H.

Pylori FACTORES VIRULENCIA

Cag: Debido a la actual heterogeneidad genticaPAIdentro de la H. genomas pylori, factores de virulencia bacteriana probablemente juegan un papel importante en la determinacin del resultado de la H. pyloriinfeccin. La isla de patogenicidad cag (cag PAI) es un elemento de ADN de 40 kb de insercin que contiene 27 a 31 genes, flanqueada por 31 pb repeticiones directas y codifica una de las ms intensamente investigadas H. protenaspylori, CagA ( 7 , 43 , 60 ). CagA fue inicialmente identificado en la dcada de 1990, y la expresin de CagA se encontr que se asocia fuertemente con lcera pptica ( 62 , 67 ). Debido a su asociacin con la enfermedad clnica, la cag PAI es ahora un bien caracterizado H. determinante pylori virulencia, y CagA se utiliza con frecuencia como un indicador de la presencia de toda la cag PAI. Aproximadamente 60 a 70% de Western H. pylori y casi el 100% de las cepas de Asia Oriental expresa CagA ( 10 , 43 , 310 ). Aunque todos H. pylori induce gastritis, las cepas que contienen el PAI cag (cag +) aumentan los riesgos para la gastritis severa, gastritis atrfica y cncer gstrico distal en comparacin con aquellos con cepas que carecen de la isla cag (cag-mutantes deficientes) ( 34 ,62 , 67 , 68 , 167 , 240 , 245 , 252 , 265 , 287 , 311 , 325 ). Al menos 18 genes codifican cag componentes de un aparato de secrecin tipo IV bacteriana que funciona para exportar protenas bacterianas travs de la membrana bacteriana y en acogida clulas epiteliales gstricas. CagAH. pylori son frecuentemente segregados en cepas cagA-positivas y cagA-negativas, dependiendo de la presencia o ausencia del producto gnico terminal de la isla CAG, CagA. El H. pylori protena CagA es de 120 - a la protena de 140 kDa, que se desplaza en las clulas husped por el sistema de secrecin tipo IV cag despus de la adhesin bacteriana. Una vez dentro de la clula husped, CagA es fosforilada en tirosina glutamato-prolina-isoleucina-tirosina-alanina (EPIYA) los motivos de clulas e induce cambios morfolgicos, inicialmente se denomin "el fenotipo colibr", que se asocian con aumento de la migracin celular ( 20 , 226 y 279 , 292 , 293 ) (vase "fosforilacin dependiente de la sealizacin celular CagA de acogida"). Hasta la fecha, cuatro distintos motivos EPIYA (EPIYA-A,-B,-C, y D) han sido identificados dentro de la regin polimrfica carboxi-terminal de CagA, y se distinguen por diferentes secuencias de aminocidos que rodean el motivo EPIYA ( 128 , 134 , 215 ). EPIYA-A y B motivos estn presentes en las cepas en todo el mundo, mientras que EPIYA-C se encuentra normalmente slo en las cepas de los pases occidentales (Europa, Norteamrica y Australia). El nmero de sitios EPIYA-C puede variar, sin embargo, la mayora de las protenas CagA contienen un nico sitio EPIYA-C (tipo ABC), y EPIYA-A y sitios EPIYA-B son fosforilados a un menor grado que EPIYA-C sitios. En las cepas occidentales, un mayor nmero de CagA EPIYA-C sitios es un indicador importante del riesgo de desarrollar cncer gstrico ( 31 ). El motivo EPIYA-D se encuentra casi exclusivamente en las cepas de Asia del Este de Japn, Corea del Sur y China), y las cepas que contienen este motivo inducir a una mayor cantidad de interleuquina-8 (IL-8) a partir de las clulas epiteliales gstricas que lo cepas portadoras de Occidental tipo ABC CagA ( 19 , 128 ). CagA fosforilacin dependiente de la sealizacin celular de acogida.Una vez que se fosforila por miembros de las familias Abl y Src de quinasas, CagA fosfo-objetivos e interacta con numerosos efectores intracelulares. Fosfo-CagA activa una fosfatasa de tirosina eucariotas (SHP-2), lo que lleva a la activacin sostenida de las reguladas por seales extracelulares-quinasas 1 y 2 (ERK1 / 2), adaptador de Crk ( 133 ), y C-terminal quinasa Src, en una fosforilacin de la tirosina dependiente de la forma en que Asia Oriental ABD tipo CagA exhibe fuerte actividad de unin de SHP-2 que Occidental del tipo ABC CagA ( 133 ).Interacciones de la fosfo-CagA con C-terminal quinasa Src se activan rpidamente un circuito de retroalimentacin negativa a regular a la baja Src de sealizacin ( 315 ). En una lnea celular de adenocarcinoma gstrico humano (AGS), el desplazamiento y posterior fosforilacin de CagA resultado en el "fenotipo colibr", un fenotipo asociado con el alargamiento de las clulas y la dispersin de clulas ( 209 , 279). En las clulas AGS, la interaccin entre los fosfo-CagA y SHP-2 aumenta la duracin de la activacin de ERK, de una manera independiente de Ras o fosfatidilinositol 3-quinasa (PI3K), y los resultados en la elongacin celular ( 132). La interaccin entre CagA y SHP-2 tambin desfosforila e inactiva la quinasa de adhesin focal (FAK), lo que resulta en la elongacin celular ( 316 ). Fosforilado CagA tambin induce la elongacin celular mediante la induccin de un defecto en la retraccin de clulas, sin embargo, las molculas de sealizacin requeridos para este fenotipo permanecer indefinido ( 38 ). Adems, la actividad cataltica de c-Src es inhibida por fosforilados CagA, que conduce a la desfosforilacin de tirosina de la actina protenas cortactin unin, ezrina, y vinculina, que conduce a la elongacin celular ( 208 , 280 , 281 ). CagA fosforilacin independiente de la sealizacin de la clula husped. Fosforilada CagA tambin ejerce efectos dentro de la clula que contribuyen a la patognesis. Translocacin, pero no la fosforilacin de CagA conduce a la activacin aberrante de -catenina, la alteracin de los complejos de unin apical, y una prdida de la polaridad celular ( 13 , 27 , 101 , 212 , 269 ,303 ). Fosforilada CagA se dirige a la

protena de adhesin celular E-cadherina, el receptor del factor de crecimiento de hepatocitos c-Met, la fosfolipasa C gamma (PLC-), los Grb2 adaptador de protenas, y la particin-quinasa defectuosa 1b/microtubule afinidad regulacin de la quinasa 2 (PAR1b / Mark2) ( 53 , 205 ,212 , 269 ), lo que conduce a las respuestas pro-inflamatorias y mitognico, la interrupcin de las uniones clula-clula, y la prdida de la polaridad celular.Fosforilada CagA asociados con la estrecha unin del epitelio andamios protenas zonula occludens 1 (ZO-1) y la molcula de protena de la transmembrana de adhesin de la unin A (JAM-A), que conduce a la naciente Asamblea, pero incompleto de las uniones estrechas en sitios ectpicos de la adhesin bacteriana ( 13 ) . Recientemente, CagA fue demostrado que se unen directamente PAR1b/MARK2, un regulador central de la polaridad celular, y para inhibir su actividad quinasa, as como a dysregulate formacin huso mittico, promoviendo as una prdida de la polaridad celular (vase "apical-junctional complejos") ( 179, 269 , 320 ). Si bien es evidente que no tirosina fosforilados formas mutantes de CagA ejercen efectos en las clulas epiteliales gstricas, a nuestro entender, actualmente no hay evidencia directa de CagA fosforilada en la clula husped. CagA es uno de los ms intensamente investigado H. protenas pylori, y hasta la fecha, es la protena bacteriana efector slo sabe que ser trasladadas por el sistema de secrecin tipo IV cag. Como se mencion anteriormente, los estudios con modelos animales y cultivos celulares han proporcionado pruebas de la importancia de CagA de H. patognesis pylori y han puesto de relieve la amplia gama de funciones de la clula husped con el que pueden interferir CagA. La generacin de ratones transgnicos que expresan CagA ha proporcionado una evidencia ms directa de una relacin causal entre CagA y la oncognesis, demostrando que la expresin transgnica de CagA conduce a la proliferacin de clulas epiteliales gstricas y el carcinoma. Estos cambios no se observaron en ratones que expresan la fosforilacin resistente CagA ( 231 ). En general, hay una fuerte evidencia de que funciona como una oncoprotena CagA bacteriana en los mamferos. Sin embargo, los modelos experimentales que estn actualmente disponibles no han proporcionado todas las respuestas. Cultivo de clulas y modelos animales a menudo proporcionan datos contradictorios, y los cambios patolgicos reportados para ratones transgnicos CagA se produjo en ausencia de inflamacin, que est en marcado contraste con lo que se ve en los seres humanos ( 231 ). Adems, slo una pequea fraccin de los individuos colonizados por CagA-positivo H. pylori desarrollar cncer gstrico. An queda mucho por aprender acerca de las circunstancias que se unen para permitir CagA para iniciar la carcinognesis. Hasta hace muy poco, no estaba claro cmo CagA se entrega realmente en la clula husped. Sin embargo, Murata-Kamiya y sus colegas han informado de que el H. pylori induce la aparicin de un fosfolpido anfitrin, fosfatidilserina, en el folleto externa de la membrana plasmtica, donde CagA especficamente pueden interactuar y ganar la entrada en las clulas ( 211 ).reas frtiles para la investigacin futura se incluyen estudios para determinar el mecanismo especfico por el cual CagA se internaliza y cuando durante la infeccin crnica CagA se desplaza en las clulas husped. PeptidoglicanoAdems de CagA, el sistema de secrecin cag tambin puede ofrecer componentes de H. pylori peptidoglicano en las clulas husped. Peptidoglicano interacta con la molcula husped Nod1 intracelular de reconocimiento de patrones, que acta como un sensor para componentes peptidoglicano procedentes de bacterias Gram-negativas. La interaccin de H. pyloripeptidogylcan con NOD1 conduce a la activacin de NF-kB que dependen de las respuestas pro-inflamatorias, tales como la secrecin de IL-8 ( 323 ) o -defensinas-2 ( 37 ). H. peptidoglicano pylori trasladadas se ha demostrado para activar otro host vas de sealizacin que se asocian con un mayor riesgo de desarrollar cncer gstrico. Por ejemplo, un estudio reciente ha demostrado que elH. pylori trasladadas peptidoglicano puede activar PI3K-AKT sealizacin, lo que lleva a la disminucin de la apoptosis y la migracin celular aumentada ( 214). Otro estudio revel que la deteccin de H. intracelulares pylori componentes peptidoglicano desencadena una cascada de sealizacin intracelular, que culmina en la produccin de interfern de tipo I (IFN) ( 331 ). La toxina VacAUn independiente H. lugar pylori relacionado con el riesgo de enfermedad mayor es vacA, que codifica la toxina secretada Vaca ( 61 , 64 , 247 , 276 ). Vaca fue identificado por primera vez como una citotoxina proteica que induce vacuolizacin intracelular de las clulas en cultivo ( 173 ). Se purific posteriormente a la homogeneidad de H. pylori sobrenadantes de cultivo de caldo y se identific como una protena de aproximadamente 87 kDa en su forma desnaturalizada ( 61 ). VacA inhibe respuestas de clulas T a H. pylori, que puede contribuir a la longevidad de la infeccin ( 35 , 111 , 299 ). El gen vacA est presente en la mayora de H. pylori, sin embargo, diferencias considerables en las actividades vacuolizante se observan entre las cepas. Esta variacin se atribuye a las variaciones en las estructuras de genes vacA dentro de la seal (s) regin, la regin media (m), y el ms recientemente identificados intermedio (i) regin, que se encuentra entre la s y regiones m ( 259 ). La regin s es estratificada en subtipos S1 y S2 y codifica un componente del pptido seal y el extremo N de la protena madura. La regin m parcialmente codifica la 55-kDa C-terminal de la subunidad y se clasifica

como del tipo M1 o M2. VacA s1/m1 cepas quimricos inducen una mayor vacuolizacin de hacer s1/m2 cepas, y tpicamente no hay actividad en el vacuolizante s2 / cepas m2 ( 24 , 61 , 259 ,321 ). En la poblacin occidental, el alelo vacA s1/m1 est fuertemente asociada con la enfermedad de lcera duodenal y gstrica y con cncer gstrico ( 24 , 25 ,203 ). Las cepas de Asia Oriental son casi todos s1/m1 vacA y, como se predijo, no estn asociados con ningn resultado clnico especfico. Hay dos subtipos i regin, I1 e I2, la regin que juega un papel funcional en la vacuolizacin, ya que las cepas vacA s1/i1/m2 se vacuolizante tipos y cepas vacA s1/i2/m2 no inducen vacuolizacin. Todos los alelos s1/m1 vacA son de tipo I1, todos los alelos S2/M2 son de tipo i2, y s1/m2 alelos puede ser I1 o I2 ( 259 ). En un estudio de 73 H. infectados pylori pacientes iranes, la colonizacin con cepasvacA i1 est fuertemente asociada con el cncer gstrico. Esta asociacin con el cncer gstrico puede ser ms fuerte que las asociaciones de vacA s m u otro tipo o estado cag ( 259 ). Entre H. pylori aisladas de pacientes en Irak y en Italia, las cepas vacA i1 se asociaron con la enfermedad de lcera gstrica ( 31 ,74 , 141 ). Sin embargo, en Asia oriental y el sudeste de Asia las poblaciones, donde la incidencia de cncer gstrico es alto, la vacA i-regin de subtipo no est asociado con el riesgo de la enfermedad ( 228 ). Recientemente, una delecin de 81 pb entre la regin m, y la regin i se identific y se denomina la regin d; cepas d1 no tienen supresin, mientras que las cepas del tipo D2 contienen un 69 - a 81-bp supresin. Para un pequeo nmero de cepas occidentales, pero las cepas asiticas no al este, vacA tipo D1 se asoci significativamente con la infiltracin de neutrfilos y la atrofia de la mucosa gstrica, lo que podra hacer que el genotipo de la regin d otro locus de riesgo para el cncer gstrico y de lcera pptica en las cepas de Occidente ( 229 ). Las consecuencias de VacA dentro de la clula husped. Similares a los elementos codificados por el cag PAI, VacA ejerce mltiples efectos sobre la estructura de las clulas epiteliales y los resultados en los fenotipos que incluyen alteracin de la funcin barrera del epitelio gstrico y la modulacin de la respuesta inflamatoria. Otros efectos de la VacA incluyen la interrupcin de finales de endosomal compartimentos, lo que resulta en la formacin de vacuolasin vitro ( 173 , 237 ), y la focalizacin de las mitocondrias, lo que lleva a una disminucin en el potencial de membrana mitocondrial, la liberacin de citocromo c, activacin de la caspasa-8 y caspasa-9, y la induccin de laapoptosis in vitro ( 63 , 107 , 190 , 243 , 336 ). Uno de varios receptores que se une a VacA sobre las clulas epiteliales gstricas es el receptor de tipo tirosina fosfatasa RPTP protena. Este receptor regula la proliferacin celular, la diferenciacin, y la adhesin, todo lo cual probablemente juegan papeles en ulcerognesis ( 105 ). La administracin oral de cido activado y despus se neutraliz VacA de tipo salvaje RPTP + / + ratones tiene un profundo efecto sobre el epitelio gstrico. Dentro de 2 das de la administracin VacA, sangrado abundante se desarrolla en el estmago, lo cual conduce al desarrollo de lceras gstricas y la atrofia gstrica. En marcado contraste, RPTP - / - ratones que recibieron VacA son resistentes al desarrollo de dao gstrico (105 ). Curiosamente, en cultivos primarios de clulas aisladas de cualquier RPTP- / - o RPTP + ratones, VacA induce vacuolizacin. Sin embargo, slo las clulas aisladas de RPTP + / + ratones desprenderse de Matrigel en respuesta a Vaca, lo que sugiere que VacA induce lceras gstricas a travs de la sealizacin no RPTP, vacuolizacin ( 99 ). Informes recientes sugieren que CagA es capaz de regular a la baja los efectos de la Vaca en vacuolizacin de la clula husped, y por el contrario, VacA puede regular a la baja actividad de CagA ( 232 , 308 ). Mecnica, Oldani et al.determin que la tirosina fosforilados CagA bloques trfico Vaca, que le impiden alcanzar su objetivo intracelular y la induccin de formacin de vacuolas. A travs de un mecanismo separado, unphosphorylated vacuolizacin CagA antagoniza mediante el bloqueo de la actividad VacA en la mitocondria ( 232 ). Por el contrario, VacA antagoniza los efectos de CagA en la dispersin y el alargamiento celular mediante la inactivacin del receptor de factor de crecimiento epidrmico (EGFR) y HER2/neu, que suprime la activacin de ERK1 / 2, activadas por mitgenos (MAP) quinasa y el fenotipo colibr ( 308 ). Estos hallazgos resaltan an ms los mecanismos a travs del cual H. pylori puede evitar la induccin de dao celular en exceso y mantener a largo plazo la colonizacin del nicho gstrico. Adhesinas yadherenciaOMPsde H. pylori al epitelio gstrico facilita la colonizacin inicial, la persistencia de la infeccin, y la entrega de los factores de virulencia para albergar las clulas epiteliales. Anlisis de secuencias de seis H. completamente secuenciado pylorirevela que aproximadamente el 4% de la H. genoma pylori se prev que codifican protenas de membrana externa (OMP), que es mucho ms que la de otras especies de bacterias conocidas. Expresin de OMP se ha asociado con enfermedades gastroduodenales (como veremos ms adelante) y por lo tanto puede aumentar el riesgo de desarrollar cncer gstrico ( 73 ). Baba. Sangre grupo de unin al antgeno adhesina (BABA) est codificado por el gen babA2, que se une a fucosilado antgeno Lewis b (Le b) en las superficies de las clulas epiteliales gstricas y es el ms bien descrita H. OMP pylori ( 36 ,113 , 143 ). Los ratones transgnicos que expresan Le b en clulas de pozo y

la superficie de mucosas han sido utilizados para demostrar que H. pylori se adhiere a las superficies de Le B-clulas que expresan ( 123 ). La gastritis que sigui es ms grave que la observada en los ratones no transgnicos, a pesar de la densidad de colonizacin comparable, lo que sugiere que Le B-mediada por la colonizacin puede aumentar el potencial patgeno de H. pylori ( 123 ). Un estudio reciente utilizando el mismo sistema demostrado que la presin selectiva es ejercida por transgnica Le expresin b y dicta el patrn de expresin del antgeno Lewis en H. lipopolisacrido pylori (LPS) de Le X y Le Le y hacia la B (248 ). Los anlisis de las especificidades de unin de H. pylori de todo el mundo sugieren que la adhesina Baba ha evolucionado en respuesta a la sede de los patrones de glicosilacin de la mucosa para permitir la H. pylori para adaptarse a su husped y para mantener la colonizacin persistente ( 22 , 248 ). La presencia de babA2 se asocia con la enfermedad de la lcera duodenal y cncer gstrico, y cuando se encuentran en combinacin con cagA y los alelos vacA s1, que se asocia con un mayor riesgo de desarrollar una enfermedad ms grave (113 ). Los anlisis ms recientes de babA2 como un marcador de virulencia han producido datos contradictorios sobre la utilidad de babA2 expresin en la prediccin de la evolucin clnica, que es muy probable que depende del origen geogrfico de la H. pylori. En las poblaciones de portugus y tailands, babA2no es un biomarcador de la enfermedad de lcera pptica o cncer gstrico ( 52 ,110 ). Sin embargo, para las cepas aisladas a partir de Alemania, Turqua, o el norte de Portugal, la expresin babA2 se asocia con la gravedad de la enfermedad gstrica ( 26 , 86 , 113 ). Saba y OIPA. cido silico vinculante adhesina (Saba) es una H. pyloriadhesina que se une a la estructura de carbohidratos sialil-Lewis antgeno xexpresado en el epitelio gstrico y est asociado con un riesgo incrementado de cncer gstrico pero una reduccin del riesgo de ulceracin duodenal ( 354 ).Sialil-Lewis expresin x se induce durante la inflamacin gstrica crnica, lo que sugiere que el H. pylori modula los patrones de glicosilacin de clulas de acogida para mejorar el apego y la colonizacin ( 187 ). In vitro, el H. pyloriinduce la expresin de antgenos de Lewis sialil-x a travs de la induccin del gen que codifica beta3 GlcNAc T5, una transferasa esencial para la biosntesis de los antgenos de Lewis ( 195 ). Por otra parte, Saba est regulada por la variacin de fase, de tal manera que la expresin de Saba rpidamente se puede cambiar "on" u "off" para adaptarse a los cambios ejercidos por el nicho gstrico ( 354 ). Protena inflamatoria exterior (OIPA) es una protena relacionada con la inflamacin membrana externa ( 353 ). H. pylori contiene un gen funcionaloipA o no funcional, y la presencia de un gen funcional se asocia significativamente con la presencia de lceras duodenales, cncer gstrico, y el aumento de la infiltracin de neutrfilos ( 102 , 354 ). OIPA expresin est vinculada a la IL-8 aument la produccin in vitro ( 352 ). Un trabajo reciente con Mongolia jerbos infectados con el tipo salvaje H. pylori y una cepa isognica oipA mutante demostrado el papel de OIPA en la induccin de las citoquinas IL-1 la mucosa, la IL-17, y factor de necrosis tumoral alfa (TNF-) y en la inflamacin de la mucosa gstrica ( 296 ). OIPA tambin est implicado en la regulacin positiva de las metaloproteinasas de matriz 1 (MMP-1), una MMP asociado con el cncer gstrico ( 347 ), en la inhibicin de la glucgeno sintasa quinasa 3 (GSK3) ( 304 ), y en -catenina a la translocacin ncleo ( 102 ). La acumulacin de -catenina en los resultados del ncleo en la formacin de heterodmeros con factores de transcripcin LEF / TCF y en la activacin transcripcional de genes que pueden influir en la carcinognesis. Dupa. lcera duodenal gen promotor (Dupa) est situado en la zona de la plasticidad de la H. genoma pylori y puede ser otro marcador de virulencia novedoso. El anlisis inicial de 500 H. pylori procedentes de Colombia, Corea del Sur y Japn mostraron un mayor riesgo de lcera duodenal y un menor riesgo de cncer gstrico en personas que llevan a dupa positivas cepas ( 178 ). in vitro, Dupa aumenta la produccin de IL-8 ( 178 ). Sin embargo, un estudio posterior se centr en las cepas procedentes de Blgica, Sudfrica, China y los Estados Unidos no se encontraron relaciones significativas entre la expresindupa y la lcera duodenal, sino una asociacin significativa con el cncer gstrico ( 18 ). La comparacin de las cepas procedentes de Irn e Irak indica que la expresin dupa se asocia significativamente con lcera duodenal en cepas aisladas de Irak, pero no en los aislados de Irn ( 141 ). No se encontr asociacin entre la expresin dupa y el cncer gstrico o duodenal en las cepas procedentes de Japn ( 220 ) o Suecia ( 275 ), pero se observaron correlaciones entre dupa y la enfermedad de lcera duodenal o cncer gstrico en las cepas de China ( 275 ). En conjunto, parece probable que dupa puede promover la lcera duodenal y / o cncer gstrico en algunos, pero no todas las poblaciones,. FlaA. H. pylori posee un paquete unipolar de 3 a 5 flagelos, que se componen de tres elementos estructurales: la basal del cuerpo, el gancho, y el filamento (112 , 234 ). El filamento acta como una hlice cuando se gira en su base y es un copolmero de la flagelina subunidades FlaA y Flab ( 175 , 295 ). FlaA es la subunidad predominante, y Flab es la subunidad menor. La mutacin de los resultados flaA en truncamiento flagelar y disminucin de la motilidad in vitro (149 ). In vivo, FlaA y otras protenas necesarias para el ensamblaje flagelar son esenciales para la infeccin persistente en

roedores y modelos gnotobiticos lechones ( 79 , 157 , 160 ). A diferencia de la flagelina de Salmonella u otros patgenos Gram-negativos que colonizan las superficies mucosas, H. FlaApylori tiene una baja actividad intrnseca para activar Toll-like receptor 5 (TLR5), que pueden contribuir a la evasin de la respuesta inmune del husped y la colonizacin persistente ( 15 , 114 , 170 ). Mutantes isognicas de MotB, que codifica la protena MotB motor flagelar y es necesario para la motilidad, tambin afectan significativamente la colonizacin ( 235 ). Adems, comparando una cepa de H. no es cancergeno pylori a un in vivo-adaptado cepa cancergena, la cepa no es cancergeno se encontr que contena una mutacin de un solo nucletido en FlaA que los haga menos mviles que la cepa cancergena ( 100 ). As, la motilidad parece ser esencial para la colonizacin gstrica xito y pueden contribuir a la patognesis