AUTOCLAVE

Introduccin
Un autoclave de laboratorio es un dispositivo que sirve para esterilizar material de laboratorio, utilizando vapor de agua a alta presin y temperatura para ello, evitando con las altas presiones que el agua llegue a ebullir a pesar de su alta temperatura. El fundamento del autoclave es que coagula las protenas de los microorganismos debido a la presin y temperatura, aunque recientemente se ha llegado a saber de algunos microorganismos, que tal como los priones, que pueden soportar las temperaturas de autoclave. Las autoclaves funcionan permitiendo la entrada o generacin de vapor de agua pero restringiendo su salida, hasta obtener una presin interna de 103 kPa, lo cual provoca que el vapor alcance una temperatura de 121 grados centgrados. Un tiempo tpico de esterilizacin a esta temperatura y presin es de 15-20 minutos. Los autoclaves ms modernos permiten realizar procesos a mayores temperaturas y presiones, con ciclos estndares a 134 C a 200 kPa durante 5 min para esterilizar material metlico; llegando incluso a realizar ciclos de vaco para acelerar el secado del material esterilizado. El hecho de contener fluido a alta presin implica que las autoclaves deben ser de manufactura slida, usualmente en metal, y que se procure construirlas totalmente hermticas. Las autoclaves son ampliamente utilizadas en laboratorios, como una medida elemental de esterilizacin de material. Aunque cabe notar que debido a que el proceso involucra vapor de agua a alta temperatura, ciertos materiales no pueden ser esterilizados en autoclave, como el papel y muchos plsticos (a excepcin del polipropileno). TIPOS DE AUTOCLAVE Unicamente deben usarse autoclaves diseados para trabajo de laboratorio y que puedan recibir carga mixta. Los autoclaves de carga porosa y los esterilizadores de lquidos embotellados son raramente satisfactorios para el trabajo de laboratorio. Existen dos variedades de autoclave de laboratorio:

El tipo de olla a presin. Los modelos de desplazamiento de la gravedad con descarga automtica de aire y vapor condensado.

Funcionamiento de las partes del autoclave

Vlvula de seguridad. Dispositivo que impide que la presin del vapor aumente por encima de determinado valor. Manmetro de la cmara. Dispositivo mecnico que indica cul es la presin de vapor en la cmara de esterilizacin. Manmetro de la camisa. Dispositivo mecnico que indica cul es la presin del vapor dentro de la camisa del autoclave.

Puerta del autoclave. Dispositivo que permite aislar la cmara de esterilizacin del ambiente exterior. Cmara de esterilizacin. Espacio en donde se colocan los objetos o elementos a ser esterilizados. Cuando la puerta se cierra la cmara queda aislada del exterior. Lnea de evacuacin de condensado de la cmara. Conducto que permite recoger el condensado que se forma en la cmara de esterilizacin como consecuencia de los procesos de transferencia de calor, que ocurren entre el vapor y los objetos que estn siendo esterilizados. Termmetro. Instrumento que indica la temperatura a la que se realizan los procesos de esterilizacin en el autoclave. Lnea de evacuacin de condensado de la camisa. Conducto que permite extraer el condensado que se forma en la camisa como resultado de los procesos de transferencia de calor entre el vapor y las paredes de la camisa. Salida de vapor al final de ciclo. Cuando se termina un ciclo de esterilizacin el vapor es extrado del autoclave mediante procedimientos controlados. Lnea de alimentacin de vapor. Conducto que alimenta con vapor el autoclave. Vlvula de admisin de aire con filtro. Dispositivo que permite el ingreso de aire filtrado al finalizar el ciclo de esterilizacin.

Esquema

Cuidados
Para realizar correctamente el proceso de Esterilizacin se realiza lo siguiente: 1.-Antes que nada se coloca el Mechero de Bunsen, el Tripi y la Tela de Asbesto o Parrilla, donde despus ser colocada el Autoclave. 2.-Colocar el Autoclave en un lugar firme y nivelado, verificando que la Autoclave este cerca de la fuente de calor (Mechero de Bunsen). 3.-Se coloca un poco de agua dentro de la cmara de la Autoclave. 4.-Asegurarse de que haya un buen nivel de agua en la Autoclave; si no hay suficiente agua, agregarla hasta que casi llegue a la parrilla inferior. 5.-Introducir el material o medios de cultivo que vayan a ser esterilizados procurando que el material quede acomodado y separado; evitando sobrecargar la Autoclave, adems de que el Material de vidrio, deber quedar boca abajo u horizontalmente (Nunca boca abajo). 6.-Cerrar la Tapa o Sistema de Cerrado ajustando bien el cerrado con los tornillos mviles y tuercas mariposas, es decir, el cerrado es hermticamente. 7.-Abrir la Vlvula de Salida de Vapor. 8-Encender la fuente de calor de la Autoclave. 9-A medida que suba la temperatura del agua (Ver el Termmetro), empezara a salir una mezcla de vapor-aire por la Vlvula de Salida de Vapor, dejar que escape esta mezcla hasta que solo salga un flujo continuo de vapor y el aire haya sido eliminado (Purgar el Autoclave). 10.-Una vez purgada la Autoclave, cerrar la Vlvula de Salida de Vapor y dejar que la presin suba hasta 15 libras por pulgada cuadrada (Observar el Manmetro), lo que proporcionara una temperatura de 121 C. Observar que no es la presin de la Autoclave lo que m ata a los microorganismos sino la elevada temperatura que puede alcanzarse cuando el vapor de agua se somete a presin.

11.-Se empieza a contar el tiempo. 12.-Transcurridos 15 minutos a 15 libras de presin, apagar la fuente de calor y dejar que la Autoclave se enfri sola (No abrir la vlvula de salida de vapor) hasta que la presin haya bajado a 0 libras. 13.-Abrir la Autoclave lentamente, para evitar la salida de un vapor peligroso y extraer el material esterilizado. 14.-Si es necesario o en caso de que el material este caliente, se recomienda usar Guantes de Asbesto (Limpios). 15.- La Autoclave es retirada del rea trabajo con cuidado y utilizando los Guantes de Asbesto (Si es necesario). 16.- Se retira la Parrilla (Utilizando Guantes de Asbesto), el Tripi y finalmente el Mechero de Bunsen.

Aplicaciones

Autoclave de uso mdico usada para esterilizar instrumental y otro producto sanitario. Autoclave de laboratorio usada para esterilizar material de laboratorio. Autoclave industrial como las que se usan por ejemplo para el tratamiento de la madera expuesta a la intemperie, laminacin de vidrio o tratamiento de composites. Autoclave de materiales compuestos usada para curar y conformar laminados de materiales compuestos polimricos.

Bibliografa
http://www.paho.org/spanish/ad/ths/ev/lab_manual-mantenimiento.pdf