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DELBOVINO
DELAS
ReunionesPlanAgropecuario,Artigas171108,
Dr.RalCasasOlascoaga
VACUNACEPA19
Aisladaen1922porJohnBuckdelechedevaca Jersey Extraviadaensuescritoriolarecuperen1923. Espontneamenteatenuadamantuvointactasu envolturadelacadenaOlipopolisacrida. Estabilidadantignicaygenmica. Atenuacinestableyconstante. ColoniasbacterianasdecarcterLisoIntermedio (SI) NoexigeCO2parasudesarrollo;esinhibidaen mediosdecultivoconazuldetioninayenmedios con5u/mldepenicilina. Lassemillasdecepa19posterioresa1956no desarrollanenmediosconEritritol1mg/ml.
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Endiciembrede2007,OswaldR.Crastaycol. RevelaronlasecuenciadelgenomacompletadelDNAde Brucellaabortuscepa19ycompararonconlascepas virulentas9941y2308paraidentificargenescandidatosde virulencia(PublicacindeMayo14de2008). Untotalde3062genesfueronidentificadosenlosdos cromosomasdelacepa19. Hubodiferenciade238genesentrelacepa19ylascepas virulentasydeellos45genesfueronconsistentemente diferentesentrelacepa19atenuadaylasdoscepas virulentas. Elanlisisrevel24genesquepuedenestarasociadosala prdidadelavirulenciadelacepa19. Departicularrelevanciason4genesqueenlacepas virulentascodificanlamembranaexternaproteicaytres protenasqueparticipanenelmetabolismodeleritritol.
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EnEE.UU,desde1941,extensainvestigacinsobresu produccineinmunogenicidad. Msde60aosdeusoenelcontroldelabrucelosisbovina. Poderinmungenorelativamentealto. Estapropiedaddependedeltipodecoloniaquedebeser lisaintermedia(SI)ydelaviabilidaddelasbacteriasque componenladosisdevacuna. Producerespuestainmunemediadaporclulasquees responsableprincipaldelaproteccinconferidacontrala brucelosis.
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Presentaantigenicidadmoderadaenelanimaljoven. Encambio,esaltamenteantignicaenelanimaladulto desdeeliniciodelapubertad. Generaformacindeanticuerposquereaccionanenlas pruebasdediagnstico,(semejantealanimalinfectado). EstapropiedadeselgraninconvenientedelaCepa19. Laedaddevacunacinesunindicadorcrticoquedebeser cumplidoestrictamenteparaevitarlasreacciones persistentes. EnUruguay,desde1deenerode1964a31dediciembrede 1996,ladosisclsicausadaparahembrasbovinasde38 meses(luegode36meses)deedaderade5060milmillones debacteriasviablesdebiendomantenerunaviabilidadde 25milmilloneshastalafechadeexpiracindelavacuna. Esunadosismuyalta,emprica. Lavacunaliofilizadaofrecemayorgarantade conservacindelaviabilidad.
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EnEE.UU,desde1980,lainvestigacinexperimentalen bovinospermitireducirladosisa13x109paralas hembrasde312mesesdeedadya13x108parahembras adultas. Lavacunacindeternerasde38yde36mesesconfiere unaproteccincompletaentre6580%delosanimales vacunadosfrenteaunaexposicindedesafodemediana intensidadarelativamentesevera.Elrestante2035%delos animalesvacunadospresentargradosvariablesde proteccin. Laestrategiadecontroleslavacunacinanualdelas hembrasjvenesquequedanprotegidasparasustituirla poblacindehembrasadultassusceptibles(novacunadas) enelcorrerde57aos. Soloseaplicaunadosisenlavidatildelanimal.La inmunidadpersistepor7aosyprobablementeanms. Laproteccinsemantiene,porlomenos,porcinco paricionesconsecutivas.
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Lavacunacinanualdelamayorpartedelstockde ternerasdeunapoblacinbovinadurantevariosaos(>57 aos)enunareginopasreduciralaprevalenciaenms del80%yenlashaciendasenmsdel20%. Enunahaciendaafectadaporbrucelosiscuyashembras hayansidoanualmentevacunadaslaincidenciapuede reducirsea>2%sineliminacindelosinfectados. Lavacunacinconaltogradodecobertura(mayorde80%y preferentemente100%)controlaperonoerradicala brucelosis. Serequiere,adems,elsaneamientoconeliminacindelos animalesinfectados(reactores). Lacombinacindelavacunacinsistemticaanualdelas generacionesdeternerasconelmtododepruebay eliminacindelosanimalesinfectadosdaexcelentes resultadosenelcontroldelabrucelosisbovinaytieneun costo/beneficiocompensadordelainversin.
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Patogenicidad:
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Seestimaque2:100.000ternerasvacunadaspuedenretener laCepa19hastalaedadadultaentejidoscomotero, placenta,gangliosyserexcretadaintermitentementeporla leche. UnahembraenlactanciaqueseaportadoradeCepa19en suubreogangliospuededarreaccinsospechosaenla Pruebadelanilloenleche. LaCepa19nodebeaplicarseenhembraspreadassobre todoluegodelos4mesesdegestacinporquepuedecausar placentitisyaborto. LaCepa19nosepropagaporfetocontaminado. LaCepa19tienepatogenicidadbenignaparaloshumanos. Causasndromedecortaduracinconfiebreyaparicinde ttuloserolgicopositivo.Esporello,quelavacunacin debeserpracticadaporveterinarioconadecuadasmedidas debioseguridad.
VACUNACINCONCEPA19DE TERNERASADIFERENTESEDADES.
Dosiscompletadevacunacon40a60milmillonesviablesde Brucellaabortuscepa19. PERMANENCIADEREACCIONESDEAGLUTINACIN
EDADTERNERAS DESPUSVACUNADAS (Meses) PORCENTAJEDEREACCIONESDELAVACUNACIN
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RESUMEN
Eselmejorinmungenoparalashembrasjvenes(38 mesesdeedad). Proveeproteccinporlavidatildelamayorade lasternerasvacunadasentre38mesesdeedad. Nocausaenfermedadenelbovino. Excepcionalmentepersistenportadoresdecepa19en hembrasjvenesvacunadas(2:100.000).Enestoscasosla Cepa19puedeaislarsedelahembraintermitentemente portadoradelaCepa19. Tieneescasosefectossecundariossiseadministraenlas ternerasalaedadde38mesesdeedad.
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RESUMEN
Lavacunacintieneelinconvenientedegenerar reaccionesserolgicasresidualesdemayorduracinluego delos9mesesdeedadyenespecialalalcanzarlamadurez sexual. AumentalaresistenciadelrodeoalainfeccinporBrucella abortus. Protegecontraelabortoenunporcentajemayorde95%. Alreducirdrsticamenteelnmerodeabortosreducela excrecinmasivadebacteriaspatgenasy consecuentementelaexposicinalainfeccin. Ayudaasanearmsrpidamenteelrodeoinfectadoconla vacunacindehembrasadultasnoinfectadasdel establecimientoafectado.Estashembrasadultasquedan serolgicamentereactoresydebenserluegoeliminadas.Se aplicaladosisreducidade3.0x108 Lavacunacindelahembrapreadapuedeprovocar aborto(5%)ylaCepa19puedeseraisladadelavacaodel
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LacepaBrucellaabortus2308fueatenuada experimentalmenteporseriedepasajes sucesivosenmedioquecontenaelantibitico Rifampicinayporseleccindecoloniasde morfologarugosadandolugaralavariante atenuada,geneticamenteestable,denominada CepaRB51. LoscomponentesprotenicosdelacepaRB51no sufrieroncambiosdiferenciales. Eneseprocesodeatenuacinseeliminla cadenaOdepolisacridos(residuosde perosamina)quecubrelasuperficiedelascepas lisasdebrucelas.
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LacepaBrucellaabortusRB51fue desarrolladaporSchurigenelVirginia PolytechnicInstitute,Virginia,EE.UU. LaCepaesunamutanterugosadelacepa virulentaBrucellaabortus2308(usada comodesafoenlaspruebasdeevaluacin delaproteccinconferidaporlasvacunas)
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LacadenaOdepolisacridoses responsableporlageneracinde anticuerposespecficosenelorganismo animalenrespuestaalainfeccinpor Brucellaabortus,loscualessondetectados enlaspruebasserolgicasdediagnstico. LaCepaRB51norequiereCO2nisangre parasucrecimiento,esureapositivay oxidalaglucosa.AdiferenciaconlaCepa19 creceenmedioconeritritol(1mg/ml),en medioconazultionina(1:500.000)o penicilina(5U/ml)..
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Elgenomacontieneungenefuncionaleri paraelmetabolismodeleritritol,elcual faltaenlaCepa19. En1990Schurigsuministrelcultivodela cepamodificadaaNationalAnimalDisease Center,APHISenIOWAparasuestudio comocandidatoposibledevacuna antibruclica. ElcultivodelaCepaRB51fuedesignado comoSemillaMaestraRB51/ARS1(Animal ResearchServices1)ysehicieronvarios pasajesparaserestudiadosenbovinos.
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Enfebrero1996,APHISotorglapatenteo licenciaparalaVacunaBrucellaabortus CepaRB51paraserusadaenelbovino comopartedelProgramadeErradicacin delaBrucelosisCooperativoFederal Estados. LaCepaRB51esestableenbovinosyno reviertealaformavirulentaoformalisa despusdeldesarrolloenbovinosporlo menosdurante12semanas
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DebidoalaausenciadelaCadenaO,la VacunadecepaRB51noestimulala produccindeanticuerposquereaccionen conlosantgenosdecepaslisasusadosen laspruebasestndardediagnstico. Porlotanto,lavacunacinnointerfiereen eldiagnosticodelabrucelosis. Estaesunapropiedaddegranimportancia delaVacunaRB51yunadiferencianotable conlaCepa19.
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ElbeneficioverdaderodelaRB51esla capacidaddepermitiridentificar serolgicamentelosanimalesinfectados ancuandoelloshayansidovacunadoscon laRB51. Sinembargo,esnecesarioinformarque animalesvacunadosconlaRB51pueden seroconvertirsecuandosonexpuestosa cepasvirulentasdecampo,mientrasquela incidenciadeabortossermuybaja.
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LavacunaRB51estimulalaproduccinde otrostiposdeanticuerposquepuedenser detectadospormediodepruebas especialesloscualespermitenconocersiel animalfuevacunadoconRB51.Enlos animalesvacunadoslaRB51estimulala formacindeanticuerposcontrala membranaproteicaexternaSeutilizala pruebadeldotblotlacualdetectala respuestacontraproteinasbacterianas gammairradiadasdelaRB51.
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LavacunacinconRB51produce,aligual quelacepa19,unarespuestamediadapor clulaslacualeslaresponsableprincipal delaproteccinconferidacontrala brucelosis. Confiereunaproteccincompletaenel65% delosanimalesvacunados.Enlaspruebas dedesafocomparativaslaRB51protegi 8%menosquelaCepa19.
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Enlasternerasdemsde10mesesconfiere mayorproteccinqueenlasternerasde menoredad. Losdatossobrelapersistenciadela inmunidadconferidaporlavacunacincon RB51,durantelavidatilenhembras vacunadasdesdeterneras,sonmuy limitadosydebernsercompletados medianteinvestigacionesexperimentales futuraseinformacionesregistradasdesu usoenelcampo. Quedalatentelaincgnitasiesnecesaria larevacunacinycuantasveces.
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Estaesunagrandiferenciaafavordela Cepa19cuyapersistenciadeproteccin inmunitariahasidodocumentadaporla vidatildelahembravacunadaconuna soladosisenlaedadtempranadesuvida (ternera). Enelanimaljovenyenadultonopreado noproduceningnsignoclnico. Labacteriaeseliminadadelacirculacin sanguneaentresdasynosepresentaen lassecrecionesnasales,salivauorina.
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LacepaRB51nosepropagadeunanimala otro. Lavacunaesinocuaenlosanimales mayoresdetresmesesdeedad. LacepaRB51debeseradministradaporun veterinarioacreditado. Lasternerasdebenservacunadas subcutneamenteconunadosisde1034mil millonesdemicroorganismosviablesala edadde4a12mesesdeedad.
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Lavacunacindelrodeodehembras adultas(vaquillonasyvacas)sepuede aplicarselectivamenteparalaprevenciny controldelabrucelosisenzonasderiesgoy enestablecimientosafectadosporla brucelosis. Lavacunacindebecombinarsecon pruebasserolgicaspreviasalactode vacunacinparalaidentificaciny eliminacinporsacrificiodelosanimales reactores.Lashembrasadultasrestantes negativasenlaspruebassernvacunadas.
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Nodebenvacunarseanimalesreactoresala brucelosis. Lavacunacindelrodeodehembras adultasnegativasesaconsejablehacerlo2 mesesantesdelservicio. Sibiensehaprescritovacunarhembrasen gestacinesconvenienteaclararqueexiste peligrodeabortoenhembrascongestacin demsde45meses. Quindecidevacunarapesardela advertenciaestarexpuestoalpeligrodel abortodesuhembragestante
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Eneliniciodelapreezelpeligrodelabortoes muybajo. Lavacunacindelrodeodehembrasadultas induceproteccinen34semanaslocual aceleraelprocesodesaneamientoycontrolde laenfermedad. Lashembrasadultassevacunancondosisde 1.0milmillonesdebacteriasvivas Losanimalesvacunadosdebenseridentificados yregistradospermanentemente. Elpropsitoprincipaldelavacunacindelos adultosenhaciendasafectadasporla brucelosisesevitarelaborto.
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LavacunaRB51protege95%contrael aborto. Enesteaspectotienedoblebeneficio semejantealaCepa19:disminuyela susceptibilidadalainfeccinydecrecela exposicinalainfeccinaldisminuir drsticamentelosabortosyexcrecinde brucelasvirulentasalambienteexterno. Elabortoconstituyeunaltopeligroparala propagacindelainfeccinenelrodeo infectadoyenlosrodeosde establecimientosvecinosoenel intercambiodeanimales.
DISMINUCINDELPROCREO
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PATOGENICIDAD:
HaocurridoinfeccinaccidentaldeRB51en humanos. Sinembargonosehanpresentadosignosclnicos adversos. SiunhumanoseexponealaCepaRB51podra causarunsndromeleve. Estapendienteunamejorevaluacindesu infeccinyeventualsndromequepuedaprovocar. LaRB51essensibleaunbuennmerode antibiticosusadoseneltratamientodela brucelosishumana(tetraciclina,oxitetraciclina, estreptomicina,ydoxiciclina)peroesresistenteala rifampicinaypenicilina.
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Paraemularloqueocurreenlanaturaleza secontaminaronnumerososfetosde"bison" americano(bufaloamericano)obtenidos porabortoprovocadoyalojadosenbolsa dobleysecontaminaroncadaunoconuna solucinde750mldelaRB51conteniendo porlomenos1.0milmillonesdeunidades debacteriaformadorasdecoloniasporml. (u.f.c/ml). Losfetosenposicinlateralrecumbente fueroncolocadosenjaulasparaprotegerlos delospredadoresyproveerbioseguridad.
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Ochojaulascargadasconlosfetosfueron expuestassincoberturay8fueron parcialmenteprotegidas.Enlasjaulascubiertas lapruebaderayosultravioletademostruna disminucinde7580%delaradiacinUV.Por mediodeequiposdebaterasmarinasde12 voltiossecontrolencadajaulalatemperatura aquefueronsometidoslosfetos.Secontrol porradimetroslaradiacinUVcadadoce minutosdeintervalo.Delosfetosdispersados enelambienteserecolectarondosvecespor semanamuestrasdebiopsiasdelapielydela profundidaddelabdomenporfstulaplstica.
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Seconsidernegativounfetoluegode4resultados negativosconsecutivos.Alfinaldelexperimentolosfetos fueronrecolectadoseincinerados. LacepaRB51persistimslargotiempoenlasmuestrade tejidosprofundosdelfetoenelperiododesdefebrero (muybajastemperaturasconnieve)hastamayo (primavera).Ningnfetofuepositivodespusdel15de junio. EnlaGranAreadeYellowstone,Montanafueexaminada lavegetacinytejidosfetalesremanentesdelossitios dondeocurrieronabortosnaturalesparaconocerla persistenciadelacontaminacinambientalnatural. Brucellaabortuspermaneciinfectantepor43dasen abril(muybajastemperaturasynieveambiental)26das enMayo(Primavera).
Lainmunosupresinnocausarecrudescencia. Nohaydeplecinlinfoideengangliosquedrenanel puntodevacunacin. Nohaycambiostitularesdegenerativoso inflamatorios. Lasbacteriasrecuperadasdespusde12semanasde desarrolloenelhuspedsongenticamenteidnticas alacepadevacuna. Lacepadevacunanosepropagadeunanimalaotro. LasVacunasCepa19yCepaRB51cumplencon todosloscriteriosdebioseguridadantesexpuestos cuandoseaplicanenlasternerasjvenes.