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DEUXIEME WORKSHOP DE BIOTECHNOLOGIE EN SANTE HUMAINE
MINISTERE DE LENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE
UNIVERSITE DES SCIENCES ET DE LA TECHNOLOGIE HOUARI BOUMEDIENE
FACULTE DES SCIENCES BIOLOGIQUES
LABORATOIRE DE BIOLOGIE CELLULAIRE ET MOLECULAIRE EN PARTENARIAT AVEC LANDRS
DEUXIEME WORKSHOP
BIOTECHNOLOGIE EN SANTE HUMAINE
08 - 10 novembre 2009
SALLE POLYVALENTE DE LUSTHB
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Les Biotechnologies : Innovations technologiques utilisant les Sciences du Vivant, sont devenues actuellement un carrefour incontournable lchelle internationale reliant les disciplines de la biologie cellulaire et molculaire aux nouvelles technologies. Technologies en plein essor, elles regroupent de nombreux domaines dactivits dont celui de la sant humaine qui nous runit aujourdhui. Utilisant les concepts fondamentaux de la biologie (biochimie, microbiologie, gntique, pharmacologie, biophysique, biologie molculaire, ingnierie et bioinformatique) et les innovations technologiques manant de ces disciplines, les biotechnologies permettent de:
1 - Prparer, tester et produire des bio-mdicaments : vaccins, protines recombinantes, anticorps monoclonaux, thrapie cellulaire et gnique, cytokines, anti-cytokines, facteurs de croissance. 2 Pronostiquer (bio-marqueurs), diagnostiquer et comprendre les mcanismes des pathognses.
Science en plein essor, les Biotechnologies constituent un enjeu stratgique majeur dans lconomie.
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COMITES
COMITE SCIENTIFIQUE
Professeur Laraba-Djebari Fatima Professeur Bakour Rabah Professeur Djerdjouri Bahia Professeur Touil-Boukoffa Chafia Professeur Hacne Hocine Professeur Benazzoug Yasmina Professeur Benlatrche Chrifa Professeur Satta Dalila Professeur Mechakra Acha Professeur Meraihi Zahia Professeur Karam Nouredine Professeur Benboubtra Mohamed Professeur Mati Abderahmane DR Hammoudi-Triki Djelila DR Mohammedi-ladjali Kefia DR Ouartsi Zohra DR Fazouane Fethia DR Belkhodja Razika DR Halouane Fatma DR Oussedik-Oumehdi Habiba DR Messai Yamina DR Hamadouche-Benhassine Traki DR Otmani-Marabout Kheira DR Nateche-Mtiaz Farida Prsidente-USTHB USTHB USTHB USTHB USTHB USTHB Univ Mentouri Univ Mentouri Univ Mentouri Univ Mentouri USTO Univ Ferhat Abbas Stif Univ M M Tizi ouzou USTHB USTHB UNIV-Annaba UMBB Boumerdes UMBB Boumerdes UMBB Boumerdes USTHB USTHB USTHB USTHB USTHB
COMITE ORGANISATION
DR Adi-Bessalem Sonia DR Benmalek Yamina DR Mezioug Dalila DR Izem Malika DR Belguendouz Houda DR Amri Manel DR Mendil Amina DR Bounaama Abdelkader DR Boussag-Abib Lila DR Abderahmani Ahmed DR Sami-Merah Sassia DR Messaoudne Djamel DR Hadj-Rabia Yamina DR Saci Amel
SECRETARIAT
DR Belkhelfa Mourad Mr. Bouanane Ouramdane DR Rafa Hayet DR Chelghoum Hayet
www.usthb.dz Contact: lbcm.worskhop@gmail.com
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SPONSORS
Remerciements
Tous nos remerciements vont ceux qui ont accept dapporter leur soutien financier lorganisation de ce Workshop
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PROGRAMME
Dimanche 08 Novembre 2009
9 H 00 9 H 45 Allocutions douverture : Monsieur le Recteur et Mme la Doyenne de la FSB Prsentation du Laboratoire de Biologie Cellulaire et Molculaire
PREMIERE SEANCE Confrences thmatiques

Modrateurs : Chentouf-Mentouri Z., Bakour R., Laraba-Djebari F.
10 H 00 Application de la Nanotechnologie dans les traitements de larthrite rhumatode. Dr Mohamed Benderdour : Dpartement de Pharmacologie, Universit de Mdecine, Montral, Canada. Anticorps recombinant: Du gne au mdicament anti-thrombotique. Pr Philippe Billiald: Facult de Pharmacie, Universit Paris-Sud et Musum National dHistoire Naturelle, Paris Pause Caf Transcriptional effects of delivery systems: The effect of dendrimer architecture on EGFR mRNA expression and on siRNA-mediated gene silencing activity. Pr Mustapha Benboubetra. University of Stif, Algeria.
10 H 30
11 H 00 11 H 30
Session :
12 H 00
DEUXIEME SEANCE Diagnostic- Pronostic- Biotechnologie.
Modrateurs : Benboubetra M., Hacene H., Touil-Boukoffa C.

Optimisation dun Test dImmuno-Diagnostic dans la Prise en Charge des patients envenims. Hammoudi-Triki, D., Mendil, A., Adi-Bessalem, S., Sami-Merah, S.et Laraba-Djebari, F, LBCM, FSBUSTHB. Gntique des affections neuromusculaires frquentes en Algrie. Analyse molculaire de plus dun millier de familles. Benhassine T., Hamadouche, T., Tazir,M, Chaouch M., Makri S., Grid D, Lvy N., De Sandre-Giovannoli A., Delague V., LeGuern E., Brice A., Koenig M., Moreira M., Vallat J.M. LBCM, FSB-USTHB. Diagnostic molculaire de lhmoglobine H en Algrie. H. Mesbah-Amroun , F. Rouabhi , R. Ducrocq , J. Elion. LBCM, FSB-USTHB. BRCA1 and BRCA2 mutation screening in Algerian patients with Hereditary Breast Cancer. Cherbal., F. et collaborateurs, LBCM, FSB, USTHB. Identification des gnes de prdisposition aux cancers colorectaux hrditaires non polyposiques, HNPCC (Syndrome de Lynch) et mise en vidence du statut MSI (MicroSatellite Instability). Berkane K.et Bouzid, K.FSB-USTHB. Etude de quelques biomarqueurs du syndrome nphrotique. Benhamdi A., Mechakra A., Cheriti
12 H 10
12 H 20 12 H 40 12 H 50
13 H 00
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N.. Constantine.
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13 H 10
Association entre-le polymorphisme du gne de lApolipoprteine E, le profil lipidique srique et la maladie dAlzheimer. Amari H., Ouldjaoui A., Sifi K., Sifi Y. Kohil K., Hamri A et Abadi. Laboratoire de gntique et biologie molculaire, CHU et Universit Mentouri Constantine Rle des cytokines et la NO-synthase dans les dsordres immunitaires associs de la maladie dAlzheimer: Impact sur limmunosurveillance des patients. Belkhelfa. M, Medjeber O.,Rafa H., Bouaziz S., Djeraba Z., Lammali A, Abdelouahab K, Abada-Bendib M., Touil-Boukoffa C. LBCM, FSB-USTHB. Mise en vidence des biomarqueurs du diabte dans la salive par les techniques dlectrophorse. Bellil Ines & Khelifi Douadi. Laboratoire de Gntique Biochimie et Biotechnologie Vgtale, Facult des Sciences de la Nature et de la Vie, Universit Mentouri Constantine
13H 20
13 H 30
13 H 40
Dbat et Pause Djeuner
TROISIEME SEANCE Session : Biothrapie

Modrateurs : Billiad P., Benlatrche C., Benderdour M.
14 H 40 14 H 50 Les Biomolcules de Venins : Outils de Diagnostic et de Thrapie dans lHmostase Oussedik-Oumehdi H., Cherifi F., Saci A et Laraba-Djebari F., LBCM, FSB-USTHB. Perspectives Immunothrapeutiques et Vaccinales dans les envenimations scorpioniques. AdiBessalem S., Boussag-Abib L., Mendil A, Hammoudi-Triki D, Sami-Merah S., Billiald, P., et LarabaDjebari F, LBCM, FSB-USTHB. Implication de la membrane lamellaire dans les stratgies dchappement parasitaire et la pathogense au cours de lchinococcose humaine : Rle anti-hydatique des Voies : IFN-gamma/NOSynthase2. Amri M., Mezioug D., Bouaziz S., Abdi Zaki-S. e Touil-Boukoffa C, LBCM, FSB-USTHB. Implication de lIL-17, de lIL-6, du TNF- et de lIL-10 dans les mcanismes de limmunomodulation au cours des maladies inflammatoires chroniques de lintestin : Action potentielle thrapeutique de lIL-10. H. Rafa, H. Saoula, A. Boutaleb F, Aftiss S., Nakmouche M.et TouilBoukoffa C., LBCM, FSB-USTHB. Les activits anti-radicalaires dune plante mdicinale locale fraxinus angustifolia (le frne). Laib Y. et Atmani Djebbar, Bejaa. Les lments mobiles de type mariner issus des organismes des sources hydrothermales ocaniques : tude et perspectives dutilisation en thrapie gnique. Toumi N., Renault S., Casse N., Pradier E., Bigot Y. et Laulier M., Tebessa. Apport des thrapies molculaires cibles dans la prise en charge des cancers colorectaux mtastiques. Exprience Algrienne. Berkane K, Oukkal, Mahfouf M.H., Terki N., Baba Ahmed R et Bouzid K, FSB- USTHB et CPMC, Alger. Dbat et Pause caf
15 H 00
15 H 10
15 H 20 15 H 30
15 H 40
15 H 50-16 H00
QUATRIEME SEANCE Session : Posters (P1-P15)

Modrateurs : Amroun-Mesbah H., Ait Lounis A., Hammoudi-Triki D.
16 H 10 -17 H 30 POSTERS (Diagnostic- Pronostic-Biotechnologie/Biothrapie)
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Lundi 09 Novembre 2009 CINQUIEME SEANCE Session : Biochimie - Biotechnologie.

Modrateurs : Ammar-Khodja, Benhassine T., Benazoug Y., Hammoudi-Triki D.
9 H 00 9 H 10 Lhmoglobine source intarissable de connaissances. Boudrahem-Addour N. LBCM, FSB-USTHB. Effet de lacide niflumique sur la physiologie mitochondriale et la prolifration des cellules ht-29. Amrouche-Mekkioui I. et Djerdjouri B., LBCM, FSB-USTHB. Colite ulcereuse au dextran sulfate - modulation du stress oxydatif par un anti-inflammatoire non sterodien, lindometacine. Bounaama A. et Djerdjouri B., LBCM, FSB-USTHB. Antidiabetic and antioxidant effect of aloin in streptozotocin-induced diabetic rats. Kandouli C., Khelifi-Touhami F., Benlatreche C., Leulmi Z, Constantine. Variation de lHomocystine et du Gnotype C677T de la Mthylnettrahydrofolate Rductase chez lHypertendu. Otmane A., Makhelouf M., Bouamrane F., Zenati A, CHU de Bab El Oued. Genetic Polymorphisms of N-Acetyltransfrase 2 and Cardiovascular Disease Khelil M, Djerdjouri B. et Tayebi B., LBCM, FSB-USTHB. Description des Chromosomes de lOutarde houbara Chlamydotis undulata undulata et Cartographie Chromosomique Compare: Premire Etape de lAnalyse du Gnome. Mahiddine L., Belhamra M., Boucekkine W., Ladjali-Mohammedi K. LBCM, FSB-USTHB, Centre Cyngtique de Zralda, Centre de Recherche Scientifique et Technique sur les Rgions Arides, Universit de Biskra, Direction Gnrale des Forts Dbat et Pause Caf
9 H 20
9 H 30
9 H 40 9 H 50
10 H 10
10 H 20
Session
SIXIEME SEANCE Microbiologie-Biotechnologie
Modrateurs : Hacene H., Messai Y., Oussedik-Oumehdi H.

10 H 25 Etude molculaire de la rsistance dEnterobacter sp aux cphalosporines large spectre et aux quinolones dans les hpitaux dAlger. Iabadene H., Messai Y., Allouache S., Verdet C., Arlet G et Bakour R., LBCM, FSB-USTHB. Gravit des mycobactrioses chez les patients immunodprims. Nateche F, Lafoz C, Baraka S, Samper S et Khaled S, LBCM, FSB-USTHB. Mise en vidence et essai de Caractrisation de molcules antifongique chez Bacillus thuringiensis. Abderrahmani A., Nateche-Metiaz F., Hacene H. et Jacques P., LBCM, FSB-USTHB. Etude phnotypique et gnotypique de la virulence de souches hospitalires de Klebsiella pneumoniae. Aissani R., Messai Y., Iabadene H., Alouache S., Arlet G.et Bakour R., LBCM, FSB-USTHB. Dbat FSB-USTHB Page 7
10 H 35 10 H 35 10 H 45 11 H 55 LBCM
SEPTIEME SEANCE Session : Posters (P16 P44)

Modrateurs : Benmalek Y., Natche F., Oussedik-Oumehdi H.
12 H 15 13 H 00 POSTERS (Biochimie-Biotechnologie /Microbiologie-Biotechnologie) Pause Djeuner
HUITIEME SEANCE Session : Microbiologie-Biotechnologie (suite)

Modrateurs : Ladjali-Mohammedi K., Nateche F., Othmani K.
14 H 00 14 H 10 Production desters dalkyle dacides gras par bioconversion microbienne dune huile vgtale. Z. Hachaichi-Sadouk, A. Tazerouti, H. Hacene, LBCM-FSB, USTHB. Profil de rsistance aux mtaux lourds chez Chryseobacterium solincola sp, nov. Benmalek Y, Nateche-Metiaz F, Hachani B, Hambli A, Fardeau M-L et Hacene H. LBCM, FSB-USTHB. Influence des apports anthropiques sur lvolution gntique des bactries en milieu marin : cas de la rsistance aux antibiotiques dans les eaux portuaires dAlger. Alouache S., Anssour L., Messai Y., Iabadene H. et Bakour R., LBCM, FSB-USTHB. Extraction et essai de caractrisation des substances antimicrobiennes produites par une souche dactinomycte halophile modre. Djinni I., Souagui S., Kecha M. et Benallaoua S, Bjaia. Dbat
14 H 20
14 H 30
14 H 40
NEUVIEME SEANCE Session: ATELIER

Modrateurs : Boudrahem N., Adi-Bessalem S., Aouf A.
15 H 00 Welcome to high definition genomics: Aouatef Ait- Lounis, Faculty of Biological sciences, USTHB, Algeria Introduction la bio-informatique : Mesbab-Amroun Hemida, LBCM, FSB-USTHB
TABLES RONDES
16 H 00- 16 H 30 Table ronde 1 Dbat autour des questions de lheure, les progrs et les perspectives des grands thmes de la Biologie Cellulaire et Molculaire et leurs implications dans les Biotechnologies en rapport avec la sant Humaine. 16 H 30 - 17 H 00 Table Ronde 2 Rflexion autour de la cration dune Socit Algrienne de Biochimie-Immunologie
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RESUMES DES COMMUNICATIONS
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CONFERENCES PLENIERES
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Application de la Nanotechnologie dans les traitements de larthrite rhumatode
Dr Mohamed BENDERDOUR
Dpartement de Pharmacologie, Universit de Mdecine, Montral, Canada.
ABSTRACT
The musculoskeletal disorders such as rheumatoid arthritis (RA) and osteoarthritis (OA) are leading worldwide causes of long-term function and work disability in both developed and developing countries. It exits conventional RA treatment strategies. However, new forms of therapy such as biological therapy and gene therapy have been shown initial promise. Biological therapy of RA is specially engineered medication which blocks the effects of proinflammatory factors such as tumour necrosis factor-alpha (TNF) and interleukin 1 beta (IL-1). One example of RA biological therapy is by using recombinant interleukin-1 receptor antagonist (IL-1Ra). But biological treatments are costly, inconvenient, and only partially effective in many patients. Gene therapy offers a solution to controlled, targeted and specific delivery of genetic material (DNA and RNA) to targeted cells, leading to treatments that are less invasive, more effective and less expensive than existing modalities. Gene therapy with IL-1Ra which was effective in reducing joint destruction in experimental RA models and clinical trials is an alternative strategy in arthritis. Additional approaches include the use of siRNA to knock down pro inflammatory factor-TNF. The gene transfer can occur through two delivery systems: viral mediated or non-viral vectors. Viruses are obvious first choices as gene delivery vehicles because they transfer their own genetic material and therapeutic genes very efficiently to the cells they infect. Unfortunately, certain viral vectors (for example, adenoviruses) can elicit a robust cellular immune response against viral and some transgenic proteins. Non-viral gene transfer systems offer several potential advantages over virus vectors. They are non-infectious, relatively non immunogenic, have low acute toxicity, can accommodate large DNA plasmids or RNA, and may be produced on a large scale. The main drawback with non-viral vector as a gene carrier is its typically low transfection efficiency (e.g. chitosan) and high toxicity (e.g. polyethylenimine [PEI]). One of our strategies to improve transfection rate is to take advantage of the passive diffusion of small size nanoparticles through the nuclear pore. Another strategy for improving transfection efficiency is to take advantage of the mechanism of folate uptake by cells to promote targeting and internalization.
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Anticorps recombinant: Du gne au mdicament anti-thrombotique
Philippe BILLIALD1, Julien MUZARD1,2, Muhammad ZAHID1, Maxime BOUABDELLI2, Martine JANDROT-PERRUS2
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Universit Paris-Sud 11, Facult de Pharmacie et Musum national d'Histoire naturelle, Paris (F) INSERM U698, Hpital Bichat, Paris (F)
RESUME Le contact des plaquettes avec la surface d'une lsion vasculaire et leur agrgation est un processus essentiel pour la formation d'un thrombus stable dans des conditions de flux artriel, en particulier dans les artres stnoses alors que dans les conditions de flux veineux, la coagulation est plus importante. Ce processus est complexe et, mal contrl, il peut conduire la formation d'un thrombus occlusif l'origine d'accidents ischmiques aigus, infarctus et accidents vasculaires crbraux. L'association thrombose-remodelage vasculaire est galement responsable de lsions ischmiques chroniques: angor, ischmie des membres infrieurs. Les drogues antiplaquettaires classiquement utilises agissent sur des tapes tardives de la formation du thrombus en induisant parfois des effets secondaires graves de type saignement et dpltion plaquettaire. Dans ce contexte, il serait intressant de disposer de molcules antithrombotiques agissant sur une tape prcoce du processus. Ainsi, la glycoprotine plaquettaire VI (GPVI), implique dans l'adhsion des plaquettes sanguines la matrice extracellulaire lse et leur activation pourrait tre une cible de choix. Rcemment, nous avons dvelopp un fragment d'anticorps recombinant de haute affinit pour GPVI. Ce fragment d'anticorps murin (mscFv) inhibe la liaison de GPVI au collagne ainsi que l'agrgation des plaquettes sanguines induite par le collagne la fois dans des conditions statiques et de flux artriel. Ce scFv a ensuite t humanis pour en rduire l'immunognicit et plusieurs constructions ont t values. L'une d'entre elles conserve intactes les proprits fonctionnelles de l'anticorps parentale. In vitro, elle inhibe l'activation des plaquettes et leur agrgation induite par le collagne. La mthode employe est simple, efficace et transfrable d'autres anticorps potentiel thrapeutique.
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TRANSCRIPTIONAL EFFECTS OF DELIVERY SYSTEMS: THE EFFECT OF DENDRIMER ARCHITECTURE ON EGFR mRNA EXPRESSION AND ON siRNA-MEDIATED GENE SILENCING ACTIVITY
Mustapha BENBOUBETRA1,2 Andrew J. HOLLINS2, Yadi OMIDI2,3 and Saghir AKHTAR2,4

1 2
Laboratory of Applied Biochemistry, Faculty of Sciences, University of Stif, Algeria. Centre for Genome-based Therapeutics, Welsh School of Pharmacy, Cardiff University, Cardiff, UK; 3 Department of Pharmaceutics, Tabriz University of Medical Sciences, Tabriz, Iran 4 Department of Pharmacology and Toxicology, Faculty of Medicine, Kuwait University, Safat, Kuwait
ABSTRACT RNA interference (RNAi) is an evolutionary conserved process for the regulation of gene expression. In mammalian cells, RNAi-induced via short (21-23nt) duplexes of RNA, termed small interfering RNA (siRNA), can elicit highly specific RNAi-mediated gene silencing providing the antisense strand of the duplex is incorporated into a multi-protein RNA-induced silencing complex complex (RISC). Subsequent hybridization with the targeted mRNA followed by its cleavage by argonaute-2, the endonuclease present in RISC, leads to inhibition of target gene expression in vitro and in vivo. RNAi technology is being widely used in studies of gene function, drug target validation as well as being explored for potential therapeutic use in the clinic. Synthetic siRNA duplexes are polyanionic macromolecules that do not readily enter cells and typically require the use of a delivery vector for effective gene silencing in cells. Choice of delivery systems is usually made on its ability to enhance cellular uptake of siRNA. Here, we show that separate from their effects on cell uptake, delivery systems can also exert changes in target gene expression that can be exploited to significantly enhance siRNA potency. Here, we show that separate from their effects on cell uptake,
delivery systems can also exert changes in target gene.
Corresponding author: E-mail: benboubetra@yahoo.co.uk
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COMMUNICATIONS ORALES
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SESSION: DIAGNOSTIC-PRONOSTIC-BIOTECHNOLOGE
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Optimisation dun Test dImmuno-Diagnostic dans la Prise en Charge des patients envenims
Djelila HAMMOUDI-TRIKI, Amina MENDIL, Sonia ADI-BESSALEM, Sassia SAMI-MERAH, Fatima LARABA-DJEBARI
Laboratoire de Biologie Cellulaire et Molculaire, Facult des Sciences Biologiques, Universit des Sciences et de la Technologie Houari Boumdienne USTHB, Bab Ezzouar, Alger, Algrie et Laboratoire de Recherche et de Dveloppement sur les Venins, Institut Pasteur dAlgrie, Alger, Algrie. E-mail : flaraba@hotmail.com - Fax: 00213 21 91 72 21
RESUME Lenvenimation scorpionique est une pathologie multifactorielle qui ncessite une prise en charge rapide des personnes envenimes. La mise au point dun test dimmunodiagnostic spcifique de type ELISA sandwich permet 1) de doser le venin dans les srums de patients envenims, 2) dvaluer une corrlation avec la gravit de lenvenimation et 3) dobserver lvolution de la concentration du venin. Dans ce contexte, des anticorps sous forme de fragments F(ab)2 spcifiques la fraction toxique du venin de scorpion sont purifis par immunoaffinit et utiliss comme un marqueur de diagnostic dans les liquides biologiques des patients. Un test ELISA de type sandwich, fiable, reproductible et sensible a t mis au point au laboratoire pour le dosage des composants toxiques du venin dans les fluides biologiques. Une tude rtrospective portant sur lanalyse clinique et informative de 182 dossiers de patients avec collecte de leurs chantillons sriques a permis de classer les patients en deux grades cliniques: un grade mineur (grade I) et un grade modr (grade II). La dtermination des concentrations sriques du venin laide de ce test a permis dtablir une corrlation troite entre ces concentrations et les grades cliniques dfinis selon les symptmes observs. Les patients prsentant un taux lev de venin srique, sont les plus svrement affects. La mise en place de ce test au chevet du patient devrait tre excute dans les plus brefs dlais car cette pathologie accidentelle est une urgence mdicale. La validation dun test ELISA rapide pourrait tre une alternative innovante pour une prise en charge rapide. Des mises au point de ce test sont entreprises par notre quipe afin de le rendre le plus rapide possible afin de permettre une utilisation plus rationnelle des thrapeutiques et moins empirique. Mots cls : Immuno-Diagnostic, Envenimation, Venin, Anticorps, ELISA, Gradation, thrapie.
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Gntique des affections neuromusculaires frquentes en Algrie. Analyse molculaire de plus dun millier de familles.
Benhassine, T.1, Hamadouche, T.2, Tazir, M.3, Chaouch, M.4, Makri, S.5, Grid, D.6, Lvy, N.7, De SandreGiovannoli, A.7, Delague, V.7, LeGuern, E.8, Brice, A.8, Koenig, M.9, Moreira, M.9, Vallat, J.M.10
1
Laboratoire de Biologie Cellulaire et Molculaire, F.S.B., U.S.T.H.B., Alger, 2 Laboratoire de Biologie Molculaire, F.S., U.M.B.B., Boumerdes, 3 Service de Neurologie, C.H.U. Alger Centre, Alger, 4 Service de Neurologie, C.H.U. Ben Aknoun, Alger, 5 Service de Neurologie, E.H.S. Ali At-Idir, Alger, 6 Gnthon, Paris, 7 Inserm u_910, Marseille, 8 Inserm u_679, Paris, 9 I.G.B.M.C., Strasbourg, 10 C.H.U.R. Limoges, Limoges
RESUME Dans le cadre de notre tude, prs dun millier de familles atteintes daffections neuromusculaires (atrophies musculaires spinales, neuropathies hrditaires sensitivo-motrices, dystrophies musculaires progressives, ataxies transmission rcessive, ...) ont t explores au plan molculaire, avec pour finalit linstauration et la mise en place dun diagnostic gntique prcis in situ en vue de rpondre aux attentes des cliniciens et des familles demandeuses. Le choix de ces maladies hrditaires tait motiv par leur forte prvalence dans notre pays, posant ainsi un grave problme de sant publique, mais galement en vue de collaborer leffort international visant clarifier la nosologie de ces affections. La collaboration multidisciplinaire engageant un rseau de gnticiens, cliniciens et anatomopathologistes a ainsi permis dengranger un nombre impressionnant de donnes, notamment lidentification de nouveaux loci/gnes responsables de nouvelles formes de ces affections neuromusculaires, mais galement la caractrisation de nouvelles altrations mutationnelles, parfois spcifiques notre pays, avec tout ce que cela entrane en terme dpidmiologie gntique et de corrlation phnotype-gnotype.
Les donnes obtenues ont ainsi permis de prendre une sorte de clich photographique des ces maladies hrditaires dans notre pays, seul garant de la mise en place dune approche de criblage molculaire rationnelle et adapte au contexte de consanguinit y prvalant, et ainsi de poser les jalons dune meilleure prise en charge de ces pathologies sur un plan gntique.
Mots-cls : Maladies neuromusculaires, Criblage molculaire, Diagnostic gntique
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DIAGNOSTIC MOLECULAIRE DE LHEMOGLOBINOSE H EN ALGERIE

Hamida Mesbah-Amroun ab; Fatiha Rouabhi c; Rolande Ducrocq d; Jacques Elion be
a
Universit des Sciences et de la Technologie Houari Boumedi ne (USTHB), Facult des Sciences Biologiques Alger, Algrie. Inserm U763, Hpital Robert Debr , Paris, France. cCentre de Transfusions Sanguine, Hpital Mustapha-Bacha, Algiers, Algeria. d AP-HP, Dpartement de Gntique, Hpital Robert Debr, Paris, France e Universit Paris Diderot - Paris 7, Facult de Mdecine, Paris, France
b
RESUME Lhmoglobinose H (Hbose H) est un syndrome thalassmique, prsentant une anmie hmolytique caractrise par la prsence dune hmoglobine anormale, lhmoglobine H (4). Le dterminisme gntique de l Hbose H est connu : cest une -thalassmie correspondant la dltion/inactivation de trois gnes par locus diplode (/). La caractrisation gnotypique a t ralise chez 19 individus rpartis sur 6 familles diffrentes, comportant chacune au moins un propositus (Hbose H). Dix mutations mditerranennes (dltionnelles et non dltionnelles) ont t recherches. Cette recherche cible base sur lutilisation des techniques de Southern, PCR (GAP-PCR, PCR-RFLP) et squenage direct, nous a permit didentifier 5 gnotypes Hbose H diffrents, preuve dune htrognit gntique. Nos rsultats montrent que lutilisation de la technique de PCR (GAP-PCR) couple lutilisation des enzymes de restriction (PCR-RFLP) comme stratgie de dpistage suffit pour identifier les mutations thalassmiques retrouves dans notre chantillon. Lintgration de ces techniques dans les stratgies de dpistage en milieu clinique contribuera sans aucun doute lamlioration du diagnostic des -thalassmies et des autres hmoglobinopathies associes (thalassmies, drpanocytose).
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BRCA1 and BRCA2 mutations screening in Algerian patients with Hereditary Breast Cancer
Farid Cherbal1 , Dounia Amet Errahmane Houamel1, Nadjet Salhi1, Anita Chikh1, Karima Ait Hami1, Lamia Talaoubrid, Karima Akli1, Ibtissem Derouiche1, Rabah Bakour1, Traki Benhassine1, Yamina Messai1, Ouardia Kareb1, Lydia Igoudjilene1, Saida Adane2, Kada Boualga3, Ahmed Cherifi4, Abdelaziz Melboucy5, Salim Bahayou6, Veronica Sciretta7, Chantal Souverain7, Bruno Pardo7, Gaelle Benais-Pont 7 and Philippe Maillet7.
1
Unit of Genetics, LMCB, FBS, University of Sciences and Technology Houari Boumediene, Algiers, Algeria, 2Central Hospital of Algiers, Algeria, 3Anti Cancer Center, Blida, Algeria, 4Senology Clinic, Ouargla, Algeria, 5Senology Clinic "Les Amandiers" Mekla, Tizi Ouzou, Algeria, 6Clinic of Radiology, Ghardaia, Algeria,7Laboratory of Molecular Oncology, Department of Genetics and Laboratory Medicine, Geneva University Hospitals, Geneva, Switzerland.
Corresponding author: Farid Cherbal, E-mail:cherbal_farid@yahoo.fr, work phone: 21321247950/64 extension 911, Fax: 21321247217
Abstract: Background: Breast cancer is the leading cause of cancer death in women in Algeria. The contribution of BRCA1 and BRCA2 mutations to hereditary breast cancer in Algerian population is largely unknown. Here, we describe analysis of BRCA1 and BRCA2 genes in 45 individuals from 37 families from an Algerian cohort with a personal and family history suggestive of genetic predisposition to breast cancer. Methods: The approach used is based on BRCA1 and BRCA2 mutations screening by High-Resolution Melting (HRM) curve analysis followed by direct sequencing. Results: Three distinct pathogenic mutations, c.83_84delTG/ p.Leu28ArgfsX12 c.181T>G/Cys61Gly, c.798_799delTT/p.Ser267LysfsX19 were detected in BRCA1 gene. Moreover 16 unclassified variants and polymorphisms were detected in BRCA1 gene (6 described for the first time). Two pathogenic mutations, c.1310_1313delAAGA/p.Lys437IlefsX22 and c.5722_5723delCT/p.Leu1908ArgfsX2 and 37 unclassified variants and polymorphisms (15 never described before) were identified in BRCA2 gene. Conclusions: For the first time, we used HRM analysis to identify BRCA1 and BRCA2 mutations in Algerian patients with a personal and family history suggestive of genetic predisposition to breast cancer. The implications of these new findings in regard to genetic testing and counseling are substantial for the Algerian population.
Keywords Algeria. BRCA1. BRCA2. Hereditary breast cancer. Mutation analysis. Unknown Variants
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Identification des gnes de prdisposition aux cancers colorectaux hrditaires non polyposiques, HNPCC( (Syndrome de Lynch) et mise en evidence du statut MSI (MicroSatellite Instability).
K. Berkane 1-2et K.Bouzid2

1 Facult des Sciences Biologiques, USTHB, Alger. 2- Laboratoire dOncologie Molculaire Fondamentale et Appliqu, Service dOncologie Mdicale (LOMFA), CPMC, Alger.
RESUME La plupart des cancers (90 95 %) surviennent dans un contexte sporadique, sans cause apparente alors que dautres apparaissent dans un contexte familial (5 10%). Dans ce contexte familial, une prdisposition hrditaire est retrouve. Avec de fortes traditions dendogamie et de consanguinit, la frquence des cancers familiaux serait plus leve dans les familles Algriennes que dans les familles occidentales. Les avances rcentes de la Biologie Molculaire permettent lidentification des personnes porteuses dune prdisposition hrditaire certains cancers. Lidentification des gnes de prdisposition aux cancers colorectaux, permet de raliser un diagnostic prcoce (diagnostic molculaire) et dpistage cibl dune population trs haut risque de dvelopper un cancer et leur assure une prise en charge optimale selon les recommandations internationales de surveillance prconises par lOrganisation Mondiale de la Sante (OMS) et lUnion Internationale contre le Cancer (UICC). De Octobre 2001 a Janvier 2005, 76 patients atteints de cancer colorectal et rpondant aux critres dAmsterdam II (critres de slection des cancers familiaux) ou cas index ont t admis au service dOncologie Mdicale pour prise en charge thrapeutique ; ces cas index subissent un prlvement sanguin pour les recherches mutationnelles au niveau des gnes h MLH1 et h MSH2 le plus souvent impliqus dans le syndrome. Une mutation au niveau du gne h MLH1 a t retrouve (exon 13, codon 516) dans 80% des cas tudis. Le statut MSI a t dtermin chez tous les patients.
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ETUDE DE QUELQUES BIOMARQUEURS DU SYNDROME NEPHROTIQUE

1,2
BENHAMDI Asma, 1 MECHAKRA Aicha, 2CHERITI Nadjia.
1 2
Laboratoire de Biologie et Environnement, Universit Mentouri, Constantine ; Laboratoire de Biochimie, Clinique rnale, Daksi, Constantine. Email : ben-asma@live.fr
Rsum
Le syndrome nphrotique est la nphropathie glomrulaire la plus frquente dans le monde, surtout chez les enfants. Il est li une augmentation de la permabilit glomrulaire qui est lorigine de plusieurs complications et se caractrise par une protinurie, une hypoprotidmie et une hyperlipidmie. Dans ce travail, nous avons tudi les principaux biomarqueurs de ce syndrome (protides totaux, albumine, transferrine, IgG, cholestrol, triglycrides, HDL et LDL). La protinurie dose par mthode colorimtrique est observe chez lensemble des malades chantillons. La sparation des protines sriques des patients de diffrents ges par lectrophorse sur actate de cellulose montre des modifications de la rpartition des fractions. Les protines sriques spcifiques doses par des mthodes colorimtriques et immunoturbidimtriques rvlent une diminution de leurs concentrations. Les lipides et lipoprotines doss par des mthodes enzymatiques et dimmunoinhibition traduisent une augmentation significative de leurs concentrations. Ltude de ces biomarqueurs prouve leur intrt dans le diagnostic du syndrome nphrotique et montre leurs rles dans la survenue des complications de la maladie. Mots cls : Biomarqueurs, syndrome nphrotique, lectrophorse, albumine, transferrine, IgG, lipides.
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Association entre le polymorphisme du gne de lApolipoprteine E, le profile lipidique srique et la maladie dAlzheimer.
AMARI HANANE, OULDJAOUI A, SIFI K, SIFI Y, KOHIL K, HAMRI A, ABADI N.

Les objectifs principaux du travail : 1- dterminer les frquences alllique et gnotypique du gne de lapoE dans la population nord constantinoise. 2- Etudier lassociation entre ce polymorphisme et la maladie dAlzheimer sur notre population 3- Etudier lassociation entre le profile lipidique srique (taux de cholestrol total, HDL, LDL, et triglycrides) et la maladie dAlzheimer. RESUME La maladie dAlzheimer est la premire cause des dmences du sujet g, cest une maladie neurodgnrative irrversible, son expression est le rsultat de multiples facteurs gntiques et environnementaux. Lapolipoprotine E constitue de 299 AA joue un rle physiologique majeur dans la rgulation du mtabolisme lipidique et lhomostasie des lipoprotines, et joue aussi un rle important dans la rparation neuronale. De nombreuses quipes ont tudi lassociation entre le polymorphisme de lapoE et risque de la maladie dAlzheimer, et lallle e4 a tait identifi comme un facteur de susceptibilit gntique pour la MA dans divers groupes ethniques. Lallle 4 augmente le risque de la MA et baisse considrablement lge de dbut de la maladie, et il existe une relation entre le nombre dallles 4 et lincidence de la MA ; le risque est plus lev pour les sujets porteurs de deux allles 4 que pour les porteurs d'un seul allle indiquant un effet-dose associ cet allle. Mais la contribution de lallle 4 dans le dveloppement de la MA, nest pas le mme dans tous les groupes ethniques travers le monde. Dans Cette tude on a examin lassociation entre le polymorphisme du gne de lapoE, le profil lipidique srique et la MA chez des malades, et des sujets contrles habitants la rgion nord-constantinoise. Population et mthodes : Notre tude cas tmoins a port sur 114 sujets dont 60 tmoins (30 Femmes et 30 Hommes avec une moyenne dge de 67,17 10,84 ans ) et 54 patients (25 Femmes et 29 Hommes avec une moyenne dge de 73,47 7,61) remplissant les critres du diagnostic de M.A probable selon les critres du DSM IV (Diagnostic and statistical Manual of Mental Disorders Fourth Edition), et ceux de la NINCDS-ADRDA (National Institute of Neurological and Communicative Disorders and Stroke-Alzheimer Disease and Related Disorders Association) Les malades ont t recruts au niveau du service de neurologie CHU de Constantine et en consultation prive (Skikda, Constantine). Les malades sont exclus sils prsentent une autre forme de dmence voir une dmence vasculaire ou tumorale et les tmoins sont choisis parmi des sujets sains volontaires des deux sexes prsentant un ge suprieur 60 ans, ayant t recrut au niveau des maisons de retraite de Constantine (Hamma Bouziane) et de Skikda. Tous les sujets (malades et tmoins) ont t choisis sur la base de leurs histoires mdicales et aprs examens physique. Leurs fonctions cognitives sont values par le Mini Mental State Examination (MMSE). Mthodes :
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DEUXIEME WORKSHOP DE BIOTECHNOLOGIE EN SANTE HUMAINE Le sang veineux est prlev aprs un jene d'au moins 10 heures. Nous avons recueilli 10 mL sur EDTA pour l'tude molculaire et 5 mL sur hparinate de lithium pour le bilan biochimique. Le cholestrol total le cholestrolLDL et HDL et les triglycrides sont doss en utilisant les procdures enzymatiques standards sur l'automate (technicon RA et Opera systems N de ref.T01-2801-56). Pour le gnotypage de l'apo E, l'ADN est extrait partir des leucocytes selon la technique de Miller et al. , et l'exon 4 du gne de l'apo E est amplifi par PCR (Taq DNA polymrase). Nous avons utilis les mmes conditions opratoires et les mmes amorces (OD 5-ATG GCG CTG AGG CCG CGC TC-3 ; (20pb) OG 5-AAC AAC TGA CCC CGG TGG CG-3 (20pb).) que celles dcrites par Tsai et al. . Les produits de PCR sont digrs par cinq units de HhaI, puis les produits de RFLP sont spars par lectrophorse sur gel de polyacrylamide en prsence de marqueurs de poids molculaire. La dtermination du gnotype de l'apo E est ralise en comparant le profil de restriction des patients aux combinaisons de fragments dcrites par Hixson et Vernier. Analyses statistiques : Le traitement des donnes et l'analyse statistique sont ralises par le logiciel Epi info version 6.0. Les statistiques descriptives sont utilises pour dterminer les caractristiques de la population, et l'analyse de corrlation pour tablir la relation entre les diffrents paramtres. Par ailleurs, la comparaison des frquences allliques et gnotypiques entre malades et tmoins est ralise en utilisant le teste de 2 et Fishers. Les odd ratios (OR) reprsentants une mesure d'association pidmiologique entre les diffrents gnotypes et la maladie sont calcules, le Seuil de significativit statistique est retenue p <0.05. Rsultats Nos rsultats montrent que la frquence alllique de lallle 4 est significativement suprieurs chez les malades que chez le groupe tmoins (27,80% versus 12,3% ; p< 0.05), de plus les OR des sujets homozygotes et htrozygotes pour lallle e4 taient de 2,24( [0,97-5,21] p<0.05) et 6,71([0,65-116] p<0.05) respectivement. Ces donnes indiquent que lallle 4 augmente le risque de la maladie dAlzheimer, dans notre population dune manire dpendante de sa dose. Les sujet MA prsentaient des taux significativement suprieurs de cholestrol (1,75 0,37 versus 1,22 0,29*, p<0.05) et de C-LDL (1,10 0,32 versus 1,91 0,37*, p<0.05) mais seulement chez les hommes, et des taux significativement infrieurs de C-HDL dans les deux sexes, hommes (0,44 0,07 versus 0,42 0,08*, p<0.05), femmes (0,47 0,08 versus 0,37 0,08*, p<0.05). Ces rsultats indiquent que les sujets porteurs de lallle 4 avec des taux levs de cholestrol et de C-LDL, et des taux bas de C-HDL sont plus susceptibles de dvelopper une maladie dAlzheimer. Le lien entre marqueurs biologiques du mtabolisme lipidique et risque de maladie dAlzheimer est incertain et demeure un sujet de controverse. Pendant les 15 dernires annes, plusieurs tudes pidmiologiques suggre que des taux lev de cholestrol plasmatique peut contribuer dans la pathogense de la MA Dans la prsente tude, on a trouv que le groupe MA avait des taux significativement infrieur de C-HDL, et des taux suprieur de cholestrol totale et C-LDL, par rapport au groupe contrle. Nos rsultats concordent avec des tudes rcentes, comme celle de Hall et al, qui ont trouv que des taux levs de cholestrol et C-LDL taient associs a laugmentation du risque de la MA dans la population africaine ge de plus de 70ans indpendamment du polymorphisme de lapoE. Conclusion : En conclusion, lallle 4 est associ laugmentation du risque de la maladie dAlzheimer dans notre population dune manire dpendante de sa dose. En revanche le rle protecteur de lallle 2 dans la maladie dAlzheimer nest pas vident et reste dmontrer. Les taux levs de cholestrol et de C-LDL et des niveaux bas de C-HDL, semblent galement favoriser le dveloppement de la MA dans la population nord constantinoise. Mais LAlgrie avec sa diversit historique, gographique, culturelle et linguistique, prsente une large diversit gntique, ainsi, des tudes additionnelles avec de plus grands chantillons sont ncessaires pour clarifier la LBCM Page 23 FSB-USTHB
DEUXIEME WORKSHOP DE BIOTECHNOLOGIE EN SANTE HUMAINE contribution relle de lAPOE et du profil lipidique dans le dveloppement de la maladie dAlzheimer dans diffrentes populations algriennes. Nos rsultats nous permettent de confirmer la suggestion selon laquelle lallle 4 et le profil lipidique peuvent tre utiliss comme biomarqueurs de la maladie dAlzheimer et considrs comme un complment au diagnostic clinique de la MA chez les sujets dments, chez lesquels la dcouverte d'un allle epsilon4 une valeur prdictive positive de 94 98 %.
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Rle des cytokines et la NO-synthase dans les dsordres immunitaires associs de la maladie dAlzheimer : Impact sur limmunosurveillance des patients
M Belkhelfa1., O Medjeber1., H Rafa1., S Bouaziz1., Z Djeraba1., A Lammali1., K Abdelouahab1., M Abada-Bendib2., C Touil-Boukoffa1.

1: quipe Cytokine et NO Synthase; Immunit et Pathognie, LBCM (FSB/USTHB). 2: Service de Neurologie/Hpital de Bab El Oued.
La maladie dAlzheimer est une des pathologies neurodgnratives les plus frquentes chez le sujet g. Cependant, ltiologie de cette maladie nest que partiellement connue. Les principales caractristiques histopathologiques ciblent linstallation des plaques sniles extracellulaires et la dgnrescence neurofibrillaire associes une importante perte neuronale. Elle se caractrise par trois phases selon lvolution et la svrit des symptmes. Les objectifs de notre travail portent sur le rle des cytokines (IFN, TNF, IL-13, IL-6 et IL-17) et du monoxyde dazote dans les dsordres immunitaire associs lvolution de la pathologie en vue de cibler un bio marqueur de phase de cette pathologie. Cette tude est ralise sur des patients suivis au service de Neurologie/Hpital de Bab El Oued. Nos rsultats suggrent que linflammation priphrique est une composante active au niveau crbral se caractrisant notamment par une expression accrue dune cytokine marqueur de la voie Th1, lIFN, dont laction est potentialise par le TNF, en particulier dans la phase prcoce de la maladie. Cette augmentation est en troite relation avec la production substantielle du NO, mettant en jeu linduction de la NOS2. A linverse, la phase intermdiaire caractrise par un tat pseudo-stationnaire des malades indique une action significative de lIL13 dans la rgulation ngative de la NOS2. La phase avance est caractrise par une corrlation positive entre la production importante du NO, laction de lIL6 et une cytokine de la voie Th17 (IL17). Ces rsultats pourraient ainsi contribuer dans le diagnostic prcoce et limmunosurveillance des patients atteints de la maladie dAlzheimer. Mots cls : cytokine, Alzheimer, NO-Synthase, dmence, neuroinflammation
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Mise en vidence des biomarqueurs du diabte dans la salive par les techniques dlectrophorse
Bellil Ines, Khelifi Douadi

Laboratoire de Gntique Biochimie et Biotechnologie Vgtale, Dpartement de Biochimie Microbiologie, Facult des Sciences de la Nature et de la Vie, Universit Mentouri Constantine
Rsum Parmi les marqueurs molculaires, les marqueurs protiques sont les premiers avoir t utiliss. Ils sont le produit direct des gnes. Plus dun 1/3 de protines de la salive se trouvent dans le sang et sont similaires aux protines sanguines et dont le rle a dj t tabli. Une majorit de ces protines salivaires font partie du systme central dalerte du corps face aux maladies et reprsentent de ce fait un bon outil diagnostic. Pour cela, une population de patients diabtiques de type I (n = 4) gs de 16 38 et de type II (n = 8) gs de 51 81 dont la pathologie datait plus de 5 ans avec une glycmie jeun suprieure 1.26g/l et prsentant une bonne hygine buccale a t retenue pour le prlvement de la salive. Cette population a t compare un sujet sain sans pathologies connues. Les protines salivaires ont t extraites et spares par la technique dlectrophorse mono et bidimensionnelle sur gel de polyacrylamide. Llectrophorse monodimensionnelle pour les protines rduites et non rduites dans des conditions naturantes et dnaturantes a fourni des diagrammes protiques clairs et reproductibles mais elle ne nous pas permis de diagnostiquer le diabte par la dtection qualitative ou quantitative dun biomarqueur. Lutilisation de la bidimensionnelle PAGE 8.8 / SDS- PAGE a permis de mettre en vidence la prsence de 6 spots chez le diabtique type II et qui sont absents chez le tmoin. Aussi une nette diffrence a t observe dans les spots communs qui sont surexprims chez le patient diabtique. Ces diffrences dexpression sont autant de facteurs dintrt (biomarqueur) pour lanalyse de linfluence du diabte sur la composition en protines salivaires, celles-ci tant susceptibles dtre spcifiquement exprimes ou inhibes au cours de cette pathologie. Ces protines salivaires variantes pouvant tre secondairement caractrises par spectroscopie de masse et tudies, afin de dterminer si elles sont vraiment susceptibles dtre considres comme marqueurs du diabte. Cette mise en vidence de spots spcifiques et /ou variants au cours dune pathologie telle que le diabte, ouvre des champs dinvestigation nouveaux tant dans le domaine du diagnostic (mise en vidence ventuelle de marqueurs) que dans le suivi de ces pathologies.
Mots cls : Biomarqueur, diabte, salive, lectrophorse, diagnostic
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SESSION: BIOTHERAPIE
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Les Biomolcules de Venins : Outils de Diagnostic et de Thrapie dans lHmostase
Habiba OUSSEDIK-OUMEHDI., Fatah CHERIFI. Amel SACI, et Fatima LARABA-DJEBARI.

Laboratoire de Biologie Cellulaire et Molculaire, Facult des Sciences Biologiques, USTHB Bab Ezzouar, Alger, Algrie. Laboratoire de Recherche et Dveloppement sur les Venins, Institut Pasteur dAlgrie. E-mail : flaraba@hotmail.com - Fax: 00213 21 91 72 21
RESUME Les constituants des venins de Viperidae renferment deux catgories de composants daction antagoniste, agissant par activation ou inhibition des facteurs de coagulation et de lagrgation plaquettaire. Ces protinases, capables de cliver les facteurs de coagulation avec une haute spcificit, sont rparties en srine protinases et en mtalloprotinases. Les biomolcules des venins de serpents prsentent un grand intrt aussi bien fondamental, diagnostique que thrapeutique. Ils constituent de prcieux outils pour la comprhension des diffrents mcanismes de lhmostase et sont galement utiliss dans le diagnostic des dysfonctionnements lis aux facteurs de coagulation linstar des enzymes de venins activit thrombinlike (SVTLE) qui sont utilises pour le dpistage des fibrinognopathies. Les venins sont galement utiliss en diagnostic pour lanalyse des diffrents facteurs de coagulation (facteurs V, VII, X, le facteur 3 plaquettaire, la protine C et le facteur de Will brand). Sur le plan thrapeutique, les SVLTE sont largement utiliss comme traitements anticoagulants. Dans cette optique, la purification de plusieurs molcules des venins de Cerastes cerastes et de Vipera lebetina a t effectue. Certaines des molcules purifies agissent sur lhmostase, tel que la RP34, une srine-protinase de type thrombine, constitue de deux sous-units de 48.5 kDa. Une autre srine-protinase de type thrombine a t purifie. Lafacytine, dun poids molculaire de 40 kDa, prsente des proprits fibrinase et fibrinognase. Elle active le facteur X et libre la srotonine en agissant sur lagrgation plaquettaire. Une autre molcule de 70 kDa a t purifie, et prsente une activit pro-coagulante, fibrinognase.
Mots clefs : Venins ; Viperidae ; Biomolcules ; Hmostase ; Diagnostic ; Thrapie ; Thrombin-like.
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Perspectives Immunothrapeutiques et Vaccinales dans les envenimations scorpioniques

Adi-Bessalem S., Boussag-Abib L., Mendil A, Hammoudi-Triki, D, Sami-Merah S., Billiald, P., et Laraba-Djebari F.
Laboratoire de Biologie Cellulaire et Molculaire, Facult des Sciences Biologiques, Universit des Sciences et de la Technologie Houari Boumediene EL Alia BP 32, 16111, Alger, Algrie Laboratoire de - Recherche et de Dveloppement sur les Venins, Institut Pasteur dAlgrie. Musum National dHistoire Naturelle EA4105. 75005 E-mail: flaraba@hotmail.com Fax: 00213 21 33 60 77
RESUME Classiquement limmunothrapie consiste administrer aux patients envenims des anticorps polyclonaux obtenus aprs hyper-immunisation des animaux. La toxicit leve des toxines des venins de scorpions constitue une difficult majeure dans la prparation des immun-srums et saccompagne souvent de dtrioration de la sant des animaux producteurs. Deux approches technologiques ont t envisages dans notre quipe pour augmenter l'activit spcifique des immun-srums produits, rduire la toxicit de l'immunogne utilis et raliser des essais dimmunoprotection chez un modle exprimental. La dtoxification du venin ou de sa fraction toxique par irradiation gamma jusqu 20 DL50 constitue une des approches abordes pour aboutir une meilleure prvention. Ces antignes attnus anavenin prservent leur pouvoir antignique et immunognique. Des essais de vaccination ralise chez lanimal pralablement immunis avec ces antignes dtoxifis montrent une protection de 100 % de protection contre des doses ltales de venin natif dAah. La deuxime approche consiste identifier des peptides synthtiques analogues la toxine AaH II aprs criblage dune banque alatoire de dodcapeptides. Utiliss comme antignes dans un protocole dimmunisation, ces peptides dpourvus de toxicit sont capables dinduire la production danticorps spcifiques. Limmunoractivit des anticorps vis vis du venin dAah est confirm par des tests immunologiques et par rsonance plasmonique de surface.
Ces approches dimmunoprotection pourraient tre dun apport certain dans limmunothrapie mais surtout dans la vaccinothrapie.
Mots cls : Venin, dtoxification, peptide synthtique, Immunothrapie, Vaccinothrapie.
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Implication de la membrane lamellaire dans les stratgies dchappement parasitaire et la pathogense au cours de lchinococcose humaine : Rle anti-hydatique des Voies : IFN-gamma/NOSynthase2
Amri Manel, Mezioug Dalila, Bouaziz Samia, Abdi Zaki-Sofiane & Touil-Boukoffa Chafia.
Equipe Cytokines et NOSynthases , LBCM, FSB-USTHB, Alger.
RESUME Lhydatidose cause par la forme larvaire du taenia Echinococcus granulosus est endmique en Algrie et contraint un traitement lourd essentiellement chirurgical. La survie du parasite est essentiellement due la prsence de la couche externe du kyste hydatique : la membrane lamellaire. Cette dernire constitue une barrire physique efficace vis vis de la rponse immunitaire de lhte. Dans notre tude, nous nous sommes intresss situer le rle jou par la membrane lamellaire dans la relation mise en place entre ce macroparasite et le systme immunitaire de lhte. Nous avons valu limplication de la membrane lamellaire dans la rgulation de deux voies antagonistes Th1/iNOS et Treg/Arginase au niveau des cultures de PBMC de sujets hydatiques. Paralllement cette tude, nous avons galement valu leffet de lIFN- (marqueur Th1) et de lIL-10 (marqueur Treg) sur la viabilit des protoscolex (forme larvaire du parasite) en coculture avec les PBMC de sujets hydatiques (Amri et al., 2007* & 2009**). Nos rsultats montrent que lextrait de membrane lamellaire diminue la production dIFN-/ NO. A linverse, il augmente la production dIL-10 et lactivit de larginase. Nos rsultats montrent galement que lIFN- possde une activit scolicide en coculture. A loppos, lIL-10 semble rguler ngativement lactivit parasiticide des macrophages via linhibition de la production du NO. Lensemble de ces donnes suggre que la couche lamellaire joue un rle essentiel dans les mcanismes dchappement mis en jeu par le parasite travers linhibition des voies IFN-/iNOS et lactivation accrue des voies Treg/Arginase. Nos rsultats ouvrent des perspectives quant au choix dune biomolcule efficace dans la thrapie anti-hydatique.
* Amri M., At Assa S., Belguendouz H., Mezioug D. & Touil-Boukoffa C. In Vitro Antihydatic Action of Gamma Interferon (IFN-) is Dependent on Nitric Oxide (NO) pathway. Journal of Interferon & Cytokine Research, 2007; 27(9): 781-787. **Amri M., Mezioug D. & Touil-Boukoffa C. Involvement of IL-10 and IL-4 in evasion strategies of Echinococcus granulosus to host immune response. Journal of European Cytokines network, 2009; 20(2): 83-86.
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Implication de lIL-17, de lIL-6, du TNF- et de lIL-10 dans les mcanismes de limmuno-modulation au cours des maladies inflammatoires chroniques de lintestin : Action potentielle thrapeutique de lIL-10
Hayet Rafa 1, Houria Saoula 2, Amira F Boutaleb 2, Saida. Aftiss 2, Mhamed Nakmouche 2, Chafia Touil-Boukoffa 1.
1: Equipe: Cytokines et NOSynthases, Laboratoire de Biologie Cellulaire et Molculaire, Facult des Sciences Biologiques, USTHB, Alger. 2: Service de gastrntrologie, CHU Maillot, Alger.
RESUME Les maladies inflammatoires chroniques intestinales (MICI) sont des affections rsultant de linflammation chronique dune partie de la paroi intestinale. Les dviations auto-immunes associes ces pathologies sont la rsultante dun dsquilibre des voies de rgulation immunitaires. Le monoxyde dazote (NO) joue un rle essentiel dans les rponses immunitaires et les ractions inflammatoires. Il est essentiellement synthtis par la NOS inductible (liNOS), enzyme induite sous leffet de plusieurs cytokines. Dans le prsent travail, nous nous sommes intresss ltude de la production du NO in vivo et ex vivo chez des patients atteints des MICI en phase active. Lactivit de liNOS a t dtermine au niveau des biopsies coliques provenant des patients atteints les pathologies considres. Cette tude a t complte par ltude de la modulation de liNOS au niveau des cultures de PBMC par le TNF-, lIL-17, lIL-6 et lIL-10. Nous avons observ une corrlation positive entre la production srique de NO et lactivit de liNOS au niveau des biopsies coliques. Les rsultats obtenus montrent galement une augmentation des taux de NO pour les deux catgories de patients aprs stimulation des PBMC par lIL-17, lIL-6 et le TNF- . A linverse, lIL-10 a induit une diminution de la production du NO. LIL-17, lIL-6 et le TNF- semblent exercer des effets similaires dans linduction de liNOS au cours de ces deux pathologies. Notre tude souligne le rle direct de NO dans limmunoinflammation associe aux ulcrations coliques. LIL-10 serait en faveur de lutilisation thrapeutique de cette molcule dans le traitement des patients atteints des MICI.
Mots cls : Maladies inflammatoires chroniques de lintestin, IL-17, TNF-, IL-6, IL-10, Monoxyde dazote.
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LES ACTIVITES ANTI-RADICALAIRES DUNE PLANTE MEDICINALE LOCALE FRAXINUS ANGUSTIFOLIA (LE FRENE)
Laib yasmina et Atmani djebbar Universit de Bejaa, Targa Ouzemour. Les activits anti-radicalaires des extraits ; thanolique, thyle actate, aqueux de lthyle actate, hexane, chloroforme et aqueux de chloroforme du Fraxinus angustifolia (feuilles et corce) ont t tudis a laide de mthodes spectro photomtriques in vitro. Leur teneur en phnols totaux et en flavonodes a t galement dtermine .Les rsultats obtenus apportent que tous les extraits ont une forte activit scavenger sur le radicale 1,1-diphnyl-2-picryhydrazyl (DPPH) Avec un taux dinhibition de 96.01% et de91.74 pour les extraits aqueux de chloroforme corce et feuilles respectivement et un taux de95.33% et de 92.03 pour les 2 extraits thanoliques, corce et feuilles respectivement ( a 100ug /ml) de mme pour le peroxyde dhydrogne(H2O2) linhibition t de 79.89% et 79.35% pour les 2 extraits thyle actate,82% pour lextrait aqueux de lthyle actate des feuilles et 78% pour lextrait hexane de lcorce. Le radicale hydroxyl (OH) t gnr avec le systme EDTA-FeCL3. H2O2, et en prsence du TBA comme rvlateur des produits de dgradation du dsoxyribose(MDA), une faible capacit anti-hydroxyl t enregistre pour les extraits aqueux contrairement a leurs activits anti DPPH et anti- H2O2 , les extraits thanolique et hexane des feuilles avaient des taux dinhibitions respectifs de: 77.56%, 70% et 59.56%, 55.21 % pour les extraits thanolique et hexane de lcorce. Une comparaison t faite entre les IC50 des extraits et celles des standards (catchine, acide gallique, acide ascorbique), une corrlation t effectue entre la teneur en phnols totaux et en flavonodes et entre les diffrentes activits anti radicalaires. Mots cls : Fraxinus, DPPH, hydroxyl OH, dsoxyribose...
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Les lments mobiles de type mariner issus des organismes des sources hydrothermales ocaniques : tude et perspectives dutilisation en thrapie gnique
Nassima Toumi1.2.3, Sylvaine Renault3, Nathalie Casse2, Elisabeth Pradier2, Yves Bigot3 et Marc Laulier2.
[1] Universit Cheikh Larbi Tbssi , Route de constantine 12200 Tbssa [2] Laboratoire de Biologie et de Gntique volutive, E.A. 3565, Universit du Maine, Avenue Olivier Messiaen, 72085 Le Mans, France. [3] Laboratoire dtude des parasites gntiques (EA3868), Universit Franois Rabelais, UFR de Sciences et Techniques, Parc de Grandmont, Avenue monge 37200 Tours
Les lments mobiles (transposons) sont des squences dADN capables de se dplacer dans le gnome. Ce dplacement est gnralement assur par une protine (transposase) code par le transposon lui-mme. Les transposons sont actuellement tudis comme outils de transgnse et de mutagense en thrapie gnique. Ils offrent plusieurs avantages par rapports aux autres techniques de transfert de gne (taille de transgne, contrle de lintgration du transgne, etc ). Les transposons de type mariner sont ubiquiste chez les eucaryotes et ils ont une structure simple ce qui fait deux des bons candidats en biotechnologie. Au Laboratoire de Biologie et Gntique Evolutive (LBGE), nous travaillons sur des transposons de type mariner issus des organismes des sources hydrothermales ocaniques. A lheure actuelle le LBGE possdent plus de 50 squences de type mariner chez plusieurs espces. Parmi ces squences, 5 ont un cadre de lecture ouvert (ORF) pour le gne de la transposase. Nous avons ralis une tude de la fonctionnalit de llment Alvcmar1 issu de lannlide hydrothermal Alvinella caudata. Lanalyse in silico de cet lment rvle quil est capable de coder deux isoformes de la transposase. Une premire isoforme qui est constitue dun ORF qui correspond une transposase de 350 acides amins . La seconde isoforme possde dans sa rgion N-teminale une extension de 30aa. Afin dtudier lactivit de ces isoformes, les protines correspondantes ont t produites en bactrie. On a pu montrer, par la technique de gel retard, quelles reconnaissent et se fixent spcifiquement aux ITR dAlvcmar1. Cette technique a pu montrer galement des vnements de coupure produits par ces transposases diffrentes tempratures (4C, 15C, 30C et 50C). Paralllement, des tests de transposition en bactrie ont rvl une activit faible de ces deux isoformes. Nos perspectives consistent optimiser cet lment par mutagense dirige afin dobtenir un lment plus performant qui peut tre utilis comme vecteur de transfert de gne.
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Apport des thrapies molculaires cibles dans la prise en charge des cancers colorectaux mtastiques . Exprience Algrienne
K. Berkane 1-2 M.Oukkal2, H.Mahfouf2, N.Terki 3, R.Baba Ahmed 4 et K. Bouzid 2
1- Facult des Sciences Biologiques, USTHB, 2- Service dOncologie Medicale, 3- Service dAnatomie Pathologique, CPMC et 4- Service dAnatomie Pathologique EHS Lamine Debaghine, BEO, Alger.
RESUME Le cancer colorectal est une pathologie grave et pose un vritable problme de sant publique. Lincidence est rgulirement croissante dans le monde. Lmergence des thrapies molculaires cibles (TMC) apporte un rel espoir en terme de survie pour des patients o un plafond thrapeutique semblait tre atteint et o le pronostic a brve chance tait rserv. Ces TMC se rvlent cibles double titre : elles ciblent un mcanisme impliqu dans le processus de loncogense et elles ne visent quune catgorie de patients. Les mutations du gne Kras se rvlent prdictives dune rponse ces anticorps monoclonaux dirigs contre le rcepteur du facteur de croissance de lEpidermal Growth Factor (EGFR). De Septembre 2005 Juin 2006, 46 patients atteints de cancer colorectal mtastatique sont admis au service pour prise en charge. Les mutations au niveau du gne KRAS sont recherches pour les patients en chec thrapeutique. La forme Wild type a t retouve chez 75,6% de nos patients et o un traitement anti-EGFR a t prconis ; une survie sans progression de la maladie de 12,5 mois a t retrouve par rapport aux patients sous cytotoxiques classiques. Les mcanismes impliqus dans les processus de lOncogense sont loin dtre compltement lucids chez lHomme puisquune rsistance ce traitement est de nouveau observe. La recherche dautres facteurs prdictifs de rponse est en cours de ralisation. Lintgration de ces techniques dans les stratgies de dpistage en milieu clinique contribuera sans aucun doute lamlioration du diagnostic des -thalassmies et des autres hmoglobinopathies associes (thalassmies, drpanocytose).
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SESSION: BIOCHIMIE-BIOTECHNOLOGIE
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Lhmoglobine source intarissable de connaissances

Boudrahem-Addour N
Laboratoire de biologie molculaire et cellulaire, Facult des sciences biologiques, USTHB, Bab Ezzouar Alger.
RESUME Lhmoglobine runit son actif un tableau de performances exceptionnelles. Cest une maladie de lhmoglobine, la drpanocytose qui a t la premire maladie molculaire identifie en 1949. Premire squence protique, premire structure tridimensionnelle. Cest aussi la protine qui prsente le plus grands nombre de variants. Lensemble de ces travaux a permis les premires interprtations structure/fonction. A lre de la biologie molculaire, lhmoglobine a gard sa position de leader. Les gnes de globine ont t les premiers gnes humains analyss dans leur structure et leur environnement chromosomique. Ils sont considrs comme un systme modle dtude des mcanismes de la spcificit tissulaire dexpression des gnes chez les vertbrs. Paralllement, de trs nombreuses mutations ont t identifies responsables des syndromes thalassmiques. Lutilisation de mthodologies de plus en plus sophistiques a contribu la prcocit et la standardisation du diagnostic molculaire et une rflexion profonde sur les aspects thiques de ce geste. Lhmoglobine a aussi t un outil prcieux dans les tudes de gntique de populations. La comparaison des tudes ralises en Algrie avec dautres dans le monde permet de retracer les mouvements de population. Le caractre endogame constat favorise les affections gntiques transmission autosomique rcessive. Il y a sans doute ce niveau une politique de sant publique mettre en place. Le phnomne de slection par le Plasmodium falciparum sur les hmoglobinopathies savre sexercer sur dautres gnes tels que les gnes HLA du CMH, les cytokines et les gnes des molcules dAdhrence. En thrapeutique, des tapes de la physiopathologie ont t cibles par lutilisation dagents pharmacologiques inducteurs de lHmoglobine ftale. Les paradigmes actuels concernent le rle de lhmoglobine dans le transport du monoxyde dazote, la rgulation complexe des familles de gnes de globine au cours du dveloppement et limplication des gnes modificateurs dans lhtrognit clinique. Quand la thrapie gnique, elle est encore lchelle de la recherche fondamentale. A laube de la mdecine molculaire, lhmoglobine continue de nous entraner sous son sillage. Fidle elle-mme cette molcule ne cessera de nous apporter la lumire..
Mots cls : Hmoglobine, molcule modle
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EFFET DE LACIDE NIFLUMIQUE SUR LA PHYSIOLOGIE MITOCHONDRIALE ET LA PROLIFERATION DES CELLULES HT-29
I. Amrouche-Mekkioui 1 et B. Djerdjouri 1
1
Laboratoire de Biologie Cellulaire et Molculaire, Facult des Sciences Biologiques (FSB). Universit des Sciences et de la Technologie Houari Boumediene (USTHB), BP 32 EL-ALIA 16111, Bab-Ezzouar (Alger).
RESUME La cyclooxygnase 2 (COX-2), une enzyme qui produit hydrolyse lacide arachidonique en prostanodes, a t implique dans la cancrogense colique. Elle intervient en inhibant lapoptose, dont la phase effectrice consiste en l'ouverture des pores de transition de permabilit mitochondriale (PTPC) et la libration de protines apoptognes. Lacide niflumique (Nif) est un anti-inflammatoire non strodien (AINS), qui inhibe les deux isoforme de cyclooxygnases avec un effet prfrentiel sur la COX-2. Nous avons tudi leffet de lacide niflumique (Nif) sur la physiologie des mitochondries de foie de rat (gonflement et respiration), sur la prolifration des cellules HT-29 (ligne pithliale intestinale drives de cancer colique humain) et la libration dIL-8 induites par le TNF et le PMA. Nos rsultats montrent que le Nif provoque louverture des pores de transition de permabilit (PTPC, 100150M) et dcouple la phosphorylation oxydative des mitochondries (10-150M). Le LPS multiplie leur taux de prolifration par un facteur de 3.5 J4. Le Nif 250 M a un pouvoir anti prolifratif sur ces cellules. Le Nif (50-100M) augmente la production dIL-8 par les cellules HT-29 en absence et en prsence de TNF, alors qu des doses plus leves il semble avoir leffet inverse (250 750M). Le Nif na aucun effet sur la production dIL-8 stimule par le PMA. Le Nif possde un effet anti prolifratif potentiel.
Mots cls : HT-29, AINS, mitochondrie, IL-8, TNF, PMA.
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COLITE ULCEREUSE AU DEXTRAN SULFATE - MODULATION DU STRESS OXYDATIF PAR UN ANTI-INFLAMMATOIRE NON STERODIEN, LINDOMETACINE
A. Bounaama1 et B. Djerdjouri1
1
RESUME La colite ulcreuse est une inflammation chronique du colon qui augmente le risque de dveloppement du cancer colorectal. Cet effet est fortement li linduction dun stress oxydatif dans la muqueuse colique. Dans ce travail, leffet de lindomtacine un anti-inflammatoire non strodien prsentant un effet inhibiteur sur le dveloppement du cancer colorectal, a t recherch sur la modulation du stress oxydatif associ une colite ulcreuse exprimentale induite par le dextran sulfate sodium (DSS). Deux cycles de DSS successifs ont t raliss. Ladministration du DSS (3%) par voie orale pendant 7 jours suivie dune administration de leau du robinet pendant 14 jours dfinit un cycle de DSS. Les taux de malondialdehyde (MDA), de glutathion rduit (GSH), de monoxyde dazote (NO) et de lactivit catalase ont t mesurs dans les homognats de colons prlevs des souris soumises aux diffrents traitements. Les rsultats obtenus montrent que le DSS a induit une augmentation du taux de GSH, du MDA et du NO respectivement avec des facteurs de 1.40, 1.65 et de 4.43 des taux tmoins. Lindomtacine a rtabli le taux de GSH et de MDA aux valeurs tmoins, sans rduire le taux de NO. Par ailleurs, lactivit catalase diffre peu de la valeur tmoin aprs traitement au DSS seul ou en prsence dindomtacine. Lindomtacine a partiellement neutralis linflammation chronique de la muqueuse intestinale induite par le DSS, en rduisant notamment linfiltrat cellulaire.
Mots cls : stress oxydatif, colite, dextran sodium sulfate, indomtacine, malondialdehyde, monoxyde dazote, GSH, catalase.
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ANTIDIABETIC AND ANTIOXIDANT EFFECT OF ALOIN IN STREPTOZOTOCIN-INDUCED DIABETIC RATS.
C. Kandouli (1), F. Khelifi-Touhami (1) , C. Benlatreche (2) , Z. Leulmi (3).

(1)Laboratoire de biologie animale. Dpartement de biologie animale .Facult des Sciences de la Nature et de la Vie .Universit Mentouri, Constantine 25000, Algrie. (2)Laboratoire de biochimie CHU IBN BADIS, Constantine 25000.Algrie. (3) Laboratoire de gnie microbiologique et applications.
chouaib50@gmail.com
ABSTRACT Hyperglycemia not only generates reactive oxygen species but also attenuates antioxidant mechanisms creating a state of oxidative stress. Oxidative stress is thought to play crucial role in development of complications associates a diabetes. Many plants were evaluated to overcome this problem. Aloe (Liliaceae) is widely used in North Africa folk medicine to treat various diseases including diabetes. Aloe contains many active ingredients, but the best known is aloin.The purpose of this study was to investigate the possible antidiabetic, hypolipidemic and antioxidant effect of aloin, with the daily amount of 30 mg/kg, during three weeks, in streptozotocin (STZ)-induced diabetic rats (30 mg/kg body weight) for three weeks. Serum glucose level was measured weekly. At the end, total cholesterol, triglycerides and HDL-cholesterol were examined in serum and reduced glutathione (GSH), thiobarbituric acid reactive substances (TBARS), superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) were evaluated in homogenates of liver and kidney. Oral administration of aloin for three weeks resulted in a significant reduction in blood glucose and a decrease in serum total cholesterol and triglycerides but no change in the level of HDL was observed. The aloin also resulted in decreased free radical formation in studied tissues (liver and Kidney). The decrease in thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) and the increase in the activities of superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) and reduced glutathione (GSH) suggest that aloin has antioxidant properties in addition to its antidiabetic effect. The result of this experimental study indicates that aloin at 30 mg/kg body weight possesses antidiabetic and antioxidant activity. However other experimental research is necessary to determine the mechanisms involved in these effects.
Keywords: Aloin; Streptozotocin; Diabetes; glycemia; Oxidative stress; Antioxidants.
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Variation de lHomocystine et du Gnotype C677T de la Mthylnettrahydrofolate Rductase chez lHypertendu
A.Otmane1, M.Makrelouf 1, F.Bouamrane 3, A.Zenati 1

Laboratoire Central de Biologie CHU de Bab El Oued1 . Service de Mdecine Interne Hpital de Bainem 3 Alger 16000 Algrie Correspondance:bioamel03_dz@yahoo.fr
RESUME Lhyperhomocystinmie reprsente un facteur de risque indpendant de pathologie cardiovasculaires et athrothrombotiques. La rgulation du taux de cet acide amin est sous la dpendance de facteurs physiologiques (ge, sexe), nutritionnels (statut vitaminique) et gntiques (dficit ou mutation des enzymes impliqus dans son mtabolisme). Dans ce travail nous tudions la mutation ponctuelle C677T de la MTHFR (Mthylnettrahydrofolate rductase) une des enzymes cl du mtabolisme de lhomocystine, dans le but dtudier sa rpartition chez une cohorte Algrienne de patients hypertendus. Ils sagit dune tude rtrospective conduite au CHU de Bab El Oued dAlger, 67 patients hypertendus sont inclus, dge moyen 55.31 13.35 ans, ils sont compars 30 sujets tmoins dge moyen 53.9 14.34 ans.Lhomocystine totale plasmatique a t dose par technique FPIA : Fluorescence Polarization Immunoassay. Le gnotype C677T de la MTHFR a t ralis par la mthode PCR sur Light Cycler. Les rsultats obtenus ont montr que lhyperhomocystinmie est plus marque chez les hypertendus 12.89 6.71 mol/l, versus 10.35 2.38 mol/l dans le groupe tmoin (p<0.05). Chez les hypertendus les frquences gnotypiques sont respectivement : 37% CC ,60% CT et 3%TT, cependant dans le groupe tmoin le gnotype TT na pas t retrouv, les gnotypes CC et CT reprsentent respectivement 40% et 60%. La distribution mondiale du gnotype C677T est trs htrogne; bien que notre travail soit prliminaire, les premiers rsultats retrouvent une frquence gnotypique de 2.5%, celle de lallleT est de 32.5%. Nos connaissances actuelles concernant linfluence de facteurs environnementaux sur le dterminant gntique savrent incompltes. Cette tude devra tre poursuivie par dautres investigations essentiellement le dosage des vitamines du groupe B (B6, B9, B12).
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GENETIC POLYMORPHISMS OF N-ACETYLTRANSFERASE 2 AND CARDIOVASCULAR DISEASES
M. Khelil1*, Bahia Djerdjouri1, Bouchentouf Tayebi2,

Laboratoire de Biologie Cellulaire et Molculaire, Facult des Sciences Biologiques, Universit des Sciences et de la Technologie Houari Boumdienne USTHB, Bab Ezzouar, BP: 32 El- Alia. 16111, Alger, Algrie
RESUME La N-actyltransfrase 2 (NAT2) est un enzyme du mtabolisme des xnobiotiques. NAT2 est polymorphe et ce polymorphisme a t associ une diffrence interindividuelle dans la rponse aux mdicaments. En outre, ce polymorphisme a aussi t associ la modification du risque des maladies multifactorielles. Notre but a t dune part de dterminer la capacit dactylation chez une population Algrienne afin de dterminer une dose thrapeutique efficace et moins toxique par rapport la dose standard. Dautre part, nous avons test la relation entre le polymorphisme gntique de lenzyme NAT2 et les maladies cardiovasculaires. 200 sujets (50 patients avec une hypertension artrielle, 50 patients ayant prsent un accident vasculaire crbral et 100 tmoins) ont t enrls dans cette tude. Le gnotype NAT2 a t dtermin par la mthode PCR-RFLP. Nos rsultats ont montr une diffrence significative entre patients et tmoins pour lhaplotype NAT2*5F (P =0.032; OR = 0.44). Aucune diffrence significative na t observe pour les autres haplotypes, ni pour les gnotypes et phnotypes. La proportion dactyleurs lents et rapides a t denviron 50% aussi bien chez les malades que chez les tmoins. En conclusion, nous pouvons suggrer quil y aurait autant de mtaboliseurs rapides que de mtaboliseurs lents chez la population de patients tudis. En outre, lhaplotype NAT2*5F semblerait tre un facteur protecteur contre les maladies cardiovasculaires tudies.
Mots cls : Maladies cardiovasculaires N- actyltransfrase, polymorphisme.
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Description des Chromosomes de lOutarde houbara Chlamydotis undulata undulata et Cartographie Chromosomique Compare: Premire Etape de lAnalyse du Gnome
Mahiddine L.,* Belhamra M.,** Boucekkine W.,*** Ladjali-Mohammedi K.*
* Laboratoire de Gntique du Dveloppement, FSB, USTHB (kafia_lm@yahoo.fr; mahiddineleila@hotmail.com) ** Centre Cyngtique de Zralda, Centre de Recherche Scientifique et Technique sur les Rgions Arides, Universit de Biskra (segmadz@yahoo.fr) *** Direction Gnrale des Forts (cynegetique2@yahoo.fr)
Rsum
Certains rarrangements chromosomiques se sont produits durant lvolution entre les gnomes aviaires et humains mais plusieurs groupes de syntnies restent conservs. Ceci a t observ dans plusieurs familles de gnes impliqus dans des fonctions biologiques extrmement importantes. Cest pour ces raisons que les gnomes aviaires constituent un excellent modle dvolution et leur connaissance commence par leurs descriptions et laccumulation dinformations. En effet, une de ces tapes est lanalyse des diffrents caryotypes aviaires et ltablissement de la cartographie chromosomique compare. Parmi les nombreuses espces aviaires qui figurent comme tant vulnrables dans la liste rouge tablie en 2004 par LUnion Internationale pour la Conservation de la Nature (UICN), on retrouve lOutarde houbara Chlamydotis undulata undulata qui est un oiseau rare, appartenant lordre des Gruiformes, emblmatique des grands espaces steppiques et dsertiques de lAfrique du Nord et du Moyen Orient. La situation trs proccupante de cette espce en Algrie nous incite entamer, rapidement, une tude de son gnome ainsi que la mise en place dune base de donnes afin de contribuer sa prservation. Ainsi, nous proposons pour la premire fois le caryotype de lOutarde houbara en bandes morphologiques GTG et dynamiques RBG obtenu aprs la ralisation dune culture des prcurseurs rythrocytaires partir dun jeune mle. Des doubles synchronisations du cycle cellulaire avec lincorporation du BrdU, analogue structural de la thymidine, lors de la rplication de lADN ont t ralises et nous ont permis dobtenir des chromosomes allongs en promtaphase. La comparaison individuelle des huit premires paires chromosomiques et les chromosomes sexuels ZZ avec les chromosomes du poulet, a rvl la prsence de similitudes entre la morphologie et le motif des bandes pour les 6 premiers macrochromosomes et le chromosome sexuel Z. A linverse, les chromosomes 7 et 8 sont nettement diffrents chez ces deux espces qui semblent avoir divergs aprs des rarrangements chromosomiques qui se sont produit durant lvolution des oiseaux. Mots cls : Outarde houbara, Chlamydotis undulata undulata, espce menace dextinction, prcurseurs rythrocytaires, double synchronisation, gnome aviaire, caryotype, chromosomes, bandes GTG et RBG, cartographie compare.
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Etude molculaire de la rsistance dEnterobacter sp aux cphalosporines large spectre et aux quinolones dans les hpitaux dAlger
Hassen IABADENEa, Yamina MESSAIa, Souhila ALOUACHEa, Charlotte VERDETb, Guillaume ARLETb et Rabah BAKOURa
a- Laboratoire de Biologie Cellulaire et Molculaire, Equipe de Gntique, Facult des Sciences Biologiques, Universit des Sciences et de la Technologie Houari Boumediene, Alger b- Universit Paris VI, Facult de Mdecine Pierre et Marie Curie, Laboratoire de Bactriologie, UPRES EA 2392, Paris, France
Rsum : Ltude a port sur Enterobacter sp (n=149) isols dans les hpitaux dAlger. Lantibiogramme, les tests dantagonisme et de synergie ont permis de distinguer 2 groupes de souches : - Sensibles aux cphalosporines de 3me et 4me gnration (C3G/C4G) : 114 souches se rpartissant en phnotypes pnicillinase haut niveau (n=21) et cphalosporinase naturelle (n=93). - Rsistantes aux C3G/C4G : 35 souches assignes aux phnotypes bta-lactamases spectre largi (n=25) et cphalosporinase acquise (n=10). La caractrisation molculaire de la rsistance a confirm : - Le phnotype BLSE avec la prsence des allles blaCTX-M (CTX-M-15 : n=11, CTX-M-3 : n=9), blaSHV-12 (n=4) et blaVEB-1 (n=1) ports respectivement par des plasmides auto-transfrables Inc/rep L/M de 80kb et Inc/rep HI2 de 150kb, et non conjugatif Inc/rep FII de 60kb. Les souches SHV-12+ coproduisent des cphalosporinases plasmidiques (pAmpC) de type DHA-1 localises sur un plasmide Inc/rep A/C de 100kb . - La drpression chez le reste des souches de la cphalosporinase chromosomique suite des mutations dans les gnes rgulateurs ampR et ampD. La recherche des dterminants qnr a montr la prsence des allles qnrS1, qnrB1 et qnrB4 chez 5 souches BLSE+ produisant CTX-M-15 ou SHV-12. Cette tude a montr la prdominance des BLSE CTX-M et lassociation des dterminants qnr ceux des BLSE, ainsi quelle a mis en vidence pour la premire fois les pAmpC en Algrie et le type DHA-1 chez Enterobacter cloacae. Mots cls : Enterobacter, BLSE, QNR, Algrie.
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Gravit des mycobactrioses chez les patients immunodprims.

Nateche F1.2*, Lafoz C3, Baraka S2, Samper S3 et Khaled S2.
1 2
Laboratoire de biologie molculaire et cellulaire, FSB, USTHB. ALGER.. ALGER. Laboratoire central, EHS EL HADI FLICI Ex EL KETTAR. ALGER 3 Laboratoire de mycobactriologie, facult de mdecine, universit de ZARAGOSSE. ESPAGNE. * fnateche@yahoo.fr
Rsum Objectif : cette tude dmontre la vulnrabilit des patients HIV positifs aux mycobactries atypiques ou non tuberculeuse (MNT). Ainsi, 312 produits pathologiques ont t investigus. Mthodes : Lidentification classique des souches atypiques ou MNT a t faite sur la base des tests classiques : Etude macroscopique des colonies ; prsence de pigments ; temps de croissance ; tests physiologiques et biochimiques ; ainsi que la rsistance lisoniazide, le TCH et le PNB.Lidentification molculaire a t ralise par une PCR avec l ARNr 16S de Mycobacterium tuberculosis, et la technique de PRA (PCR restriction analysis). Lanalyse des fragments de restriction sont compars avec la base des donnes du site : http://app.chuv.ch/prasit. Rsultats : Touts les isolats ont t identifis comme appartenant au complexe M. tuberculosis part 10 souches provenant de 9 patients ont donn des ractions atypiques. Il est important de souligner que 6 patients sont positifs pour le VIH. En effet, le p value de 0.0001 met en vidence ltroite relation entre les souches atypiques et le statut VIH. 5 espces diffrentes ont t mises en vidence : - M. intracellulare type 2 avec 5 souches. - M. nonchromogenicum type 2 avec une souche. - M. lentiflavum type 4 avec une souche. - M. fortuitum type 1 avec 2 souches. - M. chaloneae type 1 avec une souche. Dans ce cas, la thrapie est problmatique vu le haut niveau de rsistance de ces souches aux molcules antituberculeuses particulirement lisoniazide et la rifampicine. En effet, 7/10 souches sont multirsistantes dans le cas de notre tude. La technique PRA est non fastidieuse et non onreuse, elle est recommander dans les laboratoires de mycobactriologie afin de dresser un diagnostic juste et surtout prcoce. Conclusion : Les mycobactries affectent plus les malades positifs pour le VIH que les patients srongatifs, Le p value de 0.0001 met en vidence ltroite relation entre les souches atypiques et le statut VIH. Mots cls : Mycobacterium, VIH, PCR restriction analysis, multirsistance.
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Mise en vidence et essai de Caractrisation de molcules antifongique chez Bacillus thuringiensis

Abderrahmani Ahmed1, Nateche-Metiaz Farida1, Hacene Hocine 1et Jacques Philippe2.
1) Laboratoire BCM Equipe Microbiologie Facult des Sciences Biologiques -USTHB.BP 32 .El alia. 16111 .Alger Algrie. 2) Laboratoire Probiogem Polytechlille. Avenue Langevin.USTL1 .Lille. 59655. France
Rsum
Une collection de soixante rhizobactries appartenant au laboratoire de microbiologie et identifies comme tant des souches de Bacillus thuringiensis a t teste vis--vis de cinq champignons mycliens : Mucor roxii, Rhizopus nigricans, Penicillium roquefortii, Aspergillus niger et Fusarium oxysporum. Linvestigation avec ces myctes rvle une bonne activit antagoniste. En effet, lanalyse par spectromtrie de masse de type Matrix-assisted laser desorption-ionisation time of fligt ( MALDI TOF) de la souche B. thuringiensis (FvBj6) qui a prsent le spectre le plus large a permis de retrouver deux pics importants avec des masses de 906 et 1065 correspondant respectivement la kurstakine et liturine A ou la mycosubtiline. Outre, le pic 906 aurait un intrt systmatique puisquil est retrouv chez les souches de Bacillus thuringiensis uniquement et peut tre considr comme un bio marqueur et serait responsable de lactivit antifongique. En plus de son activit entomocide, Bacillus thuringiensis peut tre un prometteur candidat pour une utilisation contre les pathologies antifongiques.
Mots cls : Bacillus thuringiensis, activit antifongique, Maldi tof, kurstakine, biomarqueur antifongique.
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Etude phnotypique et gnotypique de la virulence de souches hospitalires de Klebsiella pneumoniae
Radia AISSANIa, Yamina MESSAIa, Hassen IABADENEa, Souhila ALOUACHEa, Guillaume ARLETb et Rabah BAKOURa
a- Laboratoire de Biologie Cellulaire et Molculaire, Equipe de Gntique, Facult des Sciences Biologiques, Universit des Sciences et de la Technologie Houari Boumediene, Alger b- Universit Paris VI, Facult de Mdecine Pierre et Marie Curie, Laboratoire de Bactriologie, UPRES EA 2392, Paris, France
Rsum Klebsiella pneumoniae est une bactrie pathogne opportuniste causant des infections nosocomiales et communautaires. Sa pathognicit est lie lexpression de plusieurs facteurs de virulence: capsule, adhsines, sidrophores et protectines/invasines. Les principales manifestations cliniques sont la pneumonie, la septicmie, linfection des plaies et du tractus urinaire. Lmergence de souches productrices de -lactamases spectre largi plasmidiques (BLSE) a compliqu la situation. La recherche de facteurs de virulence sur 39 souches cliniques productrices de BLSE a montr lubiquit des gnes fimH(100%), mrkD(95%) et ycfM(95%) codant les fimbriae1, les fimbriae3 et une protine putative de liaison la fibronectine. Le gne kpn codant une adhsine FimH-like est prsent chez 69% des souches. Les capsules produites ne sont pas de types antigniques K1, K2 et K5. 90% des souches sont phnotypiquement rsistantes au srum et les gnes traT, rmpA et magA, parmi ceux susceptibles de confrer cette rsistance, sont absents except chez 3 souches. Toutes les souches sont positives pour le gne entB de lentrobactine, ceux de biosynthse et de capture de la yersiniabactine (irp1, irp2, ybtS, fyuA) sont prsents chez 56% des souches et seules 8% des souches sont positives pour le gne iutA de lopron de larobactine. La production de sidrophores a t confirme par la mthode de coculture en milieu appauvri en fer. La combinaison des facteurs de virulence a permis de distinguer 9 pathotypes dont 3 sont prdominants. Cette tude a rvl la virulence des souches de K. pneumoniae svissant dans les hpitaux dAlger.
Mots cls: Klebsiella pneumoniae, virulence, bta-lactamases
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(Suite)
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PRODUCTION DESTERS DALKYLE DACIDES GRAS PAR BIOCONVERSION MICROBIENNE DUNE HUILE VEGETALE
Z. HACHAICHI-SADOUK1, 2 , A. TAZEROUTI2, H. HACENE1
1 2
Laboratoire de Biologie Cellulaire et Molculaire, Facult des Sciences Biologiques, Laboratoire de Chimie Organique Applique, Facult de Chimie, Universit des Sciences et de la Technologie Houari Boumedine, BP 32 El Alia, 16111 Bab Ezzouar, Alger, Algrie.
RsumLes esters dalkyle dacides gras issus de la transestrification dhuiles vgtales constituent des matires premires intermdiaires trs recherches par les industries pharmaceutiques. En 2007, le Committee for medicinal products for human use de l European medicines agency par exemple, dsigne les esters dacides gras comme excipients aptes solubiliser et/ou faciliter la pntration des formulations transdermiques. Cette transestrification peut tre ralise soit, par voie chimique conventionnelle, soit par voie enzymatique, ou par biotransformation au cours de la fermentation microbienne (whole cells). La bioconversion dune huile de tourteau dolives avec une souche du genre Rhodococcus a t effectue dans notre laboratoire: lanalyse du produit brut par CG et CG/MS/IE a rvl la prsence desters mthyliques et thyliques dacides gras. Les bandes caractristiques des esters ont t confirmes par IR. Mots cls: Bioconversion, Rhodococcus rhodochrous. Huile vgtale, Esters dalkyle dacides gras.
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Profil de rsistance aux mtaux lourds chez Chryseobacterium solincola sp, nov.,
Benmalek1 Y, Nateche-Metiaz1 F, Hachani1 B, Hambli1 A, Fardeau2 M-L & AHacene1 H
Laboratoire de Microbiologie, Dpartement de BCM, Facult des sciences biologiques, Universit des Sciences et de Technologie Houari Boumediene, Bab Ezzouar, Alger, Algrie. 2 Laboratoire de Microbiologie IRD, UMR D180, Microbiologie et Biotechnologie des Environnements Chauds, Universits de Provence et de la Mditerrane, ESIL, Case 925, 163 Avenue de Luminy, 13288 Marseille Cedex 09, France Corresponding author: yambenmalek@yahoo.fr
1
RESUME
Les mtaux lourds sont des lments mtalliques de masse volumique 5g/cm3. Certains sont essentiels pour le bon fonctionnement des diffrentes activits cellulaires (Fe,Cu, Ni, Zn,Co..), par contre dautres sont trs toxiques mme de trs faibles concentrations (Hg, Cd, Pb...). Ils sont naturellement prsents dans lenvironnement sous forme de traces, mais le dveloppement de la technologie a significativement augment leur taux et leur disponibilit. Ils peuvent se concentrer le long de la chane alimentaire et saccumuler dans quelques organes de lhomme et de lanimal. Ils sont tous neurotoxiques, avec certains cancrignes. Pour cette raison, plusieurs procds de biotechnologie de lenvironnement ont t dvelopps dans le but dliminer ou de diminuer la concentration de ces lments minraux trs toxiques dans notre environnement. Dans cette optique, on a tudi la rsistance vis vis 7 sels mtalliques (plomb, chrome, zinc, nickel, cadmium, cuivre, cobalt) chez Chryseobacterium solincola sp, nov., par la suite on a procd la dtermination du support gntique par les techniques du transfert gntique (conjugaison), et le curage. Les rsultats obtenus montrent que cette bactrie est poly rsistante et les CMIs dtermines sont considrables avec des chiffres de lordre de 500 ug/ml (Pb), 350ug/ml (Cr), 300ug/ml (Zn et Ni), 150ug/ml (Cd), 75ug/ml (Cu et Co). Aucun transfert gntique na eu lieu entre notre souche et la souche rceptrice E coli K 12. Pour le curage 3 clones sont obtenus avec des frquences diffrentes. Deux clones avec lagent curant SDS dont un a perdu le caractre de rsistance aux Zn et Na Cl, et lautre le caractre de rsistance au ZN seulement avec une frquence de 1.33x10-2 . Pour le 2me agent curant (acide nalidixique), un seul clone est obtenu qui a montr une perte de 3 caractres de rsistance la fois (Pb, Zn, Na Cl), avec une frquence de 0.66x 10-2 . Sur la base des rsultats obtenus, cette bactrie est trs intressante, et peut tre applique dans les diffrents procds de biotechnologie de lenvironnement.
Mots cls : Chryseobacterium solincola, rsistance, mtaux lourds, gnes de rsistance.
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Influence des apports anthropiques sur lvolution gntique des bactries en milieu marin : cas de la rsistance aux antibiotiques dans les eaux portuaires dAlger
Souhila ALOUACHE, Lynda ANSSOUR, Yamina MESSAI, Hassen IABADENE et Rabah BAKOUR
Laboratoire de Biologie Cellulaire et Molculaire, Equipe de Gntique, Facult des Sciences Biologiques, Universit des Sciences et de la Technologie Houari Boumediene, Alger
RESUME Ltude a port sur la dtection de la rsistance aux bta-lactamines chez les bactries Gram- dans les eaux portuaires pollues dAlger. Trente cinq souches ont t slectionnes sur la base de leur rsistance aux cphalosporines large spectre mdie par des bta-lactamases spectre tendu (BLSE). Ces souches se rpartissent en 20 Citrobacter freundii, 6 Aeromonas hydrophila, 6 Vibrio fluvialis (17%), 1 Citrobacter braaki (2,86%), 1 Bordetella sp. (2,86%) et 1 E. coli (2,86%). Le typage molculaire par ERIC-PCR des souches dAeromonas et de Vibrio a rvl des gnotypes diffrents, tandis quon a not le caractre clonal de 17 souches sur les 20 de Citrobacter freundii. Les BLSE identifies sont principalement de type CTXM-3 et CTXM-15, avec la prsence des types PER-1 et VEB-1 ; leurs gnes sont localiss, respectivement, sur des plasmides de 85kb autotransfrable, 10kb mobilisable et >128kb non transfrable. Ces souches identifies sont allochtones et autochtones du milieu marin, elles ont t dcrites comme agents tiologiques dinfections opportunistes et les BLSE dtectes sont de mme type que celles retrouves en clinique. Ces donnes peuvent tre indicatives de linfluence des apports anthropiques biotiques et abiotiques sur lvolution gntique des bactries marines, par les transferts gntiques in situ et la pression de slection. Ainsi, outre le maintien confirm de la rsistance aux antibiotiques dans le milieu marin, ce dernier peut mme jouer un rle dans son exacerbation.
Mots cls: Bactries Gram-, milieu marin, rsistance, antibiotiques
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Extraction et essai de caractrisation des substances antimicrobiennes produites par une souche dactinomycte halophile modre.
DJINNI Ibtissem1, SOUAGUI Samiha1, KECHA Mouloud1 et BENALLAOUA Said1.
1
Laboratoire de Biochimie Microbienne / LMA, FSNV, Universit A.MIRA, 06000 Bejaia- Algrie
e-mail : ibtissem.djinni@yahoo.fr
RESUME Face la rsurgence des maladies infectieuses dj connues (paludisme, tuberculose, etc.) et lapparition de nouvelles autres encore plus mortelles (telles que le SIDA, la grippe aviaire, etc.) mais galement le phnomne de multirsistance bactrienne qui connat une augmentation ces dernires annes, sont devenues la proccupation majeure des industries pharmaceutiques et de la communaut mdicale tant du point de vue de la mise en vidence de nouvelles molcules, sres mais galement efficaces que de celui du mcanisme daction et activit biologique. Lune des stratgies adoptes est lisolement et lidentification de souches dactinomyctes productrices dantimicrobiens issus des environnements peu communs voir extrmes. Sur un total de 35 souches modrment halophiles isoles de la rgion de Bjaia, lisolat S17 a t slectionn pour son importante activit la fois antibactrienne et antifongique vis--vis de 6 bactries, de 3 champignons filamenteux et dune levure. Les activits antibactriennes et antifongiques de cet isolat sont extraites, aussi bien partir du myclium qu partir des filtrats de cultures, par cinq solvants de polarit croissante. Des rsultats positifs ont t obtenus uniquement avec les filtrats de culture. Les extraits organiques bruts de la souche S17 ont fait objet dune semi purification sur plaque de gel de silice (CCM) afin de dterminer le meilleur systme dlution, de ce fait, le systme thanolammoniaque-eau (60/20/20) sest rvl tre le meilleur. Des rvlations chimiques et une tude spectroscopique ont t ralises sur les extraits bruts de ces filtrats de culture et les rsultats indiquent labsence de composs polyniques mais aussi, que nos substances semblent avoir des proprits analogues aux molcules de type polythers dont les caractristiques biologiques et physicochimiques semblent concider avec nos rsultats : action exclusive sur les bactries Gram +, champignons filamenteux et levures, et raction intense avec la vanilline-H2SO4. Mots cls : Actinomyctes halophiles, isolement, activit antibiotique, Streptomyces.
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ATELIER
BIOTECHNOLOGIE ET BIOINFORMATIQUE
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Welcome to High Definition Genomics

Aouatef Ait-Lounis
Facult des Sciences Biologiques, USTHB
Abstract. Chromatin immunoprecipitation (ChIP) is a technique for assaying proteinDNA binding in vivo. In a ChIP experiment for DNA-binding proteins, DNA fragments associated with a specific protein are enriched. The DNA-binding protein is crosslinked to DNA in vivo by treating cells with formaldehyde and the chromatin is sheared by sonication into small fragments, which are generally in the 200600 bp range. An antibody specific to the protein of interest is used to immunoprecipitate the DNAprotein complex. Finally, the crosslinks are reversed and the released DNA is assayed to determine the sequences bound by the protein. The introduction of microarrays allowed the fragments obtained from ChIP to be identified by hybridization to a microarray (ChIPchip), therefore enabling a genome-scale view of DNAprotein interactions. In ChIPseq, the DNA fragments of interest are sequenced directly instead of being hybridized on an array. ChIP-chip and ChIPseq experiments generate large quantities of data, and effective computational analysis will be crucial for uncovering biological mechanisms. Genome-wide mapping of proteinDNA interactions is essential for a full understanding of transcriptional regulation. A precise map of binding sites for transcription factors, core transcriptional machinery and other DNA-binding proteins is vital for deciphering the gene regulatory networks that underlie various biological processes. Key words: Chromatin immunoprecipitation ChIPchip and microarray ChIPSeq - transcription factor proteinDNA interaction. Rsum . Limmunoprcipitation de la chromatine, appele galement ChIP (pour Chromatin ImmunoPrecipitation ) est une technique qui permet didentifier les sites de liaison dun facteur de transcription sur lADN in situ. Le ChIP consiste purifier des complexes ADN-protines lis aprs un traitement par du formaldhyde. Aprs fixation de la chromatine (de lADN et des protines qui lui sont associes) par un traitement au formaldhyde, lADN est cliv en fragments de 200 600 paires de bases par sonication. La protine dintrt, un facteur de transcription par exemple, est ensuite immunoprcipite et lADN auquel elle tait lie est rcupr, purifi et amplifi par PCR avec des amorces choisies, complmentaires des rgions promotrices dintrt. Lapparition des puces haute densit ou des nouvelles techniques de squenage ont permis de cartographier lchelle du gnome les sites dinteraction entre lADN et des protines rgulant lexpression des gnes. La technologie de ChIP sur puces ADN (ChIP-onchip) ou par squenage massif (ChIP-seq) rcemment propose offre des perspectives intressantes dans le domaine de la rgulation gnique. Ces mthodologies reposent sur des analyses 'Genome-wide' qui demande des traitements bioinformatiques multiples, pas toujours bien dfinis (e.g. pour ChIP-seq). Mots cls : Immunoprcipitation de la chromatine ChIPchip Puce ADN- ChIPSeq Facteurs de transcriptions Interaction ADN protine.
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COMMUNICATIONS AFFICHEES
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P1 Action du peroxynitrite dans les altrations cellulaires et tissulaires induites par lantigne S, lors des uveites.
Lahmar-Belguendouz K1, 2 , Belguendouz H 1., et Touil- Boukoffa C1. 1 : Equipe Cytokines et NO Synthases-LBCM- F.S.B-U.S.T.H.B. 2 : Dpartement des sciences de la nature, Universit de Tebessa. RESUME
Luvite est un terme englobant une multitude de maladies inflammatoires de la tunique uvale de lil pouvant conduire la ccit. Elle peut tre dtiologie auto-immune. La protine majeure implique dans linitiation des uvites auto-immunes est lantigne S (Ag-S), localis essentiellement dans les photorcepteurs. Des travaux prcdents raliss par notre quipe, ont montr que les explants rtiniens sains mis en culture en prsence de lAg-S subissaient des altrations cellulaires et structurales et produisaient du monoxyde dazote (NO) quantifi travers ses drivs savoir les nitrites et les nitrates. Le peroxynitrite, une autre molcule drive du NO rsultant de la raction de ce dernier avec lO2- au niveau des sites inflammatoires, est connue pour sa toxicit cellulaire et tissulaire au cours de diffrentes pathologies. Afin de situer leffet du peroxynitrite et de lantigne S au niveau des diffrentes tuniques oculaires, des explants oculaires bovins sains ont t mis en culture en prsence dun donneur de peroxynitrite (SIN-1) des concentrations croissantes de 100-500 M pendant 24h et 48h et dautres explants en prsence de lAg-S une concentration de 10 g et 20 g /ml pendant la mme dure. Les rsultats obtenus ont montr de hautes similitudes entre les altrations induites par lAg-S et celles induites par le peroxynitrite en particulier, au niveau de la corne, la rtine et la chorode. A travers nos rsultats, Il apparat que le peroxynitrite joue un rle dterminant dans la gense des lsions symptomatiques de luvite et pourrait tre utilis comme bio-marqueur de lvolution de la maladie.
Mots cls : uvite, monoxyde dazote, peroxynitrite.
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P2 In vitro Nitric Oxide and Steroid Hormones relationship during Behet Disease: Role in patients physiopathological status
M.L. Ahmedi1, H. Belguendouz1, D. Messaoudene1, K. Lahmar- Belguendouz1, D. Hartani2, C. TouilBoukoffa1
1
'cytokines and NO Synthases' team, LBCM- FSB,-USTHB, Algiers, Algeria, 2Clinique d'ophtalmologie, CHU Mustapha Bacha, Algiers, Algeria
RESUME
Behet disease (BD) is a systemic chronic inflammatory disorder that is considered as vasculitis. It is characterized by significant elevation in nitric oxide (NO) levels both in vivo and in vitro. The sex ratio (male to female) is 3/1. However, despite of this fact, literature didn't report any differences in sexual hormones levels between patients with BD and control subjects. In order to investigate in vivo steroid hormones levels and their effect on NO production during BD, 85 patients with BD (66 men, 19 women) and 35 control subjects (20 men, 15 women) were included in this study. Plasma steroid hormones (progesterone, testosterone and cortisol) were evaluated by immunoassay (Biomrieux, France). PBMC were cultured in RPMI 1640 with 5% FBS, 2 mM of glutamine in presence of either testosterone (1ng/ml), oestradiol (40pg/ml) or cortisol (100ng/ml). NO levels in cultures supernatants were estimated by modified Griess method. We found that Testosterone and progesterone levels had no significant differences between patients and controls (p=0.23, p=0.52). In contrast, cortisol showed significant diminution during BD when compared to controls (p< 0.01). The cellular response to oestradiol and cortisol showed a significant reduction in NO rates (p< 0.05) while testosterone significantly increased its production (p< 0.05). In conclusion, our results showed normal sex hormones levels. However, their effect on NO production suggests that BD physiopathology is more reliable to cellular response. Reduced corticosteroid production during BD may contribute to the exacerbated inflammatory status as cortisol inhibited NO formation. Mots cls: Steroid Hormons, Nitric Oxide, Behcet Disease
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P3 Mise en place dun modle duvite auto-immune exprimentale induite par lIRBP : Implication du monoxyde dazote
Arroul-Lammali Amina, Djeraba Zineb, Belguendouz Houda, Messaoudne Djamel & Touil-Boukoffa Chafia.
Equipe Cytokines et NOSynthases FSB-USTHB RESUME Luvite est une inflammation intraoculaire formant lune des manifestations cliniques les plus svres de la maladie de Behet. LIRBP, auto-antigne rtinien, a t impliqu dans la physiopathologie de cette affection. Plusieurs travaux ont dmontr une production leve de monoxyde d'azote (NO) au cours de la pathologie. Nous avons donc t amens la mise au point dun modle exprimental, afin de vrifier l'implication de cette bio-molcule. A cet effet, nous avons induit luvite auto-immune exprimentale (UAE) chez le rat Wistar par lIRBP. La production du NO in vivo dans les plasmas, in vitro au niveau des surnageants de culture des splnocytes et localement, au niveau des yeux de rats Wistar immuniss par lIRBP a galement fait lobjet de notre tude. Nos rsultats montrent que la souche Wistar utilise dans les exprimentations est sensible linduction de lUAE par lIRBP. En effet, une inflammation intraoculaire ainsi quune dsorganisation de larchitecture de la rtine ont t observes. La production du NO in vivo, in vitro et localement a montr une augmentation significative en comparaison avec les rats tmoins et contrle (CFA+PBS). De plus, le pic de production du NO prcde celui de lapparition de luvite et des dsordres histopathologiques au niveau des rtines. Nos rsultats suggrent limplication du NO durant les phases prcoce et aigue de lUAE et le situent en tant que marqueur cl de mauvais pronostic dans le suivi des manifestations inflammatoires observes lors de latteinte oculaire associe la maladie de Behet. Mots cls : Uvite auto-immune exprimentale/ rat Wistar/ IRBP/ monoxyde dazote.
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P4 Mise en place dun modle duvite auto-immune exprimentale induite par lantigneS : Implication du Monoxyde dazote.
Djeraba, Z., Arroul-Lammali, A., Belguendouz, H., Messaoudene, D., Touil-Boukoffa, C Equipe Cytokines et NO Synthase. LBCM-FSB-USTHB.
RESUME
Luvite, constitue lune des manifestations les plus svres du syndrome de Behet. LAg S, protine rtinienne, a t fortement incrimine dans la physiopathologie de cette affection. Elle est utilise chez diffrents modles exprimentaux, afin dinduire luvite auto-immune exprimentale (UAE), modle de luvite humaine. La production du monoxyde dazote (NO) au cours de lUAE a t fortement discute par plusieurs travaux chez lhomme et sur un modle animal utilisant le rat Lewis. Nos objectifs ont port sur la mise au point dun modle exprimental duvite Behet induite chez le rat Wistar en utilisant comme effecteur lAg S. Lvolution de la production in vivo et in situ du NO a t poursuivie sur ce modle tabli au pralable. Une tude histologique du tissu neuro-rtinien a t ralise en parallle afin dy localiser les effets dltres de lAg S et sa relation avec la production du NO. Nos rsultats ont montr une augmentation significative des taux du NO dans les plasmas et les homognats des yeux des rats Wistar traits avec lAg S ; avec une diffrence de production selon les phases cliniques de lUAE. LAg S a induit des effets dltres notables sur le tissu neurortinien des rats Wistar traits et la couche des photorcepteurs semble en tre la plus sensible. Une production maximale de NO a t observe durant la phase prcdant les altrations touchant le tissu neurortinien. Le NO pourrait constituer un bio-marqueur de mauvais pronostic au cours de cette affection. Ainsi, le stress oxydatif, pourrait tre considr comme ltape pathologique initiale menant la destruction des photorcepteurs.
Mots cls : luvite auto-immune exprimentale, Ag S, le monoxyde dazote, destruction des photorcepteurs.
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P5 Analyse de lexpression des protines symplekine et -catenine impliques dans les jonctions urothliales tumorales.
Aslane M* ., Baz H.
Laboratoire de biologie physiologie cellulaire et molculaire. Ecole Normale Suprieure (ENS de Kouba, Alger- Algrie). * Dpartement de biologie molculaire et cellulaire-Universit de Mouloud Mammeri (Tizi-Ouzou- Algrie). bpacom@yahoo.fr
RESUME La symplekine et la -catenine sont des protines localises au niveau des jonctions cellulaire, font partie dun complexe protique cytoplasmique li la surface interne des jonctions, ces deux protines participent lchafaudage par leur liaison au cytosquelette. Pendant la prolifration cellulaire la symplekine et la -catenine ont t localises dans le noyau lies des complexes de protines nuclaires intervenant dans la rgulation de la transcription gntique. La progression tumorale est marque par une volution du degr de lindiffrenciation cellulaire, qui est le tmoin dune dsorganisation remarquable des jonctions intercellulaires et une perte de lancrage la matrice cellulaire. Nous nous somme pos la question, si laltration au niveau des jonctions cellulaires pendant la progression des carcinomes urothliaux sexprime par une variation dexpression de la symplekine et de la -catenine. Notre tude a consist analyser lexpression de la symplekine et de la -catenine par lectrophorse sur gle de polyacrilamide SDS-page, ralise sur des biopsies humaines de tumeurs de la vessie de diffrents grades de malignit dtermins par une coloration lHmatoxyline osine. Nos rsultats ont montr que les taux dexpression de la symplekine et de la cytoplasme diminuent progressivement en fonction de lvolution du grade tumorale. -catenine dans le
Ceci nous a permis de suggrer que ces deux protines se dtachent des jonctions et migrent vers le noyau afin dactiver la prolifration cellulaire. La symplekine et la -catenine peuvent servir de facteurs pronostiques dvolution tumorale et cibles pour une thrapie gnique. Mots cls : symplekine, -catenine, cancers urothliaux, jonction cellulaire, indiffrenciation cellulaire.
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P6 APPORT DE LA RADIOBIOLOGIE DANS LA THERAPIE ANTIVENIMEUSE OPHIDIENNE
Bennacef-Heffar N., Boukhalfa-Abib H., Oussedik-Oumehdi H et Laraba-Djebari F

Laboratoire de Biologie Cellulaire et Molculaire, Facult des Sciences Biologiques, Universit des Sciences et de la Technologie Houari Boumdienne Bab Ezzouar, Alger, Algrie. Laboratoire de Recherche et de Dveloppement sur les Venins, Institut Pasteur dAlgrie. E-mail: flaraba@hotmail.com - Fax: 00213 21 91 72 21
Rsum
La toxicit des venins de serpents constitue une difficult majeure dans la prparation des srums anti-viprins efficaces pour le traitement des envenimations ophidiennes. Lirradiation gamma a t applique pour amliorer la qualit des immun-srums. Les venins de Cerastes cerastes et de Vipera lebetina ont t irradis en utilisant deux doses de rayons gamma (1 et 2 kGy) mises par le Cobalt (60Co). Aprs irradiation, la toxicit de ces venins est attnue jusqu 10 DL50. La filtration molculaire des diffrents venins irradis a permis dobtenir des profils chromatographiques totalement modifis par rapport ceux des venins natifs. De mme, l'analyse lectrophortique des venins natifs et irradis par SDS-PAGE, rvle une htrognit dans l'lectrophorgramme des chantillons irradis. Ltude biochimique de lactivit protolytique des venins de Cerastes cerastes et de Vipera lebetina, a rvl une diminution de cette activit enzymatique. Cette rduction est dose-dpendante. En outre, lactivit phospholipasique du venin de Vipera lebetina sest rvle radiosensible car totalement abolie aprs lapplication de la dose de 2 kGy, alors que cette activit est radiorsistante pour le venin de Cerastes cerastes aux doses appliques. Dautre part, lirradiation gamma semble prserver les proprits immunologiques des molcules des venins de serpents. En effet, limmunisation de lapins avec les diffrents venins dtoxifis (1 et 2 kGy) a permis dobtenir des immun-srums ayant des titres en anticorps levs et une meilleure neutralisation de la toxicit des venins de Cerastes cerastes et de Vipera lebetina. De plus, les rsultats du Western blot ont rvl que les anticorps anti-venins dtoxifis ont une meilleure immunoractivit avec les diffrents constituants des venins natifs compars ceux des anti-venins natifs.
Mots cls : Venin, Viperidae, Irradiation gamma, Dtoxification, Immunognicit.
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Dtoxification des contituants du venin dAndroctonus australis hector par irradiation gamma : Approche Immunoprotective
Boussag-Abib Lila et Laraba-Djebari Fatima

Laboratoire de Biologie Cellulaire et Molculaire, Facult des Sciences Biologiques, USTHB. Laboratoire de Recherche et Dveloppement sur les Venins Institut Pasteur dAlgrie. Courriel: flaraba@ihotmail.com
RESUME Le dveloppement dune protection efficace et slective contre la toxicit des venins de scorpion est dune trs grande importance clinique. Il est donc ncessaire de dvelopper des techniques qui pourraient rduire la toxicit des venins tout en gardant leur pouvoir immunognique. Lapplication des rayonnements ionisants gamma a t employ avec succs pour dtoxifier le venin dAndroctonus australis hector toute en prservant ses proprits immunogniques et antigniques (Abib et LarabaDjebari, 2003). Ces caractristiques nouvelles des composants du venin dAah aprs irradiation, permet douvrir des perspectives dans les essais dimmunoprotection. Des exprimentations ont t ralises sur des animaux pralablement immuniss avec le venin ou sa fraction toxique Ftox-G50 irradis, aprs 1, 3 et 6 mois ces animaux sont envenimes avec le venin natif. Un mois aprs limmunisation avec les deux immunognes non toxiques, il a t observ une protection quasi-totale des animaux contre des doses de 3 DL50. Ce pouvoir protecteur des animaux persiste 3 mois et 6 mois aprs immunisation avec le venin irradi et ce jusqu une dose de 5 DL50 et 4 DL50 du venin natif respectivement. Une meilleure protection est observe lorsque les animaux sont immuniss avec la fraction Ftox-G50 ou le pouvoir protecteur atteint des doses de 4 DL50, 10 DL50 et 8 DL50 respectivement 1, 3 et 6 mois aprs immunisation. Limmunoprotection observe est probablement due la prsence et la persistance des anticorps neutralisants circulants dans lorganisme des animaux immuniss.
Mots cls : Venin, Fraction Ftox-G50, Irradiation gamma, Immunoprotection.
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P8
DETOXIFICATION DE LA TOXINE BOTULIQUE PAR RAYONNEMENT GAMMA : PRODUCTION DANTICORPS
AMROUCHE Lynda, MERAD Asma-Saida et LARABA DJEBARI Fatima
Laboratoire de biologie cellulaire et molculaire, facult des sciences biologiques, USTHB.Bab Ezzouar, Alger, Laboratoire de Recherche et dveloppement sur les venins Institut Pasteur dAlgrie. Centre National de Rfrence des anarobies et du botulisme de lInstitut Pasteur dAlgrie.
RESUME Les toxines botuliques se divisent en sept (07) toxinotypes (A, B, C, D E, F et G). La toxine A est la forme la plus grave. Une confirmation rapide en cas de suspicion clinique est indispensable. Notre tude a pour but principal de dvelopper des techniques de production danticorps neutralisants. Ces anticorps seront utiliss pour le typage des toxines et lidentification rapide des clostridies toxinognes. Une souche de Clostridium botulinum de Type A 453+ particulirement virulente a t isole et identifie partir du fromage fondu. La toxine BoNT A est produite sur bouillon TGY. Aprs purification partielle, cet antigne a servi la prparation dimmuns srums.
Par un procd dirradiation gamma en utilisant la source 60Co, la toxicit de la BoNT A est attnue avec diffrentes doses dirradiation. La caractrisation immunologique des immuns srums obtenus aprs hyperimmunisation de lapins avec la BoNT A irradie 20 KGy rvle que les proprits immunologiques de la toxine sont rsistants aux rayonnements ionisants gamma. Ces immun-srums prsentent un titre et une capacit neutralisante plus levs que ceux obtenus avec la toxine native.
Mots cls : Toxine botulique A, irradiation gamma, proprits immunologiques, immuns srums, titre neutralisant
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P9 Les anticorps polyvalents : Leur utilisation en Immunothrapie antiscorpionique
Mendil A., Adi-Bessalem S., Saidi H., Sami-Merah S., Hammoudi-Triki D. et Laraba-Djebari F.
Laboratoire de Biologie Cellulaire et Molculaire, Facult des Sciences Biologiques, USTHB Bab Ezzouar, Alger, Algrie. Laboratoire de Recherche et Dveloppement sur les Venins, Institut Pasteur dAlgrie.
RESUME En Algrie, limmun srum produit par lInstitut Pasteur dAlgrie est un srum monovalent dirig contre les molcules dun seul venin qui est celui dAndroctonus australis hector. La difficult didentification du scorpion incrimin lors dune piqure, tant par les victimes que par le personnel de sant nous a conduit prparer un srum polyvalent qui pourrait tre dindication plus large et plus performante. Aprs prparation et purification dun immun-srum dirig contre trois espces endmiques (Androctonus australis hector, Buthus occitanus tunetanus et Androctonus ameurexi), les anticorps obtenus sous forme de fragments F(ab)2 ont t caractriss. Leur capacit neutralisante des dsordres histopathologiques et biochimiques a t value.
Cet immun-srum polyvalent semble tre dou dune importante capacit neutralisante. En effet, son administration 30 minutes aprs envenimation, permet une restauration quasi-totale des structures tissulaires altres (myocarde, parenchyme pulmonaire et hpatique) avec normalisation des activits enzymatiques sriques (GOT/GPT, LDH et CPK), et rduction des perturbations des paramtres mtaboliques (glycmie, ure, cratinine, cholestrol) induites par les venins. Les rsultats exprimentaux ont montr que limmun srum constitu de fragments F(ab')2 polyvalents administrs dans un dlai rapide (30 min) est capable de neutraliser la quasi-totalit des altrations observes suite lenvenimation. Il en ressort de cette tude, que cet immun-srum pourrait tre dun grand apport pour couvrir tous les polymorphismes existant dans notre pays.
Mots cls : Venin, Anticorps polyvalents, Immunothrapie, physiopathologie, Mtabolisme.
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P10 Formats danticorps : Utilisation dans un schma thrapeutique aprs envenimation exprimentale
Sami-Merah S, Adi-Bessalem S., Mendil A, Hammoudi-Triki, D et Laraba-Djebari F.
Laboratoire de Biologie Cellulaire et Molculaire, Facult des Sciences Biologiques, Universit des Sciences et de la Technologie Houari Boumediene EL Alia BP 32, 16111, Alger, Algrie Laboratoire de - Recherche et de Dveloppement sur les Venins, Institut Pasteur dAlgrie.
RESUME La taille des anticorps utiliss actuellement en immunothrapie est souvent un sujet de controverses. Leur efficacit neutraliser les toxines souvent de petite taille est une des difficults majeures surmonter dans les cas cliniques les plus svres. Dans limmunothrapie actuelle, le choix du type de fragments danticorps utiliser (F(ab)2 ou Fab) est un grand dbat autour duquel les chercheurs essayent de justifier leur utilisation en se basant sur leurs proprits pharmacocintiques. les fragments F(ab)2 diffuse lgrement dans le compartiment tissulaire et sont lentement limins. Alors que les fragments Fab prsentent une meilleure diffusibilit et sont rapidement limins. Ces avantages et inconvnients respectifs des deux fragments laissent les producteurs et les cliniciens dpartags pour le choix de la molcule neutralisante. Lefficacit de diffrentes prparations danticorps (fragments Fab, fragments F(ab)2 anti-FtoxG-50 ou leur association F(ab)2/Fab) dans la neutralisation des effets physiopathologiques induits par le venin dAndroctonus australis hector a t teste. Ladministration de ces molcules 30 min aprs envenimation des animaux permet, une neutralisation des toxines, une rparation des dsordres tissulaire et mtabolique avec rtablissement du processus inflammatoire. Lutilisation de chaque molcule danticorps seule permet une neutralisation des toxines circulantes au niveau du srum, du cur et du pancras. Elle permet galement la neutralisation des dmes, des hmorragies et de la leucocytose pritonale ainsi quune normalisation des taux de lIL-6 et des activits enzymatiques (CK, LDH et EPO). Il semble cependant que la combinaison des deux types de fragments F(ab)2/Fab prsente une meilleure efficacit dans la neutralisation de toutes les perturbations causes par les constituants toxiques du venin. Ladministration de limmunothrapie sous forme dun mlange des deux fragments Fab, F(ab)2 pourrait tre une alternative dans le traitement des cas svrement envenims par le venin dAah.
Mots cls : Venin, Toxine Aah II, Inflammation, Immunotherapie
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P11 Action des cytokines Th1 (IFN-/ IL-12/) sur les scolex dEchinococcus granulosus : Immunosurveillance et nouvelle approche thrapeutique
Mezioug Dalila ; Amri Manel ; Bouaziz Samia & Touil-Boukoffa Chafia Laboratoire de Biologie Cellulaire et Molculaire- Facult des Sciences Biologiques- Universit des Sciences et de la Technologie Houari Boumediene. Alger. Equipe Cytokines et NOSynthases
RESUME L hydatidose est une affection parasitaire provoque par le dveloppement chez lhomme et divers mammifres de la forme larvaire dEchinococcus granulosus vivant ltat adulte dans le tube digestif de certains mammifres carnivores essentiellement le chien. En Algrie, lhydatidose est endmique et reprsente par sa frquence un vritable flau. Malgr lapparition, au cours des dernires annes, de mdicaments de plus en plus actifs sur les larves de Cestodes, lhydatidose relve encore largement de la chirurgie. Le systme immunitaire stimul au cours des parasitoses peut tre responsable de ractions adverses ou inappropries parfois svres. En vue de situer limplication du rapport Th1/Th2 dans lvolution de la pathologie, une analyse du profil cytokinique chez les patients atteints dhydatidose a t ralise in vivo et in vitro. Les rsultats obtenus montrent que les teneurs sriques en IFN-, IL-12 et IL-18 mesures chez les patients atteints dhydatidose localisations frquentes et rpondant une volution classique, sont nettement suprieures celles observes chez les porteurs de localisations rares ou des formes complications , chez lesquels une production substantielle en Il-4, IL-10 et IL-13 a t dtecte. Ces rsultats indiquent que la production des cytokines Th1 est prdictive dun bon pronostic, celle des cytokines Th2 laisse envisager des formes dvolution chronique ou des formes complications . Ces rsultats ont t conforts par une tude in vitro portant sur ltude de leffet des cytokines Th1 : IFN-, TNF-, IL-12 et des cytokines Th2 : IL-4, IL-10 sur la viabilit des protoscolex en coculture avec les PBMC et les monocytes/macrophages de patients hydatique. Un tat de souffrance et de dgnrescence trs prononce des protoscolex a t observ avec les cytokines Th1 associes une production substantielle en monoxyde dazote. Cependant, un tat de rsistance des protoscolex a t observ avec les cytokines Th2. Nos rsultats suggrent le rle immuno protecteur des cytokines Th1 en particulier pour lIFN- et lIL-12. Ces donnes suggrent que le parasite Echinococcus granulosus induit une immunosuppression par le biais des cytokines Th2 avec probablement limplication dun systme de rgulation via les Treg ; il est possible que par ce mcanisme, que le parasite se protge des rponses immunitaires de lorganisme qui lhberge. Il chapperait ainsi aux rponses immunitaires. Ces rsultats soulignent le rle cl de lutilisation du ratio Th1/Th2 dans ltablissement dun diagnostic prcoce, dans limmuno surveillance des patients et permettent denvisager de nouvelles stratgies thrapeutiques. Mots cls : Hydatidose ; Cytokines ; stratgies thrapeutiques
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P12 EFFET PREVENTIF DES ANTICORPS ANTI NEUTROPHILES ET DE LACIDE CAFEIQUE DANS UNE TOXICITE HEPATIQUE DE PIROXICAM
Z. Khiari 1 et B. Djerdjouri 1 1 Laboratoire de Biologie Cellulaire et Molculaire, Facult des Sciences Biologiques (FSB). Universit des Sciences et de la Technologie Houari Boumediene (USTHB), BP 32 EL-ALIA 16111, Bab-Ezzouar (Alger).
RESUME
Le but de cette tude est de rechercher leffet des anticorps anti-neutrophiles de rats (IgG anti-PN) et de lacide cafique (CA), un inhibiteur non slectif de la 5-lipooxygnase, sur linfiltration des polynuclaires neutrophiles (PN), lors dune hpatotoxicit de piroxicam. La toxicit a t induite par administration des doses toxiques D45 et D90 de piroxicam, un anti-inflammatoire non strodien non slectif, des rats blancs de souche wistar. Ce gavage est prcd ou non d'une injection intrapritonale dIgG anti-PN de rats ou d'une solution de CA 50mg/Kg. Les dosages des marqueurs du stress oxydatif raliss sur les homognats hpatiques 6 heures aprs linduction de la toxicit, ont montr une augmentation de lactivit myloperoxydase (enzyme marqueur de linfiltration leucocytaire), et du taux de malondialdhyde dun facteur de 2.5 aprs administration de la D45, et avec des facteurs de 7 et 5 respectivement aprs administration de la D90 compars leurs tmoins respectifs. Lactivit catalase est rduite avec des facteurs de 0.62 et 0.36 respectivement avec les doses D45 et D90 de piroxicam. Le stress oxydatif s'est traduit par une statoncrose, une ncrose et une importante infiltration des PN au niveau du tissu hpatique. La neutralisation de l'infiltration des PN par les IgG anti-PN et le CA est associe une prvention des atteintes biochimiques et histologiques induites par les doses toxiques de piroxicam.
Mots cls : Piroxicam, hpatotoxicit, polynuclaires neutrophiles, anticorps anti-neutrophiles de rats, acide cafique.
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P13 Apport de la phytothrapie dans lchinococcose murine
Samia Bouaziz, Manel Amri, Hadjira Zekri-Ariba, Dalila Mezioug & Chafia Touil-Boukoffa Equipe : Cytokines & NO Synthases, LBCM-FSB-USTHB, Alger, Algrie RESUME
La chirurgie reste le traitement de choix de lhydatidose humaine malgr lexistence de quelques essais de chimiothrapie. Nous nous sommes intresss dans ce sens, la recherche de nouvelles options thrapeutiques en utilisant une stratgie phytothrapeutique . Ainsi, ltude de l'effet de lextrait aqueux de graines de nigelle et de gingembre sur lvolution dune chinococcose exprimentale chez la souris Mus musculus a t entreprise. Aprs infestation par injection intra-pritonale de 2000 protscolexes / souris, le traitement t administr une concentration de 1mg/ml. Aprs 7 mois dinfestation, une diminution significative du taux d'enkystement a t note chez les groupes traits. Nous avons observ une rgression importante aprs phytothrapie, la moyenne calcule du taux denkystement chez les groupes traits est respectivement de 5 et 4. A linverse, la moyenne denkystement enregistre chez les tmoins positifs est de 12,4. Notre tude montre le potentiel scolicidal du gingembre et des graines de nigelle in vivo. Toutefois, lidentification des composs responsables de leffet scolicidal apparait ncessaire.
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P14 Action Potentielle anti-Diabtique de Crataegus azarolus

Zidi Sourour1 & Henchiri Chrifa1 Laboratoire de Biochimie, Dpartement de Biochimie, Universit Badji Mokhtar, Annaba RESUME Crataegus azarolus est une plante appartenant la famille des Rosaces, traditionnellement utilise aussi bien dans les pays arabes que dans la rgion dEl Tarf lest de lAlgrie, pour le traitement du diabte. Des rats Wistar albinos rendus diabtiques par injection intra-pritonale dAlloxane et recevant un rgime standard ont t traits avec lextrait aqueux obtenu par infusion des feuilles aux doses de 150(d1) et 300 mg/kg (d2) et par la metformine (28 mg/kg de poids corporel), deux fois par jour. Le traitement a commenc 72 heures aprs injection de lAlloxane et la confirmation de lhyperglycmie. Les rsultats obtenus relatifs la mesure de la glycmie jeun, avant et aprs sacrifice ont rvl quaprs un traitement de 12 jours, la dose d1 a engendr un effet correcteur du diabte suprieur celui de la dose d2 et de la metformine. Une rduction significative des glycmies mesures ( p<0, 001) et de certains paramtres :lipides totaux (p<0,01), triglycrides(p<0,05), cholestrol total(p<0,01), LDL(p<0,01), ure(p<0,01) et cratinine(p<0,01) a t observe. Paralllement une augmentation non significative du taux des HDL chez les individus diabtiques traits a t releve. Ltude histologique du pancras des rats diabtiques a montr que Crataegus azarolus aux deux doses de l'extrait d1 et d2 a exerc une restauration des lots de Langerhans lss au pralable par l'effet de lAlloxane. La prsence rsiduelle de linsuline dans le sang a confirm cet effet. Ltude parallle phytochimique de lextrait a t entreprise et a rvl la prsence de principes actifs tels que les flavonodes, les triterpnes et les saponosides qui pourraient tre lorigine de leffet antidiabtique observ. Les rsultats obtenus suggrent le rle potentiel thrapeutique de Crataegus azarolus . Mots cls : Diabte, Plantes Mdicinales, Phytothrapie, Alloxane, Antidiabtiques, Pharmacognosie.
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P15
CYTOTOXICITE INDUITE PAR LE VENIN DANDROCTONUS AUSTRALIS HECTOR SES TOXINES PURIFIEES
Bekkari Nadjia, Hammoudi-Triki Djelila, *Martin-Eauclaire Marie France et **Laraba-Djebari Fatima
- Laboratoire de Biologie Cellulaire et Molculaire, Facult des Sciences Biologiques, Universit des Sciences et de la Technologie Houari Boumediene EL Alia BP 32, 16111, Alger, Algrie - Laboratoire de - Recherche et de Dveloppement sur les Venins, Institut Pasteur dAlgrie. 3 CNRS UMR3132 CRN2M, IFR Jean-Roche, Universit de la Mditerrane, Facult de Mdecine Nord, Bd Pierre Dramard, 13916, Marseille, Cedex 20, France **Corresponding author: E-mail: flaraba@hotmail.com
RESUME
La toxicit de venin de scorpion, est lie aux neurotoxines qui affectent le fonctionnement des canaux ioniques des cellules excitables et induisent une libration massive de neurotransmetteurs. Les symptmes associs ces perturbations sont variables allant de lhyper, hypothermie, dfaillances cardiaques et volution dans les cas svres avec un dme pulmonaire. Les symptmes sont lis un syndrome inflammatoire Le venin dAndroctonus australis hector (AaH) induit des perturbations du mtabolisme gnral avec des augmentations sriques des mdiateurs marqueurs de la cytotoxicit et de linflammation. Ltude de limplication du venin et de ses composants toxiques, fraction FtoxG50 et toxines purifies, AaH I et AaH II dans linduction de lactivit lytique du complment et laugmentation des taux sriques des cytokines a t entreprise pour expliquer les mcanismes de cette pathognse afin de proposer une thrapie symptomatique qui serait complmentaire limmunothrapie. Le systme du complment srique est activ par le venin dAaH, sa fraction FtoxG50 et ses toxines AahI et AaHII en deux phases, la premire phase dactivation est atteinte avec un taux maximum 3 H, la deuxime phase apparait 24 H. Cette activit est moins importante au niveau pulmonaire, le premier pic est prcoce et apparait 1 H, le second tant plus tardif (48 H). Au niveau hpatique, lactivit lytique apparait en une seule phase retarde. Cependant, laugmentation du taux des cytokines, pro-inflammatoires (IL1 et 6), anti-inflammatoire (IL10), de la molcule dadhsion (ICAM) au niveau hpatique est accentue sous leffet de la toxine AaHII. Lactivit lytique du complment est inhibe par un antagoniste des rcepteurs muscarinique de lactyle choline de (latropine), aucun effet nest observ avec un antagoniste des rcepteurs 1et 2 adrnergiques (le propranolol). Ces rsultats pourraient nous tre utiles pour comprendre les mcanismes par lesquels la cytotoxicit est induite par le venin ou ses composants molculaires.
Mots Cls : Venin, Toxines, Systme du Complment, Inflammation, traitements.
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P16 Biodisponibilit et rle hpato-protecteur du lycopne chez le Rat Wistar.
Yefsah-Idres A.1, 2, Benazzoug Y.2, Othmani K.2, Djenane N.3, Sifer R.3
1. Institut National Agronomique, Alger (Algrie). 2. BRMEC, Laboratoire BCM (FCB/USTHB), Alger (Algrie) 3. Laboratoire de Biologie, CHU de Tizi-Ouzou (Algrie)
RESUME Le rle des espces ractives de loxygne (ROS) et les dommages des biomolcules sont les axes principaux de la recherche actuelle lie aux maladies chroniques. Plusieurs auteurs ont montr le rle des antioxydants, en particulier les carotnodes, dans la protection de lorganisme agissant comme agents inactivant les ROS. Dans ce travail, nous nous sommes intresss la biodisponibilit et au rle du lycopne au niveau hpatique. Lexprimentation a port sur des rats Wistar rpartis en 4 lots. Le protocole exprimental comporte la dtermination du poids corporel et de lindice hpato-somatique (IHS), le dosage du lycopne srique et tissulaire (par HPLC), une tude histologique (fixation au Bouin aqueux, coloration lhmatoxyline-osine) et un dosage srique de certaines enzymes du bilan hpatique. Nos rsultats ne montrent pas de variations importantes du poids corporel mais la dtermination de lIHS a mis en vidence une hypertrophie du foie. Le dosage du lycopne au niveau hpatique a t prouv. Ltude histologique a permis dobserves une dsorganisation de la structure du parenchyme hpatique et des lsions de type statose chez les rats intoxiqus au CCl4. Les observations effectues montrent que ladministration de lycopne rduit ces altrations. Le dosage de certaines enzymes hpatiques confirme les altrations cellulaires et tissulaires observes avec le CCl4. Une rduction du taux de ces enzymes est note chez les rats intoxiqus et traits au lycopne. En conclusion, cette tude met en exergue dune part la biodisponibilit du lycopne et dautre part son rle hpato-protecteur.
Mots cls : Lycopne -Biodisponibilit -Altrations hpatiques -Rats.
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P17 Hyperhomocystinmie et processus athrosclreux chez Psammomys obesus
Zerrouk F.1 ; Hamdis N.1 ; Othmani-Mecif K.1 ; Khedis L.1 ; Chaouad B.1 ; Ghoul A.1 ; Rezkallah N.2 ; Neggazi S. 2 ; Boumaza S.2 ; Berdja S2. ; Aouichat-Bouguerra S.2 ; Cherifi M.3 ; Benazzoug Y.1
1
BR. MEC ; 2PPCM. FSB/USTHB. BEZ. Alger ; 3Lab. Bioch. Parnet .HDey Alger
RESUME
Actuellement, il est bien tabli que lhyperhomocystinmie modre est un facteur de risque des maladies cardiovasculaires dont lathrosclrose. Lobjectif de ce travail, est de mettre en vidence les troubles biochimiques et histologiques lis une surcharge en mthionine chez le rat des sables, Psammomys obesus. La mthionine est administre par injection intra-pritonale raison de 70 mg/Kg de poids corporel / jour pendant 6 mois. Cette administration semble affecter lensemble des paramtres biochimiques plasmatiques. Par ailleurs, lhomocystinmie augmente dun facteur 7,6 au terme de lexprimentation. Ltude biochimique est complte par une lecrophorse horizontale des lipoprotines plasmatiques de Psammomys obesus soumis la mthionine pendant 3 mois. Lanalyse des lipidogrammes met en vidence un dsquilibre des fractions lipoprotiques marqu par une importante diminution de 70% des HDL et une augmentation de 35% des VLDL-LDL associe lapparition de la lipoprotine (a). Les changements structuraux rvls par les techniques histologiques et histochimiques appropries montrent que lhyperhomocystinmie altre lorganisation et la structure des diffrentes couches du cur et de laorte. Ces altrations sont reprsentes par des agrgations sanguines, une hypertrophie de lendothlium, une modification de la composition de la matrice extracellulaire marque par une accumulation de collagnes et de protoglycannes, et une dsorganisation de la trame lastique aortique. Un paississement de lpicarde et de ladventice est observ. Nos rsultats montrent que les altrations engendres par une hyperhomocystinmie perturbent non seulement la biochimie plasmatique mais galement et fortement la structure cellulaire et tissulaire de la paroi cardiaque et vasculaire. Mots-cls : hyperhomocystinmie, athrosclrose, Psammomys.
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P18 Corrlation hyperhomocystinmie - dsordres lipidiques plasmatiques et tissulaires, chez le rat Wistar Rattus norvegicus.
Ghoul A1. ; Fernane A1. ; Taghlit A1. ; Othmani K1. ; Chaouad B1. ; Zerrouk F1. ; Cherifi M3.; Griene L4. ; Yargui L 5. ; Aouichat-Bouguerra S2. ; Benazzoug Y1.
1. Biochimie & remodelage de la matrice extracellulaire. LBCM. FSB/USTHB BP32 El Alia. Bab Ezzouar.16111. Alger. Algrie 2. Physiopathologie cellulaire & molculaire. LBPO. FSB/USTHB BP32 El Alia. Bab Ezzouar.16111. Alger. Algrie 3. Laboratoire de biochimie Hpital Parnet. Hussein Dey.Alger. 4. Laboratoire dendocrinologie.CPMC .Hpital Mustapha. Alger. 5. Laboratoire central de lhpital Mustapha Bacha. Alger
RESUME
Plusieurs mcanismes ont t avancs, dont la thorie lipidique, pour expliquer les proprits athrognes de lhomocystine (McCully 1969). Nous avons prcdemment montr que lhyperhomocystinmie constituait un f acteur de risque des maladies cardiovasculaires. Nous nous sommes propos dtablir la corrlation hyperhomocystinmie - statut lipidique. Les rats Wistar sont rpartis en un lot tmoin et un lot soumis une administration de mthionine raison de 200 mg/Kg de poids corporel / jour pendant 6 mois. Le suivi des animaux a comport une pese hebdomadaire et des ponctions sanguines mensuelles pour le dosage de lhomocystine (mthode FPIA), du cholestrol total et des triglycrides (mthode enzymatique colorimtrique). Les lipoprotines plasmatiques ont fait lobjet dune analyse grce une lectrophorse horizontale sur gel dagarose. En fin dexprimentation, les rats sont sacrifis, le testicule, objet de ce travail, est prlev, rapidement pes et immerg dans le Folch pour valuer les lipides totaux. Nos rsultats montrent, que ladministration chronique de mthionine pendant 6 mois engendre chez le rat Wistar, une hyperhomocystinmie modre. Celle-ci ne semble pas affecter le poids corporel ainsi que le poids moyen du testicule. Nous avons enregistr des fluctuations similaires des lipides plasmatiques (cholestrol total et triglycrides) dans les 2 groupes de rats. Par contre lanalyse des lipoprotines plasmatiques met en vidence chez les rats expriments, une diminution des particules protectrices associe une augmentation des particules athrognes. En conclusion, nos rsultats montreraient que lathrognicit de lhomocystine serait mdie en partie par la dtrioration du statut lipidique.
Mots cls : AthrosclroseHyperhomocytinmie-Lipides
Folch J.; Lees M and Stanly G.H.S. (1957). A simple method for the isolation on purification of total lipids from animal tissues. J. Biol. Chem., 226: 497509. McCully K.S. (1969). Vascular pathology of homocysteinemia: implications for the pathogenesis of arteriosclerosis. Am. J. Pathol., 56 : 111128. Richmond W.(1973). Preparation and proprieties of cholesterol oxidase from Nocardia sp.And its application to the enzymatic assay of total cholesterol in serum. Clin. Chem., 19 : 1350 1356. Yong D. L.; Pestaner L.; Gillerman V. (1975). Effects of drugs on clinical laboratory tests.Clin. Chem., 21: 1D-432D
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HYPERHOMOCYSTEINEMIE, SYSTEME CARDIOVASCULAIRE, GESTATION
K. Othmani-Mecif 1, L. Khedis 1, F. Zerrouk 1, B. Chaouad 1, A. Ghoul 1, A. Fernane 1, A.Taghlit 1, A. Yargui 2, S. Aouichat 3, Y. Benazzoug1.
1.
MEC, BCM, FSB ; 2 Lab. Biochimie, CHU M. Bacha ; 3PCM, LBPO, FSB /USTHB, Alger
RESUME
Lhyperhomocystinmie induite par surcharge en mthionine constitue un facteur de risque de maladies cardiovasculaires. Au cours de la gestation, les vaisseaux sanguins sont soumis aux stress physique et biochimique. Peu de travaux portent sur la triade homocystine-vaisseaux sanguins- gestation. Notre travail value linfluence de ltat gestationnel sur le systme cardiovasculaire prouv par lhyperhomocystinmie induite. Lexprimentation consiste administrer de la Met (500 mg/jour) pendant 3 mois ; quatre lots de lapins adultes (n=8 chacun) sont constitus : lot tmoins non gestantes (TNG), lot tmoins gestantes (TG), lot non gestantes avec Met (NGM) et lot gestantes avec Met (GM). Lexcs de Met lve la teneur en homocystine de 1000 % pour le lot NGM et de 12% pour les GM. Le rapport des lipoprotines / atteint la valeur 3,07 vs 2,17 sous leffet de la Met (NGM) (p<0,01) alors quil est rduit chez les GM (2,44 vs 2,37). La Met en surcharge rduit lactivit de la lactate DHase et de la phosphatase acide chez les NGM, la teneur lipidique chez les GM vs TG (90 31 g/mg vs 190 70 g/mg) (p<0,05), les triglycrides accumuls au cours de la gestation et la teneur en cholestrol aortique pour ce lot (GM) (p<0,05). Par contre, lexcs de Met provoque chez les NGM, une lgre augmentation des triglycrides, une modification de la structure aortique au niveau de lintima et de la mdia (nointima). Une importante dsorganisation du tissu cardiaque est observe, avec apparition despaces entre les cardiomyocytes et fibrose interstitielle.
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P20 Hyperhomocystinmie induite par une hypothyrodie et processus athrosclreux chez Psammomys obesus
Chaouad B1, Neggazi S2, Sahraoui A2, Zerrouk F1, Ghoul A1, Othmani-Mecif K1, Cherifi M3, Griene L4, Aouichat-Bouguerra S2, Benazzoug Y1
1 BRMEC et 2 PPCM, FSB/USTHB Bab Ezzouar, Alger. 3 Lab. Bioch, Hpital Parnet, Alger. 4 Hormonologie CPMC. CHU Mustapha Alger.
RESUME
L'hypothyrodie est un facteur de risque des maladies cardiovasculaires associe une hyperhomocystinmie et hypercholestrolmie. Objectif : Nous avons tudi la relation hypothyrodie-hyperhomocystinmie-et processus athrosclreux chez le Rat des sables (Psammomys obesus). Mthodes : Les Rats des sables sont rpartis en un lot tmoin nourri de plantes halophiles et un lot trait recevant le mme rgime alimentaire associ une administration orale de carbimazole (0,03%) pendant 6 mois. Lensemble des animaux a fait lobjet de prlvements sanguins en vue du dosage de certains paramtres biochimiques plasmatiques (cholestrol, homocystine), dhormones thyrodiennes et de lanalyse des lipoprotines par lectrophorse horizontale. Les techniques histologiques ralises en fin dexprimentation ont permis une tude histomorphomtrique de la paroi aortique de Psammomys obesus. Rsultats : Nos rsultats montrent chez les animaux hyperhomocystinmiques, une diminution de la T3 et T4, une hyperhomocystinmie et une hypercholestrolmie, une diminution des HDL associe une augmentation des LDLVLDL. Lanalyse histologique de laorte a mis en vidence chez les rats des sables hyperhomocystinmiques, une importante agrgation sanguine et des altrations cellulaires (changement dorientation des cellules musculaires lisses, prolifration des fibroblastes adventiciels). La composition de la matrice extracellulaire est modifie par une accumulation de collagnes et de protoglycannes, une dsorganisation et dgradation de la trame lastique. Lensemble des altrations observes caractrise linstallation dun processus athrosclreux. Conclusion : Les rsultats obtenus montrent que lhypothyrodie constitue un facteur de risque des maladies cardiovasculaires chez le rat des sables, Psammomys obesus, via une hyperhomocystinmie et une hypercholestrolmie. Mots cls : Athrosclrose-Hyperhomocystinmie-Hypothyrodie
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P21 MODULATION PARTIELLE PAR LASPIRINE DU STRESS OXYDATIF ET DE LA TOXICITE MITOCHONDRIALE DANS UN MODELE DE DEFAILLANCE CARDIAQUE A LISOPRENALINE
M. Izem-Meziane1 et B. Djerdjouri1
1
RESUME Le stress oxydatif et le dysfonctionnement mitochondrial sont impliqus dans la pathogense des maladies cardiovasculaires. L'aspirine reste lanti-agrgant plaquettaire le plus utilis en clinique. Nous avons tudi leffet de laspirine sur un modle exprimental de dfaillance myocardique (Infarctus du myocarde) induite par lisoprenaline chez le rat Wistar. Les rats reoivent 30 mg/kg daspirine par voie orale une heure avant ladministration de 150 mg/kg disoprnaline par voie sous cutane. Les ventricules gauche (VG) sont prlevs, les dosages de lactivit de la myeloperoxydase (MPO), du monoxyde dazote (NO) et du malondialdhyde (MDA), de lactivit catalase et du taux de GSH ont t mesurs. Les taux de MDA et de NO et lactivit MPO doublent chez les rats traits par lisoprenaline compars aux contrles. Ils sont respectivement de 2,170,15 vs 0,940,05 nmoles/ mg de protines ; 11,320,82 vs 5,580,31 M H2O2/min/ mg de protines et 13,911,34 vs 6,77 0,56 M/mg de protines. Le taux de GSH et de catalase chez les rats traits par lisoprenaline diminue compars au tmoins avec respectivement 24,741,11 vs 15,440,33 nmoles/mg de protines et 21,960,84 vs 10,250,71 U /mg de prot pour la catalase). Le stress oxydatif implique un dysfonctionnement mitochondrial, traduit par une augmentation de la permabilit mitochondriale comparativement aux tmoins (0,100,01 vs 0,0260,003 UDO / mg de protines/5min). Lasprine 30 mg/kg contrle partiellement le stress oxydatif en rduisant lactivit MPO et le gonflement mitochondrial de de prs de 50%/ au trait isoprnaline et
Mots cls : Aspirine, isoprenaline, infarctus du myocarde, mitochondrie, stress oxydatif.
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P22 LA PRODUCTION DANIONS SUPEROXYDE ET DE MONOXYDE DAZOTE PAR LES POLYNUCLEAIRES NEUTROPHILES DE SOURIS BALB/c EST MODULEE DIFFEREMMENT PAR LEISHMANIA INFANTUM LEM 75
N. Tounsi1 et B. Djerdjouri1
1
RESUME Le contrle efficace de linfestation leishmanienne repose sur une production adapte des espces ractives de loxygne (ROS) et de lazote par les Leucocytes neutrophiles et macrophages. Les polynuclaires neutrophiles (PN) inflammatoires de souris BALB/c sont obtenus par aprs une peritonite au thioglycollate de sodium 3%. Leur activit bactricide a t mesure en prsence de Leishmania infantum, LEM75 (Laboratoire National de Rfrence des Leishmanies, Institut Pasteur, Alger), par la methode de rduction du cytochrome C exogne par les anions O2- 550nm et le dosage des nitrites (NO) dans les surnageants de culture (Mthode de Griess).
Les rsultats montrent que le taux dO2- basal (28,870,03 nM de Cytc rduit /106 PN), est augment de 186%, aprs incubation de 106 PN pendant 1 h avec 4x106 promastigotes de L. infantum, LEM75. La production dO2- par les PN pralablement incubs avec L. infantum, LEM75 est potentialise de 347% par une stimulation de 30 min avec 160 nM de phorbol 12 myristate, 13 acetate (PMA). La production de NO dans le surnageant de culture des PN incubs avec 4x10 6 parasites est inhibe de 34.67% par rapport celle de PN prtraits 24 h avec 160 nM de PMA seul (Activit rsiduelle de 65.33% 0. 027 M NO2-/ 106 PN). Lensemble de ces rsultats montrent que les leishmanies internalises interfrent slectivement avec lactivit iNOsynthase des PN, sans modifier la production danion superoxyde par la NADPH oxydase, impliquant les protines kinases c conventionnelles.
Mots cls : LEISHMANIA INFANTUM LEM 75, Leucocytes neutrophiles, anion superoxyde, monoxyde dazote.
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P23 EFFET PREVENTIF DE LASPIRINE SUR LE STRESS OXYDATIF

INDUIT PAR
ESCHERICHIA COLI, CHEZ LE RAT BLANC
I. Rahim1, M. Izem1 et B. Djerdjouri1

1
RESUME
Notre travail avait pour objectif dtudier le rle de laspirine dans la prvention du stress oxydatif induit par un choc septique par Escherichia coli inactive au niveau du ventricule gauche. Le choc septique a t induit chez les rats blancs par deux injections, en intrapritonale, dune dose sublthale de 1,5 109 UFC/kg dEscherichia coli inactive. Les rsultats obtenus montrent une augmentation de prs de 194% du taux du monoxyde dazote (NO) et de 98% le taux de malondialdehyde (MDA) compars taux mesurs dans les homognats de ventricules gauches tmoins, 48 heures aprs induction du choc septique.
Le prtraitement par laspirine 30 mg/kg, 1 heure avant linduction du choc septique prvient le stress oxydatif. Laspirine diminue de prs de 86,3% et de 43,5% respectivement, les taux de NO et de MDA, compars aux taux mesurs dans les ventricules gauches des rats septiques.
Ces rsultats suggrent que la dfaillance cardiaque au cours du choc septique E. coli inactive, implique un stress oxydatif caractris par une augmentation du taux de NO et du MDA. Laspirine un AINS, inhibiteur slectif de la cyclo-oxygnase-1, permet de prvenir le stress oxydatif induit par E.coli inactive au niveau du ventricule gauche.
Mots cls : Choc septique, Escherichia coli, stress oxydatif, malondialdehyde, monoxyde dazote, aspirine.
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P24 MODULATION PHARMACOLOGIQUE DU STRESS OXYDATIF INDUIT CHEZ DES SOURIS BALB/C PAR LEISHMANIA MAJOR (LIPA 1126) - ETUDE A LAIDE DU DICLOFENAC-NA ET DE LA QUERCETINE
R. Belkhelfa-Slimani 1 et B. Djerdjouri 1
RESUME
Une leishmaniose cutane exprimentale induite par le parasite Leishmania major chez des souris BALB/c a t module par le diclofnac-Na (Diclo-Na) et la querctine (Qr). Les souris sont infectes au niveau de la patte postrieure gauche par 3 x 106 promastigotes Leishmania major (MHOM/DZ/2000/LIPA1126, Leishmania, Institut Pasteur, Alger). A la 4me semaine post infection, les souris ont reu 4mg/kg/j de Diclo-Na (lot1), 25 mg/kg /jour de Qr (lot 2) ou du NaCl 0.9% (lot 4). Le volume des pattes des souris infectes augmente paralllement lactivit arginase qui augmente de 351% (p0,01) aprs 9 semaines dinfection. Au contraire, le taux des nitrites est rduit de 36% (p0,02). Le diclo-Na et la Qr rduisent respectivement, la taille de ldme plantaire 94,26% et 76,87% et la charge parasitaire 28 % et 36 %. Lactivit arginase 54% et 42%. Le taux des nitrites (activit iNO synthase) est restaur 75% et 83%, aprs 8 semaines ((p0,001). Le diclo-Na ne rduit pas linfiltration des PN (activit myeloperoxydase, MPO) et des macrophages (activit -naphtyl actate estrase, NAE), alors que la Qr rduit le taux de cellules inflammatoires dans les tissus infects. Ces effets sont confirms par ltude histologique des pattes et ganglions lymphatiques.
Les activits anti oxydantes du diclo-Na et de la Qr ont rduit le stress oxydatif dpendant des phagocytes, les lsions et le taux de parasitisme des tissus infects.
Mots cls : Leishmania major; DiclofnacNa; Querctine; Arginase; Myeloperoxydase, NO synthase, -naphtyl actate estrase.
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P25 EFFET DE LACIDE NIFLUMIQUE SUR LA PHYSIOLOGIE MITOCHONDRIALE ET LA PROLIFERATION DES CELLULES HT-29
I. Amrouche-Mekkioui 1 et B. Djerdjouri 1
1
RESUME La cyclooxygnase 2 (COX-2), une enzyme qui produit hydrolyse lacide arachidonique en prostanodes, a t implique dans la cancrogense colique. Elle intervient en inhibant lapoptose, dont la phase effectrice consiste en l'ouverture des pores de transition de permabilit mitochondriale (PTPC) et la libration de protines apoptognes. Lacide niflumique (Nif) est un anti-inflammatoire non strodien (AINS), qui inhibe les deux isoforme de cyclooxygnases avec un effet prfrentiel sur la COX-2. Nous avons tudi leffet de lacide niflumique (Nif) sur la physiologie des mitochondries de foie de rat (gonflement et respiration), sur la prolifration des cellules HT-29 (ligne pithliale intestinale drives de cancer colique humain) et la libration dIL-8 induites par le TNF et le PMA. Nos rsultats montrent que le Nif provoque louverture des pores de transition de permabilit (PTPC, 100150M) et dcouple la phosphorylation oxydative des mitochondries (10-150M). Le LPS multiplie leur taux de prolifration par un facteur de 3.5 J4. Le Nif 250 M a un pouvoir anti prolifratif sur ces cellules. Le Nif (50-100M) augmente la production dIL-8 par les cellules HT-29 en absence et en prsence de TNF, alors qu des doses plus leves il semble avoir leffet inverse (250 750M). Le Nif na aucun effet sur la production dIL-8 stimule par le PMA. Le Nif possde un effet anti prolifratif potentiel.
Mots cls : HT-29, AINS, mitochondrie, IL-8, TNF, PMA.
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P26
DE LA N-ACETYL CYSTEINE DANS UNE COLITE INDUITE PAR LACIDE ACETIQUE A. Tchakal 1, Z. Khiari1 et B. Djerdjouri1
1
EFFET PROTECTEUR
Laboratoire de Biologie Cellulaire et Molculaire, Facult des Sciences Biologiques(FSB). Universit des Sciences et de la Technologie Houari Boumediene (USTHB). BP 32 EL-ALIA 16111, Bab-Ezzouar (Alger). TEL/FAX: 021. 24. 79. 50 64 postes 942; 021. 24. 72. 17
RESUME La perturbation de lhomostasie redox (ou stress oxydatif) a t impliqu dans la pathogense de la colite ulcrative humaine. Le but de cette tude est de rechercher leffet protecteur de la N-Actyl Cystine (NAC), un antioxydant et prcurseur du glutathion sur linflammation colique.
Des souris blanches (Mus musculatus, souche Swiss) dun poids de 22 2g reparties en 3 lots de 4 souris, ont reu une injection intra-rectale dune solution dacide actique (5%) prpare dans de leau physiologique (NaCl 9), prcde ou non dune injection intra-pritonale de NAC 150mg/kg, 30 minutes avant linduction de la colite.
Les activits enzymatiques myeloperoxydase, MPO (enzyme marqueur de linfiltration leucocytaire), le taux de malondialdehyde, MDA (marqueur de la peroxydation lipidique), le taux du monoxyde dazote, NO ont t mesurs dans les homognats coliques paralllement une tude histologique, 18 heures aprs linduction de la colite. Les taux de NO et de MDA et lactivit MPO ont significativement augment de 1,56, 2,57 et 2,7 fois, par rapport aux tmoins respectifs.
Le traitement avec 150mg/kg de NAC 30 minutes avant linjection de lacide actique, rvle une diminution significative des taux de NO, MDA et de lactivit MPO coliques de 30%, 50% et 44,57%, respectivement. Leffet protecteur de la NAC a t confirm par ltude histologique.
Mots cls : Stress oxydatif, colite, acide actique, N actyl cystine, malondialdehyde, myeloperoxydase, monoxyde dazote.
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P27
LAPOCYNINE, UN INHIBITEUR DE LA NADPH OXYDASE DES PHAGOCYTES, RESTAURE LA BALANCE REDOX DANS UNE COLITE AU TNBS CHEZ LA SOURIS BALB/C
N. Rebbah1, S. Mouzaoui1 et B. Djerdjouri1

1
RESUME
Le disfonctionnement du systme immunitaire de la muqueuse ainsi que le stress oxydatif induit par le dsquilibre du rapport oxydant/anti-oxydant, conduisent laltration de lintgrit et de la fonction du tissu intestinal. Dans ce travail, lapocynine, un flavonode antioxydant a t utilise pour moduler le stress oxydatif dans un modle exprimental de colite ulcreuse induit in vivo par lacide trinitrobenzne sulfonique 30mg/kg. Leffet protecteur de lapocynine sur les atteintes de la paroi intestinale engendres par le TNBS, a t valu par une tude biochimique (dosage du taux de malondialdehyde MDA, de lactivit myeloperoxydase MPO, de lactivit catalase CAT et du taux de glutathion GSH), paralllement une tude histopathologique. Lvolution de la CU est tudie selon un protocole de 3, 7 et 10J. Le TNBS 30mg/kg a induit une inflammation du colon, caractrise par une infiltration de leucocytes neutrophiles (PN). Le relargage des enzymes granulaires comme la MPO, dont le taux est augment de 37% par rapport aux tmoins induit une peroxydation svre du tissu colique (100%). Paralllement, la colite est associe une inhibition lactivit CAT (33%) et une dpltion du taux de GSH (31%), marqueurs du systme antioxydant. Le traitement avec lapocynine 25 mg/kg rduit le taux de MDA et lactivit MPO et restaure lactivit CAT et le taux de GSH. Ceci suggre que linhibition slective de la NADPH oxydase 2 (NOX2), une enzyme caractristique des phagocytes par lapocynine rduit linflammation et les dommages tissulaires engendrs par le TNBS.
Mots cls : Colite ulcreuse, stress oxydatif, TNBS, apocynine.
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P28 COLITE A LACIDE TRINITROBENZENE SULFONIQUE. CARACTERISATION A LAIDE DUN ANTIOXYDANT, LA CURCUMINE
S. Mouzaoui1 et B. Djerdjouri1
1
RESUME
Dans cette tude leffet de la curcumine (CUR), une molcule antioxydante a t recherche dans la modulation dune colite chronique induite exprimentalement par lacide trinitrobezne sulfonique (TNBS) chez des souris de souche Swiss. Linstillation rectale dune dose de TNBS 30 mg/kg, entrane une mortalit de 27% au 14me jour. Ce taux de mortalit est nul aprs une administration quotidienne de 25mg/kg de curcumine administre par voie intra pritonale. Le taux des nitrites, marqueur de lactivit NO synthase (NOS), malonyldialdehyde (MDA, marqueur de la peroxydation des lipides) et de lactivit Myeloperoxydase (MPO, marqueur de linfiltration des polynuclaires neutrophiles, PN) mesurs dans les homognats du colon sont respectivement 5, 4 et 8 fois suprieurs aux taux basals (4.3511.696 M de nitrites/mg de protines, 0.0160.002 DO 532nm q MDA/mg de protines et 0.0640.010 DO 460 nm q MPO/min/mg de protines) 14 jours aprs instillation du TNBS. A partir de 7me jour, le stress oxydatif induit par le TNBS est efficacement contrl aprs le traitement des souris avec la curcumine. La curcumine restaure partiellement lactivit catalase rduite 80% par le TNBS (activit contrle : 1.0150.056 U/mg de protine) partir de 3me jour du traitement, par contre le taux physiologique de GSH (soit 0.5230.075 DO 12nm/mg de protine) nest rtabli quaprs 14 jours. Ces rsultats ont t confirms par ltude histologique.
Ces rsultats suggrent que la curcumine, a rtabli lquilibre des systmes prooxydants/antioxydants en faveur de ces derniers, dans une colite au TNBS, un modle exprimental de la maladie de Crohn.
Mots cls : Acide trinitrobenzne sulfonique, curcumine, stress oxydant.
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P29 UTILITE DES CELLULES VERO DANS LA CARACTERISATION DE LA TOXICITE DE LINDOMETACINE. MODULATION PAR LA N ACETYL CYSTEINE ET LA QUERCETINE
O. Limane2,3 , M. Driss2,3, N. Touabti3, L. Ait Said3, M. Segouani3 et B. Djerdjouri1 1 Laboratoire de Biologie Cellulaire et Molculaire, Facult des Sciences Biologiques (FSB). Universit des Sciences et de la Technologie Houari Boumediene (USTHB), BP 32 EL-ALIA 16111, Bab-Ezzouar (Alger). 2 Facult des gnies des procds pharmaceutique 3 Institut Pasteur, Dely Ibrahim, Alger
RESUME
L'indomtacine ou acide chlorobenzoyl mtoxy mthyl indol actique est un anti-inflammatoire non strodien, qui agit par inhibition non slective des cyclooxygnase 1 et 2 (COX-1/-2). Ces effets pro apototiques et anti prolifratifs sont attribus une activit indpendante des cyclooxygnases. Le but de cette tude est de caractriser la toxicit de l'indomtacine sur une ligne de cellules drives de rein de singe (VERO). L'implication du stress oxydatif a t recherch l'aide dun antioxydant naturel la querctine (Qr) et dun scavenger des espces ractives de loxygne (ROS) et prcurseur du glutathion, la N-Actyl-Cystine (NAC). Lincubation des cellules VERO 24h avec des concentrations croissantes dindomtacine (100-500 M), a induit une augmentation dose dpendante de la production de nitrites et de malondialdehyde (MDA), marqueurs du stress oxydatif et la rduction parallle du taux de GSH et de lactivit catalase. La toxicit est confirme par le relargage dose dpendant de la lactate dshydrognase (LDH). La querctine 15 M et la NAC 50 M ont totalement neutralis les taux des nitrites et de MDA et restaur les systmes de dfense antioxydants (GSH, catalase). Cet effet protecteur est inversement proportionnel aux concentrations excessives dindomtacine. Par ailleurs, les deux antioxydants tests exercent par elles mmes un effet pro oxydant dose dpendant, qui vient se surajouter la toxicit de lindomtacine. Cette observation suggre une utilisation modre et contrle des molcules anti oxydantes naturelles, en particulier dans les chimiothrapies caractrises par une production excessives de ROS.
Mots cls : Indomtacine, cellules VERO, stress oxydatif, querctine, N-Actyl-Cystine
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P30
EFFET MODULATEUR DE LACIDE CAFEIQUE SUR UNE COLITE ULCEREUSE CHRONIQUE AU DEXTRAN SULFATE SODIUM
A. Cherallah1, I. Amrouche-Mekkioui 1 et B. Djerdjouri 1

1
RESUME
La colite ulcreuse est une maladie inflammatoire chronique du clon. Bien que son tiologie reste inconnue, la perturbation des systmes pro-oxydants et antioxydants semble jouer un rle cl dans sa physiopathologie. Le but de notre travail a t dtudier leffet de lacide cafique 50 mg/kg sur une colite ulcreuse chronique induite chez les souris mus musculus avec du dextran sulfate sodium (DSS) 5%. Lintensit des lsions de la muqueuse colique a t estim aprs lapplication de deux cycles successifs de DSS 5% par une tude histopathologique et le dosage des marqueurs du stress oxydatif (myeloperoxydase MPO,
malondialdhyde MDA et activit catalase CAT). Aprs ladministration de deux cycles de DSS 5%, nos rsultats ont rvl une augmentation de lactivit MPO (1,71 fois), signe dune forte infiltration leucocytaire et visible sur les coupes histologiques. Une augmentation du taux de MDA (2 fois) ainsi quune diminution de lactivit CAT (1,27 fois) ont galement t not. Lacide cafique 50mg/kg a protg de faon significative les souris au cours de ladministration de deux cycles de DSS 5% par ces proprits dinhibition de la 5-LOX, par son effet scavenger sur les espces ractives de loxygne (ROS) et par sa capacit interrompre les ractions en chane de la peroxydation lipidique.
Mots cls : Colite ulcreuse, dextran sulfate sodium, acide cafique.
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P31 des chromosomes de la caille des bls Coturnix coturnix dans le cadre dune Contribution sa Prservation *
KARTOUT Y.,* BELHAMRA M.** et LADJALI-MOHAMMEDI. K.*

*Laboratoire de biologie cellulaire et molculaire, Facult des sciences biologiques (FSB), Universit des Sciences et de la Technologie Houari Boumediene (USTHB) **Centre Cyngtique de Zralda, (CRSTRA), Universit de Biskra Kafia_lm@yahoo.fr segmadz@yahoo.fr Centre de la Recherche Scientifique et Technique sur les Rgions Arides
Rsum
La caille des bls Coturnix coturnix coturnix, appele caille Europenne, est un petit oiseau nicheur et migrateur. Elle frquente en Algrie le Tell, les Hautes Altitudes et le Sahara Septentrional. Un dclin important du nombre de cailles a t signal au cours de ces 30 dernires annes partout en Europe ainsi quen Algrie. Cette situation est due lapparition de plusieurs facteurs dfavorables son maintien tels que la chasse excessive et la pollution gntique. Cette espce cyngtique est menace de disparition. Une prise de conscience gnrale a motiv sa double inscription juridique en 1979 (convention de Bonn et de Berne) pour sa protection. Lobjet de ce travail est de contribuer la prservation de cette espce en entamant la description de son gnome et dtablir, pour la premire fois en Algrie, des chromosomes haute rsolution. Nous avons ainsi ralis des cultures de fibroblastes issus dorganes dembryons et danimaux adultes. Ainsi, nous avons tabli le caryotype de la caille des bls. Nous avons ensuite effectu des comparaisons avec des espces aviaires connues telles que la poule domestique Gallus domesticus et la caille japonaise Coturnix japonica. Le nombre diplode est approximativement gal 78 chromosomes tout comme la caille japonaise et la poule domestique. Des caryotypes en bandes GTG et RBG sont proposs. Ils correspondent seulement aux huit premires paires dautosomes ainsi que la paire de chromosomes sexuels (ZZ ou ZW). Les microchromosomes, comme pour tous les oiseaux, sont extrmement difficiles identifier. Les rsultats obtenus sont trs semblables au caryotype de la caille japonaise.
MOTS CLES : Caille des bls, Coturnix coturnix, espce menace, embryon, animal adulte, culture cellulaire, chromosomes, haute rsolution, caryotype, tude gnomique compare.
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P32 Etude du Caryotype et Cartographie Chromosomique Compare dUne Espce Menace : la Perdrix gambra Alectoris barbara*
OUCHIA S.,* BELHAMRA M.** et LADJALI MOHAMMEDI K.*
*Laboratoire de biologie cellulaire et molculaire Facult des sciences biologiques (FSB) Universit des Sciences et de la Technologie Houari Boumediene (USTHB) **Centre Cyngtique de Zralda, Centre de la Recherche Scientifique et Technique sur les Rgions Arides (CRSTRA), Universit de Biskra
Kafia_lm@yahoo.fr; ouchiasiham@yahoo.fr; segmadz@yahoo.fr
RESUME
Les progrs et les connaissances accumuls grce ltude des gnomes aviaires ont permis de dtecter des homologies de squences avec les mammifres et lhomme concernant plusieurs familles de gnes. Cest pour toutes ces raisons que ltude des diffrents caryotypes aviaires constitue une tape importante dans ltablissement des cartographies chromosomiques compares. En effet, parmi les espces aviaires endmiques de lAfrique du Nord la perdrix gambra Alectoris barbara est lhomologue des perdrix rouges et bartavelles Europennes. Elle est trs prise pour sa chaire et soumise des textes de lois permettant son exploitation par lexercice de la chasse. Cependant, la pratique anarchique de la chasse, cumule la dgradation des biotopes et lpandage excessif des pesticides, ont conduit au dclin alarmant des populations de perdrix locales. Le projet Perdrix gambra , lanc par le Centre Cyngtique de Zralda, vise obtenir une souche capable de se reproduire en captivit, puis de raliser un suivi dmographique des populations naturelles aprs les lchers de repeuplement. Dans ce prsent travail, nous contribuons la prservation de la Perdrix gambra par une tude cytogntique, mene pour la premire fois en Algrie sur cette espce locale. Nous avons ainsi tabli le caryotype haute rsolution et dcrit les huit premires paires chromosomiques ainsi que les chromosomes sexuels Z et W partir de cultures cellulaires issues dembryons et danimaux adultes. Le nombre diplode a t tabli 2n= 78 comme pour la plupart des espces appartenant cette famille. Cette tude permettra par la suite de dceler dventuelles anomalies chromosomiques successibles de conduire long terme au dclin de lespce. Des tudes comparatives, aussi bien cytogntiques que phylogntiques, seront galement possibles avec dautres espces connues telles que la Poule domestique Gallus domesticus, et dautres espces locales tudies pour la premire fois au Laboratoire de Gntique du Dveloppement (perdrix choukar, caille des bls, tourterelle des bois et outarde houbara).
Mots cls : Perdrix gambra, espce endmique, cultures cellulaires, embryons, animaux adultes, caryotype, chromosomes haute rsolution, gnome aviaire, cartographie compare.
P33 Glucotoxicit et remodelage de la matrice extracellulaire des fibroblastes adventitiels en culture de Psammomys obesus
Berdja S1Neggazi S1., Hamlat N., Boumaza S1., Smail L1., Sahraoui H1., Benazzoug Y2., Kacimi G3., Haffaf E 4 ., Boudrissa A5., Aouichat-Bouguerra
S1.(1)PPCM, (2) BRME, FSB, USTHB ; (3) Laboratoire de Biochimie, HCA, Alger, (4) Service de Mdecine nuclaire, HCA, Alger. (5). Unit de parasitologie, Institut Pasteur, Sidi Fredj.berdja.sihem@hotmail.com
RESUME Introduction : Lhyperglycmie chronique induit des dsordres mtaboliques et des altrations intra et extracellulaires. Ces dernires sont marques par lactivation des voies des polyols, de la protine kinase C, des produits terminaux de glycation accentuant le stress oxydatif, marqueur de lvolution des complications cardiovasculaires. Mthodes : les fibroblastes sont mis en culture par la mthode des explants. La glucotoxicit est induite par incubation des fibroblastes en prsence de D-glucose 0.4% et 0.6% pendant 7 jours. Lvaluation des nitrites totaux et du malonaldehyde est ralise dans le compartiment intracellulaire. La prolifration des cellules est value par comptage. Les collagnes totaux du compartiment extracellulaire sont caractriss par SDS-PAGE. Rsultats : La prolifration montre une augmentation trs hautement significative comparativement aux tmoins correspondants. Le malonaldhyde et les nitrites totaux sont, dose dpendante, trs significativement augments. De mme, la quantification des chanes 2 (I) et 1 (I+III) des collagnes I et III contenus dans le compartiment extracellulaire montre une augmentation sensible, dose dpendante. Conclusion : Linduction dune glucotoxicit in vitro, par addition de D glucose des doses supraphysiologiques, instaure un stress oxydatif, une augmentation de la prolifration lie lactivation cellulaire et une augmentation des collagnes en relation avec un remodelage important de la matrice extracellulaire aortique. Toutes ces altrations sont des facteurs qui induisent et acclrent les complications cardiovasculaires. Une perspective thrapeutique comporterait deux volets : un volet dittique et un volet pharmacologique. Mots cls : Psammomys obesus, fibroblaste advetitiel, subculture, glucotoxicit, stress oxydant
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P34
Cytotoxicit in vitro du peroxyde dhydrogne sur des fibroblastes aortiques de Psammomys obesus Boumaza S1 (boumazasaliha@live.fr)., Neggazi S1., Hamlat N., Sahraoui H1., Berdja S1., Smail L1., Benazzoug Y2., Kacimi G3., Aouichat Bouguerra S1.
(1) PPCM, (2) BRME, FSB, USTHB ; (3) Lab de Bioch. HCA, Alger.
Introduction : il est tabli que les espces ractives loxygne induisent des dommages oxydatifs cellulaires. Ces derniers sont impliqus dans les pathologies cardiovasculaires qui constituent un rel problme de sant publique. Dans notre tude nous nous sommes proposs dinduire un stress oxydatif par le peroxyde dhydrogne sur les fibroblastes aortiques en culture secondaire, de Psammomys obesus. Matriel et mthodes : En culture secondaire, les fibroblastes sont exposs H2O2 1,2 et 30 mM pendant 24 h. La prolifration cellulaire est value par comptage. Une tude morphologique est ralise aprs coloration lacridine orange. La quantification du malonaldhyde et des nitrites totaux est effectue dans les compartiments extra- et intracellulaires. Rsultats : Nos rsultats montrent une diminution dose dpendante de la prolifration des fibroblastes incubs en prsence de H2O2. Le malonaldhyde et les nitrites totaux montrent une augmentation dose dpendante trs hautement significative dans les deux compartiments comparativement aux tmoins correspondants. La coloration lacridine orange a montr que les cellules soumises H2O2 produisent une fluorescence importante dans la rgion perinuclaire marquant une hypercondensation de la chromatine associe des bourgeonnements de la membrane plasmique caractrisant lapoptose cellulaire. Conclusion : le peroxyde dhydrogne est un puissant oxydant induisant des altrations biochimiques et morphologiques. De mme, les acides gras polyinsaturs des membranes cellulaires seraient trs affects par le stress oxydatif puisque le malonaldhyde est retrouv dans le compartiment extracellulaire. Les nitrites sont lorigine de la formation du peroxynitrite, radical cytotoxique majeur de lapoptose. Mots cls : stress oxydant, fibroblastes adventitiel, apoptose.
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P35 Production de xylanases de Jonesia sp. sur milieux base de xylane commercial et de dchets agricoles.
Boucherba Nawel1, Duchiron Francis2, Copinet Estelle2 et Benallaoua Said1
1-
Laboratoire de Microbiologie Applique/ Biochimie Microbienne, Facult des Sciences de la Nature et de la Vie ,Universit de Bejaia Route de Targa ouzemmour 06000 , Algrie. 2 -Laboratoire de Microbiologie Industrielle, UFR Sciences, Universit de Reims Champagne-Ardenne , Moulin de la Housse, BP 1039 , 51687 Reims, France.
Les crises successives du ptrole, lpuisement progressif des sources dnergies fossiles et leurs inconvnients cologiques ont conduit les pays industrialiss rechercher et dvelopper de nouvelles sources de carburant qui seraient la ressource privilgie pour remplacer le ptrole ou tout du moins lconomiser : le biothanol de deuxime gnration est probablement la solution .LAlgrie tant un pays producteur de ptrole devrait suivre cette dmarche pour des raisons stratgiques, en plus la valorisation de la biomasse vgtale a aussi un impact cologique trs intressant qui consiste rduire les missions de gaz effet de serre. Le xylane tant un polysaccharide abondant dans les rsidus agricoles, son hydrolyse ncessite l'intervention de xylanases, ces dernires ont t isol chez les actinomyctes notamment le genre Streptomyces. Dans ce travail nous prsentons une toute premire description d'une xylanase produite par l'espce Jonesia sp. isole Bjaia, lidentification de la souche a t ralis par le squencage de lARN 16s, lactivit enzymatique la plus leve a t dtecte la fin de la phase exponentielle aprs 35h de fermentation dans un milieu contenant le xylane de bouleau comme seule source de carbone. Un suivi de la biomasse bactrienne et de lactivit xylanolytique de la souche Jonesia sp. a t ralis pendant 10 jours sur milieux contenant la paille, le son de bl et la pulpe de tomate comme substituant du xylane de bouleau (xylane commercial), les concentrations testes sont raison de 0,5, 1 et 2%. Lexprience a montr que la meilleure activit xylanolytique est obtenue avec la paille de bl 2% aprs 9 jours de fermentation, lactivit enzymatique a t estime 11,97 U/ml, ces rsultats sont en corrlation avec ceux obtenus avec la biomasse bactrienne. Leffet de La variation du taux dinoculation de 1 5% sur lactivit enzymatique a montr quun taux de 3% donne la meilleure activit xylanolytique sur milieu base de paille de bl raison de 2%. Mots cls : production xylanases, rsidus agricoles, Jonesia sp.
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P36 Rsistance bactrienne aux antibiotiques : Approche par la biologie structurale
Ahmed Meksem1,2 et Fatima Laraba-Djebari2*

1. .Mtaux & Micro-organismes : Chimie, Biologie & Applications, Dpartement Rcepteur et Protines Membranaires, Institut de Recherches de lEcole de Biotechnologie de Strasbourg Ecole Suprieure de Biotechnologie de Strasbourg, Universit de Strasbourg, France 2. Laboratoire de Biologie Cellulaire et Molculaire Biomolcules-Mode dAction : Immunodiagnostic et Immunothrapie, Facult des Sciences Biologiques, Universit des Sciences et de la Technologie Houari Boumedine, Alger, Algrie
*flaraba@hotmail.com
Rsum
Le transport actif de lhme, des complexes fer-sidrophore, du saccharose travers la membrane externe de bactries Gram-ngatif fait intervenir des transporteurs TonB-dpendants (TBDTs). Les TBDTs sont forms de deux domaines caractristiques : un domaine bouchon et un tonneau transmembranaire 22 brins antiparallles, le domaine bouchon ferme le lumen du tonneau. Lnergie ncessaire au transport actif par les TBDTs est drive de la force proton-motrice suite une interaction entre la TonB-box du TBDT et la protine TonB du complexe TonBExbB-ExbD de la membrane cytoplasmique. Les TBDTs peuvent tre utiliss pour vhiculer des antibiotiques sous forme de complexes, fer-sidrophore-antibiotique. La membrane externe ne constitue plus une barrire slective pour lentre de ces antibiotiques, mais facilite et augmente leur taux dentre grce ce transport actif. Nous nous sommes intresss un transporteur appartenant cette famille de protines membranaires, FetA : TBDT de lnantio-pyocheline de Pseudomonas fluorescens. Nous avons mis en place et optimis une stratgie de clonage, de surexpression, de purification et de cristallisation. Cette stratgie nous a permis de cristalliser le rcepteur, dans plusieurs conditions de cristallisation avec diffrents dtergents, et denregistrer des donnes de diffraction. Ainsi, nous avons rsolue sa structure sous sa forme apo 3,2 . FetA adopte le mme repliement que les autres TBDTs en deux domaines caractristiques bouchon. L'analyse structurale rvle une grande flexibilit des boucles extracellulaires. Bien que le transporteur ne soit pas li son ligand, la TonB-box n'est pas visible dans la carte de densit lectronique, et donc dans la structure 3D, alors que sa flexibilit est suppose trs importante pour changer des interactions avec la protine TonB de la membrane interne pour le transfert d'nergie. Cette observation suppose que d'autres rgions priplamiques de FetA sont impliques dans des interactions avec le complexe TonB-ExbB-ExbD de la membrane interne. Les donnes structurales serviront pour dvelopper des stratgies thrapeutiques innovantes de lutte contre la rsistance bactrienne aux antibiotiques synthse de conjugus antibiotique-EPch ciblant lapprovisionnement en fer de Pseudomonas fluorescens sans incidence sur lhte.
Mots cls : TBDTs, transport du fer, antibiorsistance, FetA, Structure 3D.
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P37
LES MICRO-ORGANISMES HALOPHILES ET LEURS POTENTIALITES BIOTECHNOLOGIQUES
MEKNACI R., HADJ RABIA Y. et HACENE H.

Laboratoire de Microbiologie, Facult des Sciences Biologiques, Universit des Sciences et de la technologie HouariBoumdine, Alger-Algrie. meknaci_rima@yahoo.fr
RESUME Au cours des 30 dernires annes, nous avons assist la dcouverte d'une extraordinaire diversit de microorganismes habitant des milieux que l'on croyait auparavant hostiles la vie. On a baptis comme extrmophiles ces micro-organismes limites du vivant, qui se dveloppent optimalement dans des environnements o les conditions physico-chimiques sont insoutenables pour le reste des tres vivants. Ces conditions mettent l'preuve les proprits de stabilit et de fonctionnalit des macromolcules biologiques. 24 souches appartenant aux Archaebactries Halophiles extrmes qui font partie du groupe des micro-organismes extrmophiles ont t isoles partir de la Sebkha dEl Gola situe au Sahara Algrien. Les interactions entre ces dernires ont mis en vidence 9 souches prsentant une activit antagoniste contre au moins un isolat du mme domaine. Il sagirait vraisemblablement dactivits dues des substances du type Halocines dj connues chez les Archaebactries Halophiles. Deux souches productrices de substances antimicrobiennes potentiellement intressantes ont t tudies de manire approfondie et leurs produits ont t caractriss. Leur purification et caractrisation par diverses techniques chromatographique, biologique et physicochimique ont permis dobtenir des composs de nature protique, exerant un effet bactricide et prsentant un spectre daction centr sur les germes phylogntiquement proches des souches productrices.
Ce type de molcules est connu pour tre efficace dans la conservation des produits alimentaires conservs par salage, dans lindustrie du cuir et galement pour avoir des potentialits dtre utilis comme agent chimiothrapeutiques actifs contre les agents pathognes humains et animaux.
Mots cls : les Archaebactries halophiles, les Halocines, Environnements extrmes.
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P38 Apport des outils molculaires dans ltude pidmiologique des souches de Mycobacterium tuberculosis isoles de patients VIH positifs.
Nateche F1-2*, Mechouet F2, Baraka S2, Gavin Benavent P3, Lopez-Calleja A3, Samper S3 et Khaled S2.
1 2
laboratoire de biologie molculaire et cellulaire, FSB, USTHB. ALGER. Laboratoire central, EHS EL HADI FLICI. ALGER 3 Laboratoire de mycobactriologie, facult de mdecine, universit de ZARAGOSSE. ESPAGNE. * fnateche@yahoo.fr
Objectif : Cette tude se focalise sur la caractrisation molculaire des souches de M.tuberculosis isoles de patients infects par le VIH dans un hpital spcialis en maladies infectieuses Alger. Matriel et Mthodes : 312 isolats cliniques sont colligs entre la priode allant de 2000 jusqu 2006, 34 proviennent de patients VIH positifs. Lidentification des souches a t ralise par les tests biochimiques classiques. Le genotypage a t abord par les techniques de spoligotyping et RFLP-IS6110. Rsultats : Parmi les 34 souches, 28 sont gnotypes. La technique de spoligotypage offre un taux dhomologie fluctuant entre 100% 40% avec une prdominance des familles H (haarlem) ; LAM (Latino-amricain-mditerranen) et enfin la famille ubiquitaire T. Lanalyse des rsultats par technique RFLP ne met pas en vidence de corrlation entre les types de profils de restriction des souches et le statut srologique des patients. Parmi ces souches, nous attirons lattention sur la mise en vidence dune souche de profil ST1 ou famille Beijing chez un patient algrien et de 4 souches de profil ST61 famille LAM-CAM chez 4 patients originaires de pays subsahariens. Conclusion : Cette tude rvle des spoligotypes similaires aux gnotypes de M.tuberculosis circulantes dans notre environnement. Outre, linstallation de nouveaux gnotypes Alger est souligner. Mots cls : M.tuberculosis, VIH, spoligotyping, RFLP-IS6110.
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P39 Effet antibactrien de Lactococcus lactis lgard de Staphylococcus aureus rsistant aux antibiotiques isol de lait de vaches mammiteuses dans un fromage au lait cru.
Keramane Badria, Titeli Fatiha, Sadoun Djamila Laboratoire de Microbiologie Applique, Universit A Mira de Bejaa E-mail : badria-k@hotmail.fr
Rsum
Cette tude avait pour objectif de mettre en vidence le pouvoir antagoniste de Lactococcus lactis lgard de Staphylococcus aureus isol de lait de vaches atteintes de mammites, et de dmontrer lintrt de cet antagonisme dans la production de fromages au lait cru par une croissance simultane des deux souches. Un isolement et une identification de souches de S. aureus partir de diffrents laits mammiteux avant pendant et aprs le traitement aux antibiotiques sont mens. Paralllement, des souches de Lc. lactis sont isoles, purifies et identifies partir de diffrents chantillons de lait cru. Les souches de Lc. lactis sont alors cribles pour leur effet antibactrien, lgard de S. aureus rsistant aux antibiotiques par le test des spots. Enfin, un suivi de lactivit antibactrienne potentielle de Lc. lactis lgard de S. aureus est ralis dans du lait crm. 11 souches de Staphylococcus aureus ont t isoles et identifies partir de lait mammiteux. Sur 59 souches de bactries lactiques isoles 14 ont t identifies comme appartenant lespce Lactococcus lactis, dont 10 prsentaient une bonne activit antibactrienne lgard de S aureus isol de lait de vaches mammiteuses. Les rsultats du suivi de la croissance de S. aureus en culture mixte avec Lc. lactis dans le lait et le fromage, ont montr que la croissance de S. aureus est trs significativement inhibe dans le fromage en prsence de Lc. lactis. Mots cls : Staphylococcus aureus, mammites, Antagonisme, Lactococcus lactis, fromage au lait cru.
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P40 EVALUATION DE LA TOXICITE DES BLOOMS A MYCROCYSTIS SP.

A.Ouartsi & D.Chekireb
Universit Badji Mokhtar, Facult des Sciences, Dpartement de Biochimie, Annaba 23000 Algrie,
Rsum : L'apparition frquente de blooms toxiques cyanobactries au niveau des plans d'eau se produit diffrents endroits dans le monde. Ce problme est dautant plus srieux que les espces occasionnant les blooms peuvent produire des cyanotoxines qui sont potentiellement hpatotoxiques et/ou neurotoxiques. La prsence dans les retenues servant la production d'eau potable et/ou l'irrigation de cyanobactries productrices de toxines constitue donc une menace sanitaire srieuse. Dans ce contexte, des tudes physico-chimiques et biologiques ont t ralises, pour la 1re fois, dans le barrage Mexa situ au Nord-Est de l'Algrie, afin d'y rechercher des cyanobactries potentiellement toxiques. Les microcystines ont t spcialement recherches. L'chantillonnage a t effectu durant 10 mois de mars dcembre 2007. L'examen microscopique du phytoplancton montre la prsence de 8 genres de cyanobactries dont 6 sont productrices de toxines. Parmi ces dernires, le genre Microcystis sp. prolifre rgulirement et domine le phytoplancton au mois de novembre et dcembre, avec une densit cellulaire maximale de 2,1x106 cellules.ml-1 Les teneurs de microcystines intracellulaires dtermines par le test immunologique ELISA montrent que les valeurs les plus leves atteignent 0,77 g.L-1 au mois de novembre. De plus, ces valeurs sont en concordance avec les densits cellulaires du genre Microcystis sp. et de la concentration maximale de chlorophylle (a) obtenue. Paralllement, des cultures du genre Microcystis sp. sur milieu BG11, ont t menes et rvlent l'existence de 2 morphoespces se distinguant par la taille de leurs cellules. Lapproche par des mthodes gnomiques permettra, par la suite, lidentification de ces souches.
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P41 ISOLEMENT ET IDENTIFICATION CLASSIQUE ET MOLECULAIRE DESPECES DACTINOBACTERIESPRODUCTRICES DE MOLECULES ANTAGONISTES.
HADJ-RABIA Y., MEKNACI R. et HACENE H LBCM-FSB-USTHB y_hadjrabia@yahoo.fr
RESUME
Lvolution constante de la rsistance bactrienne aux antibiotiques, lmergence de nouvelles maladies infectieuses ainsi que de plusieurs types de cancer demeurant sans traitement efficace justifient la recherche intensive de nouvelles molcules bioactives.Ainsi, lune des stratgies suivies dans ce domaine de recherche consiste isoler des souches dactinobactries extrmophiles connues pour tre la principale source naturelle de mtabolites bioactifs partir dcosystmes ou environnements peu ou pas tudis essentiellement les cosystmes dont lun des facteurs environnementaux est extrme (salinit, pH, et temprature).Dans nos travaux de recherches, nous nous sommes intresss au facteur de la salinit et cela en analysant des chantillons aussi bien solides que liquides provenant de diffrentes sebkhas du Sahara Algrien. Ainsi, lanalyse de ces chantillons nous a permis disoler 12 isolats dactinobactries sur des milieux slectifs fortement sals.Les isolats obtenus ont t soumis un screening pour la production de molcules bioactives en choisissant comme cibles des bactries de rfrence ainsi que des Archaebactries halophiles.Lactivit antagoniste des souches isoles a t mise en vidence par la technique de diffusion sur glose par les cylindres dagar. Ceci, nous a permis de slectionner deux souches les plus actives. Les produits actifs ont t extraits, localiss par des mthodes chromatographiques et partiellement caractriss.Une identification approfondie des deux souches a t effectue par les mthodes classique (morphologiques, physiologiques et biochimiques) et molculaire. En effet, le squenage partiel de lARNr16S a rvl que les deux souches slectionnes appartenaient deux genres diffrents savoir Saccharomonospora et Nocardiopsis et que lune dentre elles prsente un taux de similarit de 97% avec Saccharomonospora halophila ce qui laisse suggrer quil sagirait, trs probablement, dune nouvelle espce halophile.
Mots cls : Actinobactries, Sebkha, halophiles, antibiotiques.
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P42 Typage molculaire des plasmides de souches dentrobactries multirsistantes aux antibiotiques, isoles des eaux uses
Farida BOUFROUCHE et Rabah BAKOUR

Laboratoire de Biologie Cellulaire et Molculaire, Equipe de Gntique, Facult des Sciences Biologiques, Universit des Sciences et de la Technologie Houari Boumediene, Alger RESUME Lvaluation de la sensibilit aux antibiotiques de 89 souches dentrobactries isoles des eaux uses a montr une multirsistance avec une moyenne de 20 rsistances pour 34 antibiotiques tests. Le rle des plasmides dans ces phnotypes est prpondrant. Le culot plasmidique des souches comporte 0 9 plasmides avec des tailles variant de 2 120 kb. Le replicon-typing des plasmides par hybridation molculaire a permis de les assigner majoritairement aux groupes dincompatibilit ubiquitaires IncFI, Com9 et IncQ et moins frquemment aux groupes HI2 et IncU. La comparaison de plasmides de mme taille de diffrentes espces par leurs profils de restriction a montr une similarit entre certains, ce qui peut-tre indicatif de transferts gntiques in situ. Mots-Cls : entrobactries, plasmides, rsistance, antibiotiques, eau
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P43 Culture dArthrospira platensis (Spirulina platensis) sur eaux carbonates et production de pigments phycocyanine et xanthophylles.
CHEKIREB Djamel & OUARTSI Akila Universit Badji Mokhtar Annaba - Facult des Sciences Dpartement de Biochimie BP 12 El-Hadjar Annaba Algrie dchekireb@yahoo.fr RESUME Arthrospira platensis (Spirulina platensis) est une cyanobactrie photosynthtique se dveloppant dans des eaux riches en carbonates. Elle est consomme par les populations du Tchad et du Mexique, et possde une valeur nutritionnelle trs leve. Sa composition chimique montre une grande richesse en nutriments tels que minraux, protines, provitamines, acides gras polyinsaturs. Elle renferme des pigments de type chlorophylle a , - carotnes et surtout phycocyanine. La phycocyanine possde une activit biologique importante, elle est utilise dans le domaine mdical comme antioxydant, anti-inflammatoire et anti-tumorale et aussi comme hpatoprotecteur et dtoxifiant.Notre travail consiste cultiver in vitro Arthrospira platensis sur des milieux base deaux carbonates provenant des sources thermales de Constantine et de Guelma ; dvaluer la croissance de cette algue et de comparer avec les milieux de culture classiques pour cyanobactries (Spir, Zarrouk et BG11). La nature et la composition en pigments de la biomasse obtenue sont des paramtres biotechnologiques importants, il sagit de dterminer les teneurs en chlorophylle a et en phycocyanine (et estimer son taux de puret). Une sparation chromatographique des extraits bruts est effectue pour identifier la nature des pigments produits . Les rsultats obtenus sont satisfaisants ; une croissance maximale de A. platensis est obtenue sur milieu base deau thermale de Constantine comparable au milieu de culture Spir . Pour ce qui est de leau de Guelma, la croissance est lgrement plus faible, mais demeure intressante. La production de phycocyanine dpend fortement de la composition du milieu de culture utilis. Les valeurs obtenues de la puret de la phycocyanine (exprime en %) dans les diffrents milieux varient de 0.5 2.18. Le maximum est obtenu avec le milieu Spir (2.18 %) et une valeur trs intressante est obtenue avec leau de Guelma (1.7 %). Les pigments rvls par CCM montrent une production de xanthophylles, de chlorophylle et dautres pigments sur les milieux de Constantine et de Guelma. Les quantits sont comparables celles obtenues avec les milieux classiques. Mots cls : Arthrospira, pigments, phycocynine, xanthophylles
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P44 APPROCHES MOLECULAIRES DE LA DIVERSITE BACTERIENNE DUNE SOURCE CHAUDE TERRESTRE ALGERIENNE
A. Bouanane1 , B. Ollivier2, ML. Fardeau 2 et H.Hacene1.
1- Laboratoire de Biologie cellulaire et molculaire (Microbiologie), USTHB . 2-IRD UMR 180 Extremophiles, Universit de Provence et de la Mditerrane, Marseille. Contact : bouanane.amel@yahoo.fr
Un intrt considrable est port aux microorganismes thermophiles et hyper thermophiles associs aux sources chaudes de diffrentes aires gothermales. En effet longtemps considres comme impropres au dveloppement de la vie, les sources hydrothermales terrestres se sont rvles tre le rservoir de consortia bactriens originaux. De nouvelles lignes phylogntiques despces inconnues ont t dtermines grce aux techniques molculaires et au choix de lARN 16 S comme marquer volutif. LAlgrie compte un grand nombre de sources thermo minrales. La majeure partie de ses sources est localise dans lest algrien. Elles sont classes en eaux sulfureuses, ferrugineuses, chlorures, sodiques, sulfates ou carbonates. Les eaux de hammam chellala sont rputes pour tre des plus chaudes au monde avec une temprature de 98C leur point dmergence.
Notre tude consiste caractriser la diversit de la flore indigne dune eau prleve dune source chaude situe lEst Algrien par les techniques molculaires (16S, DGGE, Clonage, ARDRA et hybridation) et non molculaires (cultures et isolement arobie et anarobie) dcologie microbienne.
Mots cl : Source chaude- Ecologie molculaire- Diversit bactrienne.
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AUTEURS : - CONFERENCES*, COMMUNICATIONS ORALES** - COMMUNICATIONS AFFICHEES*** 1 Abderrahmani Ahmed ** 2 Adi-Bessalem Sonia ** 3 Ahmedi Mohamed Lad *** 4 Aissani Radia ** 5 Ait-Lounis Aouatef ** 6 Alouache Souhila ** 7 Amari Hanane ** 8 Amri Manel ** 9 Amrouche Lynda *** 11 Amrouche-Mekkioui Ilhem ** 10 Aslane M *** 12 Bekkari Nadjia *** 13 Belkhelfa Mourad ** 14 Belkhelfa-Slimani Radia *** 15 Bellil Ines ** 16 Benboubetra Mustapha * 17 Benderdour Mohamed * 18 Benhamadi Asma ** 19 Benhassine Traki ** 20 Berdja S 21 Benmalek Yamina ** 22 Bennacef-Heffar Nouara *** 23 Berkane Kinza ** 24 Billiald Philippe * 25 Bouanane Amel 26 Bouaziz Samia *** 27 Boucherba Nawel ** 28 Boudrahem- Addour Nassima ** 29 Boufrouche Farida *** 30 Bounaama. Abdelkader ** 31 Boussag-Abib Lila *** 32 Chaouad B *** 33 Cherallah Amira *** 34 Cherbal Farid ** 35 Djeraba, Zineb ***
36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74
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Djinni Ghoul Hachaichi-Sadok Hammoudi-Triki Izem-Meziane Kandouli. Kartout Keramane Khelil Khiari Lahmar-Belguendouz Laib Lammali Limane Mahiddine Meknaci Meksem Mendil Mesbah-Amroun Messai Mezioug Mouzaoui. Nateche Othmani-Mecif Otmane Ouartsi Ouchia Oussedik-Oumehdi Rafa Rahim Rebbah Sadi Sami-Merah Tchakal. Toumi Tounsi Yefsah-Idres Zerrouk Zidi
Ibtissem A Zohra Djelila Malika C Y Badria Malika Zineb Karima Yasmina Amina O. L Rima Ahmed Amina Hamida Yamina Dalila Souad Farida Kheira A. Akila S Habiba Hayet Ibtissem Nesrine Hadjer Sassia A Nassima Nabila A F Sourour
** *** ** ** *** ** ** *** ** *** *** ** ** *** ** *** *** *** ** ** *** *** ** *** ** *** *** ** ** *** *** *** *** *** *** *** ***
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FACULTE DES SCIENCES BIOLOGIQUES

LABORATOIRE DE BIOLOGIE CELLULAIRE ET MOLECULAIRE EN PARTENARIAT AVEC LANDRS

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Lundi 09 Novembre 2009 CINQUIEME SEANCE Session : Biochimie - Biotechnologie.

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HUITIEME SEANCE Session : Microbiologie-Biotechnologie (suite)

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Corresponding author: E-mail: benboubetra@yahoo.co.uk

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BENHAMDI Asma, 1 MECHAKRA Aicha, 2CHERITI Nadjia.

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AMARI HANANE, OULDJAOUI A, SIFI K, SIFI Y, KOHIL K, HAMRI A, ABADI N.

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DEUXIEME WORKSHOP DE BIOTECHNOLOGIE EN SANTE HUMAINE

Bellil Ines, Khelifi Douadi

Mots cls : Biomarqueur, diabte, salive, lectrophorse, diagnostic

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Mots clefs : Venins ; Viperidae ; Biomolcules ; Hmostase ; Diagnostic ; Thrapie ; Thrombin-like.

DEUXIEME WORKSHOP DE BIOTECHNOLOGIE EN SANTE HUMAINE

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