Capitolul 5

TEHNICI DE EXTRACIE
Plantele reprezint un rezervor imens pentru noi descoperiri ale unor principii active care pot fi folosite n medicin, cosmetic sau n alimentaie (alimente nutraceutice, de exemplu). nainte de a fi izolate i purificate substanele utile trebuie extrase din matricea vegetal, obinndu-se ceea ce se numete un extract primar. Odat ce metaboliii au fost identificai n extractul primar se poate continua cu extracia primar la scar mai mare folosind o cantitate mare de material vegetal. Prima problem care trebuie rezolvat este alegerea celei mai eficiente metode de extragere primar a metaboliilor din materialul vegetal. Metodele folosite pot fi metode de laborator i metode industriale. Unele metode de laborator au devenit n timp metode industriale, altele au rmas doar la scar de laborator. n acest capitol se va insista, mai ales, pe metodele de laborator, i numai tangenial i pe unele procedee industriale.

5.1. Operaii preliminare pentru pregtirea materialului vegetal

Metaboliii secundari ai plantelor se pot acumula n diferite pri ale plantei, pri care trebuie colectate separat. Uneori, pentru a obine o caracterizare a metaboliilor reprezentativi trebuie colectat ntrega plant. De asemenea, metaboliii secundari variaz att calitativ, ct i cantitativ ntre speciile de plante nrudite, ca i ntre membrii aceleiai populaii. Exist suficiente referine n domeniu care descriu toate etapele de la identificarea regiunii n care se face recoltarea i pn la etichetarea materialului vegetal cules. Din punct de vedere ingineresc intereseaz, mai ales, etapele n care intervin operaii unitare cum ar fi: uscarea i mcinarea. 5.1.1. Uscarea i mcinarea materialului vegetal Se recomand uscarea materialului vegetal la temperaturi mai mici dect 30 0C pentru a evita descompunerea compuilor termolabili. Uneori materialul trebuie protejat de lumina solar, deoarece exist riscul iniierii

OPERAII TERMICE N INDUSTRIA ALIMENTAR

unor reacii chimice sub aciunea radiaiilor ultraviolete. Pentru ndeprtarea umiditii i pentru a preveni supranclzirea materialului, se recomand asigurarea unei bune circulaii a aerului. Din acest motiv materialul vegetal nu trebuie uscat n strat compact. Cnd se folosete material vegetal proaspt este de preferat o extracie rapid cu solveni organici, cum ar fi etanol sau metanol, care dezactiveaz enzimele prezente n plant. Extractul va conine i o anumit cantitate de ap. Dac se dorete separarea prii apoase se poate utiliza un solvent organic nemiscibil cu apa, produii existeni n extractul primar hidroalcoolic repartizndu-se ntre cele dou faze nemiscibile. n ceea ce privete mcinarea, este deja cunoscut c un grad mare de mrunire a oricrui material mrete suprafaa de transfer i conduce la micorarea cantitii de solvent necesar. Cu toate acestea, la materialele vegetale trebuie considerate i alte aspecte, cum ar fi necesitatea mcinrii materialului ntr-o soluie tampon sau solvent tamponat, pentru a preveni reaciile de hidroliz din cauza schimbrilor de pH care apar atunci cnd acizii organici prezeni n celul vegetal sunt eliberai. Ca alternativ se recomand congelarea materialului sau pstrarea sa n alcool. De asemenea, pentru materialele vegetale nu se recomand mcinarea chiar pn la pulbere, deoarece dac particulele sunt prea fine pot pluti n solvent fr a mai fi n contact foarte bun cu acesta, n plus, n timpul mcinrii se mai pot pierde din substanele volatile, iar compuii mai sensibili se pot degrada termic (din cauza cldurii care se degaj prin frecare), sau se pot oxida. Pentru extracia compuilor volatili din plante se recomand antrenarea cu abur i mrunirea materialului prin tiere (Jones i Douglas Kinghorn, 2005).

5.2. Metode de extracie primar

Plantele sunt matrici complexe coninnd o mare diversitate de metabolii secundari, care i ei la rndul lor au structuri i proprieti dintre cele mai variate. Aceti compui au diferite polariti i solubiliti mai mari sau mai mici n diveri solveni. De aceea, extracia cu solveni trebuie s exploateze aceste caracteristici. Ca o prim clasificare, n funcie de modul de operare, exist procedee continue i discontinue. n procedeele continue solventul curge continuu prin materialul vegetal. Pe msur ce compuii activi difuzeaz n solvent acesta devine saturat, dar datorit curgerii solventului chiar dac acesta se saturez, o nou cantitate de solvent proaspt i va lua locul. n cazul metodelor discontinue solventul este alimentat n arje. Cnd solventul s-a saturat atunci extracia trebuie oprit i solventul recuperat prin decantare. n cazul extraciilor repetate se va alimenta peste acelai material vegetal o nou cantitate de solvent.

Tehnici de extractie

Extractul obinut trebuie filtrat pentru a se ndeprta particulele vegetale foarte fine. Nu se recomand pstrarea extractelor vegetale la temperatura camerei i nici la lumina soarelui, deoarece crete riscul unor reacii nedorite de descompunere a unor compui sau de izomerizare a altora. Dac se dorete concentrarea extractului primar, acest lucru se poate realiza prin evaporare sau distilare. Ambele operaii se pot efectua la presiune obinuit, sau la depresiune, dac extractul conine muli compui valoroi termolabili. Pentru concentrrile din laborator se recomand evaporatorul rotativ, deoarece are loc o evaporare n film, mult mai avantajoas dect evaporarea din ntreaga mas a unei soluii. La folosirea unui evaporator rotativ se recomand temperaturi de maxim 400C pentru a proteja compuii termolabili. Solventul recuperat prin condensare, att la evaporare, ct i la distilare poate fi refolosit, dar pentru acelai material vegetal, pentru a se evita contaminrile nedorite (Dobre i Floarea, 1997; Jones i Douglas Kinghorn, 2005). Ca tehnici de extragere primar a metaboliilor secundari se pot enumera: Macerarea; Percolaia; Extracia cu Soxhlet; Extracia cu solvent presurizat (extracie accelerat cu solvent); Extracia cu reflux; Distilarea cu abur i hidrodistilarea; Extracia cu fluide supercitice. La aceste categorii principale se adaug diverse tehnici de intensificare a extraciei cum ar fi extracia n cmp ultrasonor, extracia asistat cu microunde. Exist i tendina, justificat, de reducerea costurilor, de a realiza extracia i separarea compuilor n aceeai etap combinnd operaii unitare cunoscute deja. 5.2.1. Alegerea solventului i a metodei de extracie O problem important, indiferent de metoda de extracie, este alegerea solventului sau a antrenantului. Ideal ar fi ca prin metoda i solventul ales s se obin numai metabolitul sau amestecul de metabolii de interes, iar operaia s fie simpl, rapid, reproductibil i s se desfoare cu costuri ct mai mici. Pentru atingerea acestui ideal, primul pas este alegerea solventului. Metodele tradiionale folosesc ap cald sau rece, alcool sau amestecuri hidro-alcoolice pentru a obine preparate care se pot administra intern (ceaiuri, infuzii, decocturi). Infuzia se refer la fierberea solventului i picurarea acestuia peste materialul vegetal; dac planta se introduce n solvent

OPERAII TERMICE N INDUSTRIA ALIMENTAR

la fierbere atunci se obine un decoct. Selectarea solventului i a metodei vor fi determinate de natura i cantitatea materialului care trebuie extras. Ca solveni se pot folosi att solveni apoi, ct i solveni organici. Solventul trebuie s asigure o bun solubilitate a solutului de interes, i dac se poate s fie i selectiv. n plus, trebuie s fie netoxic, neinflamabil, uor de recuperat prin distilare i s aib pre de cost sczut. Dintre solvenii organici care se utilizeaz deja se pot aminti: hidrocarburi alifatice sau clorurate, esteri, alcooli cu masa molecular mic. n ordinea creterii polaritii, cei mai cunoscui solveni pentru extracia primar sunt: n-hexan, diclormetan, nbutanol, iso-propanol, cloroform, acetat de etil, aceton, metanol, etanol i ap (Seidal, 2005). n continuare vor fi prezentate pe scurt principalele tehnici de obinere a extractelor primare din material vegetal. 5.2.2. Macerarea Macerarea este o tehnic foarte simpl i nc destul de utilizat pentru eliberarea metaboliulor secundari din matricea vegetal. Materialul vegetal mrunit se las ntr-un solvent n recipiente nchise la temperatura camerei. Metoda se aplic pentru o extragere iniial n sistem discontinuu. Ocazional se mai poate folosi agitarea pentru a avea un amestec omogen i pentru a crete viteza de extracie. Extracia se oprete la atingerea echilibrului metabolitului ntre extract i materialul vegetal. O prim separare grosier se poate face prin decantare, urmat de cele mai multe ori de filtrare. Centrifugarea este necesar numai dac materialul vegetal este format din particule foarte fine. Peste materialul vegetal rmas (numit marc) se mai poate aduga o cantitate proaspt de solvent. Noul filtrat obinut se poate amesteca cu cel obinut prima dat. Dezavantajul maceraiei este consumul mare de solvent i a duratei mari de timp n care are loc, de la cteva ore la cteva sptmni. De asemenea, pot avea loc pierderi de metabolit i de material vegetal. Metaboliii care au solubilitate sczut la temeperatura camerei nu pot fi extrai prin aceast metod (Seidal, 2005). 5.2.3. Percolarea Percolarea, care se mai numete i splare extractiv, este frecvent utilizat pentru obinerea extractelor primare. Materialul solid vegetal i solventul de extracie se contacteaz discontinuu n vase (tancuri) de percolare nchise sau deschise i care pot fi n strat fix, sau chiar vase cu agitare. n figura 2.1. sunt prezentate dou tancuri de percolare n strat fix. Percolarea este recomandat pentru extracia la scar mare. Ca i la macerare se pot face mai multe treceri ale solventului peste materialul vegetal, operaia desfsurndu-se n regim nestaionar. Gradul de mrunire, temperatura i timpul de staionare influeneaz randamentul operaiei. De

Tehnici de extractie

exemplu, materialele prea fin divizate, cele rinoase sau alte materiale vegetale care se gonfleaz excesiv (cele care conin mucilagii) pot nfunda percolatorul. Dac materialul nu este distribuit uniform n tanc (de exemplu, dac este prea dens) atunci solventul nu poate intra n contact cu o suprafa mare a materialului i extracia va fi incomplet. Temperatura mai mare favorizeaz procesul de extracie, dar n acelai timp poate distruge metaboliii termolabili. Alte dezavantaje ale percolrii sunt consumul mare de solvent i durata mare de timp a operrii (Dobre i Floarea, 1997).

Fig. 5.1. Tancuri de percolare deschise; a.prezentare general; b.operare cu alimentare continu de solvent 1.- corpul tancului; 2.- placa perforat; 3.- pnza filtrant;
4.- pomp recirculare; 5.- gur ncrcare solid; 6.- gur descrcare solid; 7.- strat solid

5.2.4. Extracia cu Soxhlet

Extractorul Soxhlet, a fost utilizat de ctre chimiti pentru extracia compuilor chimici dintr-o prob solid nc de la mijlocul secolului al XIX-lea.

Figura 5.2 prezint schema unui extractor Soxhlet. n extractor se introduce solidul care conine substanele de interes. Proba solid este introdus mai nti ntr-un cartu de hrtie de filtru. Dispozitivul este prevzut cu un vas pentru solvent i dou tuburi laterale de sticl care fac legtura ntre extractor i vasul cu solvent. Tubul pentru circulaia vaporilor este cuprins ntre partea superioar a vasului cu solvent i partea superioar a extractorului n care se introduce cartuul cu proba. Tubul pentru recircularea solventului leag i el cele dou pri componente; ncepe de la baza extractorului, se

OPERAII TERMICE N INDUSTRIA ALIMENTAR

continu pn la jumtatea corpului extractorului i apoi coboar brusc i intr n vasul cu solvent. Extractorul Soxhlet lucreaz n cicluri. Solventul fierbe n vas i se formeaz vapori care ajung la condensator unde condenseaz, iar condensul curge peste i prin prob i se colecteaz la partea inferioar. n acest moment solventul va conine o concentraie mic de substane extrase din prob. Nivelul lichidului crete simultan n camera de extracie i n tubul lateral de recirculare. Cnd tubul se umple, sub aciunea gravitaiei, lichidul se scurge rapid napoi n vasul cu solvent, acesta fiind sfritul unui ciclu. Acestui tip de aparat i s-au adus de-a lungul timpului modificri care vor fi prezentate n continuare. Unele dintre ele au condus la denumiri noi ale aparatelor proiectate.

Fig. 5.2. Extractorul Soxhlet

5.2.5. Extracia cu solvent presurizat Extracia accelerat cu solvent este o tehnic de extracie din probe solide sau semisolide cu solveni lichizi obinuii, care utilizeaz temperaturi i presiuni ridicate pentru a crete eficiena procesului de extracie (Seidal, 2005). Aceast tehnic poate nlocui extracia cu Soxhlet, extracia cu lichide la fierbere, extracia cu agitare, extracia asistat de ultrasunete sau alte tehnici de extracie. Utilizarea temperaturilor ridicate conduce la creterea solubilitii soluilor, la depirea efectelor de matrice, scderea vscozitii solvenilor,

Tehnici de extractie

creterea vitezelor de desorbie, creterea coeficientului de difuziune prin matricea solid. Presiunea ridicat ajut la meninerea solvenilor n stare lichid la temperaturi ridicate i grbete umplerea celulelor. Se mrete astfel viteza de extracie i crete randamentul extraciei. Etapele de lucru sunt, n general, urmtoarele: - se introduce proba n celula de extracie; - se umple celula cu solvent; - se aduce celula la presiunea i temperatura corespunztoare; - se menine proba la temperatura i presiunea prestabilite; - se pompeaz solvent n celula cu prob; - se purjeaz solventul din celul cu gaz inert; n urma acestor etape rezult extractul pentru analiz. Avantajele extraciei accelerate cu solvent sunt urmtoarele: - este o tehnic de extracie mai rapid dect alte tehnici convenionale de extracie; - necesit cantiti mai mici de solvent; - nu permite manifestarea efectelor de matrice; - utilizeaz solveni de extracie convenionali, ceea ce confer simplitate acestei tehnici; - poate fi programat, ceea ce crete reproductibilitatea datelor; - deoarece materialul dup extracie este uscat, se poate repeta extracia cu acelai solvent sau cu ali solveni de polaritate cresctoare. n figura 2.6 este prezentat schematic o astfel de instalaie de extracie.

Fig. 5.3. Instalaie pentru extracie accelerat cu solvent.

Ca exemplu de aplicare a acestei tehnici se

OPERAII TERMICE N INDUSTRIA ALIMENTAR

poate meniona extracia manitolului din frunze de mslin la 3-11 MPa, la 601500C i la viteze de curgere foarte mici ale solventului (Ghoreishi i Gholami Shahrestani, 2009). Instalaia de laborator folosit n acest scop este prezentat n figura 5.4. Alte exemple sunt: extracia unor derivai de terpene din frunze de Ginko biloba (Lang i Wai, 2003), extracia uleiurilor eseniale din semine de coriandru (Eikani i colab., 2007), ca i extracia glicirizinei din Radix glycyrrhizae (rdcin de cicoare) i a efedrinei din Ephedra sinica (Eng i colab., 2007).

Fig. 5.4. Instalaie de laborator pentru extracia sub presiune a manitolului din frunze de mslin: 1-rezervor de solvent,2-filtru de teflon, 3pomp de presiune nalt, 4-manometru, 5-valv, 6-serpentin de prenclzire, 7-coloan de extracie, 8- filtru din fibre de bumbac, 9-cuptor, 10-indicator-regulator de temperatur,12-conatiner de extract (dup Ghoreishi i Gholami Shahrestani, 2009). 5.2.6. Distilarea cu abur i extracia la reflux n extracia la reflux, materialul vegetal este imersat n solvent ntr-un balon cu fund rotund, conectat la un condensator. Solventul este nclzit pn la temperatura de fierbere. Pe msur ce vaporii condenseaz, solventul se rentoarce n balonul de extracie. Distilarea cu abur este un proces similar i care se aplic, mai ales, pentru uleiurile eseniale (amestecuri complexe de constituieni volatili). Materialul vegetal, proaspt sau uscat, este acoperit cu ap ntr-un balon i este conectat la un condensator. Pe msur ce balonul este nclzit vaporii (un amestec de uleiuri eseniale i ap) condenseaz, distilatul, care se separ n dou straturi nemiscibile, este colectat ntr-un cilindru gradat conectat la condensator. Faza apoas se recircul n balonul de extracie, n timp ce uleiul volatil se colectez separat. Principalul dezavantaj al acestor moduri de operare este c se pot degrada compuii termolabili.

Tehnici de extractie

5.2.7. Extracia cu solveni n stare supercritic Preocuprile privind protecia mediului au determinat o nou perspectiv i asupra chimiei, nvinuit de producerea unui numr mare de deeuri toxice. Aa a aprut ceea ce se numete la ora actual "chimie verde". n domeniul extraciei, unde se folosesc cantiti mari de solveni organici, ar trebui redus cantitatea acestora i unii chiar ar trebui nlocuii. O alternativ nepoluant este considerat aplicarea extraciei cu fluide supercritice. Punctul critic al unei substane pure este definit ca cea mai nalt temperatur i presiune la care substana exist n echilibru lichid-vapori. La temperaturi i presiuni mai mari dect acest punct se formeaz un fluid omogen numit fluid supercitic. Aceste aspecte se pot observa pe diagrama de faz a unei substane oarecare, diagram prezentat n figura 5.5. n punctul triplu coexist trei faze. Curba de coexisten a fazelor gaz-lichid este curba de fierbere. Deplasndu-ne n sus pe curba de fierbere prin creterea att a presiunii ct i a temperaturii, lichidul devine mai puin dens datorit expansiunii termice, iar gazele mai dense datorit creterii presiunii. n cele din urm, densitile celor dou faze converg ctre aceeai valoare, devenind identice, diferena dintre gaz i lichid dispare iar curba de fierbere se sfrete n punctul critic. Capacitatea de solvatare a gazelor supercritice crete proporional cu creterea presiunii i a densitii. Ceea ce face ca fluidele supercritice s fie considerate solveni atractivi, este faptul c densitatea gazelor devine mult mai mare la presiuni ridicate, n timp ce vscozitatea i difuzivitatea au valori apropiate de cele la presiune atmosferic. Aceste proprieti fac ca mobilitatea i puterea de solvatare a fluidelor supercritice s fie unice. De aceea, fluidele supercritice sunt candidai foarte buni pentru extracia unor substane active de orgine vegetal, i nu numai. n plus, fluidele supercritice pot avea proprieti chiar surprinztoare fa de fluidele din care provin i pe care le cunoatem n condiii normale de presiune i temperatur.

10

OPERAII TERMICE N INDUSTRIA ALIMENTAR

Figura 5.5. Diagrama de faz Apa supercritic este un exemplu interesant de proprieti neateptate ale fluidelor supercritice. n mod normal, srurile sunt uor solubile n ap, n timp ce uleiul i apa nu se amestec. n condiii supercritice, srurile sunt insolubile n ap, pe cnd uleiurile i substanele organice sunt complet miscibile cu apa. Aceast proprietate a dus la dezvoltarea unui proces de purificare a apelor reziduale prin amestecarea acestora cu ap i aer aflate n condiii supercritice. Substanele organice sunt oxidate, formeaz gaze i ap, n timp ce srurile precipit. Astfel de schimbri drastice apar i n cazul amestecurilor de lichide, pe msura apropierii de punctul critic al amestecului. Alte proprieti care se modific drastic n apropierea punctului critic sunt conductivitatea termic, tensiunea superficial, capacitatea caloric i vscozitatea. Densitatea, conductivitatea termic i difuzivitatea unei substane aflate n stare supercritic sunt mai mari dect cele ale aceleai substane n stare lichid, vscozitatea este mult mai mic, n timp ce tensiunea superficial i cldura de vaporizare dispar complet. Proprietile termice i fizice ale fluidelor supercritice sunt intermediare ntre cele ale gazelor i ale lichidelor. Densitatea fluidelor supercritice depinde puternic de presiune i temperatur. Coeficientul de difuziune este mult mai mare dect cel al lichidelor, i din acest motiv, fluidele supercritice penetreaz mult mai uor solidele poroase i fibroase.

Tehnici de extractie

11

n tabelul 5.1 sunt prezentate cteva fluide i punctele lor supercritice. Cel mai utilizat fluid n stare supercritic este CO2. Punctul critic al dioxidului de carbon este caracterizat de presiunea de 73.8 bar i temperatura de 31.10C. Se mai pot utiliza etan, butan, pentan, oxid de azot, amoniac, triflormetan i ap. Unele dintre aceste fluide prezint unele dezavantaje evidente care vor fi amintite n continuare. De exemplu, solvenii organici sunt explozivi i instalaiile n care acetia ar putea fi utilizai trebuie asigurate mpotriva acestui pericol. Hidrocarburile cloro-fluorurate sunt restricionate ca utilizri din cauza efectului lor negativ asupra stratului de ozon atmosferic. Fluid Presiune critic Temperatur (atm) critic (0C) Dioxid de 73.8 31.1 carbon Etan 48.8 32.4 Etilen 50.4 9.4 Propan 42.5 96.8 Propilen 46.9 91.9 Triflormetan 48.6 26.3 Clorotrifluormetan 38.7 29.0 Triclofluorometan 44.1 18.2 Amoniac 113.5 132.5 Ap 212.2 374.3 Ciclohexan 40.7 280.5 n-Pentan 33.7 196.7 Toluen 41 318.8 Cu toate acestea exist o serie de avantaje ale extraciei cu fluide supercritice care decurg din proprietile acestora: deoarece puterea de solvatare poate fi modificat prin modificarea presiunii sau temperaturii, separarea solutului de solvent este mai rapid i mai uoar. adugnd modificatori fluidelor supercritice (ex: metanol n CO2), polaritatea acestora se poate modifica, fcndu-le mai selective. n procesele industriale din industria alimentar sau farmaceutic nu apar probleme legate de solveni reziduali, ca n cazul utilizrii solvenilor organici clasici.

12

OPERAII TERMICE N INDUSTRIA ALIMENTAR

n general, fluidele supercritice sunt mai ieftine, mai simple i mult mai sigure. Costurile de depozitare sunt mult mai mici, deoarece pot fi uor recirculate i regenerate. Unul din principalele avantaje ale extraciei cu fluide supercritice este eliminarea solvenilor organici, n acest mod reducndu-se problemele legate de depozitare. Mai mult, cteva protocoale legislative (ex: EPA Pollution Prevention Act n SUA) impun reducerea utilizrii solvenilor organici care ar putea fi duntori mediului nconjurtor. Principalul dezavantaj al acestei tehnici este necesitatea folosirii de utilaje care lucreaz sub presiune (pentru a menine fluidul n stare critic). Un alt dezavantaj este faptul c randamentul de extracie depinde mult de mrimea particulelor de material vegetal i de cantitatea de ap coninut n acesta (Nahar i Sarker, 2005; Dobre i Floarea, 1997). Cel mai utilizat solvent supercritic este dioxidul de carbon, deoarece este ieftin, netoxic, iar punctul supercritic poate fi atins uor. Un proces de extracie cu CO2 supercritic conine dou etape principale: - extracia cu fluid supercritic (ex: extracia cafeinei din boabele verzi de cafea); - recuperarea CO2-ului i, recircularea acestuia, atunci cnd este avantajos. Cea de a doua etap se poate realiza n mai multe moduri: 1. decomprimarea gazului, permind materialului extras s prseasc amestecul aflat sub presiune; este o operaie simpl i util atunci cnd sunt implicate volume mari de extract, dar scump, deoarece este necesar recomprimarea gazului pentru recirculare. 2. adsorbia pe materiale cum este crbunele activ. Este uor de realizat i este utilizat pentru separarea cafeinei de CO2 supercritic. Ca i n cazul cafeinei, recuperarea materialului extras de pe suprafaa adsorbantului poate fi dificil. 3. absorbia materialului extras ntr-un solvent adecvat. n figura 5.6 este prezentat o instalaie pilot pentru extracia cu fluide supercritice. Chiar dac este de capacitate foarte mic (<10 Kg), ea conine toate elementele care apar i n instalaiile industriale de acest tip. Componentele sale eseniale sunt: vasul de extracie i cel de separare, condensatorul i pompa de presiune nalt. Dioxidul de carbon este depozitat la presiunea sa de vapori n condensator ca lichid aproape n stare critic.

Tehnici de extractie

13

Figura 5.6. Instalaie pilot de extracie cu fluide supercritice(adptat dup Steytler, 1997). Starea fizic a dioxidului de carbon n etapele de extracie-separare (fluid supercritic, lichid aproape supercritic sau gaz) este determinat de presiunea i temperatura din cele dou vase. Temperatura este controlat cu ajutorul unui lichid de termostatare care circul prin mantaua fiecrui vas, iar presiunea este meninut de valvele de presiune. Parametrii ca temepartura, presiunea i debitul de curgere sunt tot timpul msurai n punctele strategice ale instalaiei. Cnd are loc un proces de extracie, materialul vegetal este alimentat n vasul de extracie, care este nti purjat cu CO2 pentru a scoate aerul din sistem. Extracia ncepe prin pomparea dioxidului de carbon lichid printr-un schimbtor de cldur n vasul de extracie. Debitul de curgere, care este reglat de pomp, se menine la o valoare mic, astfel nct timpul de staionare n vasul de extracie s fie suficient pentru a se atinge echilibrul. Soluia rezultat trece apoi n vasul de separare unde se realizeaz condiiile eliberrii componenilor extrai prin varierea condiiilor de presiune i temperatur. Dioxidul de carbon gazos trece apoi n condensatorul care este rcit i unde este condensat i meninut n stare lichid (Steytler, 1997). O asemenea instalaie care opereaz ntre 2-10 L este util atunci cnd e necesar s se extrag cantiti mici de material. Totui, pentru a face experiene

14

OPERAII TERMICE N INDUSTRIA ALIMENTAR

preliminare se recomand s se foloseasc instalaii mici de laborator. Unul dintre tipurile posibile este prezent n figura 5.7.

Figura 5.7. Reprezentarea schematic a unei instalaii mici de laborator pentru extracia cu fluide supercritice: 1-vas de amestecare i de preextracie; 2-vasul de extracie; 3-vasul de colectare a extractului; 4-valv de reglare a presiunii; 5a i b-termocuple; 6-debitmetru. Instalaia din figura 5.7 are o capacitate de 10-100 mL i nu mai recupereaz dioxidul de carbon pentru recirculare, ceea ce reprezint o simplificare considerabil a configuraiei acesteia. Fiind vorba de folosirea unor cantiti mici de gaz, acesta poate fi purjat in atmosfer la sfritul ciclului de extracie-separare. O pomp mic de aer poate fi utilizat pentru presurizarea sistemului i pentru a transporta dioxidul de carbon direct din butelia de gaze n vasul de extracie. Cu ajutorul valvei 4 se poate regla presiunea dioxidului de carbon pn la valoarea presiunii atmosferice. Separarea extractului de dioxidul de carbon se face ntr-un vas de sticl rcit de tip Buchner (3). Gazul care se separ trece printr-un debitmetru i iese apoi n atmosfer. Operarea unei astfel de instalaii este simpl. Exist doar o complicaie dat de rcirea care acompaniaz destinderea dioxidului de carbon i care trebuie compenst de nclzirea valvei de destindere. Dac aceast nclzire nu este suficient, se pot depune depozite de ghea carbonic care vor stnjeni curgerea. Dac aceast nclzire este prea puternic atunci se pot produce degradari ale extractului (Steytler, 1997).

Tehnici de extractie

15

5.2.7.1. Aplicaii ale extraciei cu fluide supercritice Dintre marii beneficiari ai extraciei supercritice se pot aminti industria alimentar, cea a produselor cosmetice i industria farmaceutic. De exemplu, extracia cu fluide supercritice a fost utilizat n industria alimentar din anii 1970. Dou exemple semnificative vor fi prezentate n continuare: decofeinizarea cafelei i extracia taxolului, medicament anticancerigen. 1) Decofeinizarea cafelei Pentru extracia cofeinei din cafea cel mai utilizat procedeu este cel de extracie cu solveni din boabele verzi umezite. Autorul unui studiu n acest sens afirma la nivelul anilor 2001 c peste 50% din cafeaua decofeinizat se bazeaz pe acest procedeu, ca argumente aducndu-se costurile sczute i standardele nalte de calitate care sunt ndeplinite de produsul final. Dintre solveni se remarc diclormetanul i acetatul de etil cu peste 98% pondere din totalul de peste 30 de solveni care pot fi utilizai (Heilmann, 2001). Era greu de presupus ca alte procedeee s poat concura din punct de vedere economic cu extracia cu solveni. Dar, prin directivele de reducere a emisiilor de compui volatili n atmosfer, procedeele de decofeinizare au primit un nou impuls pentru a se perfeciona i n sensul reducerii polurii. Fr a trece n revist toate ncercrile fcute de firme mari n domeniu, amintim totui folosirea polimerilor imprentai pentru decofeinizare. Aceti polimeri se obin prin polimerizarea monomerilor n prezena agenilor de reticulare i a moleculei de interes, n acest caz cofeina. Astfel de polimeri pot recupera peste 99% din cofein fr pierderi ale aromei (Theodoridis i Manesiotis, 2002; Lin i colab., 2003; Farrington i colab., 2006). n 1974 Kurt Zosel (Zosel, 1979) a descoperit c se poate extrage cafeina din boabele verzi de cafea utiliznd ca solvent CO2 la temperatur i presiune supercritice. El a demonstrat c, n aceste condiii, CO2 este un solvent foarte specific pentru cafein i c extracia poate fi realizat n timp rezonabil i la temperaturi moderate. Aroma cafelei obinut din boabele decofeinizate diferea semnificativ de cea a cafelei obinute din boabele originale de cafea. Pe lng acest avantaj, cafeaua decofeinizat n acest mod putea fi considerat natural, deoarece nu erau implicai solveni chimici. n acea perioad, acest aspect era foarte important din dou motive: calitatea cafelei decofeinizate era considerat slab, iar companii ca Maxwell House cutau modaliti pentru mbuntirea calitii acesteia. Pe de alt parte, consumatorii erau foarte ngrijorai n legtur cu utilizarea solvenilor

16

OPERAII TERMICE N INDUSTRIA ALIMENTAR

clorurai, care erau solvenii uzuali pentru ndeprtarea cofeinei din boabele de cafea. Pentru extracia cofeinei din boabele verzi de cafea cu CO2 n condiii supercritice sau aproape critice au fost sugerate urmtoarele metode: Boabele de cafea verde umezite se amestec cu un curent de CO2 ntrun vas sub presiune. Cofeina difuzeaz din boabele de cafea n dioxidul de carbon care trece apoi ntr-un turn de splare, unde are loc absorbia cofeinei n ap. Dup 10 ore de recirculare aproape toat cofeina trece n ap, de unde se separ ulterior prin diverse metode. Folosind acelei condiii pentru extracie ca n prima metod se modific doar procedeul de recuperare a cofeinei din CO2, trecnd amestecul peste un strat de crbune activ pe care se adsoarbe cofeina. Al treilea procedeu folosete un amestec de boabe de cafea verde i particule de crbune activ care se introduc ntr-un vas mpreun cu CO2. n acest vas se realizeaz presiuni de 220 bari i temperaturi de 900C. n aproximativ 5 ore cafeina difuzeaz din boabe n dioxidul de carbon supercritic i de acolo direct pe particulele de crbune activ. Dup extracie boabele de cafea se separ de particulele de crbune prin sitare. n figura 5.8 este prezentat procedeul propus de General Foods (Katz i colab., 1991) n care se folosete o coloan de absorbie cu ap pentru recuperarea cofeinei. Dioxidul de carbon care mai poate conine urme de cofein (fiind recirculat) este alimentat continuu n vasul de extracie (1) unde se introduc i boabele de cafea verde. Extractul de cofein n CO2 este evacuat pe la partea inferioar a coloanei de extracie. Cafeua este re-extras n ap ntr-o coloan numit de absorbie (2) n care curentul de dioxid de carbon i cofein circul n contracurent cu apa pur. Soluia de cofein n ap este apoi concentrat prin osmoz invers pentru a obine cofeina de puritate 97% sau chiar mai mare. Cele mai multe procedee se refer la utilizarea dioxidului de carbon n stare supercritic ca mediu de extracie a cofeinei. Exist i procedee care propun utilizarea aceluiai CO2 dar n condiii aproape critice, procedee care se justific prin costurile energetice mai mici datorate presiunii i temperaturilor mai sczute care sunt necesare n instalaiile respective.

Tehnici de extractie

17

Figura 5.8. Procedeul Katz de extracie a cofeinei din cafea cu CO2 supercritic; 1-coloan de extracie; 2-coloan de absorbie cu ap. (Katz i colab., 1991). n 1989 Compania Hermsen din Germania a patentat decofeinizarea cafelei cu dioxid de carbon lichid (Heilmann, 2001). Boabele de cafea cu o umiditate de 45-55% i dioxidul de carbon lichid saturat cu ap au fost contactate la temperaturi de 20-250C i la presiuni de 65-70 de atm. Separarea cofeinei se face prin depresurizare sub 60 de atmosfere ntr-un separator. Se obine un amestec foarte pur de cofein n ap. Extracia dureaz cam 60 de ore, ceea ce este mult, din cauza temperaturilor mici de operare. Ca avantaj se menionez faptul c boabele decofeinizate astfel pstreaz aproape toate calitile cafelei netratate. Instalaia propus de Compania Hermsen este prezentat n figura 5.9.

18

OPERAII TERMICE N INDUSTRIA ALIMENTAR

Figura 5.9. Proces de decofeinizare al cafelei folosind CO2 lichid: 1-vas de extracie; 2-separator; 3-condensator; 4-vas de colectare; 5-pomp;6schimbtor de cldur; 7-rezervor de stocare CO2; 8-vas de saturare cu ap; 9-valv de destindere (Heilmann, 2001). 2) Extracia taxolului cu CO2 supercritic Taxolul a fost descoperit n 1960 n urma programului de cercetare a plantelor organizat de Institutul National de Lupt mpotriva Cancerului din SUA (National Cancer Institute). Componentul activ al extractului de Taxus Brevifolia a fost izolat n 1966 i a primit ca denumire comercial numele de Taxol, molecula activ fiind paclixatel, un diterpen nalt funcionalizat (figura 5.10). Taxolul se mai gsete i n alte specii de Taxus, fiind folosit inclusiv de medicina indian (Ayurveda) pentru tratarea cancerului, ca i de nativii Americani pentru tratarea cancerului pulmonar. Este utilizat la ora actual pentru tratarea cancerelor pulmonare care nu mai rspund la alte terapii i reprezint unul dintre cele mai bine comercializate medicamente anticancer (Gurib-Fakim, 2006; Kintzios, 2008; Cragg, 2008).

Tehnici de extractie

19

Figura 5.10. Formula structural a Paclixatel-ului (Taxol) Metoda convenional de purificare a taxolului cuprinde 4 etape. n prima etap, extractul rezultat n urma procesului de extracie cu un amestec aceton-hexan este fracionat cromatografic. Fraciunile care conin taxol sunt concentrate pn la uscare. Concentratele de taxol sunt cristalizate din amestecul metanol-ap i apoi recristalizate dintr-un amestec aceton-hexan, obinndu-se taxol de puritate 85-95%. n a treia etap taxolul este supus iari cromatografiei pe silicagel cu 2.5% izopropanol sau n-butanol n clorur de metilen rezultnd taxol de puritate 98%. n a patra etap, taxolul este dizolvat n aceton, soluia este filtrat i taxolul este recristalizat dintrun amestec aceton-hexan. n urma etapelor de extracie n faz organic i cromatografie se obine taxol de puritate 99%, care reprezint aproximativ 0.0145% din scoara iniial utilizat ca materie prim. Producerea taxolului prin aceast metod se confrunt cu urmtoarele dezavantaje: - timpul ndelungat necesar procedurilor de extracie i purificare; - timpi lungi de staionare n condiii dure; - randamente globale sczute. De asemenea, scoara de T brevifolia este obinut, de obicei, din natur copaci de 100 200 ani, deci sursa este limitat.

20

OPERAII TERMICE N INDUSTRIA ALIMENTAR

De-a lungul timpului au fost realizate multe studii pentru depirea acestor probleme i pentru gsirea altor metode de obinere a taxolului din alte surse naturale, prin culturi de esuturi vegetale sau alte metode biotehnologice, prin sintez chimic sau prin semisintez (Kintzios, 2008). Dei speciile de arbore de tisa sunt numeroase, iar unele au un coninut ridicat de taxol, acestea prezint inconvenientul unui coninut ridicat de ceruri i ali compui nepolari, care fac separarea taxolului dificil. De aceea, era necesar s se dezvolte tehnici selective pentru ndeprtarea acestor impuriti. Pentru mbuntirea procedeului de extracie a taxolului a fost propus i extracia cu fluide supercritice. Taxolul este legat de pereii celulari din plante printr-o legtur chimic slab. Funcie de proprietile solvenilor utilizai acesta poate fi extras parial din materialul vegetal. Dioxidul de carbon supercritic determin gonflarea materiei prime, ceea ce permite extracia mai uoar a soluilor vizai, n timp ce polaritatea sa favorizeaz extracia substanelor cu polaritate mare, ceea ce face extracia taxolului dificil. De aceea, Jennings i colaboratorii (1992) au propus extracia supercritic n care dioxidul de carbon are drept cosolvent etanolul, cunoscut ca un foarte bun solvent pentru taxol. Ei au propus un amestec de CO2 supercritic i 3.6% (procente molare) etanol la o presiune de 210 atm i 450C. n aceste condiii se poate extrage o cantitate de dubl de taxol, dect utiliznd CO2 n condiii supercritice singur. ntr-un brevet american (Kim i colab., 2003) se prezint un procedeu de extracie a taxolului utiliznd fluide supercritice i un cosolvent (modificator). Brevetul mai sus menionat ofer o metod de preparare a taxolului i a derivailor si care cuprinde o etap de extracie cu CO2 supercritic i un cosolvent, o etap de extracie lichid-lichid cu solveni organici pentru a obine un strat organic i o etap cromatografic pentru izolarea taxolului i a derivailor si din stratul de solvent organic. Etapele pot fi realizate continuu sau discontinuu. Cosolvenii servesc pentru eliberarea taxolului i a derivailor si din matricea solid. Sunt preferai cei care au n structura lor grupri OH (ex: ap n amestec cu un alcool, acid acetic, trietil amin). Condiiile de realizare a primei etape extracia supercritic sunt: temperatura ntre 60 1000C, presiunea 300 400 bari, preferabil 800C i 350 bari. Pentru etapa a doua este preferat, ca solvent organic, n-hexanul, care poate fi utilizat n combinaie cu cosolventul utilizat n prima etap. Ultima etap se realizeaz pe mai multe coloane cromatografice.

Tehnici de extractie

21

Instalaia de separare a taxolului i a derivailor si din surse vegetale (figura 2.14) cuprinde un rezervor pentru fluidul supercritic, un extractor n care se alimenteaz materia prim, un vas de separare n care se separ fluidul supercritic de componenii extrai, un separator lichid-lichid i cel puin o coloan cromatografic.

Figura 2.14. Instalaie industrial pentru obinerea taxolului prin extracie supercritic: 1- rezervor CO2, 2-pomp CO2, 3- rcitor; 4- nclzitor, 5- schimbtor de cldur pentru lichefiere, 6- rezervor cosolvent prevzut cu agitare; 7pomp alimentare cosolvent, 8- schimbtor de cldur pentru cosolvent; 9extractor, 10- regulator de presiune; 11- primul vas de separare, 12- valv pentru controlul fazei lichide; 13. schimbtor de cldur pentr nclzire/rcire, 14-al doilea vas de separare, 15- valv de control al fazei lichide, 16- regulator de presiune; 17- compresor CO2, 18- rezervor cu alcool; 19-evaporator alcool, 20pomp pentru vehicularea alcoolului, 21- rcitor; 22- rezervor hexan; 23evaporator hexan, 24- pomp vehiculare hexan; 25- rcitor; 26- vas pentru amestecarea alcoolului cu hexan, 27- separator lichid lichid; 28. concentrator; 29ansamblu de coloane cromatografice.

22

OPERAII TERMICE N INDUSTRIA ALIMENTAR

Instalaia prezentat n figura 2.14 este utilizat pentru procedee industriale, cnd se utilizeaz cantiti mari de materie prim. Alte exemple de utilizare a extraciei supercritice pentru obinerea unor metabolii secundari din plante sunt prezentate n tabelul 5.2. Tabelul 5.2. Aplicaii ale extraciei cu fluide supercritice n diverse domenii COLORANI ALIMENTARI Extracie caroteni din morcov INDUSTRIA ALIMENTAR Condiii de operare Capacitate extractor- 150mL Pmax-345 bar Extracie-207, 276 i 345 bar, Temp.-40, 55 i 70 0C Co-solvent: Etanol (5 and 10%) Volum CO2- 250 L Debit CO2-1.5 L/min -Extracie 342, 456 i 570 bar, 30, 40 and 50 0C -Co-solvent ethanol (5 and 10%) - Debit CO2 +etanol-500 mL/min P-138, 276 i 414 bar T-38 0C (and 48 0C at 414 bar) Debit CO2 -1418 L/min Vol. CO2- 1000 L P- 14, 22 i 30 MPa Temp- 40, 60 i 80 0C Debit CO2= 5, 10 i 15 mL/min P- 75, 125 i 175 bar Temp- 80, 100 i 120 0C Timp extracie-1,3 i 5 h Extracie: 3 h la 10 Mpa, cretere la 20 Mpa -1h i 6h la 30 Mpa Temp.-400C Referine bibliografice Barth i colab., 1995

Morcovi liofilizai

Vega i colab., 1996

Cartofi dulci (Extracie -caroten)

Spanos i colab., 1993

Extracie caroten din ulei de palmier Extracie -caroten ulei de palmier Extracie -caroten i vitamina E din fibre de palmier (Elaeis guineensis)

Wei i colab., 2005 Davarnejad i colab., 2008 Lau i colab., 2008

Tehnici de extractie

23

Reziduri de la fabricarea pastei de tomate (extracie -caroten i licopen)

P- 200, 250 i 300 bar Temp- 35, 45, 55 i 65 0C Debit CO2-2, 4 i 8 kg/h P-405.2 bar Temp.-60, 85 i 110 0C Timp extracie: 5, 12, 19, 26, 38, 50, 62, 79 minute Solveni: aceton, metanol, etanol, hexan, diclorometan i ap Debit CO2 -1.5 mL/min P-2545 MPa Temp.-4070 P-25,30, 35 MPa Temp.- 45, 60 i 75 0C P-300, 380, 460 bar Temp.-40, 60 i 80 0C

Baysal i colab., 2000 Ollanketo i colab., 2001

Coaj de tomate (extracie licopen-carotenoid)

Subproduse de la prelucrarea roiilor, extracie: carotenoide(-caroten i licopen), tocoferol, acizi grai i sistosteroli Licopen din tomate zdrobite

Kassama i colab., 2008 Shi i colab., 2009 Vgi i colab., 2007

Poptim- 40 MPa Temp. optim- 57 0C Durata operaiei 1.8 h P-de la 86259 bar Temp.-40, 50 i 60 0C Debit CO2 -4 mL/min P-70150 bar, Temp.- 80 0C Condiii de operare P-8.7, 9.5 i 10.3 MPa Temp.-50, 60 i 70 0C Timp extracie: 7-9 ore Debit CO2 -810 L/min )0.1 MPa i 250C) P-8.8 i 9.8 MPa Temp.- 40 i 60 0C

Huang i colab., 2008 Gmez-Prieto i colab., 2007 Blasco i colab., 1999 Referine Gironi i colab., 2008 Kondo i colab., 2002

Extracie -caroten i lutein din Mentha spicata L. Coaj de struguri negri (Extracia antocianilor) ULEIURI ESENIALE I AROME Ulei esenial de lmie

Limonen din ulei de lmie obinut prin presare la rece

24

OPERAII TERMICE N INDUSTRIA ALIMENTAR

Debit CO2 -8-9.3 L/min P- 75, 125, 150 i 300 bar Baysal i 0 Temp.- 32, 45, 60 i 75 C Starmans, Debit CO2- 4kg/h 1999 Uleiuri eseniale din coaja de Poptim- 12.5 bar Mira i portocale Temp. optim- 35 0C colab., 1999 Debit CO2- 0.53.5 kg/h Extract din boabe de piper P-1626 MPa Zhiyi i negru (Piper nigrum L.) Temp.-3550 0C colab., 2006 3 Debit CO2- 0.20.3 m /h INDUSTRIA FARMACEUTIC I MEDICIN TRADIIONAL P-20,30 i 40 MPa Geng i Temp.-30, 40 i 60 0C colab., 2007 Timp extracie: 10 minuteextracie static Eugenol din Eugenia P-10, 20 i 30 MPa Wenqiang caryophyllata Temp.-30, 40 i 50 0C i colab., Debit CO2 -2 L/min 2007 Extract din frunze de ment P-10 MPa i temp. 400C-1h Zizovic i (Mentha piperita) familia Aceleai condiii, dar debit colab., 2005 Lamiaceae CO2- 0.28 kg/h n sistem continuu Extract din seminte de P-10, 15 i 20 MPa Machmudah 0 Myristica fragrans (extract Temp.-40, 45 i 50 C i colab., numit nutmeg oil)Debit CO2-2.78x10-5, 2006 -5 utilizri incluv alimentare i 8.33x10 , cosmetice 1.39x10-5 m3/s (msurat la temp. camerei i 0.1 MPa) P-100300 MPa Carvalho Jr. Temp.-3040 0C i colab., 2005 P-100,200 i 350 bar Ibez i 0 Extract din rozmarin Temp.-49, 60 i 80 C colab., 2001 (Rosmarinus officinalis)Timp extracie: 30 minute poate avea i aplicaii n Modificatori: etanol, ap, alimentaie acid acetic, Debit CO2 -34 mL/min Ulei din semine de P-2930 MPa Yin i colab., Hippophae rhamnoides L, Temp.-3540 0C 2005 3 aplicaii tratarea cancerului i Debit CO2- 0.150.3 m /h Extracie carvon i limonen din semine de chimen

Tehnici de extractie

25

a rnilor provocate de radiaii X Extracia artemisinei din frunze de Artemisia annua L

Durat-45 ore P-75400 MPa Temp.-3050 0C Debit CO2-5.5x10-5, 11x10-5 kg/s P-100300 bar Temp.-3040 0C Debit CO2-8.33x10-5 kg/s QuispeCondori i colab., 2005 Moura i colab., 2005 Balachandran i colab., 2006 Salgin, 2007

Extract de fenicul (Foeniculum vulgare) poate avea i aplicaii alimentare

Extract de Ginger (Zingiber P-160 bar Officinale Roscoe)-poate avea Temp.-40 0C i aplicaii alimentare INDUSTRIA COOSMETIC Extracie ulei de jojoba P-125,35 i 45 MPa Temp.-7090 0C Debit CO2-3.33x10-8, 6.67x10-8, 13.33x10-8 m3/s

26

OPERAII TERMICE N INDUSTRIA ALIMENTAR