I.N.S.A.

DE ROUEN
Laboratoire de Chimie Analytique UV TP ANA3

CHROMATOGRAPHIE EN PHASE GAZEUSE DOSAGE DE LETHANOL DANS LE VIN ET LA BIERE

On se propose de doser de l'thanol en solution aqueuse. On appliquera ce dosage la dtermination du degr alcoolique dun vin et dune bire. On utilisera la mthode de l'talon interne avec l'isopropanol comme talon.

) CONDITIONS OPERATOIRES Chromatographe Varian 3300 quip dun dtecteur ionisation de flamme (FID).

Le choix de ce type de dtecteur est guid par le fait que l'on dsire tudier une solution aqueuse et qu'ainsi on ne sera pas gn par le pic du solvant. ( pourquoi ? ) - sensibilit: 10-11 A/mV attnuation: 1

- Phase stationnaire : OV 5 (5% phenyl polysiloxane) diamtre 0.32 mm - Tempratures: injecteur: 200C dtecteur: 200C

- Gaz vecteur: Hlium dbit: 1 mL/min - injecteur Split : taux de split 30 :1 Prparer une solution aqueuse contenant 5% d'thanol et 2% disopropanol (en volume). Injecter 0,2 L. Optimiser la temprature du four pour avoir une bonne sparation en un temps respectable. On utilisera un ordianteur pour la dtermination des aires de pics et on s'assurera pour la premire injection de la rptabilit des rapports d'aires obtenus (injecter 4 fois la mme solution).

) DOSAGE DE L'ETHANOL On utilisera ici la mthode de l'talon interne par talonnage. (voir annexe) N.B.: Avec les notations employes dans l'annexe, A est l'espce tudie, soit ici l'thanol et E l'talon, soit ici lisopropanol.

-1) Etalonnage Faire une srie de solutions d'talonnage pour lesquelles le rapport r varie entre 0,6 et 1,4 r = volume d'thanol / volume d'isopropanol Pour obtenir de bons rsultats avec le dtecteur ionisation de flamme trs sensible, il faut utiliser des solutions assez dilues. Les solutions seront donc prpares de la faon suivante : - 1mL d'isopropanol ( talon interne) - x mL d'thanol - eau HQ qsp 25 mL -2) Dosage du vin On sassura dans un premier temps de labsence disopropanol dans les solutions doser. A la vue de ltiquette prlever un volume connu , y ajouter disopropanol (1mL) et complter 25 mL avec de leau. Il faut se ramener dans la gamme d'talonnage dfinie ci-dessus. Raliser trois injections. Dterminer la concentration de l'thanol dans le vin, donner lintervalle de confiance (niveau de confiance 95%) sur la mesure.

-3) Dosage de la bire Faire de mme que prcdemment, on aura au pralable pris soin de dgazer la bire aux ultrasons. Dterminer la concentration de l'thanol dans la bire, donner lintervalle de confiance (niveau de confiance 95%) sur la mesure

Il vous est demand une synthse de ce travail en prsentant rapidement lappareillage puis en exploitant vos rsultats le plus rigoureusement possible.

METHODE DE L'ETALON INTERNE EN CHROMATOGRAPHIE QUANTITATIVE

En chromatographie, l'aire sous le pic est en gnral propotionnelle la quantit de matire injecte. Pour un compos quelconque A, l'aire S sous le pic A s'exprime par: SA = k m m A si on a inject une masse mA de A A

ou

SA = k v v A A

si on a inject un volume vA de A

On raisonnera sur mA ou vA selon la faon dont ont t prpares les solutions: - Titre massique: soit MA la masse de A dans l'chantillon dont le volume total est V. si v est le volume inject: il contient une masse mA de A, et on aura: v S A = k mMA A V
- Titre volumique: soit VA: le volume de A dans l'chantillon dont le volume total est V. si v est le volume inject: il contient un volume vA de A , et on aura: v S A = k v VA A V On pourrait donc penser faire un talonnage de faon classique, en prparant des solutions de titre massique ou volumique connu et en injectant toujours le mme volume v. Or compte tenu de la faible valeur de v, quelques diximes de l, la reproductibilit du volume inject est insuffisante pour obtenir des rsultats prcis. La mthode de l'talon interne rend les rsultats indpendants du volume inject, sous rserve de rester dans le domaine de linarit de rponse du dtecteur. Facteur de rponse: On admet avoir pu trouver un produit soluble dans l'chantillon, sortant sous forme de pic isol, proche du pic analys, et dont on peut introduire une concentration connue dans l'chantillon sans pertuber celui-ci. v v m et en mme temps SE = kE ME , o MA, V V ME,(ou VA et VE), v et V sont connus et SA ainsi que SE mesurs. L'injection d'une fraction v de V conduit : S A = k mMA A d'o
m S A k A MA = SE k m ME E

ou

v S A k A VA = SE k v VE E

donc

SA est indpendant de v. SE

On appelle facteur de rponse la valeur de k m ou de k v rapporte celle de l'talon, le facteur de A A rponse de l'talon lui-mme tant pris gal 100.

soit:

km S M m FA = A 100 = A E 100 m SE M A kE

ou

kv S V v FA = A 100 = A E 100 v SE VA kE

Etalonnage

On peut faire une courbe d'talonnage en prparant des solutions connues de A et E, contenant des M V rapports rm = A ou rv = A variables. On obtient alors une droite d'talonnage en portant: ME VE SA = f (r ) , soit SE
m S A FA = rm SE 100

ou

Fv SA = A rv SE 100

Pour analyser une solution inconnue , on ajoute un volume Vci (volume connu de la solution inconnue) ou une masse Mci (masse connue de la solution inconnue ) un volume VcEi (volume connu d'talon dans la solution inconnue) ou une masse McEi (masse connue de l'talon dans la solution inconnue). S S La mesure du rapport Ai = A donne la valeur correspondante de r. SEi SE VAi M rv = ou rm = Ai d'o: VcEi McEi La teneur en A de l'chantillon peut tre calcule: V - en % volumique: = Ai 100 Vci M = Ai 100 - en % massique: Mci M = Ai - en g/l: Vci - en concentration molaire:
=

(Masse

M Ai Molaire de

A Vci )

Calcul Direct Lorsque l'on est sr que la courbe d'talonnage est bien une droite passant par l'origine, on peut faire un calcul direct, aprs dtermination des facteurs de rponse. Le travail se fait en deux tapes: -1) Solution connue de A et de E pour dterminer FA -2) A un volume Vci (ou une masse Mci) de la solution inconnue , on ajoute un volume VcEi (ou une masse McEi) de l'talon. On obtient: VAi = ou Remarques: -a) L'talon peut tre utilis pour doser plusieurs espces simultanment, pourvu que la sparation soit satisfaisante. -b) La concentration de l'talon doit tre du mme ordre de grandeur que celle de l'espce doser: adapter sa teneur. MAi S Ai 100 VcEi ; le titre se calcule comme prcdemment SEi F v A S 100 = Ai McEi ; le titre se calcule comme prcdemment SEi F m
A