TERMINOLOGA ANALTICA

- PROCESO ANALTICO
- TCNICA ANALTICA
- MTODO ANALTICO
- PROCEDIMIENTO ANALTICO
- PROTOCOLO ANALTICO
PROCESO ANALTICO
Conjunto de operaciones analticas intercaladas que se
realizan entre la muestra y el resultado
Muestra
Operaciones
previas
Medida de
la seal
Toma y
tratamiento de
datos
Resultado
TCNICA ANALTICA
Principio cientfico adaptado a uno o varios instrumentos,
que nos es til o necesario para obtener informacin
sobre la composicin de la muestra (fluorimetra,
potenciometra etc.)
MTODO ANALTICO
Adaptacin variada de una tcnica, para llevar a cabo
una medida determinada. (Pueden existir varios mtodos
analticos distintos para determinar el mismo analito
mediante la misma tcnica).
PROCEDIMIENTO ANALTICO
Las instrucciones generales escritas necesarias para
utilizar un mtodo. (Normalmente son normas de carcter
oficial Ej. ASTM D-2914 anlisis de SO
2
en vino).
PROTOCOLO ANALTICO
Las directrices especficas escritas que recogen los pasos
necesarios para desarrollar el mtodo analtico sin
excepcin. (Contiene detalles especficos que no recoge
el mtodo).
SELECCIN DE UN MTODO ANALTICO
DEFINICIN DEL PROBLEMA
1.- Qu exactitud se requiere?
2.- De cunta muestra se dispone?
3.- En qu intervalo de concentraciones est el
analito?
4.- Qu componentes de la muestra interfieren?
5.- Cules son las propiedades fsicas y qumicas
de la matriz de la muestra?
6.- Cuntas muestras hay que analizar?
CARACTERSTICAS DE FUNCIONAMIENTO
Criterios de Fiabilidad (criterios numricos)
Criterios de Practicabilidad (otras caractersticas
a valorar)
Criterios de Fiabilidad
Precisin
Exactitud
Sesgo
Linealidad
Intervalo de Linealidad
Lmite de Deteccin
Lmite de Cuantificacin
Sensibilidad
Selectividad
Robustez
Criterios de Practicabilidad
Velocidad
Coste y disponibilidad de
equipo
Toxicidad de los reactivos
Habilidad del operador
Facilidad y comodidad
Seguridad en el laboratorio
Coste por muestra
Caractersticas de Funcionamiento del mtodo analtico
EXACTITUD
Grado de coincidencia entre el valor
obtenido de la magnitud medida y el valor real
de la misma. (medida del error sistemtico)
PRECISIN
Grado de concordancia mutua entre los
datos que se han obtenido de una misma
forma. (medida del error aleatorio)
EXACTITUD / PRECISIN
PRECISO
INEXACTO
EXACTO
IMPRECISO
INEXACTO
INEXACTO
SESGADO
INSESGADO
(Grado de aproximacin entre los resultados)
- Repetibilidad
- Precisin intermedia
+ Variacin interda, por instrumentos, por analistas etc.
- Reproducibilidad
+ Ensayos interlaboratorio
Se expresar a travs de la desviacin estndar, coeficiente de
variacin y el intervalo de confianza para cada caso.
PRECISIN
+ Variacin de los resultados dentro del curso del mismo
anlisis
LINEALIDAD
INTERVALO DE LINEALIDAD
Es la capacidad del mtodo para establecer una
relacin directamente (o matemticamente)
proporcional entre el resultado y la concentracin
del analito en la muestra.
y = mx+b . (S = mc + S
blanco
)
Se expresa en trminos de variacin de la
pendiente de la lnea obtenida por regresin
Es el intervalo de concentracin entre los niveles
de analito extremos (mayor y menor) que puede
utilizarse con precisin, exactitud y linealidad
Se expresa en unidades de concentracin
LMITE DE DETECCIN
a) Evaluacin visual (mtodos no instrumentales)
b) Evaluacin basada en la relacin Seal/Ruido (3:1)
c) Evaluacin basada en la desviacin estndar de la
respuesta instrumental y la pendiente de la curva (m)
(DL= 3

/ m)
Es la mnima concentracin (o cantidad) de analito en
una muestra que puede ser detectada, pero no
necesariamente cuantificada, bajo las condiciones
experimentales establecidas.
La desviacin estndar del blanco
La determinacin de se corresponde con:
LMITE DE CUANTIFICACIN
a) Evaluacin visual (mtodos no instrumentales)
b) Evaluacin basada en la relacin Seal/Ruido (10:1)
c) Evaluacin basada en la desviacin estndar de la
respuesta instrumental y la pendiente de la curva (m)
(QL= 10

/ m)
La desviacin estndar del blanco
La determinacin de se corresponde con:
Es la mnima concentracin (o cantidad) de analito en
una muestra que puede ser determinado con aceptable
exactitud y precisin, bajo las condiciones experimentales
establecidas.
LINEALIDAD E INTERVALO DE LINEALIDAD
Intervalo lineal
Seal S
Concentracion C
Limite de
cuantiIicacion
S = mc + S
Blanco
m
m =
S
Blanco
Capacidad del instrumento para discriminar
pequeas diferencias en la concentracin del
analito.
Dos factores limitan la sensibilidad
- La pendiente de la curva de calibrado
- La precisin
a) Sensibilidad de Calibracin (IUPAC)
S = mC + S
Blanco
,
SENSIBILIDAD
C
S S
m
Blanco

=
Seales
m

=
b) Sensibilidad analtica
SELECTIVIDAD
Expresa la capacidad del mtodo analtico para medir
con exactitud y de modo especfico el analito en
presencia de otros componentes que pueden formar
parte de la matriz.
Se mide comparando los resultados de un anlisis de
muestras que contienen impurezas, productos de
degradacin o ingredientes placebo, con los resultados
de la misma muestra sin los componentes anteriores
ROBUSTEZ
Expresa la capacidad del mtodo para permanecer
invariable a pequeas modificaciones ambientales o de
procedimiento.
Se mide mediante la reproducibilidad
ROBUSTEZ
(Influencia de las variaciones ambientales o de procedimiento)
- Estabilidad de las disoluciones
- Tiempos de extraccin
- En HPLC:
+ Variaciones de pH de la fase mvil
+ Variaciones de composicin de la fase mvil
+ Diferentes columnas (lotes y suministradores)
+ Temperatura y caudal
- En GC
+ Diferentes columnas (lotes y suministradores)
+ Temperatura y caudal
VALIDACIN
Se define la validacin analtica como el trabajo
experimental encaminado a obtener pruebas documentadas
de que un mtodo analtico proporciona consistentemente la
informacin requerida al uso al que se destina.
Los criterios de validacin se deben relacionar con las
especificaciones a examinar, por lo que el mtodo deber
poseer la caracterstica bsica necesaria para discriminar
de forma segura la informacin analtica de inters.
La ICH (International Conference on Harmonization
http://www.ich.org) (1996) establece las caractersticas que
deben considerarse en la validacin de un mtodo analtico
para evaluar la calidad de los medicamentos.
Criterios para juzgar la calidad de los medicamentos
Pruebas de Identidad
-Tienen por objeto demostrar que la muestra examinada se
corresponde con la sustancia que debe ser.
Pruebas de Pureza
-Lmite de las concentraciones aceptables de impurezas de los
medicamentos.
Pruebas de Actividad
-Lmites admitidos de concentracin del ingrediente o
ingredientes activos en el medicamento o materia prima.
Pruebas de Efecto o Accin
-Garanta de que la forma farmacutica actuar del modo
previsto.
CALIBRACIN
La calibracin consiste en comparar el valor de la magnitud
medida (o representada) por el sistema de medicin, con los
los valores que, bajo condiciones estrictamente definidas,
producen patrones conocidos o materiales de referencia.
- Calibracin directa.
La magnitud medida coincide con la del patrn
- Calibracin indirecta.
La respuesta del instrumento no coincide con
la magnitud medida
- Mtodos de calibracin
+ Curva de calibrado
+ Adicin estndar
+ Patrn interno
Contenido:
Definiciones
Tipos de defectos
Crtico
Principal
Secundario
Niveles de Inspeccin
Normal
Rigurosa
Reducida
Clases de Muestreo
Simple
Doble
Mltiple
Planes de Muestreo
Curvas OC
Mtodo de la curva de calibrado
Blanco C1 C2 C3 C4
MEDIDA EN EL INSTRUMENTO
Seal
Concentracion
Blanco C1 C2 C3 C4
Concentracion de
la muestra
interpolacion
Seal de muestra
Mtodo de la adicin estndar
Muestra Muestra Muestra Muestra Muestra
Blanco C1 C2 C3 C4
Analito
Patrn
MEDIDA EN EL INSTRUMENTO
Concentracion del Patron
Blanco
C1 C2 C3 C4
Seal
CMuestra
Blanco Pat. Int. Pat. Int. Pat. Int. Pat. Int.
Blanco
Pat. Anal
C1
Pat. Anal
C2
Pat. Anal
C3
Pat. Anal
C4
Mtodo del Patrn interno
Patrn
interno
Patrn
Del Analito
MEDIDA EN EL INSTRUMENTO
De dos seales diferentes
Interno Patron
Analito del Patron
Seal
Seal
Mtodo del Patrn interno
Blanco
Concentracion del patron del Analito
C1 C2 C3 C4
Concentracion de
la muestra
interpolacion
Relacion de seales
de la muestra con el
P. interno aadido
GRFICAS DE CONTROL DE CALIDAD
Grficas de control tipo Shewhart
(De valores individuales, Xi)
Grficas de Rango o Recorrido (R)
Grficas de control de datos acumulados
(Grficas de Cusum)
GRFICAS DE CONTROL Xi SHEWHART
VALOR
DIANA
1 2 3 4 5 6 7 8
CONTROLES
Invalidacin (probabilidad de azar = 1%)
+3

X
Alarma (probabilidad de azar = 5%)
+2

X
Invalidacin (probabilidad de azar = 1%)
-3

X
Alarma (probabilidad de azar = 5%)
-2

X
Indicadores para interpretar graficas X
El procedimiento de medida estar fuera de control
cuando:
1) Uno o ms puntos superen los niveles de
invalidacin (>3 de X)
2) Dos o ms puntos consecutivos por encima del
lmite de alarma (>2 de X)
3) Una serie de 7 o ms puntos por arriba o por
abajo de la media X
4) Una tendencia de incremento o disminucin
GRFICAS DE R (RECORRIDO)
Invalidacin (probabilidad de azar = 1%)
VALOR
RECORRIDO
MEDIO
+2,5 R
+3,3 R
Alarma (probabilidad de azar = 5%)
1 2 3 4 5 6 7 8
CONTROLES
CUSUM (V-VALOR DIANA) VALOR (V) CONTROL N
-23 -5 75 15
-18 -4 76 14
-14 -4 76 13
-10 -3 77 12
-7 -4 76 11
-3 0 80 10
-3 -2 78 9
-1 -1 79 8
0 0 80 7
0 -1 79 6
+1 +2 82 5
-1 -2 78 4
+1 0 80 3
+1 -1 79 2
+2 +2 82 1
Tabla del grfico de CUSUM (Valor diana 80)
5 10 15
C
U
S
U
M
30
20
10
0
-10
-20
-30
ALARMA
ALARMA
INVALIDACIN
INVALIDACIN
GRFICAS DE CUSUM
CUSUM
SHEWHART
Calidad del Control
Documentacion
Deberan existir procedimientos normalizados de trabajo
(PNTs) escritos sobre las especiIicaciones de cada instrumento en el
que se reIleje la veriIicacion de su Iuncionamiento, asi como el
calendario de los chequeos correspondientes.
Dichos procedimientos deberan estar Iirmados por el jeIe del
departamento y aprobados el JeIe de la unidad de garantia de calidad
De especial interes en el Control de calidad es lo relativo a la
integridad de los Datos Primarios (raw data)
Homologacion, CertiIicacion y Acreditacion de laboratorios de analisis
Normas NCF, BPL, UNE-EN ISO 17025 etc.