CAPITITLO

L.

Introduccin al eitudio de la biologa.

celIar

LV

. ,

ConJorme el tamao de Ia c1uIa se incrementa, ia pro-

porcin entre superficie/voiumen disminuye.l

pacidad de una clula para intercambiar sustacias en su ambiente es proporcional a 1a superficie. Si una cIula sece ms de cierto tamao, su superficie no sera suficiente para captar sustancias (p. ej., xgeno, nufrientes) necesarios. para apoyar sus actividades rrietablicas.

ca-

requerid.o para que Ia difusin desplace las sustancias hacia adentro y hacia afuera de Ia clula metablica' mente activa puede ser prohibitivamente prolongado.
T,1s clulas que tienen dimensiones excepcionalmente grandes, como el huevo de avestuz y la clu[a nerviosa,de la jirafa, en la figura 1-1"9, tienen propiedades poco habituaIes. El huevo del avestruz, y los huevos de muchos o,fros peces, reptiles y aves/ en realidad contienen una cantidad muy pequea de protoplasma vivo que se sitria por encima de una gran cantidad de yema inerte, emplada como nutriente para el embrin en desarrollo. Aunque Ia clula nerviosa de Ia jirafa y Las clulas nerviosas d.e otros animales grandes pueden ser muy largas, su dimefro tod.ava es microscpicamente pequeo

Una cIu1a depende en gran medida del movimiento al azar de las molculas (difusin), Por ejemplo, e1 oxgeno debe difundir desde la superficie de Ia clula a travs

del citoplasma hasta el iterior de las mitocondrias. Conforme la cIula aumenta de tamao y Ia distancia de I superficie al interior tambin crece, el tiempo

I Se puede coinprobar esta afiimacin caiculando rea y volumen de un cubo cuyas aristas sean de 1. cm de iongitud en comparacin con oho cuyas_ aistas sean de 10 cm de longitud. La proprcin rea/

L-4 Viru
En los ltimos decenios del siglo xtx, el trabajo de Louis Pasteury de ofros investigadores convenci al mundo cientfico de que las enfermedades infecciosas de plantas y ani-

volumen del cubo ms pequeo es consiilerablemente^mayor que la del cubo ms grande.

. C lula nerviosa de jirafa

Yema de huevo de
avstruz

Clula

Amiba

Ncleo de Ia clula hep-

humana

tica

humana

Bacteria

Ribosoma Poro nuclear

Membrana p lasmtica

ffi
\ \
\
1A
1nm de metro
de metr,o de metro de metro
0.000 001 de metro 0.000 01 de metro

\,, 0nm \
100

1llm
10 gm

100 lm

0,0001 de metro 0.001 de metro

'10

mm

\ 100 mm
1 metro

0.01 de metro 0.1 de metro 1.0 metro

10 metros

10 metros

de las clulas y de los_ componentes celulaes. Cada.unidad de medida es un.dcimo mayor que ia unidad precedente' Aunque el huevo completo de aveshuz es tcnicmente una.er"r",'r"!"r.iri;;;i"Hencuenha como un delgado disco microscpico situado sobre el bord de una gran masa inerte de yema ilh;;".

FIGLRA

l-r9'

Tamaos relativos

lr
lil.i

liir

18

CAPITULO

L,

Introduccin al estudo

de

la biologa celular

1,. i

lil

ili',
T,

I,;'

males eran causadas por bacterias. Pero el esfudio de la erermedad del mosaico del tabaco y 1a fiebre aftosa d.el ganado pronto indicaronia existenciade otro tipo de agentes infecciosos. Por ejemplo, se obsrv que la svia de-una planta de tabaco enferma eta capaz de transmitir la enfermedad del mosaico a una planta saludable, aun cuando Ia microscopio de luz. Adems, la savia de una planta continuaba siendo infecciosa aun despus de pasai a travs de filtros cuyos poror tan pequeos.que,retardaban,eI "run paso de las bacterias ms pequnas coocidas,,Eitodios, adicionales demostraron qrre, diferenci, de,lasl,bacterias, el agente infeccioso no poda crecer en medios d.e cultivo,a menos que tambin estuvieran presentes clulas vegetales
savia no demostr contener bacterias cuando se examin al

Cubierta protenica de la capsmera

Acido
nucleico

v-.,

[';
[l.r

f,.-i

ii,

,r

llL

l,

Nucleoc pside

[1,1 t \ti

tt:i
#i",'

b.l

yivas. Los investigadores concluyexon que ciertas eniermedades eran causadas por patgenos an ms pequeos y quiz ms simples que las bacterias ms peques. Estoi patgenos recibieron el nombre de virus. En L935, Wendell Stanley, del Instituio Rockefeller, public que ei virus causante de ia eniermedad del mosaico de1 tabaco se poda cristalizar y que los cristales eran infecciosos. Los cristales poseen una estructura interna regu.!_armente repetiiiva, Las sustancias que forman cristales t-ienen una estructura bien definida muy ordenada y son mucho menos complejas que las clulas ms simples. Stanley concluy errneamente que el virus del msaico del iabaco (V]ofT) era una protena. En realidad, eI VMT ed una partcula en forma de bastoncillo que consta de una solu ^1.r1a de RNA_rodeada por una cubierta helicoidal compuesta de subunidades de protena (fig.1,.20). Los virus causan docenas de enfermedades en el ser lyT3"o, incluyendo SIDA, poliomielitis, influenza, herpes labial, sarampin y unos pocos tipos de cncer (vase jeccin L6-3). Los virus presentan una gran variedad de formas, tamaos y estructuras muy diferentes, pero todos com_ parten ciertas propiedades comunes. Todos los virus son parsitos inhaceiulares obligatorios, o sea, no pueden reproducirse a menos que se ecuentren dentro djuna.clula usped, la cual, r"g,i.r ,rirus uspeiifi.o, irrudq rur. r cIula vegetal, aniral o"t bacterian. Fuera fd" ,r.,u c1ula viva, el virus existe como partcula, o virirlque n ms -o,es que un paquete de macromoiculas. EI virih contiene una pequea cantidad cle material gentico que, egn,elivirus; puede ser RNA o DNA de cadna simpie o dote. Es nsta-

l,.

[,i
f,
,
r

ir,

(b)

50 nm

FICURA I-20. Virus del mosaico del tabaco (VMT). a) Diagrama de una porcin de la partcula de1 VMT. Las subuniclaes de prtena en forma de bastn.(capsmera) que son idnticas en toda la iongitud de 1a partcuia incluyen una sIa molcula helicoidal de RN. Se muestra_el RNA que.sobresale en l exrremo donde se ha desprendido la protena. La cpside protenica con el RNA incluido se denomina nucleocpsde. b) Micrografia electrnica de partculas del VIvIT luego de tratamiento con fenol para elimina.las sulbunidades de protena e la porcin- media de la partcula de arriba y de los extmos c1e la partcula de abajo. Los bastones ntegros tienen unos 300 nm de longitud y:18 nm de dimerro. (b: Cortlsa de M.K. Corbett.)

bie que algunos virus contienen escasos gehes di.frentes, tres o cuatro, pero otros pueden tener hastalvarios cinios de eIlos. Cuanto menor el nmero de genes rys depende el virus de las enzimas y de otras protenas codificadas por los
genes de su clula

husped.

Ei material gentico del virin est rod.eado por una cpsula protenica, o cripside, por Io general qonstitida por un nmero especfico de subunidads. Entreilas ventajas de construir con subunidades una de las ms aparentes es economizar informacin gentica. Si la cubierta del virus est formada por muchas copias de una soia protena, como en el VMT, o de unas pocas protenas co*b las cubiertas d.e muchos otros virus, sIo se necesita uno o unos cuantos genes para codificar las protenas de la cubierta. . Muchos virus poseen una cpside cuya.s subunidades se organizan en formas polidricas, una estructura con la-

dos planos. Una forma polidrica particularmente comn enlos virus es elicosaedro de 20 caras. por ejemplo, el adenovirus ;que: provoca infecciones respiratoras n mamferos tiene una cpside icosadrica (fig.L-21, a). En muchos virus de animales, incluyendo el oiru s de I a in muno de f ci en c a humana (HIV) causante el SIDA, la cpside protenca est rodeacla por una cubierta externa que contiene lpidos derivados de la membrana plasmtica de la clu1a husped conforme las yemas virales se forman en la superflie ae ta c1ula husped (fig. 1-21, b),Integrada a Ia cuberta Ipida se encuenkan 1as protenas virales localizadas en ia membrana plasmtica de la c1uia husped antes de 1a gemacin. Los virus de bacterias, o bacterifagos, son de los ms compiejos
(f.ig.7=21,, c). El bacterifago

T (utilizado en experimenios

clave que revelaron la estructura y propiedadei del mate-

CAPITULO

1.

Introduccin.al estudio de la eolqga.;gelutq1 x:g,

!a1 gentico) consta de una cabezapolidrica que contiene DNA" un taIlo cilndrico a travs del cual se inyecta DNA aI iterior de ia. c1ula bacteriana, y una cola e fibras qu jntas dan a,1a partcula el aspecto de unmdulo que aterr! za sobre Ia luna. Cada virus tiene sobre su superficie una protena capaz de eniazarse a un component particular de Ia superfici d.e su ciula husped. Por ejemplo, Ia protena que se proyecta deMe-1a superficie de Ia partcula del HIV (marcaa gp120 en 1a figura 1--2L, b, recibe ese nombre por glucoprtena con peso molecular de 120 000 daltons2) interacta con una prglgry sobre la superficie del leucocito humano, 1o que facilita Ia entrada del virus al inierior de su c1ula huesp'ea.
Como se analtza en el ensayo Laperspectiaahumana,la

tar. Algunos virus tienen un conjunto muy limifaQ,o,de

p osibles.husp edes, sLo tienen cap acidad par inf qetar.iigq_ nas clulas de ciertos huspedes, Esto es cierto,por eiemplo,

para la

cula 9p120 es Ia base de Ia primera generacin de vaunas anti SIDA que en la actualidad estn en prueba. La interaccin entre las protenas virales y las del husped determina Ia especificidad del virus, o ea, el tipo de clulas huspedia las cuales el virus puede penetrar e irrfec-

parti

2 El Dalton equivale a una unidad de masa atmica, solo tomo de hidrgeno (1$.

e1

peso de un

Tayor parte de loi virus del resfriadJ."*,i"i1 slo pueden infectar clu1as epiteliales respiratorias dgl ir humano. Otros vi.rus, como eL de Ia rabia, pueden infeciar. a una variedad,de diferentes especies de huespedes, incluyqn_ do perros, murci1agos y el hombre. Losviriones son agregados macromoleculares, partcu_ , manlmadas que por s . Ias mismas son incapaces de repro_ ducirse, efectuar actividades metablicas o cualquiera otta actividad relacionada con la vida. por esta razry no se con, sidera. organismos a los virus y no se d.escriben .o*o ,tur", vivos". No obstante, una vez que se fijan a la superficie ex_ terna de un husped y pasan al interior de 1a irembrana externa de la cluia e1 virus contiene Ia informacin necesaria para alterar totalmente las acitividades de Ia clula i.Lus_ ped. Hay-dos tipos bsicos de infeccin viral: 1) En Ia mayor parte de los casos el virus detiene las actividad"r'r,or*ies de sntesis en el huesped y reorienta a la cluia para empiear sus materiales disponibles en Ia elaboracin de aidos nucleicos y protenas virales, que se ensamblan para formar nuevos viriones. En otras palabras, 1os virus n crecen como

' Protena 9p120 de la cubierta

(a)

Cubierta protenica

Acido
n

ucleico

Transcriptasa i nversa

Bicapa

de lpidos

(c)

(b)

FIGU'[TA

lii

i:

20

CAPITLILO

L.

Introdiccn aI

esf.udio de

la biologa celular

clulas; se ensamblan directamente a pafth de sus elemen_ tos para formar viiones de tamao rrnduro. por ltimo, ia clula infectada se rompe Asis) y libea una nueva gene_ racin de parlculas viales capaces de infectar a ias c1ulas vecinas- Un ejemplo de este tipo de infeccinltica se mues_ tra en el recuadro a la izquierda de la hgtra1-Z2, a, y en la f.otografla de 1a figura 1,-22, b,2) En olros casos, e virus iJectante no provoca la muerte de la clula husped., sino en vez de,'el1o introduce (iniegra) su DNA al DA de los cromosoms de la cluia husped. El DNA viral integrado
se denomina

Las c1ulas bacterianas que contienen un provirus se comportan nomahnente en tanto .ro ,e expongan a algrin tipo de estmulo, como la radiacin ultraiioleta (lJV) que activa al DNA viral ,,latente,,, lo que prozocl i_a iisis celular y libera a la progenie virai. El virus lambda es un vrus bacteriano cafaz de integrar su DNA.a los cromosomas de la celula aet hrespe, "omo se indica en ia figura l-22, a, recuadro a la derecha. Al.gunas clulas animales que contienen n provirus
producen una nueva progenie vira.l por gemacln en ia superficie de la ciula sin lisis de la iluL infectada. El virus de la inmunodeficiencia humana (HIV) acta de esta manera; una c1u1a infectada puede permanecer

varios tipos de efectos segn husped. Por ejemplo:

provirus. Un provirus integrado puede"tener

e1

tipo dJvirus y de clula

(b)

0,2 rm

FIGURA 1-22. Infeccin con un virus. a) cuando er virus bacteiano lambda inyecta su DNA en ua clula husped el resuitado 9T1"-.11?S") de dos tipo.s de infeccin. La mayor part de los agentes ,p_y:i-:_y "1, lnteccrosos sguen una aa ltica ilustrada en er reuadio izquierdo, onde la c1ula bacteriana sirve como yrquina para pro".ir ra progeni.e virar que se,libera,despus.que la clula sfe ]iiis. En otros casos, el virus entra a una uamad.a Dta l$ogena (recuadro derecho) en Ia cual el DNA del vius se lntegra a-tos cromosolu: d. I.r clula del husped como un provi_ rus reprimido' EI p.ovirus latente puede ser inducid'o a iniciar una'infecpor diferentes tipos de stmulo, incluyendo radiacin g{i1.]itia il;l;; W (indicado por l c1ula e color ms claio a Iai2q,.,terda). b) Ur.,JfU*u etapa de-la.infeccin de una crura bacteriana poi ,-,., bu'cterii;g;; a;; muestra la acumulacin ordenada de.numeoss partculas uirui.r y' ru

t_TlTllili:f?,dql l.aqo xtng y EnKa tTattutg.)

sobre 1a sup"*i.ie

ciulii.'d:

cartesia de lonathan

16

CAPITULO

1.

Introduccin al estudio de La biologa celular

Clulas nerviosas

Tejldo conectivo laxo con fibroblastos

Eritro c ito

Tejido seo con osteocitos

Msculo liso

Clulas grasas (adiposas)

Clulas del msculo estr-iado

Clulas epiteiiales del intestino

ITIGURA 1-18. Vlas de diferenciacin celular. Se presentan unos pcos de los tipos de diferenciacin celular en ej feto humano

te en

biologa molecular para describir d.imensiones atmicas. Un angstrom por 1o general equivale aI dimetro de un tomo de ludrgeno. Una molcula protenica globular tpica (como ia mi.oglobina) tiene 4.5 nm i 3.5 n* fZ.S **yiuu prote_ nas alargadas (como Ia colgena o la miosina) tinen mas de 100 nm de longitud, y eI DNA tiene ms o menos 2.0 nm de ancho..Complejos de molculas grandes, como los ribosomas, microtbulos y microfiiamentos, poseen dimetro entre 5_y 25 nm. Organelos ms grandes, como los ncleos (unos 10 pm) o las mitocondrias (alrededor de 2 .rm) son ms fciles de definir en micrmetios.

a L0-9 mekos. Aunque ya no se acepta formalmen_ nomenclatura mtrica, ei angstrom (e), qr" es igual a un dcjno de nm, todavia se emplea con frecuenci en es
1a

igual

El tamao de

1as

longitud, en tanto que

bacterlas tpicas vara entre

1as c1uias

tieren entre 10 y 30pm. Hay bastantes razones para que ias clulas sean tan pequeas, Consideremos las siguienies:

1 y 5 4m de eucariotas d.e rdinario

Independientemente de1 tamacj de 1a clula,,el ncleo nico sio contiene clos copias de la mayor parte d e Ios
genes. Puestc que 1os ger-Les actan

produccin de RNA inensajeros transportador", d" ir.,_ formaciry una clula s1o puede producir un nmero limitado de RNA mensajeros en determinado tiempo. Cuanlo- mayor sea ei volumen d.el ci.toplasma ceiular ms difcil ser sintetizar el nmero requerido de men_
sajes

co* ,r,oidus para

1a

nucleares.

CAPITLILO

fntroduccin al estudio de ta

bibtoga;celatar

2l

viva mienhas achle como fbrica para producir nuevos viriones. Algunas clulas animales que contiee unprovirus pierden el control de su propio crecimiento y divisin y se convierten en malignas. Este fenmeno se puede eitudiar con facilidad en el laboratorio al infectar cIulas cultivadas con el virus tumoral apropiado,

Debido a su eskuctura sencilla, se podra concluir que ios virus representan una forma primitiva de vida, taliez similar a las que existieron sobre la tierra antes de la evolucin de las clulas procariotas. Sin embargo, cuando se considera que la "vida de los virusl' depende por completo de las clulas que invade, es evidente que loJvirus n pudieron aparecer en el escenaio antes que sus hspedesipuesto que los virus comparten el mismo lenguaje gentico entre sl y tambin con clulas procariotas y eucariotas, no pudieron originarse de manera independiente como forma primitla despus que otras clulas habfun evolucionado. Es ms razonable asumir que los virus representan una forma degenerada, o sea,-derivada de n organismo ms complejo. I..os virus a1 parecer evolucionaron a partir de pequeos fragmentos de crornosomas celulares capaces de.mantener algr1n tipo de existencia autnoma deno d.e las clulas. Con el tiempo, estos elementos genticos autnomos adquirieron un cubierta protenica'y se convirtieron en agentes capaces de infectar a otras clulas. Considerando la tremenda diversidad de los virus es probable que dife:entes Elpor evolucionaran de manera independieirte

cin-del DNA y Ia expresin de los genes en husiedes mucho ms complejos. Adems, enh atualidad los virus se emplean como medio para introducir genes extraos.a:Ias cIulas humanas, tcnica que ser Ia baJe para el katamiento de enfermedades humanas mediante genoterapia. por 4,ho, los virus que matan insectos en 1 futuro^podrn r{esempea un papel cada vez mayor en la guerra conka plagas de insectos,

como herramientas para estudiar el mecanismo de dupl,ica-

Iln197L, sorpresivamente se descubri que los virus no elan lol tiros ms_simples de agentes infeciosos. En aquel ao,T:O. Diener, del Departamento de Agricultura de Eitados Unidos, comunic que la enfermedad por adelgazamiento de los tubrculos de la patata que prbduce piatas nudosas y agrietadas era causada por 1ln agente infccioio que consisa en una molcula cicular pequea de RNA desprovista totalmente de cubierta protelnic. Diener denomin a este patgeno un viroide. El tamao del RNA de los viroides escila enfe 240 y 600 nucletidos aproximad.ar ment-e, la dcima parte del tainao de los virus i:ns pequeos. No se ha demostrado que el RNA viroide desnudo c.o{ifjrye para alguna protefna. Ms bien, cualquier actividad bioqulmica en la cual participan los viroides se efecta

utiiizaldg protenas de la clula husped. por,ejemplg,

partir de diferentes organismos celulares. Esta Conclusin se corrobora por el hecho de que los genes presmtes en ,rada $upo de virus son muy diferentes de los correspondientes aotros ryupos/ pero son similares a los genejque infectan dentro de Ia clula husped. EI hecho d'" qr" io, virus humanos utilicen las enzimas del husped pari efeca

para duplicarse dentro de. una clula ^infectuaa viroide utiliza el RNA polimerasa II del husped una enzi_ ma que normalmente transcribe eI DNA dl husped en

tua casi todas sus acvidades metablicas hce muy dificil encontrar fmacos que impidanlos pasos delciclo viral sin daar aI husped humano. Los virus no carecen de virtudes; puesto que la actividad de los genes viales imita a la de loi genes el husped Ios investigadores han utilizado por dcenios a los riirus

RNA mensajero. Se cree que los viroides provocan erife.medades al intervenir en la va normal de expresin gentica de las clulas. Ls efectos sobre las coseihas p.rJdurr ru. graves; una enfermedad virside 1lamada cadang_cadang {9va9t las palmeras cocoteras en piantaoones diias IsI# Filipinas I gtro viroide provoc-grand.es,estragos a Ia industia de los crisantemos en Estaos Uidos. En el ensa_ y-o.Laaa erperimental se relata el descubimieto de untrfo diferente de agente infeccioso aun'ms simple,queiel

vioide.

oa

CAPITULO 1,

Introduccin al estudio de la biologa,.celular

LA PERSPECTIVA HUMAl\A
La b,squeda de uL aacutla. corltr& et SIDA
A Ia mitad del decenio de 1980 haba
grandes esperanzas de desarrollar una vacuna para prevnir Ia infeccin con

demodo que no tuvieraposibilidad de causar SIDA, tal vacuna anpodra ser

peligrogaporque laintegracinde cualquier material gentico ai DNA de una clula tiene el riesgo de convertirla en una clula cancerosa maiigna. Habla,acuerdo de que el camino ms seguro era desarrollar una vacu-

inducir una respuesta inmunoigica. Aunque todas las vacunas parecieron

seguras por no producir efectos colaterales aparentes enlos individuos sometidos a la prueba, su xito para producir

HIV, el virus causante del SIDA. La mayor parte de las vacunas contra enfemedades virales, como la poliomielitis, la viruela,negra y eI sarampin, contienen virus muertos ntegros

o virus vivos atenuados (virus modificados que ya.no son capaces de provocar infeccin grave); l,a inyeccin de estos virus inofensivos engaa al sistema inmunolgico del cuerpo para producir ancuerpos especficos y clulas de inmunidd que permanecen a la espera, listas para atacar al autntico virus caiante de ia enfermedad si logra penetrar a1 organismo. Una de ias ventajas de utilizar virusvivos atenuados

na a partir de la protena del virus

proyectada hacia afuera de la cubierta

una respuesta de inmunidad fue variable. PorItimo, se determin que ias vacunas elaboradas por dos compaas, Genentech y Chiron

viral. Esta protena de Ia cubierta, denominada 9p120 (fig.1-21.,b)

es ei

comse

ponente de Ia partlcula viral que

como.parte de una vacuna es que se estimula a las vas humoral y celular del sisterna inmunolgico. La inmunidad hurnoral es medida por anticuerpos solubles disultos en la sangre.
Estos anticuerpos son sintetizadcs por

clulas derivadas de linfocitos B. Por Io contrario, Ios Iinfocitos T se encargan de la inmunidad mediada por c1u1as, clulas capaces de reconocer y destruir alas clulas del cuerpo infetadas por virus.

Durante ei decenio de 1980, prcticamente haba acuerdo unnime de que una vacuna conka el SIDA' dependiente de virus muertos o atenuados, era segura. A diferencia de la mayor parte de los virus infecciosos, el HIV integra su material gentico a los cromosomas de1 husped, .donde permnece durante aos destruyendo gradualmente Ia'salud de una percona. Toda vacuna contra el SIDA que contenga partculas virales tambin
contiene I{NA viral, el cual puede copiarse a DNA e intregrarse'a los cromosomas celulaes. Aun si pudiera aiterarse el material gentico del virus

enlaza a la superficie extema de la clula husped antes de infectarla. La protelna viral empleada para la vacuna tendra que elaborarse a partir de un gen sintetizado en el laboratorio. EI gen se introducira a ciulas de mamferos que pueden desarrollarse en gratl cantidad en ei laboratorio, Las clulas sometidas a procesos de ingeniera gentica produciran una gran cantidad de la protena que deba purificarse y emplearse para fabricar ia vacuna. Se esperaba que ia vacuna constituida por Ia protena de la cubierta det HIV obligara a la persona a sintetizar anticuerpos.neutraliza;nfes, o sea anticuerpos capaces de bloquear la entrada del virus a la clula y por 1o tanto de prevenir que las personas expuestas al virus se ifectaran. Una desventaja de la vacuna basada slo en la protena de Ia cubierta es que no se esperaba que esmuiara la va del sistema inmunolgico mediada por clulas, Ia cual tal vez se necesitaba para d.estruir una clula que fuera infectada por el virus. Numerosas compaas en colabo-

inducen. un nivel aceptable de anticuerpos en individuos vacunados durante un periodo razonable. De iguat importancia, se demostr que estos anticuerpos inuitro evitan que el virus infecte ciulas. Se programaron estudios en gran escala para iniciarlos en 1994 para probar la eficacia de la vacuna, esto es, si era capaz de prevenir Ia infeccin con HIV en miembros de poblaciones de alto riesgo. Pero hubo una serie de acontecimientos que cambiaron los planes. Se descubri que los anticuerpos producidos por las personas en respuesta a ia vacuna no eran tan eficaces como se pens para prevenir la infeccin. Se habanllevado a cabo pruebas

Ciba-Geigy,

c
1,

r
,c

racin con vaias agencias' gubernaqrentales alrededor de1 mundo produjeron vacunas
a

anteriores de actividad neutralizante empleando vus desarrollados en el laboratorio en lneas de clulas cultivadas. Cuando se probaron anticuerpos contra ei virus aislados de personas infecta das con HfV mostrar6n.ineficacia casi total para prevenir 1a infeccin de las ciuIas. A diferencia de casi todos los virus, el HIV puede mutar con rapidez y provocar cambios en Ia estructura de su cubierta protenica. Por Io tanto, los anticuerpos aparentemente fueron producidos contra una versin
de la

p
e

ii

\ I

n q
e

n
o

c c
j

cubierta protelrLica presente eh lds

base de protenat de

Ia cubierta del HIV. T-as primeras dos fases de prueba clnica de una nueva vacuna estn diseadas para determinar si la vacuna es segura y capaz de

virus de las cIulas cullivad.as, pe.ro no del virus residente en Ia mayori de los individuos infectados. Este resultado produjo gran pesimismo en muchos investigadores respecto de que Ia vacuna fuera eficaz para prevenir la infec-

I, c
d
S

CAPITULO 1"

Introduccin al estudio de tabiologa cetular

lc.

cin por HIV en la poblacin general. Adems, era realmente difcil conse-

guir voluntarios para el estudio. No s1o a un nmero significativo de voluntarios se 1es administrara vacuna
placebo, y los que recibieran 17 verdadera vacuna en adelante tendran que ser positivos al HIV debido a qu h prueba para determinar el estado HIV depende de Ia presencia de anticuerpos para los cuales se dise la vacuna. Para empeorar las cosas, hubo, informes de que al menos 10 individuos
que haban participado en las primeros

dmicas en la regin de1 mundo donde se efectuarn las pruebas. Mientras tanto, los inconvenientes que acompaan a Ia primera generacin de vacunas HIV, adems de la creencia general de que ia biologa de Ia enfermedad es demasiado compleja para desmantelarla mediante una simple vacuna, llevaron a muchos investigadores de1 SIDA a reconsiderar 1a po-

dez, incluso mientras se estpropgan-

do dentro de un individuo infectado. Corno resultado, un irrdividuo infectado porta mitiples variantes del virus, cada una con dj.ferentes propiedades.
Estas diferencias se amplan cuando se

sibilidad de desarrollar una vacuna

basada en Virus vivo atenuado. Como
se

hizo notar antes, una de las ventajas

estudios diseados para determinar.la seguridady potencia inmunolgicas de la vacuna se haban inJectado con el virus. Estas noticias confimaron Ia iclea cada vezms extendida de que lavacuna no eralo suficientemente eiicazpara justificar un estudio en gran escala en Estados Unidos, Por ltimo, se observ que nrmalmente un individuo infectado produce anticuerpos contia las protenas de 1a cubierta viral despus de unos cuantos meses de Ia infeccin, pero al parecer tienen poco valor para alterar el curso de la enfermedad. En junio de 1994,luego de considerar todos estos factores en conjunto,
ios National Institutes of Health toma-

de emplear virus atenuado es estimular ambas vas del sistema inmunolgco: la humoral y la mediada por clulas incrementando, por 1o tanto, su probable eficacia. Aunque esta vacuna presenta una posibilidad finita de inducir cncer o de causar SIDA, ese ries-

examina Ia estructura del virus en los diferentes miembros de una poblacin (fig. PH 1-1). Puesto que una vacuna eficaz contra una cepa de virus puede ser totalmente intil contra otra cepa, el probiema de desarroliar una cepa de virus para elaborar una vacuna eficaz contra todos es muy complicado. Otra forma alternativa para Ia prevencin y tratamiento del SIDA se analizar en Laperspectiaahuntana del ca-

pltulo

1l-.

ron Ia decisin de no seguir adelante con las pruebas en gran escala para
probar la eficacia de vacunas basadas
en gp120 enEstados Unidos. Poco despus de esta decisiry Ia Organizacin

Mundial de Ia Salud (OMS) decidi

proseguir las pruebas enuna regin del

go est bastante bien equilibrado en una poblacin con probabilidad elevada de contraer Ia enfermedad. En la actualidad, varias compaas de biotecnologa estn trabajando sobre vacunas elaboradas con virus atenuados que muestran eficacia para prevenir la enfermedad en animales de laboratorio. Otro mtodo para induci inmunidad es introducir el gen de 1a protena de Ia cubierta dei HIV en eI DNA de otro virus, por ejemplo eI virus de 1a vacuna/ y emplear el virus vivo as manipulado como agente inmunizante. Por ejemplo, ei virus de 1a vacuna manipulado causara una infeccin
Ieve y estimulara
a1 cuerpo a producir anticuerpos y clulas inmunes contra la potena HIV generada durante la infeccin con el virus de 1a vacuna.

mundo donde eI riesgo de contraer SIDA es muy alto. Se estim que para
'e1ao 2000 unos 40 millones de personas estarn infectadas con eI HIV; ms de 90% de esos individuos vivirn en pases pobres del tercer mundo. La va-

Los investigadores del SIDA

se

muestran muy pesimistas acerca de la probabilidad de desarrollar una vacu-

I
I

I
I
L.

cuna ya lista para probar se prepar contra protenas de la cubierta de la cepa B del HIV prevaleciente en Estados Unidos y Europa, pero no en el resto del mundo donde predominan otras cepas. Por Io tanto, Ios estudios de Ia OMS tendrn que esperar el desarrollo de una nueva vacuna basada en protenas de las cepas del HIV en-

na eicaz en el futuro cercano. Hay

muchas razones para ese pesimismo, pero 1o ms importante es que los

investigadores todava no comprenden por completo cmo opera el virus dentro del cuerpo o por qu raz1nla respuesta inmunolgica normal es tan ineficaz contra la infeccin. Otra cornplicacin se origina en Ia capacidad del virus para mutar con demasiada rapi-

FIGURA I,II 1-1. Arbol filogentico de1 HIV, Las tres ramas de este rbo1 reflejan las cliferencias en la estructura de las protenas de1 HIV en"tres diferentes grupos e individuos infectados clue viven en Amsterdam; stos son: adictos a drogas intravenosas (amarillo), homosexuales masculinos (verde) y hemoflicos (prpura). Las diferenres ramificaciones dentro de cacla color ilusrran el grado de variacin viral dentro de estas subpoblaciones holanclesas. Para que una vacuna basada en protenas viralei pueda ser til contra ei Hl ene que estar diiigicla contra partes de 1a protena con el menor grado de vaiabilidad .dentro cle la poblacin. (Cortesa de lnap Gottdsmit.)

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CAPITULO

1,

Introdiccin al estudio

de Ia biologa celular

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CAPITULO

1.

Introduccn al estudio de la:biologa celular

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26

QAPITULO

7.

Introduccin al estudio de la biologa celular

FIGURA vE iiJ. Estalfigura muestr cual el DNA de1 gen PrP d"e algunas p( una enzima (llamada BsmA.1),-que. dr punto donde encgentra ula secuencia 1

un DNA'unido a un coiorarite, muestra et DNA de un individuo sal

rs'lcon EC] . -: de ECi; o sea, casos donde no hav,muestras de la n
1

n.. Las dos. -,',;

miembros de Ia familia. Cuando el DNA'del een,p Ios. pacientes con ECJ se trata con la:enzima; !.,obl del DNA es resistente la enzima. Esta resGtencia

no ci

os causa Ia enf ermedad.

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rf, no's susceptibG al; agent infecciosoiy su tejido cebal ap;rrece.norrnal,.'(Aoriesa,..Ar,.At"iana ,,Agtz-i: :e.1]Neissmani):1-: , ':., '
cqP-.4!ided PaIa, produEir:la protena

f;:le....u].1

' LsuiLauu uY1 rrLuLurdulutL pte'lJ co,r10il9_$e,l'.'c'fie;'.'Elr telloo 9:-d911fgS"la.io.+3r.er,1a COn pIlOneS qg Scfar)fg . tsI t.lido

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atn tambin fue inyectado con priones,dp,.lscrapie" 20 setnns yeclado :on pr.ones de. f icrapic sernanas antes, pero debido a que carece de1 gen PrP,y por lo tantorno trene

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CAPITUI,O
jrililill
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1,

Introduccin al estudia de la biologa celular

27

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r-hum&o:,e.,16s-,nimaleis,que,

c tipo deienfrrnedadrcere' une a una

,$:,tjltiglllt'e,;farece'Ia.forrnain;de'.lai,estctura prp*,y,se acrimula la:protena anormal..En eI caso de enJermedades intui9p..o.h,1r; :fg,cc1osffix.;pn{r,.como,etr*uru,ei scrapie;Prsiner,u.giere I nicos; o seira- que la duplicacin se inicia cuando una versin scrapie e la ) sean:pitado- qrotlnafrP se-une a [a protena prp normal.(o una versin no uando se;trans. . desplegada de Ia protena), qne trans{orma liprotena normal o, los animales ,enlformamodificada.l3 poilo tanto, si una molcula prpl se

1-e,,!,,

desarrollanlenf.r*uiu,

1:le,;., n-deliprin

:vadalen,l hombe,19,Este podran entonces enlazers" dor molculas ms de orpc piopresenci:.de un sofo'rggn duciendo.cuatro.,moleculas prpk, y as sucesivamente. ' rtennomal, e sufiaiqntel , , , Aunque las,enfermedades prin son muy raras, otros tras_ .1,+9 ugmpnan'aJa devasta- i,trnos d.egenerativos nerrioso's, ;;;; ;"f;J;il;;

PrPC este hecho generara dos molculas p.psc que

, j:..*l:irl,, ,t,r. : 'r,. '. .A1gimerleParkinson,so.rmuycomunes.,seesperaqueel ,,, ...,-,lli'ltu: .:.: . ,.::.,i1.;i,..:i,, . l estudio de. las enJermedades prin ser til para entener Ia . i,"it*1..,',: ., ;iar1,,,:...,.'l,base..de.padecimientoshumanosmscomunls. t . .... ,,, ;r,::'... :'t.. .tr,lti',,l, .'l

!::ai

9,iu"1'iip1eJ

!;1p;iio,

$jp!,otgin

rGistm

nn-s as

SINOPSIS
La teora celular fiene tres dogmas. 1) Todos los organismos se componen de una o ms clulas ;2) la clulaes Ia unidad de orgaruzacin bsica de la vida, y 3) todas las clulas se origi_ nan de cluias prevas (p.2).

Las caractersticas de la vida, segn se manifiestan en las cblul.us, se pueden describir medlante un conjunto du p.opiedades. Las clulas son muy complejas, su estructura est

altamente organizada y es predecible. La informacin para construi una c1ula est codificada en sus genes. Las cel,las se reproducen por divisin celular; e1 suministro de energa para sus actividades proviene de Ia energa qumica; e;ecun reacciones qumicas contoladas por enzimis; particpan en un gran nmero de actividades mc:ricas;,responden a, est_ mulos, y son capaces de un notable nivel de autorregulcin

(p.3).

r,,,

28

CAPIULO

!.

Introdiccin al estudio

de

labbloga celular

Las clulas pueden ser procariotas o eucariotas. Las clulas procariotas sIo se encuenhan enke las bacterias,.en tanto que todos los otros,tipos de organismos; protistas, hongosplanias y ani:rnIes, estn compuestos de clulas eucariotas. Lasilr1u, procariotas y las, eucariotas comparten muchas caractes ficas

comunes,"incluyendo una membrana celula similar, un siste_ 1a gomrln para almlcenal y utilizar,informacin gentica,y vas metablicas siulaes. Las,clulas procariotas Jon el,tipL ms.simple, carecen de organelos membranoios compleos (p.ej" relculo endoplsmico, complejo de Golgii mitocous y cloroplastos), cromosomas y estructuas citoisquelticas caracterstiCas de las clulas,eucariotas, Los ilos pos,de clu1as tambinse pueden distinguir por sus;mecanismLs de divisin celular, sus estructuras locomotoras yieltipo de pared celular que_producen (en caso de que hubira alguna p^ared celular) (p t).
Lo_s

grtud, en ta4to que las ciulas eucaiotas en condiciones tpicas,so.n de 10 a30lm. Las clulas son de tamao microscpico por,alggnas..razons: su ncieo posee un nrimero limitdo de copias de cada:gen,:l superficie (que sie como ea de intercambi. enfte:.Ia, clula) se convieite en un factor limitante a
medida que la,clula aumenta de tamao y Ia distancia entre Ia superficie dd la clula y su interior tambin sera demasiad.o grande para que la.clula satibfaga sus..necesidades mediante simple ditusin (p,15).

Losvirus son patgenos no celulaes que slo pueden reproducirse cuando stn presentes dentro de una clula iiva. Fuera de Ia clula, el,vius existe como un paquete de macromolculat o virin, Los viiones presentan gran variedad d.e
formas,y tamaos, pero todos ells constan e cido nucleico viral encerrado en una cubierta que conene protenas virales. Las infecciones viales pueden producir: I) estruccin de la clula husped cn produccin acompaante de cepas virales, o 2) integracin del cido nucleico vial at DNA e c1ula husped que con frecuencia altera las acvidades de,dicha cldla. Los virus no son una forma primitiva de vid.a, sino ms bien han evolucionado.securLdaiamente a partir de ftagmentos de cromosomasxelulaes (p. L7).
Los vioides y priones son patgenos que se cree contienen

organismos eucariotes multicelulares se componen

d.e

cIulas, especializadas en. diferentes actividades. Las clulas del moho del fango son un sistema r11 p'ara estud.ia la diferenciacin celular,debido a que suetapamulticelular consta de

slo dos tipos bsicos de clulas: las que prod.ucen el tallo del guerpo frutal y ias que producen las esporas, por lo contrariq ia mayor parte de las plantas y aniinales'constan d.e d.ocenas de diferentes tipos de clulai, cada unh de ias cuales tiene su propia estructua y funein distinta (p. 14).
_Casi

slo RNA y protelna, respecfivamente. Los viroides.causan

todas las clulas siempre son de tamao microscpico.

Las clulas bacteriaras tpicamente son de unoA 5lm de lon_

cierto nilmero de enfermed ades en las plantas, en tanto que los priones producen enfermedades neurolgicas mortabJ en el ser humano y otros mamferos (p Z1).

PREGUNTAS DE REPASO
1. CuIes son las.propiedades fund.amentales que compar_ ten todas las clulas? Desiribir la importancia de cada una

7.

de estas propiedades. 2. Describi algunaq de las ca,actefscas d.e las clul que sugieren que todos los organismos vivos se derivan de-un ancestro comrln,
.

3. Cul es la fuente de enrgfa que apoya la vida sobre Ia

tiela? Como se pasa la energla de un organismo al siguiente?

a:hgstroms tendra?, cuntos nanmetros?, cuntos miJ._ metros? L0. Comparar y contrastar: nuciotido y ncleo; flagelo de r:na bacteria y de un espermatozoide; miembros d.l subreino

Qu propiedades distinguen a un virus de una bacteria? 8. Por qu se piensa que 1os virus evolucionaron a partir de fonnas de vida celuia en vez d.e l inverso? 9. Si una mitocondria tiene 2 lm de longitud, cuntos

4. Comparar ias clulas procariotas y las eucariotas segrln diferencias eshucturales, funcionales y metablicas. 5. Ca es la importancia e t:l diferui.iu.iJ"ulor*l
6, Por qu casi todas las clulas siempre son microscpicas?

Achaeobacteria y una cianobactia; cluias precllrsoras de esporas y precursoras del tallo de una.cIu del moho del fango; fijacin de nikgeno y fotosrtesjs; bacterifagos y viius del mosaico del tabaco; provirus y virin; vioides y priones.

1. Considere alguna pregunta acerca de la estructua o la.funcin de las clu1as que le interese responder, Los datos requeridos para responder la pregunta serlan rs fciles d iecolectar trabajando en un animal o en una planta ntegros o .en:urra poblacin de clulas cultivadas? Cules
serfan las ventajas y desventajas de trabajar

mo ntegro en comparacin cpn un cultivo de clulai? 2. La figura L-3 mueska una cIula epitelial del intestino con nuieosas microvelosidades. CuI es la ventaja del orga_
nismo de poser estas rnicrovellosidades? eu
e

mun

organis_

que le ocu:riera a un individuo que carezca de dichas miqovellosidades como resultado de una mutacin hereditaria? 3. Las primeras clulas hurnanas que se cuitivaron con xito se derivaron de un tumor maligno Cree usted que esto slo refleja ia disponibilidad de clulas cancerosa, o que estas clulas son mejores sujetos para cultivo celular? or
qu?

esperai{a

4. Los esquemas de ias clulas vegetales y aniinales de la hgwaL-9, b,c, indican ciertas estructuras presentes en las

CAPITULO

t.

Introducci1n al estudio delabiologa

celutar

29

clulas vegetales pero ausentes en las animales. Cmo piensa usted que afecta la vida de la planta cada una de
estas estructuras?

5. Habr usted notado que las clulas poseen receptores sobe su superficie que les permiten responder a estlmulos especlficos. Muchas clulas del cuerpo humano tienen receptores que les perrniten enlaza hormonas especficas que ciculan en la sangre. Por qu cree usted que estos recep.tores hormonales son importantes? Cul sera el efecto sobre las actividades fisiolgicas del cuerpo si las ciulas
carecieran de estos receptores, o si todas las cluias tuviean los mismos receptorqs? 6. Hans Driesch no fue el primero en comprobar la potenciaIidad de una de las dos primeras clulas de.un embrin. Unos pocos aos antes, el embrilogo alemnWilhelmRoux mat ua de las primeras dos clulas de un huevo de rana

Rube Goldberg en Ia figura L-8, en qu difieren de una actividad human4 como construir,un ca:ro en una llnea de ensamblado o encestar un tiro libre en un juego de baloncesto?

8.

A diferencia de las clulas

bacterianas, el nricleo de una clula eucariota est rodeado de una membrana de doble
capa tachonada con poros complejos. Cmo piensa usted. que esto pueda afectar al hfico entre el DNA y el.citopiasma de una clu1a eucariota en comparacin con una clula

procariota?

, con una

agu.ja caliente

y iuego observ el destino

9. Examinar la fotograffa del protozoario ciliado de la figura 1-L6 y considerar algunas de las actirridades en las cuales participa esta clula y en las.cuales no par-ticipa una ciula muscula o una nerviosa de su propio cuerpo. L0. Qu tipo de clulas pensarla usted que alcanzarfan el mayor volument una clula muy aplanada o una esfrica?
Por qu?

de la

clula viva. Not que Ia cluia se desarroll en Io que prcticamente,era Ia mitad de un embrin. Cree usted que estos experimentos indican que los mecanismos que go. biernan eI desarrollo de las ranas son fundamentalmente diferentes de los que gobiernan el desariollo de los erizos de mar? Hay alguna manera de reconcilia estos dos experimentos seghn la forma en que se efectuaron? 7. Si asumimos que las actividades dentro de las clulas ocurren de manera anloga a la demostrada en la caricatura de

L1. Observe la estructua. del adenovius y del HIV esquematizada en la figura 1-21. Piensa usted que sera ms fcil

desa:rolla rura vacuna utilizando ia cubierta protenica del adenovirus en comparacin con la protena gp120 del HW? Por qu s o por qu no? 12. Si usted tuviera que argumentar acerca de que los virus son organismos vivos, qu caracterfsticas. estructurales y funcionales del vius podla ut'rliza para apoyar su ar:,

gumentacir?

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