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Edicin N 3

ADN, genes y cdigo gentico


Del ADN a la biotecnologa moderna El conocimiento del ADN (cido desoxirribonucleico), su estructura y funcin, fue determinante para el desarrollo de la biotecnologa moderna. La estructura de doble hlice del ADN, que los investigadores James Watson y Francis Crick propusieran en 1953 proporcion respuestas a muchas preguntas que se tenan sobre la herencia. Predijo la autorreplicacin del material gentico y la idea de que la informacin gentica estaba contenida en la secuencia de las bases que conforman el ADN. Ms an, con el correr de los aos y de las investigaciones, se pudo determinar que todos los seres vivos contienen un ADN similar, formado a partir de las mismas unidades: los nucletidos. Este cdigo gentico mediante el cual se escriben las instrucciones celulares es comn a todos los organismos. Es decir que el ADN de un ser humano puede ser ledo dentro de una bacteria, y una planta puede interpretar la informacin gentica de otra planta diferente. A esta propiedad de la informacin gentica se la conoce como universalidad del cdigo gentico. El cdigo gentico universal es uno de los conceptos bsicos para comprender los procesos de la biotecnologa moderna. Por ejemplo, la posibilidad de generar organismos transgnicos, y que las instrucciones del ADN de un organismo puedan determinar nuevas caractersticas en organismos totalmente diferentes. La funcin del ADN El ADN tiene la funcin de guardar informacin. Es decir, contiene las instrucciones que determinan la forma y caractersticas de un organismo y sus funciones. Adems, a travs del ADN se transmiten esas caractersticas a los descendientes durante la reproduccin, tanto sexual como asexual. Todas las clulas, procariotas y eucariotas, contienen ADN en sus clulas. En las clulas eucariotas el ADN est contenido dentro del ncleo celular, mientras que en las clulas procariotas, que no tienen un ncleo definido, el material gentico est disperso en el citoplasma celular. La estructura del ADN El ADN est organizado en cromosomas. En las clulas eucariotas los cromosomas son lineales, mientras que los organismos procariotas, como las bacterias, presentan cromosomas circulares. Para cada especie, el nmero de cromosomas es fijo. Por ejemplo, los seres humanos tienen 46 cromosomas en cada clula somtica (no sexual), agrupados en 23 pares, de los cuales 22 son autosomas y un par es sexual. Una mujer tendr un par de cromosomas sexuales XX y un varn tendr un par XY.

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Cada cromosoma tiene dos brazos, ubicados por arriba y por debajo del centrmero. Cuando los cromosomas se duplican, previo a la divisin celular, cada cromosoma est formado por dos molculas de ADN unidas por el centrmero, conocidas como cromtidas hermanas.

Esquema de un cromosoma duplicado

El ADN se compone de dos cadenas, cada una formada por nucletidos. Cada nucletido, a su vez, est compuesto por un azcar (desoxirribosa), un grupo fosfato y una base nitrogenada. Las bases nitrogenadas son cuatro: adenina (A), timina (T), citosina (C), y guanina (G), y siempre una A se enfrenta a una T y una C se enfrenta a una G en la doble cadena. Las bases enfrentadas se dice que son complementarias. El ADN adopta una forma de doble hlice, como una escalera caracol donde los lados son cadenas de azcares y fosfatos conectadas por escalones, que son las bases nitrogenadas. La molcula de ADN se asocia a protenas, llamadas histonas, y se encuentra muy enrollada y compactada para formar el cromosoma. Esta asociacin de ADN y protenas se conoce como cromatina. La cromatina puede estar enrollada en mayor o menor grado, dependiendo de la etapa en que se encuentra la clula; por ejemplo, cuando el ADN se ha duplicado antes de que la clula se divida, la cromatina se compacta en su mayor grado, y como resultado se pueden visualizar los cromosomas duplicados al microscopio como corpsculos con forma de X.

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http://images.clinicaltools.com/images/gene/dnabasepairs.jpg La doble hlice de ADN con las bases nitrogenadas complementarias que se ubican hacia dentro y establecen uniones no covalentes (o fuerzas de atraccin) entre s que mantienen la estructura de la molcula. Las desoxirribosas (azcares) y los grupos fosfato constituyen las columnas de la molcula.

FUENTE: http://www1.geneticsolutions.com/PageReq?id=1530:1873#Molecular%20Genetics La imagen representa una clula eucariota en la cual se ampla un cromosoma, y se muestra la estructura del ADN que lo constituye. Un fragmento particular del ADN forma un gen que determina una caracterstica particular. El ADN se forma a partir de la unin de nucletidos, que pueden tener cuatro bases nitrogenadas diferentes: A, T, C, G.

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Cuando la clula se divide, cada nueva clula que se forma debe portar toda la informacin gentica, que determine sus caractersticas y funciones. Para eso, antes de dividirse, el ADN debe replicarse, es decir generar una copia de s mismo. Durante la replicacin, la molcula de ADN se desenrolla, separando sus cadenas. Cada una de stas servir como molde para la sntesis de nuevas hebras de ADN. Para eso, la enzima ADN-polimerasa coloca nucletidos siguiendo la regla de apareamiento A-T y C-G. El proceso de replicacin del ADN es semiconservativo, ya que al finalizar la duplicacin, cada nueva molcula de ADN estar conformada por una hebra vieja (original) y una nueva.

http://ima Replicacin

ges.clinicaltools.com/images/gene/dnareplication.jpg semiconservativa del ADN de una clula eucariota.

Cmo se interpretan las instrucciones escritas en el ADN? La informacin est guardada en el ADN en el cdigo de secuencia de bases A, T, C y G que se combinan para originar palabras denominadas genes. Los genes son fragmentos de ADN cuya secuencia nucleotdica codifica para una protena. Es decir que a partir de la informacin escrita en ese fragmento de ADN se fabrica (sintetiza) un tipo particular de protena. Aunque, en realidad, los genes tambin llevan la informacin necesaria para fabricar molculas de ARN (ribosomal y de transferencia) que intervienen en el proceso de sntesis de protenas. El ARN (cido ribonucleico) es una molcula con una estructura similar al ADN. Un gen no es una estructura que se vea sino que se define a nivel funcional. Es una secuencia que va a empezar en algn lugar del ADN y va a terminar en otro. Para conocer un gen se secuencia, se determina la cantidad de los nucletidos que lo forman y el orden en que se ubican. Todas las clulas de un organismo tienen el mismo genoma, o conjunto de genes. Pero, en cada clula se expresan los genes que se usan. Por ejemplo, aunque una clula de la piel tiene toda la

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informacin gentica al igual que la clula del hgado, en la piel solo se expresarn aquellos genes que den caractersticas de piel, mientras que los genes que dan caractersticas de hgado, estarn all apagados. Por el contrario, los genes que dan rasgos de hgado estarn activos en el hgado e inactivos en la piel. Lo que no se usa se encuentra mayormente compactado. Este empaquetamiento puede ser temporal o definitivo. La sntesis de protenas Las protenas son macromolculas que cumplen funciones variadas. Hay protenas estructurales, otras son enzimas, otras transportan oxgeno como la hemoglobina, hay protenas involucradas en la defensa inmunitaria, como los anticuerpos, otras cumplen funciones de hormonas como la insulina, etc. As como el ADN est compuesto a partir de nucletidos, las protenas estn compuestas a partir de aminocidos. Hay 20 aminocidos diferentes, y cada protena tiene una secuencia de aminocidos particular. El proceso de sntesis de protenas consta bsicamente de dos etapas: la transcripcin y la traduccin. En la primera etapa, las palabras (genes) escritas en el ADN en el lenguaje de los nucletidos se copian o transcriben a otra molcula, el ARN mensajero (ARNm). Luego, en la etapa siguiente, el ARNm se traduce al idioma de las protenas, el de los aminocidos. Este flujo de informacin se conoce como el dogma central de la biologa.

http://images.clinicaltools.com/images/gene/mrnahighlight3.jpg

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Proceso de sntesis de protenas en una clula eucariota. La transcripcin ocurre dentro del ncleo y la traduccin en los ribosomas en el citoplasma.

La transcripcin Durante la transcripcin la enzima ARN polimerasa, copia la secuencia de una hebra del ADN y fabrica una molcula de ARN complementaria al fragmento de ADN transcripto. El proceso es similar a la replicacin del ADN, pero la molcula nueva que se forma es de cadena simple y se denomina ARN. Se denomina ARN mensajero porque va a llevar la informacin del ADN hacia los ribosomas, las organelas encargadas de fabricar las protenas. El ARN, o cido ribonucleico, es similar al ADN aunque no igual.

http://www.answers.com/main/content/wp/en/thumb/e/eb/300px-RNA-comparedto-DNA.png

Como muestra la imagen, el ARN se diferencia del ADN en que es de cadena simple, en lugar del azcar desoxirribosa tiene ribosa, y en lugar de la base nitrogenada timina, (T), tiene uracilo (U). La traduccin y el cdigo gentico La molcula del ARN mensajero se traslada a los ribosomas donde ocurre la etapa de traduccin. Durante esta etapa el ribosoma lee la secuencia de nucletidos del ARN mensajero por tripletes o tros de nucletidos, denominados codones. A medida que el ribosoma lee la secuencia de codones va formando una protena, a partir de la unin de aminocidos. Segn cul es el codn que el ribosoma lee va colocando el aminocido que corresponde. Si se considera la combinacin de cuatro bases tomadas de a tres, existe un total de 64 codones posibles. Cada codn determina qu aminocido se colocar en la protena

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que se est fabricando. De los 64 codones, 61 corresponden a aminocidos y 3 son codones de terminacin (stop), responsables de la finalizacin de la sntesis proteica. La siguiente tabla es el cdigo gentico o diccionario que permite traducir la informacin escrita en el lenguaje de los cidos nucleicos (nucletidos) al lenguaje de las protenas (aminocidos), y es universal, o sea, es vlido para todos los seres vivos.

http://images.clinicaltools.com/images/gene/codontable.jpg La tabla del cdigo gentico es universal y permite conocer a partir de la secuencia del ARN mensajero cmo ser la secuencia de la protena para la cual el gen correspondiente codifica.

As, la secuencia ATG (AUG en el ARNm) codifica para el aminocido metionina, y el codn TTT (UUU en el ARNm) codifica para el aminocido fenilalanina en todos los organismos vivos. Como slo existen 20 aminocidos en la naturaleza, varios codones pueden codificar para el mismo aminocido (por ejemplo, al aminocido glicina le corresponden los codones GGU, GGC, GGA y GGG). Cada codn del ARNm es ledo por otro ARN, llamado ARN de transferencia (ARNt), que acta como un adaptador entre la informacin que lleva el ARNm y los aminocidos que deben ir colocndose para formar la protena correspondiente. El ARNt es muy pequeo comparado con los ARNm y tiene una secuencia, denominada anticodn que aparea (es decir, es complementaria) con el codn. Cada ARN de transferencia tiene un anticodn y carga un aminocido en particular. Por ejemplo, el ARNt que tiene el anticodn UCA, se aparea al codn AGU, y carga el aminocido serina (Ser). De la misma manera, el ARNt que carga tirosina (Tyr) se aparea, a travs de su anticodn, con el codn UAC. As se va formando una cadena

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polipeptdica (protena) a medida que los anticodones de los ARNt reconocen sus respectivos codones en el ARNm. Este proceso de sntesis proteica ocurre en los ribosomas. Qu son las mutaciones? A veces, y este es un fenmeno relativamente frecuente, la enzima que se encarga de la replicacin del ADN (ADN polimerasa) se equivoca, es decir, coloca un nucletido en lugar de otro. Si, por ejemplo, la enzima ADN polimerasa coloca una T en lugar de una A podra ocurrir que al traducirse, se coloque en la protena un aminocido diferente del que correspondera. Por lo tanto, la protena generada sera diferente en un aminocido a la original. Este cambio en el ADN, llamado mutacin, podra alterar o anular la funcin de la protena. Este ejemplo ilustra el efecto de los cambios o mutaciones puntuales (debidos a un nico cambio en la secuencia) en la protena final. En algunos casos las mutaciones pasan inadvertidas, pero tambin pueden provocar la falta de actividad de una protena esencial y causar una enfermedad. De todas formas, la mayora de las mutaciones no se manifiestan, o porque estn en regiones del ADN donde no hay genes, o porque no cambian el aminocido, o porque ese cambio no altera la funcin de la protena. O bien podra alterarse la funcin y esto no resultar perjudicial. Tal es el caso del carcter color de ojos, donde el color claro se produce por falta de ciertas enzimas que fabrican los pigmentos del iris. En realidad, las mutaciones son la base de la biodiversidad. Es decir que las pequeas diferencias en el ADN es lo que determina que los seres vivos sean diferentes entre s. Esta diversidad en las caractersticas sumada a la existencia de un cdigo gentico comn entre los seres vivos, son dos hechos determinantes en el desarrollo de la biotecnologa moderna. El ADN y la biotecnologa moderna Cuando los cientficos comprendieron la estructura de los genes y cmo la informacin que portaban se traduca en funciones o caractersticas, comenzaron a buscar la forma de aislarlos, analizarlos, modificarlos y hasta de transferirlos de un organismo a otro para conferirle una nueva caracterstica. Justamente, de eso se trata la ingeniera gentica, a la que podramos definir como un conjunto de metodologas que nos permite transferir genes de un organismo a otro, y que dio impulso a la biotecnologa moderna. La ingeniera gentica permite clonar (multiplicar) fragmentos de ADN y expresar genes (producir las protenas para las cuales estos genes codifican) en organismos diferentes al de origen. As, es posible obtener protenas de inters en organismos diferentes del original del cual se extrajo el gen, mejorar cultivos y animales, producir frmacos, y obtener protenas que utilizan diferentes industrias en sus procesos de elaboracin.

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Actividades
Objetivos: - Repasar los conceptos trabajados en el texto. - Aplicar los conocimientos a la resolucin de actividades tericas y prcticas. - Comprender la relacin entre los conocimientos del ADN y el desarrollo de la biotecnologa moderna. Destinatarios y conceptos relacionados: El tema abordado en este Cuaderno se puede aplicar a alumnos de EGB y de Polimodal con diferente profundidad. Este tema se relaciona con una diversidad de conceptos que se trabajan en diferentes instancias del aprendizaje: seres vivos, biodiversidad, clulas, biomolculas, gentica y herencia, evolucin, biotecnologa, entre otros. Consideraciones metodolgicas: El objetivo de este Cuaderno y de las actividades que se proponen es sentar las bases que permitan luego comprender aspectos ms avanzados o complejos de la biotecnologa moderna y las tcnicas de ingeniera gentica que se tratan en los siguientes Cuadernos. Con los alumnos ms pequeos se puede transmitir la idea de material gentico a partir del parecido entre padres e hijos, por ejemplo, y a partir de all introducir la idea de material gentico en otros organismos que ellos conocen. Con los alumnos de Polimodal se propone profundizar y trabajar con los docentes de qumica aspectos vinculados con la estructura qumica de la molcula de ADN, as como de las otras biomolculas, y relacionarlas con su funcin. Un concepto muy interesante sobre el que se sugiere reflexionar desde la enseanza docente a partir de la estructura de ADN es el concepto de modelizacin. La ciencia es un modo particular de interpretar la realidad, y para ello elabora modelos que no son ms que meras representaciones empobrecidas, pero que permiten estudiar los fenmenos complejos que en ella se presentan. El modelo atmico, la doble hlice de ADN o el modelo de partculas no son la realidad en s mismas sino una mera representacin que selecciona los aspectos ms relevantes y significativos para los investigadores y el problema que se plantean en un momento dado. Por ello, promover la elaboracin e interpretacin de modelos resulta una de las funciones ms importantes de la enseanza de las ciencias en la escuela, de manera que todos los recursos orientados hacia ese objetivo, lejos de alejarnos de nuestros programas de enseanza (cada vez ms cargados de informacin a medida que avanzan las ciencias), aproximan a nuestros alumnos a la concepcin actual de ciencia (artculo en http://www.correodelmaestro.com/anteriores/2005/abril/nosotros107.htm). Es interesante analizar con los alumnos los esquemas o simbolismos empleados para representar la molcula de ADN, por ejemplo, las letras que representan a las bases
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nitrogenadas. Se recomienda a lo largo de las clases volver sobre la interpretacin de los simbolismos para evaluar si los alumnos comprenden la relacin entre las letras empleadas y las estructuras qumicas que representan. Se sugiere explicitar los cdigos y simbolismos que se emplean, construir equivalencias con otros lenguajes (traducir los textos en esquemas y los esquemas en textos). Por ejemplo, a diferencia de la letra C que representa el elemento carbono, en este caso la letra C representa una estructura ms grande que es la base nitrogenada Citosina, conformada a partir de la unin de tomos de diversos elementos. Tambin se sugiere construir modelos de ADN con materiales como cartulina o plastilina y trabajarlo con diferente profundidad aspectos vinculados a la estructura qumica, segn si se trata de alumnos de EGB o de Polimodal. Entre las actividades se sugiere el diseo de una red conceptual. Este recurso resulta muy til como estrategia para repasar un tema estudiado, o como mtodo para evaluar a los alumnos. El diseo de una red conceptual requiere tener los conceptos claros para poder expresarlos de manera clara y concisa. Es interesante ya que a partir de los mismos conceptos los alumnos pueden disear redes conceptuales diferentes pero todas pueden ser correctas. A su vez, el docente puede emplear esta metodologa al ensear cualquier tema, eligiendo los conceptos que quiere incluir en la red. Al emplear la red conceptual por primera vez se sugiere disear en clase entre todos una red para aprender la metodologa y luego aplicarla cuando se considere adecuado. Otro aspecto que se resalta se refiere al modo de expresar los conceptos que se transmiten. Si bien en muchos textos y en la expresin oral se suele decir que el ADN est formado por nucletidos, o que las protenas estn formadas por aminocidos, en este contexto se pretende precisar esta expresin. Por eso se dice que el ADN est formado a partir de nucletidos, y las protenas a partir de aminocidos. Aunque puede parecer un detalle semntico, es un aspecto interesante para trabajar con los alumnos desde el punto de vista de la precisin conceptual, y coordinar con los docentes de qumica para apoyar estos conceptos y trabajarlos en conjunto. La idea que se busca transmitir es que cuando los nucletidos se unen y forman el ADN, sufren una transformacin (pierden tomos) y por lo tanto dejan de ser las molculas que eran para pasar a formar parte de una nueva molcula, es decir que los nucletidos dejan de ser nucletidos. Por eso, sera impreciso decir que el ADN est formado por nucletidos, y es ms correcto decir que est formado a partir de nucletidos. Lo mismo respecto de otros monmeros que pasan a formar molculas ms complejas, como las protenas que no estn formadas por aminocidos sino a partir de aminocidos, o el almidn a partir de unidades de glucosa, etc.

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ACTIVIDAD 1. La estructura del ADN Indicar qu es lo que se observa en la figura y cmo se llaman las partes numeradas.

Rta. Se observa un modelo de la estructura del ADN formada por dos cadenas de nucletidos complementarias. Las estructuras indicadas son: 1) fosfato; 2) desoxirribosa (azcar) ; 3) timina; 4) citosina; 5) adenina; 6) guanina; 7) nucletido. En el recuadro se observa uno de los nucletidos que constituyen el ADN. Est formado por un grupo fosfato unido a la ribosa y esta, a su vez, est unida a la base nitrogenada. ACTIVIDAD 2. Del ADN a la protena a. Completar los recuadros blancos del dibujo con los siguientes rtulos: ADN, ARNm, RIBOSOMA, PROTENA, TRADUCCIN, REPLICACIN, TRANSCRIPCIN.

b. Completar los espacios en blanco:

La informacin gentica se encuentra codificada en el _____1. Esta molcula de gran tamao se encuentra en el ________________2 de las clulas _____________3 (como plantas, hongos y
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animales). La forma en que la informacin se encuentra codificada es igual en todos los organismos, por eso se dice que el cdigo gentico es _____________4. Cuando una clula debe dividirse para reproducirse (tanto por mitosis como por meiosis) el ADN previamente se ______________5. Cuando una molcula de ADN se superenrolla durante la mitosis o meiosis, puede ser vista a microscopio ptico con forma de X, esta estructura se denomina _______________6 En cada molcula de ADN se encuentran muchos genes. En trminos generales, se define gen como la porcin de ADN que codifica para una ______________7 Para que cada gen se exprese, deben ocurrir dos procesos: el primero consiste en la sntesis del ______8 que llevar el mensaje del ADN; este proceso se denomina ________________9. El segundo proceso consiste en la sntesis de la _____________10 respectiva en los _________11 , proceso en el cual interviene tambin otro ________12 conocido como _______________13 que tiene un anticodn y el aminocido correspondiente. Este proceso se denomina _____________14. Un cambio en la secuencia del ADN se denomina _______________15.

Respuestas: 1. ADN; 2. ncleo; 3. eucariotas; 4. universal; 5. duplica; 6. cromosoma; 7. protena; 8.

ARNm; 9. transcripcin; 10. protena; 11. ribosomas; 12. ARN; 13. ARN de transferencia; 14. traduccin; 15. mutacin.

ACTIVIDAD 3. Diseo de una Red conceptual Esta actividad consiste en dar una lista de conceptos principales y unirlos en una red que debe seguir ciertas reglas: 1. se debe unir de a dos conceptos por vez. Es decir que al terminar la red se pueden aislar dos conceptos y deben formar una frase coherente, que se inicia en uno de los conceptos y termina en el otro, siguiendo la direccin que indica la flecha. 2. Todos los conceptos deben formar parte de la red (no pueden quedar conceptos sueltos), y de cada concepto pueden salir o entrar ms de una flecha. 3. En las frases empleadas para unir conceptos no se pueden repetir los conceptos principales dados por el docente. Tampoco usar expresiones como el mismo ya que es una forma de reiterar un concepto. 4. No se puede usar la negacin (no) en las frases que unen conceptos ya que la idea es demostrar conocimientos mediante la afirmacin. 5. Evitar en las frases que unen conceptos el empleo reiterado de trminos tales como es, tiene, est. Aunque estos trminos pueden ser correctos, se pretende de los alumnos que puedan redactar una frase breve y ms precisa, que manifieste ideas ms exactas.

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A continuacin se presenta una lista de conceptos y se muestra un modelo de red conceptual que se podra disear a partir de estos conceptos:

MUTACIONES - BIODIVERSIDAD - SERES VIVOS - ADN - EUCARIOTAS - NUCLETIDOS TRANSCRIPCIN GEN ADENINA PROTENA RIBOSOMAS AMINOCIDOS BIOTECNOLOGA MODERNA.

Se sugiere armar una red conceptual con los alumnos y luego dar otra lista de conceptos y dejar que lo hagan de forma autnoma. Luego hacer una puesta en comn para analizar las diferentes redes que surgieron en la clase, y que los mismos alumnos puedan evaluar las redes diseadas por sus compaeros.
generan cambios en las caractersticas y originan.. MUTACIONES BIODIVERSIDAD Es la variedad de caracteres que diferencian a los... Determina los rasgos y funciones de los... SERES VIVOS

son cambios casuales en el...

Est alojado en el ncleo de las clulas...

es un tipo de clulas que forma a algunos... EUCARIOTAS

ADN
proceso de fabricacin de ARNm a partir de una secuencia de...

est formado a partir de...

NUCLETIDOS

Organelas que se encuentran en el citoplasma de las clulas...

TRANSCRIPCIN

Es una secuencia particular de... GEN Codifica para la sntesis de una...

Es una de las bases nitrogenadas que forman parte de los...

ADENINA

PROTENA es la primera etapa en el proceso de sntesis de... puede ser transferido de un organismo a otro mediante tcnicas de... organelas en las que se produce la sntesis de... Se forma a partir de la unin de..

RIBOSOMAS

AMINOCIDOS BIOTECNOLOGA MODERNA

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ACTIVIDAD 4. Las mutaciones La anemia falciforme es una enfermedad que se debe a una mutacin en un nucletido del gen que tiene informacin para la fabricacin de la hemoglobina. A partir del alelo mutado se generan molculas de hemoglobina anormales. La secuencia de ADN que se muestra a continuacin pertenece al gen que tiene la informacin para fabricar un fragmento de la hemoglobina normal: GTGCACCTGACTCCTGAGGAG CACGTGGACTGAGGACTCCTC a. Utilizando la tabla del cdigo gentico escribir la secuencia de aminocidos que se sintetiza a partir de la hebra inferior del ADN. Secuencia de ARNm: GUGCACCUGACUCCUGAGGAG Secuencia proteica: Val-His-Leu-Thr-Pro-Glu-Glu
Ntese que la hebra de ARNm obtenido a partir de leer la hebra inferior del ADN es de secuencia igual a la hebra superior, slo que en vez de T tiene U.

b. El fragmento de protena que figura a continuacin pertenece a la hemoglobina falciforme. Val-His-Leu-Thr-Pro-Val-Glu Compar esta secuencia con la anterior y determin cul es el nucletido que sufri la mutacin responsable de la anemia falciforme. Rta. A partir de conocer que el aminocido que cambi es Val por Glu, se puede deducir cul es el triplete (codn) del ARNm alterado y, a partir de eso, deducir que el nucletido que cambi en el ADN es A por T.

Actividad 5. Extraccin de ADN vegetal.

(Adaptado de la Oficina de Biotecnologa de la Univ. de Iowa)

Los estudiantes extraern ADN de bananas licuadas con agua. Una parte de esta mezcla de banana, luego es tratada con shampoo y sal, mezclada durante 5-10 minutos, y luego escurrida a travs de un filtro de caf. A lo filtrado se le agrega alcohol fro y es ste el momento cuando el ADN de la solucin de banana se precipita y se hace visible. El detergente disuelve los lpidos (molculas grasas) y las protenas de la membrana celular, rompiendo las uniones que mantienen la integridad de la misma. De esta forma se libera el contenido celular. Luego, el detergente forma complejos con los lpidos y las protenas, permitiendo que los mismos sean separados del ADN por filtracin. As se libera el ADN. La sal permite que el ADN precipite en una solucin fra de alcohol y que las cadenas de ADN no se corten. Nota para el docente: se recomienda que el material vegetal utilizado sea con poca coloracin para facilitar la observacin de los resultados, como ser, bananas o cebollas. En este caso se

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har extraccin de ADN de banana. Al final de la gua prctica se sugiere una serie de preguntas para analizar con los alumnos los resultados de la experiencia. Materiales: 1 tazas o vaso de plstico (por grupo) Licuadora Una cuchara plstica para medir y mezclar 2 filtros de papel de caf N 2 (conos) 20 ml de agua destilada Shampoo de color claro 1 banana Sal de mesa, con o sin Iodo 1 pipeta de transferencia plstica o un gotero mdico 1 tubo de ensayo sellado que contenga 95% de etanol o 91% de alcohol isoproplico 1 conservadora con hielo para enfriar los tubos con alcohol 1 varilla de vidrio o 1 pipeta Pasteur Procedimiento para la extraccin del ADN Preparar una solucin de banana procesada con sal, agua destilada y shampoo (detergente) mediante los siguientes pasos: 1. En una licuadora, mezclar una banana por taza de agua destilada (250ml). 2. Licuar por 15-20 segundos, hasta que la solucin se mezcle. 3. En una taza, preparar una solucin consistente en una cucharadita de t de shampoo y dos pizcas de sal. 4. Agregar 20 ml (4 cucharaditas) de agua destilada. 5. Disolver la sal y el shampoo revolviendo lentamente con la cuchara de plstico evitando formar espuma. 6. A la solucin preparada en el paso 3, agregar tres cucharaditas de t de la mezcla de banana del paso 1. 7. Mezclar la solucin con la cuchara por 5-10 minutos. 8. Mientras uno de los miembros del grupo mezcla la solucin de banana, otro miembro pondr el filtro N 2 de caf dentro de otra taza de plstico. Doblar el borde del filtro alrededor de la taza para que el filtro no toque el fondo de la taza. 9. Filtrar la mezcla vertindola dentro del filtro y dejar que la solucin drene por algunos minutos hasta que sean 5 ml aproximadamente de filtrado para testear. 10.Tomar un tubo de ensayo con alcohol fro. Para mejores resultados el alcohol debe estar tan fro como sea posible.

"El Cuaderno de PorquBiotecnologa" es una herramienta didctica creada y desarrollada por el equipo pedaggico del Programa Educativo PorquBiotecnologa. Su reproduccin est autorizada bajo la condicin de que se aclare la autora y propiedad de este recurso pedaggico por parte del Programa Educativo PorquBiotecnologa.

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11. Llenar la pipeta plstica con la solucin de banana y agregarla al alcohol. El ADN no es soluble en alcohol. Cuando el alcohol se agrega a la mezcla, los componentes, excepto el ADN, permanecen en la solucin mientras el ADN precipita en la capa de alcohol. 12.Dejar la solucin reposar por 2 a 3 minutos sin mover. Es importante no batir el tubo de ensayo. Se puede observar el ADN blanco el cual precipita en la capa de alcohol. 13.Cuando se obtienen buenos resultados, habr suficiente ADN para levantar con una varilla de vidrio (el ADN se enrolla a la varilla). O usando una pipeta de Pasteur que haya sido calentada en la punta para formar un gancho, se puede recuperar (tomar) algo de ADN. El ADN tiene la apariencia de mucus blanco y fibroso. Preguntas para el anlisis de la experiencia a. Por qu se puede suponer que la banana contiene ADN? Dnde se encuentra ese ADN? b. Qu otro tipo de sustancias es posible encontrar entre los componentes de la banana? c. Cul es la funcin del detergente en la experiencia? Nota: segn el nivel de los alumnos es posible profundizar en los fundamentos qumicos en los que se basa la accin del detergente. d. Cul es la funcin de la sal en la experiencia? Nota: segn el nivel de los alumnos es posible profundizar en los fundamentos qumicos en los que se basa la accin de la sal. e. Cul es la funcin del alcohol en la experiencia? Nota: segn el nivel de los alumnos es posible profundizar en los fundamentos qumicos en los que se basa la accin del alcohol. f. Al finalizar la experiencia se obtiene un mucus blanco y fibroso que sera el ADN. Es posible que la molcula de ADN se visualice a simple vista? Por qu? Rta. No se puede visualizar una molcula de ADN debido a su tamao microscpico. g. A partir de la respuesta anterior, qu creen que contiene el ADN obtenido en la experiencia? Rta. Se obtienen miles o millones de molculas de ADN juntas. Posiblemente contengan otros contaminantes por el proceso de extraccin empleado. Nota para el docente: Para finalizar la actividad experimental, se sugiere formular a los alumnos una pregunta que promueva la reflexin acerca de la presencia de ADN en los alimentos que consumimos. 1. Se podra utilizar otros alimentos para extraer ADN? En tal caso, cules podran ser esos alimentos? Rta. Se podra emplear cualquier alimento de origen vegetal o animal, tambin levaduras. 2. Se podra decir, entonces, que comemos genes? Rta. S, comemos los genes de los organismos que forman parte de la alimentacin. 3. Qu ocurre con el material gentico que se consume? Nota: esta pregunta apunta a repasar conceptos vinculados con la nutricin, la degradacin de los componentes de los alimentos y el aprovechamiento de las unidades constitutivas (nucletidos, en este caso) para fabricar los componentes del propio cuerpo.
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Material de consulta
La doble hlice. Un relato autobiogrfico sobre el descubrimiento del ADN. James Watson (1968). Salvat Editores S.A. Barcelona. 1993. ADN, 50 aos no es nada. Alberto Daz, Diego Golombek (comps.). Siglo veintiuno editores Argentina. 2004.
Centro para la enseanza de la gentica. Universidad de UTA. En espaol. Incluye actividades interactivas para chicos como construir una molcula de ADN, transcribir y traducir un gen, entre otras. http://gslc.genetics.utah.edu/es/ Correo del Maestro. Nmero 107, Abril 2005. La modelizacin en la enseanza de las ciencias naturales. Una propuesta de la construccin de modelos cientficos para la escuela primaria. Por Brbara Peisajovich. http://www.correodelmaestro.com/anteriores/2005/abril/nosotros107.htm Recursos didcticos para biologa en espaol. Contiene texto, animaciones, prcticas de laboratorio, y ejercitacin con sus respuestas. http://web.educastur.princast.es/proyectos/biogeo_ov/4a_ESO/06_genetica/INDICE.htm HIPERTEXTOS DEL REA DE LA BIOLOGA. Universidad Nacional del Nordeste. Fac. de Agroindustrias, Saenz Pea, Chaco Fac. Ciencias Agrarias, Corrientes. Argentina. http://www.biologia.edu.ar Experiencia de Extraccin del ADN. http://www.arrakis.es/~rfluengo/anucleico.html.

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