Facultad de Ingeniera Universidad Nacional de San Juan Ingeniera Qumica MICROBIOLOGA

GUA DE TRABAJOS PRCTICOS MICROBIOLOGA

Practica de laboratorio N 5 : CARACTERES FISIOLGICOS Y BIOQUMICOS

Ampliar por Biologa de los Microorganismos y Temas de Teora relacionados (Factores ambientales, Metabolismos, etc.)

A) CARACTERES FISIOLGICOS Se entiende por caracteres fisiolgicos los referentes a las funciones vitales de los microorganismos y la influencia del medio que los rodea, por ejemplo efecto de la temperatura. pH, oxgeno, etc. Tcnica 1. Efecto de la temperatura Objetivo: Determinar la temperatura ptima de crecimiento de un microorganismo. Materiales

Cultivo en medio liquido del microorganismo Medio de cultivo en estra Ansa ojal o de madera Cmaras de cultivo a distintas temperaturas

Mtodo

Sembrar un tubo por cada temperatura de incubacin Incubar durante 7 das Observar

2. Efecto del Oxgeno Objetivo: Determinar la necesidad de oxigeno del microorganismo en estudio Materiales: Medio de cultivo agarizado Cultivo en medio liquido Pipetas Pasteur

Mtodo: 0 Fundir un tubo de medio agarizado y mantenerlo a 100 C durante 10 minutos para expulsar el oxigeno disuelto Enfriar a 42-45 C e inocule masivamente con el cultivo. Homogeneizar suavemente evitando la disolucin de aire en el agar Solidificar el medio agarizado colocando el tubo en bao de agua fra. Incubar a 37 C durante 2 das
1 Lic. Eduardo A. Suero Mg. Patricia Varela

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Observar la posicin y el aspecto del crecimiento

3. Efecto del pH Objetivo: Averiguar el pH ptimo de desarrollo de un microorganismo Materiales:

Cultivo en medio lquido Medio de cultivo en cajas de Petri a diferentes pH Ansa Beinjerinck

Mtodo

Siembre el microorganismo en estudio en tres cajas con distinto pH Incube a 30C Observe el crecimiento a los 7 das

B) CARACTERES BIOQUMICOS Se entiende como caracteres bioqumicos aquellos relacionados con la qumica de los distintos procesos biolgicos que caracterizan el microorganismo. Para el estudio de 105 mismos1 puede analizarse lo que el microorganismo consume o los metabolitos que excreta, o ambos, por ejemplo asimilacin y/o fermentacin de fuentes de carbono, produccin de cido y gas a partir de ellas, produccin de sulfhdrico, hidrlisis de gelatina, desaminacin de aminocidos, utilizacin de grasas. etc. Tcnica 1. Produccin de cido y gas a partir de fuentes de carbono Objetivo: Determinar si el microorganismo fermenta la fuente de carbono y si, al mismo tiempo, produce acidificacin del medio que lo rodea. Materiales:

Cultivo en medio slido Medio de cultivo lquido con sacarosa como fuente de carbono e indicador PBC con tubos Durham invertidos

Mtodo:

Sembrar un tubo con medio liquido con PBC y dejar uno sin sembrar como testigo Incubar ambos tubos a 37 C Observar al cabo de 7 das la presencia de burbuja y el color del medio

2. Producci6n de cido sulfhdrico Objetivo: Detectar la produccin de cido sulfhdrico durante el metabolismo de las
2 Lic. Eduardo A. Suero Mg. Patricia Varela

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protenas Materiales

Cultivo en medio lquido Medio de cultivo agarizado, en tubo puncin Tirillas de papel de filtro embebida en acetato de plomo seca Ansa en punta

Mtodo

Sembrar por puncin el medio con el cultivo Antes de tapar el tubo, colocar aspticamente una de las tirillas de papel en el interior del tubo y fijarla con el tapn Incubar durante 7 das y observar si hubo ennegrecimiento del papel por la formacin de acetato de plomo

Lic. Eduardo A. Suero Mg. Patricia Varela

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MICROBIOLOGIA Practica de laboratorio N 5 . Informe Nombre: Registro: Fecha: Expresin de resultados A) CARACTERES FISIOLGICOS 1. Efecto de la temperatura Psicrfilo Mesfilo Termfilo 2. Efecto del oxigeno Aerobio Anaerobio Anaerobio 3. Influencia del pH pH con desarrollo ptimo:

B) CARACTERES BIOQUMICOS 1. Produccin de cido y gas a partir de fuentes de carbono Produccin de gas Produccin de cido 2. Produccin de sulfhdrico Oscurecimiento del papel : positivo negativo

Lic. Eduardo A. Suero Mg. Patricia Varela