PONTIFCIA UNIVERSIDADE CATLICA DE GOIS PROGRAMA DE PS-GRADUAO EM FARMCIA E QUMICA FORENSE

TCNICA DE QUIMIOLUMINESCNCIA EM MANCHAS DE SANGUE: O USO DE LUMINOL PARA A SUA IDENTIFICAO

Ananza Vidotto1 Paulo Roberto Queiroz2

1

Qumica. Aluna de Ps-Graduao em Farmcia e Qumica Forense, pela Universidade Catlica de Gois/IFAR. 2 Bilogo. Doutor em Biologia Animal pela Universidade de Braslia UnB Professor do IFAR/PUC-GO. Endereo: IFAR Instituto de Estudos Farmacuticos. SHCGN 716 Bl B Lj 05 Brasilia DF CEP: 70770-732. E-mail: pqsilva@uol.com.br

RESUMO Manchas de sangue em um local de crime podem revelar muito acerca de sua natureza: a dinmica dos fatos, de que modo o agressor chegou e deixou o local, que tipo de instrumento utilizou para cometer o delito. Os vestgios deixados na cena do crime ficam expostos a diversos fatores que podem comprometer sua conservao, desde aqueles do prprio ambiente, como chuva, calor e umidade, at a manipulao humana com a inteno de encobri-los para dificultar sua localizao pela polcia e a consequente descoberta do fato. importante, dessa forma, identificar o que pode ou no ser sangue no local do crime. Para isso, existem os chamados testes presuntivos, que devem ser sensveis e precisos para detectar a presena do material procurado mesmo depois de algum tempo da ocorrncia do fato e em condies adversas de conservao, dentre os quais se destacam a fenolftalena, a tetrametilbenzidina e o luminol, que chama a ateno por se tratar de uma reao quimioluminescente catalisada pelo ferro presente no grupamento heme do sangue. A eficincia do luminol em testes para a deteco de sangue tem sido bastante estudada em diversos suportes e sob diferentes condies, e tem-se comprovado que, apesar de caro, um mtodo bastante til e eficaz. Palavras-Chave: Luminol. Quimioluminescncia. Manchas de sangue. Criminalstica.

Chemiluminescence technique in bloodstains: The use of luminol for identification

ABSTRACT Bloodstains in the crime scene might reveal many things about its nature: the dynamics of the incident, how did the aggressor arrive and leave the place, what kind of tool did he use to commit the wrongdoing. The vestiges left in the crime scene remain exposed to many factors that may endanger its conservation, since those from the surrounding, like rain, heat, and humidity, until human manipulation, intending to hide them to make more difficult its location by the police and the consequent disclosure of the fact. Therefore, it is important identify what may be or may be not blood at crime scene. For this, there are tests known as presumptive, that must be sensitive and accurate to detect the presence of the searched material even some time after the fact had happen and in bad conditions of conservation, for example phenolphthalein, tetramethylbenzidine and the luminol, that draws the attention for being a chemiluminescent reaction catalyzed by iron present in heme group of the blood. The effectiviness of luminol in tests for detecting blood has been widely studied in several supports and under different conditions, and has been confirmed that, even though it is expensive, it is a useful and efficient method. Keywords: Chemiluminescence. Luminol. Bloodstains. Crimiminalistics.

INTRODUO

A luminescncia, um termo geral utilizado para designar diversos processos de emisso de luz, um fenmeno bastante instigante e estudado desde os tempos mais remotos. Ocorre quando eltrons excitados aps a absoro de uma determinada quantidade de energia emitem radiao luminosa ao retornarem ao seu estado fundamental, sem que uma parte significativa dessa energia se perca, se dissipando na forma de calor (DIAS, 2001; MENEZES, 2010). Essa energia eletromagntica emitida por molculas que possuem comprimento de onda na regio localizada entre o infravermelho (800 nm) e o ultravioleta (400 nm) no conhecido espectro eletromagntico (SANTOS; SANTOS; COSTA, 1992; FERREIRA; ROSSI, 2002). A quimioluminescncia, de acordo com Leite et al. (2004) um subtipo de luminescncia em que a energia de excitao do eltron para a produo da radiao luminosa advm de uma reao qumica, ou seja, a produo de luz ocorre devido a quebra de ligaes ricas em energia j existentes na molcula que reage ou formadas a

partir de rearranjos moleculares (intermedirios da reao). O tempo da reao quimioluminescente e a durao da emisso da radiao so variveis de acordo com a natureza do material que a emite e, de acordo com Ferreira; Rossi (2002) variam de perodos muito pequenos (menores que 1 s) at muito longos (cerca de 1 dia). A quimioluminescncia tem sido amplamente utilizada em diversos tipos de ensaios laboratoriais, destacando-se nas ltimas dcadas na criminalstica com a utilizao de compostos que produzem reaes quimioluminescentes instantneas ao entrarem em contato com tecidos biolgicos que podem ser facilmente encontrados em locais nos quais um crime contra a pessoa tenha sido praticado como smen e, principalmente, sangue. O luminol um composto que possui poderosas propriedades quimioluminescentes mediante oxidao que so caracterizadas pela emisso de luz azulada (MENEZES, 2010). De acordo com Navarrete et al. (2005), a quimioluminescncia do luminol em meio aquoso bsico, ocorre em presena de um reagente oxidante (H2O2, O2, HOCl) e, normalmente, de um metal de transio ou certos ons inorgnicos. Ele amplamente utilizado em todo o mundo para testar a presena de sangue, uma vez que, o grupo heme, mesmo em quantidades mnimas, tambm capaz de catalisar sua oxidao em soluo alcalina (GROSS; HARRIS; KALDUM, 1999; LEITE; FATIBELLO-FILHO; ROCHA, 2004; BARNI et al, 2007). No obstante, em um local de crime os vestgios nem sempre esto evidentes. Fatores ambientais e, principalmente, manipulaes intencionais influenciam em seu estado de conservao (PITARCH et al., 2010), o que pode dificultar e muito a sua localizao e identificao, ou mesmo uma coleta para posteriores anlises laboratoriais que sero valiosas no eventual processo criminal que seguir a fase de investigao. A aplicao da quimioluminescncia em criminalstica vem ganhando popularidade nas ltimas dcadas, inclusive com ampla divulgao pela mdia, tanto em jornalismo informativo quanto em seriados policiais televisivos de grande sucesso, que destacam a utilizao do reagente luminol para a comprovao da presena de sangue em locais de crime, em supostas armas utilizadas para comet-los, roupas de pessoas suspeitas, entre diversos outros itens relacionados ao fato delitivo, mesmo depois de limpos e lavados.

A partir do exposto, o objetivo desse trabalho foi realizar uma reviso bibliogrfica a respeito das propriedades do reagente luminol para a deteco de vestgios hemticos para anlises forenses.

METODOLOGIA

Para a elaborao deste trabalho de reviso foram utilizados artigos, dissertaes de mestrado e teses de doutorado publicados nos ltimos anos acerca do composto qumico luminol, suas propriedades quimioluminescentes e sua aplicao e utilidade no campo da criminalstica. O levantamento bibliogrfico foi realizado utilizando-se bases de dados, tais como, Scielo, Bireme, ScienceDirect e Portal de Peridicos CAPES. Alm disso, foram obtidos dados provenientes de stios de internet de Universidades do Brasil e de Portugal, assim como, da revista Qumica Nova. Foram utilizados os seguintes termos descritores: luminol, local de crime, quimioluminescncia, manchas de sangue, criminalstica, percia criminal e testes presuntivos. Foram tambm consultados artigos disponveis na Forensic International Academy of Public Safety

(http://www.iapsonline.com/forensic), nos quais foram inseridos os descritores luminol, crime scene, chemiluminescence, presumptive tests. O material foi pesquisado, organizado e analisado no perodo compreendido entre 14 de fevereiro e 05 de maio do corrente ano, e foi selecionado observando-se a compatibilidade entre seu contedo e os tpicos de relevncia para a discusso a ser realizada. Foram consultados para a realizao do trabalho, no total, vinte e oito artigos, sendo artigos publicados em lngua portuguesa, inglesa e espanhola. Tambm foram utilizadas dissertaes de mestrado, tese de doutorado e uma dissertao de psgraduao latu sensu.

DESENVOLVIMENTO A percia cientfica

crescente o papel que a cincia desempenha nas investigaes criminais (RODRIGUES; SILVA; TRUZZI, 2010). Com a legislao a cada dia mais voltada proteo dos direitos humanos, deve-se salvaguardar a integridade fsica humana no se concebendo ao profissional de polcia moderno a obteno de uma confisso de um agravo por parte de um eventual suspeito por meios insidiosos ou cruis. Dessa forma, torna-se necessrio que as tcnicas utilizadas para a comprovao do fato em questo enveredassem ainda mais pelo caminho da cincia e da tecnologia, utilizando mtodos rigorosos e que forneam resultados to precisos quanto possveis, sob pena de no terem valia perante o tribunal caso os vestgios coletados no local de crime durante a investigao no sejam tratados adequadamente (DUARTE, 2010). Nesse sentido, as mais importantes descobertas do mundo cientfico so aplicadas em criminalstica para elucidar toda espcie de delito. Crimes mais violentos, como homicdio, por exemplo, costumam apresentar sinais evidentes e, em muitos casos, pode no ser difcil para o perito realizar a identificao e coleta de indcios no local, como pegadas ou sangue. Contudo, com o decorrer do tempo, tais vestgios, principalmente os biolgicos, podem perder propriedades importantes para confiabilidade dos testes que sero realizados para fins forenses, seja por fatores ambientais aos quais eventualmente estejam expostos at o momento em que so encontrados, ou pela manipulao humana, com a inteno de limp-los para que o fato ocorrido seja encoberto (PITARCH et al, 2010). Dentre os vrios tipos de vestgios encontrados em locais onde ocorreu um crime, os hematides so os mais comuns.

O SANGUE

O sangue um tecido que desempenha diversas funes imprescindveis no organismo humano, sendo uma das principais transportar oxignio aos demais tecidos e carrear o

dixido de carbono que ser eliminado na respirao (ALMEIDA, 2009). constitudo pelo plasma, a fase lquida do sangue, composta principalmente por gua, protenas, gorduras e sais orgnicos e minerais, que corresponde a mais de 50% de seu volume total; as plaquetas, que so produzidas na medula ssea, so anucleadas e tm funo de colaborar na coagulao sangunea de forma mecnica em caso de leses vasculares (LEITE; SILVA JUNIOR; MIRANDA, 2007); os leuccitos, tambm so produzidos na medula ssea e sua principal atuao se d no sistema imunolgico (SANTOS et al, 2007); e os eritrcitos, mais conhecidos por hemcias, que contm a hemoglobina e cuja funo efetuar o transporte do oxignio dos pulmes aos tecidos e do gs carbnico no sentido inverso. A colorao do sangue depende da concentrao de oxignio dissolvido nele: escarlate, quando contm uma boa quantidade do gs; at vermelho escuro, quando a quantidade de oxignio baixa e a concentrao de dixido de carbono mais elevada (MONTEIRO, 2010). A hemoglobina, componente primordial das hemcias, um complexo hexacoordenado responsvel pela conduo de oxignio aos tecidos do organismo, e composta por uma poro protica, chamada globina, e quatro cadeias polipeptdicas ligadas cada uma a um grupamento prosttico heme (ALMEIDA, 2009). A estrutura da globina composta por dois pares de cadeias polipeptdicas cadeia alfa e cadeia beta. A cadeia alfa formada por 141 resduos de aminocidos, e a cadeia beta pela juno de 146 resduos de aminocidos. Os grupamentos heme consistem em complexos de coordenao protoporfirnicos-Fe2+, em que o ferro encontra-se ligado ao centro do anel porfirnico por quatro tomos de nitrognio, restando dessa forma duas posies axiais de coordenao uma delas preenchida pela ligao com a globina, enquanto a outra permanece livre para um ligante exgeno, que em geral ser o oxignio (BARNI; LEWIS; BERTI; MISKELLY; LAGO, 2007). Esta estrutura pode ser visualizada na figura 1.

Figura 1 Estrutura do complexo hexacoordenado (Fe2+ com seis ligaes) hemoglobina/oxignio. Fonte: BARNI et al (2007).

Manchas de sangue so de extrema importncia em uma investigao criminal: possvel identificar vtimas e suspeitos, averiguar se o volume de sangue encontrado compatvel com o ferimento e at verificar a presena ou dosagem de drogas. Todavia, para que isso seja possvel, faz-se necessrio primeiramente certificar-se de que tais manchas encontradas tratam-se realmente de sangue (FILHO; ANTEDOMENICO, 2010). Para isso, existem testes utilizados para a deteco inicial da presena do que pode potencialmente ser sangue, so os chamados testes de presuno. Segundo Shanan; Watson; Daid (2007), para que tais testes sejam considerados bons, devem englobar propriedades como rapidez, segurana, sensibilidade e especificidade, alm de no reagir com a amostra e terminar por contamin-la, interferindo em posteriores anlises, como a de DNA. Existem testes de natureza quimioluminescente, que so mais empregados em locais nos quaqis h a suspeita de que houve sangue, para tornar visveis manchas em regies que passaram por processos de limpeza e revelar vestgios que devido ao tempo transcorrido j encontram-se irreconhecveis pela observao (MONTEIRO, 2010). Dentre os testes de presuno utilizados para o sangue esto a fenolftalena, o reagente de benzidina, o negro de amido e o luminol.

LUMINOL: OBTENO E AO

O luminol (5-amino-2,3-diidroftalazina-1,4-diona) um reagente mundialmente conhecido por suas propriedades quimiolumiescentes e popular pela eficcia na deteco de sangue (MONTEIRO, 2010), muito bem caracterizada pela imediata emisso de luz azul ao entrar em contato com o referido tecido. Ele foi sintetizado pela primeira vez pelo qumico alemo H. O. Albrecht, em 1928 e foi o primeiro composto a ser utilizado para a identificao de manchas de sangue, em meados dos anos 30 do sculo passado (MENEZES, 2010; MONTEIRO, 2010). Atualmente, um dos principais mtodos para a sua obteno por meio da reao da hidrazina com o cido 3-nitroftlico, mediante aquecimento (CHEMELLO, 2007), com a posterior reduo do grupamento nitro do 5nitroftalhidrazina para a formao do produto final, conforme demonstrado na figura 2.

Figura 2 Reao de sntese do luminol a partir do cido 3-nitroftlico. Em, A) cido 3Nitroftlico; B) Hidrazina; C) 5-Nitroftalhidrazina; D) Luminol. Fonte: MONTEIRO (2010).

Existem diversos mecanismos propostos por autores distintos para explicar a reao quimioluminescente do luminol, e a maior parte das etapas mecansticas j est elucidada e bem compreendida, contudo ainda restam alguns detalhes sob discusso, como a formao de estados intermedirios eletronicamente excitados (FERREIRA; ROSSI, 2002). Explorar esse ponto. A reao, para ocorrer, necessita de um agente oxidante o mais comumente utilizado o perxido de hidrognio e um catalisador utiliza-se normalmente um metal de transio. Pode ser realizada em alguns tipos de solventes orgnicos, como o dimetilssulfxido, ou em solues aquosas com boa resposta, mas sua eficincia tima ocorre em meio bsico (DIAS, 2001; ALMEIDA, 2009).

No mecanismo mais provvel aventado para descrever a reao mais simples do luminol em meio aquoso, um metal de transio que age como catalisador realiza a converso do luminol (1) em diazoquinona (2), de acordo com a figura 3. A diazoquinona ento atacada pelo nion proveniente do perxido de hidrognio hidrolisado, formando um endoperxido (3); este perde uma molcula de nitrognio (N2) e forma ento o dinion do cido 3-aminoftlico (4), que j produzido no estado excitado. Essa a espcie que sofrer decaimento, gerando a quimioluminescncia por meio da emisso de luz em 431 nm quando o eltron excitado pela reao retorna ao seu estado fundamental (5) (DIAS, 2001; MARQUETTE; BLUM, 2006).

Figura 3 Mecanismo proposto para a oxidao do luminol por perxido de hidrognio catalisada por um metal de transio (M+n), em meio aquoso. Fonte: DIAS (2001).

O luminol eficaz para detectar sangue, mesmo depois de lavado diversas vezes (PONCE et al, 2002) devido ao fato de que, presente nas hemcias, est a hemoglobina que contm ons de ferro em seu grupo heme e agem como o catalisador necessrio para desencadear a reao quimioluminescente do luminol (FERREIRA; ROSSI, 2002). Quando ainda se encontra dentro do organismo, a hemoglobina permanece protegida pelos eritrcitos que possuem mecanismos (enzimticos e no enzimticos) para evitar sua desnaturao, mantendo os ons ferro na forma Fe2+. Ao deixar o corpo, o sangue passa a estar exposto a uma srie de processos degradativos, passando por hemlises e reaes de

oxirreduo catalisadas em um primeiro momento por enzimas de sua prpria estrutura celular e, tambm, por aquelas presentes em microrganismos que se encontram no ambiente (BARNI et al, 2007). Sob tais condies, ocorre ento a degradao da poro polipeptdica da hemoglobina, e a oxidao do on ferroso (Fe2+) passa a acontecer de forma espontnea, com a converso da hemoglobina a metahemoglobina e, em meio alcalino, este on passa a coordenar-se com grupos hidroxila em substituio ao O2, que anteriormente ligava-se ao Fe2+ (ALMEIDA, 2009). Esse novo grupo prosttico heme composto por ons frricos em que as molculas de oxignio esto sendo substitudas por hidroxilas chamado hematina (ferroprotoporfirina) e o ciclo cataltico da reao luminol/sangue no mecanismo proposto por Maloney e Thornton em 1985 (ALMEIDA, 2009) iniciado e finalizado por ele: ao borrifar o reagente sobre uma mancha de sangue, os grupamentos heme frricos (Fe3+) perdem mais um eltron e vo para um novo estado de oxidao, formando dessa forma intermedirios instveis contendo Fe4+, que ento catalisam sua oxidao, produzindo assim a luminescncia, enquanto so reduzidos novamente a Fe3+ (BARNI et al, 2007). Existem algumas outras proposies para descrever o mecanismo, no entanto esta ainda permanece como a mais aceita atualmente. Uma das maiores preocupaes com relao utilizao dos testes de presuno que os componentes aplicados sobre o material estudado danifiquem sua estrutura de alguma forma e prejudiquem anlises laboratoriais, como a extrao de DNA, que de extrema importncia para a atividade pericial. Com o intuito de verificar a ocorrncia desse fato, alguns estudos foram realizados utilizando vrios tipos de reagentes utilizados em testes presuntivos. Um desses experimentos foi publicado por Ponce e colaboradores em 2002, com a inteno de verificar uma possvel interferncia do luminol em posteriores extraes e amplificaes de DNA. O experimento foi conduzido com tecidos brancos de algodo manchados de sangue seco a temperatura ambiente. Os tecidos foram lavados com detergente padro em lavadora, a 30 oC e secos ao ar livre. Uma das amostras foi testada com luminol e outra foi armazenada para realizar as amplificaes de DNA por PCR. O tecido testado com luminol foi lavado, seco e testado com o reagente novamente at que se obtivesse um resultado negativo para a luminescncia, o que s ocorreu aps a dcima primeira lavagem. Aps cada lavagem foi realizada a extrao do DNA, cuja resposta foi ainda positiva at a terceira lavagem. Essa pesquisa indicou que no existem diferenas entre os resultados de amplificao de amostras sem o tratamento prvio com o luminol e

aquelas que foram testadas com o reagente (PONCE et al, 2002), o que demonstra que o luminol no interfere na anlise de DNA por PCR.

SENSIBILIDADE E LIMITAES

A sensibilidade de tcnicas quimioluminescentes como esta bastante elevada, podendo chegar a limites de deteco na ordem de fentomol (10-15 mol) no so incomuns nas tcnicas de quimioluminescncia e em alguns sistemas enzimticos j foram detectadas cerca de 120 molculas, conforme esclarecem Ferreira; Rossi (2002). O luminol opera com limites de deteco muito pequenos, e capaz de indicar a presena do analito, nesse caso, sangue, em concentraes extremamente pequenas. Existem estudos que apontam sua eficcia para a deteco de sangue em superfcies submetidas a at dez lavagens (PONCE et al, 2002) demonstrando, dessa forma, o alto grau de sensibilidade do teste, descrito na literatura como 1:5.000.000 em tecidos de algodo e 1:100.000 em superfcies que no sejam absorventes (ALMEIDA, 2009). Uma das limitaes que o reagente apresenta que, devido sua labilidade, deve ser preparado no momento da utilizao e deve ser mantido sob refrigerao para que suas propriedades sejam preservadas e a confiabilidade do teste mantida. Isso acarreta uma dificuldade em transportar o material at o local onde ser empregado, por existir a necessidade da manipulao in loco, alm de aumentar o custo para a sua utilizao (ALMEIDA, 2009). A baixa especificidade tambm pode ser apontada como uma limitao do luminol, a ser considerada grave, uma vez que, pode induzir a resultados falso-positivos com ons metlicos como ferro, cromo ou cobalto, que catalisam a reao e desencadeiam a emisso de luz pelo reagente, alm de peroxidases de vegetais e outros tipos de agentes oxidantes fortes que tambm reagem com o composto e geram a emisso de luz (CREAMER et al, 2003). Superfcies limpas com alvejantes igualmente podem apresentar alguma interferncia, pois o hipoclorito presente na maior parte dos alvejantes domsticos tambm pode levar produo de resultados positivos ilusrios. Contudo, pesquisas demonstraram

que a luminescncia gerada pelo hipoclorito no possui o mesmo comprimento de onda (430 3 nm) daquela gerada pelo grupo heme do sangue (455 2 nm) e o tempo de durao da emisso de luz e sua forma de extino no so compatveis, uma vez que, a luminescncia produzida pelo sangue decresce com o passar do tempo, enquanto aquela advinda do hipoclorito dissipa-se da superfcie em que se encontra (CREAMER et al, 2003). necessria muita ateno e experincia ao cientista forense para diferenciar essas emisses, que se tornam ainda mais semelhantes quando vistas em fotografia, o que necessrio ao procedimento de investigao. Dessa forma, existem estudos e tcnicas adequadas para que essa interferncia seja eliminada, diminuindo assim o risco de erro na anlise devido a esse fator (KENT; ELLIOT; MISKELLY, 2003). Os alvejantes contm estabilizantes volteis em sua formulao, que acabam por evaporar com o passar do tempo; dessa forma, a quimioluminescncia provocada pelo hipoclorito j no mais um interferente aps 8 h da aplicao do alvejante na superfcie estudada (CEAMER et al, 2005), ou tambm possvel evitar tal interferncia por meio da adio de aminas primrias e secundrias ao preparar o reagente, pois elas apresentam a propriedade de inibir a quimioluminescncia oxidativa do luminol causada pelo hipoclorito. Deve-se, no entanto, ter ateno, pois j foi demonstrado que aminas tercirias causam o efeito inverso: aumentam a produo da luminescncia e a via cataltica mais provvel e aceita para a ocorrncia deste fato a formao de ons clorotrialquilamnio, que atuariam como oxidantes (KENT; ELLIOT; MISKELLY, 2003). A reao entre as aminas e o hipoclorito depende do pH do meio e da basicidade da amina, pois quanto mais bsica ela for, mais competitiva ser pelo hipoclorito frente ao luminol, no deixando que ele reaja com este ltimo (KENT; ELLIOT; MISKELLY, 2003). A literatura descreve o preparo do reagente com 0,05 mol/L de glicina (C2H5NO2), que apontada como uma boa amina para impedir a oxidao do luminol pelo hipoclorito (ALMEIDA, 2009). A exposio do resduo hemtico a fatores ambientais tambm influencia de maneira substancial no resultado dos testes de presuno. Vestgios submetidos a condies adversas, como enterrados ou submersos em gua ou, simplesmente o decorrer do tempo, podem fazer com que esses testes j no apresentem a eficcia inicialmente esperada. sabido que a efetividade do luminol para indicar a presena de sangue em vestgios dessa natureza ainda alta, tornando-o o reagente mais indicado para testar amostras envelhecidas ou que se apresentem em mau estado de conservao (PITARCH et al, 2010).

Estudos recentes apontam sua capacidade de detectar traos de sangue depositado no solo aps seis anos de exposio ao ar livre. Este experimento foi iniciado no ano de 2004, com os pesquisadores marcando um X com sangue no cho, deixado sob as condies locais e testado com luminol a cada dois meses para verificar o tempo de permanncia de vestgios; e finalizado em 2010 quando ainda era possvel perceber traos hemticos no local com a aplicao do reagente (GABEL; SHIMAMOTO; STENE; ADAIR, 2011). Este resultado demonstra, mais uma vez, que os mtodos quimioluminescentes de anlise forense, dos quais o luminol o principal, so extremamente eficazes para indicar a presena de sangue aps um perodo longo, por apresentar sensibilidade bastante elevada, sendo capaz de reagir mesmo com quantidades nfimas de analito, como no caso da referida pesquisa.

CONSIDERAES FINAIS

O luminol um composto eficiente para detectar manchas de sangue frescas e latentes, e para este ltimo tipo tido como a melhor escolha, pois sua capacidade para localizar manchas envelhecidas e no visveis a olho nu lhe confere vantagem frente s demais tcnicas no quimioluminescentes. Possui alta sensibilidade e limite de deteco extremamente pequeno, mas sua especificidade um ponto fraco: Pode reagir com outros compostos, como alguns metais e alvejantes domsticos, gerando resultados falsopositivos. A mecanstica da reao, apesar de bastante estudada pela comunidade forense internacional, ainda no completamente compreendida. Contudo, existem proposies bem aceitas para descrever o processo da reao genrica e da reao especfica com o sangue. Os procedimentos de coleta e preservao dos vestgios encontrados em locais de crime devem ser rigorosamente seguidos para que a prova seja vlida. O luminol um reagente interessante para revelar manchas de sangue latentes em locais de crime de onde ainda seja necessrio obter outras provas, por no interferir em posteriores anlises de DNA. Nesse sentido, mesmo enfrentando algumas limitaes e interferncias, o luminol um teste presuntivo para sangue bastante til e eficaz como e um reagente de grande importncia para a percia em locais de crime.

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