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MTODOS DE DIAGNSTICO MICROBIOLGICO

Dra.. Vernica Seija

METODOS DIAGNOSTICOS
DIAGNOSTICO DIRECTO
DIAGNOSTICO INDIRECTO

Diagnstico directo
Aislamiento del microorganismo
Deteccin de componentes estructurales (antgenos) o metabolitos microbianos (toxinas) Deteccin de material gentico

AISLAMIENTO
Es fundamental la toma de muestra. Representativa. Protocolos de recoleccin, transporte y almacenamiento

Muestras microbiolgicas en CTI


Infecciones comunitarias Infecciones hospitalarias
NAV IU Bacteriemia por catter

NAV
Hemocultivos
Lavado bronquioalveolar por FBC o a ciegas

Aspirado traqueal cuantitativo o semicuantitativo

Infeccin urinaria

Urocultivo

Bacteriemia a punto de partida de VVC

CLASIFICACION DE LOS DISPOSITIVOS VASCULARES CENTRALES


CATETERES VASCULARES CENTRALES

TRANSITORIOS o CORTA DURACION

PERMANENTES o LARGA DURACION

Venosos centrales

Tunelizado

Perifrico/Central (PICC) Arteria Pulmonar


Hemodilisis

Con Bolsillo subcutneo

DEFINICIONES
Colonizacin del catter Flebitis Infecciones del sitio de salida: clnica y/o microbiolgica Infecciones del tnel

Infecciones del bolsillo


Bacteriemia relacionada al catter
Cuando se aisla el mismo MO del catter y de hemocultivos extraidos por vena perifrica Se aisla el mismo MO de un hemocultivo extraido por la via central y por una vena perifierica y la botella con la muestra extraida por central AVISA que esta positiva 120 minutos antes que la extraida por vena periferica

IDSA 2001

DEFINICIONES OPERACIONALES
Icat-Respuesta inflamatoria sistemica originada en la proliferacin de MO en un catter en ausencia de otro foco Icat definitiva-con criterios microbiolgicos de colonizacin del catter con o sin bacteriemia Icat probable-ausencia de criterios microbiolgicos pero signos y sntomas remiten a las 24 hs de extraido el catter.

MECANISMOS DE COLONIZACION DE

LOS CATETERES VENOSOS

Microorganismos 3. Colonizacin 2. Colonizacin de de la infusin de la piel la conexin 1. Colonizacin extraluminal

Vaina de fibrina

4. Colonizacin hematgena

MECANISMOS DE COLONIZACION Y DIAS DE INSTALACION


CC removidos in vivo (n= 65) CC removidos post mortem (n=10)

En CC de corta duracin ( retirados post mortem) hay predominio de la colonizacin de la superficie externa. En CC de larga duracin ( >30 das ) hay predominio de la colonizacin de la superficie interna .
Raad I et al. J Infect Dis 1993; 168:400-407

MECANISMOS DE COLONIZACION DE

LOS CATETERES VENOSOS


CATETERES CENTRALES DE CORTA PERMANENCIA (<30 das) Bacteriemias 5,9/1000 das cateter 45% extraluminales 26% intraluminales 29% indeterminadas

Safdar N, Maki DG. Intensve Care Med. 2004; 30: 62-7

BIOFILM

Biofilm del conector de un catter endovenoso 24 horas despus de la insercin

METODOS DE DIAGNOSTICO

NO CONSERVADORES RETIRO DEL CATETER


Cultivo cualitativo Cultivo cuantitativo
Cultivo semicuantitativo

CONSERVADORES CATETER IN SITU


Hemocultivos cuantitativos Tiempo diferencial de hemocultivos
Cultivos superficiales

Tinciones del catter


Revisin de publicaciones MEDLINE Sensibilidad, especificidad y curvas ROC

Citocentrifigacin con AA

Mtodos no conservadores: CULTIVO SEMICUANTITATIVO


Hacer rodar 5 cm de la punta, 4 veces adelante y atrs. Se ha considerado el mtodo de referencia para diagnstico Slo recupera microorganismos extraluminales. Sencillo, fcil aplicabilidad.

Maki DG et al. NEJM 1977; 296: 1305-1309.

La limitacin de los cultivos cuantitativos de catteres es que el diagnstico es retrospectivo y solo 15-25 % de los catteres extrados por sospecha de infeccin muestran desarrollo
ArchMed Int 1987; 147: 873-77. CID 1992; 15:197-210 J Clin Microbiol 1990; 28: 76-82

Mtodos conservadores: HEMOCULTIVOS CUANTITATIVOS


Requiere sangre perifrica y por CVC con siembra y comparacin de recuentos. Relacin 4:1 Central : Perifrica = Bacteremia relacionada CVC Engorroso, de alto costo, recupera microorganismos intraluminales.
Sensibilidad bacteriemia 94% y Especificidad 100%

Fan ST, et al.Eur.J.Microbiol.Infect.Dis. 1989;8:142-4. Capdevila JA et al. Eur J Clin Microb Infect Dis 1992; 11:403-7. Quillici N et al. Clin Infect Dis 1997;25:1066-70.

Mtodos conservadores: TIEMPO DIFERENCIAL DE LOS HEMOCULTIVOS


Compara tiempo de incubacin diferencial de hemocultivos cualitativos con sangre perifrica y central. Indicativo de bacteriemia relacionada a CVC un tiempo diferencial > 2 horas. Requiere sistema automatizado de hemocultivos En catteres de larga duracin: Sensibilidad: 94% Especificidad: 91%
Blot F et al. J Clin Microbiol 1998;36: 105-109. Rogers MS et al. J Clin Pathol 1998;51:635-637 Blot F et al. Lancet 1999; 354: 1071-1076. Malgrange VB et al. J Clin Microbiol 2001; 39: 274-278. Rijners BJ et al. Crit Care Med 2001; 29:1399-1403.

Mtodos conservadores: TIEMPO DIFERENCIAL DE LOS HEMOCULTIVOS

Raad, Issam; Hanna, Hend A.et alAnn Intern Med, Volume 140(1).January 6, 2004.18-25

Mtodos conservadores: TIEMPO DIFERENCIAL DE LOS HEMOCULTIVOS

Con diferencia de menos de 10 minutos extraer una muestra por vena periferica en forma habitual y otra muestra por la va venosa central previa desinfeccin de la llave o sitio de toma. IMPORTANTE: ROTULAR MISMO VOLUMEN