Los antibiticos Un antibitico ha sido definido como una sustancia qumica producida por un microorganismo capaz de inhibir el desarrollo

de otros microorganismos. Los antibiticos modificados por manipulaciones qumicas aun se consideran como tales. Un agente antimicrobiano es activo contra los microorganismos y puede ser producido en forma natural por microorganismos o sintticamente en el laboratorio. El trmino agente quimioterpico ha sido empleado para referirse a agentes antimicrobianos sintticos o no y tambin se refiere a agentes que actan contra clulas humanas como inmunomoduladores y drogas antitumorales. Los trminos agente antiviral y agente antimictico son trminos ms especificos, incluidos dentro de la categora ms general de agentes antimicrobianos. El aislamiento de un agente infeccioso a partir de un paciente no es con frecuencia suficiente para establecer la terapia adecuada. Muchas bacterias y algunos hongos presentan resistencia a los agentes antimicrobianos y algunos virus han desarrollado resistencia a los agentes antivirales ms actuales. Los patrones de resistencia cambian en forma constante y no importa lo rpidamente que se introduzcan los nuevos agentes teraputicos porque los microbios parecen siempre dispuestos a superarlos. Incluso entre los neumococos, que por dcadas han permanecido invariablemente susceptibles a niveles de penicilina G menores de 0.04 U/ml , han aparecido cepas que han desarrollado resistencia a esta droga. Ya que no se puede predecir la susceptibilidad de las bacterias, hongos y virus a los agentes antimicrobianos, con frecuencia es necesario estudiar la sensibilidad individual de cada patgeno a estas drogas, pudindose elegir entonces el agente apropiado (el ms activo contra el patgeno, el menos txico para el husped, con las caractersticas farmacolgicas apropiadas y el ms econmico), que proporciona mayores posibilidades de una evolucin favorable. Por supuesto, el resultado teraputico final depende de muchas otras variables. La enfermedad subyacente y condicin clnica del husped, las propiedades farmacolgicas del agente antimicrobiano, la administracin de otros agentes teraputicos adicionales y otros factores ejercern una fuerte influencia sobre el desenlace final. Los microbilogos slo pueden recomendar agentes teraputicos sobre la base de sus actividades in vitro. El clnico debe tomar la decisin final, teniendo en cuenta su conocimiento sobre todos los factores pertinentes. Un concepto importante sobre el que es necesario insistir es que no se pueden realizar pruebas de sensibilidad in vitro con cultivos mixtos, slo los cultivos puros proporcionarn resultados vlidos sobre la eficacia de un antibitico. En la prctica diaria, una buena parte de los tratamientos efectuados tanto a nivel hospitalario como ambulatorio, se establecen con arreglo a unos criterios derivados del estudio in vitro del comportamiento de las distintas especies bacterianas frente a un determinado grupo de antibiticos (tratamiento emprico). Ello se debe a que en muchas ocasiones, no puede disponerse de la bacteria aislada del proceso infeccioso y la eleccin teraputica, en esos casos, responde a criterios de empirismo derivados precisamente del conocimiento del comportamiento de distintos tipos de antibiticos frente a las bacterias presuntamente responsables de la infeccin.

Por otra parte, cada vez se hace ms necesario contar con un diseo de un programa de vigilancia de la resistencia a los antimicrobianos, a nivel general, basado precisamente en el conocimiento que tanto a nivel hospitalario como ambulatorio se tiene del comportamiento de los distintos aislamientos de bacterias frente a los antimicrobianos para poder disear las actuaciones que tiendan a superar la resistencia de las mismas a los antibiticos. Se hace necesario tambin contar no solamente con criterios de tipo cuantitativo o cualitativo (sensible, intermedio, resistente), sino que adems los resultados han de interpretarse adecuadamente para evitar llegar a conclusiones errneas que pueden derivarse de atender exclusivamente al dato que el sistema de realizacin del antibiograma nos ofrece ya que existen muchas formas de interrelacin bacteriaantibitico que deben conocerse para llegar a ese objetivo final que es la eleccin de la terapia ms adecuada. En lneas generales y en funcin sobre su forma de actuar sobre los microorganismos, hablamos de dos grandes grupos de antibiticos Antibiticos primariamente bactericidas: Ejercen una accin letal e irreversible sobre el microbio (Fosfomicina Vancomicina. B-Lactmicos Polimixina. Aminoglucsidos Rifampicina. Acido Nalidxico Quinoleinas. Nitrofurantoinas)
Antibiticos primariamente bacteriostticos: Inhiben el crecimiento pero no matan al microorganismo, permitiendo que las propias defensas del husped pueden eliminar a las bacterias (Tetraciclina Cloranfenicol. Sulfonamidas Trimetroprim. Lincomicina Clindamicina. Macrlidos)

El antibiograma Por qu realizar un antibiograma? El primer objetivo del antibiograma es el de medir la sensibilidad de una cepa bacteriana que se sospecha es la responsable de una infeccin a uno o varios antibiticos. En efecto, la sensibilidad in vitro es uno de los requisitos previos para la eficacia in vivo de un tratamiento antibitico. El antibiograma sirve, en primer lugar, para orientar las decisiones teraputicas individuales. El segundo objetivo del antibiograma es el de seguir la evolucin de las resistencias bacterianas. Gracias a este seguimiento epidemiolgico, a escala de un servicio, un centro de atencin mdica, una regin o un pas, es como puede adaptarse la antibioterapia emprica, revisarse regularmente los espectros clnicos de los antibiticos y adoptarse ciertas decisiones sanitarias, como el establecimiento de programas de prevencin en los hospitales. Hay pues un doble inters: Teraputico y epidemiolgico. Cundo realizar un antibiograma?

Siempre que una toma bacteriolgica de finalidad dagnstica haya permitido el aislamiento de una bacteria considerada responsable de la infeccin. Establecer esta responsabilidad exige una colaboracin entre el bacterilogo y el clnico. En efecto, en ciertas circunstancias, el microbilogo no podr determinar con certeza que el aislamiento de una bacteria exige un antibiograma, sin los datos clnicos que le aporta el mdico. Por ejemplo, una bacteria no patgena puede ser responsable de la infeccin de un enfermo inmunodeprimido o en un lugar determinado del organismo. La presencia de signos clnicos puede ser tambin determinante para la realizacin de un antibiograma (por ejemplo: la infeccin urinaria con un nmero reducido de grmenes). Sensibilidad bacteriana a los antibiticos La determinacin de la Concentracin Inhibidora Mnima (CIM) es la base de la medida de la sensiblidad de una bacteria a un determinado antibitico. La CIM se define como la menor concentracin de una gama de diluciones de antibitico que provoca una inhibicin de cualquier crecimiento bacteriano visible. Es el valor fundamental de referencia que permite establecer una escala de actividad del antibitico frente a diferentes especies bacterianas. Hay diferentes tcnicas de laboratorio que permiten medir o calcular de rutina, y de manera semicuantitativa, las CIM (mtodos manuales y mtodos automatizados o semiautomatizados). Estos diferentes mtodos de rutina permiten categorizar una cierta cepa bacteriana en funcin de su sensibilidad frente al antibitico probado. Esta cepa se denomina Sensible (S), Intermedia (I) o Resistente (R) al antibitco. Para un determinado antibitico, una cepa bacteriana es, segn la NCCLS: Sensible, si existe una buena probabilidad de xito teraputico en el caso de un tratamiento a la doss habitual. Resistente, si la probabilidad de xito teraputico es nula o muy reducida. No es de esperar ningn efecto teraputico sea cual fuere el tipo de tratamiento. Intermedia, cuando el xito teraputico es imprevisible. Se puede conseguir efecto teraputico en ciertas condiciones (fuertes concentraciones locales o aumento de la posologa). Ciertas molculas son representativas de un grupo de antibiticos. Los resultados (S, I, R) obtenidos con estas molculas pueden ser ampliados a los antibiticos del grupo, que en ese caso no es necesario ensayar (Ejemplo: Equivalencia entre la cefalotina que se ensaya y las restantes cefalosporinas de 1 generacin que no es necesario probar, ya que el resultado puede deducirse del obtenido en la cefalotina). Este hecho permite ensayar un nmero reducido de antibiticos, sin limitar por ello las posibilidades teraputicas. Interpretacin de un Antibiograma

Certos mecanismos de resistencia se expresan dbilmente in vitro, cuando se inscriben en el DNA bacteriano. Su expresin en el organsmo, en donde las condicones en cuanto a medios son diferentes, expondra al riesgo de fracaso teraputico. Para evitar esto, el antibiograma debe ser interpretado de manera global a fin de descubrir, a travs de la comparacin de las respuestas para cada antibitico, un mecanismo de resistencia incluso dbilmente expresado. As, gracias a la interpretacin, una cepa que aparece como falsamente sensible ser categorizada como I o R (Ejemplo: Una cepa de Klebsiella pneumoniae productora de BLSE puede aparecer sensible in vitro a las cefalospornas de 3" generacin. El resultado de Sensible debe ser corregido a Intermedio o Resistente, ya que la utilizacin de estos antibiticos correra el riesgo de provocar un fracaso teraputico).

Resistencia bacteriana Cada antibitico se caracteriza por un espectro natural de actividad antibacteriana. Este espectro comprende las especies bacterianas que, en su estado natural, sufren una inhibicin de su crecimiento por concentraciones de su antibitico susceptibles de ser alcanzadas in vivo. A estas especies bacterianas se les dice naturalmente sensibles a dicho antibitico. Las especies bacterianas que no se encuentran incluidas dentro de dicho espectro se denominan naturalmente resistentes. El antibitico no crea resistencia, pero selecciona las bacterias resistentes eliminando las sensibles. Es lo que se conoce con el nombre de presin de seleccin. El aumento de la frecuencia de las cepas resistentes va unido cas siempre al uso intensivo del antibitico en cuestin. La resistencia natural es un carcter constante de todas las cepas de una misma especie bacteriana. El conocimiento de las resistencias naturales permite prever la inactivdad de la molcula frente a bacterias identificadas (despus del crecimiento) o sospechosas (en caso de antiboterapia emprica). En ocasiones, constituye una ayuda para la identificacin, puesto que certas especies se caracterizan por sus resistencias naturales. Ejemplos: Resistencia natural del Proteus mirabilis a las tetraciclinas y a la colistina. Resistencia natural de la Klebsiella pneumoniae a las penicilinas (ampicilina, amoxicilina). La resistencia adqurida es una caracterstica propia de ciertas cepas, dentro de una especie bacteriana naturalmente sensible, cuyo patrimonio gentico ha sido modificado por mutacin o adquisicin de genes. Contrariamente a las resistencias naturales, las resistencias adquiridas son evolutivas, y su frecuencia depende a menudo de la utilizacin de los antibiticos. En el caso de numerosas especies bacterianas, y teniendo en cuenta la evolucin de las resistencias adquiridas, el espectro natural de actividad no es ya suficente para guiar la eleccin de un tratamiento antibitico. En ese caso, se hace indispensable el antibiograma. Una resistencia cruzada es cuando se debe a un mismo mecanismo de resistencia. En general, afecta a varios antibiticos dentro de una misma familia (Ejemplo: La resistencia a la oxacilina en los estafilococos se cruza con todas los -lactmicos). En ciertos casos, puede afectar a antibiticos de familias diferentes (Ejemplo: La resistencia

por impermeabilidad a las ciclinas se cruza con la resistencia al coloranfenicol y al trimetoprima). Un resistencia asociada es cuando afecta a varios antibiticos de familias dferentes. En general, se debe a la. asociacin de varios mecanismos de resistencia (Ejemplo: La resistencia de los estafiolococos a la oxacilina va frecuentemente asociada a las quinolonas, aminoglicsidos, macrolidos y ciclinas). Con el fin de tener en cuenta la evolucin de las resistencias adquiridas y, por consiguiente, proporcionar a los mdicos datos tiles cuando deben proceder a la eleccin emprica de una antibioterapia, la nocin de espectro clnico completa la de espectro natural. Definido para cada antibitico, este espectro clnico se incluye en el Resumen de las Caractersticas del Producto (RCP). Este espectro integra no solamente datos bacteriolgicos (espectro natural, frecuenca de las resistencias adquiridas), sino tambin datos farmacocinticos y clnicos (las especies descritras en el espectro son aquellas para las que se ha demostrado la actividad clnica del producto). El espectro clnico se revisa regularmente para tener en cuenta la evolucin de las resistencias adquiridas.

Evolucin, en general, de algunas resistencias bacterianas

Evolucin, en hospital, de algunas resistencias bacterianas

Mecanismos de la resistencia adquirida El mecanismo gentico de adquisicin de una resistencia puede ser: - La mutacin de un gen implicado en el modo de accin de un antibitico: Este mecanismo afecta preferentemente a ciertos antibiticos: quinolonas, rifampicina, cido fusdico, fosfomicina, antituberculosos y a veces cefalosporinas (Ejemplo: La resistencia a las quinolonas por modificacin del ADN grasa en las enterobacterias).

- La adquisicin de genes de resistencia transferidos a partir de una cepa perteneciente a una especie idntica o diferente: Ciertos Antibiticos estn particularmente afectados por este mecanismo: -lactmicos, aminoglicsidos, tetraciclinas; cloranfenicol, sulfamidas (Ejemplo: Resistencia a la ampicilina E. coli y del Proteus mirabilis). El mecanismo bioqumico de la resistencia puede ser: - una produccin por la bacteria de enzimas que inactivan el antibitico. Ejemplo: Penicilinasa de los estafilococos, lactamasa de amplio espectro (BLAE) de las enterobacterias. - una modificacin del blanco del antibitico. Ejemplo: Modificacin de las Protenas de Enlace con la Penicilina (PBP) de los estafilicocos resistentes a la oxacilina (llamados estafilococos "Meti-R"). Neumococos resistentes a la penicilina. - una impermeabilidad de la pared bacteriana por modificacin o por disminucion cuantitativa de las porinas. Ejemplo: Pseudomonas aeruginosa resistente a la imipenem. - un mecanismo de efusin: expulsin de la molcula por un transporte activo. Ejemplo: Estafilococos resistentes a las tetraciclinas. Pruebas de sensibilidad bacteriana in vitro En la poca posterior al descubrimiento de las sulfonamidas y de la penicilina rara vez se probaba la sensibilidad de los microorganismos a las drogas. Los pacientes eran tratados en forma emprica y los microorganismos generalmente eran sensibles. Slo tras el surgimiento de las cepas resistentes, poco despus de la introduccin de estos agentes, los microbilogos comenzaron a probar la sensibilidad de un microorganismo infectante frente a los agentes antimicrobianos. En un primer momento, el mtodo estndar utilizado para las pruebas in vitro fue el de dilucin en caldo, que proporcionaba un resultado cuantitativo de la concentracin de agente antimicrobiano necesaria para inhibir el desarrollo de un organismo dado.
Mtodo base de dilucin en caldo

En los mtodos de dilucin en caldo, base de casi todos los mtodos utilizados en la actualidad, se colocan concentraciones decrecientes del agente antimicrobiano, generalmente diluciones 1:2, en tubos con un caldo de cultivo que sostendr el desarrollo del microorganismo. El caldo ms comnmente usado para estas pruebas es el de Mueller-Hinton suplementado con los cationes magnesio y calcio. Los agentes antimicrobianos se preparan en "soluciones madre"

concentradas y luego se diluyen en caldo hasta obtener las concentraciones apropiadas. Un tubo de caldo se mantiene sin inocular como control negativo de crecimiento. Luego de la incubacin adecuada (usualmente de un da para el otro) se observa la turbidez de los tubos que indicar desarrollo bacteriano. El microorganismo crecer en el tubo control y en todos los otros que no contengan suficiente agente antimicrobiano como para inhibir su desarrollo. La concentracin de antibitico que presente ausencia de crecimiento, detectada por falta de turbidez (igualando al control negativo), se designa como la Concentracin Mnima Inhibitoria (CMI) (ver esquema ampliado). Para medir la capacidad de un antimicrobiano para matar a un microorganismo (CMB) se debe realizar la prueba de actividad bactericida, que emplea el mismo sistema de dilucin en caldo que para medir la sensibilidad. Al mismo tiempo que la suspensin inicial del microorganismo es inoculada en los tubos de caldo, se toma una alcuota del tubo de control de crecimiento, inmediatamente despus de ser sembrado, y se inocula tambin en una placa de agar para determinar el nmero real de unidades formadoras de colonias (UFC) del inculo. Este nmero se obtiene al contar las colonias presentes luego de la incubacin de la placa de agar hasta el da siguiente y por multiplicacin por el factor de dilucin. Por ejemplo, usando un asa calibrada de 0,01 ml para sembrar la placa y contando unas 250 colonias, en 1 ml del tubo original habr 250/0,01. Una vez determinada la CMI, se siembra una cantidad conocida de inculo de cada uno de los tubos de caldo que no presentaban turbidez en placas de agar (la pequea cantidad del agente antimicrobiano que es llevada junto con el inculo se elimina por dilucin en el agar), y el nmero de colonias que crece en estos subcultivos, despus de incubar durante la noche, se compara con el nmero de UFC/ml del cultivo original. Dado que incluso las drogas bactericidas no siempre esterilizan totalmente una poblacin bacteriana, la mnima concentracin del agente antibacteriano que permite sobrevivir a menos de 0,1 % del inculo original se denomina concentracin bactericida mnima (CBM) o concentracin letal mnima (CLM). Las CMI y las CMB de un agente antimicrobiano pueden ser determinadas, con este mtodo o con alguna variante, para cualquier bacteria que crezca en un medio liquido. Pero segn se pudo disponer de mayor nmero de agentes antimicrobianos para el tratamiento de una gran variedad de bacterias, se hicieron aparentes las limitaciones del macromtodo de dilucin en caldo y se desarrollaron variantes de esta tcnica que permitieran, por ejemplo, probar simultneamente un gerrnen aislado de un paciente frente a ms de un agente antimicrobiano. Actualmente son varios los mtodos que se utilizan para llevar a cabo los estudios de sensibilidad a los antibiticos y todos ellos se realizan en los laboratorios de microbiologa bajo condiciones entandarizadas por organismos internacionales. Entre todos, tres son los que, por su sencillez y fiabilidad, se han impuesto como sistemtica de rutinaria en la mayora de los laboratorios:

Pruebas de sensibilidad bacteriana in vitro Mtodo de difusin en agar Una vez demostradas las grandes ventajas de las tcnicas de dilucin en caldo, el paso siguiente, pensando sobre todo en poder realizar fcilmente pruebas de sensibilidad de un microorganismo frente a mltiples antibiticos a la vez, consisti en buscar la manera de aplicar la idea directamente a las placas de agar. Las primeras pruebas se realizaron inoculando la superficie de una placa de agar con el microorganismo en estudio, colocando pequeas cubetas (de metal o vidrio) sobre el agar y agregando las soluciones de los diferentes antimicrobianos dentro de dichas cubetas. Los agentes antimicrobianos difundan en el medio en forma radial alrededor de la cubeta e inhiban el desarrollo del microorganismo en la zona donde su concentracin era suficientemente alta. Las reas de inhibicin grandes indicaban una actividad antimicrobiana ms efectiva. Este mtodo fue modifcado en 1947 por Bondi y col. incorporando el agente antimicrobiano a discos de papel de filtro. Fue un paso adelante gigantesco ya que el uso de los discos de papel permita preparar un gran nmero de pruebas idnticas y almacenarlas para uso futuro. En 1966, despus de los estudios realizados por Bauer, Kirby, Sherris y Turk, ensayando diferentes cepas bacterianas, el empleo de los discos de papel de filtro para las pruebas de sensibilidad fue estandarizado y correlacionado definitivamente con las CMI correspondientes. Durante muchos aos, y a pesar de ser una tcnica puramente cualitativa, el mtodo de difusin por disco (o mtodo Kirby-Bauer), en funcin sobre todo de su comodidad, economa y fiabilidad, ha sido, y aun es, uno de los ms utilizados en los laboratorios de todo el mundo. El microorganismo a investigar se inocula en una o varias placas de agar y sobre su superficie se disponen los discos correspondientes a varios antibiticos. Se incuban las placas durante 16-24 horas a 35C y al cabo de este tiempo se estudia el crecimiento en ellas. Se valora el dimetro de la zona de inhibicin que se forma alrededor de cada disco y se compara con las referencias oportunas publicadas por el NCCLS. Con esta referencia podemos informar si el microorganismo es Sensible, Intermedio o Resistente (S, I, R) a cada uno de los antibiticos ensayados en las placas. Antibiograma realizado por el mtodo de difusin en agar En esta fotografa se muestra un ejemplo de antibiograma realizado por el mtodo de difusin en agar por medio de discos. En la imagen de la izquierda se muestra una vista general de una placa con crecimiento bacteriano y con seis discos de antibiticos. La zona de color claro que ocupa la mayor parte de la placa es el crecimiento bacteriano en las zonas no inhibidas. Los crculos negros que rodean a cinco de los seis discos marcan las zonas en que los respectivos antibiticos han inhibido, con mayor o menor eficacia, el crecimiento del

microorganismo a estudio. El sexto disco (AM-10) no tiene a su alrededor halo de inhibicin lo que indica la resistencia del microorganismo a ese antibitico. La foto de la derecha, un plano ms cercano de la mitad superior de la placa, permite observar con ms detalle lo sealado en el prrafo anterior. Puede verse adems, con gran claridad, la especial disminucin de la intensidad de crecimiento del microorganismo en la zona interior del halo de inhibicin del disco de CTX-30, debido probablemente a la aparicin de mutantes resistentes de dicho microorganismo capaces de soportar en mayor medida que el resto el efecto inhibitorio del antibitico.

Pruebas de sensibilidad bacteriana in vitro Mtodo de E-test Es uno de los mtodos ms recientes que se han presentado en el mercado y resulta de una curiosa combinacin de caractersticas de los mtodos anteriores. Se trata de una tcnica cuantitativa en placa que permite obtener una lectura directa de CMI en g/ml, ya que se emplean tiras plsticas impregnadas en concentraciones crecientes de antibitico indicadas en una escala graduada sobre la propia tira. Una de sus grandes ventajas, dadas sus caractersticas, es que resulta un mtodo ideal para estudiar cualquier tipo de microorganismo, aerobio o anaerobio, incluyendo aquellos llamados "fastidiosos" o los que tengan requerimientos especiales para crecer. El microorganismo a investigar se inocula en una placa y sobre ella se deposita la tira del antibitico (o antibiticos) a ensayar. Tras la incubacin de 16-24 horas a 35C se observan las placas y se valora la zona de inhibicin, de forma elptica, alrededor de cada tira. La CMI se lee directamente observando el punto ms bajo de la elipse que presente crecimiento. Antibiograma realizado por el mtodo de E-test En esta fotografa se muestra un ejemplo de antibiograma realizado por el mtodo de Etest.

En la fotografa de la izquierda se muestra una vista general de una placa con crecimiento bacteriano y con dos tiras de E-test. La zona de color ms claro que ocupa la mayor parte de la placa es el crecimiento bacteriano en las zonas no inhibidas. Las elipses ms oscuras que rodean la parte superior de las tiras E-test marcan las zonas en que los respectivos antibiticos han inhibido, con mayor o menor eficacia, el crecimiento del microorganismo a estudio. La foto de la derecha, un plano ms cercano de la mitad inferior de la placa, permite observar con ms detalle lo sealado en el prrafo anterior. Se aprecia perfectamente como el pico de la zona ms estrecha de la elipse en la tira de MZ coincide, en la escala graduada, con la franja entre las marcas de 1.5 y 2, lo que nos indicara que la CMI de este antibitico (MZ) para este microorganismo sera de 2 g/ml.

fotografa: Dani Val Pruebas de sensibilidad bacteriana in vitro Mtodos automatizados La mayora de estos novedosos mtodos utilizan sistemas de microdilucin en medio lquido sobre microplacas con pocillos en "U" e interpretan el crecimiento bacteriano en los diferentes pocillos por medio de un autoanalizador (mediciones por turbidez o fluorescencia) o, en el caso de los sistemas ms sencillos, por simple lectura ptica del tcnico a travs de un visor invertido de espejo. Su manipulacin suele ser fcil y rpida, generalmente automatizada o semiautomatizada, lo que los convierte en mtodos ideales para grandes volmenes de trabajo. Una de sus grandes limitaciones es que slo ofrecen garanta para investigar microorganismos de crecimiento rpido y que no tengan requerimientos especiales. Antibiograma realizado por mtodo automtico En esta fotografa se muestra un ejemplo de antibiograma realizado por un mtodo automatizado. En la imagen de la izquierda se muestra una vista general de una microplaca para autoanalizador que incluye fase de identificacin y fase de antibiograma (panel microScan). Las tres filas superiores de la microplaca son la zona de "identificacin" del microorganismo, las cinco filas inferiores son el apartado "antibiograma".

La foto de la derecha, un plano ms cercano de la mitad inferior izquierda de la microplaca, permite observar con ms detalle algunas filas de pocillos con diluciones seriadas de algunos antibiticos. La dosificacin de cada antibitico aumenta, en cada fila, de izquierda a derecha (obsrvese los rtulos bajo cada pocillo: 8-16 ... 1-2-8-16 ... 2-8-32). Los pocillos que en la imagen muestran un color verde intenso tienen crecimiento bacteriano, o sea, el antibitico en cuestin no impide el desarrollo del microorganismo a estudio. Los pocillos transparentes marcaran los puntos de inhibicin de cada antibitico.

fotografa: Dani Val