ltima comida el da anterior.
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INSTITUTO
NACIONAL DE SALUD CENTRO NACIONAL DE ALIMENTACIN Y NUTRICIN DIRECCIN EJECUTIVA DE VIGILANCIA ALIMENTARIA Y NUTRICIONAL.
http://dx.doi.org/10.1590/S1726-46342010000200006
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