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SAN AGUSTN
TEMA: La clonacin.
INTEGRANTES: Shirley Melisa Alzamora Inoan. Fiorella Karina Ramrez Quereval. Fiorella Katherine Rosado Castillo. Mariela Daniela Sosa Antn.
DEDICATORIA
A Dios: por iluminarnos y ayudarnos en la ejecucin de este trabajo, a la vez, por darnos el conocimiento y sabidura para cumplir con nuestras metas y propsitos. A nuestros padres: con profundo reconocimiento, por el cario, comprensin y apoyo, elementos indispensables para concretar nuestras metas trazadas. A nuestro profesor: por el conocimiento, consejos brindados y su contribucin como gua para llegar hacia el camino del xito.
INTRODUCCION
La clonacin deriva del griego , que significa "retoo". La clonacin es el procedimiento cientfico que consiste en tomar el material gentico de un organismo para obtener otro idntico. Este individuo obtenido mediante la clonacin tiene una composicin gentica idntica y recibe el nombre de clon. En la naturaleza, hay muchos organismos que se reproducen mediante clonacin. En el laboratorio, los cientficos utilizan tcnicas de clonacin para crear copias de clulas u organismos que tienen caractersticas valiosas. El objetivo es encontrar aplicaciones prcticas de la clonacin que se traduzcan en avances en la investigacin biolgica, la medicina y la industria. Con las recientes tcnicas de clonacin, la ciencia ha conseguido obviar un paso, hasta ahora infranqueable y obligado: la fecundacin. Lo que pareca ciencia-ficcin -como es la creacin de nuevos individuos sexuados fuera del mbito de la sexualidad, sin fusin de gametos-, ha quedado demostrado como una realidad certificable. Hasta el da de hoy ya han sido clonados ovejas, ratones, vacas, cabras y cerdos. Debemos de diferenciar el uso de la palabra clonacin, pues existen distintos contextos de la biologa: Si nos referimos al mbito de la Ingeniera Gentica, clonar es aislar y multiplicar en un tubo de ensayo un determinado gen o, en general, un trozo de ADN. Sin embargo, Dolly no es producto de Ingeniera Gentica. En el contexto a que nos referimos, clonar significa obtener uno o varios individuos a partir de una clula somtica o de un ncleo de otro individuo, de modo que los individuos clonados son idnticos o casi idnticos al original. Existen diversos tipos de clonacin: Segn el mtodo pueden ser: - Paraclonacin - Particin o fisin de embriones tempranos - Clonacin verdadera Segn el objetivo: - La reproductiva - La teraputica o celular
INDICE
HISTORIA ....... 7 CMO CLONAN CLULAS LOS CIENTIFICOS?..... 9 TIPOS DE CLONACION.12 Segn el mtodo.. 12 Paraclonacin... 12 Particin o fisin de embriones tempranos o gemelacin artificial.....13 Clonacin verdadera..14 Segn el objetivo..... 16 Reproductiva... 16 Teraputica o celular.... 17 CLONACIN EN LA NATURALEZA................................................. 20 CLONACIN EN LOS ANIMALES..... 21 CLONACIN EN LOS SERES HUMANOS. 24 POR QU ES CONTROVERTIDA LA CLONACIN?..................................... 25 BIBLIOGRAFIA. 26
HISTORIA
Las tcnicas de laboratorio que utilizan clulas embrionarias indiferenciadas fueron desarrolladas por primera vez a finales del siglo XIX, cuando el zologo alemn Hans Dreisch separ un embrin de erizo de mar cuando tena dos clulas, y ambas clulas crecieron hasta formar seres adultos. A principios del siglo XX, el embrilogo alemn Hans Spemann ampli el trabajo de Dreisch a los anfibios. En su experimento Spemann determin que un ncleo procedente de una clula embrionaria de salamandra poda dirigir el desarrollo de un organismo completo. En 1938 public sus resultados y propuso un experimento increble cuyo objeto era engendrar un animal extrayendo el ncleo de una clula e introducindolo en un vulo enucleado, es decir, un vulo al que se le haba extrado el ncleo. En 1952 el experimento propuesto por Spemann se hizo realidad cuando los bilogos estadounidenses Robert Briggs y Thomas King utilizaron la transferencia nuclear celular para introducir ADN de una clula embrionaria de rana en un vulo enucleado de rana. El embrin resultante creci hasta convertirse en un adulto. Estos primeros experimentos de clonacin, que utilizaban la transferencia nuclear celular, solo conseguan el objetivo cuando el ADN donado proceda de una clula embrionaria. En 1955 los cientficos britnicos Keith Campbell y Ian Wilmut del Instituto Roslin clonaron dos corderos, Megan y Morag, a partir de clulas embrionarias. En este experimento los investigadores fueron capaces de mantener vivas durante algn tiempo las clulas embrionarias en cultivo antes de iniciar el proceso de clonacin. Este avance permiti a los cientficos modificar los genes de la clula embrionaria en cultivo antes de su clonacin, para producir ganado genticamente modificado. En 1962 el bilogo del desarrollo britnico John Gurdon inici experimentos de clonacin utilizando clulas no embrionarias, en concreto, clulas del revestimiento intestinal del renacuajo. Gurdon pensaba que los renacuajos tenan la edad suficiente como para que las clulas extradas pudieran ser diferenciadas. Gurdon expuso un vulo de rana a la luz ultravioleta, lo que destruy su ncleo. Despus, extrajo el ncleo de una clula intestinal de renacuajo y lo implant en el vulo enucleado. El vulo se desarroll y se convirti en un renacuajo que era genticamente idntico al renacuajo donante del ADN. Sin embargo, los renacuajos clonados en los experimentos de Gurdon nunca sobrevivieron hasta la edad adulta y hoy en da los cientficos piensan que muchas de las clulas utilizadas en estos experimentos no eran clulas diferenciadas. No obstante, los experimentos de Gurdon captaron la atencin de la comunidad cientfica y las herramientas y tcnicas que l desarroll para la transferencia nuclear siguen emplendose en la actualidad. El trmino clon se utilizaba ya a principios del siglo XX en relacin con las plantas. En 1963 el bilogo britnico J.B.S. Haldane, al describir los resultados de Gurdon, se convirti en uno de los primeros en utilizar la palabra clon para referirse a los animales.
Al poco tiempo, los cientficos dirigieron su atencin hacia la clonacin de mamferos, que result ms compleja an que los primeros experimentos llevados a cabo en invertebrados y anfibios. En 1977 el bilogo del desarrollo alemn Karl Illmensee intent la clonacin de ratones a partir de clulas procedentes de embriones en fases iniciales, pero sus hallazgos fueron desacreditados debido a que utiliz tcnicas de laboratorio cuestionables. Muchos investigadores trataron de clonar ganado utilizando la transferencia nuclear celular somtica, pero hubo que esperar hasta 1984 cuando el bilogo dans Steen Willadsen, que trabajaba en la universidad de Cambridge, en Inglaterra, cre el primer mamfero clonado. Willadsen clon ovejas mediante transferencia nuclear con ADN de clulas embrionarias tempranas. Dos aos despus, un equipo de investigadores de la universidad de Wisconsin clon una vaca utilizando una tcnica similar. A partir de entonces, los cientficos empezaron a centrar sus esfuerzos en la clonacin de mamferos con ADN procedente de una clula adulta. En 1996 un equipo de cientficos del Instituto Roslin consigui su objetivo cuando naci Dolly, una oveja clonada. Dolly proceda de una clula extrada de la ubre de una oveja adulta y un vulo enucleado de una oveja de otra raza. El nacimiento de Dolly demostr que las clulas adultas podan adquirir el potencial de clonacin de las clulas embrionarias. Sin embargo, al igual que sucedi con otros experimentos de clonacin, este trabajo requera perseverancia y fueron necesarios 277 intentos de transferencia nuclear celular somtica para crear a Dolly. Un desfile de clonaciones de mamferos siguieron a Dolly. En julio de 1997 los investigadores del Instituto Roslin anunciaron el nacimiento de Polly, el primer cordero genticamente modificado. Para la creacin de Polly los cientficos insertaron en las clulas de una oveja fragmentos de ADN que contenan el gen humano para el factor IX de la coagulacin de la sangre, utilizado en el tratamiento de la hemofilia. Las clulas animales incorporaron el ADN humano a su propio material gentico. Despus clonaron estas clulas para crear a Polly, que segregaba la protena en su leche. En 1997, investigadores de la universidad de Hawai informaron de la clonacin de ms de 50 ratones idnticos a partir de una clula adulta. Otros cientficos aumentaron la lista creciente de clones, que comprenda animales como vacas, cabras, monos, cerdos y conejos. En la dcada de 1990 las tcnicas de clonacin avanzaron de forma muy rpida En el ao 2002 los cientficos clonaron el primer gato (llamado CC, por copia en carbn o copia cortesa), abriendo las puertas a la clonacin de mascotas. A pesar de estos logros, los fracasos en la clonacin de animales superan con mucho a los xitos, ya que en la mayora de los experimentos menos del 5% de los intentos dio lugar a clones vivos.
La unin de una clula somtica y un vulo enucleado se lleva a cabo mediante fusin o inyeccin. En la fusin, los cientficos colocan una clula somtica en contacto con un vulo enucleado. Un impulso elctrico aplicado a las dos clulas introduce el ncleo de la clula somtica en el vulo que carece de ncleo. En el mtodo de inyeccin, el ncleo de la clula se inyecta directamente en el vulo enucleado. En los primeros experimentos con transferencia nuclear celular somtica, esta tcnica solo tena xito si se utilizaba el ncleo de clulas embrionarias o de clulas procedentes de animales inmaduros. En 1996, cientficos britnicos engendraron la oveja Dolly empleando una variante de la transferencia nuclear celular somtica que utilizaba el ncleo de clulas adultas. Los investigadores trataron las clulas donantes adultas para conseguir un estado de reposo, de modo que el comportamiento de los genes de la clula adulta fuese lo ms parecido al de una clula embrionaria indiferenciada. Se aisl una clula de la ubre de una oveja adulta forzndola a entrar en un estado de reposo que evitaba la divisin del ncleo. Los cientficos descubrieron que este estado de reposo ayuda a la clula a volver al estado embrionario. Los investigadores transfirieron el material gentico del ncleo de la clula adulta a un vulo enucleado de una segunda oveja. El embrin resultante fue implantado a continuacin en el tero de una tercera oveja, donde se desarroll durante un embarazo normal. La transferencia nuclear celular somtica solo utiliza el material gentico presente en el ncleo de la clula donante. Sin embargo, no todos los genes de un animal estn localizados en el ncleo. Un pequeo nmero de genes reside en las mitocondrias, una estructura celular que se localiza fuera del ncleo, en el citoplasma celular. Como consecuencia, los clones derivados de la transferencia nuclear celular somtica pueden contener genes mitocondriales que pertenecen al vulo enucleado utilizado en el proceso de clonacin y no a la clula donante del material gentico. Adems, debido a que todos los organismos estn influidos por la interaccin de los genes y el medio, los organismos clonados pueden exhibir ciertas caractersticas que difieran de las del donante gentico. Por ejemplo, durante su desarrollo, un animal clonado est expuesto inevitablemente a muchos factores ambientales distintos de los que influyeron a su progenitor. Estos factores pueden ser el tipo y cantidad de alimentos, la exposicin a enfermedades infecciosas o incluso la posicin del embrin durante su desarrollo en el tero.
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TIPOS DE CLONACION
SEGN EL METODO
Paraclonacin Se toma una clula de un ser adulto, se extrae el ncleo. Estos ncleos se transfieren a un vulo enucleado o a un zigoto al que se le hayan eliminado los proncleos. Este vulo receptor aporta mitocondrias, y en el caso del zigoto, algo del espermatozoide. El embrin resultante crece en el laboratorio durante unos das hasta el estado de blastocito (unas 100 clulas), luego se implanta en el tero de una hembra. El nuevo ser que resulta es gemelo del que recibi el vulo vaciado. Los ncleos pueden proceder de: - Blastmeros de embrin pre-implantatorio - Clulas embrionarias o fetales de un cultivo primario o de un cultivo celular. El resultado: individuos casi idnticos entre s, pero diferentes de los progenitores del embrin que aport el ncleo transferido. Se pierde una generacin, ya que el embrin donante del ncleo se destruye. Los individuos nacidos as se pareceran (desde el punto de vista del genoma nuclear) al individuo que hubiera surgido del embrin destruido. A mitad de los 80 se venan produciendo paraclonaciones en diversos animales de granja: ovejas y vacas. Se lograron terneros por transferencia de ncleos de embriones en fase de hasta 128 clulas. En 1996 el equipo de Wilmut y Campbell logr dos ovejas (Megan y Morag) por transferencia de ncleos de embriones. Se sigui con experimentos de paraclonacin con clulas embrionarias y fibroblastos fetales.
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Particin o fisin de embriones tempranos o gemelacin artificial Es la divisin de un embrin o separacin de blastmeros en embriones preimplantatorios (de 2-32 clulas). Cada mitad o trozo desgajado del embrin se introduce en una zona pelcida de otro vulo, o en una cubierta artificial (ZPA), y se implanta. - En embriones se mojan en 1% de alginato y se transfieren a medio con Cl2Ca, que induce la polimerizacin - En ratones, tiene xito con blastmeros separados en fase de 2 clulas. Pero los blastmeros de embriones de 4-8 clulas pueden suministrar clulas para la masa celular interna y para el trofectodermo si se incorporan junto con blastmeros de otros embriones. El resultado son individuos prcticamente idnticos entre s (salvo mutaciones somticas), pero diferentes a sus padres. Seran equivalentes a gemelos monozigticos. No se debe considerar como clonacin en sentido estricto. Se viene aplicando desde hace aos en ganadera. Estudios de Willadsen (1979 y 1981) sobre ovejas: algunos blastmeros de embriones de 4-8 clulas pueden originar individuos completos. Recientemente se ha hecho en monos.
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Clonacin verdadera Transferencia de ncleos de clulas de individuos ya nacidos a vulos o zigotos enucleados. Se originan individuos casi idnticos entre s (salvo mutaciones somticas) y muy parecidos al donante (del que se diferencian en mutaciones somticas y en el genoma mitocondrial, que procede del vulo receptor). El ncleo procede de individuo nacido. Se transfiere a vulo o zigoto enucleados, y el embrin se implanta en tero. El resultado: individuos casi idnticos entre s y casi idnticos a su progenitor (donante del ncleo). Se ha logrado en varias especies: - Oveja (Dolly). Ncleo donante de clula sin identificar de ubre de oveja de 6 aos de la raza Finn Dorset. Embrin implantado en hembra Scottish Blackface. Baja tasa de xitos: 430 vulos, de los que se obtuvieron 277 vulos reconstituidos, que se cultivaron por separado durante 6 das. 29 blastocistos normales se transfirieron a hembras receptoras. El nico xito fue Dolly. Algunos fueron fetos o neonatos muertos, o con alteraciones del desarrollo
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- Ratones, con ncleos del cmulo oforo1[19]. (El primer ratn clnico naci el 3 de octubre de 1997, y fue llamado Cumulina; ya ha tenido progenie aparentemente normal, que a su vez se ha reproducido). El haber obtenido clones en esta especie de laboratorio, con ciclo de vida corto y de la que se tienen amplios conocimientos de su gentica, abre perspectivas insospechadas para los estudios bsicos sobre la clonacin: mecanismos de la reprogramacin celular, impronta (imprinting) genmica, activacin del genoma del embrin, diferenciacin celular, etc. Poco despus, este mismo equipo japons inform de la clonacin de ratones a partir de clulas del rabo de ratones adultos. Ganado bovino: ncleos de clulas epiteliales del oviducto, del cmulo aforo, epiteliales, musculares.
- Recientemente se ha logrado en ganado porcino: el grupo de Roslin-PPL lo ha conseguido con un nuevo mtodo de doble transferencia nuclear, con el nacimiento de cinco lechones, con dos subgrupos de tres y dos que eran clones entre s y con respecto al correspondiente donante. Sus nombres: Millie, Christa, Alexis, Carrel y Dotcom. - En felinos: el primer gato clonado fue llamado "CC" por copia en carbn o copia cortesa, fue originado por cientficos de la Universidad de Hawai. El gato, que naci el 22 de diciembre de 2001, fue clonado utilizando el mtodo de transferencia nuclear, mediante el cual el ncleo de una clula de un adulto se inserta en un vulo al que se ha extrado el ncleo. El embrin resultante se implant en el tero de una madre sustituta, que tras un embarazo normal dio a luz al gatito.
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SEGN EL OBJETIVO
Reproductiva La clonacin reproductiva est dirigida al nacimiento de individuos completos genticamente idnticos. Implica la implantacin del embrin clonado en el tero de una madre, el desarrollo del mismo y el nacimiento de un individuo. Se obtiene un individuo genticamente idntico, sin necesidad de relaciones sexuales. Se presenta como una moderna tcnica de reproduccin asexuada asistida. Es decir, aparece como una alternativa a personas que no pueden tener hijos de manera sexuada (ausencia de gametos, solteros, parejas del mismo sexo), y que no aceptan tener hijos con dotacin gentica parcial o totalmente distinta de la suya.
La clonacin reproductiva en humanos ha suscitado un fuerte rechazo por parte de casi la totalidad de la comunidad cientfica y las Instituciones en el mundo. Slo algunos cientficos (Dr. Davos en EEUU y el Dr. Antinori en Italia) se han mostrado partidarios de obtener seres humanos adultos por clonacin, a pesar de las duras crticas recibidas desde todos los mbitos. Del mismo modo en EEUU una secta, liderada por Rael, se han mostrado interesados en la clonacin de el mesas, nio de 10 meses muerto y crio conservado hace aos, y afirman haber recaudado ya suficientes fondos para empezar a clonar un ser humano.
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Teraputica o celular Este tipo de clonacin va dirigida a conseguir tejidos para trasplante a personas adultas, mejor dicho es la MEDICINA REPARADORA, obviando el riesgo de rechazo. La clonacin teraputica implica la destruccin posterior del embrin clonado del que se han extrado las clulas de la Masa Celular Interna, fuente de los tejidos para transplante. Un ejemplo es: un paciente de 50 aos, bebedor habitual de 70 gr de alcohol al da desde los 20 aos, presenta insuficiencia heptica grave, secundaria a una cirrosis alcohlica de larga evolucin. El paciente precisa de un trasplante heptico urgente. No existen donantes, o los que existen no son compatibles. Aqu entra en juego este tipo de clonacin. Al paciente se le asla cualquier clula somtica de su cuerpo, por ejemplo de la piel. Siguiendo la tcnica de la oveja Dolly, se introduce el ncleo de la clula de la piel en un vulo al que previamente se le ha extrado su ncleo. Se estimula el vulo con el ncleo transferido, y se observa que comienza la divisin celular de ese embrin clonado. Ese embrin contiene la informacin gentica del individuo cirrtico (puesto que tiene el ncleo de la clula de la piel del cirrtico), es un clon del individuo cirrtico. El embrin se desarrolle hasta la fase de blastocisto. A continuacin se extrae de la Masa Celular Interna de ese embrin la clula madre (stem cell) encargada de generar el futuro hgado de ese individuo todava en fase embrionaria. Se cultivan esas clulas y se obtienen clulas hepticas inmaduras (hepatoblastos), obteniendo en el laboratorio tejido heptico amorfo. Ese tejido lo trasladamos al hgado del enfermo, que al ponerse en contacto con tejido conjuntivo (matriz colgena que hace las veces de andamio donde se sustentan y adquieren su forma los distintos rganos), empieza a crecer de forma ordenada, restituyendo el hgado daado. No existe posibilidad de rechazo, porque ese hgado es genticamente idntico al hgado del enfermo. Los beneficios de este tipo de clonacin son: Correccin de enfermedades genticas. El tratamiento gentico podra llegar a curar enfermedades hereditarias, como la hemofilia o la fibrosis qustica, causadas por genes ausentes o defectuosos. Una tcnica de este tipo consiste en utilizar virus modificados genticamente para insertar genes nuevos funcionales en las clulas de pacientes incapaces de segregar hormonas o protenas necesarias para el normal funcionamiento del organismo. La ingeniera gentica tiene un gran potencial.
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Mientras que los beneficios potenciales de la ingeniera gentica son considerables, tambin lo son sus riesgos. Por ejemplo, la introduccin de genes que producen cncer en un microorganismo infeccioso comn, como el influenzavirus, puede ser muy peligrosa. Por consiguiente, en la mayora de las naciones, los experimentos con ADN recombinante estn bajo control estricto, y los que implican el uso de agentes infecciosos slo se permiten en condiciones muy restringidas. Otro problema es que, a pesar de los rigurosos controles, es posible que se produzca algn efecto imprevisto como resultado de la manipulacin gentica.
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CLONACION EN LA NATURALEZA
Los organismos unicelulares, como las bacterias, se reproducen mediante un tipo de reproduccin asexual llamado escisin o fisin. Durante la escisin, la clula duplica su ADN para formar dos conjuntos completos de ADN. Despus, la clula progenitora se divide y da origen a dos clulas hijas. Cada clula hija recibe un conjunto de ADN. Las dos clulas son genticamente idnticas a su progenitora y entre s. La gemacin es tambin otro tipo de reproduccin asexual que emplean las levaduras y algn animal multicelular como la hidra. En la gemacin se forma una pequea yema en el cuerpo del organismo progenitor. El ADN de la clula se duplica y una copia se dirige hacia esta yema que crece y se separa como un clon del organismo progenitor. Muchas plantas, como las fresas y algunas hierbas, se clonan a s mismas para producir estolones, es decir, tallos que crecen sobre la superficie y emiten races en cualquier lugar que est en contacto con la tierra, dando lugar a nuevas plantas genticamente idnticas a la original. Otras plantas, como los lirios, producen tallos subterrneos llamados rizomas, que originan plantas nuevas, genticamente idnticas a la planta progenitora. Algunos animales, como las pulgas de agua, pulgones, artemias y algunas especies de peces, ranas y lagartos, se reproducen asexualmente mediante un proceso llamado partenognesis, una palabra que deriva del trmino griego parthenos (virgen) y gnesis (nacer). En la partenognesis el gameto femenino se desarrolla sin necesidad de que sea fecundado por un gameto masculino. Algunos mamferos tambin producen clones, aunque a diferencia de los clones de otros organismos, los descendientes proceden de una reproduccin sexual en la que el gameto masculino fecunda el gameto femenino. En estos casos, el vulo fecundado del mamfero se divide en el tero y forma dos o ms embriones. Estos descendientes son clones unos de otros y comparten exactamente los mismos genes. Sin embargo, no existen clones del padre o de la madre, ya que sus descendientes solo heredan la mitad de los genes de cada progenitor.
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experimento, lo que facilitara a los cientficos la evaluacin de la enfermedad. Adems, los cientficos podran clonar un gran nmero de animales que padecen enfermedades que tambin afectan al ser humano, como la artrosis, con el fin de estudiar la progresin de la enfermedad y sus posibles tratamientos. Algunos animales clonados, como las ovejas o los cerdos, pueden vivir durante aos y los cientficos podran utilizar estos animales para valorar la respuesta a largo plazo de los tratamientos farmacolgicos. La clonacin puede permitirnos recuperar algunas poblaciones de animales que estn prximos a desaparecer. En el ao 2001 los cientficos clonaron con xito un gaur, un buey en peligro de extincin que vive en el Sureste asitico. Se introdujo el material gentico de una clula de la piel de un gaur macho muerto en un vulo sin ncleo de una vaca. El embrin obtenido fue implantado en una vaca que se utiliz como madre. El recin nacido muri dos das despus de nacer de una infeccin bacteriana sin relacin aparente con el proceso de clonacin. En este mismo ao, los cientficos clonaron tambin un mufln, un bvido en peligro en Cerdea, Crcega y Chipre. Otros equipos de investigadores tienen la esperanza de clonar otros animales en peligro de extincin, como el bongo, un antlope africano; el tigre de Sumatra y el oso panda gigante. Algn da los cientficos podrn clonar animales extinguidos. El ltimo bucardo, una cabra monts originaria de las montaas de los Pirineos del norte de Espaa, muri en el ao 2000. Los cientficos espaoles han conservado algunas de sus clulas con la esperanza de poder utilizarlas para crear un embrin clonado y despus implantarlas en un tipo de cabra comn con una carga gentica similar a la del bucardo. Sin embargo, para poder clonar animales en peligro de extincin, son necesarias clulas que contengan un ncleo intacto con ADN indemne. Tambin es precisa la implantacin del embrin clonado en el tero de una hembra de una especie relacionada muy prxima. Estos requerimientos impiden que los cientficos puedan clonar clulas de los restos fosilizados de dinosaurios o de otros animales extinguidos hace mucho tiempo.
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BIBLIOGRAFIA
- Microsoft Student con Encarta Premium 2008. - http://www.google.com.pe/search?hl=es&q=clonacion&btnG=Buscar+con+Google& meta=lr%3Dlang_es. - http://es.wikipedia.org/wiki/Clonaci%C3%B3n. - http://www.monografias.com/trabajos14/clonacion/clonacion.shtml. - http://www.embrios.org/clonacion/introduccion.htm. - http://www.elrincondel vago.com. - BIOLOGIA: teora y experimentos- Editorial Bruo
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