Homoisoflavonoids from the medicinal plant Portulaca oleracea

Homoisoflavonoides de la planta medicinal Portulaca oleracea

Jian Yan, Li-Rong Sun, Zhong-Yu Zhou, Yu-Chan Chen, Wei-Min Zhang, Hao-Fu Dai, Jian-Wen Tan. Phytochemistry 80 (2012) 3741

INTRODUCCIN
Portulaca oleracea es una planta medicinal anual cultivada en regiones tropicales en todo el mundo. Se utiliza como diurtica, antisptica, febrfuga, antiespasmdica y vermfuga. Posee terpenoides, alcaloides, cerebrsidos, cumarinas y flavonoides que recientemente han demostrado importante actividad biolgica

INTRODUCCIN
Pensando en identificar el potencial de Portulaca oleracea como productora de bioactivos naturales, se estudiaron las partes areas frescas de esta especie. Como resultado se aislaron cuatro homoisoflavonoides, llamados portulacanones A-D (1-4) adems de nueve compuestos conocidos (5-13)

METODOLOGA
Procedimientos generales
El P.F. se determin por un equipo de micropunto de fusin XRC-1 Los espectros IR fueron obtenidos de un espectrmetro Bruker modelo Tensor 27 Los espectros de RMN se obtuvieron en CDCl3 en un espectrmetro Bruker AV-400, se utiliz TMS como patrn interno La espectrometra de masas (HR-FAB-MS) fue llevada a cabo empleando un equipo VG-Autospec-3000 La CC fue llevada a cabo en silica gel (200-300 mesh) producida por Qingdao Marine Chemical Inc.

METODOLOGA
Material vegetal Las partes areas de P. oleracea fueron recolectadas en Guangzhou (China) en Julio de 2009. fue identificada en la Academia de Ciencias Chinas (ACC). Una muestra de la especie fue conservada en el laboratorio de fitoqumica de la ACC del sur de China

METODOLOGA
Extraccin y aislamiento
10 Kg de partes areas Se concentr a p.r. Semislido Se extrajo con EtOAc 1000 mL H2O La fase orgnica se concentr EtOH/H2O (95:5) a Tamb

Se tomaron 26g y se pasaron por CC

Residuo de 31g

CHCl3/MeOH [10:0, 9.5:0.5, 9:1, 8.5:1.5, 8:2, 7:3 y 0:10 (v/v) a 3.5, 3.0, 2.5, 2.5, 2.5, 2.5 2.0 L] Para obtener F1-F7

METODOLOGA
Extraccin y aislamiento
F2 CHCl3/MeOH (40:1 a 20:1) 1,3,5 F6 CHCl3/MeOH (9:1 a 6:1) F3 CHCl3/MeOH (30:1 a 10:1) 2 F5 CHCl3/MeOH (10:1 a 8:1)

9,12,13

4,6,7,8,10,11

METODOLOGA
Actividad citotxica
Se llev a cabo frente a lneas celulares cancergenas: SF-268, NCI-H460, K-562, SGC-7901 y SMMC-7721 Las clulas se sembraron (24h) en placas de 96 pozos y expuestas a los compuestos 1-9 (48h) Se agregaron a cada pozo 20 L de solucin 40 M de MTT (bromuro de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5 difeniltetrazolio) por 4h

Control positivo: cis-platino y mitomicina C

Se adicionaron 100 L de dodecilsulfato sdico a cada pozo Luego de 12 h a Tamb se midi la absorbancia a 595nm y se calcularon las CI50

RESULTADOS
Se aislaron 13 compuestos
Nuevos: Portulacanones AD (14) Conocidos: 2,2-dihydroxy-4,6-dimethoxychalcone (5), 3-quinolinecarboxylic acid (6), indole-3-carboxylic acid (7), thymine (8) and uracil (9), N-transferuloyltyramine (10) N-cis-feruloyltyramine (11), N-transferuloyloctopamine (12) y N-cis-feruloyloctopamine (13).

RESULTADOS
Compuesto 1
Amarillo; PF: 160C; FM: C18H18O5 (HR-FAB-MS)

O
1656 cm-1

OH
3380 cm-1

RESULTADOS
O
7 6 8 9 10

O
4

5 2 6

3
11

1
2

4 3

OH

6 protones aromticos 2 protones de grupos metoxi

RESULTADOS
O
7 6 5 8 9

O
4

2
3 11

6 1 2

4 3

10

O
Un grupo C=O Dos CH2 Dos OCH3 Un CH sp3 Doce CH sp2

OH

RESULTADOS
C O S Y
O O
5

OH

Sistema de spin C-3-C-4-C-5-C-6

RESULTADOS
C O S Y
O O
2

3
11

OH

Sistema de spin C-2-C-3-C-11

RESULTADOS
Posicin del H H C

7 6 5

9 10

O
4

5 2 3 11 6 1 2 B 4 3

OH

HMBC

RESULTADOS
Posicin del H H C

7 6 5

9 10

O
4

5 2 3 11 6 1 2 B 4 3

OH

HMBC
Se comprueban los enlaces C-3 con C-4, y C11 con C-1

RESULTADOS
Posicin del H H C

7 6 5

9 10

O
4

2
3 11

6 1

4 3

OH

HMBC
Lo cual indica que dos grupos metoxilo se encuentran localizados en C-5 y C-7

RESULTADOS
Posicin del H H C

7 6 5

O
4

2
3 11

6 1 2

4 3

10

OH

HMBC
Por tanto el grupo OH est unido a C-2 2-hydroxy-5,7-dimethoxy-3-benzyl-chroman4-one, y nombrado como portulacanone A

RESULTADOS
COMPONENTES AISLADOS DE P. oleracea

RESULTADOS
ACTIVIDAD CITOTXICA