CRECIMIENTO MICROBIANO

DEBEMOS DISTINGUIR:

FISIN BINARIA =
DIVISIN DE UNA CLULA MICROBIANA EN DOS CUANDO ALCANZA UN TAMAO DETERMINADO

CRECIMIENTO POBLACIONAL MICROBIANO =

INCREMENTO EN EL NMERO DE CLULAS Y, POR TANTO, EN BIOMASA

FISIN BINARIA O AMITOSIS

GENERACIN
INTERVALO REQUERIDO PARA LA FORMACIN DE DOS CLULAS A PARTIR DE UNA

CURVA DE CRECIMIENTO EN CULTIVO DISCONTINUO

log (UFC)
Log (CLULAS VIABLES)

ESTACIONARIA

EXPONENCIAL

MUERTE

LATENCIA

TIEMPO

FASE EXPONENCIAL

CRECIMIENTO POBLACIONAL PARMETROS DE CRECIMIENTO POBLACIONAL (MEDIBLES EN FASE EXPONENCIAL): TASA DE CRECIMIENTO: VARIACIN EN EL NMERO CELULAR O EN BIOMASA POR UNIDAD DE TIEMPO TIEMPO DE GENERACIN: TIEMPO REQUERIDO PARA QUE UNA POBLACIN SE DUPLIQUE.

Clculo de parmetros de crecimiento: Nmero de generaciones (n): N = N0 2n

Donde: N: nmero final de clulas. N0: nmero inicial de clulas.

log N = log N0 + n log 2 n = log N log N0 log 2 n = 3.3 (log N log N0)

Clculo de parmetros de crecimiento: Tiempo de generacin (g):

g=t/n Donde t = tiempo de crecimiento exponencial.

Tasa de crecimiento:
k = constante de velocidad de crecimiento media =nmero de generaciones por unidad de tiempo

k=n/t=1/g

Estimacin de g en dos poblaciones diferentes:

Cmo se mide el crecimiento bacteriano?

Por mtodos directos

mtodos indirectos

Mtodos directos: recuento de clulas totales o viables.

a) Recuento directo al microscopio Utilizando cmara de recuento de Petroff- Hausser

b) Recuento de clulas viables Por recuento en placa y diluciones seriadas

Recuento directo al microscopio

Recuento directo al microscopio

Desventajas del recuento directo al microscopio: 1) no distingue clulas muertas de clulas vivas 2) clulas pequeas son muy difciles de observar 3) la precision es difcil de lograr 4) se necesita un microscopio por contraste de fase 5) no es un buen mtodo para suspensiones de baja densidad

Recuento de clulas viables: Por recuento de colonias en placa

Recuento de colonias en diluciones seriadas

Fuentes de error en el recuento en placa:

Tiempo de incubacin inapropiado Imprecisin en las diluciones Tamao de las colonias demasiado pequeo Mala dispersin de los microorganismos

Mtodos indirectos para medir crecimiento microbiano: turbidimetra

Cultivo continuo: Un cultivo continuo es un sistema de flujo de volumen constante en el cual continuamente: se agrega medio de cultivo fresco y se quita medio de cultivo gastado El sistema llega al estado estable cuando permanecen constantes: La concentracin de clulas y la concentracin de nutrientes

Se utiliza un dispositivo denominado quimiostato

FACTORES QUE AFECTAN EL CRECIMIENTO :

DISPONIBILIDAD DE NUTRIENTES OXGENO TEMPERATURA pH OSMOLARIDAD DEL MEDIO

FORMAS TOXICAS DEL OXGENO

Radical superxido: O2 + eO2- Perxido de hidrgeno: O2- + e- + 2H+ H2O2 Radical hidroxilo: H2O2 + e- + H+ OH Enzimas neutralizantes: SOD y CATALASA 2O2- + 2H+ O2 + H2O2 SOD H2O +

Grupo

Relacin con Tipo de Presencia Ejemplos el oxgeno metabolismo de enzimas Lo requieren (aRespiracin la aerbica concentracin atmosfrica de 21%)

OXGENO

Habitat

Aerobios obligados o estrictos

Poseen SOD Generalmente Piel, polvillo y catalasa protozoos, hongos y algas. Bacterias:
Mycobacterium, Bacillus, Pseudomonas, Micrococcus luteus

Anaerobios facultativos

No lo requieren, pero crecen mejor con O2

Con O2: Poseen SOD Todas las y catalasa enterobacterias (Ej. respiracin Escherichia coli y aerbica Enterococcus). Sin O2: Algunos hongos fermentacin o (especialmente respiracin levaduras como S. anaerbica cerevisiae) Respiracin aerbica

Intestino de mamferos

Microaerfilos

Requieren entre un 2 -10% de O2

Poseen SOD Unas pocas Intestino de a nivel bacterias: aves Campylobacter jejuni, normal y catalasa a Spirillum volutans, Treponema pallidum bajo nivel

Grupo

Relacin con Tipo de Presencia de Ejemplo el oxgeno metabolismo enzimas Lo toleran. Por lo general Crecen fermentacin. igualmente (Unos pocos bien con o sin pueden hacer O2. respiracin anaerbica). Por lo general Bacterias: poseen SOD y Streptococcus no catalasa. (Si pyogenes, poseen Enterococcus catalasa, no faecalis. poseen SOD)

OXGENO

Habitat

Anaerobios aerotolerantes

Tracto respiratorio Superior. Tracto intestinal

Anaerobios obligados o estrictos

Les resulta Fermentacin Carecen de absolutament respiracin SOD y de e letal. anaerbica Catalasa. (A veces estn a muy baja concentracin)

Bacterias: Microambiente Metangenas s anaerobios (Methanobacter (por ej. ium formicum), Creados por Bacteroides (ej: facultativos B. gingivalis), que usan O2). Fusobacterium, Sedimento de Clostridium. lagos

AEROBIOS ESTRICTOS

ANAEROBIOS ESTRICTOS

AEROBIOS FACULTATIVOS

MICROAERFILOS

cultivo de bacterias microaeroflicas

16 % O2 4% CO2

cultivo de bacterias anaerbicas estrictas

TEMPERATURA
Psicrfilos: T ptima de crecimiento: 15C (entre 5 10C y 15C). T mnima de crecimiento: 0C. (A 0C crecen bien) T mxima de crecimiento: alrededor de 20C. Se encuentra en: Algunas algas (Chlamidomonas miralis), Varios gneros de eubacterias (Pseudomonas, Vibrio, Alcalgenes, Bacillus, Arthrobacter, Moritella, Photobacterium, Shawanella) En Archaea en Methanogenium. Psicrtrofos o sicrfilos facultativos: T ptima de crecimiento: 20 30 C T mnima: 0-7 C T mxima: casi 35 C. Se encuentra en: bacterias (Listeria monocytogenes) y hongos responsables del deterioro de alimentos refrigerados. Otras bacterias (Pseudomonas fluorescens), algas (Chlorella pyrenoidra, protozoos (Amoeba proteus, Paramecium caudatum)

TEMPERATURA
Mesfilos: T ptima de crecimiento: 20 45C T mnima de crecimiento: 15 -20C T mxima de crecimiento: casi 45C:: Se encuentra en la mayora de microorganismos, incluyendo casi todos los patgenos humanos. Ejemplos de bacterias:E. coli, Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus, Neisseria gonorrhoeae. Ejemplos de protozoos: Trichomonas vaginalis, Naegleria fowleri. Ejemplo de hongos: Saccharomyces cerevisiae.

Termfilos: T ptima de crecimiento: 55 -65C T mnima de crecimiento: 45C T mxima de crecimiento: 80C Se encuentra en bacterias preferentemente (Thermus aquaticus, Bacillus stearothermophilus, Cyanidium caldarium, Chaetomiun thermophila). Muy pocos hongos y algas. Crecen en compost, tuberas de agua caliente, aguas termales etc. Hipertermfilos: T ptima de crecimiento: 80 -113C T mnima de crecimiento: en general 55C. Ejemplos: Algunas arqueobacterias (Sulfolobus, Pyrococcus abyssi, Pyriodictium accultum). Crecen en zonas abisales calientes.

Neutrfilos:

pH

pH ptimo de crecimiento: 5,5<pH< 8,0. Incluye : mayora de bacterias (incluyendo mayor parte de las de importancia clnica: Lactobacillus, Staphylococcus, Escherichia y otras: Nitrosomonas) protozoos (Paramecium, Euglena) y algas. Hbitats: tejidos, sangre, saliva, agua pura, agua marina, carne, leche

pH
Acidfilos: pH ptimo de crecimiento: 0<pH<5,5. pH ligeramente cido: bacterias Helicobacter y Acontium protozoo Acantamoeba castellani. Ambiente moderadamente cido: 4<pH<5,5: Mayor parte de hongos. Ambiente muy cido: 1<pH<3: Propio de aguas termales cidas (Ej: arqueobacterias Sulfolobus acidocaldarius, Tiobacillus thiooxidans, Ferroplasma acidermanus, Picrophilus oshimae; algas Cyanidium caldarium y Dunaliella acidophila) y de contenido gstrico.

pH
Alcalfilos: ph ptimo de crecimiento: entre 8,5<pH<11,5 pH moderadamente alcalino: Proteus, Mycocystis auruginosa. pH fuertemente alcalino (pH10): Bacillus alcalophilus habita en suelos altamente carbonatados y lagos bicarbonatados. Natronobacterium. Propio tambin de jabn y amonaco.

Disponibilidad de agua y solutos

Actividad del H2O ( aw): Parmetro que indica el grado de disponibilidad de agua. Es la humedad relativa de la solucin del medio ambiente. Est en relacin inversa con la presin osmtica del medio (sta ltima seala la concentracin de solutos en especial sales- del medio)
Halofilia u osmofilia: Se refiere al requerimiento de concentraciones de solutos del medio mayores a las habituales. Halotolerancia u osmotolerancia: Se refiere a la tolerancia de concentraciones de solutos del medio mayores a las habituales.

No halotolerantes: Requieren aw=1 Son la mayora de microorganismos. En bacterias, particularmente gramnegativos.

Halotolerantes: soportan concentracin de sal bastante elevada, o sea, amplio rango de aw (entre 0.8 y 0.95). Muchos son hongos (ej: Saccharomyces ronxii, Fusarium, Mucor, Rhizopus, ascomicetes levaduras, basidiomicetes. Mayora de algas. En bacterias: Mayora de bacilos grampositivos, Bacillus, Staphylococcus aureus, Penicillium

Halfilos: Requieren altas concentraciones de sal (desde 15% hasta 20 % NaCl), o sea aw entre 0,6 y 0,75. Son: Hongos: Aspergillus, Xeromyces bisporus Crecen en dulces, miel, chocolate, etc Arqueobacterias: Halobacterium En salinas y lagos muy salados Eubacteria Actinospora (sobre pescado salado) Algas: Dunaliella, Ectothiordospira.(en aguas saladas)