Universidad de Chile Facultad de Ciencias Agronmicas Departamento de Produccin Animal Asignatura Evaluacin de Alimentos

MANUAL EXTRACTO ETREO

Elaborado por Ing. Agr. JOS CAQUILPAN PARRA Revisado por Lab. Qca. DINA CERDA 2011

ANTECEDENTES GENERALES Extracto etreo En 1879 Franz Von Soxhlet desarrollo una metodologa de extraccin de grasa, la cual hoy lleva su nombre, esta ha sido una de las tcnicas de extraccin ms utilizadas desde entonces. En principio es una extraccin de compuestos solubles en ter. La determinacin originalmente fue utilizada para la obtencin de grasa en muestras de leche, consiste en un solvente que al ser calentado se volatiliza, luego al pasar por un refrigerante se condensa y cae sobre la muestra, la cual queda sumergida en el solvente. Posteriormente ste, pasa a travs de un sifn, al matraz de calentamiento para empezar de nuevo el proceso. El contenido de grasa se cuantifica por diferencia de peso. Siempre debe hacerse referencia al extracto etreo y no al de grasa, para designar la porcin extrada. Esto se debe a que, adems de la grasa, el ter extrae pigmentos como la clorofila, ceras, etc. El ter etlico es uno de los solventes ms eficaces y se utiliza en el establecimiento de todas las normas existentes. Para que el ter pueda entrar en contacto con las muestras que se van a extraer, debe penetrar en los tejidos celulares. Para eso es indispensable tener muestras secas, ya que la humedad retarda el contacto del ter con estas. Adems, la humedad, disuelve algunos carbohidratos, lo cual es difcil de eliminar por destilacin, sin emplear temperaturas altas, lo que puede implicar la perdida de cidos grasos voltiles. La muestra debe quedar finamente molida, a fin que presente una amplia superficie para el contacto con el ter.

MATERIALES Y PRECAUCIONES Listado de materiales Dedales de celulosa Papel filtro Vasos para extracto etreo Adaptador de acero Probeta 50 cc 2 g (aproximadamente) de muestra seca Reactivos ter etlico para anlisis Material de seguridad Guantes Mascara con filtro de gases Reglas de seguridad Durante la operacin del equipo evitar trabajar cerca de fuentes de fuego o equipos elctricos, ya que los solventes volatilizados son altamente inflamables. El plato calefactor puede alcanzar temperaturas de hasta 260C en la fase de calentamiento, y la disminucin de temperatura es de manera gradual, por lo que se debe tener precaucin al sacar los vasos terminado el ciclo de trabajo. Ajustar la temperatura del plato calefactor en funcin del solvente con el cual se est realizando la extraccin, segn la tabla que se anexa. Dispositivos de seguridad. Falta de agua. El equipo cuenta con un medidor de flujo de agua, el cual verifica, durante la operacin del equipo, si existe una disminucin del flujo de agua, necesaria para la condensacin del solvente evaporado en el vidrio condensador. Si no existe flujo de agua, el equipo no comenzara un nuevo ciclo de trabajo, y si el flujo de agua disminuye durante el ciclo de trabajo una alarma acstica sonara y en el visualizador se ver AL3 y H2O, interrumpindose automticamente el ciclo de trabajo. Recomendaciones para la manipulacin de solventes orgnicos Siempre proteger ojos y manos, usando gafas y guantes. Realizar el trabajo en un lugar ventilado. Recordar que los solventes como el ter son solventes altamente explosivos e inflamables no slo en la destilacin, sino tambin por friccin y agitacin violenta. Precauciones Desconectar cualquier interruptor cercano.

Apagar calefn. Cualquier fuente de calor cercana debe estar apagada ej. digestor, plato calefactor etc. Evitar transitar cerca del extractor de grasas. Vigilar el flujo de agua. El ter etlico puede formar perxidos explosivos, se debe mantener alejado del calor, chispas y llamas, se debe utilizar solo con ventilacin adecuada, se debe evitar respirar los vapores, evitar el contacto con los ojos, la piel y la ropa.

Primero auxilios. En caso de contacto, lavar la zona afectada de inmediato con abundante agua por 15 minutos. En caso de inhalacin, llevar a la persona a un lugar aireado. En caso de ingestin NO inducir al vomito, beber bastante agua y acudir al mdico. METODOLOGA 1) Preparacin previa de la muestra: La muestra debe estar totalmente libre de humedad, por lo que previamente se debe secar a 105C hasta peso constante. La muestra seca se transfiere a un papel filtro, el que se dobla formando un papelillo, el cual debe ser rotulado con lpiz grafito, para luego ser colocado dentro de un dedal de celulosa. Los vasos para extracto etreo deben ser pesados y rotulados, para lo cual deben estar exentos de humedad (colocar en estufa a 105C por 2 horas aproximadamente). 2) Condicin inicial del equipo antes de encenderlo: Las perillas en la posicin de Inmersin (I). Las llaves de tefln verticales. La palanca de retencin del equipo debe estar arriba. Colocar la temperatura del plato calefactor en relacin al solvente que se est utilizando1. Verificar la compatibilidad de los sellos plsticos2. 3) Encendido: Abrir la llave del grifo Conectar a la corriente elctrica. Presionar el botn verde, el cual se iluminar, mostrando que el equipo est encendido. El visor principal mostrar la temperatura actual del plato calefactor. El visor secundario mostrar el programa que se utilizara para la extraccin: P013 4) Preparacin de equipo:
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Solo si se utiliza un solvente distinto del ter etlico, o el equipo se desprograma. Solo si se cambia el solvente a utilizar, verificar compatibilidad en el manual del equipo. 3 El programa consta de 3 etapas: 30 min en inmersion, 63 min en washing y 3 min en recover.

Introducir los papelillos dentro de los dedales, y colocar el adaptador metlico al dedal (Figura 1). Fijar los dedales al equipo (magnticamente) y ordenar vasos rotulados frente a las muestras correspondientes (Figura 2). Medir 50 mL de ter etlico y colocar a cada vaso. Pasar las perillas de la posicin Inmersin a la posicin Washing, lo que har que el vstago con el dedal suba. Colocar los vasos con ter en la placa calefactora, cerciorarse que los sellos de silicona estn puestos (Figura 3). Bajar la palanca de retencin, y cerciorarse que los vasos queden bien ajustados al equipo. Pasar las perillas de Washing a Inmersin, las llaves de tefln deben estar en posicin vertical. 5) Funcionamiento del equipo: Presionar START, el equipo comenzar a subir la temperatura de las placas calefactoras, el visor muestra la temperatura en C. Una vez llegado a 110C (aproximadamente), el equipo automticamente iniciar el programa de Inmersin, y luz indicadora I se encender. Luego de 30 minutos sonara la alarma, se deber presionar la flecha diagonal y la luz indicadora W se encender, pasar las perillas de inmersin a washing y colocar las vlvulas de tefln en posicin vertical. Luego de 63 minutos sonara la alarma, se deber presionar el botn con la flecha diagonal, y la luz indicadora R se encender, pasar las perillas de washing a recover y colocar las vlvulas de tefln en posicin horizontal. Comenzara a acumularse el ter en la parte superior del equipo. Luego de 3 minutos sonara la alarma y en el visor se leer End, presione el botn star/ stop para detener el sonido y el proceso finalizar. Presionar el botn verde para el apagado del equipo. 6) Deje enfriar los platos calefactores, idealmente hasta temperatura ambiente, antes de sacar los vasos receptores. 7) Una vez fros los vasos con extracto etreo, subir la palanca de retencin, primero presionando levemente hacia abajo, retirando el seguro y subindola lentamente. Puede quedar restos de ter en los vasos, por lo cual se deben dejar lo vasos en un ambiente ventilado, hasta que no se aprecie ter. 8) Colocar los vasos en estufa a 105 C hasta peso constante, registrar valor y calcular % extracto etreo. 9) El equipo debe quedar apagado, desenchufado y elFigura 2. grifo cortada. agua del Figura 3. Figura 1.

Figura 3.

Equipo Velp SER 148 Solvent Extractor

BIBLIOGRAFA Association of official agricultural chemist. 1960 Oficial methods of analysis. 9th. Ed. Washington, D. C. 832 p. AOAC. 2000. Official Methods of Analysis. 18th ed. AOAC Int., Washington, DC. Bateman, J. 1970. Nutricin animal. Manual de mtodos analticos. Editorial herrero hermanos, sucesores, S.A. Mxico. Impreso en Mxico. Luque de Castro, M.D. y F. Priego-Capote. 2010. Soxhlet extraction: Past and present panacea. Journal of Chromatography A, 1217; 23832389 Virot M., V. Tomaoa, G. Colnagui, F. Visinoni and F. Chemata. 2007. New microwaveintegrated Soxhlet extraction An advantageous tool for the extraction of lipids from food products. Journal of Chromatography A, 1174:138144