Universidad del Bo-Bo Facultad de Ciencias-Departamento de Qumica

Informe de Laboratorio Espectrofotometra

Asignatura: Procesos Biolgicos Alumnos: Rodrigo Muoz Christopher Pulido Profesora: Dra. Claudia Oviedo Ayudante: Jorge Mendoza Fecha de entrega: 08/06/2012

Resumen
En este Laboratorio se analizara la tcnica Espectrofotometra, ms que nada la parte prctica. Esto llevara a aplicar los concepto de espectrofotometra, especialmente la Ley de Beer, por lo consiguiente se analizara la absorbancia para ciertas molaridades de sulfato de cobre lo que conlleva ver el comportamiento la Ley de Beer. Esta informacin ser til para determinar la molaridad de una muestra problema, lo cual es lo que convoca el laboratorio y con esto se ver la importancia de la espectrofotometra.

Introduccin
Entendiendo la importancia de la espectrofotometra y las tcnicas que se le asocian, especialmente la Ley de Beer, se proceder hacer un analices de las de la absorbancia para 5 muestra de las cuales a 4 se les conocer la molaridad, y la otra se llamara muestra problema. Sabiendo que la ley de Beer tiene un comportamiento lineal y es de la forma

A = b C donde: A = absorbancia, = coeficiente de absorcin molar (L/mol*cm),

C = concentracin de la sustancia que absorbe luz (mol/L) b = longitud de paso de la luz a travs de la sustancia que absorbe (cm) Con esto se podr determinar las implicancias de dicha ecuacin. La forma en que se trabajara, ser a travs de la toma de datos, con los instrumentos de medicin de absorcin de luz (espectrgrafo), y los que instrumentos que leen esta informacin (interface). Una vez obtenido los datos, se podr tabular y posteriormente graficar, y al comprobar el comportamiento de la ley de Beer, se podr determinar la ecuacin de la recta de dicha grfica y con esto hacer los clculos respectivos para as determinar la molaridad de la muestra problema. Por ltimo ya entendiendo el comportamiento de la ley de Beer, se analizara los factores que hacen que la toma de datos y el trabajo con ellos, no tenga la efectividad del cien por ciento.

Materiales y Mtodos
Materiales
Tubos de Ensayo Muestra problema n10 CuSO4 -> 0.6 M, 0.4 M, 0.3 M, 0.2M Cubetas policarbonato ( 1(cm), paso) Colormetro Pc con Data Studio Agua des ionizada

Mtodos
Teniendo 5 muestra de sulfato de cobre, de las cuales 4 de ellas sern conocidas y una ser problema o por determinar, (muestras conocidas: CuSO4 -> 0.6 M, 0.4 M, 0.3 M, 0.2M), se proceder a realizar las mediciones de absorbancia, donde se encontrara ya dispuesto las 5 cubetas de policarbonato con cada solucin, adems se tendr una cubeta con agua des ionizada. Antes de cualquier medicin a realizar, se proceder a calibrar el colormetro con el fin de que este imita luz naranja (630 nm) sobre la muestra, esto se deber hacer con una cubeta con agua des ionizada y as establecer el punto cero del grafico a determinar, adems se proceder a programar el Data Studio para que este arroje los datos de la absorbancia para cada una de las muestras, incluyendo la muestra problema. Todas las tomas de datos se debern hacer con el cuidado del que el colormetro no apunte en el lado transparente de la cubeta, adems se deber tener precaucin de no tocar dicho lado, para que no se interfiera con la toma de datos.

Resultados
Tabla de datos
Concentracin (M) 0 0,2 0,3 0,4 0,6 Absorbancia 0 0,16 0,29 0,41 0,67

Segn la tabla se pude deducir que la concentracin es directamente proporcional a la absorbancia.

Grafico abundancia v/s concentracin

Absorbancia v/s Concentracin

0.8 0.7 0.6 Absorbancia 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0 0 -0.1 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 Concentarcin (M) y = 1.13x - 0.033 R = 0.9879

De la grfica se demuestra un comportamiento lineal asociado la proporcionalidad concentracin, abundancia. Los errores de la linealidad se deben ms que nada a factores como limpieza, y mal manejo de instrumentos.

Concentracin mediante interpolacin de la muestra problema

La abundancia de la muestra (0,41) est contenido en el intervalo 0,41-0,67 entonces se tiene:

Concentracin de la muestra problema mediante la ecuacin de la recta

La Ecuacin es: Dnde : Se tiene que : ; ; ; (ley de beer)

; (remplazando)

Concentracin de la muestra problema en ppm. (PM CuSO4= 159,546 g/mol)

Transformar en gramos:

Entonces queda expresado:

Discusin de resultados
En este laboratorio dadas las circunstancias de una buena toma de datos y una adecuada manipulacin de los instrumentos, se logr determinar la molaridad de una forma muy exacta, donde el colormetro arrojo un valor muy cerrado, y utilizando la ecuacin proveniente la recta justificada, tambin se logr buenos resultados, pero no siempre pude ocurrir esto ya que las variables a tener en consideracin son muchas, ejemplo de estos son: cubetas sucias, que el colormetro apunte en el sector opaco de la cubetas, disoluciones mal confeccionadas, entre otros.

Conclusin
De este laboratorio se logr concluir la importancia de la espectrometra y uno de sus derivados como es la Ley de Beer. Donde se logo apreciar la eficacia de esta, y entender cmo se trabaja con ella, adems comprender las variables que estn incluidas en esta tcnica, entendiendo que para determinar dichas variables hay que tener en consideracin varios factores en el manejo de los instrumento, para as lograr una correcta toma de datos ya que estos siempre se ven influenciados por este tipo de errores. La importancia de la fotometra que se logr apreciar en este laboratorio, fue que esta es muy transcendente para la determinacin de concentraciones desconocidas, utilizando su espectro de absorcin caracterstico en las regiones UV, IR y Vis, del espectro. Esto se pudo apreciar a travs de la tcnica de absorbancia (A = b C) o Ley de Beer, donde; para soluciones diluidas, la cantidad de luz absorbida a una longitud de onda especfica es directamente proporcional a la concentracin de la solucin, sabiendo que para este laboratorio la luz especifica fue de 630 nm, o luz naranja.

Referencias
Gua de Espectrofotometra en adecca