Fecundao e Desenvolvimento Embrionrio- Do Zigoto a Blastulao

1. Compare a estrutura geral dos gametas masculino e feminino, relacionando a forma de cada um funo que desempenham na fecundao. Na maioria das espcies, existem dois tipos fundamentalmente diferentes de gametas. O ocito est entre as maiores clulas em um organismo, enquanto o espermatozoide normalmente a menor. O ocito e o espermatozoide so otimizados em vias opostas para a propagao dos genes que carregam. O ocito no mvel e contribui para a sobrevivncia dos genes maternos por promover grande armazenamento de matria-prima para o crescimento e o desenvolvimento do embrio, juntamente com um eficiente envoltrio protetor. O espermatozoide, ao contrrio, otimizado para difundir os genes paternos explorando este investimento materno: de modo geral, ele altamente mvel e tem uma forma aerodinmica que lhe proporciona rapidez e eficincia para realizar a fecundao. A competio entre os espermatozoides feroz, e a grande maioria falha na sua misso: dos bilhes de espermatozoides liberados durante a vida reprodutiva de um homem, apenas uns poucos conseguem fecundar um ocito. Os ocitos da maioria dos animais so clulas nicas gigantes. Eles contm reservas de todos os materiais necessrios ao desenvolvimento inicial do embrio at o estgio no qual o novo indivduo possa comear a se alimentar. Antes desse estgio, essa clula gigante sofre clivagens em muitas clulas menores, mas sem ocorrer crescimento efetivo. Normalmente, o citoplasma do ocito contm reservas de nutrientes, a qual rica em lipdeos, protenas e polissacardeos e que geralmente est contida dentro de estruturas delicadas, chamadas de grnulos da gema. O revestimento do ocito outra peculiaridade dessas clulas. uma forma especializada de matriz extracelular que consiste, em grande parte, em glicoprotenas algumas secretadas pelo ocito e algumas pelas clulas que o circundam. Em muitas espcies, o revestimento principal uma camada imediatamente em torno da membrana plasmtica do ocito, chamada zona pelcida, que protege o ocito de leses mecnicas e, em muitos ocitos, e tambm atua como uma barreira espcieespecfica para o espermatozoide, admitindo apenas a entrada daqueles da mesma espcie ou de espcies intimamente relacionadas. Muitos ocitos (incluindo os de mamferos) contm vesculas secretoras especializadas, logo abaixo da membrana plasmtica, na regio externa, ou crtex, do citoplasma oocitrio. Quando um espermatozoide ativa o ocito, estes grnulos corticais liberam seu contedo por exocitose; o contedo dos grnulos altera o

revestimento do ocito de forma a ajudar a evitar que mais de um espermatozoide fusione-se ao ocito. Os espermatozoides tpicos so clulas despidas, equipadas com um flagelo forte que os impulsiona atravs de um meio aquoso, mas desprovidas de organelas citoplasmticas, como ribossomos, retculo endoplasmtico ou aparelho de Golgi, que so desnecessrias para a tarefa de transferir seu DNA para o ocito. No entanto, os espermatozoides contm muitas mitocndrias localizadas estrategicamente onde elas possam dar fora ao flagelo de forma mais eficiente. Os espermatozoides geralmente consistem em duas regies morfolgica e funcionalmente diferentes, contidas por uma nica membrana plasmtica: a cauda, que impulsiona o espermatozoide em direo ao ocito e auxilia na sua passagem atravs do revestimento do gameta feminino, e a cabea, que contm um ncleo haploide altamente condensado. O DNA no ncleo est condensado de maneira extremamente compacta, para minimizar seu volume para o transporte, e a transcrio est desativada. Os cromossomos de muitos espermatozoides carecem das histonas das clulas somticas e, ao invs delas, esto condensados com protenas simples, com carga altamente positiva, chamadas de protaminas, bem como com histonas especficas de espermatozides. Na cabea da maioria dos espermatozoides de animais, posicionada muito prximo extremidade anterior do envelope nuclear, est uma vescula secretora especializada chamada de vescula acrossmica (ou acrossomo). Essa vescula contm enzimas hidrolticas que acredita-se que auxiliem o espermatozoide a penetrar atravs do revestimento externo do ocito. Quando um espermatozoide entra em contato com o revestimento do ocito, o contedo do acrossomo liberado por exocitose na chamada reao de acrossomo (ou reao acrossmica). Essa reao necessria para o espermatozoide ligar-se ao revestimento, passar atravs dele e fundir-se com o ocito. A cauda mvel do espermatozoide um flagelo longo, cujo axonema central deriva-se de um corpo basal situado exatamente atrs do ncleo. O axonema consiste em dois microtbulos centrais simples circundados por nove pares de microtbulos dispostos simetricamente. O dobramento ativo do flagelo causado pelo deslizamento dos pares de microtbulos adjacentes entre si, controlado por protenas motoras chamadas de dinenas, as quais usam a energia da hidrlise do ATP para o deslizamento dos microtbulos. O ATP produzido por um grande nmero de mitocndrias altamente especializadas que esto concentradas na parte anterior da cauda do espermatozoide (chamada de pea intermediria), onde o ATP necessrio.

2. Descreva as principais fases do processo de fecundao humana, considerando o local em que ocorre e os principais elementos envolvidos nesse processo.

Uma vez liberados, o ocito e o espermatozoide esto igualmente destinados a morrer dentro de minutos ou horas, a menos que encontrem um ao outro e se fundam no processo de fecundao. Por meio da fecundao, o ocito e o espermatozoide so salvos: o ocito ativado para iniciar seu programa de desenvolvimento, e os ncleos haploides dos dois gametas se unem para formar o genoma diploide de um novo organismo. Dos 300 milhes ou mais de espermatozoides humanos ejaculados durante o ato sexual, apenas cerca de 200 alcanam o local de fecundao no oviduto. Uma vez que encontre um ocito, um espermatozoide deve primeiramente migrar atravs das camadas de clulas da ranulosa que circundam o ocito e, depois, ligar-se e atravessar a zona pelcida. Finalmente, ele deve ligar-se e fundir-se membrana plasmtica do ocito. Espermatozoides ejaculados de mamferos, inicialmente, no so competentes para realizar nenhuma dessas tarefas. Eles devem primeiro ser modificados por condies no trato reprodutor feminino, necessrio para o espermatozoide adquirir a capacidade de fecundar um ocito. A capacitao leva cerca de 5 a 6 horas em humanos, sendo completada apenas quando o espermatozoide chega no oviduto. O espermatozoide sofre grandes alteraes bioqumicas e funcionais, incluindo alteraes em glicoprotenas, lipdeos e canais de ons na membrana plasmtica, e uma grande alterao no potencial de repouso de sua membrana (o potencial de membrana se desloca para um valor mais negativo, de modo que a membrana se torna hiperpolarizada). A capacitao tambm est associada a um aumento no pH citoslico, a fosforilao de tirosina de vrias protenas espermticas e a exposio dos receptores de superfcie celular que ajudam o espermatozoide a ligar-se zona pelcida. A capacitao altera dois aspectos decisivos do comportamento espermtico: ela aumenta bastante a motilidade do flagelo e torna o espermatozoide capaz de sofrer a reao de acrossomo. Durante a ovulao, ocitos mamferos so liberados do ovrio para dentro da cavidade peritoneal prximo entrada do oviduto, para dentro do qual eles so levados rapidamente. Eles esto cobertos com vrias camadas de clulas da granulosa embebidas em uma matriz extracelular rica em cido hialurnico. As clulas da granulosa podem ajudar o ocito a ser recolhido para dentro do oviduto, e elas tambm podem secretar sinais qumicos no-identificados que atraem os espermatozoides para o ocito. Encontrando um ocito, um espermatozoide capacitado precisa penetrar as camadas de clulas da granulosa, utilizando uma enzima hialuronidase presente na superfcie do espermatozoide. Ento, ele pode se ligar zona pelcida. Normalmente, a zona pelcida funciona como uma barreira fecundao entre espcies, e a remoo dela frequentemente elimina essa barreira. A zona pelcida da maioria dos ocitos de mamferos composta principalmente por trs

glicoprotenas, as quais so todas produzidas exclusivamente pelo ocito em crescimento. A zona induz o espermatozoide a sofrer a reao de acrossomo (ou reao acrossmica), na qual o contedo do acrossomo liberado por exocitose. A reao de acrossomo necessria fecundao normal, pois expe vrias enzimas hidrolticas que talvez ajudem o espermatozoide a abrir o tnel atravs da zona pelcida, e altera a superfcie do espermatozoide de maneira que ele possa se ligar e se fundir membrana plasmtica do ocito. Depois de um espermatozoide sofrer a reao acrossmica e penetrar a zona pelcida, ele liga-se membrana plasmtica do ocito, inclinando-se sobre as extremidades das microvilosidades na superfcie do gameta feminino. O espermatozoide liga-se inicialmente por sua extremidade anterior e, depois, por sua poro lateral. Rapidamente as microvilosidades vizinhas sobre a superfcie do ocito se alongam e se agrupam em torno do espermatozoide para assegurar que este seja aderido de forma firme at que possa fundir-se ao ocito. Depois da fuso, todos os componentes do espermatozoide so atrados para dentro do ocito, medida que as microvilosidades so reabsorvidas. Os mecanismos moleculares responsveis pela ligao e fuso espermatozoide-ocito so em grande parte desconhecidos, embora, aps um nmero de ativaes artificiais, duas protenas de membrana tm sido apontadas como necessrias fuso. A fuso com o espermatozoide ativa o ocito, fazendo os grnulos corticais liberarem seu contedo por exocitose, em um processo chamado de reao cortical. A meiose, que estava retida em metfase II, concluda, produzindo um segundo corpsculo polar e um zigoto, o qual comea a se desenvolver. 3. Discuta a importncia da reao acrossmica no processo de fecundao. A zona pelcida induz o espermatozoide a sofrer a reao de acrossomo (ou reao acrossmica), na qual o contedo do acrossomo e liberado por exocitose. A reao de acrossomo e necessria a fecundao normal, pois expe varias enzimas hidrolticas que talvez ajudem o espermatozoide a abrir o tnel atravs da zona pelcida, e altera a superfcie do espermatozide de maneira que ele possa se ligar e se fundir a membrana plasmtica do ocito. A ZP3 purificada in vitro pode disparar a reao de acrossomo, possivelmente por ativao de um receptor semelhante a lecitina na superficie do espermatozoide, que parece ser uma forma transmembrana da enzima galactosil-transferase. A ativao do receptor leva a um aumento no Ca2+ no citosol do espermatozoide, o qual inicia a exocitose. Em vrias espcies de mamferos, a penetrao do espermatozide durante a fertilizao produz um transitrio e peridico aumento de clcio no ocito, que se propaga por vrias horas aps este estmulo inicial. O significado biolgico destas oscilaes nas concentraes de clcio no bem conhecido, mas se sabe que os ons clcio

esto envolvidos na exocitose dos grnulos corticais para o bloqueio da polispermia e controlam a progresso do ciclo celular (clivagem do embrio).

4. Descreva o desenvolvimento embrionrio humano desde a formao do zigoto at a completa implantao do blastocisto no tero. Uma vez fecundado, o ocito e chamado de zigoto. No entanto, a fecundao nao esta completa ate que os dois ncleos haplides (chamados de prncleos) um do ocito e o outro do espermatozoide tenham se aproximado e combinado seus cromossomos em um nico ncleo diplide. Em ocitos fecundados de mamferos, os dois pro-ncleos no se fundem diretamente como ocorre em muitas outras espcies. Eles se aproximam um do outro, mas permanecem separados ate depois que a membrana de cada pro-ncleo seja rompida em preparao a primeira diviso mittica do zigoto. Na maioria dos animais, incluindo os humanos, o espermatozoide contribui com mais do que seu genoma para o zigoto. Ele tambm fornece seus centrolos estruturas que esto ausentes em ocitos humanos no-fecundados. Os centrolos do espermatozide entram no ocito junto com o seu nucleo e a sua cauda, e um centrossomo se forma em torno deles. Nos humanos, o centrossomo se duplica e, ento, os dois centrossomos resultantes auxiliam na organizao do primeiro fuso mittico no zigoto. Isso explica por que a poliespermia, na qual vrios espermatozides fornecem seus centrolos para o ocito, causa a formao de fusos mitticos extra ou multipolares. Ocorre um processo de clivagem, o que consiste em repetidas divises do zigoto, resultando em um rpido aumento do nmero de clulas. Primeiro, o zigoto se divide em duas clulas conhecidas como blastmeros; estas ento se dividem em quatro blastmeros, oito blastmeros, e assim por diante. A clivagem normalmente ocorre enquanto o zigoto atravessa a tuba uterina, rumo ao tero. O zigoto ainda se encontra envolvido pela zona pelcida, deste modo, ocorre um aumento no nmero de clulas sem que aumente a massa citoplasmtica. A diviso do zigoto em blastmeros comea cerca de 30 horas aps a fertilizao. Divises subseqentes vo se seguindo e formam blastmeros progressivamente menores. Os blastmeros mudam de forma e se alinham, apertando-se uns contra os outros para formar uma esfera compacta de clulas conhecida como mrula. Este fenmeno, chamado de compactao, provavelmente mediado por glicoprotenas de adeso da superfcie celular. A compactao permite uma maior interao clula-a-clula e constitui um prrequisito para a segregao das clulas internas que formam o embrioblasto ou massa celular interna do blastocisto. A mrula (do latim, morus, amora), uma bola slida de 12 ou mais blastmeros, formada trs dias aps a fertilizao e penetra no tero. Seu nome provm da sua semelhana com o fruto amoreira.

A blstula o estgio de desenvolvimento embrionrio em que, aps sucessivas clivagens, centenas de clulas da mrula reorganizam-se agregadas e formam uma espcie de bola, com uma cavidade central repleta de lquido que denomina-se blastocele. Essas clulas formam uma camada celular chamada blastoderme. A blstula sucede a mrula e antecede a gstrula. , portanto, umas das primeiras fases de formao, antes que o embrio seja propriamente constitudo. No se sabe exatamente quanto tempo o vulo gasta para atravessar a trompa (oviduto). Presume-se que esse tempo seja de trs a quatro dias. No sexto dia da fecundao, o blastocisto fixa-se no endomtrio do tero, iniciando a fase de implantao. Nessa fase, o embrio vive custa do material difusvel atravs do endomtrio, uma vez que suas reservas nutritivas (vitelo) so mnimas. A implantao ocorre normalmente na parede posterior do corpo do tero, no espao entre a abertura de glndulas do endomtrio. A implantao do blastocisto comea no fim da primeira semana e termina antes do final do segundo. A zona pelcida degenera no quinto dia. O desaparecimento da zona pelcida resulta do aumento de tamanho do blastocisto e da degenerao causada por lise enzimtica. As enzimas lticas so liberadas pelos acrossomos dos muitos espermatozides que rodeiam e penetram parcialmente na zona pelcida. O blastocisto ento se liga ao epitlio endometrial (sexto dia). O texofoblasto comea a se diferenciar em duas camadas, o suncicioblasto e o citotrofoblasto (stimo dia). O sincciotrofiblasto evade os tecidos endometriais (capilares, glndulas, estroma) e o blastocisto comea a se implantar no endomtrio (oitavo dia). Aparecem no sinciciotrofoblasto lacunas repletas de sangue (novo dia) e o blastocisto penetra abaixo do epitlio endometrial

5.

Diferencie as fases de mrula e blstula considerando os aspectos estruturais e morfolgicos.

O zigoto sofre uma diviso celular (mitose), d origem a duas clulas chamadas blastmeros que se dividem formando quatro blastmeros, que novamente se dividem formando oito blastmeros, e assim sucessivamente. Desse modo, aps consecutivas divises, forma-se a mrula que possui forma esfrica e compacta. A mrula o nome dado ao embrio nesta fase do desenvolvimento, aps as consecutivas mitoses e se limita a uns poucos blastmeros. A blstula o estgio de desenvolvimento embrionrio em que, aps sucessivas clivagens, centenas de clulas da mrula reorganizam-se

agregadas e formam uma espcie de bola, com uma cavidade central repleta de lquido que denomina-se blastocele. Essas clulas formam uma camada celular chamada blastoderme.